阅读说明：本技术 一种美白去皱的皮肤调理剂、面膜及其制备方法 (Skin conditioner and mask for whitening and removing wrinkles and preparation method thereof ) 是由 范玉菡 温伟红 莫霖霭 于 2019-12-03 设计创作，主要内容包括：本发明提供了一种美白去皱的皮肤调理剂、面膜及其制备方法。所述皮肤调理剂按重量份计包括：0.01-0.5份α-熊果苷、1-5份烟酰胺、0.01-1份氨乙基次膦酸、0.01-0.2份富勒烯、0.01-1份乙酰基六肽-8、0.01-1份密蒙花提取物和0.01-1份乳酸杆菌/大米发酵产物。所述面膜按质量百分比计包括：1-14％上述美白去皱的皮肤调理剂、2.5-10％保湿剂、0.1-0.3％pH调节剂和0.06-0.45％增稠剂,余量为水。本发明提供的面膜,通过合理配伍多种有效成分,针对黑色素与皱纹的内在成因,抑制黑色素的生成,同时降低皮肤中胶原蛋白分解酶的活性,改善皱纹,实现美白去皱的功效。(The invention provides a skin conditioner for whitening and removing wrinkles, a mask and a preparation method thereof, wherein the skin conditioner comprises, by weight, 0.01-0.5 part of α -arbutin, 1-5 parts of nicotinamide, 0.01-1 part of aminoethyl phosphinic acid, 0.01-0.2 part of fullerene, 0.01-1 part of acetyl hexapeptide-8, 0.01-1 part of a butterflybush flower extract and 0.01-1 part of lactobacillus/rice fermentation product.)

一种美白去皱的皮肤调理剂、面膜及其制备方法

技术领域

本发明属于护理产品技术领域，具体涉及一种面膜及其制备方法，尤其涉及一种美白去皱的皮肤调理剂、面膜及其制备方法。

背景技术

人体表皮下层分布有许多色素细胞，色素细胞经体内酪氨酸酶的催化氧化而形成黑色素，皮肤内黑色素增多导致肤色加深。根据对人体皮肤色素沉着的影响程度，抑制与排除黑色素是美白化妆品实现美白目的采用的主要办法。同时，随着人年龄的增长，人体新陈代谢开始减慢，人体内成纤维细胞的数量逐渐减少，其分泌的胶原蛋白和弹力纤维蛋白也因为被氧化而逐渐减少、断裂，对表皮的支撑作用组件消失，造成表皮不均一的塌陷，真皮层开始变薄，皮肤弹性变差，会导致皱纹的产生。黑色素的累积和皱纹的产生很大程度上影响着皮肤的表面状态，因此一直以来，实现美白和抗皱都是护肤品的主要目的。

面膜是一种能够清洁、保护面部同时保养面部皮肤的护肤品，作用是将面部皮肤与外界空气隔绝，抑制水分蒸发，使表皮角质层柔软，毛孔放大，改善面部皮肤的血液循环，并增强对营养物质的吸收，达到增进皮肤生理功能的效果。通过在面膜中添加不同的活性成分，面膜能够实现不同的护肤功能，例如深层清洁、补水、保湿、美白、抗皱和祛痘等功能。

CN102988239A公开了一种护肤去皱面膜霜，所述的护肤去皱面膜霜由下列组份按照重量份数组成：甲基乙二醇13-16份，尼泊金甲醇8-15份，十六醇7-11份，硬脂酸钠3-13份，薄荷8-11份，芦荟4-8份，余量为水。本发明可使面部皮肤润滑光亮，消除皱纹效果明显，有滋润皮肤的功效，原料无毒、无害、无副作用，安全可靠。

CN108245476A公开了一种美白淡斑面膜及其制备方法，包括高浓度美容液、面膜纸、面膜纸贴和包装袋，所述高浓度美容液由如下组分组成：凝胶剂、保湿剂、防腐剂、润肤油脂、PH调节剂、美白淡斑物质、余量为蒸馏水；所述美白淡斑物质由如下组分组成：珍珠粉、维生素E、水溶性β-葡聚糖、蛋白粉、藏红花和叶黄素。本发明中美白淡斑面膜具有良好的保湿效果、锁水效果、舒缓过敏的效果以及肤色增白色斑淡化的效果，无副作用且依赖性低。

然而，目前大多数面膜的功效较为单一，无法同时实现美白和抗皱两种功效，对消费者而言，更希望获得一种能够同时实现美白和抗皱效果的多效面膜。因此，有待于研发一种具有美白和去皱功能的面膜，以满足市场需求。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种美白去皱的皮肤调理剂、面膜及其制备方法。本发明提供的皮肤调理剂和面膜，通过各组分的合理配比，可以减少皮肤的黑素色含量，增加成纤维蛋白的表达量，达到美白、去皱的功效。为达此目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供一种美白去皱的皮肤调理剂，按重量份计包括如下组分：

0.01-0.5份α-熊果苷、1-5份烟酰胺、0.01-1份氨乙基次膦酸、0.01-0.2份富勒烯、0.01-1份乙酰基六肽-8、0.01-1份密蒙花(BUDDLEJA OFFICINALIS)提取物和0.01-1份乳酸杆菌/大米发酵产物(LACTOBACILLUS/RICE FERMENT)。

α-熊果苷能够抑制酪氨酸酶的活性、抑制黑色素的产生和沉积，祛除色斑和雀斑，其对紫外线灼伤导致的瘢痕有较好的治疗功效，有较好的抗炎、修复和美白的作用。

烟酰胺又称尼克酰胺，是烟酸的酰胺化合物，也是美容皮肤科学领域公认的皮肤抗老化成份，能够减轻和预防皮肤在早期衰老过程中产生的肤色黯淡、发黄、菜色。同时，也可以修复受损的角质层脂质屏障，提高皮肤抵抗力。

氨乙基次膦酸相比于α-熊果苷，并不抑制酪氨酸酶，而是负责将酪氨酸酶转化为DOPA和DOPA醌，起到能稳定多巴色素，从防止多巴色素转化为黑色素，本发明中所用的氨乙基次膦酸商品名为ALBATIN。

富勒烯能够清除自由基，避免自由基对肌肤的影响，从而减少暗沉、色斑等问题，富勒烯还能防止皱纹的产生，降低皮肤中胶原蛋白分解酶的活性，从而避免肌肤中胶原蛋白的分解流失，也能在皱纹产生后改善皱纹。

乙酰基六肽-8是一种生物活性肽，能够抑制谷氨酸盐的释放，破坏SNARE(突触小体相关蛋白受体)复合物的稳定性，既可减少因肌肉收缩引起的面部皱纹，又可有效防止新的皱纹产生。

密蒙花提取物来源于密蒙花的叶部，其提取物中含有甘草酸等多种成分，具有清热利尿等功效，用于日化产品中，能有效调理肌肤，改善皮肤健康状态。

乳酸杆菌/大米发酵产物是乳酸杆菌以大米为底物进行发酵得到的产品，为乳酸菌代谢物，十分复杂而非单一的成份，富含多种维生素和蛋白质，营养含量均衡，抑制自由基、改善肤质，是一种优良的综合调理剂。

本发明创造性地将上述各组分在特定的比例下配伍，使其相互配合，协同增效，能够针对皮肤黑色素和皱纹的内外成因，通过抑制与排除黑色素、增加成纤维细胞、抚平细纹等作用机理，有效淡化黑色素和皱纹，使肌肤白净、细腻、紧致。

本发明中，所述α-熊果苷的重量份数为0.01-0.5份，例如可以是0.01份、0.02份、0.04份、0.05份、0.08份、0.1份、0.12份、0.15份、0.18份、0.2份、0.25份、0.3份、0.35份、0.4份、0.45份或0.5份等。

所述烟酰胺的重量份数为1-5份，例如可以是1份、1.2份、1.4份、1.5份、1.8份、2份、2.2份、2.5份、2.8份、3份、3.2份、3.5份、4份、4.2份、4.5份或5份等。

所述氨乙基次膦酸的重量份数为0.01-1份，例如可以是0.01份、0.02份、0.05份、0.08份、0.1份、0.14份、0.18份、0.2份、0.3份、0.4份、0.5份、0.6份、0.7份、0.8份、0.9份或1份等。

所述富勒烯的重量份数为0.01-0.2份，例如可以是0.01份、0.02份、0.05份、0.08份、0.1份、0.12份、0.14份、0.15份、0.16份、0.18份或0.2份等。

所述乙酰基六肽-8的重量份数为0.01-1份，例如可以是0.01份、0.02份、0.05份、0.08份、0.1份、0.14份、0.18份、0.2份、0.3份、0.4份、0.5份、0.6份、0.7份、0.8份、0.9份或1份等。

所述密蒙花提取物的重量份数为0.01-1份，例如可以是0.01份、0.02份、0.05份、0.08份、0.1份、0.14份、0.18份、0.2份、0.3份、0.4份、0.5份、0.6份、0.7份、0.8份、0.9份或1份等。

所述乳酸杆菌/大米发酵产物的重量份数为0.01-1份，例如可以是0.01份、0.02份、0.05份、0.08份、0.1份、0.14份、0.18份、0.2份、0.3份、0.4份、0.5份、0.6份、0.7份、0.8份、0.9份或1份等。

作为本发明优选的技术方案，所述皮肤调理剂还包括0.01-1份苦参(SOPHORAANGUSTIFOLIA)根提取物、0.01-1份胀果甘草(GLYCYRRHIZA INFLATA)根提取物、0.01-1份黄芩(SCUTELLARIA BAICALENSIS)根提取物和0.01-1份库拉索芦荟(ALOE BARBADENSIS)叶提取物。

苦参根提取物中含有苦参碱、氧化苦参碱、羟基苦参碱等活性成分，其能够平衡油脂分泌，疏通并收敛毛孔，清除皮肤内毒素杂质，缓解皮肤瘙痒，促进受损血管神经细胞的生长和修复，恢复皮下毛细血管细胞活力，促进肌肤的紧致细滑。

胀果甘草根提取物中的胶原蛋白成分能够使皮肤更加紧致，同时其中的抗衰老成分能够显著抵抗黑色素的沉积，达到皮肤美白的效果。

黄芩根提取物具有显著的消炎抗敏功效，缓解肌肤过敏几率，其中含有的黄芩苷锌和黄芩苷铜成分对超氧自由基具有明显的清除作用，保护皮肤细胞不受氧自由基过度氧化，同时抑制黑色素的生成。

库拉索芦荟叶提取物中含有活性物多糖、氨基酸、多肽、有机酸和维生素等水溶性成分，能明显增强皮肤角质化组织的吸水性能，还能够深入渗透保湿，具有极强的补水保湿功效。

本发明中，所述苦参根提取物的重量份数为0.01-1份，例如可以是0.01份、0.02份、0.05份、0.08份、0.1份、0.14份、0.18份、0.2份、0.3份、0.4份、0.5份、0.6份、0.7份、0.8份、0.9份或1份等。

所述胀果甘草根提取物的重量份数为0.01-1份，例如可以是0.01份、0.02份、0.05份、0.08份、0.1份、0.14份、0.18份、0.2份、0.3份、0.4份、0.5份、0.6份、0.7份、0.8份、0.9份或1份等。

所述黄芩根提取物的重量份数为0.01-1份，例如可以是0.01份、0.02份、0.05份、0.08份、0.1份、0.14份、0.18份、0.2份、0.3份、0.4份、0.5份、0.6份、0.7份、0.8份、0.9份或1份等。

所述库拉索芦荟叶提取物的重量份数为0.01-1份，例如可以是0.01份、0.02份、0.05份、0.08份、0.1份、0.14份、0.18份、0.2份、0.3份、0.4份、0.5份、0.6份、0.7份、0.8份、0.9份或1份等。

第二方面，本发明提供一种美白去皱面膜，按质量百分比计包括如下组分：

1-14％第一方面所述的皮肤调理剂、2.5-10％保湿剂、0.1-0.3％pH调节剂和0.06-0.45％增稠剂，余量为水。

本发明通过将第一方面提供的美白去皱的皮肤调理剂与保湿剂、pH调节剂、增稠剂及水合理搭配，制备得到了一种美白去皱面膜，其中含有的皮肤调理剂不仅能够实现美白去皱的功效，而且不添加防腐剂，通过合理的配比，使得所述面膜的不损伤皮肤，且保湿效果也较好。

本发明中，所述美白去皱的皮肤调理剂的重量百分比为1-14％，例如可以是1％、1.5％、2％、2.5％、3％、3.5％、4％、4.5％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％或14％等。

所述保湿剂的重量百分比为2.5-10％，例如可以是2.5％、2.8％、3％、3.5％、4％、4.5％、5％、5.5％、6％、6.5％、7％、7.5％、8％、9％、9.5％或10％等。

所述pH调节剂的重量百分比为0.1-0.3％，例如可以是0.1％、0.11％、0.12％、0.15％、0.16％、0.18％、0.2％、0.21％、0.22％、0.25％、0.28％或0.3％等。

所述增稠剂的重量百分比为0.06-0.45％，例如可以是0.06％、0.07％、0.08％、0.1％、0.15％、0.2％、0.25％、0.3％、0.32％、0.35％、0.4％、0.42％或0.45％等。

作为本发明优选的技术方案，所述保湿剂为卡波姆、丁二醇、赤藓醇、透明质酸钠或1,2-己二醇中的任意一种或两种以上的组合。

其中，卡波姆是以季戊四醇等与丙烯酸交联得到的丙烯酸交联树脂，是一类非常重要的流变调节剂，中和后的卡波姆是优秀的凝胶基质，有增稠、悬浮等重要用途，工艺简单，稳定性好，广泛应用于乳液、膏霜和凝胶中；赤藓醇有强烈的保湿和吸湿性，与甘油一样可用作化妆品的保湿剂，但没有甘油的腻黏感透明质酸钠对肌肤具有较高的穿透力，通过在美颈霜中进一步添加透明质酸钠，有助于促进营养成分的渗透吸收。乙酰化透明质酸钠对透明质酸酶的抵抗性是未乙酰化透明质酸钠的13倍，对皮肤的穿透力更强。

作为本发明优选的技术方案，所述pH调节剂为三乙醇胺。

优选地，所述增稠剂为乙二胺四乙酸二钠和/或水解小核菌(SCLEROTIUMROLFSSII)胶。

作为本发明优选的技术方案，所述美白去皱面膜还包括0.01-0.03％(例如可以是0.01％、0.012％、0.015％、0.018％、0.02％、0.022％、0.025％、0.028％或0.03％等)的增溶剂和0.01-0.02％(例如可以是0.01％、0.012％、0.014％、0.015％、0.016％、0.018％或0.02％等)的芳香剂。所述芳香剂可以为香精。

优选地，所述增溶剂为氢化蓖麻油。

优选地，所述氢化蓖麻油为PEG-40氢化蓖麻油。

氢化蓖麻油是一种改性蓖麻油产品，是常用的高效增溶剂，能将香精、精油等油性物质均匀地分散到水中，形成稳定、透明的溶液。根据所接环氧的不同，可分为PEG-40氢化蓖麻油、PEG-60氢化蓖麻油、PEG-80氢化蓖麻油等。

作为本发明优选的技术方案，所述美白去皱面膜还包括0.4-0.7％(例如可以是0.4％、0.45％、0.5％、0.55％、0.6％、0.65％或0.7％等)的抗氧化剂。

优选地，所述抗氧化剂为对羟基苯乙酮。

作为本发明优选的技术方案，所述美白去皱面膜包括如下重量百分比的组分：1-14％第一方面所述皮肤调理剂、0.1-0.3％卡波姆、2-8％丁二醇、0.01-0.5％赤藓醇、0.01-0.2％透明质酸钠、0.4-0.7％1,2-己二醇、0.1-0.3％三乙醇胺、0.01-0.05％乙二胺四乙酸二钠、0.05-0.4％水解小核菌胶、0.4-0.7％对羟基苯乙酮、0.01-0.03％增溶剂和0.01-0.02％芳香剂，余量为水。

第三方面，本发明提供一种如第二方面所述的美白去皱面膜的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：

(1)将水、增稠剂与保湿剂混合均质，得到均质液；

(2)将步骤(1)得到的均质液与剩余的组分混合，过滤出料后灌入预先放置无纺布的铝箔袋中，得到所述美白去皱面膜。

作为本发明优选的技术方案，步骤(1)中所述混合均质的温度为80-85℃，例如可以是80℃、81℃、82℃、83℃、84℃或85℃等；时间为5-10min，例如可以是5min、6min、7min、8min、9min或10min等。

优选地，步骤(1)中所述混合均质是在真空乳化锅中进行。

优选地，步骤(2)中所述混合的温度为40-45℃，例如可以是40℃、41℃、42℃、43℃、44℃或45℃等；时间为5-10min，例如可以是5min、6min、7min、8min、9min或10min等。

作为本发明优选的技术方案，所述制备方法包括如下步骤：

(1)将水、增稠剂与保湿剂加入真空乳化锅，80-85℃下混合均质5-10min，得到均质液；

(2)将步骤(1)得到的均质液冷却至40-45℃，然后加入剩余的组分，搅拌混合5-10min，冷却至38℃以下出料，灌入预先放置无纺布的铝箔袋中，得到所述美白去皱面膜。

本发明所述的数值范围不仅包括上述例举的点值，还包括没有例举出的上述数值范围之间的任意的点值，限于篇幅及出于简明的考虑，本发明不再穷尽列举所述范围包括的具体点值。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

1、本发明提供的皮肤调理剂合理配伍α-熊果苷、氨乙基次膦酸和烟酰胺三重美白成分，不仅能够抑制酪氨酸酶活性，减少色素沉淀，抑制多巴酶，减少色素形成，还能够促进色素分解，美白提亮肤色；

2、本发明提供的皮肤调理剂复合富勒烯和乙酰基六肽-8双重抗老成分，富勒烯清除自由基，提供抗氧化保护，延缓衰老与皱纹，乙酰基六肽-8改善皱纹面积与深度，淡化皱纹；同时，本发明供的美白去皱面膜具有美白抗皱双重功效，一片即可满足两大护肤需求。

具体实施方式

下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。

实施例1

本实施例提供一种美白抗皱面膜，包括如下重量份数的组分：

上述美白抗皱面膜的制备方法如下：

(1)将水、增稠剂与保湿剂加入真空乳化锅，80℃下混合均质10min，得到均质液；

(2)将步骤(1)得到的均质液冷却至40℃，然后加入剩余的组分，搅拌混合10min，冷却至35℃出料，灌入预先放置无纺布的铝箔袋中，得到所述美白去皱面膜。

实施例2

本实施例提供一种美白抗皱面膜，包括如下重量份数的组分：

上述美白抗皱面膜的制备方法如下：

(1)将水、增稠剂与保湿剂加入真空乳化锅，82℃下混合均质8min，得到均质液；

(2)将步骤(1)得到的均质液冷却至42℃，然后加入剩余的组分，搅拌混合8min，冷却至37℃出料，灌入预先放置无纺布的铝箔袋中，得到所述美白去皱面膜。

实施例3

本实施例提供一种美白抗皱面膜，包括如下重量份数的组分：

上述美白抗皱面膜的制备方法如下：

(1)将水、增稠剂与保湿剂加入真空乳化锅，85℃下混合均质5min，得到均质液；

(2)将步骤(1)得到的均质液冷却至45℃，然后加入剩余的组分，搅拌混合5min，冷却至38℃出料，灌入预先放置无纺布的铝箔袋中，得到所述美白去皱面膜。

实施例4

本实施例提供一种美白抗皱面膜，所述面膜的组分与实施例2的区别在于所述皮肤调理剂中富勒烯的质量百分比为0.1％，乙酰基六肽-8的质量百分比为1％，其余组分及制备方法同实施例2。

实施例5

本实施例提供一种美白抗皱面膜，所述面膜的组分与实施例2的区别在于所述皮肤调理剂中α-熊果苷的质量百分比为0.5％，烟酰胺的质量百分比为2.4％，氨乙基次膦酸的质量百分比为0.06％，其余组分及制备方法同实施例2。

对比例1

本对比例提供一种面膜，所述面膜的组分与实施例2的区别在于皮肤调理剂中不含α-熊果苷、烟酰胺、氨乙基次膦酸、富勒烯及乙酰基六肽-8，其余组分及制备方法同实施例2。

对比例2

本对比例提供一种面膜，所述面膜的组分与实施例2的区别在于皮肤调理剂中不含α-熊果苷、烟酰胺以及氨乙基次膦酸，且富勒烯的质量百分含量为0.2％、乙酰基六肽-8的质量百分含量为1％，其余组分及制备方法同实施例2。

对比例3

本对比例提供一种面膜，所述面膜的组分与实施例2的区别在于皮肤调理剂中不含富勒烯及乙酰基六肽-8，且烟酰胺的质量百分含量为1.7％，其余组分及制备方法同实施例2。

对比例4

本对比例提供一种面膜，所述面膜的组分与实施例2的区别在于皮肤调理剂中不含烟酰胺、氨乙基次膦酸和乙酰基六肽-8，且α-熊果苷的质量百分比为1.48％，富勒烯的质量百分比为0.55％，其余组分及制备方法同实施例2。

对比例5

本对比例提供一种面膜，所述面膜的组分与实施例2的区别在于皮肤调理剂中不含α-熊果苷、氨乙基次膦酸和富勒烯，且烟酰胺的质量百分比为1.48％，乙酰基六肽-8的质量百分比为0.55％，其余组分及制备方法同实施例2。

对比例6

本对比例提供一种面膜，所述面膜的组分与实施例2的区别在于皮肤调理剂中不含α-熊果苷、烟酰胺和富勒烯，且氨乙基次膦酸的质量百分比为1.48％，乙酰基六肽-8的质量百分比为0.55％，其余组分及制备方法同实施例2。

试验例1

红细胞溶血实验

红细胞悬液的制备：选择健康家兔，心脏取血9mL，加入2％的草酸钾溶液1mL，离心，弃去上清液，用20mmol/L的PBS溶液将沉淀物稀释至20mL，4℃保存备用。

溶血实验：选择实施例1-5和对比例1-6提供的美白抗皱面膜，用PBS溶液稀释至不同浓度，每个样品设置5个浓度梯度。取10mL待测样品的稀释液，加入200μL上述红细胞悬液(控制样品终浓度分别为5、10、20、50、100mg/mL)，以蒸馏水作为全溶血对照，PBS溶液作为阴性对照，轻轻混匀，37℃下孵育30min，在2000r/min的转速下离心10min，取上清液，用分光光度计测试其在560nm处的吸光度(A₅₆₀)，按如下公式计算溶血率；

绘制溶血率-样品浓度标准曲线，计算50％红细胞发生溶血时的样品浓度(HD50)。

蛋白变性实验：将实施例1-5和对比例1-6提供的美白去皱面膜用PBS溶液稀释至10g/L，取10mL待测样品的稀释液，加入200μL红细胞悬液，以蒸馏水作为空白对照，1mg/mL十二烷基硫酸钠(SDS)溶液作为阳性对照，轻轻混匀，37℃下孵育30min，在2000r/min的转速下离心10min，取上清液，用分光光度计分别测试其在540nm和575nm处的吸光度A₅₄₀和A₅₇₅，按照如下公式计算蛋白变性指数(DI)；

其中，R₁＝空白对照组A₅₇₅/空白对照组A₅₄₀，R₂＝实验组A₅₇₅/实验组A₅₄₀，R₃＝阳性对照组A₅₇₅/阳性对照组A₅₄₀。

根据L/D值对待测样品的刺激性进行评价，其中L/D值为HD50/DI，红细胞溶血实验刺激性分级标准如下表1所示：

表1

上述红细胞溶血实验的测试结果如下表2所示：

表2

测试样品	HD50(mg/L)	DI(％)	L/D	评价
					实施例1	25312	0.92	﹥100	无刺激性
实施例2	21459	0.84	﹥100	无刺激性
					实施例3	17328	1.37	﹥100	无刺激性
实施例4	20757	1.06	﹥100	无刺激性
					实施例5	20309	1.20	﹥100	无刺激性
对比例1	14034	1.77	﹥100	无刺激性
					对比例2	19365	1.54	﹥100	无刺激性
对比例3	18701	1.47	﹥100	无刺激性
					对比例4	19270	1.03	﹥100	无刺激性
对比例5	20127	1.26	﹥100	无刺激性
					对比例6	19325	1.41	﹥100	无刺激性

由表2可知，本发明提供的美白去皱面膜无刺激性，安全可靠。

试验例2

酪氨酸酶活性以及黑色素合成抑制实验

酪氨酸酶是黑色素代谢中目前唯一己知的酶，它是一种含铜的金属酶，由黑素细胞合成的，在黑色素产生的过程中饰演了举足轻重的角色。酪氨酸酶活性增加，黑色素细胞产生黑色素的能力就相应增强；反之相应降低。若抑制酪氨酸酶的活性，从而其吸光度发生变化，液体褪色程度与酶抑制成化学计量关系，可用分光光度法进行定量分析。

酪氨酸酶活性抑制试验：取对数生长期的小鼠黑色素瘤B16细胞，接种于6孔细胞培养板，培养过夜。分别加入终体积分数为1％的受试样品，以未处理组作细胞对照组，每组2个复孔。培养48h后用PBS洗涤1次，每孔加入100μL裂解液，刮取收集细胞，离心取上清液。取50μL细胞上清液至96孔板，再加入50μL 1％L-多巴溶液，于37℃孵育1h，M3读板仪于475nm处读取吸光度值。

相对酪氨酸酶活性(％)＝(测定孔吸光度值-空白对照组吸光度值)/(细胞对照组吸光度值-空白对照组吸光度值)×100％。

黑色素合成抑制实验：取对数生长期的小鼠黑色素瘤B16细胞，接种于T25细胞培养瓶，培养过夜。分别加入终体积分数为1％的受试样品，以未处理组作为细胞对照组。培养48h后用PBS洗涤1次，加入1mL 1mol/L NaOH溶液，刮取收集细胞，放入80℃水浴中30min，取上清液加入96孔板，M3读板仪于475nm处读取吸光度值。

相对黑色素含量(％)＝(测定孔吸光度值-空白对照组吸光度值)/(细胞对照组吸光度值-空白对照组吸光度值)×100％。酪氨酸酶活性以及黑色素合成抑制实验结果如表3所述，其中对照组的酪氨酸酶活性为100％，对照组的黑色素含量为100％。

表3

由表3结果可知，本发明提供的美白去皱面膜对酪氨酸酶的抑制效果较好，同时也能明显降低细胞中的黑色素含量。通过实施例2与对比例3比较可知，富勒烯和乙酰基六肽-8对美白成分的功效有加成作用；通过实施例2与对比例4-6比较可知，当α-熊果苷、烟酰胺以及氨乙基次膦酸三者同时存在时，所述面膜的对酪氨酸酶的抑制效果最好。

试验例3

美白效果人体评测

选择110名年龄在30-40岁之间有美白需求的志愿者作为受试对象，分为11组，分别使用实施例1-5和对比例1-6制备得到的面膜，每周使用三次面膜，共使用4周。

采用皮肤红黑色素测试仪(Hexameter MX18)评估受试对象使用面膜组合物前、后皮肤黑色素含量变化。所用仪器的测量范围是0-999，测量数值越高，说明皮肤中黑色素含量越高。受试对象使用本发明制备的面膜组合物前、后面部肌肤黑色素含量统计结果如表4所示。

表4

测试样品	使用前	使用1周	使用2周	使用4周
					实施例1	241.1	237.7	229.5	205.4
实施例2	239.6	226.3	216.3	197.7
					实施例3	245.5	228.6	218.9	194.3
实施例4	236.2	229.0	220.4	201.2
					实施例5	252.0	238.4	227.1	203.0
对比例1	240.7	238.7	235.0	231.8
					对比例2	238.6	235.3	232.5	229.4
对比例3	235.7	230.1	224.2	201.1
					对比例4	244.1	240.3	239.9	205.4
对比例5	251.5	246.6	240.7	212.3
					对比例6	239.3	230.8	221.3	201.7

由表4可知，本发明提供的美白去皱面膜的美白效果较好，使用4周后可以明显降低皮肤中黑色素含量，黑色素的减少量最高可达20.8％。

试验例4

促进弹性蛋白生成实验

将人成纤维细胞按照2×10⁴个/孔的密度接种在96孔板上，加入新鲜培养基在37℃培养箱中培养24h，待细胞贴壁后，更换新的培养基，并分别加入实施例1-5和对比例1-6提供的美白去皱面膜(控制样品终浓度为50mg/mL)，以20mmol/L的PBS溶液作为空白对照，然后在37℃培养箱中培养2天。

培养结束后，利用细胞裂解液将细胞洗脱下来，并超声破碎。采用Biocolor弹性蛋白检测试剂盒对弹性蛋白的含量进行检测：用弹性蛋白沉淀剂处理样本，使弹性蛋白沉淀下来，离心分离，去除上清液，向沉淀中加入染料和反应液，反应形成弹性蛋白-染料复合物，离心分离并用PBS溶液洗涤三次，去除未结合的染料，添加染料释放剂，使弹性蛋白-染料复合物中的染料释放出来，采用分光光度计测定样品在513nm处的吸光度。根据吸光度-染料浓度标准曲线计算弹性蛋白的表达量(实施例和对比例中弹性蛋白表达量是相对于空白组的相对表达量，空白组的表达量计为1)，结果下表5所示：

表5

测试样品	弹性蛋白表达量	测试样品	弹性蛋白表达量
				实施例1	5.1	对比例1	2.4
实施例2	6.4	对比例2	6.8
				实施例3	7.2	对比例3	2.6
实施例4	6.8	对比例4	4.9
				实施例5	6.5	对比例5	4.5
		对比例6	5.0

由表4可知，本发明提供的美白去皱面膜能够明显促进弹性蛋白的表达，从而提高皮肤弹性，减少皱纹，使人体皮肤更加紧致，且由实施例2与对比例4和5比较可知，富勒烯及乙酰基六肽-8同时存在时，处理的成纤维细胞的弹性蛋白表达量才较高，表明富勒烯与乙酰基六肽-8具有协同促进弹性蛋白表达，紧致皮肤的作用，破坏其配合关系，则会导致相应的效果下降。

试验例5

抗皱效果实验

选择110名年龄在40-50岁之间、眼周出现皱纹的女性志愿者作为受试对象，随机分为11组使用实施例1-6和对比例1-5提供的美白去皱面膜，每组10人。采用硅树脂获取受试者眼周测试部位的皱纹印记，受试者每2天使用一次面膜，连续40天。分别获取处理15天和40天后的受试者眼周测试部位的皱纹印记，用共聚焦显微镜测试皱纹深度。计算处理15天和40天后的皱纹深度减小的百分比，结果如下6所示。

表6

测试样品	15天皱纹深度减小量(％)	40天皱纹深度减小量(％)
			实施例1	15.4	28.1
实施例2	18.4	32.0
			实施例3	25.1	42.1
实施例4	22.3	36.6
			实施例5	18.7	31.5
对比例1	5.4	4.9
			对比例2	20.1	34.5
对比例3	15.7	26.3
			对比例4	14.9	24.5
对比例5	16.4	27.1
			对比例6	14.2	25.7

由表6可知，本发明提供的美白去皱面膜的去皱效果较好，使用40天后可以明显减少皮肤皱纹，且40天皱纹深度减小量最高可达42.1％。

综上所述，本发明提供的面膜在加入含有α-熊果苷、烟酰胺、氨乙基次膦酸、富勒烯及乙酰基六肽-8的皮肤调理剂之后，通过各组分的合理配比，协同增效，具有较好的美白和抗皱功效。

申请人声明，以上所述仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，所属技术领域的技术人员应该明了，任何属于本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。