阅读说明：本技术 一类4-氨基喹唑啉接丙烯酰胺类化合物及其制备方法和应用 (4-aminoquinazoline-linked acrylamide compound and preparation method and application thereof ) 是由 杨松 王培义 龙青素 吴志兵 于 2019-10-09 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一类4-氨基喹唑啉接丙烯酰胺类化合物及其制备方法和应用。该化合物具有如通式(I)所示的结构：<Image he="427" wi="387" file="DSA0000191790910000011.GIF" imgContent="drawing" imgFormat="GIF" orientation="portrait" inline="no"></Image>本发明以喹唑啉类化合物为基础,将丙烯酰胺基引入到此体系中,合成一系列含丙烯酰胺基取代的4-氨基喹唑啉类化合物,该化合物对植物致病病原细菌具有良好的抑制作用,针对病原细菌如水稻白叶枯病菌、柑橘溃疡病菌等具有良好的抑制效果。(The invention relates to a 4-aminoquinazoline-linked acrylamide compound and a preparation method and application thereof. The compound has a structure shown as a general formula (I): according to the invention, based on quinazoline compounds, acrylamide groups are introduced into the system to synthesize a series of 4-aminoquinazoline compounds containing substituted acrylamide groups, and the compounds have good inhibition effects on plant pathogenic bacteria and have good inhibition effects on pathogenic bacteria such as rice bacterial blight, citrus canker pathogen and the like.)

一类4-氨基喹唑啉接丙烯酰胺类化合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及药物化学技术领域，尤其是一种含丙烯酰胺基取代的喹唑啉类化合物及其制备方法与应用。

背景技术

近年来，植物细菌性病害(如水稻白叶枯病和柑橘溃疡病等)在我国大规模发生并流行，主要经济农作物病害呈现出发生频率高、危害程度重、发生范围广、防控难度大等特点，这对我国国民经济、特别是农业生产常造成重大损失，现有商品化抗菌药剂(如叶枯唑、噻菌铜、可杀得等)活性不够高效，急需发现高效抗植病细菌的活性化合物，在此基础上创制出自主知识产权的绿色新农药，为农作物细菌性病害防控提供候选药物。

丙烯酰胺是一种反应活性基团，能选择性的与蛋白中半胱氨酸的巯基发生Michael加成或亲核取代反应，从而抑制酶活性，这一特性使得丙烯酰胺基团近年来被成功引用到抗肿瘤药物小分子结构中，且部分药物已经商品化。另一方面，喹唑啉类化合物具有广泛的医用和农用生物活性，如：抗癌、抗菌、抗炎、抗氧化、抗痉挛、抗结核、抗微生物活性、抗病毒活性等。为了寻找高效抗菌活性化合物，本发明将丙烯酰胺结构引入喹唑啉母体中，合成一系列含丙烯酰胺基的喹唑啉类化合物，考察其生物活性，为新农药的研发和创制提供重要的科学基础。

含丙烯酰胺基化合物的生物活性研究进展如下：

2010年，Honigberg等[Honigberg，L.A.；Smith，A.M.；Sirisawad，M.；Verner，E.；Loury，D.；Chang，B.；Li，S.；Pan，Z.；Thamm，D.H.；Miller，R.A.；Buggy，J.J.The Brutontyrosine kinase inhibitor PCI-32765 blocks B-cell activation and isefficacious in models of autoimmune disease and B-cell malignancy[J].Proc.Natl.Acad.Sci.USA，2010，107，13075-13080]以4-氨基吡唑并[3，4-d]嘧啶为母体，引入丙烯酰胺基团开发了一种高效、不可逆的布鲁顿酪氨酸激酶(Btk)抑制剂l-1(Ibrutinib：IC50＜0.5nM)，通过临床试验发现，其能有效治疗B细胞淋巴癌和慢性淋巴细胞白血病，该药物于2013年被美国食品和药物管理局(FDA)批准上市。

2013年，Evans等[Evans，E.K.；Tester，R.；Aslanian，S.；Karp，R.；Sheets，M.；Labenski，M.T.；Witowski，S.R.；Lounsbury，H.；Chaturvedi，P.；Mazdiyasni，H.；Zhu，Z.；Nacht，M.；Freed，M.I.；Petter，R.C.；Dubrovskiy，A.；Singh，J.；Westlin，W.F.，Inhibition of Btk with CC-292provides early pharmacodynamic assessment ofactivity in mice and humans[J].J.Pharmacol Exp.Ther.，2013，346，219-228]以嘧啶环为母体，分别在其2，4位上用苯胺取代后，将丙烯酰胺基团引入苯环上设计合成化合物1-2(Spebrutinib)。通过抑制Btk酶活性实验结果发现，Spebrutinib能高效、选择性抑制Btk，其IC50＜0.5nM。其通过丙烯酰胺基团与Btk上的蛋白半胱氨酸481(Cys481)发生加成反应形成牢固的共价键。

2014年，Finlay等[Finlay，M.R.；Anderton，M.；Ashton，S.；Ballard，P.；Bethel，P.A.；Box，M.R.；Bradbury，R.H.；Brown，S.J.；Butterworth，S.；Campbell，A.；Chorley，C.；Colclough，N.；Cross，D.A.；Currie，G.S.；Grist，M.；Hassall，L.；Hill，G.B.；James，D.；James，M.；Kemmitt，P.；Klinowska，T.；Lamont，G.；Lamont，S.G.；Martin，N.；McFarland，H.L.；Mellor，M.J.；Orme，J.P.；Perkins，D.；Perkins，P.；Richmond，G.；Smith，P.；Ward，R.A.；Waring，M.J.；Whittaker，D.；Wells，S.；Wrigley，G.L.Discovery of a potent andselective EGFR inhibitor(AZD9291)of both sensitizing and T790M resistancemutations that spares the wild type form of the receptor[J].J.Med.Chem.，2014，57，8249-8467]根据其前期工作研究出的EGFR抑制剂1-10a，通过结构优化研发了不可逆抑制剂1-10b(Osimertinib，AZD9291)，作者在苯胺区将丙烯酰胺基团裸露出来，在嘧啶环上引入2-甲基吲哚基团，其能选择性与EGFR酪氨酸激酶域中ATP结合位点半胱氨酸Cys797相结合。AZD9291对EGFR突变型L858R/T790M的IC50为11.4nM，并在2015年被FDA批准用于治疗EGFR激酶抑制剂耐药后T790M位点变异的非小细胞肺癌(NSCLC)。

2016年，Planken等[Planken，S.；Behenna，D.C.；Nair，S.K.；Johnson，T.O.；Nagata，A.；Almaden，C.；Bailey，S.；Ballard，T.E.；Bernier，L.；Cheng，H.；Cho-Schultz，S.；Dalvie，D.；Deal，J.G.；Dinh，D.M.；Edwards，M.P.；Ferre，R.A.；Gajiwala，K.S.；Hemkens，M.；Kania，R.S.；Kath，J.C.；Matthews，J.；Murray，B.W.；Niessen，S.；Luo，Y.；Xin，S.；Zhang，C.；Lafontaine，J.Discovery of N-((3R，4R)-4-Fluoro-1-(6-((3-methoxy-1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)amino)-9-methyl-9H-purin-2-yl)pyrrolidine-3-yl)acrylamide(PF-06747775)through Structure-Based Drug Design：a high affinityirreversible Inhibitor targeting oncogenic EGFR mutants with selectivity overWild-Type EGFR[J].J.Med.Chem.，2017，60，3002-3019]采用结构设计药物的方法以及进一步改善EGFR突变体的耐药性，设计合成了化合物1-12，其对EGFR的四种突变体(外显子19Del EGFR、L858R、双突变体L858R/T790M和T790M/Del)均具有高效的抑制活性，选择性超过了野生型的EGFR，其IC50为3-12nM。

2018年，Wu等[Wu，K.D.；Chen，G.S.；Liu，J.R.；Hsieh，C.E.；Chern，J.W.，Acrylamide functional group incorporation improves drug-like properties：anexample with EGFR inhibitors[J].ACS Med.Chem.Lett.，2019，10，22-26]以EGFR抑制剂gefitinib为先导化合物，在其喹唑啉的4位取代的NH上引入丙烯酰胺基团，合成了化合物1-16，经生物研究结果表明，其对EGFR的IC50值由0.5nM升高到65.2nM，但溶解度反而有所提高。实验证明，引入丙烯酰胺基团提高了化合物的成药性能。

喹唑啉类化合物的生物活性研究进展如下：

2010年，Mani等[Mani，C.P.；Yakaiah，T.；Gayatri，G.；Pranay，K.K.；Narsaiah，B.；Murthy，U.S.；Raghu，R.R.A.Click chemistry：studies on the synthesis of novelfluorous tagged triazol-4-yl substituted quinazoline derivatives and theirbiological evaluation--theoretical and experimental validation[J].Eur.J.Med.Chem.，2010，45，78-84.]分别在喹唑啉酮的2位上引入了一个苯基和三氟甲基，在3位上引入了一个端炔，同时也在4位上通过点击化学的方法将不同长度的氟代烷烃连接到喹唑啉母体上，衍生出了一系列含有不同长度烷烃的化合物。生物活性测试结果表明，对白色念珠菌、酿酒酵母菌、黑曲霉菌等表现出了良好的生物活性。

2011年，Desai等[Desai，N.C.；Dodiya，Amit；Bhatt，Nayan；Kumar，Mukesh.Dimeric 2-(2-chlorophenyl)-quinazolin-4-ones as potentialantimicrobial agents[J].Med.Chem.Res.，2011，21，1127-1135]通过取代喹唑啉的2位和3位设计了一系列含双喹唑啉结构的衍生物，经体外生物活性研究，结果发现化合物1-24a，1-24b和1-24c表现出优异的抗菌活性，分别对化脓性链球菌(S.pyogenes)的MIC值为25、25和12.5μg/mL，优于对照药剂氨苄青霉素(100μg/mL)。

2013年，Wang等[Wang，X.；Li，P.；Li，Z.N.；Yin，J.He，M.；Xue，W.；Chen，Z.W.；Song，B.A.Synthesis and Bioact-ivity Evaluation of Novel Arylimines Containinga 3Aminoethyl-2-[(p trifluoromethoxy)anilino]-4(3H)quinazolinone Moiety[J].J.Agric.Food.Chem.，2013，61，9575-9582.]报道了一系列含有芳香亚胺结构的喹唑林类衍生物，生物活性测试结果表明，此类化合物表现出了优异的抗水稻白叶枯病菌活性。

2014年，Van等[Van H.K.；Burda，S.F.，R.；Shaw，L.N.；Manetsch，R.，Antibacterial activity of a series of N2，N4-disubstituted quinazoline-2，4-diamines[J].J.Med.Chem.，2014，57，3075-3093]报道了一系列N2，N4-喹唑啉类化合物，生物活性测试结果表明，该类化合物具有良好的抗菌活性，构效关系(SAR)研究表明在N2和N4上双取代有利于提高抗菌活性，其中，化合物11a、11b、11c对金黄色葡萄球菌(S.aureus)MIC值分别为0.37、0.67和0.73μM。

2014年，Patel等[Patel，A.B.；Chikhalia，K.H.；Kumari，P.Synthesis andbiological evaluation of novel quinazoline derivatives obtained by Suzuki C-Ccoupling[J].Med.Chem.Res.，2014，23，2338-2346.]通过Suzuki C-C coupling方法将苯偶联到喹唑啉的2位上，衍生出了一系列(硫)脲喹唑啉类衍生物，生物活性测试结果显示，化合物表现出了良好的活性，它们抗分枝杆菌的MIC值最优能达到12.50μg/mL(对照药剂Pyrazinamide吡嗪酰胺为6.25μg/mL)。

2017年，Jiang等[Jiang，Z.Y.Hong，W.D.；Cui，X.P.；Gao，H.G.；Wu，P.P.；Chen，Y.S.，Synthesis and structure-activity relationship of N4-benzylamine-N2-isopropyl-quinazoline-2，4-diamines derivatives as potential antibacterialagents[J].RSC.Advances.，2017，7，52227-52237.]合成了一系列喹唑啉类二胺取代化合物，经构效研究筛选出8个有较好抗菌活性的化合物，生物活性结果表明，化合物12对大肠杆菌(E.coli)，金黄色葡萄球菌(S.aureus)及表皮葡萄球菌(S.epidermidis)的MIC为3.9μg/mL，对耐甲氧西林金色葡萄球菌(MRSA)的MIC为7.8μg/mL。优于对照药剂万古霉素(31.2μg/mL)。

2018年，Yang等[Yang，L.；Ge，S.；Huang，J.；Bao，X.P.Synthesis of novel(E)-2-(4-(1H-1，2，4-triazol-1-yl)styryl)-4-(alkyl/arylmethyleneoxy)quinazolinederivatives as antimicrobial agents[J].Mol.Divers，2018，22，71-82]报道了一系列含三氮唑的喹唑啉类衍生物，进一步测试该系列化合物对3种植物病原细菌水稻白叶枯病菌(Xoo)、柑橘溃疡病菌(Xac)和烟草青枯病菌(R.solanacearum)的抑制活性。活性结果显示，化合物1-33a，1-33b，1-33c对柑橘溃疡病菌(Xac)的EC50分别为53.2、67.7和70.7μg/mL，略高于对照药剂叶枯唑(87.7μg/mL)。

本发明的目的之一提供了一种4-氨基喹唑啉类化合物或其立体异构体、或其盐或其溶剂化物。

本发明的另一目的在提供了制备上述化合物或其立体异构体、或其盐或其溶剂化物的中间体化合物及其制备方法。

本发明还有一目的是提供了一种含有上述化合物或其立体异构体、或其盐或其溶剂化物的组合物。

本发明还有一目的是提供了上述化合物或其立体异构体、或其盐或其溶剂化物，或所述组合物的用途。

本发明另一目的是提供了利用上述化合物或其立体异构体、或其盐或其溶剂化物，或所述组合物防治农业病虫害的方法。

为实现上述目的，本发明采用了下述技术方案：

一种4-氨基喹唑啉类化合物或其立体异构体、或其盐或其溶剂化物，该化合物具有如通式(I)所示的结构：

其中

独立的选自氢、氘、任意取代或未取代的烷基、任意取代或未取代的烯基、任意取代或未取代的炔基、任意取代或未取代的烷氧基、任意取代或未取代的环烷基、羟基、氨基、卤素、巯基、膦基、硝基中的一个或多个；

R₂独立的选自氢、氘、任意取代或未取代的烷基、任意取代或未取代的烯基、任意取代或未取代的炔基、任意取代或未取代的烷氧基、任意取代或未取代的环烷基、任意取代或未取代的烷基酰基、任意取代或未取代的烯基酰基、任意取代或未取代的炔基酰基、任意取代或未取代的芳基、任意取代或未取代的杂芳基。

R₁独立的选自氢、氘、烷基、烷氧基、羟基、氨基、硝基、卤素、巯基、膦基中的一个或多个；

优选地，R₁独立的选自氢、氘、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、羟基、氨基、硝基、F、Cl、Br、巯基、膦基中的一个或多个；

更优选地，R₁独立的选自氢、氘、C₁-C₃烷基、C₁-C₃烷氧基、羟基、氨基、硝基、F、Cl、Br；

最优选地，R₁独立的选自氢、氘、甲基、乙基、正丙基、异丙基、羟基、氨基、硝基、F、Cl、Br；

R₂独立的选自氢、氘、烷基、烷氧基、烯基、炔基、环烷基、烷基酰基、烯基酰基、炔基酰基、芳基、杂芳基；

优选地，R₂独立的选自氢、氘、C₁-C₈烷基、C₁-C₈烷氧基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₁-C₈烷基酰基、C₂-C₈烯基酰基、C₂-C₈炔基酰基、C₆-C₁₅芳基、C₄-C₁₀杂芳基中的一个或多个；

更优选地，R₂独立的选自氢、氘、C₁-C₅烷基、C₁-C₅烷氧基、C₂-C₅烯基、C₂-C₅炔基、C₁-C₅烷基酰基、C₂-C₅烯基酰基、C₂-C₅炔基酰基、C₆-C₈芳基、C₄-C₈杂芳基中的一个或多个；

最优选地，R₂独立的选自氢、氘、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、乙烯基、烯丙基、乙酰基、正丙酰基、异丙酰基、正丁酰基、异丁酰基、仲丁酰基、叔丁酰基、烯丙酰基、烯丁酰基、烯仲丁酰基、烯叔丁酰基、烯正戊酰基、烯异戊酰基、烯新戊酰基、乙炔基、炔丙基、炔丁基、苯基、苄基、呋喃基、2-呋喃亚甲基、3-呋喃亚甲基、噻吩基、2-噻吩亚甲基、3-噻吩亚甲基、吡咯基、2-吡咯亚甲基、3-吡咯亚甲基。

最优选地，所述化合物选自下述具体化合物：

一种制备权利要求1所述化合物或其立体异构体、或其盐或其溶剂化物的中间体化合物，如下所示：

其中R₁和R₂如上所述。

优选地，所述化合物或其立体异构体、或其盐或其溶剂化物的制备方法，还包括：化合物在卤代物存在下生成通式(I)所示化合物的步骤。

优选地，所述制备方法还包括：在取代胺存在下生成的步骤，其中R₁和R₂如权上所述。

更优选地，所述制备方法还包括下述具体步骤：

其中R₁和R₂如上所述。

一种组合物，含有所述的化合物或其立体异构体、或其盐或其溶剂化物，以及农业上可用的助剂或杀菌剂、杀虫剂或除草剂；

优选地，所述组合物的剂型选自乳油(EC)、粉剂(DP)、可湿性粉剂(WP)、颗粒剂(GR)、水剂(AS)、悬浮剂(SC)、超低容量喷雾剂(ULV)、可溶性粉剂(SP)、微胶囊剂(MC)、烟剂(FU)、水乳剂(EW)、水分散性粒剂(WG)。

所述的化合物或其立体异构体、或其盐或其溶剂化物，或所述的组合物可用于防治农业病虫害，优选地，所述农业病虫害为植物细菌性或真菌性病害；更优选地，所述农业病虫害为植物叶枯病和植物溃疡病；最优选地，所述农业病虫害为水稻白叶枯病、黄瓜白叶枯病、烟草青枯病、魔芋白叶枯病、柑桔溃疡病、葡萄溃疡病、番茄溃疡病、猕猴桃溃疡病、苹果溃疡病、黄瓜灰霉病、辣椒枯萎病、油菜菌核病、小麦赤霉病、马铃薯晚疫病、蓝莓根腐。

一种防治农业病虫害的方法，其包括使所述的化合物或其立体异构体、或其盐或其溶剂化物，或所述的组合物作用于有害物或其生活环境；优选地，所述农业病虫害为植物细菌性或真菌性病害；更优选地，所述农业病虫害为水稻白叶枯病、黄瓜白叶枯病、魔芋白叶枯病、柑桔溃疡病、葡萄溃疡病、番茄溃疡病、猕猴桃溃疡病、苹果溃疡病、黄瓜灰霉病、辣椒枯萎病、油菜菌核病、小麦赤霉病、马铃薯晚疫病、蓝莓根腐。

用于保护植物免受农业病虫害侵害的方法，其包括其中使植物与所述的化合物或其立体异构体、或其盐或其溶剂化物，或所述的组合物接触的方法步骤。

此处用到的术语“烷基”是包括具有特定数目碳原子的支链和直链饱和烃基。例如“C_1-10烷基”(或亚烷基)目的是C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9和C10烷基。另外，例如“C_1-6烷基”表示具有1到6个碳原子的烷基。烷基可为非取代或取代的，以使一个或多个其氢原子被其它化学基团取代。烷基的实施例包括但不限于甲基(Me)、乙基(Et)、丙基(如正丙基和异丙基)、丁基(如正丁基、异丁基、叔丁基)、戊基(如正戊基、异戊基、新戊基)及其类似物。

“烯基”是既包括直链或支链结构的烃，且具有一个或多个出现在链中任何稳定点的碳-碳双键。例如“C_2-6烯基”(或亚烯基)目的是包括C2、C3、C4、C5和C6烯基。烯基的实例包括但不限于乙烯基、1-丙烯基，2-丙烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、4-戊烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基、5-己烯基、2-甲基-2-丙烯基、4-甲基-3-戊烯基及其类似物。

“炔基”是既包括直链或支链结构的烃，且具有一个或多个出现在链中任何稳定点的碳-碳叁键。例如“C_2-6炔基”(或亚炔基)目的是包括C2、C3、C4、C5和C6炔基；如乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基及其类似物。

此处用到的术语“取代的”指的是在指定原子或基团上的任意一个或多个氢原子以选择的指定基团取代，前提是不超过指定原子的一般化合价。如果没有其它说明，取代基命名至中心结构。例如，可以理解的是当(环烷基)烷基是可能的取代基，该取代基至中心结构的连接点是在烷基部分中。此处使用的环双键是形成于两个临近环原子之间的双键(如C＝C、C＝N或N＝N)。

取代基和或变量的组合是允许的，仅当这些组合产生稳定的化合物或有用的合成中间体。稳定的化合物或稳定结构暗示所述化合物以有用的纯度从反应混合物分离出来时是足够稳定的，随之配制形成有效的治疗试剂。优选地，目前所述化合物不包含N-卤素、S(O)₂H或S(O)H基。

术语“环烷基”指的是环烷基，包括单-、双-或多环体系。C_3-7环烷基目的是包括C3、C4、C5、C6和C7环烷基。环烷基实例包括但不限于环丙基、还丁基、环戊基、环己基、降冰片基及其类似物。此处用到的“碳环”或“碳环残余”指的是任何稳定3、4、5、6或7-元单环或双环或7、8、9、10、11、12或13-元双或三环，其可为饱和、部分不饱和、不饱和或芳香性的。这些碳环实例包括但不限于环丙基、环丁基、环丁烯基、环戊基、戊烯基、环己基、环己烯基、环庚基、环庚烯基、金刚烷基、环辛基、环辛烯基、环辛二烯、[3.3.0]双环辛烷、[4.3.0]双环壬烷、[4.4.0]双环癸烷、[2.2.2]双环辛烷、芴基、苯基、萘基、茚满基、金刚烷基、蒽基和四氢萘基(萘满)。如上所述，桥环也包含于碳环(如[2.2.2]双环辛烷)的定义中。如果没有其它说明，优选的碳环是环丙基、环丁基、环戊基、环己基和苯基。当使用术语“碳环”，目的是包括“芳基”。当一个或多个碳原子连接两个非临近碳原子出现桥环。优选的桥是一个或两个碳原子。指出的是桥总是将单环转化为双环。当环是桥连的，环的取代基也存在于桥上。

术语“芳基”指的是在环部分具有6到12个碳原子的单环或双环芳香烃基，如苯基和萘基，每个可被取代的。

术语“卤素”或“卤素原子”指的是氯、溴、氟和碘。

术语“杂芳基”指的是取代和非取代芳香5或6元单环基团，9-或10-元双环基团，和11到14元三环基团，在至少一个环中具有至少一个杂原子(O，S或N)，所述含杂原子的环优选具有1、2或3个选自O、S和N中的杂原子。含杂原子的杂芳基的每个环可含一个或两个氧或硫原子和/或由1到4个氮原子，前提是每个环中杂原子的总数是4或更少，且每个环具有至少一个碳原子。完成双环和三环基团的稠合环可仅含有碳原子，并可以是饱和、部分饱和或不饱和。氮和硫原子可任选被氧化且氮原子可任选被季铵化。双环或三环的杂芳基必须包括至少一个全芳香环，氮其它稠合环可为芳香性或非芳香性的。杂芳基可在任何环的任何可利用氮或碳原子上连接。当化合价允许，如果所述其它环是环烷基或杂环，其另外任选以＝O(氧)取代。

示例性单环杂芳基包括吡咯基、吡唑基、吡唑啉基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、噻二唑基、呋喃基、噻吩基、噁二唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、三嗪基及其类似物。

示例性双环杂芳基包括吲哚基、苯并噻唑基、苯并二氧杂环戊烯基、苯并噁唑基、苯并噻吩基、喹啉基、四氢异喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、吲哚嗪基、苯并呋喃基、色酮基、香豆素基、苯并呋喃基、噌啉基、喹喔啉基、吲唑基、吡咯并吡啶基、氟代吡啶基、二氢异吲哚基、四氢喹啉基及其类似物。

如果没有其它说明，本发明的化合物理解为包括游离态和其盐。术语“盐”表示以无机和/或有机酸和碱形成酸式和/或碱式盐。另外，术语“盐可包括两性离子(内盐)，如当式I化合物含有碱性片段如胺或吡啶或咪唑环，和酸式片段如羧酸。药物上可接受的(即非毒性、生理学上可接受的)盐是优选的，如可接受的金属和胺盐，其中阳离子没有显著贡献毒性或盐的生物活性。然而，其它盐可是有用的，如在制备过程中采用分离或纯化步骤，因此也包含于本发明范围中。式I化合物的盐可以如式I化合物与一定量的酸或碱形成，如等量，在媒介中如在其中盐可沉淀或其水媒介中，然后进行冻干作用。

当提到取代基为烯基、炔基、烷基、卤素、芳基、杂芳基、烷氧基、环烷基、羟基、氨基、巯基、膦基时，或这些取代基具体的为某个具体的烯基、炔基、烷基、卤素、芳基、杂芳基、烷氧基、环烷基、羟基、氨基、巯基、膦基时，指的是一个到三个上述取代基。如甲基苯基指的是一个到三个甲基取代的苯基。

通过采用上述技术方案，本发明以喹唑啉类化合物为基础，将能够提高目标化合物生物活性的烷基、炔基和丙烯酰胺基引入到此体系中，合成一系列含烷基、炔基和丙烯酰胺基的喹唑啉类化合物，且发现该化合物对致病病原细菌具有良好的抑制作用，针对病原细菌[如水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae，Xoo)、柑橘溃疡病菌(Xanthomonas axonopodis pv.citri，Xac)等]均具有良好的抑制效果，为新农药的研发和创制提供重要的科学基础。

实施例

下面通过实施例对本发明作进一步说明。应该理解的是，本发明实施例所述方法仅仅是用于说明本发明，而不是对本发明的限制，在本发明的构思前提下对本发明制备方法的简单改进都属于本发明要求保护的范围。实施例中用到的所有原料和溶剂均为市售产品。

实施例1：5-氯喹唑啉-4(3H)-酮的制备

将6-氯-2-氨基苯甲酸(87.0mmol)于100mL圆底烧瓶中，向其中加入30mL甲酰胺搅拌，加热至145℃反应5h后停止反应，冷却至室温，抽滤，水洗，得到灰白色固体，烘干后产率76.0％。

实施例2：4，5-二氯喹唑啉的制备

将5-氯喹唑啉-4(3H)-酮(11.0mmol)于100mL圆底烧瓶中，向其中加入20mL甲苯搅拌溶解，再向体系加入5当量的POCl₃和2当量的三乙胺，加热至120℃回流，反应5h后停止反应，脱溶，用100mLDCM溶解固体，用氨水调节pH至6-7，用水洗(30mL*3)，柱层析提纯(PE∶EA＝10∶1 V/V)，得到白色固体，产率54.4％。

实施例3：6-溴-4-氨基喹唑啉的制备

将6-溴-4-氯喹唑啉(1g，5.02mmol)加入50mL圆底烧瓶中，加入15mL四氢呋喃搅拌溶解后，向体系加入氨水(1.7mL，100mmol)，将温度升高至40℃回流5h后，TLC监测反应完毕，停止反应，体系有固体析出。冷却至室温，抽滤、水洗、烘干后得到淡黄色固体0.8g，产率88.6％。

实施例4：6-溴-N-甲基喹唑啉-4-胺

取6-溴-4-氟喹唑啉(3g，12mmol)加入100mL圆底烧瓶中，加入30mL异丙醇搅拌溶解后，向体系加入三乙胺(1.0mL，24mmol)和甲胺醇(2.3mL，18mmol)溶液，升温至50℃反应4h后，TLC监测反应完毕，停止反应。减压蒸馏除溶剂，柱层析提纯(PE∶EA＝10∶1 V/V)，浓缩后得到2.7g白色固体，产率93.1％。

实施例5：N-(6-溴喹唑啉-4-基)丙烯酰胺的制备

将6-溴-4-氨基喹唑啉(0.25g，1.11mol)于25mL圆底烧瓶中，加入15mL DMF搅拌20min后，向体系加入三乙胺(0.31mL，2.23mmol)和丙烯酰氯(0.18mL，2.23mmol)，在冰浴下搅拌2h后，停止反应。向体系加入80mL乙酸乙酯，用饱和NH₄Cl萃取(20mL×3)，取有机层浓缩，经柱层析提纯(PE∶EA＝10∶1 V/V)得到白色固体80mg，产率12.9％。

实施例6：N-(6-溴喹唑啉-4-基)-N-甲基丙烯酰胺的制备

将6-溴-N-甲基喹唑啉-4-胺(0.40g，1.68mmol)于25mL圆底烧瓶中，加入15mL THF搅拌溶解，在冰浴下，向体系加入N，N-二异丙基乙胺(0.33mL，2.01mmol)和丙烯酰氯(0.20mL，2.52mmol)，反应过夜。减压蒸馏除溶剂，柱层析提纯(PE∶EA＝10∶1 V/V)得到白色固体0.11g，产率22.4％。

其它目标化合物的合成，选用相应的原料或者取代基，参照上述实施例制备。

合成的含烷基和丙烯酰胺基的喹唑啉类化合物的结构及核磁共振氢谱和碳谱数据如表1所示，物化性质如表2所示。

表1化合物的核磁共振氢谱和碳谱数据

表2目标化合物的理化性质

药理实施例1：

采用浊度法测试目标化合物对植物病原菌的抑制率，试验对象为水稻白叶枯病菌(Xoo)和柑橘溃疡病菌(Xac)。DMSO溶解在培养基中作为空白对照。将水稻白叶枯病菌(水稻白叶枯病原菌在M210固体培养基)放到NB培养基中，在28℃、180rpm恒温摇床中振荡培养到对数生长期备用；将柑橘溃疡病菌(在M210固体培养基上)放到NB培养基中，在28℃、180rpm恒温摇床中振荡培养到对数生长期备用。将药剂(化合物)配置成不同浓度(例：100，50μg/mL)的含毒NB液体培养基5mL加入到试管中，分别加入40μL含有植病细菌的NB液体培养基，在28-30℃、180rpm恒温摇床中振荡，其水稻白叶枯病原菌培养36h，柑橘溃疡病菌培养48h。将各个浓度的菌液在分光光度计上测定OD₅₉₅值，并且另外测定对应浓度的含毒无菌NB液体培养基的OD₅₉₅值。

EC₅₀(median effective concentration)是评价植物病原菌对化合物敏感性的重要指标，同时也是对目标化合物作用机制研究时，化合物浓度设置的重要参数。在浓度梯度实验中，采用二倍稀释法设定合适的5个浓度，最后将药剂对植物病原菌的抑制率、药剂浓度换算成对数值，通过SPSS软件回归分析得到毒力曲线，计算出EC₅₀。

采用浊度法测试目标化合物对植物病原菌的有效中浓度EC₅₀，试验对象为水稻白叶枯病菌(Xoo)和柑橘溃疡病菌(Xac)。DMSO溶解在培养基中作为空白对照。将水稻白叶枯病菌(水稻白叶枯病原菌在M210固体培养基)放到NB培养基中，在28℃、180rpm恒温摇床中振荡培养到对数生长期备用；将柑橘溃疡病菌(在M210固体培养基上)放到NB培养基中，在28℃、180rpm恒温摇床中振荡培养到对数生长期备用。将药剂(化合物)配置成不同浓度(例：100，50，25，12.5，6.25μg/mL)的含毒NB液体培养基5mL加入到试管中，分别加入40μL含有植病细菌的NB液体培养基，在28-30℃、180rpm恒温摇床中振荡，其水稻白叶枯病原菌培养36h，柑橘溃疡病菌培养48h。将各个浓度的菌液在分光光度计上测定OD₅₉₅值，并且另外测定对应浓度的含毒无菌NB液体培养基的OD₅₉₅值。

校正OD值＝含菌培养基OD值-无菌培养基OD值

抑制率％＝[(校正后对照培养基菌液OD值-校正含毒培养基OD值)/

校正后对照培养基菌液OD值]×100

本发明实施例辅以说明本发明的技术方案，但实施例的内容并不局限于此，目标化合物实验结果如表3和4所示。

表3含烷基和丙烯酰胺基的喹唑啉类化合物对植物病原细菌的抑制活性

“NT”表示未测试

表4含烷基和丙烯酰胺基的喹唑啉类化合物对植物病原细菌的EC₅₀

从表3和4中可以看出，在离体试验中，目标化合物对植物致病病原菌(如水稻白叶枯病菌和柑橘溃疡病菌)表现出了较好的抑制活性。其中，化合物1～3、9～23在100μg/mL浓度下对水稻白叶枯病菌的抑制活性均在97％以上，化合物1～3、9～22在浓度50μg/mL浓度下对水稻白叶枯病菌的抑制活性均在97％以上，化合物23在浓度50μg/mL浓度下对水稻白叶枯病菌的抑制活性为74.8％；化合物1、3、9～18、21～23、在100μg/mL浓度下对柑橘溃疡病菌的抑制率分别为91.2、78.0、98.9、100、63.8、98.9、98.8、97.0、78.2、93.1、86.2、60.2、98.3、96.9和93.4％，化合物1、3、9～10、12～15、17、22～23在50μg/mL浓度下对柑橘溃疡病菌的抑制活性分别为70.6、59.0、86.2、90.7、98.3、91.8、98.3、62.6、61.7、90.2、98.7％。进一步测试结果表明化合物1～3、9～23对水稻白叶枯病菌的EC₅₀分别为3.67、10.2、11.6、7.81、3.21、7.13、2.01、3.64、5.03、7.35、6.60、9.52、8.40、6.24、8.15、8.89、6.59和36.9μg/mL，化合物1、9～13、18、20～23对柑橘溃疡病菌的EC₅₀分别为28.3、15.0、14.6、65.1、16.3、18.0、15.2、28.6、16.2、6.85和18.3μg/mL，可用于制备抗植物致病病原细菌农药。