一种同时制备苯乙醇苷与松果菊苷的方法
阅读说明：本技术 一种同时制备苯乙醇苷与松果菊苷的方法 (Method for simultaneously preparing phenylethanoid glycoside and echinacoside ) 是由 杨丽微 安晓东 连运河 高伟 蔡亚园 于 2020-05-06 设计创作，主要内容包括：一种同时制备苯乙醇苷与松果菊苷的方法,属于天然提取物分离纯化技术领域,包括将肉苁蓉提取物通过串联大孔树脂柱吸附；后将大孔树脂柱单独解析；将解吸液分别干燥,分别得到苯乙醇苷产品、松果菊苷产品。苯乙醇苷产品中苯乙醇苷单位含量≥90％、其中松果菊苷单位含量≥20％；松果菊苷产品中苯乙醇苷单位含量≥50％、其中松果菊苷单位含量≥45％。(A method for simultaneously preparing phenylethanoid glycoside and echinacoside belongs to the technical field of natural extract separation and purification, and comprises adsorbing Cistanchis herba extract by series macroporous resin column; then, the macroporous resin column is independently resolved; respectively drying the desorption solution to respectively obtain phenylethanoid glycoside products and echinacoside products. The phenylethanoid glycoside product contains phenylethanoid glycoside unit more than or equal to 90%, wherein echinacoside unit content is more than or equal to 20%; the content of phenylethanoid glycoside unit in echinacoside product is not less than 50%, and the content of echinacoside unit is not less than 45%.)
技术领域
本发明属于天然提取物纯化技术领域，具体涉及一种同时制备苯乙醇苷与松果菊苷的方法。
背景技术
肉苁蓉为传统中药，具有温补肾阳、抗疲劳、抗衰老、提高学习记忆能力的功效，药典中记载其植物基源为列当科肉苁蓉属植物肉苁蓉(Cistanche deserticola Ma.)和管花肉苁蓉(Cistanche tubulosa Wight)。近些年通过科学研究表明，肉苁蓉属中的苯乙醇苷类成分在肉苁蓉的功效中起到关键作用。苯乙醇苷为含有特定官能团的一类物质，其中主要代表成分为松果菊苷和毛蕊花糖苷，2015版中国药典中对肉苁蓉和管花肉苁蓉中的松果菊苷与毛蕊花糖苷进行了具体要求。
目前肉苁蓉提取物产品有苯乙醇苷产品(市场产品最高含量为85％，控制其中松果菊苷与毛蕊花糖苷含量)、松果菊苷产品(只控制松果菊苷含量)、毛蕊花糖苷产品(只控制毛蕊花糖苷含量)；通常松果菊苷产品、毛蕊花糖苷产品中要提高其松果菊苷或毛蕊花糖苷的含量需要多步的精制步骤。
在肉苁蓉提取技术领域，通常以提取获得总苯乙醇苷类成分为目标，提取产物中含有松果菊苷、毛蕊花糖苷以及其他苯乙醇苷类成分。例如，公开号CN101194934A的专利申请，记载了通过细胞破碎、浆液萃取、膜分离及大孔树脂吸附及层析分离提纯、高温灭酶、喷雾干燥等工艺的系统集成技术，获得一种肉苁蓉活性物质，其中松果菊苷单体化合物含量达到15％～49.6％，毛蕊花糖苷单体化合物含量达到5％～26.7％；公开号CN101214281A的专利申请，提取获得一种肉苁蓉活性物质，其中肉苁蓉提取物中松果菊苷及毛蕊花糖苷单体化合物含量达到20％～70％；公开号CN105111255A的专利申请公开了一种通过提取、过滤、大孔吸附树脂吸附等步骤获得的含有松果菊苷和毛蕊花糖苷的提取物，其中松果菊苷含量≥25％，毛蕊花糖苷含量≥10％，苯乙醇苷类总含量≥80％；公开号CN108542937A的专利申请公开了一种通过树脂联用分离纯化获得肉苁蓉苯乙醇苷提取物的方法，其产物中总苯乙醇苷含量超过95％，松果菊苷和毛蕊花糖苷的总含量超过85％。
此外，现有技术也存在通过新鲜肉苁蓉制备毛蕊花糖苷的工艺。例如，公开号CN101629200A的专利申请，记载了通过提取纯化工艺获得苯乙醇苷类含量54.3％～93％的肉苁蓉提取液后，以肉苁蓉提取液作为催化反应底物，以β-葡萄糖苷酶工业酶制剂固定化酶作为生物催化剂，经催化反应获得毛蕊化糖苷含量38.6％～89.2％的产品。
可见现有技术中，肉苁蓉提取目标单一，提取产品多为包含松果菊苷和毛蕊花糖苷以及其他苯乙醇苷类成分的混合物，或仅获得毛蕊花糖苷含量较高的产品。并且这些工艺中，有的获得的产品中活性成分含量较低，有的工艺步骤复杂。为了提供一种兼顾肉苁蓉提取物品质和效率的工业化生产方法，本申请提供了一种能够同时获得两种优质肉苁蓉提取产品的工业化制备方法，通过该制备方法能够简便的获得一种松果菊苷含量较高的产品，并同时能获得一种总苯乙醇苷类含量较高的产品。即通过一种提取工艺获得两种规格的产品，且该方法简单、高效，适用于现代化工业应用。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种操作简单、产品单位含量高、适合工业化生产的同时制备苯乙醇苷产品与松果菊苷产品的方法。
为解决以上技术问题，本发明采用的技术方案如下：
一种同时制备苯乙醇苷与松果菊苷的方法，其包括以下步骤：一种同时制备苯乙醇苷与松果菊苷的方法，其包括以下步骤：1)提取肉苁蓉原料，获得肉苁蓉提取液；2)将步骤1)所得提取液制备成吸附液，将吸附液通过串联的两个或两个以上吸附柱进行吸附，优选两个吸附柱；3)吸附后先用水洗，取消串联后，再用解析溶剂分别解析各吸附柱，并分别获得解析后的流出液；4)对解析流出液进一步浓缩、干燥，相应得到两种或多种产品。
更进一步，上述方法中：步骤1)所述肉苁蓉提取液中含有苯乙醇苷和松果菊苷；
更进一步，上述方法中：步骤1)所述肉苁蓉原料来源于列当科肉苁蓉属植物；具体来源为肉苁蓉(Cistanche deserticola Ma.)或管花肉苁蓉(Cistanche tubulosaWight)，所述原料可以是新鲜的，也可以是干燥后的，优选管花肉苁蓉。
更进一步，上述方法中：步骤1)所述提取为溶剂提取，所述溶剂为现有技术中任何可溶解苯乙醇苷的常规溶剂，优选水、乙醇、甲醇、丙酮或它们的混合物；
更进一步，上述方法中：步骤1)中提取方法为加热提取，提取温度不超过80℃、累计时间不超过12小时。
更进一步，上述方法中：步骤2)所述吸附液由步骤1)所获得的肉苁蓉提取液浓缩、澄清、稀释获得。更进一步，所述浓缩步骤中，浓缩程度为浓缩液重量为药材原料重量的2-7倍量(例如，由1kg肉苁蓉原料得到的浓缩液量为2-7kg)；更进一步，上述澄清步骤中使用的澄清方法包括冷却沉淀法、离心法、膜过滤法；更进一步，上述稀释步骤为在澄清步骤获得的澄清液中加入提取溶剂或水，优选使用水稀释；稀释步骤进一步优选先使用水洗涤澄清步骤所得滤渣或沉淀，再将洗液与前一步所得澄清液合并完成稀释。
更进一步，上述方法中：步骤2)中制备所得吸附液的重量为肉苁蓉原料重量的5-15倍(例如，1kg肉苁蓉原料最终制备得到的吸附液量为5-15kg)；优选8-12倍。
更进一步，上述方法中：步骤2)中所述吸附柱优选大孔吸附树脂柱；
更进一步，上述方法中：步骤2)中单位体积的大孔吸附树脂可处理的吸附液量为对应原料量的0.1-3.0倍(例如，1L树脂可以处理0.1-3kg肉苁蓉原料制备得到的吸附液)。
更进一步，上述方法中：步骤2)中优选串联两根吸附柱；
更进一步，上述方法中：步骤3)所述解析溶剂为乙醇水溶液；优选乙醇纯度为30％-95％；
更进一步，上述方法中：步骤3)所述水洗时水的用量为1-5倍柱体积，优选1-3倍柱体积。
更进一步，上述方法中：步骤4)所述干燥可采用任意的干燥方法，优选喷雾干燥或者真空干燥。
更进一步，上述方法中：步骤4)中所述产品中，第1根树脂解析产品为苯乙醇苷产品，第2根树脂解析产品为松果菊苷产品。
更进一步，上述方法中：步骤4)中所述产品中，苯乙醇苷产品中苯乙醇苷单位含量≥90％、其中松果菊苷单位含量≥20％；松果菊苷产品中苯乙醇苷单位含量≥50％、其中松果菊苷单位含量≥45％。
本申请还提供了一种同时制备苯乙醇苷与松果菊苷的方法，其包括以下步骤：
1)提取肉苁蓉原料，获得肉苁蓉提取液；2)将步骤1)所得提取液制备成吸附液，将吸附液通过两个串联的大孔吸附树脂柱；3)吸附后先用水洗，取消串联后，再用解析溶剂分别解析各吸附柱，并分别获得解析后的流出液；4)对解析流出液进一步浓缩、干燥，相应得到两种产品；
所述步骤1)所述肉苁蓉提取物中含有苯乙醇苷和松果菊苷；
所述步骤2)中，制备得到的吸附液的重量为肉苁蓉原料重量的5-15倍；
所述步骤3)中水洗时水的用量为1-5倍柱体积，解析溶剂为乙醇水溶液。
上述方法中第1根树脂解析产品为苯乙醇苷产品，其中苯乙醇苷单位含量≥90％、其中松果菊苷单位含量≥20％；第2根树脂解析产品为松果菊苷产品，其中苯乙醇苷单位含量≥50％、其中松果菊苷单位含量≥45％。
本申请还提供了一种同时制备苯乙醇苷与松果菊苷的方法，其包括以下步骤：
1)提取肉苁蓉原料，获得肉苁蓉提取液；2)将步骤1)所得提取液制备成吸附液，将吸附液通过两个串联的大孔吸附树脂柱；3)吸附后先用水洗，取消串联后，再用解析溶剂分别解析各吸附柱，并分别获得解析后的流出液；4)对解析流出液进一步浓缩、干燥，相应得到两种产品；
所述步骤1)所述肉苁蓉原料为管花肉苁蓉；
所述步骤2)中，制备得到的吸附液的重量为肉苁蓉原料重量的8-12倍；
所述步骤3)中水洗时水的用量为1-3倍柱体积，解析溶剂为30％-95％乙醇水溶液。
上述方法中第1根树脂解析产品为苯乙醇苷产品，其中苯乙醇苷单位含量≥90％、其中松果菊苷单位含量≥20％；第2根树脂解析产品为松果菊苷产品，其中苯乙醇苷单位含量≥50％、其中松果菊苷单位含量≥45％。
有益效果：
本申请利用松果菊苷与其他苯乙醇类成分在树脂中的吸附能力不同，通过串联色谱柱的方式，分别获得两种成分不同的产品。
本发明得到的苯乙醇苷产品单位含量可以达到90％以上、松果菊苷产品单位含量45％以上。本发明工艺简单，产品纯度高，适于工业化生产。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步详细说明。
下述提到的松果菊苷含量与毛蕊花糖苷含量均依照2015版中国药典的液相方法进行检测；苯乙醇苷含量检测方法为：将样品使用50％甲醇溶解至适宜浓度，在紫外分光光度计最大吸收峰处进行检测，检测以松果菊苷为标准品，做标准曲线并进行含量检测。
实施例1
原料：干燥的管花肉苁蓉(苯乙醇苷含量9.6％，松果菊苷含量3.3％，毛蕊花糖苷含量1.0％)
取干燥管花肉苁蓉600g，粉碎后添加60％乙醇5000ml65℃条件下提取4遍，每遍提取2小时，合并提取液，负压浓缩至1200ml，离心浓缩液、使用2000ml水洗渣2遍，合并清液串柱上100ml*2根大孔吸附树脂，将两根树脂进行3倍量水洗，分别用95％乙醇解析、干燥后得到两种产品。经检测，苯乙醇苷产品中苯乙醇苷含量为91.2％、松果菊苷含量为20.6％、毛蕊花糖苷含量为15.4％；松果菊苷产品中松果菊苷单位含量为49.9％，苯乙醇苷单位含量为59.1％，毛蕊花糖苷单位含量为1.3％。
表1实施例1肉苁蓉处理前后活性成分含量变化表
苯乙醇苷含量
松果菊苷含量
毛蕊花糖苷含量
管花肉苁蓉
9.6％
3.3％
1.0％
苯乙醇苷产品
91.2％
20.6％
15.4％
松果菊苷产品
59.1％
49.9％
1.3％
实施例2
原料：干燥的管花肉苁蓉(苯乙醇苷含量20.5％，松果菊苷含量8.1％，毛蕊花糖苷含量3.2％)
取上述管花肉苁蓉40g，粉碎后添加50％甲醇300ml50℃条件下提取4遍，每遍提取1.5小时，合并提取液，负压浓缩至280ml，离心浓缩液、使用100ml水洗渣2遍，合并清液串柱上200ml*2根大孔吸附树脂，将两根树脂进行1倍量水洗，分别用35％乙醇解析、干燥后得到两种产品，经检测，苯乙醇苷产品中苯乙醇苷含量为93.2％、松果菊苷含量为24.5％、毛蕊花糖苷含量为27.7％；松果菊苷产品中松果菊苷单位含量为66.8％，苯乙醇苷单位含量为85.2％，毛蕊花糖苷单位含量为2.9％。
表2实施例2肉苁蓉处理前后活性成分含量变化表
苯乙醇苷含量
松果菊苷含量
毛蕊花糖苷含量
管花肉苁蓉
20.5％
8.1％
3.2％
苯乙醇苷产品
93.2％
24.5％
27.7％
松果菊苷产品
85.2％
66.8％
2.9％
实施例3
原料：干燥的管花肉苁蓉(苯乙醇苷含量19.5％，松果菊苷含量14.1％，毛蕊花糖苷含量2.9％)
取上述管花肉苁蓉200g，粉碎后添加丙酮900ml45℃条件下提取4遍，每遍提取1.5小时，合并提取液，负压加水浓缩脱味至1000ml，离心浓缩液、使用500ml水洗渣2遍，合并清液串柱上200ml*2根大孔吸附树脂，将两根树脂进行2倍量水洗，分别用60％乙醇解析、干燥后得到两种产品，经检测，苯乙醇苷产品中苯乙醇苷含量为95.5％、松果菊苷含量为49.6％、毛蕊花糖苷含量为24.2％；松果菊苷产品中松果菊苷单位含量为90.7％，苯乙醇苷单位含量为94.1％，毛蕊花糖苷含量为0.5％。
表3实施例2肉苁蓉处理前后活性成分含量变化表
苯乙醇苷含量
松果菊苷含量
毛蕊花糖苷含量
管花肉苁蓉
19.5％
14.1％
2.9％
苯乙醇苷产品
95.5％
49.6％
24.2％
松果菊苷产品
94.1％
90.7％
0.5％
实施例4
原料：干燥的管花肉苁蓉(苯乙醇苷含量23.5％，松果菊苷含量8.1％，毛蕊花糖苷含量3.3％)
取上述管花肉苁蓉100g，粉碎后添加水2000ml80℃条件下提取4遍，每遍提取3小时，合并提取液，负压加水浓缩至600ml，离心浓缩液、使用300ml水洗渣2遍，合并清液串柱上200ml*2根大孔吸附树脂，将两根树脂进行2倍量水洗，分别用60％乙醇解析、干燥后得到两种产品，经检测，苯乙醇苷产品中苯乙醇苷含量为94.3％、松果菊苷含量为30.5％、毛蕊花糖苷含量为29.1％；松果菊苷产品中松果菊苷单位含量为62.3％，苯乙醇苷单位含量为85.6％，毛蕊花糖苷含量为1.8％。
表4实施例4肉苁蓉处理前后活性成分含量变化表
苯乙醇苷含量
松果菊苷含量
毛蕊花糖苷含量
管花肉苁蓉
23.5％
8.1％
3.3％
苯乙醇苷产品
94.3％
30.5％
29.1％
松果菊苷产品
85.6％
62.3％
1.8％
由以上实施例可以看出，肉苁蓉原料经本申请工艺提取分离后获得了含量较高的苯乙醇苷和松果菊苷两种产品，同时工艺简便，适应于工业化生产，具有优异的技术效果。
最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
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