阅读说明：本技术 具有透视可显影功能的碘化油丝素蛋白栓塞微球制备方法 (Preparation method of iodized oil silk fibroin embolism microsphere with perspective developing function ) 是由 孙兴伟 于 2021-07-07 设计创作，主要内容包括：本发明公开了具有透视可显影功能的碘化油丝素蛋白栓塞微球制备方法,包括制备脱胶丝素纤维；制备丝素蛋白溶液并浓缩；在四口烧瓶中加入石蜡和Span80,搅拌均匀,逐滴加入浓缩后的丝素蛋白溶液和超液碘化油,制得悬浊液；将悬浊液加入离心管中进行离心,取出离心液后清洗,清洗完后进行离心；加入乙醇过夜,去除乙醇后进行干燥,研磨成均匀的粉末即得碘化油丝素蛋白栓塞微球。本发明通过加入碘化油,使得丝素蛋白栓塞微球具有X线透视可显影功能,碘化油丝素蛋白微球的降解周期为1个月至半年,解决了体内永久滞留的难题。(The invention discloses a preparation method of iodized oil silk fibroin embolism microsphere with perspective developing function, which comprises the steps of preparing degummed silk fibroin fiber; preparing silk fibroin solution and concentrating; adding paraffin and Span80 into a four-neck flask, stirring uniformly, and dropwise adding concentrated silk fibroin solution and super liquid iodized oil to obtain suspension; adding the suspension into a centrifuge tube for centrifugation, taking out the centrifugate, cleaning, and centrifuging after cleaning; adding ethanol overnight, removing ethanol, drying, and grinding into uniform powder to obtain iodized oil-fibroin protein embolism microsphere. The iodized oil is added, so that the silk fibroin embolization microsphere has an X-ray perspective developing function, the degradation period of the iodized oil silk fibroin microsphere is 1 month to half a year, and the problem of permanent detention in vivo is solved.)

具有透视可显影功能的碘化油丝素蛋白栓塞微球制备方法

技术领域

本发明涉及医疗用栓塞微球技术领域，尤其涉及具有透视可显影功能的碘化油丝素蛋白栓塞微球制备方法。

背景技术

经皮穿刺子宫动脉栓塞是通过微导管将栓塞微球输送至子宫动脉，通过阻断血供治疗子宫肌瘤、腺肌症，该技术具有疗效好，创伤小，恢复快的优点，目前已在临床广泛应用。

目前，临床使用最多的栓塞微球为PVA颗粒，是一种永久性栓塞剂，由于该颗粒不能在体内降解，永久在体内滞留，常常给患者带来困扰和担忧；同时，永久性栓塞不利于子宫动脉栓塞的二次治疗。

丝素蛋白微球具有可降解功能，可用于经子宫动脉栓塞治疗子宫肌瘤腺肌症，但是传统丝素蛋白微球X线透视不可显影，在栓塞过程中不利于评价栓塞程度，另外不利于体外检测其降解情况。因此需要一种可降解的丝素蛋白栓塞微球，既能保证肌瘤、腺肌症的缺血坏死，又能解决体内永久滞留的难题，同时该微球具有X线透视显影功能，从而利于降解过程的体外监测。

发明内容

本发明的目的在于提供具有透视可显影功能的碘化油丝素蛋白栓塞微球制备方法，以解决上述背景技术中所提出的问题。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：具有透视可显影功能的碘化油丝素蛋白栓塞微球制备方法，包括如下步骤，

S1)制备脱胶丝素纤维；

S2)制备丝素蛋白溶液并浓缩；

S3)采取乳化溶剂蒸发法制备丝素微球，具体步骤为，

S31)在四口烧瓶中加入石蜡和Span80，搅拌均匀，逐滴加入S2中制备的浓缩后的丝素蛋白溶液和超液碘化油，塞上瓶塞，打开瓶塞继续搅拌，制得悬浊液；

S32)将悬浊液加入离心管中进行离心，取出离心液后加入无水乙醇，然后用石油醚、无水乙醇清洗，清洗完后进行离心；

S33)加入乙醇过夜，去除乙醇后进行干燥，将干燥后的产物研磨成均匀的粉末，即制得碘化油丝素蛋白栓塞微球。

作为进一步的优化，S1的具体步骤为，将生蚕丝放入碳酸钠溶液中，使蚕丝均匀布开，30 min后取出用温水搓洗，再用去离子水搓洗，然后置入恒温烘箱中烘干，制得脱胶丝素纤维。

作为进一步的优化，S2的具体步骤为，

S21）将脱胶丝素纤维放入LiBr溶液中，恒温油浴中磁力搅拌制得SF-LiBr混合溶液，将混合溶液置入透析袋中，两头扎紧，在去离子水中进行透析，过滤后制得丝素蛋白溶液；

S22）再将透析袋置入聚乙二醇粉末中进行浓缩，将浓缩后的丝素蛋白溶液离心，取上清液保存备用。

作为进一步的优化，S21中透析时间为3-5天，每个8-12h换水。

作为进一步的优化，S22中的透析时间为10-15h；离心温度为3-5℃，离心半径为13-15cm，离心时间为40-60min，离心速率为4500-5000r/min。

作为进一步的优化，，S31中的搅拌速率为900-1000r/min；瓶塞密闭时间为3-5min；打开瓶塞后的搅拌时间为40-60min。

作为进一步的优化，，S32中悬浊液的离心温度为3-5℃，离心时间为5-10min，离心速率为1300-1400r/min；S32中的清洗次数为3-5次。

作为进一步的优化，，S33中的干燥温度为20±2℃。

与已有技术相比，本发明的有益效果体现在：

通过在丝素蛋白里混合一定比例的碘化油，在不改变其可降解特性的前提下，使得丝素蛋白栓塞微球具有X线透视可显影功能，弥补传统丝素蛋白微球不足，有利于术中评价栓塞程度和体外监测其降解情况；同时，降解周期1个月至半年，既能保证肌瘤、腺肌症的缺血坏死，又能解决体内永久滞留的难题。

附图说明

图1为本发明图空皿的X线透视图。

图2为本发明装有碘化油丝素蛋白栓塞微球的示意图。

图3为本发明装有碘化油丝素蛋白栓塞微球的X线透视显影图。

图4为本发明装有碘化油丝素蛋白栓塞微球的电镜图。

具体实施方式

以下是本发明的具体实施例，结合附图对本发明的技术方案作进一步的描述，但本发明并不限于这些实施例。

如图1至4所示，具有透视可显影功能的碘化油丝素蛋白栓塞微球制备方法，包括如下步骤，称取5g生蚕丝放入2L、100℃、0.02mol/L的碳酸钠溶液中，每隔5min用玻璃棒翻转使蚕丝均匀布开，30min后取出，先用温水搓洗3遍，再用去离子水搓洗3遍以充分脱胶，后置入恒温烘箱中烘干，得到脱胶的丝素纤维；将丝素纤维放入9.3mol/L的LiBr溶液(200g/L)中，60℃恒温油浴中磁力搅拌4h，得到棕黄色SF-LiBr混合溶液；将混合溶液置入透析袋中，两头扎紧，放在去离子水中透析3天，定期换水，后过滤得到丝素蛋白溶液；再将透析袋置入聚乙二醇粉末中浓缩12h，将浓缩后的丝素溶液在4℃、离心半径13.5cm、转速4950r/min离心1h，取上清液保存于4℃冰箱中以备用。

采取乳化溶剂蒸发法制备丝素微球，在四口烧瓶中分别加入20mL石蜡和200μLSpan80，用机械搅拌器以950r/min的转速搅拌混匀，再逐滴加入400μL体积分数8%的丝素蛋白溶液、以及400μL超液碘化油，毛玻璃塞塞上5min，打开瓶塞继续搅拌1h，所得悬浊液加入到50mL离心管中，4℃、1350r/min离心5min，取出后往里滴加2mL无水乙醇，然后用石油醚、无水乙醇洗3遍，每洗完1次即刻离心，最后加入乙醇过夜，倒去乙醇，挥发剩余乙醇后室温下干燥后产物研磨成均匀的粉末，即得到碘化油丝素蛋白微球。

本发明碘化油丝素蛋白微球的降解周期为1个月至半年，既能保证肌瘤、腺肌症的缺血坏死，又能解决体内永久滞留的难题；因为加入了碘化油，使得丝素蛋白栓塞微球具有X线透视可显影功能，有利于术中评价栓塞程度和体外监测其降解情况。

本文中所描述的具体实施例仅仅是对本发明精神作举例说明。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。