阅读说明：本技术 一种黄芪甲苷的制备方法 (Method for preparing astragaloside ) 是由 杨成东 于 2018-05-30 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一种黄芪甲苷的制备方法,具体涉及一种采用酶法-超声破壁法提取黄芪甲苷的方法。其处理步骤包括：准备黄芪,将其粉碎,研磨,成为粉末,以料液比1:5加入PH值4.5的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液,混匀后按质量加入17%的纤维素酶,55℃酶解1h后,4000r/min离心10min,收集上清液,取适量酶法破壁沉淀物,分别以料液比1:5加入温水、50%~60%无水乙醇、0.05mol/L PH值为3.7的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液,提取30~40min,并于相同条件下进行超声波辅助提取,提取结束后,4000r/min离心10min,取上清液,合并两次上清液,在60℃下干燥,得到黄芪甲苷。本发明具有高效、溶液有效成分含量较高的优点。(The invention relates to a preparation method of astragaloside, in particular to a method for extracting astragaloside by adopting an enzyme method-ultrasonic wall breaking method, which comprises the processing steps of preparing astragalus, crushing and grinding the astragalus into powder, adding a citric acid-disodium hydrogen phosphate buffer solution with a pH value of 4.5 according to a feed-liquid ratio of 1:5, uniformly mixing, adding 17% of cellulase according to the mass, carrying out enzymolysis for 1h at 55 ℃, centrifuging for 10min at 4000r/min, collecting a supernatant, taking a proper amount of enzyme method wall breaking precipitate, respectively adding warm water, 50% ~ 60% of absolute ethyl alcohol and 0.05mol/L of citric acid-disodium hydrogen phosphate buffer solution with a pH value of 3.7 according to a feed-liquid ratio of 1:5, extracting for 30 ~ 40min, carrying out ultrasonic auxiliary extraction under the same condition, centrifuging for 10min at 4000r/min after the extraction is finished, taking the supernatant, combining the two times of supernatant, and drying at 60 ℃ to obtain the astragaloside.)

一种黄芪甲苷的制备方法

技术领域

本发明涉及一种黄芪甲苷的制备方法，属于中药有效成分提取领域。

背景技术

黄芪是百姓经常食用的纯天然品，民间流传着“常喝黄芪汤，防病保健康”的顺口溜，意思是说经常用黄芪煎汤或泡水代茶饮，具有良好的防病保健作用。黄芪和人参均属补气良药，人参偏重于大补元气，回阳救逆，常用于虚脱、休克等急症，效果较好。而黄芪则以补虚为主，常用于体衰日久、言语低弱、脉细无力者。有些人一遇天气变化就容易感冒，中医称为“表不固”，可用黄芪来固表，常服黄芪可以避免经常性的感冒。现代医学研究表明，黄芪有增强机体免疫功能、保肝、利尿、抗衰老、抗应激、降压和较广泛的抗菌作用。能消除实验性肾炎蛋白尿，增强心肌收缩力，调节血糖含量。黄芪不仅能扩张冠状动脉，改善心肌供血，提高免疫功能，而且能够延缓细胞衰老的进程。黄芪食用方便，可煎汤，煎膏，浸酒，入菜肴等。

黄芪多糖中的主要有效成份是多糖和黄芪苷。黄芪苷分为黄芪苷Ⅰ、黄芪苷Ⅱ、黄芪苷Ⅳ。其中生物活性最好的是黄芪苷IV即黄芪甲苷。黄芪甲苷不仅具有黄芪多糖的作用，还有些是黄芪多糖无法比拟的作用，其药效强度是常规黄芪多糖的2倍多，抗病毒作用更是黄芪多糖的30倍。由于含量少，效果好，更是有“超级黄芪多糖”之称。

目前对黄芪甲苷的提取多采用有酸水解法和预发酵法。酸水解方法由于酸用量大，酸降解有机质副产物多，使污水排放量大，环境污染严重，限制了黄芪甲苷元的产业化发展。采用预发酵法提取黄芪甲苷元，但该法耗时长，而且产品质量不够稳定。

酶法—超声破壁提取是指通过纤维素酶对植物细胞进行破壁处理。以提取组织中有效成分的一种提取方法。应用酶法提取植物中有效成分，植物经破壁处理后，同一植物的不同组织、部位因细胞破碎，能高度混合均匀，实现了植物内产品的物质基础的均一，无高温溶剂提取的工艺，减少了有效成损的环节，最大限度地保留原植物的全成分。

再结合超声波的空化效应以及机械效应，从而使细胞中的有效成分得以释放直接与溶剂接触并溶解在其中，从而提高有效成分的提取率。

发明内容

本发明是针对现有技术的不足，旨在提供一种高效性和选择性、操作简便、产率高、副产物少、可工业化实现的制备黄芪甲苷的方法。

本发明的技术方案按照下列步骤进行：

a.准备黄芪，将其粉碎，研磨，成为粉末，以料液比1:5加入PH值4.5的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液，匀后按质量加入17%的纤维素酶，55℃酶解1h后，4000r/min离心10min，收集上清液。

b.取适量酶法破壁沉淀物，分别以料液比1:5加入温水、50%~60%的无水乙醇、0.05mol/L PH值3.7的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液，提取30~40min，并于相同条件下进行超声波辅助提取。

c.提取结束后，4000r/min离心10min，取上清液，合并两次上清液，以60℃下干燥，得到黄芪甲苷。

2.步骤a中所述的离心机功率为900W，转速为1000~20000r/min。

3.步骤b中所述的超声萃取的条件为：频率30KHz，超声温度30~40℃。

4.步骤c中所述的离心机功率为900W，转速为1000~20000r/min。

本发明的优点在于：

1.本发明采用植物纤维素酶法处理原料，实现了植物破壁，有效成分充分溶出，同时又避免加热，从而可有效避免黄芪甲苷成分的破坏。

2.本发明采用酶法—超声破壁法提取黄芪甲苷，具有高效、溶液有效成分含量较高、抗氧化性较强的优点。

下面将结合

具体实施方式

进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

准备黄芪，将其粉碎，研磨，成为粉末，以料液比1:5加入PH值4.5的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液，匀后按质量加入17%的纤维素酶，55℃酶解1h后，4000r/min离心10min，收集上清液，取适量酶法破壁沉淀物，分别以料液比1:5加入温水（30℃）、50%无水乙醇、0.05mol/LPH值3.7的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液，提取30min，并于相同条件下将物料置于30KHz超声波装置中提取，提取结束后，4000r/min离心10min，取上清液，合并两次上清液，以60℃下干燥，得到黄芪甲苷，经HPLC检测，黄芪甲苷的含量为99.4%。

实施例2：

准备黄芪，将其粉碎，研磨，成为粉末，以料液比1:5加入PH值4.5的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液，匀后按质量加入17%的纤维素酶，55℃酶解1h后，4000r/min离心10min，收集上清液，取适量酶法破壁沉淀物，分别以料液比1:5加入温水（45℃）、55%无水乙醇、0.05mol/LPH值3.7的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液，提取35min，并于相同条件下将物料置于30KHz超声波装置中提取，提取结束后，4000r/min离心10min，取上清液，合并两次上清液，以60℃下干燥，得到黄芪甲苷，经HPLC检测，黄芪甲苷的含量为99.6%。

实施例3：

准备黄芪，将其粉碎，研磨，成为粉末，以料液比1:5加入PH值4.5的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液，匀后按质量加入17%的纤维素酶，55℃酶解1h后，4000r/min离心10min，收集上清液，取适量酶法破壁沉淀物，分别以料液比1:5加入温水（50℃）、60%无水乙醇、0.05mol/LPH值3.7的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液，提取40min，并于相同条件下将物料置于30KHz超声波装置中提取，提取结束后，4000r/min离心10min，取上清液，合并两次上清液，以60℃下干燥，得到黄芪甲苷，经HPLC检测，黄芪甲苷的含量为99.8%。