夜用型皮肤护理组合物、皮肤昼夜节律调节的组合物
阅读说明：本技术 夜用型皮肤护理组合物、皮肤昼夜节律调节的组合物 (Night skin care composition, and composition for regulating skin circadian rhythm ) 是由 李东翠 姜乃生 徐炎明 于 2021-09-23 设计创作，主要内容包括：本发明属于新材料领域,公开了一种夜用型皮肤护理组合物,所述组合物中含有三醇型人参次生苷,该组合物可以以多种日化品的形式存在,其相比于二醇型人参次生苷、市售人参原生苷,在胶原蛋白促生的效果、褪黑素调节效果具有明显的优势。本发明的另外一个目的在于,提供和该夜用型皮肤护理组合物的日用型皮肤护理组合物以组成一套皮肤昼夜节律调节的组合物,实现皮肤昼夜节律调节,在皮肤的细纹面积占比、弹性、ITA值、光泽度等方面具有显著的优势。(The invention belongs to the field of new materials, and discloses an overnight skin care composition, which contains triol type ginseng secondary glycoside, can exist in the form of various daily chemicals, and has obvious advantages in the effects of promoting collagen growth and regulating melatonin compared with diol type ginseng secondary glycoside and commercially available ginseng primary glycoside. Another object of the present invention is to provide a daily skin care composition comprising the night skin care composition and a skin circadian rhythm control composition for skin, which can control the circadian rhythm of skin and is superior in terms of the ratio of fine lines to area, elasticity, ITA value, and gloss of skin.)
技术领域
本发明涉及新材料领域，具体涉及一种夜用型皮肤护理组合物、皮肤昼夜节律调节的组合物。
背景技术
昼夜节律，又称为生物周期，是指生物体受到外界环境变化影响在大脑中会形成“主时钟”，通过在不同时间发送信号来调节身体的活动。生物周期受视交叉上核(Suprachiasmatic nucleus,SCN)控制。环境影响因素有很多，比如温度，进食，锻炼运动等，而这其中SCN的运行主要受光照/黑暗循环驱动，并把生物节律信息传导到整个机体，所以这个“主时钟”与日夜的更替基本吻合。昼夜节律在恒定不变的环境下也以大约24小时(circa diem，大约一天)的周期持续存在。SCN起搏神经元是生物钟分级网络的主节点，它驱动睡眠-觉醒节律并协调外周组织中的生物钟和众多生理过程，包括睡眠、觉醒、体温调节、自主神经系统张力、进食周期、奖赏回路、心境和运动。例如，睡眠时钟也是人的体温节律，它对如何睡觉和白天状态有相当大的影响。我们的体温并不是恒定在37℃，当外部环境变化时，我们的生物钟会随之做出相应的反应，来使实际的体温接近我们生物钟设定的最佳体温值。体温的高低变化告诉大脑何时感到疲乏，何时清醒。当体温升高，人往往感到清醒，脑波频率通常也比较高。当体温降低，人往往感到困乏，疲劳和懒。这是脑电波频率降低和进入睡眠第一阶段的明显信号。
当个人的作息时间遵从自然环境所创造的节律时，有助于身体达到最佳状态，睡眠质量更好，精神状态更佳，类似“顺势而为”。而现代社会创造的新科技让我们有能力在深夜也可以继续在明如白昼的室内进行娱乐或工作，这其实就是在人为与自然的力量做斗争，睡眠障碍、记忆力衰退、情绪暴躁、免疫功能变差等，这些都是昼夜颠倒所付出的代价。
昼夜颠倒是常见应激之一，多发生于倒班工作，或频繁的跨时区旅行带来的时差反应。光照循环是生物周期最重要的外源性影响因素。光照异常引起的昼夜颠倒、生物周期紊乱，往往会伴随机体代谢异常。昼夜颠倒引起体重增加，伴随着光照的颠倒，日夜进食量也趋于倒置。伴随着电能光照，电脑、手机等电子设备的使用，人类的昼夜周期不再局限于太阳光照，出现越来越多的慢性生物节律不同步，而引发肥胖和代谢功能异常等疾病。研究表明昼夜颠倒对机体的影响涉及多条代谢网络，包括能量代谢、蛋白质吸收与讲解、脂肪酸代谢、胆固醇代谢等途径，从而影响葡萄糖、甘氨酸、酪氨酸、苏氨酸、谷氨酰胺及胆固醇等物质的含量。酪氨酸是酪氨酸酶功能的催化底物，是最终形成优黑素和褐黑素的主要原料。褪黑素具有促进睡眠、调节时差、抗衰老、调节免疫、抗肿瘤等多项生理功能。昼夜颠倒导致生物节律紊乱需要更多的褪黑素作用于机体，导致更进一步的代谢紊乱。昼夜颠倒可能导致机体的氧化应激水平较高，应激状态下需要高浓度的谷胱甘肽参与清除体内多余的自由基，导致氨基酸的过度消耗，加重代谢紊乱。昼夜颠倒后血液中不饱和脂肪酸的减少，胆固醇含量的增加会增加机体患动脉硬化以及动脉硬化并发症、高血压、心脏病、心力衰竭、肾衰竭、脑出血等疾病的风险。昼夜颠倒引起睡眠剥夺，是指由于各种原因引起的睡眠丢失状态。随着生活节奏的加快，社会压力的增大等，睡眠剥夺已成为现代社会的普遍现象。睡眠期间，脑内蛋白质合成加快，同时有利于建立新的突触联系而促进学习记忆活动。睡眠剥夺可引起脑功能损坏，导致学习记忆能力下降、注意力分散、定向障碍等认知功能改变，也可以同时引起焦虑情绪。
除了身体内部的器官受昼夜节律调控之外，皮肤也是有相似的变化。早在2012年，拜尔斯道夫公司就联合德国的几家睡眠研究机构发表了关于人类表皮层角质细胞分化受昼夜节律影响的论文。通过基因微阵列的研究(micro array)，发现不止一个基因显著地呈现出昼夜节律相关的表达，其中就有Bmal1和Per1。正因为有了这些皮肤相关基因的周期性震荡表达，表现在外就是白天屏障功能增加，皮脂分泌增加，抗氧化力增强，细胞的分化降到最低。皮肤开启防护状态，主要任务就是隔绝、对抗外界紫外线、污染物等带来的压力和刺激。而随着夜间到来，皮肤从防御状态转换为休养生息的状态，血液循环加速，细胞增殖速率达到最高，代谢掉日间积累的“垃圾”和修护DNA损伤。屏障的功能减弱，渗透率增加，失水严重。更具体地来说，阳光在控制人体昼夜节律和维生素D合成中起着重要作用。然而，我们的皮肤在白天直接暴露在紫外线和有害物质中，产生大量活性氧自由基，从而积累皮肤损伤，甚至引起昼夜节律紊乱，并发生老化、氧化反应。因此，在白天，我们需要一种防御外界应激的机制，能及时清除自由基，恢复和维持受损细胞的生命节律非常重要。在夜间，过量的光辐射(包括白天积累的可见光、红外线和紫外线等)对人体肌肤造成“光污染”损伤，傍晚至夜间人体皮肤继续暴漏在“光污染”下，比如过于明亮的灯光、显示器、电视、智能手机等电子产品产生的蓝光，会进一步加剧皮肤昼夜节律的紊乱，抑制褪黑素的合成，而褪黑素是一种强大的抗氧化剂，正常的褪黑色合成在夜间能够修复皮肤损伤，而被抑制的褪黑素合成会导致皮肤进一步损伤。因而，在夜间，我们的肌肤需要一种强大的修复机制，促进表皮层与真皮层的细胞增殖与修复，同时能够调节褪黑素的正常合成，恢复人体正常的昼夜节律。胶原蛋白是脊椎动物体内最丰富的一种分泌蛋白，持续存在并且基本不更新，在人体内含量极其丰富且承担的功能也极为重要。胶原蛋白的分泌主要由人体真皮层的成纤维细胞负责。昼夜节律还可以影响胶原蛋白的合成、分泌和降解，因此，破坏昼夜节律会让胶原蛋白纤维堆积，使其结构紊乱、弹性减弱和强度下降，从而影响皮肤质量(Nature CellBiology,2020,22,74–86)。熬夜不仅伤身伤神，还会破坏你的胶原蛋白，所以，昼夜节律对护肤活性物及产品的开发非常重要。
人参用来缓解焦虑，睡眠障碍，节律紊乱，已经有一些研究，主要集中在医药、保健品等领域，通过注射给药或者食用等方式。人参在中国自古被誉为“百草之王”,是具备“滋阴补生、扶正固本”之用的极品中草药。《神农本草经》中提到人参有“主补五脏,安精神,定魂魄,止惊悸,明目,开心益智之功效”。补益中药人参在我国和东亚的应用已有数千年，作为滋补强身的药材闻名世界。人参皂苷是人参中所含的主要作用成分，也是一种活性极强的四环三萜类皂苷，可以直接从植株中提取或制备，学术上也叫原型人参皂苷，可通俗理解为普通人参皂苷，包括Ra、Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rf等。人参皂苷具有与固醇类激素相似的结构，对于机体糖皮质激素、交感神经系统和免疫系统等具有调节的作用。有研究表明，在人参-石菖蒲药液药物干预的作用下，睡眠剥夺导致的损伤情况得到了一定程度的修复，人参－石菖蒲药液干预可以修复或者抑制睡眠剥夺导致的大鼠星形胶质细胞和神经元的损伤(人参石菖蒲药对对睡眠剥夺大鼠海马IL-6R、NMDAR影响的实验研究，时珍国医国药2018年第29卷第10期)。另有研究利用代谢组学技术研究光照改变造成昼夜颠倒应激对大鼠能量代谢的影响,同时评价人参皂苷的干预作用。结果表明，人参皂苷可改善昼夜颠倒造成的代谢物质改变，其机制可能是通过调节兴奋性和抑制性神经递质等上游代谢通路，继而改变下游的物质变化(世界科学技术(中医药现代化)，2012,14(06))。
人参不仅作为补益保健上品，其应用于美容护肤及治疗损容性疾病的历史也非常悠久。在中医方书中，很多具备美容作用的方剂都含有人参，或单味使用，或与其他药物、食物配合使用。现代研究表明，人参内服或外用都能起到保健及美容护肤的作用。人参被广泛应用于化妆品领域的主要宣称功效有：1)延缓皮肤衰老，促进皮下毛细血管的血液循环，增加皮肤营养供应；2)预防和减少皮肤皱纹，抗氧化、修复细胞；3)抑制黑色素还原，美白、使皮肤洁白光滑；4)保护皮肤光泽柔嫩，保湿、增加皮肤弹性。然而，作为护肤品原料或者成品研究方面，现有的人参化妆品或原料多以添加人参总提取物或总人参皂苷，其主要来源于人参根、茎、叶、果、花，韩国人参化妆品则主要是红参或者生物转化人参提取物，也有一些已经把人参皂苷的单体化合物应用到化妆品中。总体来讲，使用人参及其提取物的化妆品，目前整体的问题是功效成分不明确，标准不统一，品质不稳定，皮肤吸收差。极少有产品直接加入纯度高、化学成分清晰、生物活性更高的稀有人参次生苷。稀有人参皂苷是相对于原型人参皂苷而言的。稀有人参皂苷其实是原型人参皂苷的代谢衍生物，无法直接从植株中提取，只能通过转化或代谢原型人参皂苷而获得，包括Rg3、Rh2、Rg5、Rk1、Rk2、Rh3、Rk3等成分，都是通过代谢或转化原型人参皂苷而来，这些稀有人参皂苷成分具备更多样更强大的生物活性和吸收性能，可以称得上是人参皂苷家族中的“贵族”。
比如：
D1：CN201811476440.9公开了一种抗皮肤老化人参皂苷Ro的制备方法及在化妆品中的应用。皮肤老化作为人类整体衰老的一部分，对其进行研究具有特殊的意义。皮肤老化主要包括自然老化和光老化，前者是内源性的程序性过程，后者是指通过其他环境因素接触或是生活方式的原因产生的损害积累，主要由太阳的紫外线辐射引起的老化又称为光老化。该方案提供的方法不依赖于传统的反复硅胶柱层析即可制备得到高纯度的人参皂苷Ra2、人参皂苷Ra3、人参皂苷Rs1、人参皂苷Rs2、人参皂苷Ro、人参皂苷Rc、人参皂苷Rg6，上述人参皂苷具有抗皮肤光老化，可以用于制备抗皮肤光老化的化妆品。
D2：CN201710847003.2涉及含有人参皂苷F2的皮肤外用剂组合物，更详细地涉及如下的组合物，该组合物含有由利用培基耕人参水耕栽培系统或喷雾耕人参水耕栽培系统进行栽培而收获的清洁原参和人参叶提取的人参皂苷F2，从而能够获得更高含量的人参皂苷F2。另外，由于该组合物中含有人参皂苷F2，从而不仅能够通过优异的抗氧化能力而提供防皮肤老化效果、皮肤保湿能力改善效果、抗炎效果、粉刺和特应性等皮肤问题改善效果，美白效果、皮脂调节效果、毛孔收缩效果、并通过改善血液循环而提供的面色改善等皮肤整体状态改善效果，而且能够提供防头屑效果、育发效果和防止白发效果等头皮和毛发状态改善效果。
D3：CN201811282724.4公开了一种二醇型人参皂苷纳米乳及其制备方法和用途。该二醇型人参皂苷纳米乳由如下组分组成：由二醇型人参皂苷提取物和水组成的水相、油相和混合乳化剂；其中，所述水相和油相的质量比为5～8：45，所述油相和混合乳化剂的质量比为7.5～8：2～2.5，所述二醇型人参皂苷提取物在水相中的质量浓度为15～25％，所述二醇型人参皂苷提取物含有的二醇型人参皂苷Rb1、Rb2、Rc和Rd的含量之和不低于38％。所制备的二醇型人参皂苷纳米乳粒度符合要求，具有很好的皮肤透过性能和皮肤滞留性能，并可通过促进胶原蛋白合成，抑制胶原蛋白酶活性，以达到抗皮肤衰老功能。
D4：CN201480025030.6公开了含有人参皂苷Y的皮肤外用剂组合物，更具体地，涉及含有人参皂苷Y而具有优异的抗氧化能力，并且不仅能够提供改善皮肤保湿能力的效果、抗炎效果、改善痤疮和过敏等皮肤问题的效果、美白效果、调节皮脂的效果、收缩毛孔的效果、通过改善血液循环而改善脸色等改善皮肤整体状态的效果，而且还能够提供防止头屑的效果、育毛效果、防止白发的效果等的改善头皮和头发状态的效果。
D5：CN201480025174.1公开了一种含有人参皂苷Rh4的皮肤外用剂组合物。更具体地，涉及一种含有人参皂苷Rh4且通过优异的抗氧化力而能够提供皮肤老化防止效果、皮肤保湿力改善效果、抗炎效果及痤疮等皮肤问题的改善效果、美白效果、皮脂调节效果、毛孔收缩效果及通过血循环改善的脸色改善等的整体皮肤状态的改善效果的组合物，所述组合物除了上述效果外，还能够提供防止头皮屑的效果、毛发生长效果及防止白发效果等的头皮及毛发状态改善效果。
综合上文的D1-D5，我们可以发现，对于人参皂苷、稀有人参皂苷在皮肤护理方面的研究已经有了近10年的历史。大量的研究已经证实了很多种类型的人参皂苷对于皮肤护理是具有较为明显的作用的。
但是，现有的研究暂且存在的困境在于：对于人参皂苷的功能开发单一、没有结合皮肤护理的过程中的实际配方的需求，尤其是针对日间和夜间护肤的需求差异性，导致没有一款功效明显、机理清晰的人参皂苷产品面市。
发明内容
本发明的目的之一在于，提供一种夜用型皮肤护理组合物，该组合物可以以多种日化品的形式存在，其相比于二醇型人参次生苷、市售人参原生苷，在胶原蛋白促生的效果、褪黑素调节效果具有明显的优势。
本发明的另外一个目的在于，提供和该夜用型皮肤护理组合物的日用型皮肤护理组合物以组成一套皮肤昼夜节律调节的组合物，实现皮肤昼夜节律调节，在皮肤的细纹面积占比、弹性、ITA值、光泽度等方面具有显著的优势。
为实现上述目的，本发明提供了一种夜用型皮肤护理组合物，所述组合物中含有具有如下通式Ⅰ的三醇型人参次生苷；
R1独立的选自以下基团中的一种：
-O-Glc、-O-Xyl、-O-Rha、-O-Ara、-O-Lyx、-O-Glc(2→1)Glc、-O-Glc(6→1)Glc、-O-Glc(2→1)Xyl、-O-Glc(6→1)Xyl、-O-Glc(2→1)Rha、-O-Glc(6→1)Rha、-O-Glc(2→1)Ara、-O-Glc(6→1)Ara、-O-Glc(2→1)Lyx、-O-Glc(6→1)Lyx、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Glc、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Glc、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Glc、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Glc、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Xyl、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Xyl、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Xyl、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Xyl、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Rha、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Rha、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Rha、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Rha、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Ara、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Ara、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Ara、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Ara、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Lyx、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Lyx、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Lyx、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Lyx；
R2选自以下基团中的一种：
在上述的夜用型皮肤护理组合物中，所述组合物中含有0.0001wt％～50wt％的三醇型人参次生苷。
优选地，所述组合物中含有0.001％～10％的三醇型人参次生苷；
更优选地，所述组合物中含有0.002％～1％的三醇型人参次生苷；
更优选地，所述组合物中含有0.005％～0.5％的三醇型人参次生苷。
在上述的夜用型皮肤护理组合物中，所述组合物为水剂、精华液、乳液、膏霜、无水配方之一。
经过大量实验验证，本发明的三醇型人参次生苷在几乎所有的剂型中都能够表现出较为出色的效果。
在上述的夜用型皮肤护理组合物中，所述三醇型人参次生苷在皮肤护理组合物中以活性成分、或胶束的壳材、或脂质体的壳材、或颗粒的包覆材料的形式存在。
在上述的夜用型皮肤护理组合物中，所述脂质体为含有双分子层或多分子层膜材结构的载体材料，被包覆物为亲水活性物质或疏水性活性物或二者组合，所述亲水活性物质为水解蛋白类化合物、水溶性小分子多肽类化合物、水溶性小分子类化合物中的一种或多种；所述的疏水性活性物为天然或合成油脂类化合物、磷脂类化合物、维生素、胡萝卜素、类胡萝卜素类化合物、精油类化合物、脂溶性小分子类活性物中的一种或多种。
更为具体来说，所述亲水活性物质为括水解蛋白类化合物(水解蚕丝蛋白多肽、水解胶原蛋白多肽、水解牛奶蛋白多肽、水解大米蛋白多肽、水解羊毛蛋白多肽等)、水溶性小分子多肽类化合物(生物素三肽-1、乙酰基六肽-8、类蛇毒三肽、九肽-1等)、水溶性小分子类化合物(水溶性抗坏血酸及衍生物、果酸、植物提取物、视黄醇/酸、烟酰胺、苯乙基间苯二酚、α-熊果苷、生物活性寡糖、多糖等)中的一种或多种；所述疏水活性物质为天然或合成油脂类化合物、磷脂类化合物、维生素、胡萝卜素、类胡萝卜素类化合物、精油类化合物、脂溶性小分子类活性物(辅酶Q-10、白藜芦醇、虾青素等)中的一种或多种。
所述胶束为单分子层膜材的载体材料，被包覆物为天然或合成油脂类化合物、磷脂类化合物、维生素、胡萝卜素、类胡萝卜素类化合物、精油类化合物、脂溶性小分子类活性物中的一种或多种。
更为具体来说，所述疏水活性物质为天然或合成油脂类化合物、磷脂类化合物、维生素、胡萝卜素、类胡萝卜素类化合物、精油类化合物、脂溶性小分子类活性物(辅酶Q-10、白藜芦醇、虾青素等)中的一种或多种。
作为本发明的进一步细化，上述的疏水活性物质、亲水活性物质根据下述物质的亲水亲油性能可从以下物质中进行选择：VC及衍生物、VE、虾青素、白藜芦醇、神经酰胺、植物提取物、油酯类、蛋白、多肽、多糖等。
此外，本发明还提供一种皮肤昼夜节律调节的组合物，包括日用型皮肤护理组合物和如上任一所述的夜用型皮肤护理组合物；
其中，日用型皮肤护理组合物含有具有如下通式Ⅱ的二醇型人参次生苷；
R3选自以下基团中的一种：
-O-Glc、-O-Xyl、-O-Rha、-O-Ara、-O-Lyx、-O-Glc(2→1)Glc、-O-Glc(6→1)Glc、-O-Glc(2→1)Xyl、-O-Glc(6→1)Xyl、-O-Glc(2→1)Rha、-O-Glc(6→1)Rha、-O-Glc(2→1)Ara、-O-Glc(6→1)Ara、-O-Glc(2→1)Lyx、-O-Glc(6→1)Lyx、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Glc、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Glc、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Glc、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Glc、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Xyl、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Xyl、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Xyl、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Xyl、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Rha、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Rha、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Rha、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Rha、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Ara、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Ara、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Ara、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Ara、-O-Glc(2→1)Glc(2→1)Lyx、-O-Glc(2→1)Glc(6→1)Lyx、-O-Glc(6→1)Glc(2→1)Lyx、-O-Glc(6→1)Glc(6→1)Lyx；
R4选自以下基团中的一种：
在上述的皮肤昼夜节律调节的组合物中，所述日用型皮肤护理组合物中含0.0001wt％～50wt％的二醇型人参次生苷。
优选地，所述组合物中含有0.001％～10％的二醇型人参次生苷；
更优选地，所述组合物中含有0.002％～1％的二醇型人参次生苷。
更优选地，所述组合物中含有0.005％～0.5％的二醇型人参次生苷。
在上述的皮肤昼夜节律调节的组合物中，所述二醇型人参次生苷在日用型皮肤护理组合物中以活性成分、或胶束的壳材、或脂质体的壳材、或颗粒的包覆材料的形式存在。
在上述的皮肤昼夜节律调节的组合物中，以二醇型人参次生苷为壳材的脂质体的被包覆物为亲水活性物质或疏水性物质或二者组合，所述亲水活性物质为水解蛋白类化合物、水溶性小分子多肽类化合物、水溶性小分子类化合物中的一种或多种；所述的疏水性活性物为天然或合成油脂类化合物、磷脂类化合物、维生素、胡萝卜素、类胡萝卜素类化合物、精油类化合物、脂溶性小分子类活性物中的一种或多种。
以二醇型人参次生苷为壳材的胶束的被包覆物为天然或合成油脂类化合物、磷脂类化合物、维生素、胡萝卜素、类胡萝卜素类化合物、精油类化合物、脂溶性小分子类活性物中的一种或多种。
更为具体来说，所述亲水活性物质为括水解蛋白类化合物(水解蚕丝蛋白多肽、水解胶原蛋白多肽、水解牛奶蛋白多肽、水解大米蛋白多肽、水解羊毛蛋白多肽等)、水溶性小分子多肽类化合物(生物素三肽-1、乙酰基六肽-8、类蛇毒三肽、九肽-1等)、水溶性小分子类化合物(水溶性抗坏血酸及衍生物、果酸、植物提取物、视黄醇/酸、烟酰胺、苯乙基间苯二酚、α-熊果苷、生物活性寡糖、多糖等)中的一种或多种。
更为具体来说，所述疏水活性物质为天然或合成油脂类化合物、磷脂类化合物、维生素、胡萝卜素、类胡萝卜素类化合物、精油类化合物、脂溶性小分子类活性物(辅酶Q-10、白藜芦醇、虾青素等)中的一种或多种。
作为本发明的进一步细化，上述的疏水活性物质、亲水活性物质根据下述物质的亲水亲油性能可从以下物质中进行选择：VC及衍生物、VE、虾青素、白藜芦醇、神经酰胺、植物提取物、油酯类、蛋白、多肽、多糖等。
在上述的皮肤昼夜节律调节的组合物中，所述日用型皮肤护理组合物为水剂、精华液、乳液、膏霜、无水配方之一。
经过大量实验验证，本发明的二醇型人参次生苷在几乎所有的剂型中都能够表现出较为出色的效果。
可以展望的，本方案也可能也会做食品、保健品、生物医药的相关用途。
本发明的有益效果如下：
针对白天的护肤需求，本发明所述二醇型人参次生苷具有抗应激功能、抗氧化和清除自由基、抗光损伤等防御性、抑制性作用机制；
针对夜间皮肤修复的需求，所述三醇型人参次生苷具有增强免疫功能，促进和调节褪黑素合成相关蛋白，从而影响时钟基因，调控节律，促进细胞的新陈代谢、细胞增殖，加快衰老皮肤细胞DNA核酸和蛋白质的合成，恢复细胞正常的生理功能等促生作用机制；
通过上述的二醇型人参次生苷日用和三醇型人参次生苷夜用，可以达到非常优异的护理效果，在长期细胞毒性、日间抗氧化应激清除自由基光防护效果、夜间胶原促生、昼夜节律褪黑素调节效果、人体多维度功效评价等方面相比于人参原生苷来说，优势明显。
附图说明
图1为实施例1、实施例3和对比例1的日用抗氧化应激、清除自由基、光损伤修复的实验结果；
图2为实施例1、实施例3和对比例1的日用抗氧化应激、清除自由基、光损伤修复的实验结果；
图3为实施例1-4和对比例1的夜用胶原蛋白促生的效果；
图4和5为实施例1-4和对比例1的昼夜节律褪黑素调节效果。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施方式，对本发明的技术方案作进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制。
第一部分日用型皮肤护理组合物、夜用型皮肤护理组合物的功能验证
实施例1
二醇型稀有人参次生苷溶液的制备
取0.1g如通式Ⅱ所示的二醇型稀有人参次生苷，溶于100ml去离子水中，超声10min使之充分溶解，制备得到1mg/ml的二醇型人参次生苷溶液；
其中，R3基团为-O-Glc(6→1)Ara，R4为
实施例2
三醇型稀有人参次生苷溶液的制备
取0.1g如通式Ⅰ所示的三醇型稀有人参次生苷，溶于100ml去离子水中，超声10min使之充分溶解，制备得到1mg/ml的三醇型人参次生苷溶液；
其中，R1基团为-O-Glc(6→1)Ara，R2为
实施例3
二醇型稀有人参次生苷胶束的制备
制备工艺如下：取卵磷脂：如通式Ⅱ所示的稀有二醇型稀有人参次生苷：生育酚乙酸酯的质量比1：2：4共同溶于无水乙醇中，在室温条件下搅拌1h至完全溶解，配制乙醇溶液的总浓度为70mg/mL，然后将配制好的乙醇溶液与反溶剂去离子水分别吸入针筒。通过数字注射泵将配制好的卵磷脂人参皂甙乙醇溶液和去离子水。通过数字注射泵将配制好的卵磷脂乙醇溶液和去离子水分别连接多通道混合器的两个通道，通入速度优选为6mL/min，在另外两个通道分别通入相同的去离子水，通入速度优选为54mL/min，所得含有1mg/ml的二醇型人参次生苷纳米胶束液体从出口流出，用容器承接。
其中，R1基团为-O-Glc(6→1)Ara，R2为
实施例4
三醇型稀有人参次生苷胶束的制备
制备工艺如下：取卵磷脂：如通式Ⅰ所示的稀有三醇型稀有人参次生苷：生育酚乙酸酯的质量比1：2：4共同溶于无水乙醇中，在室温条件下搅拌1h至完全溶解，配制乙醇溶液的总浓度为70mg/mL，然后将配制好的乙醇溶液与反溶剂去离子水分别吸入针筒。通过数字注射泵将配制好的卵磷脂人参皂甙乙醇溶液和去离子水。通过数字注射泵将配制好的卵磷脂乙醇溶液和去离子水分别连接多通道混合器的两个通道，通入速度优选为6mL/min，在另外两个通道分别通入相同的去离子水，通入速度优选为54mL/min，所得含有1mg/ml的三醇型人参次生苷纳米胶束液体从出口流出，用容器承接。
其中，R1基团为-O-Glc(6→1)Ara，R2为
实施例5
日用型精华素
制备表1所示的日用型精华素，使用5％(质量分数)的实施例1所描述的1mg/ml的二醇型稀有人参次生苷水溶液。
具体配方工艺为：A相加热至80℃，均质3min/次，降温后依次加入混合好的B相，PH值调整到5.5-6.0。
实施例6
夜用型精华素
参照实施例5的配方制备工艺，使用5％(质量分数)的实施例2所描述的1mg/ml的三醇型稀有人参次生苷水溶液，制备表1所示的夜用型精华素。
对比例1
参照实施例1和2，取市售人参提取物，未经过分离配置含有人参总皂苷浓度为1mg/ml的溶液，其中，人参皂苷的主要结成分为人参原生苷。
对比例2
参照实施例5的配方制备工艺，使用5％(质量分数)的对比例1所描述的1mg/ml的市售人参原生苷的水溶液，制备表1所示的日用型精华素。
对比例3
参照实施例6的配方制备工艺，使用5％(质量分数)的对比例1所描述的1mg/ml的-市售人参原生苷的水溶液，制备表1所示的夜用型精华素。
表1昼夜节律精华素
性能测试：
项目1：长期细胞毒性
对实施例1-4和对比例1的细胞相容性、长期细胞毒性进行了测试和对比。具体实验操作流程为：使用小鼠成纤维细胞NIH 3T3，测试相同给定剂量的药物30μg/mL处理后不同培养时间的细胞存活率。细胞铺板，96孔板，2000细胞/孔，200μL培养基，培养过夜。次日早上，吸出培养基，加入30ug/ml浓度的实施例和对比例(总体积100μL)，培养不同时间点(12，24，48，72h)。每孔加入阿尔玛蓝10μL(2mg/mL)，染色约4h。取100μL于黑色孔板，荧光酶标仪测试，590/550。
实验测定结果如表2所示，结果表明本发明所阐述的精准分离和转化的日用型二醇型人参次生苷、夜用型三醇型人参次生苷，及其所制备的纳米载体材料均优于对比例1使用的市售未经过分离转化的人参提取物(人参原生苷)。本发明的所述的日用型二醇型人参次生苷、夜用型三醇型人参次生苷及纳米载体材料与细胞相容性好，细胞存活率％高，尤其是长期细胞兼容性明显优于对比例。
表2长期细胞毒性结果
项目2：日用抗氧化应激、清除自由基、光损伤修复
日间环境下，环境污染、紫外线等照射皮肤使得体内活性氧上调，自由基(包括氧离子、过氧化物和含氧自由基等)在皮肤内积累，氧化状态失衡。为了模拟日间护肤的需求，对实施例1、实施例3和对比例1的抗氧化应激，清除自由基和光损伤修复的能力进行了测试和对比。
首先，实验通过双氧水对小鼠成纤维细胞刺激造成氧化应激效应，产生ROS羟自由基(·OH)，在相同给药(实施例1、实施例3和对比例1)处理后，定时测定实施例和对比例对细胞自由基的清除作用，用DCFH-DA染料对细胞内ROS染色，通过荧光显微镜对ROS进行分析，评估实施例和对比例对于氧化应激状态的调节效果，清除自由基的效果。具体实验操作为：小鼠成纤维细胞铺板：取六孔板，15万细胞/孔，2mL培养基，培养过夜。次日早上，吸出培养基，加入2mL双氧水(稀释十万倍，逐级稀释)，刺激24小时。吸出双氧水，用PBS清洗一次并吸出，或者用培养基配置一定浓度的实施例1、实施例3和对比例1，加入孔板(2mL)。于不同时间点(6，12h)之后染色，吸出培养基，加入DCFH-DA(用未配培养基稀释1000倍)，每孔加入1mL。放入孵箱培养20分钟，用未配培养基洗涤，最后加入2mL未配培养基。在倒置荧光显微镜下观察，绿色代表活性氧。拍照选取无荧光细胞图，荧光图以及复合图。
实验测定结果如图1所示。如图1所示，对成纤维细胞进行正常培养后，使用双氧水后，可以看到阴性对照组在双氧水的刺激下，细胞内产生大量的ROS自由基(强烈的荧光效应)，成纤维细胞被破坏损伤严重(细胞凋亡形态居多)，而在添加了30ug/mL的本发明所述的日用二醇型稀有人参次生苷实施例1及其纳米胶束实施例3后，具有非常好的活性氧清除能力(几乎无自由基的荧光信号)和细胞修复能力(细胞存活％高)。实施例1、3具有比对比例1的人参原生苷更优的修复细胞能力，可以看到更多的细胞存活形态，说明本发明阐述的日用型二醇型稀有人参次生苷(实施例1)及其负载疏水性活性物质的纳米胶束(实施例3)具有优异的抗氧化应激功效和活性氧自由基清除能力，对于细胞具有更优异的日间防护功效，能更好的应对氧化应激损伤。
进一步，实验通过紫外线UV对小鼠成纤维细胞刺激造成氧化应激效应，产生ROS自由基和细胞光损伤，在相同给药处理后，定时测定实施例和对比例对细胞自由基的清除作用和对光损伤的修复作用，用DCFH-DA染料对细胞内ROS染色，通过荧光显微镜对ROS进行分析，评估实施例和对比例对于UV光损伤的修复效果。具体实验操作为：小鼠成纤维细胞铺板：取六孔板，15万细胞/孔，2mL培养基，培养过夜。次日早上，吸出培养基，使用固定光源的UV照射成纤维细胞10min。停止UV辐照，用培养基配置一定浓度的材料，加入孔板(2mL)。于不同时间点(6，12h)之后染色，吸出培养基，加入DCFH-DA(用未配培养基稀释1000倍)，每孔加入1mL。放入孵箱培养20分钟，用未配培养基洗涤，最后加入2mL未配培养基。在倒置荧光显微镜下观察，绿色代表活性氧。拍照选取无荧光细胞图，荧光图以及复合图。
实验测定结果如图2所示。
如图2所示，对成纤维细胞进行正常培养后，使用定量辐照的紫外线刺激，可以看到阴性对照组在紫外线辐照刺激下，细胞内也产生大量的活性氧自由基(强烈的荧光效应)，成纤维细胞被破坏，光损伤严重(细胞凋亡形态居多)，而在添加了30ug/mL的本发明所述的日用二醇型稀有人参次生苷实施例1及其纳米胶束实施例3后，具有非常好的活性氧清除能力(几乎无自由基的荧光信号)和细胞修复能力(细胞存活％高)。实施例1、3具有比对比例1的人参原生苷更优的修复细胞能力，可以看到更多的细胞存活形态，说明本发明阐述的日用型二醇型稀有人参次生苷(实施例1)及其负载疏水性活性物质的纳米胶束(实施例3)具有优异的抗氧化应激功效和活性氧自由基清除能力，对于细胞具有更优异的日间防护功效，能更好的应对氧化应激及光损伤。
通过以上两种氧化应激模型对实施例1、实施例3及对比例1进行了清除ROS和光防护的评测，可以得出一致结论，日用型材料实施例1、实施例3和对比例1均具备良好的抗氧化能力，但在实施例1、3的日用材料修复下，具有比对比例1更优的细胞形态，尤其是在紫外线刺激模型中，可以明显看到更多的细胞存活形态，说明本发明阐述的二醇型稀有人参次生苷对于细胞具有更优异的日间防护功效，应对氧化应激及光损伤。
项目3：夜用胶原蛋白促生的效果
胶原蛋白约占皮肤真皮层80％的比重，使得皮肤饱满充盈，促进COL 1含量的增加，可以达到一定抵抗皱修复紧致的作用。成纤维细胞在白天受到氧化应激刺激时，经过UV刺激后，会产生大量ROS，促进细胞老化。夜间是胶原修复的最佳时间，为了模拟夜间的护肤的需求，对实施例1-4和对比例1的胶原修复的能力进行了测试和对比。
具体实验操作为：培养鼠源或者人源成纤维细胞；使用固定光源UV进行刺激，按材料不同作用方式，加入药物材料与细胞共孵育，设定作用时间点；提取细胞内RNA，按照RT-PCR测定方法，检测胶原蛋白COL-1表达量。
实验测定结果如图3所示。
通过以上细胞模型对实施例1-4及对比例1进行了胶原促生修复的评测，由图3的实验结果表明，UV刺激后的阴性对照样品其胶原蛋白COL-1的表达显著下降。加入本发明所述的日间护肤实施例1、实施例3及夜间护肤实施例2、实施例4均可以有效激活胶原蛋白，促进COL1的表达，应对氧化应激损伤。其对胶原促生的效果均明显优于对比例1中使用的市售人参皂苷。尤其是本发明所述的夜间护肤三醇型人参次生苷实施例2及其纳米材料实施例4，可以提供更好的夜间胶原促生修复效果，显著高于对比例1市售人参原生苷，也优于本发明所述的日间型二醇型人参次生苷实施例1及其纳米材料实施例2，表明三醇型人参次生苷更加适合夜间护肤。
项目4：昼夜节律褪黑素调节效果
生物体的昼夜节律与褪黑素息息相关。经UV刺激后的细胞，与褪黑素相关基因蛋白ASMT/AANAT表达会显著降低，从而影响了细胞的正常昼夜节律。与褪黑素直接相关蛋白酶/受体有AANAT,ASMT,mtnr1c,mtnr1al,MTNR1A,MTNR1B等，间接相关蛋白有BMAL1,CLOCK等。AANAT和ASMT是涉及褪黑素合成的两种蛋白酶，可以把体内的前体分子(五羟色胺)转化为褪黑素。合成的褪黑素有会对时钟基因有一个反馈调节。褪黑素显着增加了CLOCK，BMAL1，PER1，PER2，CRY1和CRY2的表达。通过检测药物分子对AANAT和ASMT的调节作用，可以推导出药物对褪黑素的分泌及昼夜节律的调控影响。为了更进一步探索本发明所述的日间、夜间稀有人参次生苷调节昼夜节律的机理，对实施例1-4和对比例1的ASMT/AANAT表达能力进行了测试和对比。
具体实验操作为：培养鼠源成纤维细胞；使用固定光源的UV刺激对细胞的ASMT/AANAT进行干扰，破坏细胞的褪黑素合成及昼夜节律，按材料不同作用方式，加入实施例和对比例材料与细胞共孵育，设定作用时间点；提取细胞内RNA，按照RT-PCR测定方法，检测褪黑素相关蛋白表达量。
实验结果如图4和图5所示，UV刺激下，ASMT/AANAT的表达会显著下降，表明细胞的褪黑素合成及昼夜节律受到破坏，加入实施例1-4会明显促进ASMT/AANAT的表达，从而促进褪黑素的生成。实施例1-4显著高于对比例1人参原生苷，表明本发明所述的实施例及其组合能更好的调节褪黑素的分泌及其相关的昼夜节律。尤其是实施例2和实施例4中，基于本发明阐述的夜间护肤材料，三醇型稀有人参次生苷及其所构成的纳米载体材料，可以提供更好的褪黑素促生和调节效果，优于二醇型稀有人参次生苷及其所构成的纳米载体材料(实施例1、3)，从而可以更好的在夜间调节和应对由于日间积累的氧化应激造成的昼夜节律的破坏，以上结果表明三醇型人参次生苷更加适合夜间护肤。
实施例7
制备表1所示的日用型精华素，使用5％(质量分数)的二醇型稀有人参次生苷溶液。
二醇型稀有人参次生苷溶液的制备过程如下：
取1g如通式Ⅱ所示的二醇型稀有人参次生苷，溶于100ml去离子水中，超声10min使之充分溶解，制备得到10mg/ml的二醇型人参次生苷溶液；
其中，R3基团为-O-Glc，R4为
实施例8
制备表1所示的日用型精华素，使用5％(质量分数)的二醇型稀有人参次生苷溶液。
二醇型稀有人参次生苷溶液的制备过程如下：
取5g如通式Ⅱ所示的二醇型稀有人参次生苷，溶于100ml去离子水中，超声10min使之充分溶解，制备得到50mg/ml的二醇型人参次生苷溶液；
其中，R3基团为-O-Xyl，R4为
实施例9
制备表1所示的日用型精华素，使用5％(质量分数)的二醇型稀有人参次生苷溶液。
二醇型稀有人参次生苷溶液的制备过程如下：
取10g如通式Ⅱ所示的二醇型稀有人参次生苷，溶于100ml去离子水中(可加入适量增溶剂)，超声10min使之充分溶解，制备得到100mg/ml的二醇型人参次生苷溶液；
其中，R3基团为-O-Xyl，R4为
实施例10
参照实施例5的配方制备工艺，使用5％(质量分数)的三醇型稀有人参次生苷溶液，制备表1所示的夜用型精华素。
三醇型稀有人参次生苷溶液的制备过程如下：
取1g如通式Ⅰ所示的三醇型稀有人参次生苷，溶于100ml去离子水中，超声10min使之充分溶解，制备得到10mg/ml的三醇型人参次生苷溶液；
其中，R1基团为-O-Glc，R2为
实施例11
参照实施例5的配方制备工艺，使用5％(质量分数)的三醇型稀有人参次生苷溶液，制备表1所示的夜用型精华素。
三醇型稀有人参次生苷溶液的制备过程如下：
取10g如通式Ⅰ所示的三醇型稀有人参次生苷，溶于100ml去离子水中，超声10min使之充分溶解，制备得到100mg/ml的三醇型人参次生苷溶液；
其中，R1基团为-O-Ara，R2为
通过上述的实施例7-11验证了不同的R1基团和R2基团对于三醇型稀有人参次生苷的影响，以及不同的R3基团和R4基团对于二醇型稀有人参次生苷的影响。
通过大量实验论证：不同的R1和R3基因对于日用和夜用型精华素的效能发挥无决定性的影响；
不同的R2和R4基团对于日用和夜用型精华素的效能发挥无决定性的影响。
实施例12
参考表3制备护肤水。
表3护肤水的配方
制备过程如下：
A相加热至80℃，均质3min/次，降温至45C以下，依次加入混合好的B相和C相，混合均匀，PH值调整到5.5-6.0。
实施例13
参考表3的配方，制备护肤水，不同之处在于采用实施例4制备的三醇型稀有人参次生苷胶束溶液。
实施例14
参考表4的配方，制备面霜。
表4面霜的配方
二醇型稀有人参次生苷脂质体溶液的制备方法和配方如下：
A相加热至80℃，B相也加热至80℃，将A相B相混合并均质3min/次，降温至40C以下，加入混合好的C相，混合均匀，PH值调整到5.5-6.0。
实施例15
与实施例14大体相同，不同之处在于，组分16为三醇型稀有人参次生苷脂质体溶液。
三醇型稀有人参次生苷脂质体溶液的制备方法和配方如下：
制备工艺如下：取氢化卵磷脂：如通式I所示的稀有三醇型稀有人参次生苷：辅酶Q-10的质量比7：2：1共同溶于无水乙醇中，在室温条件下搅拌1h至完全溶解，配制乙醇溶液的总浓度为100mg/mL，然后将配制好的乙醇溶液与反溶剂去离子水分别吸入针筒。通过数字注射泵将配制好的卵磷脂人参皂甙乙醇溶液和去离子水。通过数字注射泵将配制好的卵磷脂乙醇溶液和去离子水分别连接多通道混合器的两个通道，通入速度优选为5mL/min，在另外两个通道分别通入相同的去离子水，通入速度优选为95mL/min，所得含有1mg/ml的三醇型人参次生苷纳米脂质体液体从出口流出，用容器承接。
其中，R1基团为-O-Glc，R2为
通过上述的实施例12-15验证了不同的纳米颗粒如胶束、脂质体，对产品性能的影响。作为本发明的优化方案，胶束、脂质体不仅仅可以保持如《日用型皮肤护理组合物、夜用型皮肤护理组合物的功能验证》中的基本性能之外，在合适的化妆品体系中，胶束、脂质体还能够高效的包覆活性成分，其壳材可以同时起到包覆以及作为有效成分的作用。
第二部分日用型皮肤护理组合物、夜用型皮肤护理组合物的功能验证
实施例17
人体功效对比
制备表1所示的实施例5(含有本发明所述的二醇型人参次生苷)的日用型精华素，实施例6(含有本发明所述的三醇型人参次生苷)的夜用型精华素。
将以上精华素分为两组，第一组为实施例5、6组合而成的日用型精华素和夜用型精华素；
第二组中日用型精华素采用实施例5(含有本发明所述的二醇型人参次生苷)；参照实施例6配方，夜用型精华素采用如下表5的配方(含有本发明所述的二醇型人参次生苷，记为对比例4)：
表5夜用型精华素(对比例4)
以上两组组合在使用4周后，对其紧致、抗皱、美白(提亮、均匀肤色)的效果进行了人体功效评价和对比。
具体实验步骤为：N＝10人，受试者均为女性，最小年龄46岁，最大年龄53岁，平均年龄为48.75±2.82岁。采用双盲、随机、对照测试(前后对照、对照组对照)，以此人群做统计分析。试验环境温度：20℃～22℃，湿度：40％～60％，并且进行实时动态监测。测试仪器为：1、VISIA-CR面部图像分析系统，美国Canfield公司；2、PRIMOS-CR皮肤快速三维成像系统，Primos 5.8分析软件，美国Canfield公司；3、使用主机：德国Courage-Khazaka公司制造的多功能皮肤测试仪Cutometer MPA580主机(Cutometer皮肤弹性检测探头；
Colorimeter CL400皮肤颜色检测探头；Glossymeter GL200皮肤光泽度检测探头)。测试主要指标为：(1)眼角纹的皱纹面积占比；(2)个体类型角(individual typeangle，ITA°)：采用国际照明委员会确定的三基色刺激值(L*、a*、b*)对皮肤颜色进行量化，按公式计算得到个体类型角ITA°值，表征皮肤白度；(3)皮肤光泽度；(4)皮肤弹性R2值、F4值；实验测定三次取平均值。
具体测试方法为：使用前清洁面部后，用保湿水涂抹面部，待干燥后，白天取适量日用精华素(实施例5)和对照物(实施例5)分别涂抹在产品涂抹侧及对照侧皮肤，晚上取适量夜用精华素(实施例6)和对照物(对比例4)分别涂抹在产品涂抹侧及对照侧皮肤，早晚各1次，连续使用28天。在试验期间，受试者禁止口服或外用宣称具有抗皱、紧致、提亮皮肤或类似宣称的其他制剂；受试部位禁止接受可能影响抗皱功效测试的美容手术或其他美容方式；受试者以室内活动为主，避免长期暴露在室外光照下。面部清洁30min后，使用VISIA-CR及PRIMOS-CR采集受试者产品涂抹侧和对照侧测量区域的皱纹图像，分别确定皱纹目标分析位置，使用分析软件分别得到两侧的皱纹面积占比；并用CL400、GL200以及弹性测试探头于试验部位检测皮肤ITA°值、光泽度以及皮肤弹性R2值和F4值，以上测量值均作为基线值(D0)，然后进行产品发放并指导使用方法。受试者使用产品后14天(D14)及28天(D28)需回访并进行同样的指标检测。同一个受试者的测试使用同一仪器、同一测试人员完成。两个测试时间点之间应保持测试部位前后一致。
实验测定结果如下所示。
2.1Wrinkle area/AOI area即皱纹面积占比
即所选区域内，皱纹占整个区域的面积比例。指标数值越低，皱纹占比越少。通过比较使用前后的皱纹面积占比变化，可反映产品的抗皱功效。皱纹面积占比在不同回访时间点的数值与使用前基线值(D0)相比下降越多，提示产品的抗皱效果越好。皱纹面积占比下降率＝(使用产品前皱纹面积占比-使用产品后皱纹面积占比)/使用产品前皱纹面积占比×100％。
实验测定结果如表6所示，由结果可以得出，在使用日夜精华素28天后，实施例组日夜组合(实施例5+实施例6)对皱纹的改善(皱纹面积占比下降，皱纹改善率为12.44％)优于对照例组合(实施例5+对比例4)(皱纹面积占比下降，皱纹改善率为6.49％)。
表6.皱纹面积占比及皱纹面积占比改善率效果对比
2.2皮肤颜色(ITA°值)分析
由Skin-Colorimeter CL 400测得的数值采用国际照明委员会确定的三基色刺激值(L*、a*、b*)对皮肤颜色进行量化，并按公式1计算得到个体类型角ITA°(IndividualTypology Angel)值，表征皮肤白度。ITA°＝arctan[(L*－50)/b*]×180×π-1
其中，L*、a*、b*色度中，L*反映颜色的亮度，即从白到黑的颜色变化，L*值越大，颜色越偏向白色，反之偏向黑色；a*值越大颜色越偏向红色，越小颜色偏向绿色；b*值越大颜色越偏向黄色，越小颜色偏向蓝色。ITA°为色度各值的综合指标，数值越高，就表明肤色越浅。通过比较使用前后的测量区域ITA°值可反映皮肤的亮度改变。ITA°值和L*值在不同回访时间点的数值与使用前基线值(D0)相比上升越多，肤色的改善效果越好。
实验测定结果如表7所示，由结果可以得出，在使用日夜精华素28天后，实施例组日夜组合(实施例5+实施例6)对皮肤颜色(ITA°值)改善效果(皮肤颜色ITA°值提升7.83％)明显优于对照例组合(实施例5+对比例4)(皮肤颜色ITA°值下降0.24％)。
表7.皮肤颜色(ITA°值)改善效果对比
2.3皮肤光泽度分析
光泽度值表示经皮肤表面后的光反射率，表征皮肤表面的光泽度。由Skin-Glossymeter GL200测得的数值经漫散射校正(DSC)后得到的校正的光泽度值，校正光泽度值越低，皮肤光泽度越高。通过比较使用前后的校正光泽度值变化，可反映皮肤光泽度的提升。光泽度值在不同回访时间点的数值与使用前基线值(D0)相比上升越多，提示皮肤光泽度改善效果越好。
实验测定结果如表8所示，由结果可以得出，在使用日夜精华素28天后，实施例组日夜组合((实施例5+实施例6))对皮肤光泽度改善效果(效果提升6.24％)明显优于对照例组合(实施例5+对比例4)(效果下降2.23％)。
表8.皮肤光泽度改善效果对比
2.4皮肤弹性、紧致效果
R值为第一次消除负压后皮肤的回弹位移与第一次加载负压时皮肤的最大拉伸位移的比值，即Cutometer皮肤弹性测试仪的R2值，值越接近于1，表征皮肤弹性越好；F值为所有测试周期施加负压和消除负压过程中所形成的包络曲线内的面积值，即Cutometer皮肤弹性测试仪的F4值，值越小表征皮肤越紧实。通过比较使用前后的弹性R2值和F4值变化，可反映产品的紧致功效。R2值在不同回访时间点的数值与使用前基线值(D0)相比上升越多或F4值下降越多，提示皮肤弹性改善效果越好、皮肤越紧致。
实验测定结果如表9所示，由结果可以得出，在使用日夜精华素28天后，实施例组日夜组合(实施例5+实施例6)对皮肤弹性R2改善效果(提升12.04％)优于对照例组合(实施 例5+对比例4)(提升0.54％)；实施例组日夜组合(实施例5+实施例6)对皮肤紧致度F4改善效果(提升10.37％)优于对照例组合(实施例5+对比例4)(提升7.08％)。
表9.皮肤弹性和紧致度改善效果对比
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其它的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。