阅读说明：本技术 N-[(1s)-2-[3-(3-氯-4-氰基苯基)-1h-吡唑-1-基]-1-甲基乙基]-5-(1-羟基乙基)- 1h-吡唑-3-甲酰胺的制备方法 (Preparation method of N- [ (1S) -2- [3- (3-chloro-4-cyanophenyl) -1H-pyrazol-1-yl ] -1-methylethyl ] -5- (1-hydroxyethyl) -1H-pyrazole-3-formamide ) 是由 徐梓宸 魏万国 方显杰 刘汝丰 裔明月 周成龙 刘洁 于 2019-07-17 设计创作，主要内容包括：本发明涉及N-[(1S)-2-[3-(3-氯-4-氰基苯基)-1H-吡唑-1-基]-1-甲基乙基]-5-(1-羟基乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺的制备方法。具体为提供了两条制备中间体(S)-4-(1-(2-氨基丙基)-1H-吡唑-3-基)-2-氯苄腈的新方法和从该中间体出发制备N-[(1S)-2-[3-(3-氯-4-氰基苯基)-1H-吡唑-1-基]-1-甲基乙基]-5-(1-羟基乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺的方法。(The invention relates to a preparation method of N- [ (1S) -2- [3- (3-chloro-4-cyanophenyl) -1H-pyrazol-1-yl ] -1-methylethyl ] -5- (1-hydroxyethyl) -1H-pyrazole-3-formamide. In particular to two new methods for preparing an intermediate (S) -4- (1- (2-aminopropyl) -1H-pyrazol-3-yl) -2-chlorobenzonitrile and a method for preparing N- [ (1S) -2- [3- (3-chloro-4-cyanophenyl) -1H-pyrazol-1-yl ] -1-methylethyl ] -5- (1-hydroxyethyl) -1H-pyrazole-3-formamide from the intermediate.)

N-[(1S)-2-[3-(3-氯-4-氰基苯基)-1H-吡唑-1-基]-1-甲基 乙基]-5-(1-羟基乙基)- 1H-吡唑-3-甲酰胺的制备方法

技术领域

本发明涉及原料药制备方法技术领域,具体涉及药物N-[(1S)-2-[3-(3-氯-4-氰基苯基)-1H-吡唑-1-基]-1-甲基乙基]-5-(1-羟基乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺的制备。

背景技术

雄激素受体(androgen receptor,AR)属于核受体超家族，该超家族成员众多，但在脊椎动物中只存在5种，即***受体、***受体、雄激素受体、糖皮质激素受体和盐皮质激素受体。AR包含918个氨基酸残基，由此组成3个重要的结构域，分别是DNA结合域(DNAbinding domain,DBD)、配体结合域(ligand binding domain,LBD) 和氮端结合域(N-terminal domain,NTD)。

正常情况下AR存在于细胞质中并与热体克蛋白(Hsp90)结合。当雄激素(睾酮或二氢睾酮)出现时，AR将释放Hsp90，同时其LBD区与雄激素结合，这一结合导致LBD区构象发生变化，并伴随着受体的磷酸化，从而激活AR。激活后形成的 AR-雄激素复合物将进一步启动相关的基因转录，从而发挥后续的生物学效应。

体外实验证实，AR拮抗剂能抑制***细胞增殖，并促进其凋亡。早期***癌患者在应用AR拮抗剂进行治疗后，***特异抗原水平降低，整体表现为***体积减小、症状有不同程度的减轻、患者生存时间延长。目前已上市的AR拮抗剂有 4种，均属于非甾体小分子AR拮抗剂，因此，开发用于治疗***癌的新的非甾体 AR拮抗剂是很有必要的。

N-[(1S)-2-[3-(3-氯-4-氰基苯基)-1H-吡唑-1-基]-1-甲基乙基]-5-(1-羟基乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺是由拜耳(Bayer AG)和芬兰奥立安(Orion Corp.)共同开发的一种新型雄激素受体拮抗剂，它的化学结构不同于已知的雄激素受体拮抗剂。与其他抗雄激素药物不同的是，它在非临床模型中并不进入大脑，可通过阻断核异位而抑制雄激素受体。Ⅰ、Ⅱ期临床研究显示N-[(1S)-2-[3-(3-氯-4-氰基苯基)-1H-吡唑-1-基]-1-甲基乙基]-5-(1-羟基乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺具有显著的抗肿瘤活性和良好的耐受性和安全性。

其结构式如下所示：

N-[(1S)-2-[3-(3-氯-4-氰基苯基)-1H-吡唑-1-基]-1-甲基乙基]-5-(1-羟基乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺的化学名称为：N-((S)-1-(3-(3-氯-4-氰基苯基)-1H-吡唑-1-基)-丙烷-2-基)- 5-(1-羟基乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺，其吡唑环上的羟基乙基1-位碳具有两种构型，N- [(1S)-2-[3-(3-氯-4-氰基苯基)-1H-吡唑-1-基]-1-甲基乙基]-5-(1-羟基乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺是两种异构体的混合物，单一构型如式Ia化合物和式Ib化合物所示。其中，式 Ia化合物的化学名称为：N-((S)-1-(3-(3-氯-4-氰基苯基)-1H-吡唑-1-基)-丙烷-2-基)-5- ((R)-1-羟基乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺；式Ib化合物化学名称为：N-((S)-1-(3-(3-氯-4-氰基苯基)-1H-吡唑-1-基)-丙烷-2-基)-5-((S)-1-羟基乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺。文献 WO2016120530报道，式Ia化合物和式Ib化合物也是潜在的雄激素受体拮抗剂，可用于治疗***癌。

N-[(1S)-2-[3-(3-氯-4-氰基苯基)-1H-吡唑-1-基]-1-甲基乙基]-5-(1-羟基乙基)-1H-吡唑-3- 甲酰胺可按WO2011051540报道的方法制备，如下面路线1所示：

专利WO2011051540报道化合物1和化合物2发生碳碳偶联反应，得到化合物3；化合物3发生水解反应得到化合物4；化合物4与化合物5先发生取代反应，得到的产物再经酸条件下去除氨基保护基得到化合物6；化合物6与化合物7缩合成酰胺得到化合物8；化合物8经羰基还原得到N-[(1S)-2-[3-(3-氯-4-氰基苯基)-1H-吡唑-1-基]- 1-甲基乙基]-5-(1-羟基乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺。其中化合物7可按WO2012139930公开的方法制备，具体方法为：由化合物9与化合物10在三氯化铟的催化下环合成吡唑化合物11；化合物11经水解得到化合物7。

N-[(1S)-2-[3-(3-氯-4-氰基苯基)-1H-吡唑-1-基]-1-甲基乙基]-5-(1-羟基乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺的两种单一构型式Ia化合物和式Ib化合物可按WO201620530公开的方法制备，如路线2和路线3所示：

制备单一构型化合物Ia的合成方法中，化合物11在酮还原酶(KRED酶)的催化下选择性还原得到化合物12a；化合物12a上的羟基被叔丁基二苯基硅基保护得到化合物13a；化合物13a水解得到化合物14a；化合物14a与化合物6发生生成酰胺反应得到化合物15a；化合物15a脱保护得到式Ia化合物。其中化合物12a还可由化合物9与化合物16a在催化剂作用下制备得到。

制备单一构型化合物Ib的合成方法中，化合物11在酮还原酶(KRED酶)的催化下选择性还原得到化合物12b；化合物12b上的羟基被叔丁基二苯基硅基保护得到化合物13b；化合物13b水解得到化合物14b；化合物14b与化合物6发生生成酰胺反应得到化合物15b；化合物15b脱保护得到式Ib化合物。其中化合物12b还可由化合物9与化合物16b在催化剂的作用下制备得到。

本发明旨在提供一种新的N-[(1S)-2-[3-(3-氯-4-氰基苯基)-1H-吡唑-1-基]-1-甲基乙基]-5-(1-羟基乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺的制备方法。

发明内容

第一方面，本发明提供两种化合物6的制备方法，分别是路线4和路线5。

路线4：化合物6的第一种制备方法

路线4中，化合物17和化合物18发生碳碳偶联反应，得到化合物3；化合物3 发生水解反应得到化合物4；化合物4与化合物5先发生取代反应，得到的产物再经酯水解得到化合物6。

路线5中，化合物19与化合物5发生取代反应得到化合物20；化合物20发生取代反应制得化合物21；化合物21与化合物1发生碳碳偶联反应得到化合物22；化合物22脱掉保护得到化合物6。

第二方面，本发明提供两种N-[(1S)-2-[3-(3-氯-4-氰基苯基)-1H-吡唑-1-基]-1-甲基乙基]-5-(1-羟基乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺的制备方法，分别是路线6和路线7.

合成路线6中，化合物6与化合物11发生胺酯交换反应得到化合物8；化合物8 经酮还原反应得到N-[(1S)-2-[3-(3-氯-4-氰基苯基)-1H-吡唑-1-基]-1-甲基乙基]-5-(1-羟基乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺。

合成路线7中，化合物6与化合物13发生胺酯交换反应得到化合物15；化合物 15脱除硅基保护得到N-[(1S)-2-[3-(3-氯-4-氰基苯基)-1H-吡唑-1-基]-1-甲基乙基]-5-(1-羟基乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺。

在本发明的一些实施方案中，所用的羟基保护剂除叔丁基二苯基硅基以外，还包括特戊酰基、苯甲酰基、乙酰基、三甲基硅基、三乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、三异丙基硅基、苄基、对甲氧基苄基、三苯甲基、甲氧基甲基、2-乙氧基乙基、2-(三甲基硅基)乙氧基甲基或烯丙基，优选叔丁基二甲基硅基或叔丁基二苯基硅基，更优选叔丁基二甲基硅基。

具体实施方式

通过下面的实施例可以更具体的理解本发明，但其是举例说明而不是限制本发明的范围。

实施例1：制备2-氯-4-(1-四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)苄腈(3)

加入乙腈(50mL)、水(50mL)、碳酸钾(21.07g,2.07当量)，2-氯-4-(4，4，5， 5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苄腈(17)(14.0g，1.0当量)和1-(四氢- 2H-吡喃-2-基)-5-溴-1H-吡喃(18)(21.0g,1.17当量)。将混合物在氮气气氛下回流约0.5小时。将混合物在氮气保护下冷却至60-70℃。在氮气保护下加入乙酸钯 (0.10g，0.007当量)和三苯基膦(0.40g，0.024当量)。在70℃搅拌反应2小时。在65-70℃分离并且从反应混合物中除去水相。向反应混合物中加入2mL氨水 (25％)，然后将其冷却至20℃。在20℃逐渐加入水(80mL)。将混合物在20℃搅拌过夜。将结晶产物过滤并且用乙腈：水1：1(20mL)洗涤两次。将产物在50-60℃减压干燥。产量17.18g(92.3％)。

实施例2：制备2-氯-4-(1H-吡唑-3-基)苄腈(4)

加入2-氯-4-(1-四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)苄腈(3)(10.0g,1.00当量)和甲醇(40mL)。在10℃加入30％HCl(0.3mL,0.08当量)。将混合物在10℃搅拌2小时。在10℃加入氨水(25％)(3.0mL,1.1当量)。在10-20℃逐渐加入水(15mL)。将混合物在20℃搅拌过夜。然后将混合物冷却至0-5℃，并且在0-5℃搅拌4小时。将结晶产物过滤并且用冷水：甲醇混合物3：1(30mL)洗涤，并且在50-60℃干燥。产量6.78g(95.8％)。

实施例3：制备(S)-4-(1-(2-氨基丙基)-1H-吡唑-3-基)-2-氯苄腈(6)

将15g(73.7mmol)的2-氯-4-(1H-吡唑-3-基)苄腈(4)、26.5g(151mmol)的 (S)-叔丁基-1-羟基丙-2-基氨基甲酸酯(5)、三苯基膦(39.6g,151mmol)和84mL的乙酸乙酯在氮气气氛下放入反应容器中。将混合物冷却至10℃.在搅拌下4小时期间均匀地加入DIAD(29.7mL,151mmol)，同时保持温度在10℃.将混合物在20℃下搅拌过夜。在搅拌下在10-30分钟期间滴加浓盐酸(31.1mL,295mmol)，同时保持温度在30℃.将混合物在45℃搅拌直到反应完成。加入水(82.5mL)，并且将温度调节至 35℃.然后加入DCM(105mL)，并且将混合物剧烈搅拌至少1分钟，并且静置分层 10分钟。分离有机层，并且用60mL温水洗涤。合并水相并且用75mLDCM和 19.3mL(125mmol)25％的氨水加入水相中。通过加入50％氢氧化钠将调节pH至9.分层，减压浓缩出DCM至25mL.加入2-丙醇(4.65mL)，并且将温度调节至约50℃.然后在1小时期间加入90mL的正庚烷。当加入约22mL的正庚烷时，在溶液中加入晶种。混合物在6小时期间冷却至0℃，然后搅拌过夜。过滤出产物，用正庚烷洗涤，并且在50℃真空干燥。产率81.8％。

实施例4：制备(S)-(1-(1H-吡唑-1基)丙基-2-基)氨基叔丁酯(20)

将15g的吡唑(19)、26.5g(151mmol)的(S)-叔丁基-1-羟基丙-2-基氨基甲酸酯(5)、三苯基膦(39.6g,151mmol)和84mL的乙酸乙酯在氮气气氛下放入反应容器中。将混合物冷却至10℃.在搅拌下4小时期间均匀地加入DIAD(29.7mL,151mmol)，同时保持温度在10℃.将混合物在20℃下搅拌过夜。加入水(82.5mL)，并且将温度调节至35℃.然后加入DCM(105mL)，并且将混合物剧烈搅拌至少1分钟，并且静置分层10分钟。分离有机层，并且用60mL温水洗涤。减压浓缩出DCM至25mL，加入2-丙醇(4.65mL)，并且将温度调节至约50℃.然后在1小时期间加入90mL的正庚烷。当加入约22mL的正庚烷时，在溶液中加入晶种。混合物在6小时期间冷却至 0℃，然后搅拌过夜。过滤出产物，用正庚烷洗涤，并且在50℃真空干燥。产率 86.8％。

实施例5：制备(S)-(1-(3-(4,4,5,5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H- 吡唑-1-基)丙基-2-基)氨基叔丁酯(21)

将(S)-(1-(1H-吡唑-1基)丙基-2-基)氨基叔丁酯(20)(50g)、THF(70mL)在室温在氮气气氛下混合。将混合物冷却至0℃，在0-5℃，历经2-3小时滴加n-BuLi (179g,1.42M,Inhexane)，并且将混合物在0-5℃搅拌1小时。在0-5℃，历经45分钟滴加硼酸三异丙酯(68g)。将混合物置于室温并且搅拌1-2小时。在室温，历经20- 30分钟向该混合物中分批加入频哪醇(38.8g)，随后搅拌45分钟。将混合物冷却至 0℃，并且在0-5℃历经30分钟滴加乙酸(39g)。将混合物置于室温并且保持12-14 小时。随后将混合物冷却至0℃，并且在0-5℃，历经30分钟滴加水。将混合物置于室温并且搅拌30分钟。分离水层，并且用甲苯(200mL)萃取。合并有几层用10％碳酸氢钠溶液和水洗涤。将有机层减压浓缩，残留物加入正庚烷中搅拌过滤，得产物 62g.

实施例6：制备S-(1-(3-(3-氯-4氰基苯基)-1H-吡唑-1-基)丙基-2-基)氨基叔丁酯 (22)

加入乙腈(50mL)、水(50mL)、碳酸钾(21.07g,2.07当量)，(S)-(1-(1H-吡唑-1 基)丙基-2-基)氨基叔丁酯(20)(14.0g，1.0当量)和2-氯-5-溴苄腈(21.0g,1.17当量)。将混合物在氮气气氛下回流约0.5小时。将混合物在氮气保护下冷却至60-70℃。在氮气保护下加入乙酸钯(0.10g，0.007当量)和三苯基膦(0.40g，0.024当量)。在 70℃搅拌反应2小时。在65-70℃分离并且从反应混合物中除去水相。向反应混合物中加入2mL氨水(25％)，然后将其冷却至20℃。在20℃逐渐加入水(80mL)。将混合物在20℃搅拌过夜。将结晶产物过滤并且用乙腈：水1：1(20mL)洗涤两次。将产物在50-60℃减压干燥。产量17.18g(92.3％)。

实施例7：制备(S)-4-(1-(2-氨基丙基)-1H-吡唑-3-基)-2-氯苄腈(6)

将S-(1-(3-(3-氯-4氰基苯基)-1H-吡唑-1-基)丙基-2-基)氨基叔丁酯(22)(10g)加入10mL4N盐酸二氧六环溶液中,10℃搅拌反应3小时，过滤得产物，真空干燥的产量8.0g。

实施例8：制备(S)-5-乙酰基-N-(1-(3-(3-氯-4-氰基苯基)-1H-吡唑-1-基) 丙-2-基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(8)

将(S)-4-(1-(2-氨基丙基)-1H-吡唑-3-基)-2-氯苄腈(6)(10g)溶于甲苯中，氮气保护下降温至0℃，加入叔丁醇钾20g，保持温度在0℃，搅拌1小时。在 0℃下，滴入3-乙酰基-1H-吡唑-5-甲酸乙酯(11)(10g)。0℃搅拌1小时，升温至室温搅拌1小时。降温至0℃，加入20mL水和100mL乙酸乙酯，分层，有机层减压浓缩，得产物15.4g。

实施例9：制备N-((S)-1-(3-(3-氯-4-氰基苯基)-1H-吡唑-1-基)-丙-2-基)-5-(1-羟基乙基)-1H-吡唑-3-甲酰胺

将100mg(0.25mmol)(S)-5-乙酰基-N-(1-(3-(3-氯-4-氰基苯基)-1H-吡唑-1-基)丙-2-基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(8)和5mLEtOH加入反应烧瓶中，并且作为 EtOH悬浮液缓慢加入19mg(0.5mmol)硼氢化钠。将反应搅拌过夜至完成。滴加 0.5mL水和1mL0.5MHCl。将溶液蒸发至干，并且加入20mLDCM.将混合物用 10mL1M碳酸氢钠和10mL水洗涤，然后经无水硫酸钠干燥。减压浓缩得76mg产物。收率76％。