阅读说明：本技术 一种白芨葡甘聚糖酯的制备方法及其应用 (Preparation method and application of bletilla striata glucomannan ester ) 是由 邓辉 陈存武 韩邦兴 张卫明 谷仿丽 刘�东 马世宏 宋程 卫培培 于 2019-11-07 设计创作，主要内容包括：本发明公开一种白芨葡甘聚糖酯的制备方法,本发明包括以下步骤：(1)将白芨葡甘聚糖分散于蒸馏水中,用磷酸缓冲液调节pH至6.0,加入β-甘露聚糖酶,于50-60℃保温振荡后,煮沸灭酶；(2)白芨葡甘聚糖的酯化：将步骤(1)中的产物溶于有机溶剂或有机溶剂与水的混合物中,然后加入C6～C20饱和脂肪酸、脂肪酶搅拌反应,将获得的反应液进行纯化,制得白芨葡甘聚糖酯。本发明还提供上述制备方法制得的白芨葡甘聚糖酯在制备乳化剂和微囊粉中的应用,本发明的有益效果在于：本发明制备的疏水性白芨葡甘聚糖通过自组装成纳米胶团,增强包裹物在水溶液中的分散性,延长释放时间,且制备方法简单。(The invention discloses a preparation method of bletilla striata glucomannan ester, which comprises the following steps: (1) dispersing bletilla striata glucomannan in distilled water, adjusting pH to 6.0 with phosphate buffer, adding beta-mannase, keeping temperature at 50-60 deg.C, shaking, boiling to inactivate enzyme; (2) esterification of bletilla striata glucomannan: dissolving the product obtained in the step (1) in an organic solvent or a mixture of the organic solvent and water, adding C6-C20 saturated fatty acid and lipase, stirring for reaction, and purifying the obtained reaction liquid to obtain the bletilla glucomannan ester. The invention also provides the application of the bletilla striata glucomannan ester prepared by the preparation method in preparing the emulsifier and the microcapsule powder, and the invention has the beneficial effects that: the hydrophobic bletilla striata glucomannan prepared by the invention is self-assembled into a nano micelle, the dispersibility of the wrappage in aqueous solution is enhanced, the release time is prolonged, and the preparation method is simple.)

一种白芨葡甘聚糖酯的制备方法及其应用

技术领域

本发明涉及功能性生物材料技术领域，具体涉及一种白芨葡甘聚糖酯的制备方法及其应用。

背景技术

白芨葡甘聚糖(KGM)是白芨胶中的主要成份。在日本、美国和中国，有关白芨在医药、食品、化工和纺织等领域的应用研究已取得了重要进展，但天然的长链白芨葡甘聚糖极难溶于水，也不溶于其他有机溶剂，从而使其研究受到极大限制。

近年来，天然多糖在食品、化妆品和医药等领域用作乳化剂及乳化稳定剂已有一些报道。用生物方法合成或提纯的寡糖酯及胞外多糖酯用作工业中的乳化剂或表面活性剂也取得了一定进展。

专利CN201010270592.0提供了一种魔芋葡甘聚糖酯化反应的方法，采用机械力化学方法，包括如下步骤：第一步：将魔芋葡甘聚糖烘干至含水量低于4％，然后加入质量为魔芋葡甘聚糖质量0.5～5％的酯化改性剂；第二步：按振动磨的研磨罐50～90％的体积填充率准备研磨介质；第三步：把所述魔芋葡甘聚糖与所述研磨介质混合均匀后加入所述振动磨的研磨罐内，密封好所述研磨罐，启动所述振动磨研磨20～60分钟；第四步：通过筛分将研磨介质和样品分离，得到酯化反应的魔芋葡甘聚糖。

发明内容

本发明所要解决的技术问题之一在于一种乳化性能稳定的白芨葡甘聚糖酯的制备方法。

本发明通过以下技术手段实现解决上述技术问题的：

本发明提供一种白芨葡甘聚糖酯的制备方法，包括以下步骤：

(1)取白芨葡甘聚糖溶液，用磷酸缓冲液调节pH至6.0，加入β-甘露聚糖酶，于50-60℃保温振荡后，煮沸灭酶；

(2)白芨葡甘聚糖的酯化：将步骤(1)中的产物溶于有机溶剂或有机溶剂与水的混合物中，然后加入C6～C20饱和脂肪酸、脂肪酶后，调节混合物的水分活度为0.4-0.8，于反应温度为42-50℃、酶剂量为300-800U/mL条件下搅拌反应，将获得的反应液进行纯化，制得白芨葡甘聚糖酯。

有益效果：本发明以白芨葡甘聚糖为原料，制得疏水性白芨葡甘聚糖酯，本发明制备的疏水性白芨葡甘聚糖通过自组装成纳米胶团，形成核-壳结构，包裹疏水性、易氧化、需缓释的物质，增强包裹物在水溶液中的分散性，延长释放时间，制备的白芨葡甘聚糖酯易于乳化形成胶团，扩大了白芨葡甘聚糖的应用领域，且制备方法简单、高效。

优选的，所述白芨葡甘聚糖溶液的制备方法包括以下步骤：称取1-2g白芨葡甘聚糖分散于100ml蒸馏水中。

优选的，所述步骤(1)中保温振荡2-5h，煮沸10-15min。

优选的，所述有机溶剂为二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺、甲酰胺中的一种。

优选的，所述β-甘露聚糖酶来源于枯草芽孢杆菌。

优选的，往葡甘聚糖溶液中加入0.2-0.5％w/vβ-甘露聚糖酶。

优选的，所述C6～C20饱和脂肪酸包括月桂酸、豆蔻酸、软脂酸、硬脂酸中的一种。

优选的，所述步骤(2)中的搅拌反应的转速为150-300r/min。

优选的，所述脂肪酶来源于枯草芽孢杆菌。

优选的，所述白芨葡甘聚糖酯的纯化方法包括以下步骤：将获得的反应液置于透析袋中，于10倍体积蒸馏水中透析，每隔4-6h换一次水，透析48h后，收集透析袋内的溶液，进行加热后，离心取上清液，将上清液负压干燥制得白芨葡甘聚糖酯。

有益效果：通过蒸馏水替换出有机溶剂，同时加热变性酶，并离心去除，纯化获得目的产物。

优选的，所述纯化步骤中的加热温度为100℃，加热时间为10-20min。

优选的，所述离心转速为8000-10000rpm。

优选的，所述白芨葡甘聚糖溶液的制备方法包括以下步骤：称取1-2g白芨葡甘聚糖分散于100ml蒸馏水中。

优选的，所述白芨葡甘聚糖溶液的制备方法包括以下步骤：

(1)将白芨与水混合，于匀浆机中匀浆，制得白芨浆液；

(2)将步骤(1)中的白芨浆液离心，获得上清液；

(3)建立乙醇-磷酸氢二钾双水相体系：乙醇水溶液中乙醇的体积分数为70％，磷酸氢二钾水溶液中磷酸氢二钾的重量分数为55％，所述乙醇水溶液与磷酸氢二钾水溶液的体积比为3:7；

(4)将步骤(2)中的上清液和乙醇-磷酸氢二钾双水相体系置于超声逆流提取装置中提取，所述上清液与乙醇-磷酸氢二钾双水相体系的比为1:45(g:mL)；

(5)将步骤(4)中的提取液静置后，取下相溶液过滤，将滤液分别经截留分子量为100K和10K的中空纤维超滤装置进行超滤分离，获得分子量分别为10-100k和大于100k的白芨葡甘聚糖溶液。

有益效果：白芨葡甘聚糖水溶液的不是经过干粉复溶的制备产物，分子间作用破坏少，成膜性和乳化性更佳。

优选的，所述步骤(1)中的水为去离子水。

优选的，所述白芨与去离子水的质量比为1:4。

优选的，所述步骤(1)中将白芨与去离子水的混合物置于匀浆机中，于4-10℃、13000-15000rpm、匀浆5min，间歇1min，总匀浆时间为25-30min。

优选的，所述步骤(2)中将白芨浆液于4-10℃、5000-8000rpm、离心15-20min。

有益效果：打碎粗纤维，降低白芨葡甘聚糖粘度，从植物组织中分离出没有溶胀的淀粉颗粒和其他不溶性杂质，利用低温高速匀浆让白芨中的纤维、淀粉和葡甘聚糖解离，再利用低温离心沉淀出没有溶胀的淀粉颗粒和其他不溶性杂质，不添加其他制剂，降低了产品的外源杂质污染；不采用高温处理，均在常温下或低温下进行，降低了温度对白芨葡甘聚糖的破坏和反应。

优选的，所述步骤(4)中于25℃、500W条件下提取20min。

优选的，所述步骤(5)中下相溶液采用400目尼龙滤布过滤。

优选的，所述步骤(5)中于压力为0.20MPa、超滤温度为30℃、料液体积流量为0.06-0.08L/min条件下，截留获得分子量大于100K白芨葡甘聚糖浓缩溶液。

优选的，将经过截留分子量为100K的中空纤维超滤装置超滤后的滤液经过截留分子量为100K的中空纤维超滤装置进行超滤分离，所述步骤(5)中于压力为0.20MPa、超滤温度为25℃、料液体积流量为0.04-0.05L/min条件下，截留获得分子量为10-100K的白芨葡甘聚糖浓缩溶液。

本发明解决的技术问题之二在于提供上述制备方法制得的白芨葡甘聚糖酯在制备乳化剂中的应用。

本发明提供上述制备方法制得的白芨葡甘聚糖酯在制备乳化剂中的应用，包括以下步骤：

将白芨葡甘聚糖酯置于蒸馏水中，以10000r/min进行匀浆后，进行超声，然后将超声后的溶液先经过0.45μm滤膜过滤，再经过0.22μm滤膜过滤，收集滤液制得乳化剂。

优选的，选用取代度为0.20的白芨葡甘聚糖酯制备乳化剂。

有益效果：本发明制备的疏水性白芨葡甘聚糖酯可用于脂溶性生物活性成分和精油的包装、防护和缓释。

本发明解决的技术问题之三在于提供上述制备方法制得的白芨葡甘聚糖酯在制备微囊粉中的应用。

本发明提供上述制备方法制得的白芨葡甘聚糖酯在制备微囊粉中的应用，包括以下步骤：

(1)将白芨葡甘聚糖酯置于蒸馏水中，以10000r/min进行匀浆后，进行超声，然后将超声后的溶液先经过0.45μm滤膜过滤，再经过0.22μm滤膜过滤，收集滤液制得乳化剂；

(2)将步骤(1)中制得的乳化剂与灵芝孢子油混合，以10000r/min进行匀浆，将匀浆后的乳液进行喷雾干燥，制得微囊粉。

有益效果：本发明通过干燥制得微囊粉，能够用于生物活性物质的包装和存放。

优选的，所述灵芝孢子油与乳化剂的体积比为1:2。

优选的，选用取代度为0.35的白芨葡甘聚糖酯制备微囊粉。

本发明的优点在于：

(1)本发明以白芨葡甘聚糖为原料，制得疏水性白芨葡甘聚糖酯，本发明制备的疏水性白芨葡甘聚糖通过自组装成纳米胶团，形成核-壳结构，包裹疏水性、易氧化、需缓释的物质，增强包裹物在水溶液中的分散性，延长释放时间，制备的白芨葡甘聚糖酯易于乳化形成胶团，扩大了白芨白芨葡甘聚糖的应用领域，且制备方法简单；

(2)采用β-甘露聚糖酶酶法脱枝大分子白芨葡甘聚糖为较小分子产物，反应条件温和，产物的水溶性更好；

(3)白芨葡甘聚糖酯制备的乳化剂，具有良好的稳定性，并表现出很好的抗盐性能和抗酸性能；

(4)通过优化后的酶促反应条件，使得疏水性白芨葡甘聚糖酯的制备过程更加温和、快速和高效；

(5)本发明制备的疏水性白芨葡甘聚糖酯可用于脂溶性生物活性成分和精油的包装、防护和缓释；

(6)本发明通过干燥制得微囊粉，能够用于生物活性物质的包装和存放。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

下述实施例中所用的试验材料和试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

实施例中未注明具体技术或条件者，均可以按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。

实施例1

白芨葡甘聚糖溶液的制备方法，包括以下步骤：

(1)将白芨洗净后，将白芨与去离子水按质量比为1:4混合，置于匀浆机中，于4℃、13000rpm、匀浆5min，间歇1min，总匀浆时间为30min，制得白芨浆液；

(2)将步骤(1)中的白芨浆液于离心机中，4℃、5000rpm、离心20min，获得上清液；

(3)建立乙醇-磷酸氢二钾双水相体系：乙醇水溶液中乙醇的体积分数为70％，磷酸氢二钾水溶液中磷酸氢二钾的重量分数为55％，乙醇水溶液与磷酸氢二钾水溶液的体积比为3:7；在该体积比条件下，既可以维持稳定的双水相，又可以有效的分离水溶性成分和醇溶性成分；

(4)将步骤(2)中的上清液和乙醇-磷酸氢二钾双水相体系置于超声逆流提取装置中，于25℃、500W条件下提取20min，上清液与乙醇-磷酸氢二钾双水相体系的比为1:45(g:mL)；本实施例中采用的超声逆流提取装置为现有技术；

(5)将步骤(4)中的提取液静置后，取下相溶液经400目的尼龙滤布过滤，将滤液经截留分子量为100K的中空纤维超滤装置进行超滤分离，通过超滤装置用去离子水洗去小分子杂质和盐分子，于压力为0.20MPa、超滤温度为30℃、料液体积流量为0.06L/min条件下截留获得分子量大于100k的白芨葡甘聚糖浓缩溶液；检测并控制浓缩溶液的质量分数为20％；

(6)将经过截留分子量为100K的中空纤维超滤装置超滤后的滤液经过截留分子量为100K的中空纤维超滤装置进行超滤分离，通过超滤装置用去离子水洗去小分子杂质和盐分子，于压力为0.20MPa、超滤温度为25℃、料液体积流量为0.04L/min条件下，截留获得分子量为10-100K的白芨葡甘聚糖浓缩溶液，检测并控制浓缩溶液的质量分数为20％。

实施例2

白芨葡甘聚糖酯的制备方法，包括以下步骤：

(1)称取1g白芨葡甘聚糖分散于100ml蒸馏水中，用0.1mol/LpH为6.0磷酸缓冲液调节pH至6.0，加入0.2g来源于枯草芽孢杆菌的β-甘露聚糖酶，于50℃保温振荡2h后，煮沸10min灭酶；其中磷酸缓冲液为磷酸钠缓冲液NaH₂PO₄、Na₂HPO₄，或磷酸钾缓冲液K₂HPO₄、KH₂PO₄，使用的磷酸缓冲液为现有技术，只要能调节溶液的pH即可；白芨葡甘聚糖的分子量为1-10kD，白芨葡甘聚糖的分子量越大越难复溶，复溶后的成膜性也越差。

(2)白芨葡甘聚糖的酯化：将步骤(1)中的产物0.1g溶于20ml二甲基亚砜中，然后加入0.1g月桂酸、0.2g来源于枯草芽孢杆菌的脂肪酶，调节混合物的水分活度为0.4，其中水分活度的调节方法为现有技术，于反应温度为42℃、酶剂量为300U/mL、150r/min条件下搅拌反应；在有机溶剂体系中，用来自枯草芽孢杆菌中的脂肪酶催化脂肪酸与之反应生成酯。酯化特异性地发生在葡萄糖残基的C6位上，酯化位点的确定为现有技术。随着白芨葡甘聚糖相对分子质量的增大，取代度减小；

水分活度主要影响脂肪酶的活性，水活度越低脂肪酶活性越高，但白芨葡甘聚糖的水溶性越差，反之，也成立，所以本实施例中选取的水分活度可以兼顾脂肪酶的活性和白芨葡甘聚糖的溶解性。

(3)将步骤(2)中获得的反应液置于透析袋中，于10倍体积蒸馏水中透析，每隔4h换一次水，透析48h后，收集透析袋内的溶液，于100℃加热10min，8000rpm离心取上清液，将上清液于60℃，93.3Kpa条件下负压干燥制得白芨葡甘聚糖酯；用蒸馏水替换出有机溶剂，同时加热变性酶，并离心去除，纯化获得目的产物。

用3,5-二硝基水杨酸法测得步骤(1)中的降解产物还原糖含量为4-10wt％，黏均分子量为2000-10000Da，白芨葡甘聚糖是由D-葡萄糖、D-甘露糖通过β-(1→4)键连接而成。通过β-甘露聚糖酶分解高分子白芨葡甘聚糖为小分子白芨葡甘聚糖，增强其水溶性。

白芨葡甘聚糖的酯化反应的取代度为0.2-0.5，取代度(DS)采用皂化法测定，其中皂化法为现有技术。

水包油乳液体系及乳化力测定

把含有葡甘聚糖酯的苯溶液(2mg/mL)、含有葡甘聚糖酯的环己烷溶液(2mg/mL)各1mL分别注入含4mL蒸馏水的刻度管中，用25W超声波发生器超声乳化5min，以未加葡甘聚糖酯的苯-水乳液体系为参比，立即在波长620nm处测定，所得的光密度值代表乳化力。所得乳液用显微染色法和电导法分别鉴定。

本实施例中测得OD₆₂₀为1.62，显微染色成胶束状即乳化，导电性好的为O/W型乳状液，连续相为水，证明本实施例中制得的体系为水包油型，而导电性差的为W/O型乳状液，连续相为油。说明本实施例制备的白芨葡甘聚糖酯易于乳化形成胶团。

实施例3

白芨葡甘聚糖酯的制备方法，包括以下步骤：

(1)取实施例1中制得的白芨葡甘聚糖溶液100mL，用0.1mol/LpH为6.0磷酸缓冲液调节pH至6.0，加入0.3g来源于枯草芽孢杆菌的β-甘露聚糖酶，于50℃保温振荡2h后，煮沸15min灭酶；其中磷酸缓冲液为磷酸钠缓冲液NaH₂PO₄、Na₂HPO₄，或磷酸钾缓冲液K₂HPO₄、KH₂PO₄，磷酸缓冲液为现有技术；白芨葡甘聚糖的分子量为1-10kD；

(2)白芨葡甘聚糖的酯化：将步骤(1)中的产物0.2g溶于50ml二甲基亚砜中，然后加入0.2g软脂酸、0.3g来源于枯草芽孢杆菌的脂肪酶，调节混合物的水分活度为0.6，其中水分活度的调节方法为现有技术，于反应温度为45℃、酶剂量为500U/mL、200r/min条件下搅拌反应；在有机溶剂体系中，用来自枯草芽孢杆菌中的脂肪酶催化脂肪酸与之反应生成酯。酯化特异性地发生在葡萄糖残基的C6位上，酯化位点的确定为现有技术。随着白芨葡甘聚糖相对分子质量的增大，取代度减小；

水分活度主要影响脂肪酶的活性，水活度越低脂肪酶活性越高，但白芨葡甘聚糖的水溶性越差，反之，也成立，所以本实施例中选取的水分活度可以兼顾脂肪酶的活性和白芨葡甘聚糖的溶解性。

(3)将步骤(2)中获得的反应液置于透析袋中，于10倍体积蒸馏水中透析，每隔5h换一次水，透析48h后，收集透析袋内的溶液，于100℃加热10min，9000rpm离心取上清液，将上清液于65℃，95.3Kpa条件下负压干燥制得白芨葡甘聚糖酯；用蒸馏水替换出有机溶剂，同时加热变性酶，并离心去除，纯化获得目的产物。

实施例4

白芨葡甘聚糖酯的制备方法，包括以下步骤：

(1)称取2.0g白芨葡甘聚糖分散于100ml蒸馏水中，用0.1mol/LpH为6.0磷酸缓冲液调节pH至6.0，加入0.5g来源于枯草芽孢杆菌的β-甘露聚糖酶，于50℃保温振荡5h后，煮沸12min灭酶；其中磷酸缓冲液为磷酸钠缓冲液NaH₂PO₄、Na₂HPO₄，或磷酸钾缓冲液K₂HPO₄、KH₂PO₄，磷酸缓冲液为现有技术；白芨葡甘聚糖的分子量为1-10kD；

(2)白芨葡甘聚糖的酯化：将步骤(1)中的产物0.3g溶于100ml二甲基亚砜中，然后加入0.5g豆蔻酸、0.4g来源于枯草芽孢杆菌的脂肪酶，调节混合物的水分活度为0.6，于反应温度为50℃、酶剂量为800U/mL、300r/min条件下搅拌反应；在有机溶剂体系中，用来自枯草芽孢杆菌中的脂肪酶催化脂肪酸与之反应生成酯。酯化特异性地发生在葡萄糖残基的C6位上，酯化位点的确定为现有技术。随着白芨葡甘聚糖相对分子质量的增大，取代度减小；

水分活度主要影响脂肪酶的活性，水活度越低脂肪酶活性越高，但白芨葡甘聚糖的水溶性越差，反之，也成立，所以本实施例中选取的水分活度可以兼顾脂肪酶的活性和白芨葡甘聚糖的溶解性。

(3)将步骤(2)中获得的反应液置于透析袋中，于10倍体积蒸馏水中透析，每隔6h换一次水，透析48h后，收集透析袋内的溶液，于100℃加热10min，10000rpm离心取上清液，将上清液于70℃，98.6Kpa条件下负压干燥制得白芨葡甘聚糖酯；用蒸馏水替换出有机溶剂，同时加热变性酶，并离心去除，纯化获得目的产物。

实施例5

白芨葡甘聚糖酯在制备乳化剂中的应用

称取5mg白芨葡甘聚糖酯置于5ml蒸馏水中，以10000r/min匀浆10min后，进行超声5min，然后将超声后的溶液先经过0.45μm滤膜过滤，再经过0.22μm滤膜过滤，收集滤液制得纳米级乳化剂。

实施例6

白芨葡甘聚糖酯在制备乳化剂中的应用

称取5mg白芨葡甘聚糖酯置于8ml蒸馏水中，以10000r/min匀浆20min后，进行超声10min，然后将超声后的溶液先经过0.45μm滤膜过滤，再经过0.22μm滤膜过滤，收集滤液制得纳米级乳化剂。

实施例7

白芨葡甘聚糖酯在制备乳化剂中的应用

称取5mg白芨葡甘聚糖酯置于10ml蒸馏水中，以10000r/min匀浆30min后，进行超声15min，然后将超声后的溶液先经过0.45μm滤膜过滤，再经过0.22μm滤膜过滤，收集滤液制得纳米级乳化剂。

实施例8

白芨葡甘聚糖酯在制备微囊粉中的应用

(1)将取代度为0.35的白芨葡甘聚糖酯置于蒸馏水中，以10000r/min进行匀浆20min后，进行超声，然后将超声后的溶液先经过0.45μm滤膜过滤，再经过0.22μm滤膜过滤，收集滤液制得乳化剂；

(2)将步骤(1)中制得的乳化剂与预冷保存的灵芝孢子油混合，灵芝孢子油与乳化剂的体积比为1:2，以10000r/min进行匀浆，匀浆20min，将匀浆后的乳液进行喷雾干燥，喷雾干燥采用喷雾干燥装置，进风温度为100℃、出风温度为60℃，制得微囊粉。

实施例9

乳化稳定性实验

将实施例4中制得的乳化剂与预冷保存的玫瑰精油混合，玫瑰精油与乳化剂的体积比为1:9，以10000r/min进行匀浆，匀浆10-20min后静置。

水相含10％NaCl：称取5mg白芨葡甘聚糖酯置于5ml蒸馏水中，在蒸馏水中加入10％NaCl(0.5g)，以10000r/min匀浆10min后，进行超声5min，然后将超声后的溶液先经过0.45μm滤膜过滤，再经过0.22μm滤膜过滤，收集滤液制得纳米级乳化剂，然后与预冷保存的玫瑰精油混合，玫瑰精油与乳化剂的体积比为1:9，以10000r/min进行匀浆，匀浆10-20min后静置。

水相含1.0％的柠檬酸：称取5mg白芨葡甘聚糖酯置于5ml蒸馏水中，在蒸馏水中加入1.0％NaCl(0.05g)，以10000r/min匀浆10min后，进行超声5min，然后将超声后的溶液先经过0.45μm滤膜过滤，再经过0.22μm滤膜过滤，收集滤液制得纳米级乳化剂，然后与预冷保存的玫瑰精油混合，玫瑰精油与乳化剂的体积比为1:9，以10000r/min进行匀浆，匀浆10-20min后静置。

实验结果：将获得的玫瑰精油-乳化体系室温下静置四个星期，呈现出很好的稳定性，并没有发现破乳分离现象。在水相含10％NaCl的情况下，10min后，其乳液浊度仅减少了9.1％，在水相含1.0％的柠檬酸，pH＝2.3的条件下，10min后，其乳液浊度仅减少了8.4％。

表明制备的玫瑰精油-乳化体系的在室温下有良好稳定性，并表现出很好的抗盐性能和抗酸性能。

对比例

乳化稳定性实验

将工业常用乳化剂-十二烷基硫酸钠(SDS)(0.1％，M/V)与预冷保存的玫瑰精油混合，玫瑰精油与乳化剂的体积比为1:9，以10000r/min进行匀浆，匀浆10-20min后静置。

水相含10％NaCl：称取5mg十二烷基硫酸钠置于5ml蒸馏水中，在蒸馏水中加入10％NaCl(0.5g)，以10000r/min匀浆10min后，进行超声5min，然后将超声后的溶液先经过0.45μm滤膜过滤，再经过0.22μm滤膜过滤，收集滤液制得纳米级乳化剂，然后与预冷保存的玫瑰精油混合，玫瑰精油与乳化剂的体积比为1:9，以10000r/min进行匀浆，匀浆10-20min后静置。

水相含1.0％的柠檬酸：称取5mg十二烷基硫酸钠置于5ml蒸馏水中，在蒸馏水中加入1.0％柠檬酸(0.05g)，以10000r/min匀浆10min后，进行超声5min，然后将超声后的溶液先经过0.45μm滤膜过滤，再经过0.22μm滤膜过滤，收集滤液制得纳米级乳化剂，然后与预冷保存的玫瑰精油混合，玫瑰精油与乳化剂的体积比为1:9，以10000r/min进行匀浆，匀浆10-20min后静置。

实验结果：将获得的玫瑰精油-SDS乳化体系室温下静置四个星期，呈现出破乳分离现象。在水相含10％NaCl的情况下，10min后，其乳液浊度仅减少了65.4％，在水相含1.0％的柠檬酸，pH＝2.3的条件下，10min后，其乳液浊度仅减少了53.7％。

表明制备的玫瑰精油-SDS乳化体系的在室温下稳定性差，抗盐性能和抗酸性能也差。

以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。