Vitrigel膜干燥体的制造方法以及制造装置
阅读说明：本技术 Vitrigel膜干燥体的制造方法以及制造装置 (Method and apparatus for producing Vitrigel film dried body ) 是由 竹泽俊明 于 2018-04-12 设计创作，主要内容包括：本发明提供一种Vitrigel膜干燥体的制造方法,其能够得到具有没有褶皱的平滑表面的Vitrigel膜干燥体。Vitrigel膜干燥体的制造方法依次具备以下工序：工序1,将具有1个以上凹部的构件A与具有1个以上贯穿孔的构件B按照使所述凹部与所述贯穿孔重叠的方式同心状地配置、载置；工序2,从所述构件B的所述贯穿孔注入溶胶；工序3,使所述溶胶凝胶化；工序4,将所述工序3中获得的水凝胶在形成于所述构件A以及所述构件B内的状态下进行干燥使其玻璃化；工序5,将所述工序4中获得的水凝胶干燥体进行水合；工序6,将所述工序5中获得的Vitrigel干燥再一次使其玻璃化；以及工序7,将由所述工序6获得的Vitrigel干燥体中微少地覆盖在上述构件A的顶面上的部分进行切离。(The present invention provides a method for manufacturing a Vitrigel film dried body, which can obtain a Vitrigel film dried body having a smooth surface without wrinkles. The method for producing a Vitrigel membrane dried body comprises the following steps in this order: a step 1 of disposing and placing a member a having 1 or more recessed portions and a member B having 1 or more through-holes concentrically such that the recessed portions and the through-holes overlap each other; step 2 of injecting sol from the through-hole of the member B; step 3 of gelling the sol; a step 4 of drying the hydrogel obtained in the step 3 in a state of being formed in the member a and the member B to vitrify the hydrogel; step 5 of hydrating the dried hydrogel obtained in step 4; a step 6 of drying the Vitrigel obtained in the step 5 and vitrifying the dried Vitrigel; and a step 7 of cutting off a portion of the Vitrigel dried body obtained in the step 6, which slightly covers the top surface of the member a.)
技术领域
本发明涉及Vitrigel膜干燥体的制造方法以及制造装置。具体而言，本发明涉及Vitrigel膜干燥体的制造方法以及制造装置、以及、粘接有使用该制造方法以及制造装置获得的Vitrigel膜干燥体的设备的制造方法以及制造装置。
本申请主张2017年5月17日在日本申请的日本特愿2017-098330号的优先权，将其内容援引于本文中。
背景技术
一直以来，发明人开发了一种具备胶原蛋白Vitrigel膜(collagen Vitrigelfilm)干燥体的腔室(例如参照专利文献1)。首先，制造与Parafilm(注册商标)一体化了的、具有没有褶皱的平滑表面的胶原蛋白Vitrigel膜干燥体(例如参照专利文献2)，将其粘贴于筒状的腔室主体，然后将Parafilm(注册商标)剥离，从而制造了具备胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的腔室。目前，通过将夹持于2块环状磁铁的胶原蛋白Vitrigel膜进行干燥，制造胶原蛋白Vitrigel膜干燥体(例如参照专利文献3)，将其粘贴于筒状的腔室主体，然后切除不要部分，从而制造了具备胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的腔室。
另外，发明人开发出一种方法，即，在制造出的具备胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的腔室中，为了防止在水合时胶原蛋白Vitrigel膜发生弯曲，而在该胶原蛋白Vitrigel膜之下粘贴经过硅处理的聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)薄膜(例如，参照专利文献4)。
另外，发明人目前开发了一种具备胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的细胞封入用设备。关于其制造方法，首先，将夹持于2块环状磁铁中的胶原蛋白Vitrigel膜进行干燥，从而制造胶原蛋白Vitrigel膜干燥体(例如，参照专利文献3)。接着，将此胶原蛋白Vitrigel膜干燥体粘贴于环状的侧面构件之后切除不要部分，从而获得具备胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的细胞封入用设备。
另一方面，对于发明人目前为止开发出的粘贴型(创可贴型)人工皮肤制剂，将去端肽胶原蛋白(atelocollagen)Vitrigel膜干燥体置于创伤部，接着，重叠与胶原蛋白Vitrigel膜干燥体相比大一圈的经硅处理的PET薄膜，进一步，从其上方覆盖并粘贴敷料带(dressing tape)(例如，参照专利文献5)。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本特许第5933223号公报
专利文献2：日本特许第5892611号公报
专利文献3：日本特许第4817847号公报
专利文献4：日本特开2015-223108号公报
专利文献5：再公表WO2014/208525号公报
发明内容
发明想要解决的课题
对于专利文献2中记载的与Parafilm(注册商标)一体化了的、具有没有褶皱的平滑表面的胶原蛋白Vitrigel膜干燥体，存在有如下的课题：在将Parafilm(注册商标)剥离了之后，在胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的表面附着源自Parafilm(注册商标)的成分。
另外，专利文献3中记载的使用环状磁铁制造出的胶原蛋白Vitrigel膜干燥体存在有如下的课题：在作业方面需要时间与成本，并且，在胶原蛋白Vitrigel膜干燥体中产生干燥褶皱。
另外，对于专利文献4中记载的具备粘贴有经硅处理的PET薄膜的胶原蛋白Vitrigel膜的腔室，在制造了具备胶原蛋白Vitrigel膜的腔室之后粘贴经硅处理的PET薄膜。因此，尚未开发出以低成本且简便地制造微弱粘贴了经硅处理的PET薄膜的、且具有没有褶皱的平滑表面的胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的技术。
本发明鉴于上述情形而完成，提供一种Vitrigel膜干燥体的制造方法以及制造装置，其可简便地获得具有没有褶皱的平滑表面的Vitrigel膜干燥体。另外提供一种简便的粘接了Vitrigel膜干燥体的设备的制造方法以及制造装置，其可在Vitrigel膜干燥体的制造之后连续地制造。
用于解决课题的方案
发明人为了实现上述目的反复进行了深入研究，结果发现：通过使用具备对水凝胶的吸附性低的构件以及对水凝胶的吸附性高的构件的装置，可简便地获得具有没有褶皱的平滑表面的Vitrigel膜干燥体，从而完成了本发明。
即，本发明包含以下的实施方式。
本发明的第1实施方式所涉及的Vitrigel膜干燥体的制造方法依次具备以下的工序：
工序1，将具有1个以上的凹部的构件A与具有1个以上的贯穿孔的构件B按照使上述构件A的上述凹部与上述构件B的上述贯穿孔重叠的方式同心状地配置、载置，
该构件A中在上述凹部的底面，中心部由对水凝胶的吸附性低的第1材料构成，周边部由对水凝胶的吸附性高的第2材料构成，
该构件B中贯穿孔的横截面的尺寸与上述构件A的上述凹部的横截面的尺寸大致相同，
工序2，从上述构件B的上述贯穿孔注入溶胶，
工序3，将注入了上述溶胶的上述构件A以及上述构件B静置，使上述溶胶进行凝胶化，
工序4，将上述工序3中获得的水凝胶在形成于上述构件A以及上述构件B内的状态下进行干燥并且使其玻璃化，
工序5，将上述工序4中获得的水凝胶干燥体在形成于上述构件A以及上述构件B内的状态下进行水合，
工序6，将上述工序5中获得的Vitrigel在形成于上述构件A以及上述构件B内的状态下进行干燥并且再一次进行玻璃化，以及
工序7，将上述工序6中获得的Vitrigel干燥体之中微少地覆盖在上述构件A的顶面上的部分进行切离。
在上述第1实施方式所涉及的Vitrigel膜干燥体的制造方法中，上述第1材料也可以在上述构件A的上述凹部的底面能够装拆。
本发明的第2实施方式所涉及的粘接了Vitrigel膜干燥体的设备的制造方法，为使用通过利用上述第1实施方式的Vitrigel膜干燥体的制造方法所获得的Vitrigel膜干燥体而制造粘接了Vitrigel膜干燥体的设备的方法，其依次具备以下工序：
工序8，在上述Vitrigel膜干燥体配置于上述构件A以及上述构件B内的状态下，将上述构件B从上述构件A分离，将构件C(具有一个以上的凹部，在与上述Vitrigel膜干燥体相接触侧的面的周边部具有粘接剂层的筒状构件以可拔出***的方式嵌入上述凹部，且上述凹部的横截面的尺寸与上述构件A的上述凹部的横截面的尺寸大致相同)按照使得上述构件A的上述凹部与上述构件C的上述凹部重叠的方式同心状地配置，在上述构件C之上载置上述构件A，以及
工序9，将上述构件A与上述构件C进行分离，从上述构件A拔出粘接了上述Vitrigel膜干燥体的筒状构件。
在上述第2实施方式的粘接了Vitrigel膜干燥体的设备的制造方法中，也可在上述工序9之后，进一步依次具备以下工序：
工序10，将上述工序9中获得的粘接了上述Vitrigel膜干燥体的上述筒状构件，按照粘接了上述Vitrigel膜干燥体的面与底面相接触的方式，可拔出***地嵌入于第2构件C，在上述筒状构件的没有粘接上述Vitrigel膜干燥体的面的周边部形成粘接剂层，
工序11，在通过上述Vitrigel膜干燥体的制造方法获得的第2Vitrigel膜干燥体形成于第2构件A以及第2构件B内的状态下，使上述第2构件B从上述第2构件A分离，
将上述工序10中获了的第2构件C，按照使上述第2构件A的上述凹部与上述第2构件C的上述凹部重叠的方式同心状地配置，按照使上述第2构件C的没有粘接上述Vitrigel干燥体的面的上述粘接剂层与形成于上述第2构件A内的第2Vitrigel干燥体相接触的方式，在上述第2构件C上载置上述第2构件A，以及
工序12，使上述第2构件C与上述第2构件A分离，从上述第2构件A拔出在两面粘接了上述Vitrigel膜干燥体的筒状构件。
本发明的第3实施方式的Vitrigel膜干燥体的制造装置具备构件A与构件B，所述构件A具有1个以上的凹部，且在上述凹部的底面，中心部由对水凝胶的吸附性低的第1材料构成，周边部由对水凝胶的吸附性高的第2材料构成，所述构件B具有1个以上的横截面尺寸与上述构件A的上述凹部的横截面尺寸大致相同的贯穿孔，在同心状地配置了上述构件A与上述构件B的情况下，按照使上述凹部与上述贯穿孔重叠的方式配置。
在上述第3实施方式的Vitrigel膜干燥体的制造装置中，也可以使上述第1材料在上述构件A的上述凹部的底面可拆卸。
本发明的第4实施方式的粘接了Vitrigel膜干燥体的设备的制造装置，具备上述第3实施方式的Vitrigel膜干燥体的制造装置、以及具有1个以上的横截面尺寸与上述构件A的上述凹部的横截面尺寸大致相同的凹部的构件C，上述构件C的上述凹部供筒状构件可拔出***地嵌入，该筒状构件为粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的主体，在同心状地配置了上述构件A与上述构件C的情况下，按照使上述构件A的上述凹部与上述构件C的上述凹部重叠的方式配置。
在上述实施方式的粘接了Vitrigel膜干燥体的设备的制造装置中，也可具备2个以上的上述Vitrigel膜干燥体的制造装置。
发明的效果
根据上述实施方式的Vitrigel膜干燥体的制造方法以及制造装置，可简便地获得具有没有褶皱的平滑表面的Vitrigel膜干燥体。另外，根据上述实施方式的粘接了Vitrigel膜干燥体的设备的制造方法以及制造装置，可在Vitrigel膜干燥体的制造之后连续地制造粘接了Vitrigel膜干燥体的设备，可简便地获得粘接了Vitrigel膜干燥体的设备。
附图说明
图1A是表示本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造装置的一个例子的平面视图。
图1B是表示本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造装置的一个例子的主视图。
图1C是表示本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造装置的一个例子的立体图。
图2A是表示实施例1中的在使用本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造方法获得的细胞封入用设备中装满了PBS的状态的图像。
图2B是表示比较例1中的在使用环状磁铁制造的粘接有Vitrigel膜干燥体的细胞封入用设备中装满了PBS的状态的图像。
图3是表示实施例2中的在本实施方式的粘接了Vitrigel膜干燥体的腔室中注入PBS的状态的图像。
图4是表示制造例6中的使本实施方式的Vitrigel膜干燥体与PET薄膜可拆卸的情形的图像。
具体实施方式
《Vitrigel膜干燥体的制造方法》
本实施方式的Vitrigel膜干燥体的制造方法是使用构件A与构件B的方法。构件A具有1个以上的凹部。在该凹部的底面，中心部由对水凝胶的吸附性低的第1材料构成，周边部由对水凝胶的吸附性高的第2材料构成。另外，构件B具有1个以上的横截面尺寸与构件A的凹部的横截面尺寸大致相同的贯穿孔。
另外，本实施方式的Vitrigel膜干燥体的制造方法依次具备以下工序1～工序7。
在工序1中，按照使上述构件A的上述凹部与上述构件B的上述贯穿孔重叠的方式同心状地配置、载置。
在工序2中，从上述构件B的上述贯穿孔注入溶胶。
在工序3中，将注入了上述溶胶的上述构件A以及上述构件B静置，从而使上述溶胶进行凝胶化。
在工序4中，将上述工序3中获得的水凝胶在形成于上述构件A以及上述构件B内的状态下进行干燥并且进行玻璃化。
在工序5中，将上述工序4中获得的水凝胶干燥体在形成于上述构件A以及上述构件B内的状态下进行水合。
在工序6中，将上述工序5中获得的Vitrigel在形成于上述构件A以及上述构件B内的状态下进行干燥，使其再一次玻璃化。
在工序7中，将上述工序6中获得的Vitrigel干燥体中的微少地覆盖在上述构件A的顶面上的部分进行切离。
根据本实施方式的Vitrigel膜干燥体的制造方法，可简便地制造具有没有褶皱的平滑表面的Vitrigel膜干燥体。
需要说明的是，在本说明书中，所谓“溶胶”是指：将液体作为分散介质的分散质的胶体颗粒(尺寸：约1～数百nm左右)特别地由高分子化合物构成的物质。作为溶胶，更具体地可列举天然物高分子化合物和/或合成高分子化合物的水溶液。因此，这些高分子化合物利用化学键导入交联而获取网眼结构的情况下，转变为“水凝胶”、即、在其网眼中保有了大量水的半固态状态的物质。即，所谓“水凝胶”，表示使溶胶进行凝胶化而得到的物质。
另外，所谓“Vitrigel”是指，在将以往的水凝胶进行了玻璃化(vitrification)之后进行再水合而获得的处于稳定状态的凝胶，发明人命名为“Vitrigel(日文：ビトリゲル；中文译文：玻璃质凝胶)(注册商标)”。予以说明的是，以下，在使用用语“Vitrigel”之时，省略用语“(注册商标)”而使用。
另外，在本说明书中，在详细说明由水凝胶形成的Vitrigel膜干燥体的制造工序之时，对于在该玻璃化工序后未立即进行再水合工序的水凝胶的干燥体，简单地称为“水凝胶干燥体”。而且，与其相区别地，将在该玻璃化工序后经由再水合工序而获得的凝胶表示为“Vitrigel”，将通过使该Vitrigel进行玻璃化而获得的干燥体称为“Vitrigel干燥体”。另外，将对Vitrigel干燥体进行紫外线照射工序而获得的物质称为“对Vitrigel干燥体实施紫外线照射处理而得到的Vitrigel材料”；将对该Vitrigel材料进行再水合工序而获得的凝胶称为“Vitrigel材料”；将使Vitrigel材料干燥而获得的干燥体称为“Vitrigel材料的干燥体”。因此，“Vitrigel”以及“Vitrigel材料”是水合体。
关于本实施方式的Vitrigel膜干燥体的制造方法的各工序，在以下进行详细说明。
＜工序1＞
首先，在构件A上载置构件B。此时，按照使构件A的凹部与构件B的贯穿孔重叠的方式同心状地配置。通过使构件A的凹部与构件B的贯穿孔重叠并且连通，从而可在接下来的工序2中，将溶胶通过构件B的贯穿孔注入于构件A的凹部。
接着，针对各构件的构成以及材料，如下所示。
[构件A]
(形状)
构件A具有1个以上的凹部。在该凹部内，制造Vitrigel膜干燥体。
关于构件A的凹部，从可获得具有平滑表面的Vitrigel膜干燥体的方面考虑，底面平滑、且侧面与底面相互垂直。
另外，关于凹部的横截面的面积，可设为成为所期望的尺寸的Vitrigel膜干燥体那样的尺寸，没有特别的限定。关于凹部的横截面的面积，具体而言，可为例如4mm2以上且400cm2以下，可为例如20mm2以上且40cm2以下，可为例如80mm2以上且4cm2以下。
关于凹部的数量，例如列举1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、15、20等，不限定于此。其中，凹部的数量优选为偶数，更优选为2、4、6或8，进一步优选为4、6或8。
另外，在构件A中具有2个以上的凹部的情况下，优选在构件A上以相等间隔配置凹部。
另外，在构件A中，凹部的深度可适当调整以使Vitrigel膜干燥体的厚度成为所期望的厚度，优选为1μm以上且5mm以下，更优选为5μm以上且3mm以下，进一步优选为10μm以上且2mm以下，特别优选为100μm以上且1mm以下。通过使凹部的深度为上述范围，从而例如在细胞封入用设备中使用通过本实施方式的制造方法获得的Vitrigel膜干燥体的情况下，能够成为可将细胞注入于该设备内进行培养的强度。
另外，在构件A中，凹部的横截面的形状可适当调整以使Vitrigel膜干燥体的形状成为所期望的形状，例如可列举三角形、四边形(包含正方形、长方形、梯形)、五边形、六边形、七边形、八边形等多边形；圆形、椭圆形、大致圆形、椭圆形、大致椭圆形、半圆形、扇形等，不限定于此。其中，凹部的横截面的形状优选为圆形。
另外，在构件A中，在凹部的横截面为圆形的情况下，其直径可以适当调整以使得Vitrigel膜干燥体的直径为所期望的直径，可为例如2mm以上且226mm以下，可为例如5mm以上且72mm以下，可为例如10mm以上且23mm以下。
(材料)
另外，关于构成构件A的材料，在凹部的底面，中心部由对水凝胶的吸附性低的第1材料构成，周边部由对水凝胶的吸附性高的第2材料构成。另外，除了凹部的底面的中心部以外的部分也可全都由第2材料构成。
此处，“凹部的底面的中心部”表示从底面的中心至最短的边缘部之间的距离中的、例如直至9/10、优选4/5、更优选3/4、进一步优选2/3、特别优选1/2为止的位置。另外，“凹部的底面的周边部”表示包围上述凹部的底面的中心部的部分。
在本说明书中，“对水凝胶的吸附性低的材料”是指：水凝胶完全不吸附的材料或以可装拆的程度的弱力吸附的材料。
另外，在本说明书中，“对水凝胶的吸附性高的材料”是指：水凝胶完全地吸附的材料或以无法装拆的程度的强力吸附的材料。
具体而言，可如以下所示进行定义。
首先，使水凝胶与第1材料或第2材料接触，在从水平方向观察第1材料或第2材料的表面上的水凝胶时，如果将水凝胶的轮廓曲线与第1材料表面或第2材料的交点设为“端点”，则在端点处测定接触角θ。此时，在端点处，第1材料或第2材料的表面张力(气体/第1材料或第2材料间的表面张力)γS1或γS2、水凝胶/第1材料或第2材料间的表面张力γLS1或γLS2、以及水凝胶的表面张力(气体/水凝胶间的表面张力)γL发挥作用。润湿的状态稳定时，端点不右左移动而是静止，因而这些“γS1、γLS1、以及γL”、或者、“γS2、γLS2、以及γL”中的各3个力取得平衡。这3个力的平衡由以下的[1]或[2]所示的式(扬氏方程式(Young’s equation))表示。
γS1＝γLcosθ+γLS1 [1]
γS2＝γLcosθ+γLS2 [2]
另外，对于润湿性即接触角的大小，由水凝胶以及第1材料或第2材料各自的表面特性决定。因此，可利用将上述式[1]变形而得到的以下的[3]所表示的式子、或将上述式[2]变形而得到的以下的[4]所表示的式子而考虑。
cosθ＝(γS1-γLS1)/γL···[3]
cosθ＝(γS2-γLS2)/γL···[4]
cosθ变小而接近0表示：接触角θ接近180°，润湿变差，即，对水凝胶的吸附性变低。据此，关于用于降低对水凝胶的吸附性的方法，可列举“(1)增大水凝胶的表面张力γL”、或者“(2)减小第1材料的表面张力γS1”中的任一种方法。
另一方面，cosθ变大而接近1表示：接触角θ接近0°，润湿变良好，即，对水凝胶的吸附性变高。据此，关于用于提高对水凝胶的吸附性的方法，可列举“(1)减小水凝胶的表面张力γL”、或者“(2)增大第2材料的表面张力γS2”中的任一种方法。
关于水凝胶的表面张力，为了使所获得的膜的强度一定，因而可变化的区域受限。因此，在降低对水凝胶的吸附性的情况下，“(2)减小第1材料的表面张力γS1”的方法是优选的。另一方面，在提高对水凝胶的吸附性的情况下，“(2)增大第2材料的表面张力γS2”的方法是优选的。
根据以上内容，对水凝胶的吸附性低的材料是指与水凝胶的表面张力相比表面张力小的材料。更具体而言，第1材料的表面张力与水凝胶的表面张力相比，例如可以小1dynes/cm以上，优选小5dynes/cm以上，更优选小10dynes/cm以上，进一步优选小20dynes/cm以上，特别优选小30dynes/cm以上。
通过使第1材料的表面张力与水凝胶的表面张力相比小上述下限值以上，从而可容易将所制造出的Vitrigel膜干燥体从第1材料剥离。
另外，所谓对水凝胶的吸附性高的材料，是指与水凝胶的表面张力相比表面张力大的材料。更具体而言，第2材料的表面张力与水凝胶的表面张力相比，例如大1dynes/cm以上，优选大3dynes/cm以上，更优选大5dynes/cm以上，进一步优选大7dynes/cm以上，特别优选大10dynes/cm以上。
通过使第2材料的表面张力与水凝胶的表面张力相比大上述下限值以上，从而在下述工序7之后，可抑制所制造出的Vitrigel膜干燥体意外地剥落或者发生移动。
另外，在水凝胶是包含胶原蛋白等蛋白质的凝胶的情况下，对水凝胶的吸附性低的材料也可以是指在表面上较多地具有亲水性基团的材料，对水凝胶的吸附性高的材料也可以是指在表面上较多地具有疏水性基团的材料。关于在上述亲水性基团以及上述疏水性基在表面上具有的数量，可根据所使用的包含蛋白质的水凝胶的种类而适宜调整。
关于上述亲水性基团，例如，可列举磷酸胆碱基(Phosphorylcholine group)、亚烷基二醇基等。
关于上述疏水性基团，例如，可列举直链状、支链状以及环状的烷基。烷基的碳原子数例如为1以上且20以下，例如为4以上且20以下。
作为上述第1材料，具体而言，例如可列举不锈钢、聚(氯乙烯)等，不限定于它们。
另外，关于第1材料，例如也可以是层叠了硅等剥离剂的薄膜。通过按照使得Vitrigel膜干燥体与该薄膜的层叠了剥离剂层的面相接触的方式，制造Vitrigel膜干燥体，从而可容易地将Vitrigel膜干燥体剥离。关于上述薄膜的材料，例如可列举聚乙烯、聚对苯二甲酸乙二醇酯、聚苯乙烯、聚丙烯等，没有特别的限定。
另外，关于第1材料，例如也可以是通过将硅等油涂布于构件A的底面上而成的油覆膜。
作为上述第2材料，具体而言，例如可列举玻璃材料、聚丙烯酸酯(丙烯酸类树脂)、聚苯乙烯、尼龙等，不限定于它们。
作为上述玻璃材料，更具体而言，例如可列举碱石灰玻璃、Pyrex(注册商标)玻璃、Vycor(注册商标)玻璃、石英玻璃等。
作为上述聚丙烯酸酯(丙烯酸类树脂)，更具体而言，例如可列举聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(甲基丙烯酸乙酯)、聚(甲基丙烯酸丁酯)、聚(甲基丙烯酸异丁酯)、聚(甲基丙烯酸己酯)、聚(甲基丙烯酸异癸酯)、聚(甲基丙烯酸月桂酯)、聚(甲基丙烯酸苯酯)、聚(丙烯酸甲酯)、聚(丙烯酸异丙酯)、聚(丙烯酸异丁酯)、聚(丙烯酸十八烷酯)等。
另外，除了凹部的底面的中心部以外的部分也可以全都由上述例示出的第2材料构成。
另外，上述第1材料也可以以能够装拆的方式载置于构件A的凹部的底面。此时，优选第1材料以通过物理性剥离即可简单地装拆的程度的弱力与构成构件A凹部底面的材料粘合。具体而言，例如，如后述制造例所示，第1材料也可以介由PBS等盐、以利用镊子等的物理性剥离即可简单地装拆的程度的弱力、与构成构件A凹部底面的材料粘合。或者，第1材料也可以介由含有硅等剥离剂的剥离剂层、以利用镊子等的物理性剥离即可简单地装拆的程度的弱力、与构成构件A凹部底面的材料粘合。
此时，关于在第1材料下存在的构成构件A凹部底面的材料，可列举与上述第2材料同样的材料。
[构件B]
(形状)
构件B具有1个以上的贯穿孔。此贯穿孔的尺寸与构件A的凹部的横截面大致相同。具体而言，贯穿孔的横截面的面积相对于构件A的凹部的横截面的面积而言优选为1倍以上且1.5倍以下，更优选为1倍以上且1.3倍以下，进一步优选为1倍以上且1.25倍以下，特别优选为1.21倍。
贯穿孔的数量优选为与构件A的凹部的数量相同的数量，例如可列举1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、15、20等，不限定于此。其中，贯穿孔的数量优选为偶数，更优选为2、4、6或8，进一步优选为4、6或8。
另外，在构件B中具有2个以上的贯穿孔的情况下，优选在构件B上以相等间隔配置贯穿孔。
另外，在构件B中具有2个以上的贯穿孔的情况下，在构件B上，以与构件A上的凹部相同的间隔配置贯穿孔。
另外，在同心状地配置构件A与构件B时，构件B的贯穿孔按照与构件A的凹部重叠的方式配置。
另外，在构件B中，贯穿孔的高度没有特别的限定，可设为例如1μm以上且100mm以下，可设为例如1μm以上且50mm以下，可设为例如5μm以上且10mm以下，可设为例如10μm以上且5mm以下。
另外，在构件B中，贯穿孔的横截面的形状可设为与构件A的凹部的横截面相同，例如可列举三角形、四边形(包含正方形、长方形、梯形)、五边形、六边形、七边形、八边形等多边形；圆形、椭圆形、大致圆形、椭圆形、大致椭圆形、半圆形、扇形等，不限定于此。其中，贯穿孔的横截面的形状优选为圆形。
另外，在构件B中，在贯穿孔的横截面为圆形的情况下，其直径可设为与构件A的凹部的直径大致相同，可设为例如2mm以上且226mm以下，可设为例如5mm以上且72mm以下，可设为例如10mm以上且23mm以下。
(材料)
另外，构件B的材料没有特别的限定，从处理容易度考虑，优选为与构成构件A的第2材料相同的材料。关于构件B的材料，可列举与作为上述构件A的第2材料而例示出的材料相同的材料。
＜工序2＞
接着，将溶胶从构件B的贯穿孔注入于构件A的凹部。
关于上述溶胶，例如包含凝胶化的源自细胞外基质的成分、纤维蛋白(fibrin)、琼脂、琼脂糖、纤维素等天然高分子化合物，以及聚丙烯酰胺(polyacrylamide)、聚乙烯醇、聚环氧乙烷、聚(甲基丙烯酸2-羟乙酯)/聚己内酯(poly(II-hydroxyethylmethacrylate)/polycaprolactone)等合成高分子化合物。
关于上述凝胶化的源自细胞外基质的成分，例如可列举胶原蛋白(I型、II型、III型、V型、XI型等)、由小鼠EHS肿瘤萃取物(包含IV型胶原蛋白、层粘连蛋白(laminin)、硫酸乙酰肝素蛋白多糖(heparan sulfate proteoglycan)等)再构筑的基底膜成分(商品名：Matrigel)、糖胺聚糖(glycosaminoglycan)、透明质酸(hyaluronic acid)、蛋白多糖(proteoglycan)、明胶等，不限定于此。各自凝胶化中可选择最适的盐等成分、其浓度、pH等，制造所期望的Vitrigel膜干燥体。另外，通过将原料进行组合，从而可获得模仿了各种各样的生物体内组织的Vitrigel膜干燥体。
其中，关于溶胶，优选为凝胶化的源自细胞外基质的成分，更优选为胶原蛋白。另外，关于胶原蛋白中更优选的原料，可例示出天然胶原蛋白(native collagen)或去端肽胶原蛋白。
在上述溶胶为胶原蛋白溶胶的情况下，对于胶原蛋白溶胶，作为具有最适的盐浓度的物质，例如可使用通过使用生理盐水、PBS(Phosphate Buffered Saline、磷酸盐缓冲液)、HBSS(Hank’s Balanced Salt Solution、汉克平衡盐溶液)、基础培养液、无血清培养液、含血清的培养液等而制备出的胶原蛋白溶胶。另外，胶原蛋白的凝胶化时的溶液的pH可为例如6以上且8以下。
特别是在使用无血清培养液的情况下，可避免其它动物血清成分中所含的不适于移植的物质(例如，抗原、病原因子等)包含在Vitrigel膜干燥体中。因此，使用无血清培养液获得的Vitrigel膜干燥体优选能够用于医疗用细胞移植设备。
另外，用于制作Vitrigel膜干燥体的胶原蛋白溶胶的浓度优选为0.1％以上且1.0％以下，更优选为0.2％以上且0.6％以下。通过使胶原蛋白溶胶的浓度为上述下限值以上，从而使得凝胶化不过于弱，另外，通过使胶原蛋白溶胶的浓度为上述上限值以下，从而可获得由均匀的胶原蛋白凝胶形成的Vitrigel膜干燥体。
另外，关于胶原蛋白溶胶的制备，例如在4℃左右进行即可。
＜工序3＞
接着，将注入了溶胶的构件A以及构件B静置，使溶胶进行凝胶化。
关于将溶胶进行保温的温度，可根据所使用的溶胶的种类而适当调整。例如，在溶胶为胶原蛋白溶胶的情况下，对于进行凝胶化时的保温，可设为低于胶原蛋白改性温度的温度，该胶原蛋白改性温度取决于所使用的胶原蛋白的动物种类，一般而言可通过在20℃以上且37℃以下的温度进行保温从而以数分钟至数小时进行凝胶化。
＜工序4＞
接着，将所得的水凝胶在形成于构件A以及构件B内的状态下进行干燥，使其玻璃化。
通过将水凝胶进行干燥，从而可完全去除水凝胶内的自由水，进一步进行结合水的部分去除。
越延长此玻璃化工序(将水凝胶内的自由水完全地去除，然后进行结合水的部分去除的工序)的期间，越可在进行了再水合之时获得透明度、强度优异的Vitrigel。予以说明的是，也可根据需要，将通过在短期间的玻璃化后进行再水合而获得的Vitrigel利用PBS等进行清洗，再一次进行玻璃化。
关于干燥方法，例如可使用风干、在密闭容器内干燥(使容器内的空气循环，始终供给干燥空气)、在放置了硅胶的环境下进行干燥等各种方法。例如，关于风干的方法，可例示出在以10℃、40％湿度保持为无菌的培养箱(incubator)中干燥2天、或者在无菌状态的洁净工作台内在室温下干燥一昼夜等方法。
＜工序5＞
接着，使所得的水凝胶干燥体在形成于构件A以及构件B内的状态下进行水合。此时，可使用生理盐水、PBS(Phosphate Buffered Saline)等进行水合。
＜工序6＞
接着，将所得的Vitrigel在形成于构件A以及构件B内的状态下进行干燥，再一次使其玻璃化。
作为干燥方法，可列举与上述工序4中例示出的方法同样的方法。
＜工序7＞
接着，针对所得的Vitrigel干燥体，使用例如筒状的刮刀(薄刃)等，将Vitrigel干燥体中的微少地覆盖在上述构件A的顶面上的部分进行切离。此时，沿着构件B的内侧面切入筒状的刮刀，将微少地覆盖在构件A的顶面上的Vitrigel干燥体切断。由此，可形成横截面的尺寸大致均匀的Vitrigel干燥体。
上述筒状的刮刀的横截面为与构件A的凹部的横截面相比微大、另外与构件B的贯穿孔的横截面相比微小的尺寸。具体而言，关于筒状的刮刀的横截面的面积，相对于构件A的凹部的横截面的面积而言优选为1倍以上且1.15倍以下，更优选为1倍以上且1.1倍以下，进一步优选为1倍以上且1.07倍以下，特别优选为1倍以上且1.05倍以下。
另外，关于筒状的刮刀的高度，可制成能够***于构件A以及构件B、且能够将所制造的Vitrigel膜干燥体进行切离的高度，没有特别的限定。
另外，关于筒状的刮刀的横截面的形状，可设为与构件A的凹部的横截面相同，例如可列举三角形、四边形(包含正方形、长方形、梯形)、五边形、六边形、七边形、八边形等多边形；圆形、椭圆形、大致圆形、椭圆形、大致椭圆形、半圆形、扇形等，不限定于此。其中，贯穿孔的横截面的形状优选为圆形。
另外，关于上述筒状的刮刀的直径，在筒状的刮刀的横截面为圆形的情况下，其直径可设为与构件A的凹部的直径大致相同，可设为例如2mm以上且226mm以下，可设为例如5mm以上且72mm以下，可设为例如10mm以上且23mm以下。
另外，例如，在同时制造2个以上的Vitrigel膜干燥体的情况下，也可使用构件D，将在构件A的凹部内制造出的2个以上的Vitrigel膜干燥体一次性地进行切离，所述构件D是具备与构件A的凹部数量相应的数量的上述筒状的刮刀，在同心状地配置上述构件A与上述构件B与上述构件D时，按照介由构件B的贯穿孔使构件A的凹部与筒状的刮刀重叠的方式配置筒状的刮刀。
＜其它的工序＞
另外，关于所得的Vitrigel干燥体，也可在工序6之后且在工序7之前在形成于构件A以及构件B内的状态下，或者在工序7之后在从构件A以及构件B取出的状态下，照射紫外线，对Vitrigel干燥体实施紫外线照射处理，从而制成Vitrigel材料。
在紫外线的照射中，可使用公知的紫外线照射装置。
关于紫外线向Vitrigel干燥体的照射能量，每单位面积的总照射量优选为0.1mJ/cm2以上且6000mJ/cm2以下，更优选为10mJ/cm2以上且4000mJ/cm2以下，进一步优选为100mJ/cm2以上且3000mJ/cm2以下。通过使总照射量为上述范围，从而可将使进一步利用再水合的工序获得的Vitrigel材料的透明度以及强度为特别优选。
另外，紫外线向Vitrigel干燥体的照射也可反复进行多次。在反复进行紫外线向Vitrigel干燥体的照射的情况下，优选的是：在进行第1次的紫外线的照射之后，进行对Vitrigel干燥体实施紫外线照射处理的Vitrigel材料的再水合以及再玻璃化的工序，其后进行第2次以后的紫外线向再玻璃化后的Vitrigel材料的干燥体的照射。
每单位面积的紫外线总照射量相同时，可分割为多次反复进行紫外线向Vitrigel干燥体的照射，从而更加提高进一步进行再水合而获得的Vitrigel材料的透明度以及强度。另外分割的次数越多则越优选。例如，紫外线向Vitrigel干燥体的照射的每单位面积的总照射量为1000mJ/cm2以上且4000mJ/cm2以下的范围时，该范围内的照射次数优选为2次以上且10次以下，更优选为2次以上且6次以下。
另外，在反复进行紫外线向Vitrigel干燥体的照射的情况下，也可将紫外线的照射部位划分为Vitrigel干燥体的一个面与另一个面(上表面与下表面)而照射，使其总照射量为向Vitrigel干燥体的每单位面积的紫外线总照射量。
对于通过对Vitrigel干燥体进行紫外线照射、使得通过进一步再水合而获得的Vitrigel材料的强度与透明度变高，认为是因为：Vitrigel材料内的高分子化合物彼此通过紫外线进行交联。即，认为通过该操作能够使Vitrigel材料维持高的透明度以及强度。
进而，也可以将通过对所获得的Vitrigel干燥体实施了紫外线照射处理的Vitrigel材料进行水合，从而制成Vitrigel材料。此时，可使用生理盐水、PBS(PhosphateBuffered Saline)等使其水合。
进而，也可通过将所得的Vitrigel材料进行干燥，从而使其再玻璃化，制成Vitrigel材料的干燥体。
作为干燥方法，可列举与上述工序4中例示出的方法同样的方法。
关于通过本实施方式的Vitrigel膜干燥体的制造方法获得的Vitrigel膜干燥体，例如可用于具备Vitrigel膜干燥体的腔室、细胞封入用设备、或利用了具备上述Vitrigel膜干燥体的薄膜的粘贴型人工皮肤制剂等。
《粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造方法》
·第1实施方式
本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造方法是：使用由上述实施方式涉及的Vitrigel膜干燥体的制造方法获得的Vitrigel膜干燥体、制造粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的方法。
另外，关于本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造方法，是除了上述构件A以及上述构件B之外还使用构件C的方法。构件C具有1个以上的凹部。在该构件C的凹部，以可拔出***的方式嵌入筒状构件，该筒状构件在与Vitrigel膜干燥体相接触侧的面的周边部具有粘接剂层。另外，构件C的凹部的横截面是与构件A的凹部的横截面大致相同的尺寸。
另外，本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造方法是依次具备以下工序8以及工序9的方法。
在工序8中，在Vitrigel膜干燥体配置于构件A以及构件B内的状态下，使构件B从构件A分离，接着，将构件C以使构件A的凹部与构件C的凹部重叠的方式同心状地配置，在构件C之上载置构件A。
在工序9中，将构件A与构件C进行分离，从构件A拔出粘接有Vitrigel膜干燥体的筒状构件。
根据本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造方法，可由上述Vitrigel膜干燥体的制造方法连续地制造粘接有Vitrigel膜干燥体的设备。
需要说明的是，关于由本实施方式的制造方法制造的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备，例如可列举具备Vitrigel膜干燥体的腔室、细胞封入用设备等，但不限定于此。
以下，详细说明本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造方法的各工序。
＜工序8＞
首先，在将经由上述工序1～工序7获得的Vitrigel膜干燥体配置于构件A以及构件B内的状态下，将构件B从构件A分离。接着，在构件A之上载置构件C。此时，按照使构件A的凹部与构件C的凹部重叠的方式同心状地配置。通过使构件A的凹部与构件C的凹部重叠，可在不偏离的状态下，经由粘接剂层，将Vitrigel膜干燥体粘接于筒状构件。
关于粘接Vitrigel膜干燥体以及筒状构件的时间以及环境，可根据粘接剂层的组成而适宜选择。
接着，针对构件C以及筒状构件的构成以及材料，如下所示。
[构件C]
(形状)
构件C具有1个以上的凹部。另外，在构件C的凹部以可拔出***的方式嵌入筒状构件。
构件C的凹部可制成能够拔出***地嵌入后述筒状构件的形状。具体而言，构件C的凹部的底面可以是平滑的，也可以不是平滑的。另外，在构件C的凹部，侧面与底面可相互垂直，也可不垂直。
构件C的凹部的横截面是与构件A的凹部的横截面大致相同的尺寸。具体而言，关于凹部的横截面的面积，相对于构件A的凹部的横截面的面积而言优选为1.0倍以下，更优选为0.9倍以下，进一步优选为0.8倍以下，特别优选为0.75倍。
关于构件C的凹部的数量，优选为与构件A的凹部的数量相同的数量，例如可列举1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、15、20等，但不限定于此。其中，构件C的凹部的数量优选为偶数，更优选为2、4、6或8，进一步优选为4、6或8。
另外，在构件C中具有2个以上的凹部的情况下，优选在构件C上以相等间隔配置凹部。
另外，在构件C中具有2个以上的凹部的情况下，在构件C上以与构件A上的凹部相同的间隔配置凹部。
另外，在同心状地配置构件A与构件C时，按照使构件C的凹部与构件A的凹部重叠的方式配置。
另外，在构件C中，凹部的高度没有特别的限定，可根据嵌入的筒状构件的高度而适当调整。
另外，在构件C中，凹部的横截面的形状可设为与构件A的凹部的横截面相同，例如可列举三角形、四边形(包含正方形、长方形、梯形)、五边形、六边形、七边形、八边形等多边形；圆形、椭圆形、大致圆形、椭圆形、大致椭圆形、半圆形、扇形等，但不限定于此。其中，构件C的凹部的横截面的形状优选为圆形。
另外，对于构件C，在凹部的横截面为圆形的情况下，其直径可设为与构件A的凹部的直径大致相同，可设为例如2mm以上且226mm以下，可设为例如5mm以上且72mm以下，可设为例如10mm以上且23mm以下。
(材料)
另外，构件C的材料没有特别的限定，从处理容易度的方面考虑，优选为与构成构件A的第2材料相同的材料。关于构件C的材料，可列举与作为上述构件A的第2材料而例示出的材料相同的材料。
[筒状构件]
(形状)
关于筒状构件的形状，可根据所得的设备的用途而适当选择。作为形状，例如可列举圆柱、圆锥、圆锥台(circular truncated cone)、角锥、角锥台、球、多面体(例如，四面体、五面体、六面体(包含立方体)、八面体、十二面体、二十面体、二十四面体、开普勒-波因索特(Kepler-Poinsot)立体等)等，但不限定于此。
筒状构件的横截面可小于构件A的凹部的横截面。具体而言，筒状构件的横截面的面积相对于构件A的凹部的横截面的面积而言优选为0.5倍以上，更优选为0.6倍以上，进一步优选为0.7倍以上，特别优选为0.75倍。
筒状构件的外径可小于构件A的凹部的直径。具体而言，筒状构件的外径相对于构件A的凹部的直径而言优选为0.7倍以上，更优选为0.8倍以上，进一步优选为0.85倍以上，特别优选为0.87倍。
关于筒状构件的高度，可根据所得的设备的用途而适当选择。
例如，在制造细胞封入用设备的情况下，筒状构件的高度为5μm以上，优选为50μm以上且15mm以下，更优选为100μm以上且10mm以下，进一步优选为500μm以上且2mm以下。
(材料)
关于筒状构件的材料，可为具有液密性的材料。另外，关于筒状构件的材料，可以是具有透气性的材料，也可以是不具有透气性的材料。
在筒状构件的材料是具有透气性的材料的情况下，氧透过系数可为例如100cm3/m2·24hr·atm以上且5000cm3/m2·24hr·atm以下，可为例如1000cm3/m2·24hr·atm以上且3000cm3/m2·24hr·atm以下，可为例如1200cm3/m2·24hr·atm以上且2500cm3/m2·24hr·atm以下。进一步，二氧化碳透过系数可为例如1000cm3/m2·24hr·atm以上且20000cm3/m2·24hr·atm以下，可为例如3000cm3/m2·24hr·atm以上且15000cm3/m2·24hr·atm以下，可为例如5000cm3/m2·24hr·atm以上且10000cm3/m2·24hr·atm以下。
另外，在筒状构件的材料是不具有透气性的材料的情况下，氧透过系数可为例如100cm3/m2·24hr·atm以下，可为例如50cm3/m2·24hr·atm以下。进一步，二氧化碳透过系数可为例如1000cm3/m2·24hr·atm以下，可为例如500cm3/m2·24hr·atm以下。
另外，关于筒状构件的材料，例如，在制造用于处理细胞的设备的情况下，可为适于培养细胞的材料。作为适于培养细胞的材料，具体而言，例如可列举玻璃材料、弹性体材料、包含树状聚合物或共聚物的塑料等，不限定于此。关于玻璃材料，例如可列举碱石灰玻璃、Pyrex(注册商标)玻璃、Vycor(注册商标)玻璃、石英玻璃等。关于弹性体材料，例如可列举聚氨酯橡胶、丁腈橡胶(nitrile rubber)、硅橡胶、硅树脂(silicon resin)(例如，聚二甲基硅氧烷)、氟橡胶、丙烯酸类橡胶、异戊二烯橡胶、乙烯丙烯橡胶、氯磺化聚乙烯橡胶、表氯醇橡胶、氯丁橡胶、苯乙烯·丁二烯橡胶、丁二烯橡胶、聚异丁烯橡胶等。关于树状聚合物，例如可列举聚(氯乙烯)、聚(乙烯醇)、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚(乙酸乙烯酯-co-马来酸酐)、聚(二甲基硅氧烷)单甲基丙烯酸酯、环状烯烃聚合物、氟碳聚合物、聚苯乙烯、聚丙烯、聚乙烯亚胺(polyethylenimine)等。作为共聚物，例如可列举聚(乙酸乙烯酯-co-马来酸酐)、聚(苯乙烯-co-马来酸酐)、聚(乙烯-co-丙烯酸)以及它们的衍生物等。
另外，筒状构件在与Vitrigel膜干燥体粘接的面具有粘接剂层。作为构成上述粘接剂层的粘接剂，可使用没有细胞毒性的粘接剂，可以是合成化合物的粘接剂，也可以是天然化合物的粘接剂。作为合成化合物的粘接剂，例如可列举氨基甲酸酯系粘接剂、氰基丙烯酸酯系粘接剂、聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)、磷酸钙系粘接剂、树脂系水泥等。作为天然化合物的粘接剂，例如可列举纤维蛋白糊、明胶糊等。
另外，粘接剂层也可由双面胶带形成。作为上述双面胶带，可使用没有细胞毒性的双面胶带，优选使用在医疗用途中使用的双面胶带等。具体而言，例如可列举：具有在支承体的两面层叠有粘着剂层的结构、并且上述粘着剂层由橡胶系、丙烯酸系、氨基甲酸酯系、硅系、乙烯基醚系的公知粘着剂形成。更具体而言，例如可列举3MJapan公司制造的皮肤粘贴用双面胶带(制品编号：1510、1504XL、1524等)、日东电工公司制造的皮肤用双面粘着胶带(制品编号：ST502、ST534等)、Nichiban Medical Corp.制造的医疗用双面胶带(制品编号：#1088、#1022、#1010、#809SP、#414125、#1010R、#1088R、#8810R、#2110R等)、DIC公司制造的薄型发泡体基材两面粘接胶带(制品编号：#84010、#84015、#84020等)等。
＜工序9＞
接着，通过将构件A与构件C进行分离，从构件A拔出粘接有Vitrigel膜干燥体的筒状构件，从而获得粘接有Vitrigel膜干燥体的设备。
·第2实施方式
关于本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造方法，也可在工序9之后进一步依次具备以下工序10～工序12。
在工序10中，将工序9中获得的粘接有Vitrigel膜干燥体的筒状构件，按照粘接有Vitrigel膜干燥体的面与底面相接触的方式，可拔出***地嵌入第2构件C。接着，在筒状构件的没有粘接Vitrigel膜干燥体的面的周边部形成粘接剂层。
在工序11中，首先，利用上述实施方式涉及的Vitrigel膜干燥体的制造方法获得第2Vitrigel膜干燥体。接着，在所得的第2Vitrigel膜干燥体形成于第2构件A以及第2构件B内的状态下，将第2构件B从第2构件A分离。接着，将工序10中获得的第2构件C，按照使第2构件A的凹部与第2构件C的凹部重叠的方式同心状地配置。接着，按照第2构件C的没有粘接Vitrigel干燥体的面的粘接剂层与形成于第2构件A内的第2Vitrigel干燥体相接触的方式，在第2构件C之上载置上述第2构件A。
在工序12中，将第2构件C与第2构件A进行分离，从第2构件A拔出在两面粘接有Vitrigel膜干燥体的筒状构件。
到工序8为止，与上述第1实施方式相同。针对后续的工序10～12，如下所示详细地说明。
＜工序10＞
将工序9中获得的在筒状构件粘接有Vitrigel膜干燥体的设备，按照粘接有该Vitrigel膜干燥体的面与底面相接触的方式，可拔出***地嵌入于第2构件C。需要说明的是，第2构件C是与上述构件C相同的构件。
接着，在筒状构件的没有粘接Vitrigel膜干燥体的面的周边部形成粘接剂层。
关于粘接剂层的形成方法，例如可列举涂布粘接剂的方法、或粘贴双面胶带的方法等，但不限定于此。关于上述粘接剂以及上述双面胶带，列举与上述的工序8中例示出的物质同样的物质。
＜工序11＞
接着，使用上述实施方式涉及的Vitrigel膜干燥体的制造方法，在第2构件A上制造第2Vitrigel膜干燥体。接着，在所得的第2Vitrigel膜干燥体形成于第2构件A以及第2构件B内的状态下，将第2构件B从第2构件A分离。需要说明的是，第2构件A以及第2构件B与上述构件A以及上述构件B相同。
接着，在第2构件C之上载置第2构件A。此时，在第2构件C中，筒状构件以可拔出***的方式嵌入。关于此筒状构件，在没有粘接Vitrigel膜干燥体的面的周边部具有粘接剂层。另外，在筒状构件的与具有粘接剂层的面相反一侧的面，具有Vitrigel膜干燥体。另外，按照使第2构件A的凹部与第2构件C的凹部重叠的方式同心状地配置。由于第2构件C的凹部与第2构件A的凹部重叠，因而能够在不偏离的状态下，经由粘接剂层将Vitrigel膜干燥体粘接于筒状构件。关于粘接Vitrigel膜干燥体以及筒状构件的时间以及环境，可根据粘接剂层的组成而适宜选择。
＜工序12＞
接着，通过将第2构件C与第2构件A分离、从第2构件A拔出在两面粘接有Vitrigel膜干燥体的筒状构件，从而得到在两面粘接有Vitrigel膜干燥体的设备。
《Vitrigel膜干燥体的制造装置》
本实施方式的Vitrigel膜干燥体的制造装置具备构件A与构件B。
构件A具有1个以上的凹部。在该凹部的底面，中心部由对水凝胶的吸附性低的第1材料构成，周边部由对水凝胶的吸附性高的第2材料构成。
构件B具有1个以上的贯穿孔。此贯穿孔的横截面是与构件A的凹部的横截面大致相同的尺寸。
另外，在同心状地配置了构件A与构件B的情况下，按照使凹部与贯穿孔重叠的方式配置。
根据本实施方式的Vitrigel膜干燥体的制造装置，可简便地制造具有没有褶皱的平滑表面的Vitrigel膜干燥体。
图1A是表示本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造装置的一个例子的平面视图。另外，图1B是表示本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造装置的一个例子的主视图。另外，图1C是表示本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造装置的一个例子的立体图。
在图1A～图1C中，Vitrigel膜干燥体的制造装置(10)具备构件A(1)以及构件B(2)。
构件A(1)具有1个以上的凹部(1c)。另外，在凹部(1c)的底面，中心部由对水凝胶的吸附性低的第1材料(1a)构成。另外，在凹部(1c)的底面，周边部由对水凝胶的吸附性高的第2材料(1b)构成。
需要说明的是，关于构件A中的凹部的形状、以及第1材料以及第2材料等的详细情况，如在上述Vitrigel膜干燥体的制造方法中说明了的那样。
另外，第1材料(1a)在凹部(1c)的底面也可以是可装拆的。此时，第1材料(1a)优选以通过物理性剥离而可简单地装拆的程度的弱力、与构成构件A(1)凹部(1c)底面的材料粘接。具体而言，例如，如后述制造例所示，第1材料(1a)可介由PBS等盐以通过基于镊子等的物理性剥离即可简单地装拆的程度的弱力、与构成构件A(1)凹部(1c)的底面的材料粘接。或者，第1材料(1a)可介由含有硅等剥离剂的剥离剂层、以通过基于镊子等的物理性剥离即可简单地装拆的程度的弱力、与构成构件A(1)凹部(1c)的底面的材料粘接。
此时，关于存在于第1材料(1a)之下的构成构件A(1)凹部(1c)的底面的材料，可列举与上述第2材料同样的材料。
另外，构件A(1)也可具有定位销(4)，该定位销(4)用于以使构件A(1)的凹部(1c)与构件B(2)的贯穿孔(2a)重叠的方式将构件A(1)与构件B(2)同心状地配置。由于具有定位销(4)，可简便地按照凹部(1c)与贯穿孔(2a)重叠的方式将构件A(1)与构件B(2)同心状地配置。
另外，构件B(2)具有1个以上的贯穿孔(2a)。贯穿孔(2a)的横截面是与凹部(1c)的横截面大致相同的尺寸。具体而言，贯穿孔(2a)的横截面的面积相对于构件A(1)的凹部(1c)的横截面的面积而言优选为1倍以上且1.5倍以下，更优选为1倍以上且1.3倍以下，进一步优选为1倍以上且1.25倍以下，特别优选为1.21倍。
需要说明的是，关于构件B中的贯穿孔的形状以及构件B的材料等的详细情况，如在上述“Vitrigel膜干燥体的制造方法”中说明了的那样。
另外，构件B(2)也可具有定位销的接受侧孔穴(2b)，用于以使构件A(1)的凹部(1c)与构件B(2)的贯穿孔(2a)重叠的方式将构件A(1)与构件B(2)同心状地配置。由于具有定位销的接受侧孔穴(2b)，可简便地按照凹部(1c)与贯穿孔(2a)重叠的方式使构件A(1)与构件B(2)同心状地配置。
本实施方式的Vitrigel膜干燥体的制造装置不限于图1A～图1C中所示，也可在不损害本实施方式的Vitrigel膜干燥体的制造装置的效果的范围内，将图1A～图1C中所示的制造装置的一部分结构进行变更或删除和/或、在目前为止说明了的制造装置中进一步追加其它的结构。
例如，在图1A～图1C中，例示了构件A的凹部的横截面以及构件B的贯穿孔的横截面为圆形的制造装置，但是不限定于此，也可以是其它的形状。关于横截面的形状，可列举与在上述Vitrigel膜干燥体的制造方法中例示的形状相同的形状。
另外，例如，在图1A～图1C中，例示了构件A的凹部的数量以及构件B的贯穿孔的数量为6的制造装置，但是不限定于此，也可以是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、12、15、20等其它数量。
另外，例如，在图1A～图1C中，例示了构件A以及构件B的形状为圆柱状的制造装置，但是不限定于此，也可以是圆锥台、角锥台、多面体(例如，四面体、五面体、六面体(包含立方体)、八面体、十二面体、二十面体、二十四面体等其它形状。
＜其它的构成＞
另外，本实施方式的Vitrigel膜干燥体的制造装置也可进一步具备具有1个以上的筒状刮刀的构件D。筒状的刮刀的数量可为与构件A的凹部的数量相应的数量。
在构件D方面，同心状地配置构件A与构件D时，按照使构件A的凹部与筒状的刮刀重叠的方式配置筒状的刮刀。通过使用此构件D，可容易地切离在构件A的凹部内制造出的Vitrigel膜干燥体。
《粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造装置》
·第1实施方式
关于本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造装置，具备上述实施方式涉及的Vitrigel膜干燥体的制造装置以及构件C。构件C具有1个以上的凹部。此凹部的横截面是与构件A的凹部的横截面大致相同的尺寸。另外，构件C的凹部供筒状构件可拔出***地嵌入，该筒状构件为粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的主体。另外，在本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造装置方面，在同心状地配置了构件A与构件C的情况下，按照构件A的凹部与构件C的凹部重叠的方式配置。
根据本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造装置，能够从上述Vitrigel膜干燥体的制造装置连续地制造粘接有Vitrigel膜干燥体的设备。
图1A是表示本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造装置的一个例子的平面视图。另外，图1B是表示本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造装置的一个例子的主视图。另外，图1C是表示本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造装置的一个例子的立体图。
在图1A～图1C中，粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造装置(100)具备Vitrigel膜干燥体的制造装置(10)以及构件C(3)。Vitrigel膜干燥体的制造装置(10)如在上述“Vitrigel膜干燥体的制造装置”中所说明的那样。
构件C(3)具有1个以上的凹部(3a)。凹部(3a)的横截面是与构件A(1)的凹部(1c)的横截面大致相同的尺寸。具体而言，凹部(3a)的横截面的面积相对于凹部(1c)的横截面的面积而言优选为1.0倍以下，更优选为0.9倍以下，进一步优选为0.8倍以下，特别优选为0.75倍。
需要说明的是，关于构件C中的凹部的形状以及构件C的材料等的详细情况，如在上述粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造方法中所说明的那样。
另外，构件C(3)也可具有用于以使构件A(1)的凹部(1c)与构件C(3)的凹部(3a)重叠的方式将构件A(1)与构件C(3)同心状地配置的定位销的接受侧孔穴(3b)。由于具有定位销的接受侧孔穴(3b)，可简便地以凹部(1c)与凹部(3a)重叠的方式将构件A(1)与构件C(3)同心状地配置。
另外，关于构件C(3)的凹部(3a)，能够可拔出***地嵌入筒状构件(5)，该筒状构件(5)为粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的主体。由此，可简便地取出所制造的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备。
需要说明的是，关于筒状构件的形状以及材料等的详细情况，如在上述的“粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造方法”中所说明的那样。
·第2实施方式
关于本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造装置，也可具备2个以上的上述实施方式涉及的Vitrigel膜干燥体的制造装置。
关于本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造装置，除了具备2个以上的上述Vitrigel膜干燥体的制造装置以外，构成与上述第1实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造装置相同。
通过具备2个以上的Vitrigel膜干燥体的制造装置，能够简便地制造两面粘接有Vitrigel干燥体的设备。
关于Vitrigel膜干燥体的制造装置的数量，例如可列举2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20等，不限定于此。其中，关于Vitrigel膜干燥体的制造装置的数量，从能够同时制造2个面的Vitrigel膜干燥体的方面考虑，优选为偶数。
实施例
以下，通过实施例来说明本发明，但本发明不限定于以下的实施例。
[制造例1]天然胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的制造1
(1)制造装置的准备
为了制造Vitrigel膜干燥体，使用图1A～图1C所示的制造装置(岸本工业公司制造，丙烯酸类树脂制)。具体而言，使用厚度10mm的构件A(凹部：深度1.0mm、直径15.0mm的圆形底面)、厚度5mm的构件B(贯穿孔：直径16.5mm的圆形)以及厚度5mm的构件C(凹部：深度0.75mm、直径13.03mm的圆形底面)。另外，作为对胶原蛋白Vitrigel的吸附性低的材料，使用聚氯乙烯薄膜(Unipack公司制造，AS ONE 6-633-25，厚度0.08mm)。首先，使用冲压机，将聚氯乙烯薄膜冲压为的圆形。接着，将所得的圆形的聚氯乙烯薄膜放入于加入了70％乙醇溶液的的培养皿(petri dish)，浸渍10分钟进行了灭菌。10分钟后，去除70％乙醇溶液，添加PBS进行了清洗。反复进行了3次清洗。
接着，将70％乙醇溶液喷吹于丙烯酸类树脂制的构件A与构件B进行灭菌，在洁净工作台内进行干燥。接着，在聚氯乙烯薄膜的单侧的面粘贴双面胶带(Scotch公司制造，厚度0.065mm)，将粘贴了双面胶带的面与构件A的凹部的底面进行了粘接。构件A的全部6个孔(well)同样地粘接聚氯乙烯薄膜。
接着，使用定位销使构件A与构件B叠合。接着，一边按压构件A与构件B，一边在周围缠绕Parafilm(注册商标)，在构件B上载置2个重物(岸本工业公司制造，50t×25×25，约260g)。
(2)胶原蛋白溶胶的制备
在冰上将含牛血清的培养液2mL分注于50mL锥形管(conical tube)。接着，添加源自牛的天然胶原蛋白溶液(高研公司制造，I-AC，胶原蛋白浓度0.5质量％)2mL，进行3次移液(pipetting)，制备出均匀的胶原蛋白溶胶。所使用的含牛血清的培养液的组成如下所示。
含牛血清的培养液：达尔伯克改良伊格尔培养基(Dulbecco’s Modified Eagle’sMedium；DMEM)(GIBCO公司制造，Cat.No.11885-084)
+灭活化胎牛血清(Fetal Bovine Serum；FBS)(SIGMA公司制造，F2442)
+20mM HEPES(GIBCO公司制造，Cat.No.15630-080)
+100units/mL青霉素+100μg/mL链霉素(GIBCO公司制造，Cat.No.15140-148)
(3)胶原蛋白溶胶的注入
接着，将胶原蛋白溶胶800μL从构件B的贯穿孔注入粘接在构件A的底面的聚氯乙烯薄膜上，使胶原蛋白溶胶遍布于孔全体，然后抽出440μL，使孔内残留360μL的胶原蛋白溶胶。接着，一边移动重物，一边对全部6孔反复进行了6次相同操作。
(4)胶原蛋白的凝胶化
接着，将(3)中注入了胶原蛋白溶胶的构件在设定为37℃的5％二氧化碳浓度的培养箱内保管2小时，使其凝胶化。在凝胶化后，卸下了重物。
(5)胶原蛋白凝胶的玻璃化(胶原蛋白凝胶干燥体的制造)
接着，在凝胶化后，在设定为10℃、40％湿度的恒温恒湿库内吹风进行干燥，使其玻璃化，从而获得胶原蛋白凝胶干燥体。
(6)胶原蛋白凝胶干燥体的再水合(Vitrigel的制造)
接着，在玻璃化后，从恒温恒湿库取出，再次将重物载置在构件B之上。接着，从构件B的贯穿孔添加1mL的PBS，静置10分钟，使其再水合(PBS添加第1次)。10分钟后去除PBS，从构件B的贯穿孔再次添加1mL的PBS，静置了10分钟(PBS添加第2次)。再一次进行相同操作(PBS添加第3次)，去除PBS，完成再水合。
(7)Vitrigel的再玻璃化(Vitrigel干燥体的制造)
在再水合后，在设定为10℃、40％湿度的恒温恒湿库内吹风使其干燥，进行再玻璃化，从而获得Vitrigel干燥体。
(8)Vitrigel干燥体的冲压
接着，在再玻璃化后，从恒温恒湿库取出，使用冲压刃(森下制版公司制造，)，切断了Vitrigel干燥体中的覆盖在构件A的顶面上的部分。接着，确认利用冲压刃被切断，从构件A卸下构件B，从而在构件A上制造Vitrigel膜干燥体。
[制造例2]具备天然胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的细胞封入用设备的制造1
(1)Vitrigel膜干燥体的制造1
使用与制造例1的(1)～(8)同样的方法，在构件A上制造Vitrigel膜干燥体。
(2)筒状构件的准备
将40mL杀菌水加入于50mL锥形管。接着，作为成为细胞封入用设备的主体的筒状构件，放入聚苯乙烯制环状体(岸本工业公司制造，内径外径厚度2.0mm)，在振荡机(NISSIN公司制造，RECIPRO SHAKER)上振荡10分钟进行清洗。清洗后，去除杀菌水，加入新的杀菌水40mL，反复进行了3次同样的操作。接着，将70％乙醇溶液40mL加入50mL锥形管，向其中投入用杀菌水进行了清洗的环状体，在振荡机(NISSIN公司制造，RECIPRO SHAKER)之上，振荡3分钟进行灭菌。
(3)粘接剂向筒状构件的涂布以及向构件C的装载1
首先，将70％乙醇溶液喷吹于丙烯酸类树脂制的构件C进行灭菌，在洁净工作台内进行干燥。接着，使用200μL的long-tip采取适量的粘接剂，在环状体的周边部涂布扩展了聚氨酯系粘接剂(Cemedine Co.,Ltd.制造，UM700)。接着，按照环状体的没有涂布粘接剂的面与构件C的底面相接触的方式，将环状体以可拔出***的状态装载在构件C。
(4)筒状构件与Vitrigel膜干燥体的粘接1
接着，在载置了环状体的构件C之上，按照环状体的涂布有粘接剂的面与Vitrigel膜干燥体相接触的方式，使用定位销而叠合由(1)获得的制造了Vitrigel膜干燥体的状态的构件A。接着，将重物载置在构件A之上，于洁净工作台内静置1天，将粘接剂进行干燥。
(5)构件C的取下1
从干燥开始起1天后，确认其变干，将其反转以使构件C位于上方，并取下构件C。接着，使用镊子，从侧面进行推移，将粘接有Vitrigel膜干燥体的环状体从构件A的孔的底面慢慢取下。接着，将在单面粘接有Vitrigel膜干燥体的环状体放入的培养皿。接着，将Parafilm(注册商标)卷绕在培养皿用铝箔(aluminium foil)遮蔽，于室温保存。
(6)Vitrigel膜干燥体的制造2
使用与制造例1的(1)～(8)同样的方法，进一步在1套构件A上制造Vitrigel膜干燥体。
(7)粘接剂向筒状构件的涂布以及向构件C的载置2
将在(5)中保存的在单面粘接有Vitrigel膜干燥体的环状体从培养皿取出，在与粘接有Vitrigel膜干燥体的面相反的一侧的面的周边部，涂布扩展粘接剂。接着，按照环状体的粘接有Vitrigel膜干燥体的面与构件C的底面相接触的方式，将在单面粘接有Vitrigel膜干燥体的环状体以可拔出***的状态载置在构件C。
(8)筒状构件与Vitrigel膜干燥体的粘接2
接着，在载置有环状体的构件C上，以使环状体的涂布有粘接剂的面与Vitrigel膜干燥体相接触的方式，使用定位销叠合由(6)获得的制造了Vitrigel膜干燥体的状态的构件A。接着，将重物载置于构件A上，于洁净工作台内静置1天，将粘接剂进行干燥。
(9)构件C的取下2
从干燥开始起1天后，确认其变干，将其反转以使构件C位于上方，取下构件C。接着，使用镊子，从侧面进行推移，将粘接有Vitrigel膜干燥体的环状体从构件A的孔的底面慢慢取下，得到在两面粘接有Vitrigel膜干燥体的环状体(即，细胞封入用设备)。接着，将所得的在两面粘接有Vitrigel膜干燥体的环状体(细胞封入用设备)放入的培养皿，将Parafilm(注册商标)卷绕在培养皿用铝箔遮蔽，于室温保存。
[制造例3]天然胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的制造2
(1)制造装置的准备
作为对胶原蛋白Vitrigel的吸附性低的材料，使用经硅处理的聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)薄膜(藤森工业公司制造，厚度75μm)。首先，使用冲压机，将经硅处理的PET薄膜冲压为的圆形。接着，在所得的圆形的经硅处理的PET薄膜上粘贴修补胶带(mending tape)(Scotch公司制造，厚度0.058mm)，确认出硅处理面。接着，将所得的圆形的经硅处理的PET薄膜放入加入了70％乙醇溶液的的培养皿，浸渍10分钟，进行灭菌。10分钟后，去除70％乙醇溶液，一边对面进行注意一边添加PBS进行清洗。反复进行了3次清洗。
接着，向具有深5.0mm、直径15.0mm的由圆形底面形成的孔的24孔板(岸本工业公司制造，丙烯酸类树脂制)喷吹70％乙醇溶液，进行灭菌。接着，在洁净工作台内使其干燥。接着，向24孔板的底面分别各放置一片清洗过的经硅处理的PET薄膜，使硅处理面成为上表面。接着，各添加1mL的PBS，去除，在洁净工作台内干燥约3小时，从而将经硅处理的PET薄膜介由PBS盐而微弱地粘接于24孔板的底面。
(2)胶原蛋白溶胶的制备
使用与制造例1的(2)同样的方法，制备均匀的胶原蛋白溶胶。
(3)胶原蛋白溶胶的注入
接着，向24孔板内的经硅处理的PET薄膜上分别注入胶原蛋白溶胶各600μL，使胶原蛋白溶胶遍布于孔全体，然后抽出240μL，从而在孔内残留360μL胶原蛋白溶胶。接着，对全部24孔反复进行24次相同操作。
(4)胶原蛋白的凝胶化
接着，将(3)中的注入了胶原蛋白溶胶的24孔板在设定为37℃的5％二氧化碳浓度的培养箱内保管2小时，使其凝胶化。
(5)胶原蛋白凝胶的玻璃化(胶原蛋白凝胶干燥体的制造)
接着，在凝胶化后，在设定为10℃、40％湿度的恒温恒湿库内吹风使其干燥，进行玻璃化，从而获得胶原蛋白凝胶干燥体。
(6)胶原蛋白凝胶干燥体的再水合(Vitrigel的制造)
接着，在玻璃化后，从恒温恒湿库取出，将600μL的PBS添加于孔中，静置10分钟，使其再水合(PBS添加第1次)。10分钟后，将PBS去除，再一次将600μL的PBS添加于孔中，静置了10分钟(PBS添加第2次)。再一次进行相同操作(PBS添加第3次)，将PBS去除，完成了再水合。
(7)Vitrigel的再玻璃化(Vitrigel干燥体的制造)
再水合后，在设定为10℃、40％湿度的恒温恒湿库内吹风使其干燥，进行再玻璃化，从而得到粘贴于经硅处理的PET薄膜上的Vitrigel干燥体。
(8)吸附于薄膜的Vitrigel干燥体从24孔板的装拆
将镊子置入24孔板的孔内壁面与PET薄膜之间的间隙，将PET薄膜从侧面微弱地推移，从孔底面装拆。
其结果，获得了微弱地粘贴有经硅处理的PET薄膜的、具有没有褶皱的平滑表面的天然胶原蛋白Vitrigel膜干燥体。
关于微弱地粘贴有经硅处理的PET薄膜，如下所示进行确认。
首先，在没有粘贴天然胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的一侧的PET薄膜的表面粘贴了修补胶带。其后，在相反侧、即、没有粘贴PET薄膜的一侧的天然胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的表面，也粘贴了修补胶带。接着，将两侧的修补胶带微弱地进行拉伸以使其相互远离，以至于能够简单地装拆PET薄膜与天然胶原蛋白Vitrigel膜干燥体，由此可确认。
[实施例1]
在由制造例2获得的在两面粘接有Vitrigel膜干燥体的环状体(细胞封入用设备)的内部装满了PBS。将结果示于图2A。
根据图2A，注入了PBS的状态的细胞封入用设备中的Vitrigel膜均匀且没有褶皱，是平滑表面。
[比较例1]
利用以往的制造方法、即使用2块环状磁铁的方法(参考文献：日本专利第4817847号公报)，制造Vitrigel膜干燥体。接着，在环状体上使用聚氨酯系粘接剂，粘接所得的Vitrigel膜干燥体，从而制造了在两面粘接有Vitrigel膜干燥体的环状体(细胞封入用设备)。接着，在细胞封入用设备的内部装满了PBS。将结果示于图2B。
根据图2B，注入了PBS的状态的细胞封入用设备中的Vitrigel膜在周边部产生了微少的褶皱。
根据实施例1以及比较例1的结果表明，通过使用本实施方式的Vitrigel膜干燥体的制造方法以及制造装置，能够简便地制造具有没有褶皱的平滑表面的Vitrigel膜干燥体。
[制造例4]去端肽胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的制造1
(1)制造装置的准备
使用与制造例1的(1)同样的方法，准备了制造装置。
(2)胶原蛋白溶胶的制备
接着，在冰上将无血清培养液4mL分注于50mL锥形管。接着，添加源自猪的去端肽胶原蛋白溶液(关东化学株式会社制造，胶原蛋白浓度1.0质量％)4mL，进行3次移液，制备出均匀的胶原蛋白溶胶。需要说明的是，所使用的无血清培养液是以下所示的组成。
无血清培养液：达尔伯克改良伊格尔培养基(Dulbecco’s Modified Eagle’sMedium；DMEM)(GIBCO公司制造，Cat.No.11885-084)
+20mM HEPES(GIBCO公司制造，Cat.No.15630-080)
+100units/mL青霉素+100μg/mL链霉素(GIBCO公司制造，Cat.No.15140-148)
(3)胶原蛋白溶胶的注入
接着，将胶原蛋白溶胶900μL从构件B的贯穿孔注入到粘接于构件A底面的聚氯乙烯薄膜上，使胶原蛋白溶胶遍布在孔全体。接着，一边使重物移动，一边对全部6孔反复进行了6次相同操作。
(4)胶原蛋白的凝胶化
使用与制造例1的(4)同样的方法，将胶原蛋白进行凝胶化。
(5)胶原蛋白凝胶的玻璃化(胶原蛋白凝胶干燥体的制造)
使用与制造例1的(5)同样的方法，将胶原蛋白凝胶进行玻璃化。
(6)胶原蛋白凝胶干燥体的再水合(Vitrigel的制造)
使用与制造例1的(6)同样的方法，将胶原蛋白凝胶干燥体进行再水合。
(7)Vitrigel的再玻璃化(Vitrigel干燥体的制造)
使用与制造例1的(7)同样的方法，将Vitrigel进行再玻璃化。
(8)Vitrigel干燥体的冲压
使用与制造例1的(8)同样的方法，在构件A上制造Vitrigel膜干燥体。
[制造例5]具有去端肽胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的腔室的制造
(1)Vitrigel膜干燥体的制造
使用与制造例4的(1)～(8)同样的方法，在构件A上制造Vitrigel膜干燥体。
(2)筒状构件的准备
作为成为腔室主体的筒状构件，使用丙烯酸制管(内径外径长度15mm)。丙烯酸制管的周边部中，按照单面的外径为约14mm的方式用锉刀进行锥度(taper)加工。接着，在没有进行锥度加工的一侧的管的周边部，粘接了2根丙烯酸制吊杆(hanger)。粘接后，放入预先注入了40mL杀菌水的50mL锥形管内。接着，在振荡机(NISSIN公司制造，RECIPRO SHAKER)上，使其振荡10分钟进行清洗。清洗后，将杀菌水去除，加入新的杀菌水40mL，反复进行了3次同样的操作。接着，将70％乙醇溶液40mL加入于50mL锥形管，向其中投入用杀菌水进行了清洗的管，在振荡机(NISSIN公司制造，RECIPRO SHAKER)上，振荡3分钟进行了灭菌。
(3)双面胶带向筒状构件的粘接
将薄型发泡体基材两面粘接胶带(DIC公司制造，#84010WHITE、厚度100μm)切除为环状形状(内径外径)。接着，在进行了锥度加工的一侧的管的周边部，粘接经切除后的双面胶带的单侧，在管的周边部形成了粘接剂层。
(4)筒状构件与Vitrigel膜干燥体的粘接
接着，在由(1)获得的构件A上的Vitrigel膜干燥体上，按照管的周边部的粘接有双面胶带的面与Vitrigel膜干燥体相接触的方式，将在单侧的周边部粘接有双面胶带的管叠合进行粘接。接着，通过将管从构件A的底面慢慢取下，从而制造具备有Vitrigel膜干燥体的腔室。
[实施例2]
向在制造例5中获得的在单面粘接有Vitrigel膜干燥体的管(腔室)的内部注入了PBS。将结果示于图3。
根据图3可确认，PBS没有从注入了PBS的状态的腔室中的Vitrigel膜漏出。
[制造例6]去端肽胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的制造2
(1)制造装置的准备
作为对胶原蛋白Vitrigel的吸附性低的材料，使用经硅处理的聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)薄膜(藤森工业公司制造，厚度75μm)。首先，使用冲压机，将经硅处理的PET薄膜冲压为的圆形。接着，在所得的圆形的经硅处理的PET薄膜上粘贴修补胶带(Scotch公司制造，厚度0.058mm)从而确认出硅处理面。接着，将所得的圆形的经硅处理的PET薄膜放入于加入了70％乙醇溶液的的培养皿，浸渍10分钟进行灭菌。10分钟后，去除70％乙醇溶液，一边对面进行注意一边添加PBS进行清洗。反复进行3次清洗。
为了制造Vitrigel膜干燥体，使用图1A～图1C中所示的制造装置(岸本工业公司制造，丙烯酸树脂制)。具体而言，使用厚度10mm的构件A(凹部：深度1.0mm、直径15.0mm的圆形底面)以及厚度5mm的构件B(贯穿孔：直径16.5mm的圆形)。接着，将70％乙醇溶液喷吹于丙烯酸树脂制的构件A与构件B进行灭菌，在洁净工作台内使其干燥。
接着，将清洗过的经硅处理的PET薄膜以硅处理面为上表面的方式在构件A的全部6个孔的底面上每孔置于一片。接着，分别加入各0.5mL的PBS，去除，在洁净工作台内干燥约3小时，从而将经硅处理的PET薄膜介由PBS盐微弱地粘接在构件A的孔的底面上。接着，使用定位销将构件A与构件B叠合。接着，一边按压构件A与构件B，一边在周围缠绕Parafilm(注册商标)，将2个重物(岸本工业公司制造，50t×25×25、约260g)置于构件B上。
(2)胶原蛋白溶胶的制备
使用与制造例4的(2)同样的方法，制备出均匀的胶原蛋白溶胶。
(3)胶原蛋白溶胶的注入
接着，将胶原蛋白溶胶900μL从构件B的贯穿孔注入到粘接在构件A底面的硅处理PET薄膜上，使胶原蛋白溶胶遍布于全部孔。接着，一边使重物移动，一边对全部的6孔反复进行了6次相同操作。
(4)胶原蛋白的凝胶化
使用与制造例1的(4)同样的方法，将胶原蛋白进行凝胶化。
(5)胶原蛋白凝胶的玻璃化(胶原蛋白凝胶干燥体的制造)
使用与制造例1的(5)同样的方法，将胶原蛋白凝胶进行玻璃化。
(6)胶原蛋白凝胶干燥体的再水合(Vitrigel的制造)
使用与制造例1的(6)同样的方法，将胶原蛋白凝胶干燥体进行再水合。
(7)Vitrigel的再玻璃化(Vitrigel干燥体的制造)
使用与制造例1的(7)同样的方法，将Vitrigel进行再玻璃化。
(8)吸附于薄膜的Vitrigel干燥体从构件A的装拆
使用与制造例1的(8)同样的方法，在构件A上制造Vitrigel膜干燥体。接着，将镊子置于构件A的孔内壁面与PET薄膜之间的间隙，从侧面微弱地推移PET薄膜，从孔底面装拆。
其结果，获得了微弱地粘贴了经硅处理的PET薄膜的、具有没有褶皱的平滑表面的去端肽胶原蛋白Vitrigel膜干燥体。
需要说明的是，如下所示地确认了微弱地粘贴着经硅处理的PET薄膜。
首先，在没有粘贴去端肽胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的一侧的PET薄膜的表面，粘贴了修补胶带。接着，在相反侧、即、没有粘贴PET薄膜的一侧的去端肽胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的表面，也粘贴了修补胶带。接着，确认到通过将两侧的修补胶带以相互远离的方式微弱地进行拉伸、从而可简单地装拆PET薄膜与去端肽胶原蛋白Vitrigel膜干燥体(参照图4)。
[制造例7]具有天然胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的细胞封入用设备的制造2
(1)Vitrigel膜干燥体的制造
使用与制造例1的(1)～(8)同样的方法，在构件A上制造Vitrigel膜干燥体。
(2)筒状构件的准备
使用与制造例2的(2)同样的方法，准备聚苯乙烯制环状体(岸本工业公司制造，内径外径厚度2.0mm)。
(3)筒状构件向构件C的装载以及双面胶带向筒状构件的粘接1
首先，针对较薄发泡体基材防水双面胶带(Nitto Denko Corporation制造，No.57210B、厚度：0.1mm)，使用冲孔刀(以及)用冲压机冲压为环状。将其准备了2张。接着，向丙烯酸树脂制的构件C喷吹70％乙醇溶液进行灭菌，在洁净工作台内使其干燥。接着，在构件C上设置环状体。接着，将冲压为环状的双面胶带中的一片以不从环状体露出的方式贴合在设置于构件C的环状体上。
(4)筒状构件与Vitrigel膜干燥体的粘接1
接着，将双面胶带的没有与环状体接触的一侧的面的剥离纸剥离，使粘着剂层露出。接着，对于设置了环状体的构件C与(1)中获得的制造了Vitrigel膜干燥体的状态的构件A，按照环状体的粘着剂层所露出的面与Vitrigel膜干燥体相接触的方式，使用定位销使其叠合，从而使环状体与Vitrigel膜干燥体粘接。
(5)构件C的取下1
接着，将其反转以使构件C位于上方，取下构件C。接着，使用镊子从侧面进行推移，将粘接有Vitrigel膜干燥体的环状体从构件A的孔的底面慢慢取下。
(6)Vitrigel膜干燥体的制造2
使用与制造例1的(1)～(8)同样的方法，进一步在1套构件A上制造Vitrigel膜干燥体。
(7)筒状构件向构件C的装载以及双面胶带向筒状构件的粘接2
接着，在构件C上设置由(5)制作的在单面粘接了Vitrigel膜干燥体的环状体。接着，在环状体的与粘接有Vitrigel膜干燥体的面相反一侧的面，以不从环状体露出的方式粘贴(3)中冲压为环状的双面胶带。
(8)筒状构件与Vitrigel膜干燥体的粘接2
接着，将双面胶带的没有与环状体接触的一侧的面的剥离纸剥离，使粘着剂层露出。接着，对于设置了在单面粘接有Vitrigel膜干燥体的环状体的构件C与由(6)获得的制造了Vitrigel膜干燥体的状态的构件A，按照环状体的粘着剂层露出的面与Vitrigel膜干燥体相接触的方式，使用定位销使其叠合，从而使环状体与Vitrigel膜干燥体粘接。
(9)构件C的取下2
接着，进行反转以使构件C位于上方，取下构件C。接着，使用镊子从侧面进行推移，将粘接有Vitrigel膜干燥体的环状体从构件A的孔的底面慢慢取下，获得在两面粘接有Vitrigel膜干燥体的环状体(即，细胞封入用设备)。接着，将所得的在两面粘接有Vitrigel膜干燥体的环状体(细胞封入用设备)加入于的培养皿，将Parafilm(注册商标)卷绕在培养皿用铝箔遮蔽，于室温保存。
[制造例8]具有天然胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的细胞封入用设备的制造3
(1)Vitrigel膜干燥体的制造
使用与制造例1的(1)～(8)同样的方法，在构件A上制造Vitrigel膜干燥体。
(2)筒状构件的准备
利用以及的冲孔刀将硅橡胶片材(厚度：2mm、产品编号：2-9318-01、AS ONE Corporation制造)进行冲压，制作硅环状体。接着，将制作出的硅环状体浸渍于70％乙醇10分钟，进一步用PBS进行3次清洗，从而进行了灭菌。
(3)筒状构件向构件C的装载以及双面胶带向筒状构件的粘接1
首先，使用冲孔刀(以及)用冲压机将硅橡胶粘接用双面胶带(Nitto Denko Corporation制造，No.5302A，厚度：0.085mm)冲压为环状。将其准备了2张。接着，将70％乙醇溶液喷吹于丙烯酸类树脂制的构件C进行灭菌，在洁净工作台内进行干燥。接着，在构件C设置硅环状体。接着，将冲压为环状的双面胶带中的1张以不从环状体露出的方式粘贴在硅环状体上。此时，将双面胶带的硅橡胶粘接用粘着剂层的面(剥离纸：透明侧)粘贴于硅环状体。
(4)筒状构件与Vitrigel膜干燥体的粘接1
接着，将双面胶带的没有与硅环状体接触的一侧的面的剥离纸剥离，使粘着剂层露出。接着，对于设置了硅环状体的构件C与由(1)获得的制造了Vitrigel膜干燥体的状态的构件A，按照环状体的粘着剂层露出的面与Vitrigel膜干燥体相接触的方式使用定位销进行叠合，从而使硅环状体与Vitrigel膜干燥体粘接。
(5)构件C的取下1
接着，进行反转以使构件C位于上方，取下构件C。接着，使用镊子从侧面进行推移，将粘接有Vitrigel膜干燥体的硅环状体从构件A的孔的底面慢慢取下。
(6)Vitrigel膜干燥体的制造2
使用与制造例1的(1)～(8)同样的方法，进一步在1套构件A上制造Vitrigel膜干燥体。
(7)筒状构件向构件C的装载以及双面胶带向筒状构件的粘接2
接着，在构件C中设置由(5)制作的在单面粘接有Vitrigel膜干燥体的硅环状体。接着，在硅环状体的与粘接有Vitrigel膜干燥体的面相反一侧的面，按照不从环状体露出的方式粘贴(3)中冲压为环状的硅橡胶粘接用双面胶带。此时，将双面胶带的硅橡胶粘接用粘着剂层的面(剥离纸：透明侧)粘贴于硅环状体。
(8)筒状构件与Vitrigel膜干燥体的粘接2
接着，将双面胶带的没有与硅环状体连接的一侧的面的剥离纸剥离，使粘着剂层露出。接着，对于设置了硅环状体的构件C与由(6)获得的制造了Vitrigel膜干燥体的状态的构件A，按照硅环状体的粘着剂层露出的面与Vitrigel膜干燥体相接触的方式，使用定位销进行叠合，从而使硅环状体与Vitrigel膜干燥体粘接。
(9)构件C的取下2
接着，进行反转以使构件C位于上方，取下构件C。接着，使用镊子从侧面进行推移，将粘接有Vitrigel膜干燥体的硅环状体从构件A的孔的底面慢慢取下，获得在两面粘接有Vitrigel膜干燥体的硅环状体(即，细胞封入用设备)。接着，将所得的在两面粘接有Vitrigel膜干燥体的硅环状体(细胞封入用设备)加入于的培养皿，将Parafilm(注册商标)卷绕在培养皿，用铝箔遮蔽，于室温保存。
[制造例9]包含去端肽胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的细胞封入用设备的制造
(1)制造装置的准备
为了制造Vitrigel膜干燥体，使用图1A～图1C所示的制造装置(岸本工业公司制造，丙烯酸树脂制)。具体而言，使用厚度10mm的构件A(凹部：深度1.0mm、直径15.0mm的圆形底面)以及厚度5mm的构件B(贯穿孔：直径16.5mm的圆形)。接着，将70％乙醇溶液喷吹于丙烯酸树脂制的构件A与构件B进行灭菌，在洁净工作台内使其干燥。
接着，使用浸有硅油(KF-96、信越化学工业公司制造)的Kimwipe，擦拭构件A的凹部内的壁面。接着，使用定位销将构件A与构件B叠合。接着，一边按压构件A与构件B，一边在周围缠绕了Parafilm(注册商标)。
(2)胶原蛋白溶胶的制备
使用与制造例4的(2)同样的方法，制备均匀的胶原蛋白溶胶。
(3)Vitrigel膜干燥体的制造
使用由(1)准备的制造装置，除此以外，使用与制造例4的(3)～(7)同样的方法，将胶原蛋白溶胶1.8mL从构件B的贯穿孔注入构件A的底面上，在构件A上制造去端肽胶原蛋白Vitrigel膜干燥体。
(4)筒状构件的准备
使用公知的方法(参考文献1：国际公开第2018/003858号)，准备包含去端肽胶原蛋白的筒状构件。具体而言，按以下所示的步骤制作。
(4-1)去端肽胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的制作
首先，将28mL的0.5％去端肽胶原蛋白溶胶注入内径60mm的壁面模具内，依照公知的方法(参考文献2：国际公开第2012/026531号)制作8张去端肽胶原蛋白Vitrigel膜干燥体(胶原蛋白量：5.0mg/cm2)。需要说明的是，关于0.5％去端肽胶原蛋白溶胶，通过在冰上将无血清培养液16mL分注于50mL锥形管，然后添加源自猪的去端肽胶原蛋白溶液(关东化学株式会社制造，胶原蛋白浓度1.0质量％)16mL，进行3次移液，从而制备得到。
(4-2)去端肽胶原蛋白Vitrigel膜双层粘接干燥体的制作
接着，利用PBS将2张该去端肽胶原蛋白Vitrigel膜干燥体进行再水合，制备出2张去端肽胶原蛋白Vitrigel膜。在乙烯基片材上伸展1张去端肽胶原蛋白Vitrigel膜。接着，在其上添加600μL的0.5％去端肽胶原蛋白溶胶，按照不从膜露出的方式进行扩展，然后覆盖另1张去端肽胶原蛋白Vitrigel膜。需要说明的是，对于0.5％去端肽胶原蛋白溶胶，基于公知的方法(参考文献3：日本特开2015-203018号公报)用作粘接剂。接着，在10℃、湿度40％的培养箱内使用清洁风干机，进行干燥(玻璃化)。接着，进行UV照射(单位面积的UV总照射量：400mJ/cm2)。进一步，将UV照射后的双层粘接干燥体翻过来，进行UV照射(单位面积的UV总照射量：400mJ/cm2)，获得去端肽胶原蛋白Vitrigel膜双层粘接干燥体。
(4-3)去端肽胶原蛋白Vitrigel膜四层粘接干燥体的制作
接着，利用PBS将由(4-2)获得的去端肽胶原蛋白Vitrigel膜双层粘接干燥体进行再水合。接着，在乙烯基片材上铺展1个双层粘接体。接着，在其上添加600μL的0.5％去端肽胶原蛋白溶胶，以不从双层粘接体露出的方式进行扩展，然后覆盖另1个双层粘接体，由此制作出四层粘接体。接着，在10℃、湿度40％的培养箱内使用清洁风干机，进行了干燥(玻璃化)。接着，进行UV照射(单位面积的UV总照射量：400mJ/cm2)。进一步，将UV照射后的四层粘接干燥体翻过来，进行UV照射(单位面积的UV总照射量：400mJ/cm2)，从而获得去端肽胶原蛋白Vitrigel膜四层粘接干燥体。
(4-4)筒状构件的成型
接着，针对(4-3)获得的去端肽胶原蛋白Vitrigel膜四层粘接干燥体，利用以及的冲孔刀冲压2个部位，制作出2个环状的去端肽胶原蛋白Vitrigel膜四层粘接干燥体(内径8mm、外径13mm)。
(5)筒状构件与Vitrigel干燥体的粘接
首先，利用PBS将由(3)制作的构件A上的去端肽胶原蛋白Vitrigel膜干燥体进行再水合，制备去端肽胶原蛋白Vitrigel膜。另一方面，由(4)制作的环状的去端肽胶原蛋白Vitrigel膜四层粘接干燥体也同样地利用PBS进行再水合，从而制备出环状的去端肽胶原蛋白Vitrigel膜四层粘接体。接着，在乙烯基片材上铺展环状的去端肽胶原蛋白Vitrigel膜四层粘接体。接着，在四层粘接体上添加20μL的0.5％去端肽胶原蛋白溶胶，以不从环状体露出的方式进行扩展。接着，按照该环状的去端肽胶原蛋白Vitrigel膜四层粘接体的涂布了去端肽胶原蛋白溶胶的面与构件A上的去端肽胶原蛋白Vitrigel膜相接触的方式，使环状的去端肽胶原蛋白Vitrigel膜四层粘接体与去端肽胶原蛋白Vitrigel膜粘接。接着，在10℃、湿度40％的培养箱内使用清洁风干机，进行干燥(玻璃化)，从而获得了在单面具有去端肽胶原蛋白Vitrigel膜的环状的去端肽胶原蛋白Vitrigel膜四层粘接体(以下有时会简称为“带有单面膜的环状四层粘接体”)。制作出2个该带有单面膜的环状四层粘接体。接着，将2个带有单面膜的环状四层粘接干燥体分别从构件A取下。接着，对带有单面膜的环状四层粘接干燥体的与构件A接触的一侧的面，进行了UV照射(单位面积的UV总照射量：400mJ/cm2)。进一步，将UV照射后的带有单面膜的环状四层粘接干燥体翻过来，对粘接着环状的去端肽胶原蛋白Vitrigel膜四层粘接干燥体的一侧的面，也进行了UV照射(单位面积的UV总照射量：400mJ/cm2)。
(6)带有单面膜的环状四层粘接体彼此的粘接
接着，利用PBS将(5)中获得的2个带有单面膜的环状四层粘接干燥体进行再水合，制成带有单面膜的环状四层粘接体。接着，在乙烯基片材上，将2个带有单面膜的环状四层粘接体铺展，分别使粘接着环状的去端肽胶原蛋白Vitrigel膜四层粘接体的一侧的面位于上方。接着，在1个带有单面膜的环状四层粘接体上，添加20μL的0.5％去端肽胶原蛋白溶胶，以不从环状体露出的方式进行了扩展。接着，将涂布了去端肽胶原蛋白溶胶的带有单面膜的环状四层粘接体与、另1个没有涂布去端肽胶原蛋白溶胶的带有单面膜的环状四层粘接体，按照粘接着四层粘接体的一侧的面彼此相接触的方式进行了粘接。接着，在10℃、湿度40％的培养箱内使用清洁风干机进行了干燥(玻璃化)。接着，进行了UV照射(单位面积的UV总照射量：400mJ/cm2)。进一步，将其翻过来，进行UV照射(单位面积的UV总照射量：400mJ/cm2)，从而获得了包含去端肽胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的细胞封入用设备。接着，将所得的包含去端肽胶原蛋白Vitrigel膜干燥体的细胞封入用设备加入的培养皿，将Parafilm(注册商标)卷绕在培养皿，用铝箔遮蔽，于室温保存。
产业上的可利用性
根据本实施方式的Vitrigel膜干燥体的制造方法以及制造装置，可简便地制造具有没有褶皱的平滑表面的Vitrigel膜干燥体。另外，根据本实施方式的粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造方法以及制造装置，可由上述Vitrigel膜干燥体的制造方法以及制造装置连续地制造粘接有Vitrigel膜干燥体的设备。
附图标记说明
1：构件A、1a：第1材料、1b：第2材料、1c：构件A的凹部、
2：构件B、2a：贯穿孔、2b：构件B中的定位销的接受侧孔穴、
3：构件C、3a：构件C的凹部、3b：构件C中的定位销的接受侧孔穴、
4：定位销、
5：筒状构件、
10：Vitrigel膜干燥体的制造装置、
100：粘接有Vitrigel膜干燥体的设备的制造装置。
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