阅读说明：本技术 用于除皱的药物组合物及其应用 (Pharmaceutical composition and its application for smoothing wrinkle ) 是由 朱盼盼 沙薇 李婷 金小小 于 2019-10-12 设计创作，主要内容包括：本发明涉及药物领域,特别涉及用于除皱的药物组合物及其应用。该组合物包括乌梅提取物、五味子提取物、赤芍提取物、柠檬酸、没食子酸,可加入药学或化妆品领域中常用的辅料或辅助性成分中,制备成凝胶剂、贴剂、软膏等。本发明的组合物能促进皮肤细胞代谢,提高皮肤天然保湿能力,长期使用具有减少或消除细小皱纹、安全无毒副作用等优点。(The present invention relates to drug fields, in particular to are used for the pharmaceutical composition and its application of smoothing wrinkle.The composition includes smoked plum extractive, Schisandra chinens P.E, red paeonia extract, citric acid, gallic acid, can be added in pharmaceutically or cosmetically field in common auxiliary material or complementary ingredient, be prepared into gelling agent, patch, ointment etc..Composition of the invention can promote skin cell metabolism, improve skin natural moisture preserving ability, and long-time service has many advantages, such as to reduce or eliminate fine wrinkles, safe without toxic side effect.)

用于除皱的药物组合物及其应用

技术领域

本发明涉及药物领域，特别涉及用于除皱的药物组合物及其应用。

背景技术

人口老化是全球性的趋势，而老化后最明显的即是皮肤外观的变化，因此延缓皮肤老化的相关产品特别受到瞩目。皱纹是皮肤老化的特征之一，而导致皱纹的诱发因素常有：

1、精神因素：情绪不好会导致人体气血运行不畅，经常闷闷不乐、急躁、孤僻，或是常常在面部表现出愁苦、紧张、拘谨的表情，牵动表情肌就容易产生纵向或横向的皱纹，使人出现衰老迹象。

2、不良生活习惯：经常睡眠不足、吸烟、缺少运动等，都会使皮肤的新陈代谢及调节功能受损，致使容颜憔悴，引起皮肤衰老、产生皱纹。

3、水分不足：水是皮肤重要的组成部分，也是皮肤进行新陈代谢所不可缺少的物质基础。一般来说，皮肤含水量若低于10％，就会呈现干燥状态，使皮肤粗糙、松弛，时间长了皱纹也就产生了

4、阳光暴晒：长时间在阳光下暴晒会使皮肤变干、变薄、失去弹性，如果使弹力纤维和角质纤维失去了正常功能，那么皮肤也会逐渐变松、起皱。

5、饮食不当：长期饮食不平衡、营养状况不佳，皮肤及肌肉组织就也会营养不良，引起的皮肤粗糙和松弛，会加速皱纹的产生。

6、化妆品使用不当：使用不适当的化妆品会破坏皮肤的质地，导致皮肤纤维减少、皮肤含水量下降、弹性下降、出现皱纹。过厚的粉底液也同样会使面部出现细密的小皱纹。

从而，为预防及改善皱纹，除了防晒、保持健康生活以外，维持皮肤含水量于10％以上，也是保养皮肤、预防皱纹生成的重要步骤。健康肌肤的含水量应维持在15～20％左右，皮肤含水量过低容易形成敏感性肌肤，而含水量至少要30％以上才能使皮肤达到晶莹剔透的效果。因此维持皮肤含水量的保湿步骤不论是在防皱、抗老等保养或是在降低皮肤过敏上皆扮演了重要的角色。

此外，由紫外线所造成的老化现象称为光老化，其会经由有丝***原(mitogen)活化蛋白激酶(protein kinase)途径的磷酸化作用而增加真皮层的基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase，MMP)的量。基质金属蛋白酶会分解胶原蛋白从而减少皮肤中的胶原蛋白含量。皮肤若少了胶原蛋白的支撑，会变得松弛失去弹性，并造成角质层过度增生，皱纹增加。目前已发现的动物胶原蛋白约有二十一种型式，其中以第一型胶原蛋白的含量最多，也是功能最广的胶原蛋白。依不同组织而有不同的胶原蛋白。于皮肤组织中，第一型胶原蛋白约占80％，而第三型胶原蛋白约占20％。因此，若能抑制基质金属蛋白酶特别是第一型的活性及/或减少其生成，即可达到改善/增进肤质的功效。

目前，用于减轻皮肤缺陷的外观，例如皱纹、细纹的手段包括侵袭性和非侵袭性技术。侵袭性技术例如手术、填充剂、激光表面重修或可提供更持久的效应并且可以治疗突出的缺陷。而非侵袭性方法的实例包括通过将粉底型化妆品涂敷至皮肤或涂敷包括可随时间减轻缺陷的外观的成分的美容制剂(例如，抗皱纹霜剂)而隐藏缺陷。遗憾的是，粉底化妆品并不耐久，且不能减轻显著皮肤缺陷的外观，例如深皱纹，而含有可以减轻缺陷的外观的成分的美容制剂需要花费较长时间才能起效，并且对于较为明显的皮肤缺陷没有作用。特别地，很多现有的美容制剂不具有能够美化显著缺陷所需的机械性能。

基于安全性及天然性考虑，目前已尝试由天然产物中开发抗老化制剂。然依现今潮流，仍有需要发展天然、安全低敏且具更佳效果的护肤除皱产品。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种用于除皱的药物组合物及其应用。该组合物具有促进皮肤细胞代谢，提高皮肤天然保湿能力，长期使用具有减少或消除细小皱纹、刺激性小、安全无毒副作用等优点。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种组合物，以重量份计，包括如下组分：

在本发明的一些具体实施方案中，以重量份计，包括如下组分：

在本发明的一些具体实施方案中，以重量份计，包括如下组分：

或

或

在上述研究的基础上，本发明还提供了所述的组合物的制备方法，包括如下步骤：

乌梅提取物的制备：取乌梅原药，经粉碎、过筛后，与乙醇水溶液混合提取，过滤后收集滤液，浓缩，真空干燥，制得乌梅提取物；

五倍子提取物的制备：取五倍子原药，粉碎后，与水混合提取，过滤后收集滤液，浓缩，真空干燥，制得五倍子提取物；

赤芍提取物的制备：取赤芍原药或饮片，粉碎后，与酸性水溶液混合提取，醇沉静置，收集沉淀经真空干燥，过筛，制得赤芍提取物。

在本发明的一些具体实施方案中，乌梅提取物的制备中，以g/mL计，乌梅原药与乙醇水溶液的质量体积比为1:(25～35)；所述乙醇水溶液中乙醇的浓度为80～90％(v/v)；

五倍子提取物的制备中，以g/mL计，五倍子原药与水的质量体积比为1:(10～20)；

赤芍提取物的制备中，以g/mL计，赤芍原药或饮片与酸性水溶液的质量体积比为1:(6～10)；所述酸性水溶液的pH值为2。

在本发明的一些具体实施方案中，乌梅提取物的制备中，所述提取的温度为60～80℃，所述提取的时间为2～4h；

五倍子提取物的制备中，所述提取的温度为100℃，每次提取的时间为1～3h，所述提取的次数为2～4次；

赤芍提取物的制备中，所述提取的温度为15～35℃，每次提取的时间为1～2h，所述提取的次数为2～4次。

在本发明的一些具体实施方案中，乌梅提取物的制备中，所述浓缩为于60～65℃浓缩至密度为1.0～1.5g/cm³；

五倍子提取物的制备中，所述浓缩为于60～65℃浓缩至密度为1.0～1.1g/cm³；

赤芍提取物的制备中，所述浓缩为于60～65℃浓缩至密度为1.15～1.18g/cm³；所述醇沉静置为：加入浓缩产物3-5倍重量的95％乙醇，搅拌20～50min，静置8～16h。

在本发明的一些具体实施方案中，所述真空干燥的真空度为-0.075～-0.085Mpa，温度为60℃，含水率＜9％。

本发明还提供了所述的组合物或所述的制备方法制得的组合物在制备除皱的药物和/或化妆品中的应用。

本发明还提供了药物或化妆品，包含所述的组合物或所述的制备方法制得的组合物以及可接受的辅料。

在本发明的一些具体实施方案中，所述药物的剂型为凝胶剂、注射剂、贴剂、软膏等。

本发明提供了一种用于除皱的药物组合物中含有乌梅、五倍子、赤芍、柠檬酸、没食子酸五种原料。本方采用君臣佐使的中医理论，乌梅为君，五倍子为臣，两药协同起收敛作用，赤芍化瘀反佐，辅以柠檬酸、没食子酸，五种原料合理配比，在加入药学或化妆品领域中常用的辅料或辅助成分后，可制备成凝胶剂、注射剂、贴剂、软膏等。保持原中药的药性作用和配伍关系，经人群试用，具有促进皮肤细胞代谢，提高皮肤天然保湿能力，长期使用具有减少或消除细小皱纹、刺激性小、安全无毒副作用等优点。

具体实施方式

本发明公开了一种用于除皱的药物组合物及其应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

所述的一种用于除皱的药物组合物，其特征在于，由下述重量份的组分构成：乌梅提取物30～50重量份、五倍子提取物10～30重量份、赤芍提取物10～30重量份、柠檬酸5～20重量份、没食子酸5～15重量份。

所述的一种用于除皱的药物组合物，其特征在于，由以下重量份的组分构成：乌梅提取物35～45重量份、五倍子提取物15～25重量份、赤芍提取物12～25重量份、柠檬酸8～15重量份、没食子酸8～12重量份。

在发明的另一些实施例中，所述的乌梅提取物通过以下步骤制得：取乌梅中药材，粉碎，过60目筛，加入25～35倍(质量体积比，即1g药材加入25～35mL乙醇)浓度为80～90％的乙醇，在温度60～80℃下，每次提取2～4个小时，过滤，回收乙醇，滤液浓缩(60～65℃)至密度为1.0～1.5g/cm³，得到浸膏，进行真空干燥，得到乌梅提取物；

所述的五倍子提取物通过以下步骤制得：取五倍子药材，粉碎成细粉，加入其重量10～20倍(质量体积比，即1g药材加入10～20ml水)的纯化水，在100℃，提取1～3小时后，进行过滤，共提取2～4次，合并滤液，静置24h，滤液浓缩(60～65℃)至相对密度为1.0～1.1g/cm³，浸膏于真空(真空度：-0.075～-0.085Mpa)干燥箱内(60℃)干燥(含水率＜9％)即得到五倍子提取物；

所述的赤芍提取物通过以下步骤制得：取赤芍药材饮片，粉碎至1500目的超微粉，加入其重量6～10倍(质量体积比，即1g药材加入6～10ml酸性水溶液)的PH＝2的酸性水溶液，提取1～2小时，过滤，共提取2～4次，合并滤液，浓缩至密度1.15～1.18g/cm³，加入3～5倍重量的95％乙醇醇沉，搅拌20～50min，静置8～16h，沉淀经真空干燥、过筛，得赤芍提取物。

在本发明的一些实施例中，所述酸性水溶液为盐酸、磷酸中的一种或两者的混合物。

所述的一种用于除皱的药物组合物，其特征在于，所述的产品类型为凝胶剂、贴剂、软膏等。

所述的产品具有促进皮肤细胞代谢，提高皮肤天然保湿能力、减少或消除细小皱纹的特点。

本发明的一种用于除皱的药物组合物中含有乌梅、五倍子、赤芍、柠檬酸、没食子酸五种原料。本方采用君臣佐使的中医理论，乌梅为君，五倍子为臣，两药协同起收敛作用，赤芍化瘀反佐，辅以柠檬酸、没食子酸，五种原料合理配比，在加入药学或化妆品领域中常用的辅料或辅助成分后，可制备成凝胶剂、注射剂、贴剂、软膏等。保持原中药的药性作用和配伍关系，经人群试用，具有促进皮肤细胞代谢，提高皮肤天然保湿能力，长期使用具有减少或消除细小皱纹、刺激性小、安全无毒副作用等优点。

本发明提供的用于除皱的药物组合物及其应用中所用试剂及原料均可由市场购得。

下面结合实施例，进一步阐述本发明：

实施例1

(1)乌梅提取物的制法：取乌梅中药材，粉碎，过60目筛，加入25倍浓度为80％的乙醇，在温度60℃下，提取2个小时，过滤，回收乙醇，滤液于60～65℃浓缩至密度为1.0g/cm³，得到浸膏，进行真空干燥，得到乌梅提取物。

(2)五倍子提取物的制法：取五倍子药材，粉碎成细粉，加入其重量18倍的纯化水，在100℃下，提取2小时后，进行过滤，共提取3次，合并滤液，静置24h，滤液于60～65℃浓缩至相对密度为1.05g/cm³，浸膏于真空干燥箱内(真空度：-0.075～-0.085Mpa，60℃)干燥，即得到五倍子提取物；

(3)赤芍提取物的制法：取赤芍药材饮片，粉碎至1500目的超微粉，加入其重量6～10倍的PH＝2的酸性水溶液，每次提取1～2小时，过滤，共提取2～4次，合并滤液，浓缩至密度1.15～1.18g/cm³，加入3～5倍重量的95％乙醇醇沉，搅拌20～50min，静置8～16h，沉淀经真空干燥、过筛，得赤芍提取物。

实施例2用于除皱的凝胶剂

取制备例1中所得的乌梅提取物35g、五倍子提取物15g、赤芍提取物12g、加入柠檬酸8g、没食子酸8g。

以上原料按照常规工艺加入常规辅料制成凝胶剂，每日早晚清洁后使用。

实施例3用于除皱的软膏

取制备例1中所得的乌梅提取物45g、五倍子提取物25g、赤芍提取物25g、加入柠檬酸15g、没食子酸12g。

以上原料按照常规工艺加入常规辅料制成软膏，每日早晚清洁后使用。

实施例4用于除皱的贴剂

取制备例1中所得的乌梅提取物40g、五倍子提取物18g、赤芍提取物18g、加入柠檬酸12g、没食子酸10g。

以上原料按照常规工艺加入常规辅料制成贴剂，每日晚上敷于清洁后皮肤15min。

效果例1除皱效果说明-体外试验说明

1、样品：实施例1中所制备的各提取物以及实施例2～4制得的组合物。

2、人的成纤维细胞的培养

通过活检从15岁男性的皮肤组织中收集人的成纤维细胞，并在37℃和5.0％的CO₂的条件下在培养箱中，将该成纤维细胞培养在DMEM(Dulbecco改进的Eagle培养基)中，该培养基含有10％的胎牛血清、100IU/mL的青霉素和50μg/mL的链霉素。

3、除皱效果测试方法

将人的成纤维细胞按10⁵个细胞/孔的细胞浓度接种在24孔板中并静置17小时，并且确认细胞贴壁。然后，去掉培养基，并将实施例1制备的各提取物溶解后取2ml分加到培养板的各个孔中，将实施例1中制得的提取物按不同浓度溶解在培养基中。将孔板在CO₂培养箱中培养48小时，之后收集上清液，然后使用I型原胶原C-肽(PIP)EIA(酶免疫测定)试剂盒测定人的成纤维细胞中生成的I型原胶原的量。

统计学方法：对I型原胶原的生产量采用统计学软件SPSS19.0进行处理，在对实验结果进行分析时，数据以表示，以P＜0.05为差异有统计学意义。

4、测试结果

实施例1中的各提取物及实施例2～4制得的制剂稀释不同的浓度，与原胶原浓度进行对比。结果如表1所示：

表1

注：*示分别与乌梅提取物、五倍子提取物、赤芍提取物相比具有显著差异(P＜0.05)；

#示分别与乌梅提取物、五倍子提取物、赤芍提取物相比具有极显著差异(P＜0.01)。

测试结果显示，与未用本发明提取物处理的对照组相比，分别用乌梅提取物、五倍子提取物、赤芍提取物、实施例2～4制得的制剂处理的人的成纤维细胞中的I型原胶原生产量随着提取物浓度的提高，生成量逐渐上升。其中，三种提取物在同浓度条件下，对原胶原生成量进行比较，结果表明乌梅提取物＞五倍子提取物＞赤芍提取物；与三种单一提取物相比，经组合后的提取物在同浓度条件下，采用SPSS19.0软件对原胶原生成量进行数据分析，P＜0.05或P＜0.01，具有统计学意义。其中，当样品浓度为0.001mg/mL时，实施例4制得的制剂分别与三种单一提取物相比，具有显著差异(P＜0.05)；当样品浓度为0.005mg/mL时，实施例2～4制得的制剂分别与三种单一提取物相比，具有显著差异(P＜0.05)；当样品浓度为0.01mg/mL时，实施例2～4制得的制剂分别与三种单一提取物相比，具有极显著差异(P＜0.01)。因此，可说明该药物组合物中的三种提取物均可增加胶原纤维的量，且经组合后增加幅度更强，从而增强皮肤弹性，达到除皱的目的。

效果例2除皱效果说明-保湿性效果

皮肤含水量测定：

1、样品：实施例2～4制备的除皱产品。

对照品：市售三种同剂型产品；对比例1：纪梵希完美抗皱细纹修复凝胶；对比例2：OLAY新生塑颜臻粹眼霜；对比例3：资生堂悦薇抗皱眼贴。

2、受试者：无任何皮肤疾患，受试部位皮肤无异常，也未涂抹任何用药物和化妆品等外用制剂；

3、实验方法：

受试前受试者统一用温和清洁剂清洗前臂内侧面，在恒定的环境中(温度为20-22℃，相对湿度为40-60％)静坐30min；在测试期间，受试者不要随意离开测试环境，并保持情绪稳定。受试产品涂抹量一般在每平方厘米2g，涂布在2cm×2cm的区域，区域之间间隔至少2cm，选择一区域作为空白对照。选择不同时间，分别测定各测试点的变化值Xnt和X0t，每点一般测定三次，取平均数；在Xnt和X0t中，其中：

n＝样品编码

t＝各个不同测试时间

0＝空白对照

4、实验结果计算：

将每个点每时间段检测的平均数值减去空白点的数值，即为该时段部位的测定值，结果以湿度测量值表示。皮肤含水量测试结果表2所示。

表2皮肤含水量测试结果

从上表的结果可以看出，使用了本发明所述的用于除皱的药物组合物的受试皮肤的含水值具有明显的提升，短时间效果显著，且能长时间保持。采用SPSS19.0软件对上述数据进行统计分析，经正态性检验后，对三组对比产品所测得的各时间点皮肤含水量进行x2检验，P＜0.05，具有统计学意义。实施例1-3的提升效果明显高于市售同剂型产品。表明该除皱的药物组合物能显著提高皮肤天然保湿能力。

效果例3除皱效果说明-人群试用试验

1、样品：实施例3制备的除皱软膏；

对照品：OLAY新生塑颜臻粹眼霜。

2、志愿者的选择及分组：

选取有面部皱纹、眼部皱纹、抬头纹、细纹、皮肤弹性的健康志愿者100名，年龄在35-60岁之间，均无严重的系统疾病、免疫缺陷或自身免疫疾病，对化妆品无过敏、面部无急性炎症、未使用激素类药物或免疫抑制剂、未涂抹外用制剂。将此100名志愿者随机分成2组，每组50人，分为试验组和对照组。

3、给药方案：

其中试验组为取实施例2中制备的除皱软膏，均匀涂布于50名志愿者的皱纹处，每次1g，连续应用30天。对照组为取市售产品(OLAY新生塑颜臻粹眼霜)，均匀涂布于50名志愿者的皱纹处，每次1g，连续应用30天。30天后评价其使用的感受及皮肤纹理情况。

评价标准：使用感受来源于志愿者自述的感觉，皮肤纹理情况通过肉眼直接观察和皮肤纹理实验。

统计学方法：志愿者的一般临床资料和检查结果均采用统计学软件SPSS19.0进行处理，在对实验结果志愿者的治疗有效性进行分析时，数据采用(％)的形式表达，采用x2的形式对试验结果数据进行检验，若P＜0.05，则证明统计学意义存在。

4、实验结果：

表3

表4

表5

从上表可知，两组人群在使用产品后除皱效果均有所改善，在使用实施例2中的除皱软膏30天后，皮肤纹理改善的有效率(86％)远高于对照组，P＜0.05，有显著性差异；针对眼部皱纹、抬头纹，试验组效果与对照组相当，P＞0.05，差异无统计学意义；面部皱纹、细纹及皮肤弹性的改善情况，组间差异性均具有统计学意义(P＜0.05)，说明除皱软膏具有明显的除皱效果。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。