阅读说明：本技术 一种养殖场用消毒除臭纳米乳剂及制备方法和应用 (A kind of farm disinfecting, deodorizing nanoemulsion and preparation method and application ) 是由 王艳玲 庞云露 刘元元 孙亚磊 王英俊 崔栩 郑亚妮 盖新光 于 2019-09-29 设计创作，主要内容包括：本发明提供了一种养殖场用消毒除臭纳米乳剂,属于畜禽养殖领域。其技术方案为：纳米乳剂包括有效成分和辅料,有效成分包括聚六亚甲基胍或聚六亚甲基胍盐类,有效成分还包括缩氨酸、枯草溶菌素、大蒜油、龙脑、百里香酚、丁香酚、桉叶素、薄荷脑、香茅精油、藿香油,辅料包括表面活性剂、助表面活性剂,制药用水。本发明的有益效果为：本发明消毒除臭纳米乳剂的制备方法成本低廉、容易操作、并且所用试剂毒性较小,对生产人员的身体危害程度较低,有利于安全生产和环境保护,同时,消毒除臭纳米乳剂具有极强的杀灭细菌和病毒的能力,能够有效去除养殖场所异味,且广谱高效,具有长期抑菌作用；安全、无毒副作用。(The present invention provides a kind of farm disinfecting, deodorizing nanoemulsions, belong to livestock and poultry cultivation field.Its technical solution are as follows: nanoemulsion includes effective component and auxiliary material, effective component includes polyhexamethylene guanide or poly (hexamethylene) class, effective component further includes peptide, subtilisin, garlic oil, borneol, Thymol, eugenol, Cineole, menthol, oil of Cymbopogon winterianus, palchouli oil, auxiliary material includes surfactant, cosurfactant, water for pharmaceutical purposes.The invention has the benefit that the preparation method of disinfecting, deodorizing nanoemulsion of the present invention is low in cost, easy to operate and agents useful for same toxicity is smaller; it is lower to the body harm degree of producers; be conducive to safety in production and environmental protection; simultaneously; disinfecting, deodorizing nanoemulsion has the ability of extremely strong killing bacterium and virus; cultivation place peculiar smell, and broad-spectrum high efficacy can be effectively removed, there is long-term bacteriostasis；It is safe and free of toxic and side effects.)

一种养殖场用消毒除臭纳米乳剂及制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种畜禽养殖领域，尤其涉及一种养殖场用消毒除臭纳米乳剂。

背景技术

近年来，随着养殖周期的缩短，养殖密度提高，导致了畜禽疾病高发。不仅给养殖业带来了较大的经济损失，更严重威胁着食品安全和人类健康。只有有效预防，才能减少发病和死亡。消毒工作是贯彻预防为主的重要措施和防控各类畜禽疾病的主要环节。许多疾病就是由于消毒不规范和不彻底所致。畜牧养殖业恶臭主要来自动物之粪尿及畜殖场地冲洗废水，新鲜家禽、家畜粪尿之物化性质及恶臭物质，所散发之空气污染物尤其是臭味常造成附近邻近乡镇居民投诉，造成居民、畜牧养殖场及政府机关的困扰，养殖场的工作人员受害尤甚。

畜禽养殖场消毒工作应主要围绕饲、饮水、空气、畜禽舍、生产区、车辆用具、人员、粪污、污水、动物尸体等方面进行。选择消毒剂应遵循“高效、安全、稳定、经济、方便”的原则。所选用的消毒剂应具有强大的杀菌和杀病毒能力；安全无毒性和残留性，刺激性小，无特殊的臭味和颜色；药剂的有效期长且稳定，与其他消毒剂无配伍禁忌；价格低廉，使用方便，容易得到；除臭效果应迅速有效，且效果持久。

发明内容

本发明的目的在于提供一种制备方法成本低廉、容易操作、并且所用试剂毒性较小，对生产人员的身体危害程度较低，有利于安全生产和环境保护，同时，消毒除臭纳米乳剂具有极强的杀灭细菌和病毒的能力，且广谱高效，能够有效去除养殖场所异味，具有长期抑菌作用；安全、无毒副作用的养殖场用消毒除臭纳米乳剂。

本发明是通过如下措施实现的：

一种养殖场用消毒除臭纳米乳剂，其特征在于，所述纳米乳剂包括有效成分和辅料，所述有效成分包括聚六亚甲基胍1-30份或聚六亚甲基胍盐类1-30份，所述有效成分还包括缩氨酸1-25份、枯草溶菌素1-25份、大蒜油1-15份、龙脑1-15份、百里香酚1-15份、丁香酚1-10份、桉叶素1-10份、薄荷脑1-10份、香茅精油1-10份、藿香油1-10份，所述辅料包括表面活性剂5-20份、助表面活性剂1-20份，制药用水5-20份。

本发明的具体特点还有：

所述纳米乳剂包括有效成分和辅料，所述有效成分包括聚六亚甲基胍15份，所述有效成分还包括缩氨酸17份、枯草溶菌素16份、大蒜油8份、龙脑7份、百里香酚7份、丁香酚6份、桉叶素7份、薄荷脑8份、香茅精油6份、藿香油6份，所述辅料包括表面活性剂13份、助表面活性剂14份，制药用水14份。

所述纳米乳剂包括有效成分和辅料，所述有效成分包括聚六亚甲基胍盐类10份，所述有效成分还包括缩氨酸13份、枯草溶菌素12份、大蒜油5份、龙脑6份、百里香酚5份、丁香酚4份、桉叶素6份、薄荷脑4份、香茅精油3份、藿香油5份，所述辅料包括表面活性剂11份、助表面活性剂8份，制药用水13份。

所述纳米乳剂是按如下方法制成的：

S1、取适量聚六亚甲基胍或聚六亚甲基胍盐类溶于制药用水中，备用；

S2、取适量缩氨酸、枯草溶菌素、大蒜油、龙脑、百里香酚、丁香酚、桉叶素、薄荷脑、香茅精油、藿香油、表面活性剂、助表面活性剂，混合搅拌均匀，备用；

S3、将步骤S1和步骤S2最终得到的溶液混合搅拌均匀放入高压均质仪中，制备得到粒径为10～100 nm的纳米乳。

所述表面活性剂为硬质酸钠、油酸钾、十二烷基硫酸钠、硬脂酸钙、聚甘油硬脂酸脂、聚甘油油酸脂、司盘（20、40、60、80）、聚氧乙烯脂肪酸酯（45、49、52）、月桂醇聚氧乙烯醚（30、35）泊洛沙姆、吐温（20、40、60、80）、***胶、西黄蓍胶、明胶、杏树胶、胆固醇中的一种或多种。

所述助表面活性剂为乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、正戊醇、异戊醇、1-己醇、2-己醇、1-辛醇、2-辛醇、杂醇油、对壬基酚中的一种或多种。

所述纳米乳剂在在畜禽养殖场所中消毒及除臭的应用。

本发明的有益效果为：本发明消毒除臭纳米乳剂的制备方法成本低廉、容易操作、并且所用试剂毒性较小，对生产人员的身体危害程度较低，有利于安全生产和环境保护，同时，消毒除臭纳米乳剂具有极强的杀灭细菌和病毒的能力，能够有效去除养殖场所异味，且广谱高效，具有长期抑菌作用；安全、无毒副作用。

具体实施方式

为能清楚说明本方案的技术特点，下面通过具体实施方式，对本方案进行阐述。

实施例1：

所述纳米乳剂包括有效成分和辅料，所述有效成分包括聚六亚甲基胍5份，所述有效成分还包括缩氨酸4份、枯草溶菌素5份、大蒜油3份、龙脑4份、百里香酚6份、丁香酚5份、桉叶素4份、薄荷脑3份、香茅精油3份、藿香油3份，所述辅料包括表面活性剂9份、助表面活性剂8份，制药用水7份。

所述纳米乳剂包括有效成分和辅料，所述有效成分包括聚六亚甲基胍盐类5份，所述有效成分还包括缩氨酸4份、枯草溶菌素5份、大蒜油3份、龙脑4份、百里香酚6份、丁香酚5份、桉叶素4份、薄荷脑3份、香茅精油3份、藿香油3份，所述辅料包括表面活性剂9份、助表面活性剂8份，制药用水7份。

所述纳米乳剂是按如下方法制成的：

S1、取适量聚六亚甲基胍或聚六亚甲基胍盐类溶于制药用水中，备用；

S2、取适量缩氨酸、枯草溶菌素、大蒜油、龙脑、百里香酚、丁香酚、桉叶素、薄荷脑、香茅精油、藿香油、表面活性剂、助表面活性剂，混合搅拌均匀，备用；

S3、将步骤S1和步骤S2最终得到的溶液混合搅拌均匀放入高压均质仪中，制备得到粒径为10～100 nm的纳米乳。

本试验制备的纳米乳剂在存放24个月期间，在外观性状、鉴别、检查、含量各项检查指标均无明显变化，符合临床前药品质量标准的各项规定，质量基本稳定。

实施例2

所述纳米乳剂包括有效成分和辅料，所述有效成分包括聚六亚甲基胍15份，所述有效成分还包括缩氨酸17份、枯草溶菌素16份、大蒜油8份、龙脑7份、百里香酚7份、丁香酚6份、桉叶素7份、薄荷脑8份、香茅精油6份、藿香油6份，所述辅料包括表面活性剂13份、助表面活性剂14份，制药用水14份。

所述纳米乳剂包括有效成分和辅料，所述有效成分包括聚六亚甲基胍盐类10份，所述有效成分还包括缩氨酸13份、枯草溶菌素12份、大蒜油5份、龙脑6份、百里香酚5份、丁香酚4份、桉叶素6份、薄荷脑4份、香茅精油3份、藿香油5份，所述辅料包括表面活性剂11份、助表面活性剂8份，制药用水13份。

所述纳米乳剂是按如下方法制成的：

S1、取适量聚六亚甲基胍或聚六亚甲基胍盐类溶于制药用水中，备用；

S2、取适量缩氨酸、枯草溶菌素、大蒜油、龙脑、百里香酚、丁香酚、桉叶素、薄荷脑、香茅精油、藿香油、表面活性剂、助表面活性剂，混合搅拌均匀，备用；

S3、将步骤S1和步骤S2最终得到的溶液混合搅拌均匀放入高压均质仪中，制备得到粒径为10～100 nm的纳米乳。

本试验制备的纳米乳剂在存放24个月期间，在外观性状、鉴别、检查、含量各项检查指标均无明显变化，符合临床前药品质量标准的各项规定，质量基本稳定。

本发明纳米乳剂的发明人在原料的制备方法及其应用方面，进行了一系列实验研究，确定了制备本发明纳米乳剂的制备方法及其有益效果，使其与现有技术相比具有明显的消毒除臭效果优势。

实验一、本发明纳米乳剂临床实验

1、刺激性试验

急性眼刺激试验 用健康成年的新西兰白色家兔4只，体重2.5~3.0kg，将该消毒除臭乳0.1ml滴入家兔左眼结膜囊内，被动闭合4s后用生理盐水冲洗，右眼为对照滴生理盐水。于滴眼后6、24、48、72h和4、7d观察并记录眼局部刺激反应并进行评分。

急性皮肤刺激试验 取健康成年的新西兰白色家兔4只，体重2.5~3.0kg，剪去脊柱两侧的毛，去毛面积两侧各为4cm×4cm，24h后确认无皮肤损伤后，将0.5ml的消毒除臭乳直接敷贴在去毛区的兔背一侧皮肤上，然后用两层纱布和一层玻璃纸覆盖，无刺激胶布固定，另一侧皮肤作为空白对照。固定4h后用温水洗去残留物，观察去除受试物后的24、48h的皮肤刺激反应，计算原发刺激指数，做出评价。

刺激试验结果表明，该消毒除臭乳对动物急性眼刺激积分指数为3，对眼有轻度刺激性。对家兔皮肤刺激强度值为0，属于无刺激性。

2、腐蚀性试验

将不锈钢、碳钢、铜和铝等4种金属片制成直径25.0mm，厚1.0mm圆形，穿一直径为2.0mm小孔，表面积总值约为9.81cm²，光洁度为8。用清洁洗涤剂浸泡，去油，洗净；以120号粒度水砂纸磨去金属表面的氧化层，再用自来水冲净，置50℃恒温箱中干燥3h后精确称重。以每个金属片200ml用量，将该消毒除臭乳分装到烧杯内，每种金属1个；然后取每种金属片一式3片悬挂浸泡在消毒除臭乳内72h，取出金属片除去腐蚀产物并清洗后，干燥后精确称重作为试验后重量。计算腐蚀速率。经检测，复方消毒乳原液对4种金属浸泡72h，对不锈钢、铜无腐蚀性，对碳钢、铝基本腐蚀速率R(mm／a)均<0.00100。

3、毒性试验

急性经口毒性试验 选体重20~22g的昆明种一级小鼠20只，雌雄各半。用消毒除臭乳采用一次经口灌胃给药，给药后观察14d，记录小鼠各种症状和死亡动物数，计算LD₅₀值。

蓄积毒性试验 取体重180~200g的昆明种一级大鼠20只，雌雄各半。根据急性毒性试验LD₅₀值按体重计算染毒剂量，第1～4d染毒剂量为0.1LD₅₀，以后每4h递增1.5倍剂量，直至28d。每4h称重1次，计算蓄积系数。

小鼠骨髓细胞微核试验 选用健康一级小鼠50只，随机分为5组，每组雌雄各5只。设计1／2LD₅₀、1／5LD₅₀、1／20LD₅₀mg／kg体重3个剂量组，另设阴性对照(蒸馏水)及阳性对照[给环磷酰胺40mg／kg(体重)]。经口灌胃给药，采用两次给药间隔24h，于末次给药后6h，常规取股骨骨髓制片、固定、染色，于油镜下对每只动物观察1000个嗜多染红细胞，计算微核率，进行统计学分析。

小鼠***畸形试验 选用25只雄性健康小鼠，随机分为5组，每组5只。设计1／2、1／5、1／20LD₅₀，等3个剂量组，另设阴性对照(蒸馏水)及阳性对照[给环磷酰胺40mg／kg(体重)]。经口灌胃给药，连续5d，于首次给药后的第35d处死动物，取副睾制片、固定、染色，于油镜下对每只动物观察2000条***中畸形***数，计算***畸形发生率，进行统计学分析。

试验结果表明，在急性经口毒性试验中，小鼠染毒后未见异常反应，未出现死亡，该复方消毒剂对小鼠急性经口LD₅₀>5000mg／kg(体重)，属实际无毒性。蓄积毒性试验给药20d，雌、雄小鼠均无死亡情况发生，小鼠蓄积系数K>5，为弱蓄积毒性，小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验为阴性，无致突变性。***畸形试验结果为阴性。

实验二、本发明纳米乳剂质量检测实验

本发明实验例对实施例1-2制得的纳米乳进行质量评价。

评价方法：

1、结构类型 取纳米乳适量，4×10³r·min^-1离心10min，观察乳滴状态。

2、形态观察及粒径分布 用蒸馏水稀释脂肪纳米乳，再加OsO₄溶液固定15 min，将固定的乳剂薄层做TEM测定。

3、稳定性 包括强光照射试验、高湿度试验、高温试验、加速试验、常温留样考察。

评价结果：

1、结构类型 为澄明纳米乳。

2、形态观察及粒径分布 形态均一，粒径分布为30~80nm，分布均匀。

3、稳定性 经稳定性考察，产品性状稳定均一。

实验三、本发明纳米乳剂应用实验

1、消毒除臭能力评价

本发明实验例通过养殖场消毒除臭试验进一步验证本发明在养殖场所消毒除臭方面的有效性。

（1）杀菌试验

根据2017版《消毒技术规范》规定操作方法：将纳米乳剂按照1:200的比例进行稀释，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌、绿脓杆菌、肠炎沙门菌、普通变形杆菌、白喉杆菌、福氏痢疾杆菌、铜绿假单胞菌进行了杀灭试验。

表1 消毒除臭纳米乳剂细菌杀灭率

样品	金黄色葡萄球菌	大肠杆菌	白色念珠菌	绿脓杆菌	肠炎沙门菌	普通变形杆菌	白喉杆菌	福氏痢疾杆菌	铜绿假单胞菌
										纳米乳剂	100	100	100	100	100	100	100	100	99

2、除臭能力试验

将本发明实际应用于数个养殖场，进行实地测试，养殖场所工作人员普遍反应，养殖场所异味显著减少，且效果能够持续3~5天。