阅读说明：本技术 (S)-2-(((S)-(((2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸-2-乙基丁基酯的结晶形式 (Crystalline forms of (S) -2- (((S) - ((((2R, 3S,4R,5R) -5- (4-aminopyrrolo [2,1-f ] [1,2,4] triazin-7-yl) -5-cyano-3, 4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl) methoxy) (phenoxy) phosphoryl) amino) propanoic a) 是由 K·布拉克 E·A·卡拉 L·V·休曼 N·劳森 于 2018-04-27 设计创作，主要内容包括：本发明涉及用于治疗病毒感染的(S)-2-(((S)-(((2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸2-乙基丁基酯(式I)的新型盐和结晶形式。在一些实施方式中,所述病毒感染是由选自以下的病毒引起的：沙粒病毒科,冠状病毒科,丝状病毒科,黄病毒科和副粘病毒科。<Image he="432" wi="700" file="DDA0002256078290000011.GIF" imgContent="drawing" imgFormat="GIF" orientation="portrait" inline="no"></Image>(The present invention relates to (S) -2- (((S) - ((((2R, 3S,4R,5R) -5- (4-aminopyrrolo [2, 1-f) for the treatment of viral infections][1,2,4]Novel salts and crystalline forms of triazin-7-yl) -5-cyano-3, 4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl) methoxy) (phenoxy) phosphoryl) amino) propionic acid 2-ethylbutyl ester (formula I). In some embodiments, the viral infection is caused by a virus selected from the group consisting of: arenavirusFamily, coronaviridae, filoviridae, flaviviridae and paramyxoviridae.)

具体实施方式

中，药物组合物是溶液。配制本发明的药物组合物，以便在将组合物施用于患者时使其中含有的活性成分具有生物利用度。将施用于受试者或患者的组合物采取一个或多个剂量单位的形式，其中例如片剂可以是单剂量单位，并且气溶胶形式的本发明化合物的容器可以容纳多个剂量单位。制备此类剂量形式的实际方法对于本领域技术人员而言是已知的或者是显而易见的；例如，参见Remington:The Science andPractice of Pharmacy，第20版 (Philadelphia College of Pharmacy and Science，2000)。在任何情况下，待施用的组合物将含有治疗有效量的本发明化合物，用于根据本发明的教导治疗感兴趣的疾病或病症。

本发明的药物组合物可以通过制药领域熟知的方法制备。例如，旨在通过注射施用的药物组合物可以通过将本发明的化合物与无菌蒸馏水混合以形成溶液来制备。或者，旨在通过注射施用的药物组合物可以通过将本发明的化合物与无菌反渗透水混合以形成溶液来制备。可加入表面活性剂或其它增溶赋形剂以促进均相溶液或悬浮液的形成。表面活性剂是与本发明化合物非共价相互作用以促进化合物在含水递送系统中的溶解或均匀悬浮的化合物。

在其他实施方式中，旨在用于口服施用的固体药物组合物可以通过以下制备：将治疗有效量的本发明化合物与至少一种适当的药学上可接受的赋形剂混合以形成固体预制剂组合物，然后可以容易地将其细分为同等有效的单位剂量形式，例如片剂、丸剂和胶囊剂。因此，在一些实施方式中，提供了药物组合物，其包括治疗有效量的式I化合物以及药学上可接受的赋形剂。

本发明的化合物以治疗有效量施用，所述治疗有效量将根据多种因素而变化，包括所用特定化合物的活性；化合物的代谢稳定性和作用时长；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；施用方式和时间；***速率；药物组合；特定疾病或病症的严重程度；以及接受治疗的个体。在一些实施方式中，本发明的化合物可以单独施用或与其他抗病毒剂联合施用，一天一次、或一天两次、或一天三次、或一天四次，只要患者受到感染、潜伏感染或以预防感染(例如多年、多月、多周或多天)。

本发明的组合物可以包括任何合适纯度的式I化合物。例如，式I 化合物的纯度可以为至少99.0％，或至少99.1，99.2，99.3，99.4，99.5， 99.6，99.7，99.8或至少99.9％。在一些实施方式中，本发明提供了具有纯度至少为99.1％的式I化合物的组合物。在一些实施方式中，本发明提供了具有纯度至少为99.3％的式I化合物的组合物。在一些实施方式中，本发明提供了具有纯度至少为99.5％的式I化合物的组合物。在一些实施方式中，本发明提供了具有纯度至少为99.7％的式I化合物的组合物。

本发明的组合物中存在的杂质可包括未反应的原料、不希望的副产物和其他物质。代表性的杂质包括杂质A：

杂质A可以以少于约0.5％(w/w)，或少于约0.45％，0.40，0.35，0.30， 0.25，0.20，0.15，0.10，0.09，0.08，0.07，0.06，0.05，0.04，0.03，0.02，或少于约0.01％(w/w)的量存在于本发明的组合物中。在一些实施方式中，式I化合物的组合物包括少于0.10％(w/w)的杂质A。在一些实施方式中，式I化合物的组合物包括少于0.05％(w/w)的杂质A。

在一些实施方式中，式I化合物的组合物可具有至少99.1％的纯度，其中该组合物包括少于0.10％(w/w)的杂质A。在一些实施方式中，式I 化合物的组合物可具有至少99.1％的纯度，其中该组合物包括少于 0.05％(w/w)的杂质A。在一些实施方式中，式I化合物的组合物可具有至少99.1％的纯度，其中该组合物包括少于0.04％(w/w)的杂质A。在一些实施方式中，式I化合物的组合物可具有至少99.5％的纯度，其中该组合物包括少于0.04％(w/w)的杂质A。在一些实施方式中，式I化合物的组合物可具有至少99.5％的纯度，其中该组合物包括少于0.04％(w/w) 的杂质A。

式I

还提供了包含如本文所述的式I的至少一种，至少两种，至少三种或全部结晶形式的组合物。在一个特定实施方式中，提供了包含本文所述的一种式I化合物的组合物。在一个特定实施方式中，提供了包含本文所述的两种式I的结晶化合物的组合物。在一个特定实施方式中，提供了包含本文所述的三种式I的结晶化合物的组合物。在一个特定实施方式中，提供了包含本文所述的四种式I的结晶化合物的组合物。在一个特定实施方式中，一种组合物，其包含本文所述的结晶式I形式II和式I形式IV的混合物。在其他实施方式中，本文所述的组合物可以包含基本上纯的结晶形式，或者可以基本上不含其他结晶形式和/或杂质。

在一些实施方式中，组合物包含式I的结晶形式。在一些实施方式中，提供了包含如本文所述的结晶形式的组合物，其中组合物中的式I 化合物为基本上纯的(即，基本上纯的本文所述的式I化合物)。在包含式I的结晶形式的组合物的特定实施方式中，至少约50％，至少约 60％，至少约70％，至少约80％，至少约85％，至少约90％，至少约 95％，至少约96％，至少约97％，至少约98％，或至少约99％的存在于组合物中的式I是本文公开的结晶形式之一。在一些实施方式中，组合物包括至少约50％，至少约60％，至少约70％，至少约80％，至少约 85％，至少约90％，至少约95％，至少约96％，至少约97％，至少约 98％，或至少约99％的式I的结晶形式之一。

在包含本文公开的结晶形式的组合物的其他实施方式中，少于约 50％，少于约40％，少于约30％，少于约20％，少于约10％，少于约 5％，少于约4％，少于约3％，少于约2％或少于约1％的存在于组合物中的式I是式I的其他无定形或结晶形式和/或杂质。

在包含本文公开的结晶形式的组合物的其他实施方式中，相对于存在的结晶形式的质量，杂质占总质量的少于约5％，少于约4％，少于约3％，少于约2％或少于约1％。例如，杂质可包括来自合成式I的副产物、污染物、降解产物、其他结晶形式、无定形形式、水和溶剂。在一些实施方式中，杂质包括来自合成式I的过程的副产物。在一些实施方式中，杂质包括来自合成式I的过程的污染物。在一些实施方式中，杂质包括式I的降解产物。在一些实施方式中，杂质包括式I的其他结晶形式。在一些实施方式中，杂质包括水或溶剂。在包含本文公开的结晶形式的组合物的一些实施方式中，杂质选自来自合成式I的副产物、污染物、降解产物、其他结晶形式、水、溶剂及其组合。

组合疗法

在一些实施方式中，提供了用于治疗人中的沙粒病毒科病毒感染的方法，其包括向所述人组合施用治疗有效量的本文公开的化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂。在一些实施方式中，提供了用于治疗人中的拉沙病毒感染的方法，其包括向所述人组合施用治疗有效量的本文公开的化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂。在一些实施方式中，提供了用于治疗人中的胡宁病毒感染的方法，其包括向所述人组合施用治疗有效量的本文公开的化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂。

在一些实施方式中，本发明提供了用于治疗沙粒病毒科病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的本文公开的化合物或组合物与治疗有效量的适用于治疗沙粒病毒科病毒感染的一种或多种另外的治疗剂的组合。在一些实施方式中，本发明提供了用于治疗拉沙病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的本文公开的化合物或组合物与治疗有效量的适用于治疗沙粒病毒科病毒感染的一种或多种另外的治疗剂的组合。在一些实施方式中，本发明提供了用于治疗拉沙病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的本文公开的化合物或组合物与治疗有效量的适用于治疗拉沙病毒感染的一种或多种另外的治疗剂的组合。在一些实施方式中，本发明提供了用于治疗胡宁病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的本文公开的化合物或组合物与治疗有效量的适用于治疗沙粒病毒科病毒感染的一种或多种另外的治疗剂的组合。在一些实施方式中，本发明提供了用于治疗胡宁病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的本文公开的化合物或组合物与治疗有效量的适用于治疗胡宁病毒感染的一种或多种另外的治疗剂的组合。

一些实施方式提供了与一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合的本文公开的化合物用于治疗患有沙粒病毒科病毒感染的人中的病毒感染的方法。一些实施方式提供了与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合的治疗有效量的本文公开的化合物用于治疗患有拉沙病毒感染的人中的病毒感染的方法。一些实施方式提供了与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合的治疗有效量的本文公开的化合物用于治疗患有胡宁病毒感染的人中的病毒感染的方法。一些实施方式提供了治疗有效量的本文公开的化合物用于治疗患有沙粒病毒科病毒感染的人中的病毒感染的方法，其中所述化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合施用。一些实施方式提供了本文公开的化合物用于治疗患有拉沙病毒感染的人中的病毒感染的方法，其中治疗有效量的所述化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合施用。一些实施方式提供了本文公开的化合物用于治疗患有胡宁病毒感染的人中的病毒感染的方法，其中治疗有效量的所述化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合施用。在一些实施方式中，本发明提供了与适用于治疗沙粒病毒科病毒感染的一种或多种另外的治疗剂组合的本文公开的化合物用于治疗沙粒病毒科病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明提供了本文公开的化合物用于治疗沙粒病毒科病毒感染的方法，其中治疗有效量的所述化合物与治疗有效量的适用于治疗沙粒病毒科病毒感染的一种或多种另外的治疗剂组合施用。在一些实施方式中，本发明提供了与适用于治疗拉沙病毒感染的一种或多种另外的治疗剂组合的本文公开的化合物用于治疗拉沙病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明提供了本文公开的化合物用于治疗拉沙病毒感染的方法，其中治疗有效量的所述化合物与治疗有效量的适用于治疗拉沙病毒感染的一种或多种另外的治疗剂组合施用。在一些实施方式中，本发明提供了与适用于治疗胡宁病毒感染的一种或多种另外的治疗剂组合的本文公开的化合物用于治疗胡宁病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明提供了本文公开的化合物用于治疗胡宁病毒感染的方法，其中治疗有效量的所述化合物与治疗有效量的适用于治疗胡宁病毒感染的一种或多种另外的治疗剂组合施用。

在一些实施方式中，提供了用于治疗人中的冠状病毒科病毒感染的方法，其包括向所述人施用治疗有效量的本文公开的化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂的组合。在一些实施方式中，提供了用于治疗人中的 SARS病毒感染的方法，其包括向所述人施用治疗有效量的本文公开的化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂的组合。在一些实施方式中，提供了用于治疗人中的MERS病毒感染的方法，其包括向所述人施用治疗有效量的本文公开的化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂的组合。

在一些实施方式中，本发明提供了用于治疗冠状病毒科病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的本文公开的化合物或组合物与治疗有效量的适用于治疗冠状病毒科病毒感染的一种或多种另外的治疗剂的组合。在一些实施方式中，本发明提供了用于治疗SARS 病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的本文公开的化合物或组合物与治疗有效量的适用于治疗冠状病毒科病毒感染的一种或多种另外的治疗剂的组合。在一些实施方式中，本发明提供了用于治疗SARS病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的本文公开的化合物或组合物与治疗有效量的适用于治疗SARS病毒感染的一种或多种另外的治疗剂的组合。在一些实施方式中，本发明提供了用于治疗MERS病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的本文公开的化合物或组合物与治疗有效量的适用于治疗冠状病毒科病毒感染的一种或多种另外的治疗剂的组合。在一些实施方式中，本发明提供了用于治疗MERS病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的本文公开的化合物或组合物与治疗有效量的适用于治疗MERS病毒感染的一种或多种另外的治疗剂的组合。

一些实施方式提供了与一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合的本文公开的化合物用于治疗患有冠状病毒科病毒感染的人中的病毒感染的方法。一些实施方式提供了与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合的治疗有效量的本文公开的化合物用于治疗患有SARS病毒感染的人中的病毒感染的方法。一些实施方式提供了与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合的治疗有效量的本文公开的化合物用于治疗患有MERS病毒感染的人中的病毒感染的方法。一些实施方式提供了治疗有效量的本文公开的化合物用于治疗患有冠状病毒科病毒感染的人中的病毒感染的方法，其中所述化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合施用。一些实施方式提供了本文公开的化合物用于治疗患有SARS病毒感染的人中的病毒感染的方法，其中治疗有效量的所述化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合施用。一些实施方式提供了本文公开的化合物用于治疗患有MERS病毒感染的人中的病毒感染的方法，其中治疗有效量的所述化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合施用。在一些实施方式中，本发明提供了与适用于治疗冠状病毒科病毒感染的一种或多种另外的治疗剂组合的本文公开的化合物用于治疗冠状病毒科病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明提供了本文公开的化合物用于治疗冠状病毒科病毒感染的方法，其中治疗有效量的所述化合物与治疗有效量的适用于治疗冠状病毒科病毒感染的一种或多种另外的治疗剂组合施用。在一些实施方式中，本发明提供了与适用于治疗 SARS病毒感染的一种或多种另外的治疗剂组合的本文公开的化合物用于治疗SARS病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明提供了本文公开的化合物用于治疗SARS病毒感染的方法，其中治疗有效量的所述化合物与治疗有效量的适用于治疗SARS病毒感染的一种或多种另外的治疗剂组合施用。在一些实施方式中，本发明提供了与适用于治疗 MERS病毒感染的一种或多种另外的治疗剂组合的本文公开的化合物用于治疗MERS病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明提供了本文公开的化合物，其用于治疗MERS病毒感染的方法，其中治疗有效量的所述化合物与治疗有效量的适用于治疗MERS病毒感染的一种或多种另外的治疗剂组合施用。

在一些实施方式中，提供了用于治疗人中的丝状病毒科病毒感染的方法，其包括向所述人施用治疗有效量的本文公开的化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂的组合。在一些实施方式中，提供了用于治疗人中的埃博拉病毒感染的方法，其包括向所述人施用治疗有效量的本文公开的化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂的组合。

在一些实施方式中，本发明提供了用于治疗丝状病毒科病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的本文公开的化合物或组合物与治疗有效量的适用于治疗丝状病毒科病毒感染的一种或多种另外的治疗剂的组合。在一些实施方式中，本发明提供了用于治疗埃博拉病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的本文公开的化合物或组合物与治疗有效量的适用于治疗埃博拉病毒感染的一种或多种另外的治疗剂的组合。

一些实施方式提供了与一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合的本文公开的化合物用于治疗患有丝状病毒科病毒感染的人中的病毒感染的方法。一些实施方式提供了与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合的治疗有效量的本文公开的化合物用于治疗患有埃博拉病毒感染的人中的病毒感染的方法。一些实施方式提供了治疗有效量的本文公开的化合物用于治疗患有丝状病毒科病毒感染的人中的病毒感染的方法，其中所述化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合施用。一些实施方式提供了本文公开的化合物用于治疗患有埃博拉病毒感染的人中的病毒感染的方法，其中治疗有效量的所述化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合施用。在一些实施方式中，本发明提供了与适用于治疗丝状病毒科病毒感染的一种或多种另外的治疗剂组合的本文公开的化合物用于治疗丝状病毒科病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明提供了本文公开的化合物用于治疗丝状病毒科病毒感染的方法，其中治疗有效量的所述化合物与治疗有效量的适用于治疗丝状病毒科病毒感染的一种或多种另外的治疗剂组合施用。

在一些实施方式中，提供了用于治疗人中的黄病毒科病毒感染的方法，其包括向所述人施用治疗有效量的本文公开的化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种) 另外的治疗剂的组合。在一些实施方式中，提供了用于治疗人中的寨卡病毒感染的方法，其包括向所述人施用治疗有效量的本文公开的化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂的组合。

在一些实施方式中，本发明提供了用于治疗黄病毒科病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的本文公开的化合物或组合物与治疗有效量的适用于治疗黄病毒科病毒感染的一种或多种另外的治疗剂的组合。在一些实施方式中，本发明提供了用于治疗寨卡病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的本文公开的化合物或组合物与治疗有效量的适用于治疗寨卡病毒感染的一种或多种另外的治疗剂的组合。

一些实施方式提供了与一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合的本文公开的化合物用于治疗患有黄病毒科病毒感染的人中的病毒感染的方法。一些实施方式提供了与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合的治疗有效量的本文公开的化合物用于治疗患有寨卡病毒感染的人中的病毒感染的方法。一些实施方式提供了治疗有效量的本文公开的化合物用于治疗患有黄病毒科病毒感染的人中的病毒感染的方法，其中所述化合物与治疗有效量的一种或多种 (例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合施用。一些实施方式提供了本文公开的化合物，其用于治疗患有寨卡病毒感染的人中的病毒感染的方法，其中治疗有效量的所述化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合施用。在一些实施方式中，本发明提供了与适用于治疗黄病毒科病毒感染的一种或多种另外的治疗剂组合的本文公开的化合物用于治疗黄病毒科病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明提供了本文公开的化合物用于治疗黄病毒科病毒感染的方法，其中治疗有效量的所述化合物与治疗有效量的适用于治疗黄病毒科病毒感染的一种或多种另外的治疗剂组合施用。

在一些实施方式中，提供了用于治疗人中的副粘病毒科病毒感染的方法，其包括向所述人施用治疗有效量的本文公开的化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂的组合。在一些实施方式中，提供了用于治疗人中的 RSV病毒感染的方法，其包括向所述人施用治疗有效量的本文公开的化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂的组合。

在一些实施方式中，本发明提供了用于治疗副粘病毒科病毒感染的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的本文公开的化合物或组合物与治疗有效量的适用于治疗副粘病毒科病毒感染的一种或多种另外的治疗剂的组合。在一些实施方式中，本发明提供了用于治疗RSV 感染的方法，其包括向有此需要的患者施用治疗有效量的本文公开的化合物或组合物与治疗有效量的适用于治疗RSV感染的一种或多种另外的治疗剂的组合。

一些实施方式提供了与一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合的本文公开的化合物用于治疗患有副粘病毒科病毒感染的人中的病毒感染的方法。一些实施方式提供了与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合的治疗有效量的本文公开的化合物用于治疗患有RSV感染的人中的病毒感染的方法。一些实施方式提供了治疗有效量的本文公开的化合物用于治疗患有副粘病毒科病毒感染的人中的病毒感染的方法，其中所述化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合施用。一些实施方式提供了本文公开的化合物用于治疗患有RSV 感染的人中的感染的方法，其中治疗有效量的所述化合物与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种) 另外的治疗剂组合施用。在一些实施方式中，本发明提供了与适用于治疗副粘病毒科病毒感染的一种或多种另外的治疗剂组合的本文公开的化合物用于治疗副粘病毒科病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明提供了本文公开的化合物用于治疗副粘病毒科病毒感染的方法，其中治疗有效量的所述化合物与治疗有效量的适用于治疗副粘病毒科病毒感染的一种或多种另外的治疗剂组合施用。

治疗有效量的如本文公开的式I化合物可与治疗有效量的一种或多种另外的治疗剂以该式I化合物的任何剂量量(例如，5mg至300mg 化合物)组合。

在一些实施方式中，提供了包含与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合的治疗有效量的本文公开的化合物，以及药学上可接受的赋形剂的药物组合物。

在一些实施方式中，提供了包含与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合的治疗有效量的本文公开的化合物的组合药剂。

在一些实施方式中，提供了包含与治疗有效量的一种或多种(例如，一种、两种、三种、一种或两种、或一种至三种)另外的治疗剂组合的治疗有效量的本文公开的化合物的试剂盒。

在一些实施方式中，用于与本文公开的化合物组合的所述另外的治疗剂针对病毒感染有效。

在一些实施方式中，用于与本文公开的化合物组合的所述另外的治疗剂针对沙粒病毒科病毒感染(特别是拉沙病毒和胡宁病毒感染)有效。

在一些实施方式中，将治疗有效量的式I化合物配制成溶液，其可任选地含有治疗有效量的一种或多种可用于治疗沙粒病毒科病毒感染的其他化合物。在一些实施方式中，该溶液可以含有另一种用于治疗沙粒病毒科病毒感染的活性成分。

在一些实施方式中，与本文公开的化合物组合使用的另外的治疗剂针对冠状病毒科病毒感染，特别是SARS病毒和MERS病毒感染具有活性。

在一些实施方式中，将治疗有效量的式I化合物配制成溶液，其可任选地含有治疗有效量的一种或多种可用于治疗冠状病毒科病毒感染的其他化合物。在一些实施方式中，该溶液可以含有另一种用于治疗冠状病毒科病毒感染的活性成分。

在一些实施方式中，与本文公开的化合物组合使用的另外的治疗剂具有针对丝状病毒科病毒感染，特别是马尔堡病毒、埃博拉病毒和/或 Cueva病毒感染的活性。这些其他活性治疗剂的非限制性实例为利巴韦林，帕利珠单抗，motavizumab，RSV-IGIVMEDI-557， A-60444，MDT-637，BMS-433771，胺碘酮，决奈达隆，维拉帕米，埃博拉恢复期血浆(ECP)，TKM-100201，BCX4430((2S,3S,4R,5R)-2-(4- 氨基-5H-吡咯并[3,2-d]嘧啶-7-基)-5-(羟甲基)吡咯烷-3,4-二醇)，法匹拉韦(也称为T-705或Avigan)，T-705单磷酸，T-705二磷酸，T-705 三磷酸，FGI-106(1-N,7-N-双[3-(二甲基氨基)丙基]-3,9-二甲基喹啉并 [8,7-h]喹诺酮-1,7-二胺)，JK-05，TKM-埃博拉，ZMapp，rNAPc2， VRC-EBOADC076076-00-VP，OS-2966，MVA-BN filo，brincidofovir，基于Vaxart腺病毒载体5的埃博拉疫苗，Ad26-ZEBOV，FiloVax疫苗，GOVX-E301，GOVX-E302，埃博拉病毒进入抑制剂(NPC1抑制剂) 和rVSV-EBOV及其混合物。本发明的化合物和组合物还可以与磷酰胺吗啉代寡聚物(PMO)组合使用，后者是合成的反义寡核苷酸类似物，旨在通过与特定RNA序列形成碱基对双链体来干扰翻译过程。PMO的实例包括AVI-7287，AVI-7288，AVI-7537，AVI-7539，AVI-6002和 AVI-6003。本发明的化合物和组合物也可用于与提供给患有丝状病毒科病毒感染的患者的一般护理一起使用，其包括肠胃外液体(包括右旋糖盐水和林格氏乳酸)和营养品，抗生素(包括甲硝唑和头孢菌素抗生素，例如头孢曲松和头孢呋辛)和/或抗真菌预防，发热和止痛药，止吐药 (如甲氧氯普胺)和/或止泻药，维生素和矿物质补充剂(包括维生素K 和硫酸锌)，抗炎剂(如布洛芬)，止痛药和患者人群中其他常见疾病药物，例如抗疟疾药物(包括蒿甲醚和青蒿琥酯-苯芴醇联合疗法)，伤寒(包括喹诺酮类抗生素如环丙沙星，大环内酯类抗生素如阿奇霉素，头孢类抗生素如头孢曲松，或氨基青霉素如氨苄西林)或志贺氏菌病。

在一些实施方式中，将治疗有效量的式I化合物配制成溶液，其可任选地含有治疗有效量的一种或多种其他可用于治疗丝状病毒科病毒感染的化合物。在一些实施方式中，该溶液可以含有另一种用于治疗丝状病毒科病毒感染的活性成分。

在一些实施方式中，与本文公开的化合物组合使用的另外的治疗剂具有针对黄病毒科病毒感染，特别是寨卡病毒感染的活性。这些其他活性治疗剂的非限制性实例为阿莫地喹，氯喹，利巴韦林，干扰素α， BCX4430，NITD008和单克隆抗体。

在一些实施方式中，将治疗有效量的式I化合物配制成溶液，其可任选地含有治疗有效量的一种或多种其他可用于治疗黄病毒科病毒感染的化合物。在一些实施方式中，该溶液可以含有另一种用于治疗黄病毒科病毒感染的活性成分。

在一些实施方式中，与本文公开的化合物组合使用的另外的治疗剂具有针对副粘病毒科病毒感染，特别是RSV感染的活性。这些其他活性治疗剂的非限制性实例为利巴韦林，沙丁胺醇，肾上腺素和帕利珠单抗。

在一些实施方式中，将治疗有效量的式I化合物配制成溶液，其可任选地含有治疗有效量的一种或多种可用于治疗副粘病毒科病毒感染的其他化合物。在一些实施方式中，该溶液可以含有另一种用于治疗副粘病毒科病毒感染的活性成分。

在一些实施方式中，当本文公开的化合物与一种或多种如上所述的另外的治疗剂组合时，组合物的组分以同时或顺序方案施用。当顺序施用时，组合可以分两次或更多次施用而施用。

在一些实施方式中，将治疗有效量的本文公开的化合物与治疗有效量的一种或多种另外的治疗剂以单位剂量形式组合以同时施用于患者，例如作为用于口服施用的固体剂量形式。

在一些实施方式中，治疗有效量的本文公开的化合物与一种或多种另外的治疗剂一起施用。治疗有效量的本文公开的化合物与治疗有效量的一种或多种另外的治疗剂的共同施用通常是指同时或顺序施用本文公开的化合物以及一种或多种另外的治疗剂，使得治疗有效量的本文公开的化合物以及一种或多种另外的治疗剂均存在于患者的身体内。

共同施用包括在施用治疗有效量的一种或多种另外的治疗剂的单位剂量之前或之后施用包含治疗有效量的一种或多种本文公开的化合物的单位剂量，例如，本文公开的化合物可以在施用一种或多种另外的治疗剂的数秒、数分钟或数小时内施用。例如，在一些实施方式中，首先施用单位剂量的本文公开的化合物，然后在数秒或数分钟内施用单位剂量的一种或多种另外的治疗剂。或者，在其他实施方式中，首先施用单位剂量的一种或多种另外的治疗剂，然后在数秒或数分钟内施用单位剂量的本文公开的化合物。在一些实施方式中，首先施用单位剂量的本文公开的化合物，然后在数小时时段(例如，1-12小时)后施用单位剂量的一种或多种另外的治疗剂。在其他实施方式中，首先施用单位剂量的一种或多种另外的治疗剂，然后在数小时时段(例如，1-12小时)后施用单位剂量的本文公开的化合物。

V.治疗方法

在一些实施方式中，本发明涉及治疗选自沙粒病毒科、冠状病毒科、丝状病毒科、黄病毒科和副粘病毒科的病毒的方法。

在一些实施方式中，本发明涉及通过施用本文提供的式I化合物来治疗沙粒病毒科病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明涉及通过施用本文提供的式I化合物来治疗选自以下的沙粒病毒科物种感染的方法：Allpahuayo病毒(ALLV)、Amapari病毒(AMAV)、熊峡谷病毒 (BCNV)、卡塔琳娜病毒、Chapare病毒、Cupiqui病毒(CPXV)、丹顿农病毒、Flexal病毒(FLEV)、瓜纳里托病毒(GTOV)、Ippy病毒(IPPYV)、胡宁病毒(JUNV)、Kodoko病毒、拉沙病毒(LASV)、莱蒂罗氏病毒 (LATV)、淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)、Lujo病毒、Machupo病毒(MACV)、Mobala病毒(MOBV)、Morogoro病毒、Mopeia病毒(MOPV)、 Oliveros病毒(OLVV)、Parana病毒(PARV)、皮钦德病毒(PICV)、Pinhal 病毒、Pirital病毒(PIRV)、萨比亚病毒(SABV)、斯金纳箱病毒、Tacaribe 病毒(TCRV)、塔米埃米病毒(TAMV)和白水阿罗约病毒(WWAV)。在一些实施方式中，本发明涉及通过施用本文提供的式I化合物来治疗拉沙病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明涉及通过施用本文提供的式I化合物来治疗胡宁病毒感染的方法。

在一些实施方式中，本发明涉及通过施用本文提供的式I化合物来治疗冠状病毒科病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明涉及通过施用本文提供的式I化合物来治疗中东呼吸综合症(MERS)感染的方法。在一些实施方式中，本发明涉及通过施用本文提供的式I化合物来治疗严重急性呼吸综合症(SARS)感染的方法。

在一些实施方式中，本发明涉及通过施用本文提供的式I化合物来治疗丝状病毒科病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明涉及通过施用本文提供的式I化合物来治疗埃博拉病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明涉及通过施用本文提供的式I化合物来治疗选自以下的埃博拉病毒感染的方法：扎伊尔(即埃博拉病毒，EBOV)，苏丹，大森林(TaiForest)，邦迪布吉和雷斯顿。在一些实施方式中，本发明涉及通过施用本文提供的式I化合物来治疗马尔堡病毒感染的方法。

在一些实施方式中，本发明涉及通过施用本文提供的式I化合物来治疗黄病毒科病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明涉及通过施用本文提供的式I化合物来治疗寨卡病毒感染的方法。

在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物用于治疗沙粒病毒科病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物用于通过施用本文提供的式I化合物来治疗选自以下的沙粒病毒科物种感染的方法：Allpahuayo病毒(ALLV)、Amapari病毒 (AMAV)、熊峡谷病毒(BCNV)、卡塔琳娜病毒、Chapare病毒、Cupiqui 病毒(CPXV)、丹顿农病毒、Flexal病毒(FLEV)、瓜纳里托病毒(GTOV)、 Ippy病毒(IPPYV)、胡宁病毒(JUNV)、Kodoko病毒、拉沙病毒(LASV)、莱蒂罗氏病毒(LATV)、淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)、Lujo病毒、 Machupo病毒(MACV)、Mobala病毒(MOBV)、Morogoro病毒、Mopeia 病毒(MOPV)、Oliveros病毒(OLVV)、Parana病毒(PARV)、皮钦德病毒 (PICV)、Pinhal病毒、Pirital病毒(PIRV)、萨比亚病毒(SABV)、斯金纳箱病毒、Tacaribe病毒(TCRV)、塔米埃米病毒(TAMV)和白水阿罗约病毒(WWAV)。在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物用于治疗拉沙病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物用于治疗胡宁病毒感染的方法。

在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物用于治疗冠状病毒科病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物用于治疗中东呼吸综合征(MERS)感染的方法。在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物用于治疗严重急性呼吸系统综合症(SARS)感染的方法。

在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物用于治疗丝状病毒科病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物用于治疗埃博拉病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物用于治疗选自以下的埃博拉病毒感染的方法：扎伊尔(即埃博拉病毒，EBOV)，苏丹，大森林(Tai Forest)，邦迪布吉和雷斯顿。在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物用于治疗马尔堡病毒感染的方法。

在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物用于治疗黄病毒科病毒感染的方法。在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式 I化合物用于治疗寨卡病毒感染的方法。

在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物在制备用于治疗沙粒病毒科病毒感染的药物中的用途。在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物在制备用于治疗选自以下的沙粒病毒科物种感染的药物中的用途：Allpahuayo病毒(ALLV)、Amapari病毒 (AMAV)、熊峡谷病毒(BCNV)、卡塔琳娜病毒、Chapare病毒、Cupiqui 病毒(CPXV)、丹顿农病毒、Flexal病毒(FLEV)、瓜纳里托病毒 (GTOV)、Ippy病毒(IPPYV)、胡宁病毒(JUNV)、Kodoko病毒、拉沙病毒(LASV)、莱蒂罗氏病毒(LATV)、淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒 (LCMV)、Lujo病毒、Machupo病毒(MACV)、Mobala病毒(MOBV)、 Morogoro病毒、Mopeia病毒(MOPV)、Oliveros病毒(OLVV)、Parana 病毒(PARV)、皮钦德病毒(PICV)、Pinhal病毒、Pirital病毒(PIRV)、萨比亚病毒(SABV)、斯金纳箱病毒、Tacaribe病毒(TCRV)、塔米埃米病毒(TAMV)和白水阿罗约病毒(WWAV)。在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物在制备用于治疗拉沙病毒感染的药物中的用途。在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物在制备用于治疗胡宁病毒感染的药物中的用途。

在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物在制备用于治疗冠状病毒科感染的药物中的用途。在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物在制备用于治疗MERS感染的药物中的用途。在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物在制备用于治疗 SARS感染的药物中的用途。

在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物在制备用于治疗丝状病毒科病毒感染的药物中的用途。在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物在制备用于治疗埃博拉病毒感染的药物中的用途。在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物在制备用于治疗选自以下的埃博拉病毒感染的药物中的用途：扎伊尔(即埃博拉病毒，EBOV)，苏丹，大森林(Tai Forest)，邦迪布吉和雷斯顿。在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物在制备用于治疗马尔堡病毒感染的药物中的用途。

在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物在制备用于治疗黄病毒科病毒感染的药物中的用途。在一些实施方式中，本发明涉及本文提供的式I化合物在制备用于治疗寨卡病毒感染的药物中的用途。

VI.XRPD数据

在一些实施方式中，结晶形式的特征在于通过X射线粉末衍射图谱 (XRPD)确定的晶间面间隔。XRPD的衍射图通常由绘制峰的强度与峰的位置的图表示，即以度为单位的衍射角2θ(2-θ)。可以根据峰位置及其相对强度来选择给定XRPD的特征峰，以方便地将该晶体结构与其他晶体结构区分开。

本领域技术人员认识到，相同化合物的给定结晶形式的XRPD峰位置和/或强度的测量值将在误差范围内变化。°2θ的值允许适当的误差范围。通常，误差范围用“±”表示。例如，约“8.7±0.3”的°2θ表示约8.7±0.3(即约9.0)至约8.7-0.3(即约8.4)的范围。取决于样品制备技术、应用于仪器的校准技术、人类操作变化等，本领域技术人员认识到XRPD的适当的误差范围可为±0.5；±0.4；±0.3；±0.2；±0.1；±0.05；或更小。在本发明的一些实施方式中，XRPD误差范围是±0.2。在本发明的一些实施方式中，XRPD误差范围是±0.5。

用于XRPD分析的方法和设备的另外的细节在实施例部分中描述。

结晶式I形式I的XRPD峰显示在以下表1A中。

表1A:结晶式I形式I的XRPD峰

结晶式I形式II的XRPD峰显示在以下表1B中。

表1B:结晶式I形式II的XRPD峰

结晶式I形式III的经计算的粉末图谱峰显示在以下表1C中。

表1C:结晶式I形式III的经计算的粉末图谱峰

结晶式I形式IV的XRPD峰显示在以下表1D中。

表1D:结晶式I形式IV的XRPD峰

通过包括将式I与溶剂(其中溶剂为乙酸异丙酯)组合的方法制备的式I形式II和形式IV的混合物(混合物I)的XRPD峰显示在以下表 1E中。

表1E:通过包括将式I与溶剂(其中溶剂为乙酸异丙酯)组合的方法制备的式I形式II和形式IV的混合物(混合物I)的XRPD 峰

通过包括将式I与溶剂(其中溶剂为乙酸异丙酯)组合的方法制备的式I形式II和形式IV的混合物(混合物II)的XRPD峰在以下表1F 中。

表1F:通过包括将式I与溶剂(其中溶剂为乙酸异丙酯)组合的方法制备的式I形式II和形式IV的混合物(混合物II)的 XRPD峰

通过包括将式I与溶剂在一温度下组合(其中溶剂为异丙醇和水，且温度为20℃)的方法制备的式I形式II和形式IV的混合物(混合物 III)的XRPD峰在以下表1G中。

表1G:通过包括将式I与溶剂在一温度下组合(其中溶剂为异丙醇和水，且温度为20℃)的方法制备的式I形式II和形式 IV的混合物(混合物III)的XRPD峰

结晶式I马来酸盐形式I的XRPD峰在以下表1H中。

表1H:结晶式I形式I马来酸盐的XRPD峰

VII.结晶形式的制备

A.式I

一种合成(S)-2-(((S)-(((2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基) 丙酸-2-乙基丁基酯(例如式I化合物)的方法先前已描述于共同待决美国专利申请号14/926,062，以及于2015年10月29日提交的标题为“用于治疗丝状病毒科病毒感染的方法”的相关共同待决PCT专利申请号 US2015/057933中。该参考文献在此通过引用整体并入本文，且特别是关于(S)-2-(((S)-(((2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7- 基)-5-氰基-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸-2-乙基丁基酯的合成。

例如，在一个方面中，提供了一种生产包含式I的一种或多种结晶形式的组合物的方法，其中该方法包括将式I化合物与合适的溶剂或合适的溶剂的混合物组合以生产包含式I化合物的一种或多种结晶形式的组合物。在另一方面中，提供了另一种生产包含式I的一种或多种结晶形式的组合物的方法，其中该方法包括将式I与合适的溶剂或合适的溶剂的混合物组合。

特定溶剂或溶剂组合或组合溶剂的方法的选择会影响式I的一种结晶形式相对有利于另一种结晶形式的形成。适用于晶体形成的溶剂可包括，例如，水，异丙醚，乙酸异丙酯，异丙醇，乙醇，二氯甲烷，2-甲基四氢呋喃，甲基叔丁基醚，庚烷，乙腈及其任何混合物。

杂质的存在会影响式I的一种结晶形式相对有利于另一种结晶形式的形成。在一些实施方式中，形式是通过包含具有杂质的式I的方法制备的。在另一实施方式中，形式是通过包含基本上纯的式I的方法制备的。

在另一方面中，还提供了根据本文所述的任何方法生产的一种或多种式I的结晶形式。

应理解，本文所述的用于制备结晶形式(包括结晶形式I至IV和/ 或混合物I、II和/或III中的任何一种或多种)的方法相比于在实验室规模产生的用于制备式I的方法可产生数量和质量差异。

式I形式I

在一些实施方式中，提供了一种生产包含结晶形式I的组合物的方法，其中该方法包括将式I与溶剂组合以生产包含结晶式I形式I的组合物，其中溶剂是异丙醚。

提供了通过将式I与溶剂组合而生产的结晶式I形式I，其中溶剂为异丙醚。

式I形式II

在一些实施方式中，提供了一种生产包含结晶式I形式II的组合物的方法，其中该方法包括将式I与溶剂组合以生产包含结晶式I形式II 的组合物，其中溶剂是乙醇和水。

提供了通过将式I与溶剂组合而生产的结晶式I形式II，其中溶剂为乙醇和水。

在一些实施方式中，提供了一种生产包含结晶式I形式II的组合物的方法，其中该方法包括在一温度下将式I与溶剂组合以生产包含结晶式I形式II的组合物，其中溶剂为异丙醇和水，且温度为50℃。

提供了通过在一温度下将式I与溶剂组合而生产的结晶式I形式II，其中溶剂为异丙醇和水，且温度为50℃。

在一些实施方式中，提供了一种通过使本发明的式I与异丙醇和水的溶剂混合物在适于制备结晶型I形式II的条件下接触而生产结晶式I 形式II的方法，其中式I保持基本上不溶于溶剂混合物中。本发明方法中使用的式I可为结晶式I，例如结晶形式I，结晶形式II，结晶形式III，结晶形式IV，或其混合物，例如混合物I，混合物II或混合物III。在一些实施方式中，式I可为结晶式I。在一些实施方式中，式I可为式I 形式II和式I形式IV的混合物。在一些实施方式中，式I可为混合物 I，混合物II或混合物III。在一些实施方式中，式I可为混合物II。在一些实施方式中，形式II被制备成基本上不含形式IV。在一些实施方式中，式I包括形式II和形式IV的混合物，溶剂混合物包括异丙醇和水，其中式I保持基本上不溶于溶剂混合物中，从而制备基本上不含结晶形式IV的结晶形式II。

异丙醇和水可以任何合适的比率存在于溶剂混合物中，其中水的体积至少等于异丙醇的体积。异丙醇和水的代表性比率包括1:1至约1:5 (V/V)，或1:1至约1:4(V/V)，或1:1至约1:3(V/V)，或1:1至约1:2(V/V)，或约1:1.5至约1:2(V/V)。异丙醇和水的代表性比率包括至少1:1(V/V)，以及1:1.1，1:1.2，1:1.3，1:1.4，1:1.5，1:1.6，1:1.7，1:1.8，1:1.9，1:2，1:2.5，1:3，1:4或1:5(V/V)。异丙醇和水的其他比率包括2:2，2:3，2:4，2:5，2:6，2:7，2:8，2:9，2:10，3:3，3:4，3:5，3:6，3:7，3:8，3:9或 3:10(V/V)。在一些实施方式中，溶剂混合物包括比率为1:1至约1:2(V/V) 的异丙醇和水。在一些实施方式中，溶剂混合物包括比率为约2:3至约 1:2(V/V)的异丙醇和水。在一些实施方式中，溶剂混合物包括比率至少为1:1(V/V)的异丙醇和水，其中水的存在体积不少于异丙醇的体积。在一些实施方式中，溶剂混合物包括比率为约3:4(V/V)的异丙醇和水。在一些实施方式中，溶剂混合物包括比率为约3:5(V/V)的异丙醇和水。在一些实施方式中，溶剂混合物包括比率为约1:2(V/V)的异丙醇和水。

制备结晶式I形式II的方法可在任何合适的温度下进行。制备结晶型I形式II的代表性温度为约20℃，或25，30，35，40，45，50，51， 52，53，54，55，56，57，58，59，60，65，70，75或约80℃。代表性温度范围包括20℃至80℃，或25℃至70℃，30℃至60℃，40℃至 60℃，45℃至60℃，或45℃至55℃。在一些实施方式中，该接触步骤在约30℃至约60℃的温度下进行。在一些实施方式中，该接触步骤在约45℃至约60℃的温度下进行。在一些实施方式中，该接触步骤在约 50℃的温度下进行。

在一些实施方式中，该接触步骤在约30℃至约60℃的温度下进行，其中溶剂混合物包括比率至少为1:1(V/V)的异丙醇和水，其中水的存在体积不少于异丙醇的体积。在一些实施方式中，该接触步骤在约45℃至约60℃的温度下进行，其中溶剂混合物包括比率为1:1至约1:3(V/V) 的异丙醇和水。在一些实施方式中，该接触步骤在约45℃至约60℃的温度下进行，其中溶剂混合物包括比率为约2:3至约2:5(V/V)的异丙醇和水。在一些实施方式中，该接触步骤在约45℃至约60℃的温度下进行，其中溶剂混合物包括比率为约3:4(V/V)的异丙醇和水。在一些实施方式中，该接触步骤在约45℃至约60℃的温度下进行，其中溶剂混合物包括比率为约3:5(V/V)的异丙醇和水。在一些实施方式中，该接触步骤在约50℃的温度下进行，其中溶剂混合物包括比率为约1:2(V/V)的异丙醇和水。

在一些实施方式中，结晶形式II的制备基本上不含形式IV。在一些实施方式中，混合物II包含式I形式II和式I形式IV，以使得结晶形式II的制备基本上不含式I形式IV。

在一些实施方式中，提供了一种生产结晶形式II的方法，其包括将式I和溶剂混合物接触，其中式I包含形式II和形式IV，其中溶剂混合物包含比率为约3:5(V/V)的异丙醇和水，且在约50℃的温度下，并且其中式I保持基本上不溶于溶剂混合物中，由此制备基本上不含结晶形式IV的结晶形式II。

在一些实施方式中，提供了一种生产包含结晶式I形式II的组合物的方法，其中该方法包括将式I与溶剂组合以生产包含结晶式I形式II 的组合物，其中溶剂为1-丙醇。

提供了通过将式I与溶剂组合而生产的结晶式I形式II，其中溶剂为1-丙醇。

在一些实施方式中，提供了一种生产包含结晶式I形式II的组合物的方法，其中该方法包括将式I与溶剂组合以生产包含结晶式I形式II 的组合物，其中溶剂为四氢呋喃。

提供了通过将式I与溶剂组合而生产的结晶式I形式II，其中溶剂为四氢呋喃。

在一些实施方式中，提供了一种生产包含结晶式I形式II的组合物的方法，其中该方法包括将式I与溶剂组合以生产包含结晶式I形式II 的组合物，其中溶剂为2-丙醇。

提供了通过将式I与溶剂组合而生产的结晶式I形式II，其中溶剂为2-丙醇。

在一些实施方式中，提供了一种生产包含结晶式I形式II的组合物的方法，其中该方法包括将式I与溶剂组合以生产包含结晶式I形式II 的组合物，其中溶剂为乙腈。

提供了通过将式I与溶剂组合而生产的结晶式I形式II，其中溶剂为乙腈。

在一些实施方式中，提供了一种生产包含结晶式I形式II的组合物的方法，其中该方法包括将式I与溶剂组合以生产包含结晶式I形式II 的组合物，其中溶剂为二氯甲烷。

提供了通过将式I与溶剂组合而生产的结晶式I形式II，其中溶剂为二氯甲烷。

在一些实施方式中，提供了一种生产包含结晶式I形式II的组合物的方法，其中该方法包括将式I与溶剂组合以生产包含结晶式I形式II 的组合物，其中溶剂为乙醇。

提供了通过将式I与溶剂组合而生产的结晶式I形式II，其中溶剂为乙醇。

在一些实施方式中，提供了一种生产包含结晶式I形式II的组合物的方法，其中该方法包括将式I与溶剂组合以生产包含结晶式I形式II 的组合物，其中溶剂为甲基叔丁基醚。

提供了通过将式I与溶剂组合而生产的结晶式I形式II，其中溶剂为甲基叔丁基醚。

在一些实施方式中，提供了一种生产包含结晶式I形式II的组合物的方法，其中该方法包括将式I与溶剂组合以生产包含结晶式I形式II 的组合物，其中溶剂为2-甲基四氢呋喃。

提供了通过将式I与溶剂组合而生产的结晶式I形式II，其中溶剂为2-甲基四氢呋喃。

在一些实施方式中，提供了一种生产包含结晶式I形式II的组合物的方法，其中该方法包括将式I与溶剂组合以生产包含结晶式I形式II 的组合物，其中溶剂为乙酸乙酯和水。

提供了通过将式I与溶剂组合而生产的结晶式I形式II，其中溶剂为乙酸乙酯和水。

在一些实施方式中，提供了一种生产包含结晶式I形式II的组合物的方法，其中该方法包括将式I与溶剂组合以生产包含结晶式I形式II 的组合物，其中溶剂为甲基乙基酮。

提供了通过将式I与溶剂组合而生产的结晶式I形式II，其中溶剂为甲基乙基酮。

式I形式III

在一些实施方式中，提供了一种生产包含结晶形式III的组合物的方法，其中该方法包括将式I与溶剂组合以生产包含结晶形式III的组合物，其中溶剂为二氯甲烷。

提供了通过将式I与溶剂组合而生产的结晶形式III，其中溶剂为二氯甲烷。

式I形式IV

在一些实施方式中，提供了一种生产包含结晶式I形式IV的组合物的方法，其中该方法包括将式I与溶剂组合以生产包含结晶式I形式 IV的组合物，其中溶剂为2-甲基四氢呋喃和甲基叔丁基醚。

提供了通过将式I与溶剂组合而生产的结晶式I形式IV，其中溶剂为2-甲基四氢呋喃和甲基叔丁基醚。

在一些实施方式中，提供了一种生产包含结晶式I形式IV的组合物的方法，其中该方法包括将式I与溶剂组合以生产包含结晶式I形式 IV的组合物，其中溶剂为2-甲基四氢呋喃和庚烷。

提供了通过将式I与溶剂组合而生产的结晶式I形式IV，其中溶剂为2-甲基四氢呋喃和庚烷。

B.式I的形式的混合物

在一些实施方式中，本发明涉及(S)-2-(((S)-(((2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸-2-乙基丁基酯结晶形式的混合物(式I混合物)。

在一些实施方式中，本发明涉及(S)-2-(((S)-(((2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸-2-乙基丁基酯形式II和

(S)-2-(((S)-(((2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸-2-乙基丁基酯形式IV的混合物。

在一些实施方式中，本发明涉及通过包括将式I与溶剂组合的方法而制备的(S)-2-(((S)-(((2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪 -7-基)-5-氰基-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸-2-乙基丁基酯结晶形式的混合物，其中溶剂选自乙酸异丙酯以及异丙醇和水的混合物。在一些实施方式中，本发明涉及通过包括将式I与溶剂组合的方法而制备的(S)-2-(((S)-(((2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基吡咯并 [2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸-2-乙基丁基酯形式II和

(S)-2-(((S)-(((2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸-2-乙基丁基酯形式IV的混合物，其中溶剂为乙酸异丙酯和异丙醇。在一些实施方式中，本发明涉及通过包括将式I与溶剂组合的方法而制备的 (S)-2-(((S)-(((2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸-2-乙基丁基酯形式II和(S)-2-(((S)-(((2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4] 三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸-2-乙基丁基酯形式IV的混合物，其中溶剂为乙酸异丙酯。在一些实施方式中，本发明涉及通过包括将式I与溶剂组合的方法而制备的 (S)-2-(((S)-(((2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸-2-乙基丁基酯形式II和(S)-2-(((S)-(((2R,3S,4R,5R)-5-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4] 三嗪-7-基)-5-氰基-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲氧基)(苯氧基)磷酰基)氨基)丙酸-2-乙基丁基酯形式IV的混合物，其中溶剂为异丙醇和水的混合物。

式I的形式Ⅱ和形式Ⅳ的混合物可以通过使用多种溶剂或其混合物而制备。代表性的溶剂包括但不限于水，异丙醇(IPA)，乙酸异丙酯 (IPAc)，四氢呋喃(THF)，2-甲基四氢呋喃(MeTHF)，甲基叔丁基醚(MTBE)及其组合。形式II和形式IV的混合物可导致以不同量存在的形式II和形式IV。形式II和形式IV的代表性混合物包括混合物 I、混合物II和混合物III等。

在一些实施方式中，提供了一种生产形式Ⅱ和形式Ⅳ的混合物的方法，其中该方法包括将式Ⅰ与溶剂组合，其中溶剂为乙酸异丙酯。

提供了通过将式I与溶剂组合而生产的形式II和形式IV的混合物，其中溶剂为乙酸异丙酯。提供了通过将式I与溶剂组合而生产的形式II 和形式IV的混合物，其中溶剂为异丙醇和水的混合物。提供了通过将式I与溶剂组合而生产的形式II和形式IV的混合物，其中溶剂为2-甲基四氢呋喃和甲基叔丁基醚的混合物。

当溶剂包括溶剂混合物时，该溶剂混合物可包括适于溶解起始物料的溶剂和基本上不能溶解起始物料的反溶剂。溶剂和反溶剂可以任何合适的比率存在。溶剂和反溶剂的代表性比率包括10:1至1:10，或5:1至 1:5，4:1至1:4，3:1至1:3，或2:1至1:2(V/V)。溶剂与反溶剂的比率也可以在结晶过程中改变，例如溶剂与反溶剂的起始比率为10:1，9:1， 8:1，7:1，6:1，5:1，4:1，3:1或2:1，然后加入另外的反溶剂以将溶剂与反溶剂的比率改变为1:2，1:3，1:4，1:5，1:6，1:7，1:8，1:9或1:10。在一些实施方式中，溶剂与反溶剂的初始比率可为约3:1(V/V)，且溶剂与反溶剂的最终比率可为约1:2(V/V)。在一些实施方式中，异丙醇与水的初始比率可为约3:1(V/V)，且最终比率可为约1:2(V/V)。在一些实施方式中，溶剂与反溶剂的初始比率可为约8:1(V/V)，且溶剂与反溶剂的最终比率可为约1:2(V/V)。在一些实施方式中，2-甲基四氢呋喃 (MeTHF)与甲基叔丁基醚(MTBE)的初始比率可为约8:1(V/V)，且最终比率可为约1:2(V/V)。

混合物I

在一些实施方式中，提供了一种生产混合物I的方法，其中该方法包括将式I与溶剂组合，其中溶剂为乙酸异丙酯。

提供了通过将式I与溶剂组合而生产的混合物I，其中溶剂为乙酸异丙酯。

混合物II

在一些实施方式中，提供了一种生产混合物II的方法，其中该方法包括将式I与溶剂组合，其中溶剂为乙酸异丙酯。

提供了通过将式I与溶剂组合而生产的混合物II，其中溶剂为乙酸异丙酯。

混合物III

在一些实施方式中，提供了一种生产混合物III的方法，其中该方法包括将式I与溶剂在一温度下组合，其中溶剂为异丙醇和水，且温度为约20℃。

提供了通过将式I与溶剂在一温度下组合而生产的混合物III，其中溶剂为异丙醇和水，且温度为约20℃。

C.式I马来酸盐

在一些实施方式中，提供了一种生产包含结晶式I马来酸盐形式I 的组合物的方法，其中该方法包括将式I与马来酸在溶剂中组合以生产包含结晶式I马来酸盐形式I的组合物，其中溶剂为甲醇和乙酸异丙酯。

提供了通过在溶剂中将式I与马来酸组合以生产包含结晶式I马来酸盐的组合物而产生的式I马来酸盐形式I，其中溶剂为甲醇和乙酸异丙酯。

VIII.制造药物产品的用途

还提供了本文所述的结晶形式在制造药物产品中的用途。本文所述的一种或多种式I化合物可用作制造过程中的中间体以生产药物产品。

在一些实施方式中，式I化合物用于制造活性药物成分。在一些实施方式中，式I形式I用于制造活性药物成分。在一些实施方式中，式 I形式II用于制造活性药物成分。在一些实施方式中，式I形式III用于制造活性药物成分。在一些实施方式中，式I形式IV用于制造活性药物成分。在一些实施方式中，式I的形式的混合物用于制造活性药物成分。在一些实施方式中，式I形式II和式I形式IV的混合物用于制造活性药物成分。在一些实施方式中，混合物I用于制造活性药物成分。在一些实施方式中，混合物II用于制造活性药物成分。在一些实施方式中，混合物III用于生产活性药物成分。在一些实施方式中，式I马来酸盐形式I用于制造活性药物成分。

IX.制品和试剂盒

可以制备包含一种或多种本文所述的式I化合物并在一种或多种药物上可接受的赋形剂或其他成分中配制的组合物，将其置于合适的容器中，并标记用于治疗指定的病症。因此，还考虑了一种制品，例如包含剂量形式的本文所述的一种或多种式I化合物以及含有该化合物的使用说明的标签的容器。

在一些实施方式中，制品是包含剂量形式的本文所述的一种或多种式I化合物、以及一种或多种药物上可接受的赋形剂或其他成分的容器。在本文所述制品的一些实施方式中，所述剂量形式是溶液。

也考虑了试剂盒。例如，试剂盒可包含药物组合物的剂量形式以及包含该组合物在治疗医学病症中的使用说明的包装说明书。在另一个实施方式中，试剂盒可以包含多个单独的剂量形式，每个剂量形式包含治疗有效量的如本文所述的化合物，以及将它们施用于有此需要的人的说明书。每种单独的剂量形式可包含治疗有效量的如本文所述的化合物与至少一种药学上有效的赋形剂的组合。单独的剂量形式可以为例如溶液、片剂、丸剂、胶囊、小袋、舌下药物、冻干粉末、喷雾干燥粉末或用于口服、肠胃外或局部施用的液体组合物的形式。试剂盒中使用的说明书可为用于治疗沙粒病毒科病毒感染，冠状病毒科病毒感染，丝状病毒科病毒感染，黄病毒科病毒感染或副粘病毒科病毒感染，包括本文所述的每种物种。在一些实施方式中，试剂盒中使用的说明书可为用于治疗人中的拉沙病毒感染。在一些实施方式中，试剂盒中使用的说明书可为用于治疗人中的胡宁病毒感染。在一些实施方式中，试剂盒中使用的说明书可为用于治疗人中的SARS病毒感染。在一些实施方式中，试剂盒中使用的说明书可为用于治疗人中的MERS病毒感染。在一些实施方式中，试剂盒中使用的说明书可为用于治疗人中的埃博拉病毒感染。在一些实施方式中，试剂盒中使用的说明书可为用于治疗人中的寨卡病毒感染。在一些实施方式中，试剂盒中使用的说明书可为用于治疗人中的 RSV感染。说明书可针对本文所述的任何病毒感染和方法。说明书可为用于预防或治疗现有的病毒感染。

在一些实施方式中，本文所述的结晶或盐形式可能潜在地表现出改善的性质。例如，在一些实施方式中，本文所述的结晶或盐形式可能潜在地表现出改善的稳定性。此种改善的稳定性可能对式I化合物的制备具有潜在的有益影响，例如提供长时期储存工艺中间体的能力。改善的稳定性还可能有益于式I化合物的组合物或药物组合物。在一些实施方式中，本文所述的结晶或盐还可能潜在地导致式I化合物的产率提高，或可能导致式I化合物质量的改善。在一些实施方式中，本文所述的结晶、盐和溶剂化物形式还可表现出改善的药代动力学性质和/或潜在改善的生物利用度。

X.方法

实施例1.式I形式I

将式I(56.2mg)添加到玻璃小瓶中。加入异丙醚(约0.5mL)，将小瓶封盖，并将悬浮液在约21℃下搅拌约4天。通过离心/过滤从悬浮液中分离出固体形式的式I形式I，并如下所述进行表征。

实施例2.式I形式II

将式I(0.03至0.07g)添加到反应容器中，并向其中加入约0.1至 0.4g的乙醇和水混合物，水活度范围为0.2至0.8。将容器密封并在室温下搅拌约两周。分离式I形式II并如下所述进行表征。

在另一种方法中，将式I(3.7g)添加到反应容器中。加入异丙醇(约11mL)和水(约4mL)，并将悬浮液加热至约50℃，直至实现溶解。在约50℃下经约1小时内添加水(约2mL)，然后添加约37mg 的式I形式II晶种。在约50℃下经约2.5小时添加水(约6mL)，并将悬浮液在约50℃下搅拌约1.5小时。经约6小时添加水(约11mL)，并将悬浮液在约50℃下搅拌约9小时。将悬浮液经约6小时冷却至约 20℃，并将该悬浮液在约20℃下搅拌约17小时。通过过滤从悬浮液中分离出固体形式的式I形式II，并如下所述进行表征。

在另一种方法中，将结晶式I(7.0g)添加到反应容器中。加入异丙醇(约21mL)和水(约35mL)，并将悬浮液加热至约50℃。将悬浮液在约50℃下搅拌约18小时，然后经约3小时冷却至约20℃，并在约20℃下搅拌约3小时。通过过滤从悬浮液中分离出固体形式的式I 形式II，并如下所述进行表征。

实施例3.式I形式III

在约21℃下，将式I(41.2mg)溶解在具有二氯甲烷(97.9mg) 的烧瓶中。将烧瓶封盖几天。观察到式I形式III。

实施例4.式I形式IV

MeTHF/MTBE

在约20℃下，在反应容器中搅拌式I(8.0g)在2-甲基四氢呋喃 (32mL)中的粗溶液，并经约1小时加入甲基叔丁基醚(4mL)。添加含有形式II和形式IV的混合物的晶种，并将悬浮液在约20℃下搅拌。在约20℃下经约5天的时间加入甲基叔丁基醚(64mL)，并将悬浮液在约20℃下搅拌2天。通过过滤从悬浮液中分离出固体形式的式I形式 IV，并进行干燥。

MeTHF/MTBE

将(3aR,4R,6R,6aR)-4-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-6-(羟甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-甲腈(10g，30 mmol)、((S)-(4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷酰基)-L-丙氨酸2-乙基丁基酯(14 g，32mmol)和氯化镁(4.4g，46mmol)加至反应容器中。在约25℃下，加入四氢呋喃(约100mL)，然后加入N,N-二异丙基乙胺(13mL，76 mmol)。约3h后，将反应混合物加入甲基叔丁基醚(约100mL)和柠檬酸水溶液(10wt％，约100mL)的预冷(约10℃)混合物中。分离有机层和水层，并将有机层用碳酸钾水溶液(10wt％，约150mL)，碳酸钾水溶液(10wt％，两次约100mL)，氯化铵水溶液(10wt％，约100mL)和氯化钠水溶液(15wt％，约100mL)洗涤。将有机层的溶剂交换为乙腈并将体积调节至约100mL。将乙腈溶液冷却至约0℃并加入浓盐酸(约20mL)。约3h后，将反应混合物加入2-甲基四氢呋喃(约100mL)和碳酸氢钾水溶液(20wt％，约100mL)的预冷(约10℃)混合物中，并用2-甲基四氢呋喃(约50mL)向前冲洗。分离有机层和水层，并将有机层用碳酸氢钾水溶液(20wt％，约40mL)和氯化钠水溶液(15wt％，约100mL)洗涤。将有机层浓缩至约50mL，并加入2-甲基四氢呋喃(约50mL)。然后将有机层用氯化钠水溶液(15wt％，约50mL)洗涤。将有机层浓缩并自2- 甲基四氢呋喃蒸馏，直至溶液达到不超过0.2％的目标水含量。将2-甲基四氢呋喃溶液(约200mL)抛光过滤，然后将一部分(约三分之一)2-甲基四氢呋喃溶液浓缩至约23mL。在约20℃下加入式I形式IV晶种 (约40mg)，并经约8h加入甲基叔丁基醚(约43mL)。将悬浮液在约20 ℃下搅拌约一周。通过过滤从悬浮液中分离出固体形式的式I形式IV，并如下所述进行表征。

MeTHF/庚烷

在另一种方法中，将(3aR,4R,6R,6aR)-4-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4] 三嗪-7-基)-6-(羟甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-甲腈(3.0g，9.0mmol)、((S)-(4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷酰基)-L-丙氨酸2-乙基丁基酯(4.3g，9.5mmol)和氯化镁(1.3g，14mmol)加至反应容器中。在约25℃下，加入四氢呋喃(约30mL)，然后加入N,N-二异丙基乙胺(3.9mL，23mmo)。约16h后，将反应混合物加入2-甲基四氢呋喃(约30mL)和柠檬酸水溶液(10wt％，约30mL)的预冷(约3℃)混合物中。分离有机层和水层，并将有机层用碳酸钾水溶液(10wt％，约45 mL)，碳酸钾水溶液(10wt％，两次约30mL)和氯化铵水溶液(10wt％，约30mL)洗涤。将有机层的溶剂交换为乙腈并将体积调节至约32mL。将乙腈溶液冷却至约0℃并加入浓盐酸(约6mL)。约2h后，将反应混合物加入2-甲基四氢呋喃(约30mL)和碳酸氢钾水溶液(20wt％，约30 mL)的预冷(约12℃)混合物中。分离有机层和水层，并将有机层用碳酸氢钾水溶液(20wt％，约12mL)和氯化钠水溶液(15wt％，约30mL) 洗涤。将有机层浓缩至约12mL，并加入2-甲基四氢呋喃(约15mL)。然后将有机层用氯化钠水溶液(15wt％，约15mL)洗涤。将有机层浓缩并自2-甲基四氢呋喃蒸馏，直至溶液达到不超过0.2％的目标水含量。将2-甲基四氢呋喃溶液(约60mL)抛光过滤，然后浓缩至约24mL，并将溶液在约20℃下搅拌。加入含有形式II和形式IV的混合物的晶种(约 30mg)，并将庚烷(约18mL)缓慢加至悬浮液。将悬浮液在约21℃下搅拌约1天，然后在约2周后，通过过滤从悬浮液中分离出固体形式的式 I形式IV，并如下所述进行表征。

实施例5.混合物I，形式II和形式IV的混合物

将(3aR,4R,6R,6aR)-4-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-6-(羟甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-甲腈(20g，60 mmol)、((S)-(4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷酰基)-L-丙氨酸2-乙基丁基酯(32 g，72mmol)和氯化镁(8.6g，90mmol)加至反应容器中。在约20℃下，加入四氢呋喃(约200mL)，然后加入N,N-二异丙基乙胺(26mL， 151mmol)。约3h后，将反应混合物加入2-甲基四氢呋喃和柠檬酸水溶液(10wt％)的预冷(约15℃)混合物中。分离有机层和水层，并将有机层用碳酸钾水溶液(10wt％，约300mL)，碳酸钾水溶液(10wt％，两次约200mL)、氯化铵水溶液(10wt％，200mL)和氯化钠水溶液(15 wt％，约200mL)洗涤。将有机层的溶剂交换为乙腈并将体积调节至约 200mL。将乙腈溶液冷却至约0℃并加入浓盐酸(约40mL)。约3h 后，将反应混合物冷却至约-10℃，加入2-甲基四氢呋喃(约200mL)和碳酸氢钾水溶液(20wt％，约200mL)的预冷(约10℃)混合物中。分离有机层和水层，并将有机层用碳酸氢钾水溶液(20wt％，约100mL)和氯化钠水溶液(15wt％，约200mL)洗涤。将有机层浓缩至约140mL，并用氯化钠水溶液(15wt％，约100mL)洗涤。将有机层浓缩并自2-甲基四氢呋喃蒸馏，直至溶液达到不超过0.2％的目标水含量。将2-甲基四氢呋喃溶液(约400mL)抛光过滤，并将溶剂交换为乙酸异丙酯。将乙酸异丙酯溶液(约100mL)在约21℃下搅拌。加入含有形式II和形式 IV的混合物的晶种(约40mg)，并将悬浮液在约21℃下搅拌约3天。通过过滤从悬浮液中分离出固体形式的含有形式II和形式IV的混合物的结晶式I，并如下所述进行表征。

实施例6.混合物II，形式II和形式IV的混合物

将(3aR,4R,6R,6aR)-4-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-6-(羟甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-甲腈(20g，60 mmol)、((S)-(4-硝基苯氧基)(苯氧基)磷酰基)-L-丙氨酸2-乙基丁基酯(29 g，63mmol)和氯化镁(8.6g，90mmol)加至反应容器中。在约20℃下，加入四氢呋喃(约200mL)，然后加入N,N-二异丙基乙胺(26mL， 151mmol)。约4h后，将反应混合物加入甲基叔丁基醚(约200mL)和柠檬酸水溶液(10wt％，约200mL)的预冷(约10℃)混合物中。分离有机层和水层，并将有机层用碳酸钾水溶液(10wt％，约300mL)，碳酸钾水溶液(10wt％，两次约200mL)、氯化铵水溶液(10wt％，200mL) 和氯化钠水溶液(15wt％，约200mL)洗涤。将有机层的溶剂交换为乙腈并将体积调节至约200mL。将乙腈溶液冷却至约0℃并加入浓盐酸 (约40mL)。约3h后，将反应混合物冷却至约-10℃，加入2-甲基四氢呋喃(约200mL)和碳酸氢钾水溶液(20wt％，约200mL)的预冷(约10℃) 混合物中。分离有机层和水层，并将有机层用碳酸氢钾水溶液(20 wt％，约80mL)和氯化钠水溶液(15wt％，约200mL)洗涤。将有机层浓缩至约100mL，并用氯化钠水溶液(15wt％，约100mL)洗涤。将有机层浓缩并自2-甲基四氢呋喃蒸馏，直至溶液达到不超过0.2％的目标水含量。将2-甲基四氢呋喃溶液(约400mL)抛光过滤，并将溶剂交换为乙酸异丙酯。将乙酸异丙酯溶液(约100mL)在约20℃下搅拌。加入含有形式II和形式IV的混合物的晶种(约40mg)，并将悬浮液在约20℃下搅拌约3天。通过过滤从悬浮液中分离出固体形式的含有形式II和形式IV的混合物的结晶式I，并如下所述进行表征。

实施例7.混合物III，形式II和形式IV的混合物

将式I(14.0g)加至反应容器中。加入异丙醇(42mL)和水(14mL)并将悬浮液加热至约50℃，直至实现溶解。将溶液冷却至约20℃，并加入约14mg含有形式II和形式IV的混合物的晶种。在约20℃下经约3 小时加入水(70mL)，并将悬浮液在约20℃下搅拌约17小时。通过过滤从悬浮液中分离出固体形式的含有形式II和形式IV的混合物的结晶式I，并如下所述进行表征。

实施例8.式I马来酸盐形式I

在20mL小瓶中采用搅拌棒将0.58g(2S,3R,4R,5R)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-双(苄氧基)-5-((苄氧基)甲基)四氢呋喃-2- 甲腈溶于5mL乙酸异丙酯(IPAc)中。在第二小瓶中将4mL IPAc和0.25 mL乙醇加至150mg马来酸中，并溶解该马来酸。伴随搅拌将第二小瓶的内容物加至20mL小瓶中。搅拌约1小时后，将悬浮液过滤，将滤物用2.5mL IPAc洗涤，并风干以分离(2S,3R,4R,5R)-2-(4-氨基吡咯并 [2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-双(苄氧基)-5-((苄氧基)甲基)四氢呋喃-2-甲腈马来酸盐。

向第一反应容器中加入式I的形式的混合物(3.31g)和乙酸异丙酯 (约20mL)，将其封盖并高速磁力搅拌。将马来酸(0.72g)加入第二反应容器中。向第二反应容器中添加乙酸异丙酯(约20mL)。将甲醇(约5mL)加入第二反应容器中。将甲醇(约5mL)加入第一反应容器中。将第二反应容器的内容物添加到第一反应容器中。将第一个反应容器在约21℃下搅拌约5分钟，然后用(2S,3R,4R,5R)-2-(4-氨基吡咯并 [2,1-f][1,2,4]三嗪-7-基)-3,4-双(苄氧基)-5-((苄氧基)甲基)四氢呋喃-2-甲腈马来酸盐晶种引种。将第一反应容器封盖，并在约21℃下搅拌约18 小时。通过离心/过滤从悬浮液中分离出固体形式的式I马来酸盐形式 I，并如下所述进行表征。

结晶形式的表征

通过包括X射线粉末衍射(XRPD)、差示扫描量热(DSC)、热重量分析(TGA)和动态气相吸附(DVS)的各种分析技术，使用以下描述的程序对本发明的结晶形式进行表征。

X-射线粉末衍射：使用铜辐射(Cu Kα，)在衍射仪 (PANanalyticalXPERT-PRO，PANanalytical B.V.，Almelo，荷兰)上进行XRPD分析。通过将粉末状样品沉积在配备有零背景板的钢制支架的中心来准备分析样品。发生器在45kV的电压和40mA的电流下运行。所用狭缝为Soller 0.02rad.，防散射1.0°和散度。样品转速为2转/ 秒。在5分钟内从2到40°2θ进行扫描，步长为0.008°2θ。数据分析由X'Pert Date Viewer 2.2c版(PANalytical B.V.，Almelo，荷兰)和X'Pert Data Viewer 1.2d版(PANalytical B.V.，Almelo，荷兰)进行。

式I形式I的XRPD图谱在图1中示出。

式I形式II的XRPD图谱在图5中示出。

图9中示出的式I形式III的经计算的XRPD图谱的计算是通过使用Mercury3.1Development(Build RC5)。将式I形式III的单晶数据输入Mercury 3.1中以计算式I形式III的XRPD图谱。

式I形式IV的XRPD图谱在图10中示出。

式I混合物I的XRPD图谱在图13中示出。

式I混合物II的XRPD图谱在图16中示出。

式I混合物III的XRPD图谱在图19中示出。

式I马来酸盐形式I的XRPD图谱在图22中示出。

式I形式IV的XRPD图谱在图26中示出。

差式扫描量热：使用差示扫描量热(DSC)仪器(TA Q1000，TA Instruments，NewCastle，DE，USA)评估热性能。对于每个实验，将大约1至10mg的固体样品置于带有针孔的标准铝盘中，并在50mL/ 分钟的氮气吹扫下以5至10℃/分钟的速率加热。使用UniversalAnalysis 2000 4.7A版(TA Instruments，New Castle，DE，USA)进行数据分析。

式I形式I的DSC在图2中示出。

式I形式II的DSC在图6中示出。

式I形式IV的DSC在图11中示出。

式I混合物I的DSC在图14中示出。

式I混合物II的DSC在图17中示出。

式I混合物III的DSC在图20中示出。

式I马来酸盐形式I的DSC在图23中示出。

热重量分析：热重量分析(TGA)在TGA仪器(TA Q500，TA Instruments，NewCastle，DE，USA)上进行。对于每个实验，将约1 至10mg的固体样品置于敞开的铝盘中，并在60mL/分钟的氮气吹扫下以5至10℃/分钟的速率加热。使用Universal Analysis 20004.7A版(TA Instruments，New Castle，DE，USA)进行数据分析。

式I形式I的TGA在图3中示出。

式I形式II的TGA在图7中示出。

式I形式IV的TGA在图12中示出。

式I混合物I的TGA在图15中示出。

式I混合物II的TGA在图18中示出。

式I混合物III的TGA在图21中示出。

式I马来酸盐形式I的TGA在图24中示出。

动态气相吸附：使用动态气相吸附(DVS)仪器(TGA Q5000TA Instruments，NewCastle，DE)在室温下评估吸湿性。在25℃下，水的吸附和解吸作为相对湿度(RH)0至90％范围内的函数研究。将室内的相对湿度增加10％RH，并保持直至固体和大气达到平衡。继续进行平衡测试，直至通过或者5或10小时后期满。此时，RH升高了10％，重复此过程直到达到90％RH并达到平衡。在此期间，监测吸水率。对于解吸，以类似的方式降低相对湿度以测量整个吸附/解吸循环。任选地重复该循环。所有实验均以dm/dt模式(质量随时间变化)进行操作，以确定平衡终点。使用约5-10mg的固体。使用Universal Analysis 2000 4.7A版(TAInstruments，New Castle，DE，USA)进行数据分析。

式I形式I的DVS在图4中示出。

式I形式II的DVS在图8中示出。

式I马来酸盐形式I的DVS在图25中示出。

在配备有Mo K_α辐射(例如Wavelength(波长))的Bruker APEX II Ultra衍射仪上进行单晶X射线衍射研究。将主题化合物的晶体切成 0.22x 0.18x 0.04mm的截面，并用Paratone-N油将其固定在Cryoloop 上。如下表中所示在特定温度下在氮气流中收集数据(例如100(2)K或200(2)K)。收集涵盖指标的反射总数(例如-9<＝h<＝10，-13<＝k<＝16， -37<＝l<＝36)。发现某些反射是对称独立的，具有R_int值。分度和晶胞细化指示晶体系统(例如单斜晶、三斜晶或正交晶格)。找到由数据中的系统缺失而唯一定义的空间群(例如P1，P2(1)，C2和P21212)。使用Bruker SAINT软件程序整合数据，并使用SADABS软件程序进行量度。通过直接方法求解(SHELXT)产生了与提议结构相容的完整相位模型。

通过全矩阵最小二乘法各向异性地精制所有非氢原子 (SHELXL-2014)。使用骑乘模型放置所有氢原子。使用SHELXL-2014 中的适当HFIX命令，相对于其母原子限制它们的位置。晶体学数据汇总在下表中。绝对立体化学设定为符合先前研究过的相同化合物样品。

式I形式II的单晶X射线晶体学数据汇总在下表2A中。

表2A:式I形式II的单晶数据

式I形式III的单晶X射线晶体学数据汇总在下表2B中。

表2B:式I形式III的单晶数据

以下表3中汇总了式I的各种形式的纯度概况，

表3:纯度概况

¹ 20℃下使用iPAc制备。²由条目2通过以下制备：在50℃下溶于IPA/水(3:1V/V)中，然后加入水(5V)，最终溶剂混合物为 IPA/水(3:6V/V)。³在50℃下由条目1在IPA/水(1:2V/V)中制备，无固体溶解。

其中杂质A为(2R,3R,4S,5R)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1,2,4]三嗪-7- 基)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-甲腈：

在本发明的一些实施方式中，式I是水合的。在一些实施方式中，式I与水分子的比率为1:1。

固态NMR：固态NMR(SSNMR)实验是在Bruker Avance I光谱仪 (Bruker，Billerica，MA)上进行的，¹³C的操作是在100.51MHz下，¹H的操作是在399.66MHz下。使用采用7mm魔角旋转(MAS)系统(Revolution NMR，Ft.Collins，CO)改装的Chemagnetics(Ft.Collins， CO)Apex探针获取数据。将每个样品装入7mm氧化锆转子中。所有实验均使用交叉极化和魔角旋转(CP/MAS)获得。魔角旋转速度通常为5kHz。化学位移是通过3-甲基戊二酸在18.84ppm处的甲基峰的二级参考而相对于TMS记录的，准确度为±0.2ppm。使用总边带抑制 (TOSS)消除旋转边带。饱和度恢复用于测量¹H T₁弛豫时间。

数据收集是在～8.5℃的标称温度下进行的。采集参数包括1.5ms的交叉极化时间，～50ms的采集时间，以及约2倍于¹H T₁的周期延迟(～3.2 秒)。采集期间使用～64kHz的¹H去耦。数据在Bruker Topspin 软件包中进行处理。自由感应衰减经过傅立叶变换、定相和基线校正。

式I形式II的固态NMR在图27中示出。

式I形式II和形式IV的混合物(顶部)、混合物III(中部)以及混合物I(底部)的固态NMR在图28中示出。

混合物III(顶部)、式I形式II和形式IV的混合物(中部)以及混合物II(底部)的固态NMR在图29中示出。

竞争实验

进行了若干实验，其证明式I形式II是更稳定的形式。

式I与相应的溶剂混合，并在室温下通过无搅拌棒的搅拌器混合。两周后获得分离出的固体的XRPD。

式I形式I和式I形式II之间的竞争实验的进行通过将式I形式I 与乙酸异丙酯混合，然后加入混合物II(式I形式II和式I形式IV的混合物)。

式I形式II和式I形式IV之间的竞争实验的进行通过将式I混合物II与IPA/水(3/6V/V)在50℃下组合若干天。所有实验均显示转化为式I形式II。

包括本申请中引用的所有专利、专利申请和出版物在内的每个参考文献通过引用整体并入本文，如同它们中的每一个被单独并入一样。此外，将会理解的是，在本发明的上述教导中，本领域技术人员可以对本发明进行某些改变或修饰，并且这些等同物仍将在由所附的本申请的权利要求所限定的本发明的范围内。包括本申请中引用的所有专利、专利申请和出版物在内的每个参考文献通过引用整体并入本文，如同它们中的每一个被单独并入一样。此外，将会理解的是，在本发明的上述教导中，本领域技术人员可以对本发明进行某些改变或修饰，并且这些等同物仍将在由所附的本申请的权利要求所限定的本发明的范围内。