阅读说明：本技术 一种获取评估消化道损伤模型腹胀指数的方法 (Method for obtaining abdominal distension index of digestive tract injury assessment model ) 是由 蒋雪薇 魏鹏举 金朋 邓水香 宫晔 田觅 于 2019-09-23 设计创作，主要内容包括：本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种获取评估消化道损伤模型腹胀指数的方法,包括如下步骤：对实验体进行预训练；采集经预训练后的实验体在实验所需时间节点的腹正面图像,并将其存储；调取腹正面图像,提取第一数据和第二数据；计算第一数据与第二数据之比值,并将其作为腹胀指数；应用腹胀指数评估实验体的消化道肿胀程度。本发明通过对同一动物不同时间节点进行连续多次评估,提高了评估结果的准确度,且方便快捷,高效无创,降低成本,减少设备依赖性,间接量化消化道肿胀程度进而便于对消化道损伤模型的消化道进行评估。(The invention relates to the technical field of biology, in particular to a method for obtaining and evaluating an abdominal distension index of a digestive tract injury model, which comprises the following steps: pre-training an experimental body; acquiring an abdominal front image of the pre-trained experimental body at a time node required by the experiment, and storing the abdominal front image; calling a front image of the abdomen, and extracting first data and second data; calculating the ratio of the first data to the second data, and taking the ratio as an abdominal distension index; the degree of gut swelling in the subjects was assessed using the abdominal distension index. According to the invention, the nodes of the same animal at different times are evaluated continuously and repeatedly, so that the accuracy of the evaluation result is improved, the method is convenient, rapid, efficient and noninvasive, the cost is reduced, the equipment dependence is reduced, and the swelling degree of the digestive tract is quantified indirectly, thereby facilitating the evaluation of the digestive tract injury model.)

一种获取评估消化道损伤模型腹胀指数的方法

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种获取评估消化道损伤模型腹胀指数的方法。

背景技术

消化道损伤会导致消化道功能障碍，影响患者营养吸收、免疫等生理活动。在日常生活中，引起消化道损伤的原因有多种，如有毒物质、肠道感染、机械刺激等因素对消化道的刺激，外伤、烧伤、脑卒中及其他器官损伤也可以引起继发性消化道损伤。随着各类肠损伤相关疾病研究进程的推进，各类大鼠肠损伤模型被广泛应用。在大鼠肠损伤模型中观察到消化道黏膜损伤、通透性增强、肠蠕动减弱没消化道肿胀等表现，且上述表现均与生存情况相关。

消化道肿胀是反映消化道损伤的重要表征之一，现有对消化道损伤的评估方法按创伤程度分为有创类和无创类。常用的有创类方法一般为炭粉推进法、剖腹直接观察法及组织学损伤评分等，常用的无创类方法有疾病活动指数评分、影像学评估等方法。

有创类方法均为在已死亡的实验动物身上观察其死亡时间点时刻身体组织的变化，操作过程复杂，无法在同一动物身上观测不同时间点身体组织的变化，且动物成本较高；而无创类方法的使用设备较贵，且专业技术要求高，主要依赖技术人员的主观判断，不便于广泛开展使用。

发明内容

鉴于现有评估消化道肿胀的常见方法操作复杂、成本高或设备依赖性高的问题，本发明提供了一种获取评估消化道损伤模型腹胀指数的方法，能够对同一动物不同时间点进行连续多次评估，增加了评估结果的准确度，且高效无创、降低成本、减少设备依赖性。

为达到上述目的，本发明的实施案例采用如下技术方案：

本发明提供了一种获取评估消化道损伤模型腹胀指数的方法，获取评估消化道损伤模型腹胀指数的方法包括如下步骤：对实验体进行预训练；采集经预训练后的实验体在实验所需时间节点的腹正面图像，并将其存储；调取腹正面图像，并提取腹正面图像内第一数据和第二数据；计算第一数据与第二数据的比值，并将其作为腹胀指数。

依照本发明的一个方面，预训练的具体步骤包括：对实验体进行适应性训练：在建立消化道损伤模型前连续3天，将实验体提尾倒置使其头部向下，身体自然舒展；每天训练3至5次，使其倒置时无身体蜷缩、肌紧张应激反应；对基底节注射自体血以构建由脑出血引起消化道损伤的实验体。

依照本发明的一个方面，采集经预训练后的实验体在实验所需时间节点的腹正面图像的具体步骤包括：设置***：根据实验所需时间节点，拎尾部将经预训练后的实验体倒置，使其头部向下身体自然舒展，前肢抓握于预先固定的金属网格上；获取图像：对经预训练后的实验体腹正面进行拍摄，将拍照所得腹正面图像与相应时间节点一一对应储存。

依照本发明的一个方面，根据本实验所需时间节点，即生成经预训练后的实验体后的2小时、第3天、第7天，拎尾部倒提以将经预训练后的实验体倒置，头部向下且身体自然舒展，前肢抓握于预先固定的金属网格上。

依照本发明的一个方面，金属网格由多根金属条拼合而成且固定于试验台台面上，金属网格高于试验台台面至少15cmm。

依照本发明的一个方面，采用12MP广角镜头并距离实验体30至40cm以对其腹正面进行拍照。

依照本发明的一个方面，调取图像，提取第一数据和第二数据的具体步骤包括：调取实验所需的时间节点对应的图像；测量该图像以获取第一数据和第二数据的具体步骤包括：调取图像：应用image J软件调取实验时间节点对应的经预训练后的实验体腹正面图像；提取图像内数据：在image J软件中利用直线测量工具对图像进行测量，将经预训练后的实验体腹部最宽处的宽度作为第一数据，记为L1；将经预训练后的实验体腹股沟与股骨头外侧皮肤交点至同侧肱骨根部外侧垂直于体轴的连线作为第二数据，记为L2，保存并导出结果。

依照本发明的一个方面，计算第一数据与第二数据的比值，并将其作为腹胀指数的具体步骤包括：通过Excel软件提取第一数据和第二数据；将第一数据与第二数据比值，并将比值记作为腹胀指数。

依照本发明的一个方面，在获取腹胀指数后，应用腹胀指数评估经预训练后的实验体的消化道肿胀程度。

本发明实施的优点：通过对实验体进行适应性锻炼使其适应倒提状态，从而便于在实验所需时间节点对处于倒提状态的实验体进行拍照，并对拍摄所得图片进行测量计算，以对同一动物不同时间节点进行连续多次评估，提高了评估结果的准确度，且方便快捷，高效无创，降低成本，减少设备依赖性，间接量化消化道肿胀程度进而便于对消化道损伤模型的消化道进行评估。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明提供的一种评估消化道损伤模型消化道肿胀程度的方法的流程图；

图2为本发明所述的实验大鼠腹正面测量示意图；

图3为本发明所述的无肿胀组与有肿胀组的消化道重量对比图；

图4为本发明所述的无肿胀组与有肿胀组的腹胀指数对比图；

图5为本发明所述的消化道重量与腹胀指数关系图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

为了解决操作复杂不易于得到较为准确的消化道肿胀程度的评估结果的技术问题，本发明提供了一种获取评估消化道损伤模型腹胀指数的方法，能够对同一动物不同时间点进行连续多次评估，增加了评估结果的准确度，且高效无创，成本较低。下面结合图1-图4对该获取评估消化道损伤模型腹胀指数的方法进行举例说明。

如图1所示，图1为本发明提供的一种获取评估消化道损伤模型腹胀指数的方法的流程图，所述获取评估消化道损伤模型腹胀指数的方法包括如下步骤：

S1，对实验体进行预训练。

由于引起消化道损伤的疾病有很多，为了不进行重复的阐述，本申请可以选取实验大鼠作为实验体，选择由脑出血引起的消化道损伤为例进行研究，在实际研究过程中，可以根据实验目的、实验条件等选取其他动物作为实验体进行研究，亦可以选择由其他病症引起的消化道损伤进行研究，本申请中对此不作进一步地限定。在本实施例中，需要对实验大鼠进行预训练，其具体步骤包括：对实验大鼠进行适应性训练。具体而言，在消化道损伤模型建立前连续3天，拎尾部将实验体倒置，使其头部向下身体自然舒展；每天训练3至5次，使其倒置时无身体蜷缩、肌紧张等应激反应；构建消化道损伤模型。在本实施例中，可以选择通过对基底节注射自体血以构建由脑出血引起消化道损伤的实验体，从而构建消化道损伤模型。

在实际训练过程中，不同的实验体适应倒置训练的时间不同，即不同的实验体的训练天数不相同，训练天数的设置根据实际选用的实验体设置，本申请中对此不作进一步地限定。

在本申请中，基底节注射自体血以构建由脑出血引起的消化道损伤模型的具体步骤包括：具体注射定位参数为距实验大鼠前囟前1.5mm，右侧旁开3.5mm，深6.0mm，注射血量为100μl。

S2，采集经预训练后的实验体在实验所需时间节点的腹正面图像，并将其存储。

在具体实现方式中，采集经预训练后的实验大鼠在实验所需时间节点的腹正面图像的具体步骤包括：设置***：根据实验所需时间节点，拎尾部将经预训练后的实验大鼠倒提，使其头部向下身体自然舒展，前肢抓握于预先固定的金属网格上；获取图像：对经预训练后的实验大鼠腹正面进行拍摄，将拍照所得腹正面图像与相应时间节点一一对应储存。在本申请中，倒提次数的设置根据经预训练后的实验大鼠是否处于放松状态而定，一般倒提次数设置为一次或者两次。

在本实施例中，实验所需时间节点为经预训练后的实验大鼠消化道损伤模型后的两小时、第三天以及第七天，更进一步地说，在生成经预训练后的实验大鼠后的2小时、第3天、第7天，拎尾部倒提将经预训练后的实验大鼠倒置，头部向下且身体自然舒展，前肢抓握于预先固定的金属网格上。在实际实验过程中，为了提高评估结果的准确度，时间节点可以为一个或多个，且时间节点根据实验需求以及具体选择的实验体进行选择。

在本实施例中，金属网格由多根金属条拼合而成且固定于试验台面上，为便于经预训练后的实验大鼠的前肢抓取金属网格，金属网格需高于试验台面至少15cm，此外，金属条直径为1mm，金属网格的网格大小为1cm*8cm。

为了便于采集较为清晰的图像，本申请中的图像采用12MP广角镜头对经预训练后的实验大鼠进行拍摄，选用27mm焦距以及1200万像素，并使该广角镜头距离经预训练后的实验大鼠腹正面30至40cm，拍摄而得的图像需要以经预训练后的实验大鼠的腹部为中心，且平行于实验大鼠的腹部正面。

S3，调取腹正面图像，并提取腹正面图像内第一数据和第二数据。

具体来讲，先通过image J软件调取实验时间节点对应的经预训练后的实验大鼠腹正面图像；再在image J软件中利用直线测量工具对图像进行测量，将测量所得经预训练后的实验大鼠腹部最宽处的宽度作为第一数据，记为L1，单位为像素；将测量所得经预训练后的实验大鼠腹股沟与股骨头外侧皮肤交点至同侧肱骨根部外侧垂直于体轴的连线作为第二数据，记为L2，单位为像素，如图2所示。

S4，计算第一数据和第二数据的比值，并将其作为腹胀指数存储。

当通过image J软件测量得到第一数据和第二数据后，通过ecxel软件提取第一数据和第二数据，并计算两者的比值，记作腹胀指数。

具体来讲，将第一数据L1除以第二数据L2，并将所得值记作腹胀指数(AbdominalDistention Index,ADI)，计算公式为ADI＝L1/L2。

在本申请中，当获得腹胀指数后，可以应用腹胀指数评估实验大鼠的消化道肿胀程度，更进一步地说，应用腹胀指数(ADI)结合其他实验指标，如消化道病理等共同评估实验大鼠的消化道肿胀程度；或者根据实验所需的不同时间节点测得的腹胀指数(ADI)对实验大鼠消化道肿胀进行连续评估。

当针对任一时间节点获取与其相应的腹胀指数后，根据多个腹胀指数对消化道肿胀程度进行评估。在本实施例中，将该实验大鼠进行剖腹以观察其消化道的实际肿胀程度，并自其贲门至***取胃肠称重，随后根据剖腹观察结果将模型分为消化道无肿胀组和肿胀组，将无肿胀组与肿胀组进行对比。

实验发现肿胀组消化道重量极显著增加(P<0.01)，如图3所示，采用本发明计算出的腹胀指数显著升高，如图4所示，且消化道重量与腹胀指数(ADI)具有显著正相关性(P<0.05,R²＝0.4602)，如图5所示，由此表明本发明能够无创地评估消化道肿胀程度。

综上所述，本发明实施例通过对实验大鼠进行适应性锻炼使其适应倒提状态，从而便于在实验所需时间节点对处于倒提状态的实验大鼠进行拍照，并对拍摄所得图片进行测量计算，以对同一动物在不同时间节点进行连续多次评估，提高了评估结果的准确度，且方便快捷，高效无创，降低成本，减少设备依赖性，间接量化消化道肿胀程度进而便于对消化道损伤模型的消化道进行评估。

以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本领域技术的技术人员在本发明公开的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。