具体实施方式

(抗老化剂、抗氧化剂、抗炎剂、及美白剂)

＜抗老化剂＞

本发明的抗老化剂含有蒿属植物经曲霉菌发酵的发酵液(以下有时称为“蒿属植物发酵液”)、百里香经曲霉菌发酵的发酵液(以下有时称为“百里香发酵液”)、香蜂草经曲霉菌发酵的发酵液(以下有时称为“香蜂草发酵液”)、及矢车菊经曲霉菌发酵的发酵液(以下有时称为“矢车菊发酵液”)中的至少任一种发酵液作为有效成分，还视需要含有其它成分。

所述蒿属植物发酵液、所述百里香发酵液、所述香蜂草发酵液、及所述矢车菊发酵液具有选自由基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1，MMP-1)活性抑制作用、透明质酸合成酶3(hyaluronan synthase 3，HAS3)mRNA表达促进作用、I型胶原蛋白产生促进作用、密蛋白-1 mRNA表达促进作用、密蛋白-4mRNA表达促进作用、紧蛋白mRNA表达促进作用、谷氨酰胺转氨酶-1(transglutaminase-1，TGM-1)mRNA表达促进作用、水通道蛋白3(Aquaporin 3，AQP3)mRNA表达促进作用、及丝聚蛋白mRNA表达促进作用所组成的群组中的至少1种作用，能够利用这些作用，用作抗老化剂的有效成分。

因此，所述抗老化剂具有选自由MMP-1活性抑制作用、透明质酸合成酶3 mRNA表达促进作用、I型胶原蛋白产生促进作用、密蛋白-1 mRNA表达促进作用、密蛋白-4mRNA表达促进作用、紧蛋白mRNA表达促进作用、谷氨酰胺转氨酶-1 mRNA表达促进作用、水通道蛋白3mRNA表达促进作用、及丝聚蛋白mRNA表达促进作用所组成的群组中的至少1种作用。

虽然尚不清楚所述蒿属植物发酵液、所述百里香发酵液、所述香蜂草发酵液、及所述矢车菊发酵液所具有的发挥MMP-1活性抑制作用、透明质酸合成酶3 mRNA表达促进作用、I型胶原蛋白产生促进作用、密蛋白-1 mRNA表达促进作用、密蛋白-4mRNA表达促进作用、紧蛋白mRNA表达促进作用、谷氨酰胺转氨酶-1 mRNA表达促进作用、水通道蛋白3 mRNA表达促进作用、及丝聚蛋白mRNA表达促进作用中的至少任一种作用的物质的详细情况，但以往完全不知道所述蒿属植物发酵液、所述百里香发酵液、所述香蜂草发酵液、及所述矢车菊发酵液具有这种优异的作用，并且可用作抗老化剂，这是本发明者们的新发现。

＜抗氧化剂＞

本发明的抗氧化剂是含有蒿属植物经曲霉菌发酵的发酵液(蒿属植物发酵液)、百里香经曲霉菌发酵的发酵液(百里香发酵液)、香蜂草经曲霉菌发酵的发酵液(香蜂草发酵液)、及矢车菊经曲霉菌发酵的发酵液(矢车菊发酵液)中的至少任一种发酵液作为有效成分，还视需要含有其它成分而成的。

所述蒿属植物发酵液、所述百里香发酵液、所述香蜂草发酵液、及所述矢车菊发酵液具有二苯基对苦基肼(DPPH，Dipheny-p-picrylhydrazyl)自由基清除作用，能够利用该作用而将其用作抗氧化剂的有效成分。

因此，所述抗氧化剂具有DPPH自由基清除作用。

虽然尚不清楚所述蒿属植物发酵液、所述百里香发酵液、所述香蜂草发酵液、及所述矢车菊发酵液所具有的发挥DPPH自由基清除作用的物质的详细情况，但以往完全不知道所述蒿属植物发酵液、所述百里香发酵液、所述香蜂草发酵液、及所述矢车菊发酵液具有这种优异的作用，并且可用作抗氧化剂，这是本发明者们的新发现。

＜抗炎剂＞

本发明的抗炎剂是含有蒿属植物经曲霉菌发酵的发酵液(蒿属植物发酵液)、及香蜂草经曲霉菌发酵的发酵液(香蜂草发酵液)中的至少任一种发酵液作为有效成分，还视需要含有其它成分而成的。

所述蒿属植物发酵液及所述香蜂草发酵液具有透明质酸酶活性抑制作用，能够利用该作用而将其用作抗炎剂的有效成分。

因此，所述抗炎剂具有透明质酸酶活性抑制作用。

虽然尚不清楚所述蒿属植物发酵液及所述香蜂草发酵液所具有的发挥透明质酸酶活性抑制作用的物质的详细情况，但以往完全不知道所述蒿属植物发酵液及所述香蜂草发酵液具有这种优异的作用，并且可用作抗炎剂，这是本发明者们的新发现。

＜美白剂＞

本发明的美白剂是含有蒿属植物经曲霉菌发酵的发酵液(蒿属植物发酵液)、香蜂草经曲霉菌发酵的发酵液(香蜂草发酵液)、及矢车菊经曲霉菌发酵的发酵液(矢车菊发酵液)中的至少任一种发酵液作为有效成分，还视需要含有其它成分而成的。

所述蒿属植物发酵液、香蜂草发酵液、及所述矢车菊发酵液具有酪氨酸酶活性抑制作用及黑色素产生抑制作用中的至少1种作用，能够利用该作用而将其用作美白剂的有效成分。

因此，所述美白剂具有酪氨酸酶活性抑制作用及黑色素产生抑制作用中的至少1种作用。

虽然尚不清楚所述蒿属植物发酵液、所述香蜂草发酵液、及所述矢车菊发酵液所具有的发挥酪氨酸酶活性抑制作用及黑色素产生抑制作用中的至少任一种作用的物质的详细情况，但以往完全不知道所述蒿属植物发酵液、所述香蜂草发酵液、及所述矢车菊发酵液具有这种优异的作用，并且可用作美白剂，这是本发明者们的新发现。

＜＜蒿属植物发酵液＞＞

所述蒿属植物发酵液是属于蒿属的植物(以下有时称为“蒿属植物”)利用曲霉菌发酵而得的发酵液。

-蒿属植物-

用作所述发酵原料的所述蒿属植物是属于菊科(Compositae)蒿属(Artemisia)的多年生草本植物，自古以来一直被用作食品或药用的原料。在北海道、本州、四国、九州等日本国内广泛地自然生长或种植，能够从这些地区容易获取。

所述蒿属植物的种类没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举：山地蒿(Artemisia montana(Nakai)Pamp.)、茵陈蒿(Artemisia capillaris Thunbergii)、魁蒿(Artemisia princeps Pampan.)、牡蒿(Artemisia japonica Thunb.)、中亚苦蒿(Artemisia absinthium L.)、白苞蒿(Artemisia lactiflora Wall.)、海岸蛔蒿(Artemisia maritima L.)、猪毛蒿(Artemisia scoparia Waldst.et kit.)等。这些可以单独使用1种，也可以并用2种以上。

所述蒿属植物的获取方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，可以从自然界采集，也可以使用市售品。

用作所述发酵原料的所述蒿属植物的使用部位没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举：花、花蕾、果实、果皮、种子、种皮、茎、叶、秆、枝叶等地上部分；根、根茎等地下部分等。这些可以单独使用1种，也可以并用2种以上。这些部位当中，所述蒿属植物的使用部位优选为地上部分。

关于用作所述发酵原料的所述蒿属植物的大小，只要是能够培养所述曲霉菌的大小，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举：所采集的原本大小、切断成所需的大小、经微粉(粉末)化的大小等。

关于用作所述发酵原料的所述蒿属植物的状态，只要是能够培养所述曲霉菌的状态，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举：所采集的原本状态、干燥状态、粉碎状态、榨汁状态、提取物的状态等。这些状态当中，从所述曲霉菌容易起作用的方面来说，优选所采集的原本状态、粉碎状态、榨汁状态、提取物的状态，更优选所采集的原本状态、粉碎状态。

使所述蒿属植物为干燥状态的方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举：日晒干燥的方法、利用常用的干燥机进行干燥的方法等。

使所述蒿属植物为所述粉碎状态的方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举利用搅拌机、榨糖机、电力磨机、喷射式磨机、冲击式粉碎机等进行粉碎的方法等。

使所述蒿属植物为所述榨汁状态的方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举压榨等。

使所述蒿属植物为所述提取物状态的方法没有特别限制，可以根据目的适当选择植物提取中常用的方法。

用作所述发酵原料的所述蒿属植物优选在接种所述曲霉菌之前进行杀菌。对所述蒿属植物进行杀菌的方法没有特别限制，可以从公知的方法中适当选择。

-曲霉菌-

使所述蒿属植物发酵的所述曲霉菌没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举：米曲霉(Aspergillus oryzae)、酱油曲霉(Aspergillus sojae)等黄曲霉菌；琉球曲霉(Aspergillus luchuensis)等黑曲霉菌；河内白曲霉(Aspergillus kawauchii)等白曲霉菌；这些的变异株等。这些可以单独使用1种，也可以并用2种以上。这些曲霉菌当中，作为所述曲霉菌，从抗老化作用、抗氧化作用、抗炎作用、及美白作用中的至少任一种作用优异的方面来说，优选米曲霉(Aspergillus oryzae)。

所述曲霉菌的获取方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，可以从自然界采集，也可以使用市售品。另外，作为所述曲霉菌，可以使用以米等为原料的种曲，也可以使用下述蒿属植物种曲，还可以使用经培养基(琼脂培养基、液体培养基等)培养的曲霉菌。这些曲霉菌当中，从抗老化作用、抗氧化作用、抗炎作用、及美白作用中的至少任一种作用优异的方面，优选使用所述蒿属植物种曲。

关于所述曲霉菌在用作所述发酵原料的所述蒿属植物上的接种量，只要是能使所述蒿属植物发酵的量，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，在所述发酵原料为液体状态的情况下，优选为1×10³个/mL～1×10⁸个/mL，在所述发酵原料为固体状态的情况下，优选为1×10³个/g～1×10⁸个/g。

在对所述蒿属植物接种所述曲霉菌时，优选添加水。所述水的添加量没有特别限制，可以根据目的适当选择，相对于所述蒿属植物100质量份，优选添加500质量份～5,000质量份，更优选添加1,000质量份～4,000质量份，特别优选添加1,500质量份～3,000质量份。

所述发酵(培养)温度只要是能够利用所述曲霉菌进行发酵的温度范围内，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为20℃～40℃，更优选为25℃～35℃。如果所述发酵温度低于20℃，则存在1法使所述蒿属植物充分发酵，抗老化作用、抗氧化作用、抗炎作用、及美白作用中的至少任一种作用不足的情况。此外，如果超过50℃，则存在无法使所述曲霉菌增殖的情况。

所述发酵(培养)时间没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为10小时～40小时，更优选为20小时～30小时。如果所述发酵时间少于10小时，则存在无法使所述蒿属植物充分发酵，抗老化作用、抗氧化作用、抗炎作用、及美白作用中的至少任一种作用不足的情况。

停止所述发酵(培养)的方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举进行加热的方法等。

用来停止所述发酵的加热温度只要是所述曲霉菌无法再生长的温度，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为50℃以上，更优选为70℃以上，特别优选为100℃～130℃。如果所述加热温度低于50℃，则存在无法停止所述发酵的情况，如果超过30℃，则存在抗老化作用、抗氧化作用、抗炎作用、及美白作用中的至少任一种作用不足的情况。

用来停止所述发酵的加热时间只要是可使所述曲霉菌成为无法生长的状态，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为5分钟以上，更优选为10分钟～20分钟。如果所述加热时间少于5分钟，则存在无法停止所述发酵的情况，如果超过20分钟，则存在抗老化作用、抗氧化作用、抗炎作用、及美白作用中的至少任一种作用不足的情况。

此外，停止所述发酵后的所述蒿属植物发酵液优选进行冷却。冷却方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举于常温下静置、于冷藏库中静置等的方法等。

所述蒿属植物利用所述曲霉菌进行发酵的次数没有特别限制，可以根据目的适当选择，可以是1次，也可以是多次。

在进行多次所述发酵的情况下，所述曲霉菌可以仅在初次接种，可以仅接种数次，也可以每次发酵时都接种，优选仅在初次接种。

在进行多次所述发酵的情况下，发酵温度及发酵时间可以分别不同，也可以相同。

--蒿属植物种曲--

所述蒿属植物种曲是使用所述蒿属植物作为种曲原料，对该种曲原料接种曲霉菌，使足量的孢子附着在该蒿属植物上生长而获得。通过在所述发酵中使用所述种曲，能够更高效率且容易地获得肌肤亲和性优异的蒿属植物发酵液，从该方面来说是有利的。

用作所述种曲原料的所述蒿属植物可以同样使用所述-蒿属植物-中记载的植物，关于所述蒿属植物的使用部位、大小、状态等形态也相同。

作为用于制作所述蒿属植物种曲的所述曲霉菌，可以同样使用所述-曲霉菌-中记载的菌。

所述曲霉菌在用作所述种曲原料的所述蒿属植物上的接种量没有特别限制，可以根据目的适当选择，相对于所述蒿属植物100质量份，优选接种5质量份～100质量份的悬浮在杀菌水中的曲霉菌(1×10³个/mL～1×10⁸个/mL)，更优选接种10质量份～50质量份，特别优选接种20质量份～30质量份。如果相对于所述蒿属植物100质量份，所述曲霉菌的接种量少于5质量份，则存在无法使足量的孢子附着于所述蒿属植物上生长的情况，如果超过100质量份，则存在因水分过多而导致异常繁殖的情况。

在对用作所述种曲原料的所述蒿属植物接种所述曲霉菌时，优选添加水。所述水的添加量没有特别限制，可以根据目的适当选择，相对于所述蒿属植物100质量份，优选添加10质量份～250质量份，更优选添加20质量份～200质量份，特别优选添加30质量份～150质量份。如果相对于所述蒿属植物100质量份，所述水的添加量少于10质量份，则存在无法使足量的孢子附着于所述蒿属植物上生长的情况。

所述培养温度只要是能使所述曲霉菌生长的温度范围内，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为20℃～40℃，更优选为25℃～35℃。如果所述培养温度低于20℃，则存在无法使足量的孢子附着于所述蒿属植物上生长的情况。此外，如果超过50℃，则存在无法使所述曲霉菌增殖的情况。

所述培养时间没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为80小时～210小时，更优选为100小时～190小时，特别优选为120小时～170小时。如果所述培养时间少于80小时，则存在无法使足量的孢子附着于所述蒿属植物上生长的情况，如果超过210小时，则存在孢子的出芽率降低的情况。

所述蒿属植物发酵液可以含有所述曲霉菌的菌体，也可以是去除所述曲霉菌的菌体后的发酵液，优选为去除所述曲霉菌的菌体后的发酵液。

所述蒿属植物发酵液的状态没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可为所述蒿属植物发酵液本身，也可为所述蒿属植物发酵液的纯化物、所述蒿属植物发酵液的浓缩物、所述蒿属植物发酵液的稀释物等。另外，所述蒿属植物发酵液也可为使该蒿属植物发酵液的干燥物再次混合或溶解于水或亲水性溶剂等溶剂中而得的液体。

所述蒿属植物发酵液的纯化物没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举将所述蒿属植物发酵液中的固体成分(例如所述蒿属植物的植物体、曲霉菌的菌体、沉淀物等)去除后的物质等。

所述去除方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举过滤等。

所述过滤方法没有特别限制，可以根据目的从公知的方法中适当选择。

所述蒿属植物发酵液的稀释物及所述蒿属植物发酵液的浓缩物没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举将蒿属植物发酵液制备为所需浓度的物质等。

所述稀释方法没有特别限制，可以根据目的从公知的方法中适当选择。

所述浓缩方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举减压浓缩等。

述蒿属植物发酵液的干燥物没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举将蒿属植物发酵液干燥所得的物质等。

所述干燥方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举冷冻干燥等。

所述蒿属植物发酵液只要是蒿属植物经曲霉菌发酵的发酵液，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，从肌肤亲和性良好的方面来说，优选为接触角81°以下的蒿属植物发酵液，更优选为接触角78°以下的蒿属植物发酵液。

本说明书中，接触角表示如下值，该值是使用动态接触角/表面张力测定装置(FTA1000 Falcon，First Ten Angstroms公司制造)，将测定样品3μL滴到所述装置的样品台，在温度22℃、相对湿度20％的条件下，利用液滴法进行测定，用θ/2法求出1,000ms的接触角θ(°)所得的值。

所述接触角是用作表示“润湿”的指标，其被定义为“在静止液体的自由表面与固体壁面接触的位置处，液面与固体面所成的角(取位于液体内部的角)”(参照《理化学辞典》第4版，岩波书店股份有限公司)。所述接触角取决于液体分子间的内聚力和固体壁面间的附着力的大小关系，当液体润湿固体(附着力大)时为锐角，当未润湿时为钝角。因此，接触角越小，越容易润湿，即，表明肌肤亲和性越好，因此，所述蒿属植物发酵液的接触角的下限没有特别限制，可以根据目的适当选择。

＜＜百里香发酵液＞＞

所述百里香发酵液是百里香经曲霉菌发酵的发酵液。

-百里香-

用作所述发酵原料的百里香(Thymus vulgaris Linne)是属于唇形科(Labiatae)地椒(Thymus)属的多年生木本植物，是草药的一种，自古以来一直被用作食用或药用的原料。别名有普通百里香等。原产地为地中海沿岸，但也在日本国内自然生长或种植，能够从这些地区容易获取。

所述百里香的获取方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，可以从自然界采集，也可以使用市售品。

用作所述发酵原料的所述百里香的使用部位没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举：花、花蕾、果实、果皮、种子、种皮、茎、叶、枝、树皮、秆、枝叶等地上部分；根、根茎等地下部分等。这些部位可以单独使用1种，也可以并用2种以上。这些部位当中，所述百里香的使用部位优选为地上部分。

关于用作所述发酵原料的所述百里香的大小，只要是能够培养所述曲霉菌的大小，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举：所采集的原本大小、切断成所需的大小、经微粉(粉末)化的大小等。

关于用作所述发酵原料的所述百里香的状态，只要是能够培养所述曲霉菌的状态，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举所采集的原本状态、干燥状态、粉碎状态、榨汁状态、提取物的状态等。这些状态当中，从所述曲霉菌容易起作用的方面来说，优选所采集的原本状态、粉碎状态、榨汁状态、提取物的状态，更优选所采集的原本状态、粉碎状态。

使所述百里香为干燥状态的方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举：日晒干燥的方法、利用常用的干燥机进行干燥的方法等。

使所述百里香为所述粉碎状态的方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举利用搅拌机、榨糖机、电力磨机、喷射式磨机、冲击式粉碎机等进行粉碎的方法等。

使所述百里香为所述榨汁状态的方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举压榨等。

使所述百里香为所述提取物状态的方法没有特别限制，可以根据目的适当选择植物提取中常用的方法。

用作所述发酵原料的所述百里香优选在接种所述曲霉菌之前进行杀菌。对所述百里香进行杀菌的方法没有特别限制，可以从公知的方法中适当选择。

-曲霉菌-

使所述百里香发酵的所述曲霉菌没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举所述＜＜蒿属植物发酵液＞＞中记载的曲霉菌等。这些曲霉菌可以单独使用1种，也可以并用2种以上。这些曲霉菌当中，作为所述曲霉菌，从抗老化作用及抗氧化作用中的至少任一种作用优异的方面来说，优选米曲霉(Aspergillus oryzae)。

所述曲霉菌的获取方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，可以从自然界采集，也可以使用市售品。另外，作为所述曲霉菌，可以使用以米等为原料的种曲，也可以使用下述百里香种曲，还可以使用经培养基(琼脂培养基、液体培养基等)培养的曲霉菌。这些曲霉菌当中，从抗老化作用及抗氧化作用中的至少任一种作用优异的方面来说，优选使用所述百里香种曲。

关于所述曲霉菌在用作所述发酵原料的所述百里香上的接种量，只要是可使所述百里香发酵的量，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，在所述发酵原料为液体状态的情况下，优选为1×10³个/mL～1×10⁸个/mL，在所述发酵原料为固体状态的情况下，优选为1×10³个/g～1×10⁸个/g。

在对所述百里香接种所述曲霉菌时，优选添加水。所述水的添加量没有特别限制，可以根据目的适当选择，相对于所述百里香100质量份，优选添加500质量份～5,000质量份，更优选添加1,000质量份～4,000质量份，特别优选添加1,500质量份～3,000质量份。

所述发酵(培养)温度只要是能够利用所述曲霉菌进行发酵的温度范围内，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为20℃～40℃，更优选为25℃～35℃。如果所述发酵温度低于20℃，则存在无法使所述百里香充分地发酵，抗老化作用及抗氧化作用中的至少任一种作用不足的情况。

所述发酵(培养)时间没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为10小时～40小时，更优选为20小时～30小时。如果所述发酵时间少于10小时，则存在无法使所述百里香充分地发酵，抗老化作用及抗氧化作用中的至少任一种作用不足的情况。

停止所述发酵(培养)的方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举进行加热的方法等。

用来停止所述发酵的加热温度只要是所述曲霉菌无法再生长的温度，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为50℃以上，更优选为70℃以上，特别优选为100℃～130℃。如果所述加热温度低于50℃，则存在无法停止所述发酵的情况，如果超过130℃，则存在抗老化作用及抗氧化作用中的至少任一种作用不足的情况。

用来停止所述发酵的加热时间只要是可使所述曲霉菌成为无法生长的状态，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为5分钟以上，更优选为10分钟～20分钟。如果所述加热时间少于5分钟，则存在无法停止所述发酵的情况，如果超过20分钟，则存在抗老化作用及抗氧化作用中的至少任一种作用不足的情况。

此外，停止所述发酵后的所述百里香发酵液优选进行冷却。冷却方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举静置于常温、冷藏库等的方法等。

所述百里香利用所述曲霉菌进行发酵的次数没有特别限制，可以根据目的适当选择，可以是1次，也可以是多次。

在进行多次所述发酵的情况下，所述曲霉菌可以仅在初次接种，可以仅接种数次，也可以每次发酵时都接种，优选仅在初次接种。

在进行多次所述发酵的情况下，发酵温度及发酵时间可以分别不同，也可以相同。

--百里香种曲--

所述百里香种曲是使用所述百里香作为种曲原料，对该种曲原料接种曲霉菌，使足量的孢子附着于该百里香上生长而得。通过在所述发酵中使用所述种曲，能够更高效率且容易地获得肌肤亲和性优异的百里香发酵液，从该方面来说是有利的。

用作所述种曲原料的所述百里香可以同样使用所述-百里香-中记载的植物，关于所述百里香的使用部位、大小、状态等形态也相同。

作为用于制作所述百里香种曲的所述曲霉菌，可以同样使用所述-曲霉菌-中记载的菌。

所述曲霉菌在用作所述种曲原料的所述百里香上的接种量没有特别限制，可以根据目的适当选择，相对于所述百里香100质量份，优选接种5质量份～100质量份的悬浮在杀菌水中的曲霉菌(1×10³个/mL～1×10⁸个/mL)，更优选接种10质量份～50质量份，特别优选接种20质量份～30质量份。如果相对于所述百里香100质量份，所述曲霉菌的接种量少于5质量份，则存在无法使足量的孢子附着于所述百里香上生长的情况，如果超过100质量份，则存在因水分过多导致异常繁殖的情况。

在对用作所述种曲原料的所述百里香接种所述曲霉菌时，优选添加水。所述水的添加量没有特别限制，可以根据目的适当选择，相对于所述百里香100质量份，优选添加10质量份～250质量份，更优选添加20质量份～200质量份，特别优选添加30质量份～150质量份。如果相对于所述百里香100质量份，所述水的添加量少于10质量份，则存在无法使足量的孢子附着于所述百里香上生长的情况。

所述培养温度只要是能使所述曲霉菌生长的温度范围内，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为20℃～40℃，更优选为25℃～35℃。如果所述培养温度低于20℃，则存在无法使足量的孢子附着于所述百里香上生长的情况。此外，如果超过50℃，则存在无法使所述曲霉菌增殖的情况。

所述培养时间没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为80小时～210小时，更优选为100小时～190小时，特别优选为120小时～170小时。如果所述培养时间少于80小时，则存在无法使足量的孢子附着于所述百里香上生长的情况，如果超过210小时，则存在孢子的出芽率下降的情况。

所述百里香发酵液可以含有所述曲霉菌的菌体，也可以是去除所述曲霉菌的菌体后的发酵液，优选为去除所述曲霉菌的菌体后的发酵液。

所述百里香发酵液的状态没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可为所述百里香发酵液本身，也可为所述百里香发酵液的纯化物、所述百里香发酵液的浓缩物、所述百里香发酵液的稀释物等。另外，所述百里香发酵液也可为使该百里香发酵液的干燥物再次混合或溶解于水或亲水性溶剂等溶剂中而得的液体。

所述百里香发酵液的纯化物没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举将所述百里香发酵液中的固体成分(例如所述百里香的植物体、曲霉菌的菌体、沉淀物等)去除后的物质等。

所述去除方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举过滤等。

所述过滤方法没有特别限制，可以根据目的从公知的方法中适当选择。

所述百里香发酵液的稀释物及所述百里香发酵液的浓缩物没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举将百里香发酵液制备为所需浓度的物质等。

所述稀释方法没有特别限制，可以根据目的从公知的方法中适当选择。

所述浓缩方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举减压浓缩等。

所述百里香发酵液的干燥物没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举将百里香发酵液干燥所得的物质等。

所述干燥方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举冷冻干燥等。

所述百里香发酵液只要是百里香经曲霉菌发酵的发酵液，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，从肌肤亲和性良好的方面来说，优选为接触角87°以下的百里香发酵液，更优选为接触角81°以下的百里香发酵液。

＜＜香蜂草发酵液＞＞

所述香蜂草发酵液是香蜂草经曲霉菌发酵的发酵液。

-香蜂草-

用作所述发酵原料的香蜂草(Melissa officinalis Linne)是属于唇形科(Labiatae)蜜蜂花(Melissa)属的多年生草本植物。其是草药的一种，自古以来一直被用作食用或药用的原料。别名有柠檬香蜂草(Lemon balm)、香蜂花(garden balm)等。原产地为南欧，但也在日本国内自然生长或种植，能够从这些地区容易获取。

所述香蜂草的获取方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，可以从自然界采集，也可以使用市售品。

用作所述发酵原料的所述香蜂草的使用部位没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举：花、花蕾、果实、果皮、种子、种皮、茎、叶、秆、枝叶等地上部分；根、根茎等地下部分等。这些部位可以单独使用1种，也可以并用2种以上。这些部位当中，所述香蜂草的使用部位优选为地上部分。

关于用作所述发酵原料的所述香蜂草的大小，只要是能够培养所述曲霉菌的大小，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举：所采集的原本大小、切断成所需的大小、经微粉(粉末)化的大小等。

关于用作所述发酵原料的所述香蜂草的状态，只要是能够培养所述曲霉菌的状态，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举：所采集的原本状态、干燥状态、粉碎状态、榨汁状态、提取物的状态等。这些状态当中，从所述曲霉菌容易起作用的方面来说，优选所采集的原本状态、粉碎状态、榨汁状态、提取物的状态，更优选所采集的原本状态、粉碎状态。

使所述香蜂草为干燥状态的方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举：日晒干燥的方法、利用常用的干燥机进行干燥的方法等。

使所述香蜂草为所述粉碎状态的方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举利用搅拌机、榨糖机、电力磨机、喷射式磨机、冲击式粉碎机等进行粉碎的方法等。

使所述香蜂草为所述榨汁状态的方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举压榨等。

使所述香蜂草为所述提取物状态的方法没有特别限制，可以根据目的适当选择植物提取中常用的方法。

关于用作所述发酵原料的所述香蜂草优选在接种所述曲霉菌之前进行杀菌。对所述香蜂草进行杀菌的方法没有特别限制，可以从公知的方法中适当选择。

-曲霉菌-

使所述香蜂草发酵的所述曲霉菌没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举所述＜＜蒿属植物发酵液＞＞中记载的曲霉菌等。这些曲霉菌可以单独使用1种，也可以并用2种以上。这些曲霉菌当中，作为所述曲霉菌，从抗老化作用、抗氧化作用、抗炎作用、及美白作用中的至少任一种作用优异的方面来说，优选米曲霉(Aspergillus oryzae)。

所述曲霉菌的获取方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，可以从自然界采集，也可以使用市售品。另外，作为所述曲霉菌，可以使用以米等为原料的种曲，也可以使用下述香蜂草种曲，还可以使用经培养基(琼脂培养基、液体培养基等)培养的曲霉菌。这些曲霉菌当中，从抗老化作用、抗氧化作用、抗炎作用、及美白作用中的至少任一种作用优异的方面来说，优选使用所述香蜂草种曲。

关于所述曲霉菌在用作所述发酵原料的所述香蜂草上的接种量，只要是能使所述香蜂草发酵的量，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，在所述发酵原料为液体状态的情况下，优选为1×10³个/mL～1×10⁸个/mL，在所述发酵原料为固体状态的情况下，优选为1×10³个/g～1×10⁸个/g。

在对所述香蜂草接种所述曲霉菌时，优选添加水。所述水的添加量没有特别限制，可以根据目的适当选择，相对于所述香蜂草100质量份，优选添加500质量份～5,000质量份，更优选添加1,000质量份～4,000质量份，特别优选添加1,500质量份～3,000质量份。

所述发酵(培养)温度只要是能够利用所述曲霉菌进行发酵的温度范围内，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为20℃～40℃，更优选为25℃～35℃。如果所述发酵温度低于20℃，则存在无法使所述香蜂草充分发酵，抗老化作用、抗氧化作用、抗炎作用、及美白作用中的至少任一种作用不足的情况。

所述发酵(培养)时间没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为10小时～40小时，更优选为20小时～30小时。如果所述发酵时间少于10小时，则存在无法使所述香蜂草充分发酵，抗老化作用、抗氧化作用、抗炎作用、及美白作用中的至少任一种作用不足的情况。

停止所述发酵(培养)的方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举进行加热的方法等。

用来停止所述发酵的加热温度只要是所述曲霉菌无法再生长的温度，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为50℃以上，更优选为70℃以上，特别优选为100℃～130℃。如果所述加热温度低于50℃，则存在无法停止所述发酵的情况，如果超过130℃，则存在抗老化作用、抗氧化作用、抗炎作用、及美白作用中的至少任一种作用不足的情况。

用来停止所述发酵的加热时间只要是可使所述曲霉菌成为无法生长的状态，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为5分钟以上，更优选为10分钟～20分钟。如果所述加热时间少于5分钟，则存在无法停止所述发酵的情况，如果超过20分钟，则存在抗老化作用、抗氧化作用、抗炎作用、及美白作用中的至少任一种作用不足的情况。

此外，停止所述发酵后的所述香蜂草发酵液优选进行冷却。冷却方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举静置于常温、冷藏库等的方法等。

所述香蜂草利用所述曲霉菌进行发酵的次数没有特别限制，可以根据目的适当选择，可以是1次，也可以是多次。

在进行多次所述发酵的情况下，所述曲霉菌可以仅在初次接种，可以仅接种数次，也可以每次发酵时都接种，优选仅在初次接种。

在进行多次所述发酵的情况下，发酵温度及发酵时间可以分别不同，也可以相同。

--香蜂草种曲--

所述香蜂草种曲是使用所述香蜂草作为种曲原料，对该种曲原料接种曲霉菌，使足量的孢子附着于该香蜂草上生长而得。通过在所述发酵中使用所述种曲，能够更高效率且容易地获得肌肤亲和性优异的香蜂草发酵液，从该方面来说是有利的。

用作所述种曲原料的所述香蜂草可以同样使用所述-香蜂草-中记载的植物，所述香蜂草的使用部位、大小、状态等形态也相同。

作为用于制作所述香蜂草种曲的所述曲霉菌，可以同样使用所述-曲霉菌-中记载的菌。

所述曲霉菌在用作所述种曲原料的所述香蜂草上的接种量没有特别限制，可以根据目的适当选择，相对于所述香蜂草100质量份，优选接种5质量份～100质量份的悬浮在杀菌水中的曲霉菌(1×10³个/mL～1×10⁸个/mL)，更优选接种10质量份～50质量份，特别优选接种20质量份～30质量份。如果相对于所述香蜂草100质量份，所述曲霉菌的接种量低于5质量份，则存在无法使足量的孢子附着于所述香蜂草上生长的情况，如果超过100质量份，则存在因水分过多导致异常繁殖的情况。

在对用作所述种曲原料的所述香蜂草接种所述曲霉菌时，优选添加水。所述水的添加量没有特别限制，可以根据目的适当选择，相对于所述香蜂草100质量份，优选添加10质量份～250质量份，更优选添加20质量份～200质量份，特别优选添加30质量份～150质量份。如果相对于所述香蜂草100质量份，所述水的添加量少于10质量份，则存在无法使足量的孢子附着于所述香蜂草上生长的情况。

所述培养温度只要是能使所述曲霉菌生长的温度范围内，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为20℃～40℃，更优选为25℃～35℃。如果所述培养温度低于20℃，则存在无法使足量的孢子附着于所述香蜂草上生长的情况。此外，如果超过50℃，则存在无法使所述曲霉菌增殖的情况。

所述培养时间没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为80小时～210小时，更优选为100小时～190小时，特别优选为120小时～170小时。如果所述培养时间低于80小时，则存在无法使足量的孢子附着于所述香蜂草上生长的情况，如果超过210小时，则存在孢子的出芽率下降的情况。

所述香蜂草发酵液可以含有所述曲霉菌的菌体，也可以是去除所述曲霉菌的菌体后的发酵液，优选为去除所述曲霉菌的菌体后的发酵液。

所述香蜂草发酵液的状态没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可为所述香蜂草发酵液本身，也可为所述香蜂草发酵液的纯化物、所述香蜂草发酵液的浓缩物、所述香蜂草发酵液的稀释物等。另外，所述香蜂草发酵液也可为使该香蜂草发酵液的干燥物再次混合或溶解于水或亲水性溶剂等溶剂中而得的液体。

所述香蜂草发酵液的纯化物没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举将所述香蜂草发酵液中的固体成分(例如所述香蜂草的植物体、曲霉菌的菌体、沉淀物等)去除后的物质等。

所述去除方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举过滤等。

所述过滤方法没有特别限制，可以根据目的从公知的方法中适当选择。

所述香蜂草发酵液的稀释物及所述香蜂草发酵液的浓缩物没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举将香蜂草发酵液制备为所需浓度的物质等。

所述稀释方法没有特别限制，可以根据目的从公知的方法中适当选择。

所述浓缩方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举减压浓缩等。

所述香蜂草发酵液的干燥物没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举将香蜂草发酵液干燥所得的物质等。

所述干燥方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举冷冻干燥等。

所述香蜂草发酵液只要是香蜂草经曲霉菌发酵的发酵液，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，从肌肤亲和性良好的方面来说，优选为接触角85°以下的香蜂草发酵液，更优选为接触角79°以下的香蜂草发酵液。

＜＜矢车菊发酵液＞＞

所述矢车菊发酵液是矢车菊经曲霉菌发酵的发酵液。

-矢车菊-

用作所述发酵原料的矢车菊(Centaurea cyanus Linne)是属于菊科(Compositae)矢车菊属(Centaurea)的一年生草本植物，自古以来一直被用作食用或药用的原料。别名有鬼灯檠、兰芙蓉(Centaurea)、车轮花(Centaurea)等。原产地为欧洲，但也在日本国内自然生长或种植，能够从这些地区容易获取。

所述矢车菊的获取方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，可以从自然界采集，也可以使用市售品。

关于用作所述发酵原料的所述矢车菊的使用部位没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举：花、花蕾、果实、果皮、种子、种皮、茎、叶、秆、枝叶等地上部分；根、根茎等地下部分等。这些部位可以单独使用1种，也可以并用2种以上。这些部位当中，所述矢车菊的使用部位优选为地上部分。

关于用作所述发酵原料的所述矢车菊的大小，只要是能够培养所述曲霉菌的大小，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举：所采集的原本大小、切断成所需的大小、经微粉(粉末)化的大小等。

关于用作所述发酵原料的所述矢车菊的状态，只要是能够培养所述曲霉菌的状态，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举：所采集的原本状态、干燥状态、粉碎状态、榨汁状态、提取物的状态等。这些状态当中，从所述曲霉菌容易起作用的方面来说，优选所采集的原本状态、粉碎状态、榨汁状态、提取物的状态，更优选所采集的原本状态、粉碎状态。

使所述矢车菊为干燥状态的方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举：日晒干燥的方法、利用常用的干燥机进行干燥的方法等。

使所述矢车菊为所述粉碎状态的方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举利用搅拌机、榨糖机、电力磨机、喷射式磨机、冲击式粉碎机等进行粉碎的方法等。

使所述矢车菊为所述榨汁状态的方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举压榨等。

使所述矢车菊为所述提取物状态的方法没有特别限制，可以根据目的适当选择植物提取中常用的方法。

用作所述发酵原料的所述矢车菊优选在接种所述曲霉菌之前进行杀菌。对所述矢车菊进行杀菌的方法没有特别限制，可以从公知的方法中适当选择。

-曲霉菌-

使所述矢车菊发酵的所述曲霉菌没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举所述＜＜蒿属植物发酵液＞＞中记载的曲霉菌等。这些曲霉菌可以单独使用1种，也可以并用2种以上。这些曲霉菌当中，作为所述曲霉菌，从抗老化作用、抗氧化作用、及美白作用中的至少任一种作用优异的方面来说，优选米曲霉(Aspergillus oryzae)。

所述曲霉菌的获取方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，可以从自然界采集，也可以使用市售品。另外，作为所述曲霉菌，可以使用以米等为原料的种曲，也可以使用下述矢车菊种曲，还可以使用经培养基(琼脂培养基、液体培养基等)培养的曲霉菌。这些曲霉菌当中，从抗老化作用、抗氧化作用、及美白作用中的至少任一种作用优异的方面来说，优选使用所述矢车菊种曲。

关于所述曲霉菌在用作所述发酵原料的所述矢车菊上的接种量，只要是能使所述矢车菊发酵的量，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，在所述发酵原料为液体状态的情况下，优选为1×10³个/mL～1×10⁸个/mL，在所述发酵原料为固体状态的情况下，优选为1×10³个/g～1×10⁸个/g。

在对所述矢车菊接种所述曲霉菌时，优选添加水。所述水的添加量没有特别限制，可以根据目的适当选择，相对于所述矢车菊100质量份，优选添加500质量份～5,000质量份，更优选添加1,000质量份～4,000质量份，特别优选添加1,500质量份～3,000质量份。

所述发酵(培养)温度只要是能够利用所述曲霉菌进行发酵的温度范围内，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为20℃～40℃，更优选为25℃～35℃。如果所述发酵温度低于20℃，则存在无法使所述矢车菊充分发酵，抗老化作用、抗氧化作用、及美白作用中的至少任一种作用不足的情况。

所述发酵(培养)时间没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为10小时～40小时，更优选为20小时～30小时。如果所述发酵时间少于10小时，则存在无法使所述矢车菊充分发酵，抗老化作用、抗氧化作用、及美白作用中的至少任一种作用不足的情况。

停止所述发酵(培养)的方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举进行加热的方法等。

用来停止所述发酵的加热温度只要是所述曲霉菌无法再生长的温度，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为50℃以上，更优选为70℃以上，特别优选为100℃～130℃。如果所述加热温度低于50℃，则存在无法停止所述发酵的情况，如果超过130℃，则存在抗老化作用、抗氧化作用、及美白作用中的至少任一种作用不足的情况。

用来停止所述发酵的加热时间只要是可使所述曲霉菌成为无法生长的状态，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为5分钟以上，更优选为10分钟～20分钟。如果所述加热时间低于5分钟，则存在无法停止所述发酵的情况，如果超过20分钟，则存在抗老化作用、抗氧化作用、及美白作用中的至少任一种作用不足的情况。

此外，停止所述发酵后的所述矢车菊发酵液优选进行冷却。冷却方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举静置于常温、冷藏库等的方法等。

所述矢车菊利用所述曲霉菌进行发酵的次数没有特别限制，可以根据目的适当选择，可以是1次，也可以是多次。

在进行多次所述发酵的情况下，所述曲霉菌可以仅在初次接种，可以仅接种数次，也可以每次发酵时都接种，优选仅在初次接种。

在进行多次所述发酵的情况下，发酵温度及发酵时间可以分别不同，也可以相同。

--矢车菊种曲--

所述矢车菊种曲是使用所述矢车菊作为种曲原料，对该种曲原料接种曲霉菌，使足量的孢子附着于该矢车菊上生长而得。通过在所述发酵中使用所述种曲，能够更高效率且容易地获得肌肤亲和性优异的矢车菊发酵液，从该方面来说是有利的。

用作所述种曲原料的所述矢车菊可以同样使用所述-矢车菊-中记载的植物，所述矢车菊的使用部位、大小、状态等形态也相同。

作为用于制作所述矢车菊种曲的所述曲霉菌，可以同样使用所述-曲霉菌-中记载的菌。

所述曲霉菌在用作所述种曲原料的所述矢车菊上的接种量没有特别限制，可以根据目的适当选择，相对于所述矢车菊100质量份，优选接种5质量份～100质量份的悬浮在杀菌水中的曲霉菌(1×10³个/mL～1×10⁸个/mL)，更优选接种10质量份～50质量份，特别优选接种20质量份～30质量份。如果相对于所述矢车菊100质量份，所述曲霉菌的接种量少于5质量份，则存在无法使足量的孢子附着于所述矢车菊上生长的情况，如果超过100质量份，则存在因水分过多导致异常繁殖的情况。

在对用作所述种曲原料的所述矢车菊接种所述曲霉菌时，优选添加水。所述水的添加量没有特别限制，可以根据目的适当选择，相对于所述矢车菊100质量份，优选添加10质量份～250质量份，更优选添加20质量份～200质量份，特别优选添加30质量份～150质量份。如果相对于所述矢车菊100质量份，所述水的添加量少于10质量份，则存在无法使足量的孢子附着于所述矢车菊上生长的情况。

所述培养温度只要是能使所述曲霉菌生长的温度范围内，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为20℃～40℃，更优选为25℃～35℃。如果所述培养温度低于20℃，则存在无法使足量的孢子附着于所述矢车菊上生长的情况。此外，如果超过50℃，则存在无法使所述曲霉菌增殖的情况。

所述培养时间没有特别限制，可以根据目的适当选择，优选为80小时～210小时，更优选为100小时～190小时，特别优选为120小时～170小时。如果所述培养时间低于80小时，则存在无法使足量的孢子附着于所述矢车菊上生长的情况，如果超过210小时，则存在孢子的出芽率下降的情况。

所述矢车菊发酵液可以含有所述曲霉菌的菌体，也可以是去除所述曲霉菌的菌体后的发酵液，优选为去除所述曲霉菌的菌体后的发酵液。

所述矢车菊发酵液的状态没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可为所述矢车菊发酵液本身，还可为所述矢车菊发酵液的纯化物、所述矢车菊发酵液的浓缩物、所述矢车菊发酵液的稀释物等。另外，所述矢车菊发酵液也可为使该矢车菊发酵液的干燥物再次混合或溶解于水或亲水性溶剂等溶剂中而得的液体。

所述矢车菊发酵液的纯化物没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举将所述矢车菊发酵液中的固体成分(例如所述矢车菊的植物体、曲霉菌的菌体、沉淀物等)去除后的物质等。

所述去除方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举过滤等。

所述过滤方法没有特别限制，可以根据目的从公知的方法中适当选择。

所述矢车菊发酵液的稀释物及所述矢车菊发酵液的浓缩物没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举将矢车菊发酵液制备为所需浓度的物质等。

所述稀释方法没有特别限制，可以根据目的从公知的方法中适当选择。

所述浓缩方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举减压浓缩等。

所述矢车菊发酵液的干燥物没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举将矢车菊发酵液干燥所得的物质等。

所述干燥方法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举冷冻干燥等。

所述矢车菊发酵液只要是矢车菊经曲霉菌发酵的发酵液，便没有特别限制，可以根据目的适当选择，从肌肤亲和性良好的方面来说，优选为接触角85°以下的矢车菊发酵液，更优选为接触角79°以下的矢车菊发酵液。

＜＜其它成分＞＞

所述抗老化剂、抗氧化剂、抗炎剂、及美白剂中的所述其它成分没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举：赋形剂、防潮剂、防腐剂、强化剂、增稠剂、乳化剂、抗氧化剂、甜味剂、酸味剂、调味料、着色剂、香料、美白剂、保湿剂、油性成分、紫外线吸收剂、表面活性剂、增稠剂、醇类、粉末成分、着色材料、水性成分、水、皮肤营养剂等。这些可以单独使用1种，也可以并用2种以上。

所述其它成分的含量没有特别限制，可以根据目的适当选择。

-用途-

本发明的抗老化剂、抗氧化剂、抗炎剂、及美白剂由于具有优异的抗老化作用、抗氧化作用、抗炎作用、及美白作用中的至少任一种作用，所以例如适合用作医药品、准药品、化妆品、饮食品等，其调配量、用法、及剂型可根据其使用目的适当选择。

所述调配量可以根据所述发酵液的生理活性等适当调整。另外，所述抗老化剂、所述抗氧化剂、所述抗炎剂、及所述美白剂还可以是所述发酵液本身。

所述用法没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举：口服用、非口服用、外用等用法。这些用法中，优选外用。

所述剂型没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举：片剂、粉剂、胶囊剂、颗粒剂、浸膏剂、及糖浆剂等口服给药剂；注射剂、滴剂、及栓剂等非口服给药剂；化妆水、乳液、乳霜、软膏、精华液、润肤乳、面膜、胶冻、唇膏、口红、粉饼、沐浴剂、肥皂、沐浴露、收敛水、养发露、发乳、整发液、润发油、洗发精、护发素等外用剂等。

另外，本发明的抗老化剂、抗氧化剂、抗炎剂、及美白剂也可以用作抗老化作用、抗氧化作用、抗炎作用、或美白作用的作用机制相关研究的试剂。

本发明的抗老化剂、抗氧化剂、抗炎剂、及美白剂适用于人，只要发挥各自的作用效果，还可以用于人以外的动物(例如小鼠、大鼠、仓鼠、狗、猫、牛、猪、猴等)。

(化妆品)

本发明的化妆品含有选自由本发明的抗老化剂、抗氧化剂、抗炎剂、及美白剂所组成的群组中的至少1种，视需要还含有其它成分。

＜抗老化剂、抗氧化剂、抗炎剂、美白剂＞

所述化妆品中的选自由所述抗老化剂、所述抗氧化剂、所述抗炎剂、及所述美白剂所组成的群组中的至少1种的含量没有特别限制，可以根据目的适当选择，相对于所述化妆品的总量，优选为5体积％以上，更优选为20体积％以上。如果选自由所述抗老化剂、所述抗氧化剂、所述抗炎剂、及所述美白剂所组成的群组中的至少1种的含量低于5体积％，则存在抗老化作用、抗氧化作用、抗炎作用、及美白作用中的至少任一种作用不足的情况。此外，选自由所述抗老化剂、所述抗氧化剂、所述抗炎剂、及所述美白剂所组成的群组中的至少1种的含量越多越好，其上限没有特别限制，可以根据目的适当选择。另外，所述化妆品还可以是选自由所述抗老化剂、所述抗氧化剂、所述抗炎剂、及所述美白剂所组成的群组中的至少1种物质本身。

＜其它成分＞

所述化妆品还可以在无损本发明的目的及作用效果的范围内，视需要进一步添加通常用于制造化妆品的各种主剂、助剂、其它成分。

所述其它成分没有特别限制，可以根据目的适当选择，例如可列举：收敛剂、杀菌剂、抗菌剂、紫外线吸收剂、细胞活化剂、油脂类、蜡类、烃类、脂肪酸类、醇类、酯类、表面活性剂、香料等。这些成分可以单独使用1种，也可以并用2种以上。在这些成分和选自由所述抗老化剂、所述抗氧化剂、所述抗炎剂、及所述美白剂所组成的群组中的至少1种并用的情况下，有时会协同地作用，带来超出预期的优异的作用效果。

关于所述化妆品中的所述其它成分的含量，只要无损本发明的效果，便没有特别限制，可以根据目的适当选择。

＜用途＞

所述化妆品的用途没有特别限制，可从通常的化妆品中适当选择，例如可列举：化妆水、乳液、乳霜、软膏、精华液、润肤乳、面膜、胶冻、唇膏、口红、粉饼、沐浴剂、肥皂、沐浴露等皮肤化妆品；收敛水、养发露、发乳、整发液、润发油、洗发精、护发素等头皮头发化妆品等。

所述化妆品可以将选自由所述抗老化剂、所述抗氧化剂、所述抗炎剂、及所述美白剂所组成的群组中的至少1种在不妨碍其活性的情况下调配到任意的化妆品中而成，也可以是以选自由所述抗老化剂、所述抗氧化剂、所述抗炎剂、及所述美白剂所组成的群组中的至少1种为主成分的化妆品。另外，所述化妆品还可以是选自由所述抗老化剂、所述抗氧化剂、所述抗炎剂、及所述美白剂所组成的群组中的至少1种物质本身。

本发明的化妆品适合用于人，但只要发挥各自的作用效果，还可以用于人以外的动物(例如小鼠、大鼠、仓鼠、狗、猫、牛、猪、猴等)。

本发明的化妆品由于含有选自由所述抗老化剂、所述抗氧化剂、所述抗炎剂、及所述美白剂所组成的群组中的至少1种，所以当用于皮肤时，发挥优异的抗老化作用、抗氧化作用、抗炎作用、及美白作用中的至少任一种作用，从该方面来说很有用。

实施例

以下列举制造例及试验例来具体地说明本发明，但本发明不受这些试验例的任何限定。

＜制造例1：三齿蒿发酵液1的制备＞

-种曲制备步骤-

用白金环(platinum loop)取曲霉菌(米曲霉(Aspergillus oryzae)，菌株名：AOK1714，秋田今野商店股份有限公司制造)，使之悬浮在杀菌水50mL中，制作曲霉菌溶液。使用Thoma血细胞计数板(EKDS制造)，估算所述曲霉菌溶液的菌数，结果为1.0×10⁵个/mL。

然后，将切成0.5cm～5cm的三齿蒿(ALBION股份有限公司制造)10g放入锥形烧瓶中，进行加压杀菌，对该三齿蒿接种所述曲霉菌溶液2mL，在30℃下静置培养168小时。培养结束后，在45℃下干燥24小时，获得“三齿蒿种曲”。

-发酵步骤-

使用粉碎机(榨糖机)将三齿蒿(ALBION股份有限公司制造)粉碎，并使之通过2mm的网筛，获得三齿蒿粉碎物。对该三齿蒿粉碎物50g添加水1,000mL并进行混合，其后接种所述种曲制备步骤中获得的三齿蒿种曲(菌数：约1.0×10⁶个/mL)20mL。然后，在25℃下预培养22小时。使用硅藻土对获得的发酵液进行过滤，获得“三齿蒿发酵液1”。

＜制造例2：三齿蒿发酵液2的制备＞

所述制造例1中，将三齿蒿种曲变更为以米为原料的种曲(米曲霉(Aspergillus oryzae)，白神亮白曲霉，秋田今野商店股份有限公司制造)(以下有时称作“米种曲”)，除此以外，利用与所述制造例1相同的方法获得“三齿蒿发酵液2”。

＜比较制造例1：三齿蒿提取液的制备＞

使用粉碎机(榨糖机)将三齿蒿(ALBION股份有限公司制造)粉碎，并使之通过2mm的网筛，获得三齿蒿粉碎物。对该三齿蒿粉碎物50g添加水1,000mL并进行混合，其后在25℃下搅拌22小时。然后，使用硅藻土对获得的搅拌物进行过滤，获得“三齿蒿提取液”。

(试验例Α-1：接触角的测定)

将制造例1中获得的三齿蒿发酵液1、制造例2中获得的三齿蒿发酵液2、及比较制造例1中获得的三齿蒿提取液作为试验样品，利用以下的方法测定接触角。

具体来说，使用动态接触角/表面张力测定装置(FTA1000 Falcon，First TenAngstroms公司制造)，将各试验样品3μL分别滴到所述装置的样品台(铝制)，在温度22℃、相对湿度20％的条件下，利用液滴法进行测定。用θ/2法求出1,000ms的接触角θ(°)。测定3次接触角，求出其平均值。将结果示于下述表1。另外，将测定各试验样品接触角时的液滴的一例示于图1A～图1C。

[表1]

相比于比较制造例1中获得的三齿蒿提取液，制造例1中获得的三齿蒿发酵液1及制造例2中获得的三齿蒿发酵液2的接触角都小，为81°以下，肌肤亲和性优异。此外，制造例1中获得的三齿蒿发酵液1的接触角为78°以下，肌肤亲和性更优异。

(试验例1-1：基质金属蛋白酶-1(MMP-1)活性抑制作用试验)

使用制造例1中获得的三齿蒿发酵液1、制造例2中获得的三齿蒿发酵液2、及比较制造例1中获得的三齿蒿提取液作为受验样品，利用改变了一部分翁施和海德里希(Wunschand Heidrich)法的下述试验方法，进行基质金属蛋白酶-1(MMP-1)活性抑制作用的试验。

在带盖的试管中，将各受验样品溶解于含20mmol/L氯化钙的0.1mol/L Tris(Tris(hydroxymethyl)aminomethane，三羟甲基氨基甲烷)-HCl缓冲液(pH值7.1)中。然后，将所述受验样品的溶解液50μL、MMP-1(来自溶组织梭菌的胶原酶IV(COLLAGENASE Type IVfrom Clostridium histolyticum)，Sigma公司制造)溶液50μL、及Pz-peptide(Pz-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg-OH，BACHEM Feinchemikalien AG公司制造)溶液400μL进行混合，在3℃下反应30分钟后，添加25mmol/L柠檬酸溶液1mL以使反应停止。此外，此时所述受验样品的最终浓度为下述表2所示的浓度。然后，添加乙酸乙酯5mL，并剧烈地振荡。将其以1,600×g进行10分钟离心分离，测定乙酸乙酯层在波长320nm下的吸光度。

另外，作为空白样品，将MMP-1溶液(酶溶液)变更为0.1mol/L Tris-HCl缓冲液(pH值7.1)，除此以外，进行与上述相同的操作并测定吸光度。

此外，作为对照，将受验样品的溶解液变更为不含受验样品的含20mmol/L氯化钙的0.1mol/L Tris-HCl缓冲液(pH值7.1)，除此以外，进行与上述相同的操作并测定吸光度。

根据所获得的吸光度的测定值，基于下述式1算出MMP-1活性抑制率。将结果示于下述表2。

＜式1＞

MMP-1活性抑制率(％)＝{1－(C－D)/(Α－B)}×100

所述式1中，A～D分别表示以下内容。

A：未添加受验样品且添加了酶时，在波长320nm下的吸光度

B：未添加受验样品且未添加酶时，在波长320nm下的吸光度

C：添加了受验样品且添加了酶时，在波长320nm下的吸光度

D：添加了受验样品且未添加酶时，在波长320nm下的吸光度

[表2]

(试验例1-2：透明质酸合成酶3(HAS3)mRNA表达促进作用试验)

使用制造例1中获得的三齿蒿发酵液1、制造例2中获得的三齿蒿发酵液2、及比较制造例1中获得的三齿蒿提取液作为受验样品，通过下述试验方法，进行透明质酸合成酶3(HAS3)mRNA表达促进作用的试验。

将各受验样品以最终浓度成为下述表3所示的浓度的方式溶解于正常人表皮角化细胞基础培养基(HuMedia-KB2，仓敷纺织股份有限公司制造)中，制备添加了受验样品的培养基。

使用正常人表皮角化细胞增殖用培养基(HuMedia-KG2，仓敷纺织股份有限公司制造)，在37℃、5％CO₂的条件下，培养正常人新生儿表皮角化细胞(Normal Human EpidermalKeratinocytes，NHEK，仓敷纺织股份有限公司制造)直至融合，其后，利用胰蛋白酶处理来回收细胞。将所回收的细胞利用正常人表皮角化细胞增殖用培养基(HuMedia-KG2)调整为1.5×10⁵细胞/mL。

然后，将所述NHEK(1.5×10⁵细胞/mL)2mL接种到35mm培养皿，在37℃、5％CO₂的条件下培养一夜。培养结束后，将培养基更换为正常人表皮角化细胞基础培养基(HuMedia-KB2)，进一步培养24小时。培养结束后，将培养基更换为所述添加了受验样品的培养基2mL，在37℃、5％CO₂的条件下培养24小时。培养结束后去除培养液，利用RNA提取用试剂(ISOGENII(目录号：311-07361)，NIPPONGENE股份有限公司制造)提取总RNA，通过分光光度计测定各RNA量，使用纯化水以成为200ng/μL的方式制备总RNA。

另外，作为对照，将所述添加了受验样品的培养基2mL变更为不含受验样品的正常人表皮角化细胞基础培养基(HuMedia-KB2)2mL，除此以外，进行与所述相同的操作并测定吸光度，利用与上述相同的方法以成为200ng/μL的方式制备总RNA。

以所述各总RNA为模板，测定透明质酸合成酶3(HAS3)mRNA及作为内部标准的甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)mRNA表达量。mRNA的检测是通过使用实时PCR(polymerase chainreaction，聚合酶链反应)装置(Thermal Cycler Dice(注册商标)实时系统III(Real TimeSystem III)，Takara Bio股份有限公司制造)、及SYBR(注册商标)PrimeScript(注册商标)RT-PCR试剂盒(Perfect Real Time(目录号：RR063A)，Takara Bio股份有限公司制造)的两步法RT-PCR反应来进行。

未添加受验样品及添加了受验样品的HAS3 mRNA的表达量由GAPDH mRNA的表达量进行了修正。根据该修正值，基于下述式2算出HAS3 mRNA表达促进率。将结果示于下述表3。

＜式2＞

HAS3 mRNA表达促进率(％)＝A/B×100

所述式2中，A及B分别表示以下内容。

A：添加了受验样品时的修正值

B：未添加受验样品时的修正值

[表3]

(试验例1-3：DPPH自由基清除作用试验)

使用制造例1中获得的三齿蒿发酵液1、制造例2中获得的三齿蒿发酵液2、及比较制造例1中获得的三齿蒿提取液作为受验样品，通过下述试验方法，进行DPPH自由基清除作用的试验。

将各受验样品溶解于乙醇溶液(富士胶片和光纯药股份有限公司制造)中，制备受验样品溶液。

向150μmol/L DPPH(diphenyl-p-picrylhydrazyl，二苯基对苦基肼)乙醇溶液3mL中添加所述受验样品溶液3mL，立即将容器塞紧进行振荡混合，静置30分钟后，测定波长520nm的吸光度。此外，此时所述受验样品的最终浓度为下述表4所示的浓度。

另外，作为空白样品，将DPPH乙醇溶液变更为不含DPPH的乙醇溶液，除此以外，进行与上述相同的操作并测定吸光度。

此外，作为对照，将受验样品溶液变更为不含受验样品的乙醇溶液(富士胶片和光纯药股份有限公司制造)，除此以外，进行与上述相同的操作并测定吸光度。

根据所获得的吸光度的测定值，基于下述式3算出DPPH自由基清除率。将结果示于下述表4。

＜式3＞

DPPH自由基清除率(％)＝{Α－(B－C)}/A×100

所述式3中，A～C分别表示以下内容。

A：未添加受验样品且添加了DPPH时，波长520nm下的吸光度

B：添加了受验样品且添加了DPPH时，波长520nm下的吸光度

C：未添加受验样品且未添加DPPH时，波长520nm下的吸光度

[表4]

(试验例1-4：透明质酸酶活性抑制作用试验)

使用制造例1中获得的三齿蒿发酵液1、制造例2中获得的三齿蒿发酵液2、及比较制造例1中获得的三齿蒿提取液作为受验样品，通过下述试验方法，进行透明质酸酶活性抑制作用的试验。

将各受验样品溶解于0.1mol/L乙酸缓冲液(pH值3.5)中，制备受验样品溶液。

向所述受验样品溶液0.2mL中添加透明质酸酶溶液(IV-S型(来自牛睾丸)、400NFunits/mL，SIGMA公司制造)0.1mL，在37℃下反应20分钟。然后，添加作为活化剂的2.5mmol/L氯化钙0.2mL，在37℃下进一步反应20分钟。向其中添加0.8mg/mL透明质酸钠溶液(来自鸡冠)(富士胶片和光纯药股份有限公司制造)0.5mL，在37℃下反应40分钟。此外，此时所述受验样品的最终浓度为下述表5所示的浓度。然后，加入0.4mol/L氢氧化钠0.2mL以使反应停止，冷却后，向各反应溶液中加入硼酸溶液0.2mL，煮沸3分钟。水冷后，加入p-DABA试剂(使对二甲氨基苯甲醛10g溶解于10N盐酸12.5mL和乙酸87.5mL的混合液中，并用乙酸稀释成10倍而成的试剂)6mL，在37℃下反应20分钟。然后，测定波长585nm下的吸光度。

另外，作为空白样品，将透明质酸酶溶液(酶溶液)变更为0.1mol/L乙酸缓冲液(pH值3.5)，除此以外，进行与上述相同的操作并测定吸光度。

此外，作为对照，将受验样品溶液变更为不含受验样品的0.1mol/L乙酸缓冲液(pH值3.5)，除此以外，进行与上述相同的操作并测定吸光度。

根据所获得的吸光度的测定值，基于下述式4算出透明质酸酶活性抑制率。将结果示于下述表5。

＜式4＞

透明质酸酶活性抑制率(％)＝{1－(C－D)/(Α－B)}×100

所述式4中，A～D分别表示以下内容。

A：未添加受验样品且添加了酶时，在波长585nm下的吸光度

B：未添加受验样品且未添加酶时，在波长585nm下的吸光度

C：添加了受验样品且添加了酶时，在波长585nm下的吸光度

D：添加了受验样品且未添加酶时，在波长585nm下的吸光度

[表5]

(试验例1-5：酪氨酸酶活性抑制作用试验)

使用制造例1中获得的三齿蒿发酵液1、制造例2中获得的三齿蒿发酵液2、及比较制造例1中获得的三齿蒿提取液作为受验样品，通过下述试验方法，进行酪氨酸酶活性抑制作用的试验。

将各受验样品溶解于25％DMSO(Dimethyl sulfoxide，二甲基亚砜)溶液，制备受验样品溶液。向48孔板中添加Mcllvaine缓冲液(pH值6.8)0.2mL、0.3 mg/mL酪氨酸溶液0.06mL、及所述受验样品溶液0.18mL，在37℃下静置10分钟。向其中添加800unit/mL酪氨酸酶溶液(SIGMA公司制造)0.02mL，在37℃下进一步反应15分钟。反应结束后，测定波长475nm下的吸光度。此外，此时所述受验样品的最终浓度为下述表6所示的浓度。

另外，作为空白样品，将酪氨酸酶溶液(酶溶液)变更为Mcllvaine缓冲液(pH值6.8)，除此以外，进行与上述相同的操作并测定吸光度。

此外，作为对照，将受验样品溶液变更为不含受验样品的25％DMSO溶液，除此以外，进行与上述相同的操作并测定吸光度。

根据所获得的吸光度的测定值，基于下述式5算出酪氨酸酶活性抑制率。将结果示于下述表6。

＜式5＞

酪氨酸酶活性抑制率(％)＝{1－(C－D)/(Α－B)}×100

所述式5中，A～D分别表示以下内容。

A：未添加受验样品且添加了酶时，在波长475nm下的吸光度

B：未添加受验样品且未添加酶时，在波长475nm下的吸光度

C：添加了受验样品且添加了酶时，在波长475nm下的吸光度

D：添加了受验样品且未添加酶时，在波长475nm下的吸光度

[表6]

＜制造例3：茵陈蒿发酵液1的制备＞

在所述制造例1的种曲制备步骤中，将三齿蒿变更为茵陈蒿(Artemisia capillaris Thunbergii)(ALBION股份有限公司制造)，除此以外，利用与所述制造例1的种曲制备步骤相同的方法制备“茵陈蒿种曲”。

另外，在所述制造例1的发酵步骤中，将三齿蒿变更为茵陈蒿(Artemisia capillaris Thunbergii)(ALBION股份有限公司制造)，除此以外，利用与所述制造例1的发酵步骤相同的方法获得“茵陈蒿发酵液1”。

＜制造例4：茵陈蒿发酵液2的制备＞

所述制造例3中，将茵陈蒿种曲变更为米种曲(Aspergillus oryzae，白神亮白曲霉，秋田今野商店股份有限公司制造)，除此以外，利用与所述制造例3相同的方法获得“茵陈蒿发酵液2”。

＜比较制造例2：茵陈蒿提取液的制备＞

所述比较制造例1中，将三齿蒿变更为茵陈蒿(Artemisia capillarisThunbergii)(ALBION股份有限公司制造)，除此以外，利用与所述比较制造例1相同的方法获得“茵陈蒿提取液”。

(试验例Α-2：接触角的测定)

所述试验例Α-1中，将试验样品变更为制造例3中获得的茵陈蒿发酵液1、制造例4中获得的茵陈蒿发酵液2、及比较制造例2中获得的茵陈蒿提取液，除此以外，利用与所述试验例Α-1相同的方法测定接触角。将结果示于下述表7。另外，将测定各试验样品接触角时的液滴的一例示于图2A～图2C。

[表7]

相比于比较制造例2中获得的茵陈蒿提取液，制造例3中获得的茵陈蒿发酵液1及制造例4中获得的茵陈蒿发酵液2的接触角都小，为81°以下，肌肤亲和性优异。此外，制造例3中获得的茵陈蒿发酵液1的接触角为78°以下，肌肤亲和性更优异。

(试验例2-1：透明质酸合成酶3(HAS3)mRNA表达促进作用试验)

试验例1-2中，将受验样品变更为制造例3中获得的茵陈蒿发酵液1、制造例4中获得的茵陈蒿发酵液2、及比较制造例2中获得的茵陈蒿提取液，将受验样品的最终浓度变更为下述表8所示的浓度，除此以外，利用与试验例1-2相同的方法进行透明质酸合成酶3(HAS3)mRNA表达促进作用的试验。将结果示于下述表8。

[表8]

(试验例2-2：I型胶原蛋白产生促进作用试验)

使用制造例3中获得的茵陈蒿发酵液1、制造例4中获得的茵陈蒿发酵液2、及比较制造例2中获得的茵陈蒿提取液作为受验样品，通过下述试验方法，进行I型胶原蛋白产生促进作用的试验。

将各受验样品以最终浓度成为下述表9所示的浓度的方式溶解于含0.25％胎牛血清(Fetal bovine serum，FBS，biosera公司制造)的杜尔贝科MEM(Modified Eagle′sMedium，改良伊格尔培养基)(日水制药股份有限公司制造)中，制备添加了受验样品的培养基。

使用含10％FBS的DMEM，在37℃、5％CO₂的条件下培养正常人纤维母细胞(NB1RGB，从RIKEN BRC购入)直至融合，其后，利用胰蛋白酶处理来回收细胞。将所回收的细胞用含10％FBS的DMEM调整为1.6×10⁵细胞/mL。

然后，将所述NB1RGB(1.6×10⁵细胞/mL)以每孔100μL接种到96孔微板，在37℃、5％CO₂的条件下培养一夜。培养结束后，将培养基更换为添加了受验样品的培养基100μL，在37℃、5％CO₂的条件下培养3天。培养结束后，利用ELISA(Enzyme Linked ImmunosorbentAssay，酶联免疫吸附测定)法测定各孔的培养基中的I型胶原蛋白量。

具体来说，将培养上清液90mL移至ELISA板，在4℃下持续一夜在培养板上的吸附后，丢弃溶液，利用含0.05％Tween-20的磷酸生理盐水缓冲液(PBS-T)洗净。其后，利用含1％FBS的磷酸生理盐水缓冲液进行封闭操作。丢弃溶液，利用含0.05％Tween-20的磷酸生理盐水缓冲液(PBS-T)洗净，与抗人胶原蛋白I型抗体(兔IgG，Chemicon公司制造)反应。丢弃溶液，利用含0.05％Tween-20的磷酸生理盐水缓冲液(PBS-T)洗净，与HRP标记抗兔IgG抗体反应后，采取同样的洗净操作，进行显色反应。

I型胶原蛋白量是使用标准品进行所述ELISA，制作校准曲线而算出。

另外，作为对照，将受验样品溶液变更为不含受验样品的含0.25％FBS的DMEM，除此以外，进行所述相同的操作并利用ELISA法进行测定。

根据所获得的测定值，基于下述式6算出I型胶原蛋白产生促进率。将结果示于下述表9。

＜式6＞

I型胶原蛋白产生促进率(％)＝A/B×100

所述式6中，A及B分别表示以下内容。

A：添加了受验样品时的I型胶原蛋白量

B：未添加受验样品时的I型胶原蛋白量

[表9]

(试验例2-3：密蛋白-1 mRNA表达促进作用试验)

使用制造例3中获得的茵陈蒿发酵液1、制造例4中获得的茵陈蒿发酵液2、及比较制造例2中获得的茵陈蒿提取液作为受验样品，通过下述试验方法，进行密蛋白-1 mRNA表达促进作用的试验。

将各受验样品以最终浓度成为下述表10所示的浓度的方式溶解于正常人表皮角化细胞基础培养基(HuMedia-KB2，仓敷纺织股份有限公司制造)中，制备添加了受验样品的培养基。

使用正常人表皮角化细胞增殖用培养基(HuMedia-KG2，仓敷纺织股份有限公司制造)，在37℃、5％CO₂的条件下培养正常人新生儿表皮角化细胞(NHEK，仓敷纺织股份有限公司制造)直至融合，其后利用胰蛋白酶处理来回收细胞。将所回收的细胞利用正常人表皮角化细胞增殖用培养基(HuMedia-KG2)调整为1.5×10⁵细胞/mL。

然后，将所述NHEK(1.5×10⁵细胞/mL)2mL接种到35mm培养皿，在37℃、5％CO₂条件下培养一夜。培养结束后，将培养基更换为正常人表皮角化细胞基础培养基(HuMedia-KB2)，进一步培养24小时。培养结束后，将培养基更换为所述添加了受验样品的培养基2mL，在37℃、5％CO₂的条件下培养24小时。培养结束后去除培养液，利用RNA提取用试剂(ISOGENII(目录号：311-07361)，NIPPONGENE股份有限公司制造)提取总RNA，通过分光光度计测定各RNA量，使用纯化水以成为200ng/μL的方式制备总RNA。

另外，作为对照，将所述添加了受验样品的培养基2mL变更为不含受验样品的正常人表皮角化细胞基础培养基(HuMedia-KB2)2mL，除此以外，进行与所述相同的操作并测定吸光度，利用与上述相同的方法以成为200ng/μL的方式制备总RNA。

以所述各总RNA为模板，测定密蛋白-1 mRNA及作为内部标准的GAPDH mRNA表达量。mRNA的检测是通过使用实时PCR装置(Thermal Cycler Dice(注册商标)实时系统III，Takara Bio股份有限公司制造)、及SYBR(注册商标)PrimeScript(注册商标)RT-PCR试剂盒(Perfect Real Time(目录号：RR063A)，Takara Bio股份有限公司制造)的两步法实时PCR反应来进行。

未添加受验样品及添加了受验样品的密蛋白-1 mRNA表达量由GAPDH mRNA的表达量进行了修正。根据该修正值，基于下述式7算出密蛋白-1mRNA表达促进率。将结果示于下述表10。

＜式7＞

密蛋白-1 mRNA表达促进率(％)＝A/B×100

所述式7中，A及B分别表示以下内容。

A：添加了受验样品时的修正值

B：未添加受验样品时的修正值

[表10]

(试验例2-4：密蛋白-4mRNA表达促进作用试验)

将制造例3中获得的茵陈蒿发酵液1、制造例4中获得的茵陈蒿发酵液2、及比较制造例2中获得的茵陈蒿提取液作为受验样品，通过下述试验方法，进行密蛋白-4mRNA表达促进作用的试验。

将各受验样品以最终浓度成为下述表11所示的浓度的方式溶解于正常人表皮角化细胞基础培养基(HuMedia-KB2，仓敷纺织股份有限公司制造)中，制备添加了受验样品的培养基。

使用正常人表皮角化细胞增殖用培养基(HuMedia-KG2，仓敷纺织股份有限公司制造)，在37℃、5％CO₂的条件下培养正常人新生儿表皮角化细胞(NHEK，仓敷纺织股份有限公司制造)直至融合，其后利用胰蛋白酶处理来回收细胞。将所回收的细胞利用正常人表皮角化细胞增殖用培养基(HuMedia-KG2)调整为1.5×10⁵细胞/mL。

然后，将所述NHEK(1.5×10⁵细胞/mL)2mL接种到35mm培养皿，在37℃、5％CO₂条件下培养一夜。培养结束后，将培养基更换为正常人表皮角化细胞基础培养基(HuMedia-KB2)，进一步培养24小时。培养结束后，将培养基更换为所述添加了受验样品的培养基2mL，在37℃、5％CO₂的条件下培养24小时。培养结束后去除培养液，利用RNA提取用试剂(ISOGENII(目录号：311-07361)，NIPPONGENE股份有限公司制造)提取总RNA，通过分光光度计测定各RNA量，使用纯化水以成为200ng/μL的方式制备总RNA。

另外，作为对照，将所述添加了受验样品的培养基2mL变更为不含受验样品的正常人表皮角化细胞基础培养基(HuMedia-KB2)2mL，除此以外，进行与所述相同的操作并测定吸光度，利用与所述相同的方法以成为200ng/μL的方式制备总RNA。

以所述各总RNA为模板，测定密蛋白-4mRNA及作为内部标准的GAPDH mRNA表达量。mRNA的检测是通过使用实时PCR装置(Thermal Cycler Dice(注册商标)实时系统III，Takara Bio股份有限公司制造)、及SYBR(注册商标)PrimeScript(注册商标)RT-PCR试剂盒(Perfect Real Time(目录号：RR063A)，Takara Bio股份有限公司制造)的两步法实时PCR反应来进行。

未添加受验样品及添加了受验样品的密蛋白-4mRNA表达量由GAPDH mRNA的表达量进行了修正。根据该修正值，基于下述式8算出密蛋白-4mRNA表达促进率。将结果示于下述表11。

＜式8＞

密蛋白-4mRNA表达促进率(％)＝A/B×100

所述式8中，A及B分别表示以下内容。

A：添加了受验样品时的修正值

B：未添加受验样品时的修正值

[表11]

(试验例2-5：紧蛋白mRNA表达促进作用试验)

将制造例3中获得的茵陈蒿发酵液1、制造例4中获得的茵陈蒿发酵液2、及比较制造例2中获得的茵陈蒿提取液作为受验样品，通过下述试验方法，进行紧蛋白mRNA表达促进作用的试验。

将各受验样品以最终浓度成为下述表12所示的浓度的方式溶解于正常人表皮角化细胞基础培养基(HuMedia-KB2，仓敷纺织股份有限公司制造)中，制备添加了受验样品的培养基。

使用正常人表皮角化细胞增殖用培养基(HuMedia-KG2，仓敷纺织股份有限公司制造)，在37℃、5％CO₂的条件下培养正常人新生儿表皮角化细胞(NHEK，仓敷纺织股份有限公司制造)直至融合，其后利用胰蛋白酶处理来回收细胞。将所回收的细胞利用正常人表皮角化细胞增殖用培养基(HuMedia-KG2)调整为1.5×10⁵细胞/mL。

然后，将所述NHEK(1.5×10⁵细胞/mL)2mL接种到35mm培养皿，在37℃、5％CO₂条件下培养一夜。培养结束后，将培养基更换为正常人表皮角化细胞基础培养基(HuMedia-KB2)，进一步培养24小时。培养结束后去除培养液，利用RNA提取用试剂(ISOGEN II(目录号：311-07361)，NIPPONGENE股份有限公司制造)提取总RNA，通过分光光度计测定各RNA量，使用纯化水以成为200ng/μL的方式制备总RNA。

另外，作为对照，将所述添加了受验样品的培养基2mL变更为不含受验样品的正常人表皮角化细胞基础培养基(HuMedia-KB2)2mL，除此以外，进行与所述相同的操作并测定吸光度，利用与所述相同的方法以成为200ng/μL的方式制备总RNA。

以所述各总RNA为模板，测定紧蛋白mRNA及作为内部标准的GAPDH mRNA表达量。mRNA的检测是通过使用实时PCR装置(Thermal Cycler Dice(注册商标)实时系统III，Takara Bio股份有限公司制造)、及SYBR(注册商标)PrimeScript(注册商标)RT-PCR试剂盒(Perfect Real Time(目录号：RR063A)，Takara Bio股份有限公司制造)的两步法实时PCR反应来进行。

未添加受验样品及添加了受验样品的紧蛋白mRNA表达量由GAPDH mRNA表达量进行了修正。根据该修正值，基于下述式9算出紧蛋白mRNA表达促进率。将结果示于下述表12。

＜式9＞

紧蛋白mRNA表达促进率(％)＝A/B×100

所述式9中，A及B分别表示以下内容。

A：添加了受验样品时的修正值

B：未添加受验样品时的修正值

[表12]

＜制造例5：百里香发酵液1的制备＞

在所述制造例1的种曲制备步骤中，将三齿蒿变更为百里香(Thymus vulgarisLinne)(ALBION股份有限公司制造)，除此以外，利用与所述制造例1的种曲制备步骤相同的方法制备“百里香种曲”。

另外，在所述制造例1的发酵步骤中，将三齿蒿变更为百里香(Thymus vulgarisLinne)(ALBION股份有限公司制造)，除此以外，利用与所述制造例1的发酵步骤相同的方法获得“百里香发酵液1”。

<制造例6：百里香发酵液2的制备>

所述制造例5中，将百里香种曲变更为米种曲(Aspergillus oryzae，白神亮白曲霉，秋田今野商店股份有限公司制造)，除此以外，利用与所述制造例5相同的方法获得“百里香发酵液2”。

<比较制造例3：百里香提取液的制备>

所述比较制造例1中，将三齿蒿变更为百里香(Thymus vulgaris Linne)(ALBION股份有限公司制造)，除此以外，利用与所述比较制造例1相同的方法获得“百里香提取液”。

(试验例A-3：接触角的测定)

所述试验例A-1中，将试验样品变更为制造例5中获得的百里香发酵液1、制造例6中获得的百里香发酵液2、及比较制造例3中获得的百里香提取液，除此以外，利用与所述试验例A-1相同的方法测定接触角。将结果示于下述表13。另外，将测定各试验样品接触角时的液滴的一例示于图3A～图3C。

[表13]

相比于比较制造例3中获得的百里香提取液，制造例5中获得的百里香发酵液1及制造例6中获得的百里香发酵液2的接触角都小，为87°以下，肌肤亲和性优异。此外，制造例5中获得的百里香发酵液1的接触角为81°以下，肌肤亲和性更优异。

(试验例3-1：谷氨酰胺转氨酶-1(TGM-1)mRNA表达促进作用试验)

使用制造例5中获得的百里香发酵液1、制造例6中获得的百里香发酵液2、及比较制造例3中获得的百里香提取液作为受验样品，通过下述试验方法，进行谷氨酰胺转氨酶-1(TGM-1)mRNA表达促进作用的试验。

将各受验样品以最终浓度成为下述表14所示的浓度的方式溶解于正常人表皮角化细胞基础培养基(HuMedia-KB2，仓敷纺织股份有限公司制造)中，制备添加了受验样品的培养基。

使用正常人表皮角化细胞增殖用培养基(HuMedia-KG2，仓敷纺织股份有限公司制造)，在37℃、5％CO₂的条件下培养正常人新生儿表皮角化细胞(NHEK，仓敷纺织股份有限公司制造)直至融合，其后利用胰蛋白酶处理来回收细胞。将所回收的细胞利用正常人表皮角化细胞增殖用培养基(HuMedia-KG2)调整为1.5×10⁵细胞/mL。

然后，将所述NHEK(1.5×10⁵细胞/mL)2mL接种到35mm培养皿，在37℃、5％CO₂条件下培养一夜。培养结束后，将培养基更换为正常人表皮角化细胞基础培养基(HuMedia-KB2)，进一步培养24小时。培养结束后，将培养基更换为所述添加了受验样品的培养基2mL，在37℃、5％CO₂的条件下培养24小时。培养结束后去除培养液，利用RNA提取用试剂(ISOGENII(目录号：311-07361)，NIPPONGENE股份有限公司制造)提取总RNA，通过分光光度计测定各RNA量，使用纯化水以成为200ng/μL的方式制备总RNA。

另外，作为对照，将所述添加了受验样品的培养基2mL变更为不含受验样品的正常人表皮角化细胞基础培养基(HuMedia-KB2)2mL，除此以外，进行与所述相同的操作并测定吸光度，利用与上述相同的方法以成为200ng/μL的方式制备总RNA。

以所述各总RNA为模板，测定谷氨酰胺转氨酶-1(TGM-1)mRNA及作为内部标准的GAPDH mRNA表达量。mRNA的检测是通过使用实时PCR装置(Thermal Cycler Dice(注册商标)实时系统III，Takara Bio股份有限公司制造)、及SYBR(注册商标)PrimeScriPt(注册商标)RT-PCR试剂盒(Perfect Real Time(目录号：RR063A)，Takara Bio股份有限公司制造)的两步法实时PCR反应来进行。

未添加受验样品及添加了受验样品的TGM-1 mRNA表达量由GAPDH mRNA表达量进行了修正。根据该修正值，基于下述式10算出TGM-1 mRNA表达促进率。将结果示于下述表14。

＜式10＞

TGM-1 mRNA表达促进率(％)＝A/B×100

所述式10中，A及B分别表示以下内容。

A：添加了受验样品时的修正值

B：未添加受验样品时的修正值

[表14]

(试验例3-2：水通道蛋白3(AQP3)mRNA表达促进作用试验)

使用制造例5中获得的百里香发酵液1、制造例6中获得的百里香发酵液2、及比较制造例3中获得的百里香提取液作为受验样品，通过下述试验方法，进行水通道蛋白3(AQP3)mRNA表达促进作用的试验。

将各受验样品以最终浓度成为下述表15所示的浓度的方式溶解于正常人表皮角化细胞基础培养基(HuMedia-KB2，仓敷纺织股份有限公司制造)中，制备添加了受验样品的培养基。

使用正常人表皮角化细胞增殖用培养基(HuMedia-KG2，仓敷纺织股份有限公司制造)，在37℃、5％CO₂的条件下培养正常人新生儿表皮角化细胞(NHEK，仓敷纺织股份有限公司制造)直至融合，其后利用胰蛋白酶处理来回收细胞。将所回收的细胞利用正常人表皮角化细胞增殖用培养基(HuMedia-KG2)调整为1.5×10⁵细胞/mL。

然后，将所述NHEK(1.5×10⁵细胞/mL)2mL接种到35mm培养皿，在37℃、5％CO₂条件下培养一夜。培养结束后，将培养基更换为正常人表皮角化细胞基础培养基(HuMedia-KB2)，进一步培养24小时。培养结束后，将培养基更换为所述添加了受验样品的培养基2mL，在37℃、5％CO₂的条件下培养24小时。培养结束后去除培养液，利用RNA提取用试剂(ISOGENII(目录号：311-07361)，NIPPONGENE股份有限公司制造)提取总RNA，通过分光光度计测定各RNA量，使用纯化水以成为200ng/μL的方式制备总RNA。

另外，作为对照，将所述添加了受验样品的培养基2mL变更为不含受验样品的正常人表皮角化细胞基础培养基(HuMedia-KB2)2mL，除此以外，进行与所述相同的操作并测定吸光度，利用与上述相同的方法以成为200ng/μL的方式制备总RNA。

以所述各总RNA为模板，测定水通道蛋白3(AQP3)mRNA及作为内部标准的GAPDHmRNA表达量。mRNA的检测是通过使用实时PCR装置(Thermal Cycler Dice(注册商标)实时系统III，Takara Bio股份有限公司制造)、及SYBR(注册商标)PrimeScript(注册商标)RT-PCR试剂盒(Perfect Real Time(目录号：RR063A)，Takara Bio股份有限公司制造)的两步法实时PCR反应来进行。

未添加受验样品及添加了受验样品的AQP3 mRNA表达量由GAPDH mRNA表达量进行了修正。根据该修正值，基于下述式11算出AQP3 mRNA表达促进率。将结果示于下述表15。

＜式11＞

AQP3 mRNA表达促进率(％)＝A/B×100

所述式11中，A及B分别表示以下内容。

A：添加了受验样品时的修正值

B：未添加受验样品时的修正值

[表15]

(试验例3-3：紧蛋白mRNA表达促进作用试验)

试验例2-5中，将受验样品变更为制造例5中获得的百里香发酵液1、制造例6中获得的百里香发酵液2、及比较制造例3中获得的百里香提取液，将受验样品的最终浓度变更为下述表16所示的浓度，除此以外，利用与试验例2-5相同的方法进行紧蛋白mRNA表达促进作用的试验。将结果示于下述表16。

[表16]

(试验例3-4：DPPH自由基清除作用试验)

试验例1-3中，将受验样品变更为制造例5中获得的百里香发酵液1、制造例6中获得的百里香发酵液2、及比较制造例3中获得的百里香提取液，将受验样品的最终浓度变更为下述表17所示的浓度，除此以外，利用与试验例1-3相同的方法进行DPPH自由基清除作用的试验。将结果示于下述表17。

[表17]

<制造例7：香蜂草发酵液1的制备>

在所述制造例1的种曲制备步骤中，将三齿蒿变更为香蜂草(Melissa officinalis Linne)(ALBION股份有限公司制造)，除此以外，利用与所述制造例1的种曲制备步骤相同的方法制备“香蜂草种曲”。

另外，在所述制造例1的发酵步骤中，将三齿蒿变更为香蜂草(Melissa officinalis Linne)(ALBION股份有限公司制造)，除此以外，利用与所述制造例1的发酵步骤相同的方法获得“香蜂草发酵液1”。

<制造例8：香蜂草发酵液2的制备>

所述制造例7中，将香蜂草种曲变更为米种曲(Aspergillus oryzae，白神亮白曲霉，秋田今野商店股份有限公司制造)，除此以外，利用与所述制造例7相同的方法获得“香蜂草发酵液2”。

<比较制造例4：香蜂草提取液的制备>

所述比较制造例1中，将三齿蒿变更为香蜂草(Melissa officinalis Linne)(ALBION股份有限公司制造)，除此以外，利用与所述比较制造例1相同的方法获得“香蜂草提取液”。

(试验例A-4：接触角的测定)

所述试验例A-1中，将试验样品变更为制造例7中获得的香蜂草发酵液1、制造例8中获得的香蜂草发酵液2、及比较制造例4中获得的香蜂草提取液，除此以外，利用与所述试验例A-1相同的方法测定接触角。将结果示于下述表18。另外，将测定各试验样品接触角时的液滴的一例示于图4A～图4C。

[表18]

相比于比较制造例4中获得的香蜂草提取液，制造例7中获得的香蜂草发酵液1及制造例8中获得的香蜂草发酵液2的接触角都小，为85°以下，肌肤亲和性优异。此外，制造例7中获得的香蜂草发酵液1的接触角为79°以下，肌肤亲和性更优异。

(试验例4-1：I型胶原蛋白产生促进作用试验)

试验例2-2中，将受验样品变更为制造例7中获得的香蜂草发酵液1、制造例8中获得的香蜂草发酵液2、及比较制造例4中获得的香蜂草提取液，将受验样品的最终浓度变更为下述表19所示的浓度，除此以外，利用与试验例2-2相同的方法进行I型胶原蛋白产生促进作用的试验。将结果示于下述表19。

[表19]

(试验例4-2：水通道蛋白3(AQP3)mRNA表达促进作用试验)

试验例3-2中，将受验样品变更为制造例7中获得的香蜂草发酵液1、制造例8中获得的香蜂草发酵液2、及比较制造例4中获得的香蜂草提取液，将受验样品的最终浓度变更为下述表20所示的浓度，除此以外，利用与试验例3-2相同的方法进行水通道蛋白3(AQP3)mRNA表达促进作用的试验。将结果示于下述表20。

[表20]

(试验例4-3：DPPH自由基清除作用试验)

试验例1-3中，将受验样品变更为制造例7中获得的香蜂草发酵液1、制造例8中获得的香蜂草发酵液2、及比较制造例4中获得的香蜂草提取液，将受验样品的最终浓度变更为下述表21所示的浓度，除此以外，利用与试验例1-3相同的方法进行DPPH自由基清除作用的试验。将结果示于下述表21。

[表21]

(试验例4-4：透明质酸酶活性抑制作用试验)

试验例1-4中，将受验样品变更为制造例7中获得的香蜂草发酵液1、制造例8中获得的香蜂草发酵液2、及比较制造例4中获得的香蜂草提取液，将受验样品的最终浓度变更为下述表22所示的浓度，除此以外，利用与试验例1-4相同的方法进行透明质酸酶活性抑制作用的试验。将结果示于下述表22。

[表22]

(试验例4-5：酪氨酸酶活性抑制作用试验)

试验例1-5中，将受验样品变更为制造例7中获得的香蜂草发酵液1、制造例8中获得的香蜂草发酵液2、及比较制造例4中获得的香蜂草提取液，将受验样品的最终浓度变更为下述表23所示的浓度，除此以外，利用与试验例1-5相同的方法进行酪氨酸酶活性抑制作用的试验。将结果示于下述表23。

[表23]

＜制造例9：矢车菊发酵液1的制备＞

在所述制造例1的种曲制备步骤中，将三齿蒿变更为矢车菊(Centaurea cyanusLinne)(ALBION股份有限公司制造)，除此以外，利用与所述制造例1的种曲制备步骤相同的方法制备“矢车菊种曲”。

另外，在所述制造例1的发酵步骤中，将三齿蒿变更为矢车菊(Centaurea cyanusLinne)(ALBION股份有限公司制造)，除此以外，利用与所述制造例1的发酵步骤相同的方法获得“矢车菊发酵液1”。

＜制造例10：矢车菊发酵液2的制备＞

所述制造例9中，将矢车菊种曲变更为米种曲(Aspergillus oryzae，白神亮白曲霉，秋田今野商店股份有限公司制造)，除此以外，利用与所述制造例9相同的方法获得“矢车菊发酵液2”。

＜比较制造例5：矢车菊提取液的制备＞

所述比较制造例1中，将三齿蒿变更为矢车菊(Centaurea cyanus Linne)(ALBION股份有限公司制造)，除此以外，利用与所述比较制造例1相同的方法获得“矢车菊提取液”。

(试验例A-5：接触角的测定)

所述试验例A-1中，将试验样品变更为制造例9中获得的矢车菊发酵液1、制造例10中获得的矢车菊发酵液2、及比较制造例5中获得的矢车菊提取液，除此以外，利用与所述试验例A-1相同的方法测定接触角。将结果示于下述表24。另外，将测定各试验样品接触角时的液滴的一例示于图5A～图5C。

[表24]

相比于比较制造例5中获得的矢车菊提取液，制造例9中获得的矢车菊发酵液1及制造例10中获得的矢车菊发酵液2的接触角都小，为85°以下，肌肤亲和性优异。此外，制造例9中获得的矢车菊发酵液1的接触角为79°以下，肌肤亲和性更优异。

(试验例5-1：I型胶原蛋白产生促进作用试验)

试验例2-2中，将受验样品变更为制造例9中获得的矢车菊发酵液1、制造例10中获得的矢车菊发酵液2、及比较制造例5中获得的矢车菊提取液，将受验样品的最终浓度变更为下述表25所示的浓度，除此以外，利用与试验例2-2相同的方法进行I型胶原蛋白产生促进作用的试验。将结果示于下述表25。

[表25]

(试验例5-2：谷氨酰胺转氨酶-1 mRNA表达促进作用试验)

试验例3-1中，将受验样品变更为制造例9中获得的矢车菊发酵液1、制造例10中获得的矢车菊发酵液2、及比较制造例5中获得的矢车菊提取液，将受验样品的最终浓度变更为下述表26所示的浓度，除此以外，利用与试验例3-1相同的方法进行谷氨酰胺转氨酶-1mRNA表达促进作用的试验。将结果示于下述表26。

[表26]

(试验例5-3：丝聚蛋白mRNA表达促进作用试验)

将制造例9中获得的矢车菊发酵液1、制造例10中获得的矢车菊发酵液2、及比较制造例5中获得的矢车菊提取液作为受验样品，通过下述试验方法，进行丝聚蛋白mRNA表达促进作用的试验。

将各受验样品以最终浓度成为下述表27所示的浓度的方式溶解于正常人表皮角化细胞基础培养基(HuMedia-KB2，仓敷纺织股份有限公司制造)，制备添加了受验样品的培养基。

使用正常人表皮角化细胞增殖用培养基(HuMedia-KG2，仓敷纺织股份有限公司制造)，在37℃、5％CO₂的条件下培养正常人新生儿表皮角化细胞(NHEK，仓敷纺织股份有限公司制造)直至融合，其后利用胰蛋白酶处理来回收细胞。将所回收的细胞利用正常人表皮角化细胞增殖用培养基(HuMedia-KG2)调整为1.5×10⁵细胞/mL。

然后，将所述NHEK(1.5×10⁵细胞/mL)2mL接种到35mm培养皿，在37℃、5％CO₂条件下培养一夜。培养结束后，将培养基更换为正常人表皮角化细胞基础培养基(HuMedia-KB2)，进一步培养24小时。培养结束后，将培养基更换为所述添加了受验样品的培养基2mL，在37℃、5％CO₂的条件下培养24小时。培养结束后去除培养液，利用RNA提取用试剂(ISOGENII(目录号：311-07361)，NIPPONGENE股份有限公司制造)提取总RNA，通过分光光度计测定各RNA量，使用纯化水以成为200ng/μL的方式制备总RNA。

另外，作为对照，将所述添加了受验样品的培养基2mL变更为不含受验样品的正常人表皮角化细胞基础培养基(HuMedia-KB2)2mL，除此以外，进行与所述相同的操作并测定吸光度，利用与上述相同的方法以成为200ng/μL的方式制备总RNA。

以所述各总RNA为模板，测定丝聚蛋白mRNA及作为内部标准的GAPDH mRNA表达量。mRNA的检测是通过使用实时PCR装置(Thermal Cycler Dice(注册商标)实时系统III，Takara Bio股份有限公司制造)、及SYBR(注册商标)PrimeScript(注册商标)RT-PCR试剂盒(Perfect Real Time(目录号：RR063A)，Takara Bio股份有限公司制造)的两步法实时PCR反应来进行。

未添加受验样品及添加了受验样品的丝聚蛋白mRNA表达量由GAPDH mRNA表达量进行了修正。根据该修正值，基于下述式12算出丝聚蛋白mRNA表达促进率。将结果示于下述表27。

＜式12＞

丝聚蛋白mRNA表达促进率(％)＝A/B×100

所述式12中，A及B分别表示以下内容。

A：添加了受验样品时的修正值

B：未添加受验样品时的修正值

[表27]

(试验例5-4：水通道蛋白3(AQP3)mRNA表达促进作用试验)

试验例3-2中，将受验样品变更为制造例9中获得的矢车菊发酵液1、制造例10中获得的矢车菊发酵液2、及比较制造例5中获得的矢车菊提取液，将受验样品的最终浓度变更为下述表28所示的浓度，除此以外，利用与试验例3-2相同的方法进行水通道蛋白3(AQP3)mRNA表达促进作用的试验。将结果示于下述表28。

[表28]

(试验例5-5：透明质酸合成酶3(HAS3)mRNA表达促进作用试验)

试验例1-2中，将受验样品变更为制造例9中获得的矢车菊发酵液1、制造例10中获得的矢车菊发酵液2、及比较制造例5中获得的矢车菊提取液，将受验样品的最终浓度变更为下述表29所示的浓度，除此以外，利用与试验例1-2相同的方法进行透明质酸合成酶3(HAS3)mRNA表达促进作用的试验。将结果示于下述表29。

[表29]

(试验例5-6：密蛋白-1 mRNA表达促进作用试验)

试验例2-3中，将受验样品变更为制造例9中获得的矢车菊发酵液1、制造例10中获得的矢车菊发酵液2、及比较制造例5中获得的矢车菊提取液，将受验样品的最终浓度变更为下述表30所示的浓度，除此以外，利用与试验例2-3相同的方法进行密蛋白-1 mRNA表达促进作用的试验。将结果示于下述表30。

[表30]

(试验例5-7：密蛋白-4mRNA表达促进作用试验)

试验例2-4中，将受验样品变更为制造例9中获得的矢车菊发酵液1、制造例10中获得的矢车菊发酵液2、及比较制造例5中获得的矢车菊提取液，将受验样品的最终浓度变更为下述表31所示的浓度，除此以外，利用与试验例2-4相同的方法进行密蛋白-4mRNA表达促进作用的试验。将结果示于下述表31。

[表31]

(试验例5-8：紧蛋白mRNA表达促进作用试验)

试验例2-5中，将受验样品变更为制造例9中获得的矢车菊发酵液1、制造例10中获得的矢车菊发酵液2、及比较制造例5中获得的矢车菊提取液，将受验样品的最终浓度变更为下述表32所示的浓度，除此以外，利用与试验例2-5相同的方法进行紧蛋白mRNA表达促进作用的试验。将结果示于下述表32。

[表32]

(试验例5-9：DPPH自由基清除作用试验)

试验例1-3中，将受验样品变更为制造例9中获得的矢车菊发酵液1、制造例10中获得的矢车菊发酵液2、及比较制造例5中获得的矢车菊提取液，将受验样品的最终浓度变更为下述表33所示的浓度，除此以外，利用与试验例1-3相同的方法进行DPPH自由基清除作用的试验。将结果示于下述表33。

[表33]

(试验例5-10：对于B16黑色素瘤细胞的黑色素产生抑制作用试验)

将制造例9中获得的矢车菊发酵液1、制造例10中获得的矢车菊发酵液2、及比较制造例5中获得的矢车菊提取液作为受验样品，通过下述试验方法，进行针对B16黑色素瘤细胞的黑色素产生抑制作用的试验。

将各受验样品溶解于含10％FBS(biosera公司制造)及1mmol/L茶碱(富士胶片和光纯药股份有限公司制造)的DMEM(日水制药股份有限公司制造)中，制备添加了受验样品的培养基。

使用含10％FBS的DMEM，在37℃、5％CO₂的条件下培养B16黑色素瘤细胞直至融合，其后利用胰蛋白酶处理来回收细胞。将所回收的细胞利用含10％FBS及1mmol/L茶碱的DMEM调整为2.4×10⁵细胞/mL。

然后，将所述B16黑色素瘤细胞(2.4×10⁵细胞/mL)以每孔300μL接种到48孔板，在37℃、5％CO₂的条件下培养6小时。培养结束后，将培养基更换为添加了受验样品的培养基100μL，在37℃、5％CO₂的条件下培养3天。培养结束后，分别以每孔300μL添加所述添加了受验样品的培养基，在37℃、5％CO₂的条件下培养4天。此外，此时所述受验样品的最终浓度为下述表34所示的浓度。

培养结束后，从各孔中去除培养基，添加2mol/L氢氧化钠溶液200μL，利用超声波破碎仪来破坏细胞，测定波长475nm下的吸光度。

根据测得的吸光度值，基于使用合成黑色素(SIGMA公司制造)所制作的校准曲线算出黑色素量。

另外，为了测定细胞存活率，利用与所述方法相同的方法，使用所述添加了受验样品的培养基培养B16黑色素瘤细胞后，去除培养基，并用400μL的PBS缓冲液洗净。然后，将中性红以最终浓度0.05mg/mL溶解于含10％FBS的DMEM中，将所得的溶液向各孔中逐一添加200μL，培养2.5小时。培养结束后去除中性红溶液，将乙醇-乙酸溶液(乙醇：乙酸：水＝50：1：49(体积比))向各孔中逐一添加200μL，来提取色素。提取后，测定波长540nm下的吸光度。

另外，作为对照，将受验样品溶液变更为不含受验样品的含10％FBS及1mmol/L茶碱的DMEM，除此以外，进行与上述相同的操作并测定吸光度。

根据所获得的测定值，基于下述式13算出细胞存活率，并基于下述式14算出经该细胞存活率修正的黑色素产生抑制率(％)。将结果示于下述表34。

＜式13＞

细胞存活率(％)＝(D/C)×100

所述式13中，将C及D分别表示以下内容。

C：未添加受验样品时，波长540nm下的吸光度

D：添加了受验样品时，波长540nm下的吸光度

＜式14＞

黑色素产生抑制率(％)＝{1－(B/D)/(A/C)}×100

所述式14中，A～D分别表示以下内容。

A：未添加受验样品时的黑色素量

B：添加了受验样品时的黑色素量

C：未添加受验样品时，波长540nm下的吸光度

D：添加了受验样品时，波长540nm下的吸光度

[表34]

产业上的可利用性

本发明的抗老化剂、抗氧化剂、抗炎剂、及美白剂是具有优异的抗老化作用、抗氧化作用、抗炎作用、及美白作用中的至少任一种作用，且安全性高的天然物质系产品，因此，不论化妆品、食品、医药品等领域，均能够利用。

本发明的化妆品由于含有选自由本发明的所述抗老化剂、所述抗氧化剂、所述抗炎剂、及所述美白剂所组成的群组中的至少1种，所以适合用于化妆水、乳液、乳霜、软膏、精华液、润肤乳、面膜、胶冻、唇膏、口红、粉饼、沐浴剂、肥皂、沐浴露等皮肤化妆品；收敛水、养发露、发乳、整发液、润发油、洗发精、护发素等头皮头发化妆品等。