制作单酰基甘油酯油的方法和含有单酰基甘油酯油的食物产品

文档序号:1926125 发布日期:2021-12-03 浏览:17次 >En<

阅读说明:本技术 制作单酰基甘油酯油的方法和含有单酰基甘油酯油的食物产品 (Process for making monoacylglycerol oils and food products containing monoacylglycerol oils ) 是由 D·J·蒙迪希罗 W·J·布斯曼 于 2020-01-17 设计创作,主要内容包括:提供了用于将具有高单酰基甘油酯(MAG)含量的加工油掺入产品和食物产品中的组合物和方法。特别提供了产生高MAG含量加工油的方法。(Compositions and methods for incorporating processing oils with high Monoacylglyceride (MAG) content into products and food products are provided. In particular, methods of producing high MAG content process oils are provided.)

制作单酰基甘油酯油的方法和含有单酰基甘油酯油的食物 产品

相关申请的交叉引用

本申请主张2019年1月18日提出申请的美国临时申请号62/794,412和2019年4月12日提出申请的美国临时申请号62/833,558的优先权,其中每一者的全文通过引用方式并入本文中。

背景技术

胰消化酶分泌的慢性缺陷被称为外分泌性胰腺功能不全(EPI)。如果没有这些消化酶,患有EPI的患者就无法正确消化食物中的营养成分,并可能出现营养不良和腹部障碍。EPI在患有慢性胰腺炎和其他几种慢性胃肠障碍的个体中很常见。EPI也见于患有囊性纤维化的患者中。胰酶替代疗法(PERT)可减轻EPI的影响,在所述疗法中,个体在每次消耗食物时施用酶胶囊。常规地,PERT治疗包括从猪胰腺中提取的胰酶。

脂质是能量密集型化合物,是必需长链脂肪酸的来源。消耗的脂质(通常包括高百分比的三酰基甘油酯(TAG))与胰腺分泌的脂肪酶一起消化,形成游离脂肪酸(FFA)和单酰基甘油酯(MAG)。阻止脂肪酶从胰腺中释放会导致含三酰基甘油酯的脂肪和油的消化非常差。对于患有EPI的患者而言,这可能会导致严重的营养不良,因为热量、必需脂肪酸和脂溶性营养成分会被截留在未消化的脂质颗粒中并通过系统。

临床上对另选营养源的需求未得到满足,患有EPI的个体无需补充PERT即可消耗另选营养源。

MAG形式的部分水解的脂肪和油容易被患有EPI的个体吸收,而无需PERT。基于MAG油的产品已在临床上被评估为基于胶囊的营养补充剂;然而,使用胶囊以避免不良味道。对于常规的MAG油来源,对起始油进行化学或酶处理,以制作MAG,然后用溶剂对其进行提取和蒸馏,以将MAG从起始油的其他组分中分馏出来。这些MAG产品作为相对纯的产品出售,仅含有可忽略不计的污染性游离脂肪酸(FFA)、(二酰基甘油酯)DAG和TAG,且几乎不含其他化合物。因此,MAG油的常规来源通常缺少油中发现的其他天然化合物,诸如生育酚。

临床上需要消化系统效率低下或受损的个体可以消耗的热量密度非常高的营养产品。除了具有胰腺病理(例如,囊性纤维化、胰腺炎和胰腺癌患者)的个体,其他诊断为或未诊断为外分泌性胰腺功能不全(EPI)的患者也将从所述产品中获益。此外,患有胆汁功能障碍(胆汁淤积)的个体可能受益于不需要胆汁酸进行乳化的“预消化”脂肪。市场上有高热量的“能量棒”和饮料。但是,这些产品不适合无法消化(水解)产品中脂肪的个体。到目前为止,还没有人将脂质配制成适合“无PERT”使用的液体(奶昔)和固体(棒)形式。这些制剂可以作为“完全营养”的来源,供应个体所有的热量和必需脂肪酸需求。液体营养可以是口服营养补充剂(ONS)产品或肠内喂养产品的形式。

因此,需要能被消化系统效率低下或受损的个体消耗的高热量密度食物。本申请描述一种生产基本上不含TAG的可食用酶修饰油(EMO)的方法。

一氯丙二醇(MCPD)和缩水甘油酯是在食用油的精炼期间形成的。这些化合物对人类有毒,且需要在食物产品中被最小化。根据国际癌症研究机构(IARC),3-MCPD目前被分类为可能的人类致癌物质(2B组)。IARC和美国国家毒理学计划将缩水甘油归类为对人类可能致癌(2A组)。目前的标准建议暴露量低于2ug/kg体重/天,对于70kg体重的人低于140ug/天,且对于5kg(约10lb)的婴儿仅为10ug/天。

首次在酸(HCl)水解蛋白质中检测到MCPD化合物,但在2008年发现精炼植物油中存在MCPD酯。结果发现这个问题很普遍。许多食用油经加工会去除对外观、味道、货架稳定性、安全性和消费者接受度有负面影响的组分。油中的单酰基和二酰基甘油(MAG和DAG)可与除臭工艺中的氯离子反应,产生3-一氯丙二醇(3-MCPD)酯和缩水甘油酯(GE)。

下表1显示美国食用油采样中的MCPD化合物水平(来源于《食物添加剂与污染物:A部分(Food Additives&Contaminants:Part A)》,2013年第30卷第12期2081-2092)。

最近报告了美国婴儿对婴儿制剂的3-MCPD和缩水甘油酯消耗的估计暴露量(J.Spungen等人《食物添加剂与污染物:A部分》,2018年第35卷第6期1085-1092)。在本分析中,使用了美国FDA关于婴儿配方便利小样本中3-MCPD和缩水甘油酯浓度(分别为3-MCPD和缩水甘油当量)的数据,以通过0-6个月大婴儿对配方的消耗来估计暴露量。基于所有配方中的平均浓度,估计3-MCPD和GE暴露量分别为7-10μg/kg bw/天和2μg/kg bw/天。通过消耗单个制造商生产的配方估计的平均暴露量对于3-MCPD在1μg/kg bw/天至14μg/kg bw/天范围内,且对于GE在1μg/kg至3μg/kg范围内。

因此,需要减少和消除食用油中这些化合物的方法。本申请的生产基本上不含TAG和污染物诸如MCPD的食用酶修饰油(EMO)的方法因此满足了这种需要。

一些植物油富含油酸。这些油已证明对健康有益。其中一些原因可归因于油酸和富含此种脂肪酸的油,诸如橄榄油、杏仁油和卡诺拉(菜籽)油。三油精是富含油酸的TAG,如下所示。三油精是在所有三个位置100%酯化为甘油的油酸。这三个位置被定义为“sn-1、sn-2和sn-3”。Sn是“立体号码”。

鉴于这些油的健康益处,需要能够为患有EPI的个体提供这些油的健康益处,并增强和使油的有益组分更易获得的组合物和方法。

发明内容

本公开涉及一种包括源自油源的加工油的产品。在一个实施例中,加工油包括等于或大于加工油总重量的30重量%的MAG含量、加工油总重量的约10重量%至约30重量%的DAG含量和加工油总重量的约5重量%至约60重量%的FFA含量,其中所述加工油不含TAG或包括等于或小于所述加工油总重量的5重量%的TAG含量,并且其中所述加工油包括源自油源并天然存在于油源中的非油成分,使得所述非油成分不被添加到所述加工油中。

在一些实施例中,油源来自选自植物、动物、鱼或其混合物的来源。在一些实施例中,油源包括MCPD化合物。在这些实施例中,加工油基本上不含MCPD化合物。

在一些实施例中,所述产品的非油成分选自抗氧化剂、维生素及其混合物。

在一些实施例中,所述产品包括占产品总重量的大于1重量%的MAG。

在一些实施例中,所述产品包括占产品总重量的大于50重量%的MAG。

本公开还涉及一种食物产品。在一个实施例中,所述食物产品包括油并且具有约1kcal/克至约5kcal/克的热量密度,其中约20%至约50%的热量源自所述油。

在一些实施例中,所述食物产品的油是源自油源的加工油,其中加工油包括等于或大于加工油总重量的30重量%的MAG含量、加工油总重量的约10重量%至约30重量%的DAG含量和加工油总重量的约5重量%至约60重量%的FFA含量,其中所述加工油不含TAG或包括等于或小于所述加工油总重量的约5重量%的TAG含量,并且其中所述加工油包括源自油源并天然存在于油源中的非油成分,使得所述非油成分不被添加到所述加工油中。

在一些实施例中,所述食物产品的油源来自选自植物、动物或鱼的来源。

在一些实施例中,所述食物产品的非油成分选自抗氧化剂、维生素及其混合物。

在一些实施例中,所述食物产品包括占产品总重量的大于1重量%的MAG。

在一些实施例中,所述食物产品包括占产品总重量的大于50重量%的MAG。

在一些实施例中,所述食物产品具有约25克至约3000克的总重量。

在一些实施例中,所述食物产品具有每克约1kcal至约5kcal的总热量含量。

在一些实施例中,所述食物产品可以进一步包括碳水化合物源。

在一些实施例中,所述食物产品可以进一步包括蛋白质源。

在一些实施例中,所述油占食物产品总热量含量的5%至95%。

本公开还涉及一种制作富含单酰基甘油的油的方法。在一个实施例中,所述方法包括将包括三酰基甘油(TAG)的起始油、缓冲溶液和能够将所述TAG水解为游离脂肪酸(FFA)的第一酶混合以产生第一反应混合物;使所述反应混合物在足以使所述第一酶水解所述TAG的条件下反应第一时间段以产生水相和脂质(游离脂肪酸)反应产物;使所述反应产物中的所述第一酶失活;收集所述脂质反应产物;将所述脂质反应产物和食物级甘油以及能够酯化FFA的第二酶混合以形成第二反应混合物;使所述第二反应混合物反应第二时间段以产生反应产物脂质油相和甘油相;使所述反应产物中的所述第二酶失活;向反应中加入盐,并从所述甘油相中分离脂质油相;和收集所述脂质油相。

在一些实施例中,所述起始油是源自植物、动物、海洋生物或其混合物的油。在一些实施例中,起始油包括MCPD化合物,并且脂质油相基本上不含MCPD化合物。

在一些实施例中,所述第一酶是脂肪酶AY。

在一些实施例中,所述第一时间段是足以水解所述起始油中至少94%的TAG的时间段。

在一些实施例中,所述第一时间段在约14小时至24小时之间。

在一些实施例中,使所述反应混合物在足以使所述第一酶水解所述TAG的条件下反应的所述步骤在约30℃至约35℃之间的温度下进行。

在一些实施例中,混合包括三酰基甘油(TAG)、缓冲溶液和能够将所述TAG水解为游离脂肪酸(FFA)的第一酶的起始油并使所述反应混合物在足以使所述第一酶将所述TAG水解为FFA的条件下反应的所述步骤在氮气气氛下进行。

在一些实施例中,所述第二酶是脂肪酶G。

在一些实施例中,所述第二时间段是足以导致脂质油相中MAG富集约60%至95%的时间段。

在一些实施例中,所述第二时间段在约24小时至约72小时之间。

在一些实施例中,使所述第二反应混合物反应第二时间段以产生脂质油相和甘油相的所述步骤在约17℃至23℃之间的温度下进行。

在一些实施例中,所述方法进一步包括通过施加足以从反应产物中除去至少一部分水的第三时间段的真空来干燥所述反应产物。

在一些实施例中,干燥所述反应产物的所述步骤在20℃-30℃之间的温度下进行。

在一些实施例中,所述干燥步骤在整个第二时间段内施加。

在一些实施例中,使所述第二酶失活的所述步骤通过加热所述反应产物进行。

在一些实施例中,所述加热在至少70℃的温度下进行至少1小时。

在一些实施例中,从所述甘油相中分离所述脂质油相的所述步骤包括向所述反应产物中加入氯化钠。

在一些实施例中,氯化钠的最终浓度包括至多0.3重量%的氯化钠。

在一些实施例中,所述方法进一步包括在混合所述脂质反应产物和食物级甘油以及能够酯化FFA和甘油的第二酶之前,在所述脂质反应产物上重建氮气气氛。

在一些实施例中,在进行收集所述脂质反应产物的所述步骤之前,重复除去至少一部分所述水相和用约当量体积的水替换所述至少一部分所述水相并等待第二时间段的所述步骤。

在一些实施例中,所述方法进一步包括在收集所述脂质油相之后向所述脂质油相中加入生育酚。

在一些实施例中,具有总脂肪酸含量的加工油包括占加工油组合物的总脂肪酸含量的约5重量%至约75重量%之间的量的油酸单甘油酯(MOG)。

在一些实施例中,加工油包括比率在约0.01至约5之间的油酸和亚油酸,基于加工油的总重量,加工油具有大于50重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在一些实施例中,加工油包括比率在约1至约100之间的油酸和亚麻酸,基于加工油的总重量,加工油具有大于50重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在一些实施例中,加工油包括油酸和亚油酸,并且具有总脂肪酸含量,其中亚油酸以占加工油的总脂肪酸含量的约10重量%至约90重量%的量存在。

在一些实施例中,加工油的脂肪酸谱与生产加工油的预加工油的脂肪酸谱基本上相同。

在一些实施例中,加工油具有包括油酸、亚油酸和亚麻酸的脂肪酸谱,其中油酸、亚油酸和亚麻酸的量分别在生产加工油的预加工油中油酸、亚油酸和亚麻酸的量的约10%以内。

在一些实施例中,加工油具有包括油酸、亚油酸和亚麻酸的脂肪酸谱,其中油酸、亚油酸和亚麻酸的量分别在生产加工油的预加工油中油酸、亚油酸和亚麻酸的量的约1%以内。

在一些实施例中,一种用于促进有需要的受试者中的葡萄糖稳态的方法包含向所述受试者施用包括加工油的组合物的步骤,所述加工油包括油酸单甘油酯,其中至少50重量%的所述油酸单甘油酯是1-油烯基单甘油酯。

在一些实施例中,一种用于治疗有需要的受试者中的II型糖尿病的方法包含向所述受试者施用包括加工油的组合物的步骤,所述加工油包括油酸单甘油酯,其中至少50重量%的所述油酸单甘油酯是1-油烯基单甘油酯。

在一些实施例中,一种用于促进有需要的受试者中的葡萄糖稳态的方法包含向所述受试者施用包括本公开的加工油的组合物的步骤。

在一些实施例中,一种用于治疗有需要的受试者中的糖尿病的方法包含向所述受试者施用包括本公开的加工油的组合物的步骤。

附图说明

图1描绘起始植物油、中间FFA和最终MAG油的组分的TLC分离。

图2描绘起始植物油、中间FFA和最终MAG油的组分的TLC分离。

图3描绘在“Ensure原始营养奶昔”和本公开的酶修饰油产品(“GBFS”)中FFA、MAG、DAG和TAG的分布。

图4描绘制造酶修饰油的工艺的方框流程图。

图5描绘即饮营养饮料和GBFS水解豌豆蛋白中氨基酸和肽的分布。

图6A描绘真实TAG(三硬脂酸甘油酯)的NMR光谱。

图6B描绘从杏仁油生产的酶修饰油的NMR光谱。

图7描绘摄入基于EMO的即饮奶昔后血清甘油三酯的升高。

图8描绘在摄入不含PERT的基于MAG的RTDS后血清甘油三酯的升高。

图9描绘患者在摄入不含PERT的基于MAG的RTDS或含PERT的标准营养补充剂后的血糖水平(平均值)。

图10描绘患者在摄入不含PERT的基于MAG的RTDS或含PERT的标准营养补充剂后的血清甘油三酯水平(平均值)。

图11描绘实例13的卡诺拉油和卡诺拉EMO以及两个商业单甘油酯样本中某些脂肪酸的百分比。

图12A描绘基于LC/MS/MS分析的实例14的卡诺拉油和卡诺拉EMO中各种化合物的量。

图12B描绘基于LC/MS/MS分析的实例14的卡诺拉油和卡诺拉EMO中各种化合物的量。

具体实施方式

应理解,前面的一般描述和下面的详细描述都仅仅是示例性和解释性的,而不是对所要求保护的本发明的限制。在本申请中,单数的使用包含复数,词语“一”或“一个”意指“至少一个”,并且“或”的使用意指“和/或”,除非另有特别说明。此外,术语“包含(including)”以及例如“包含(includes)”和“包含(included)”的其他形式的使用不是限制性的。此外,诸如“元件”或“组件”等术语涵盖包括一个单元的元件或组件以及包括多于一个单元的元件或组件,除非另有特别说明。

本文使用的章节标题仅用于组织目的,并且不应被解释为限制所述主题。本申请中引用的所有文件或文件的部分,包含但不限于专利、专利申请、文章、书籍和论文,在此明确地通过引用全文并入本文用于任何目的。如果一个或多个所并入的文献和类似材料对术语的定义与本申请中所述术语的定义相矛盾,则以本申请为准。

本发明上下文中的“富含”意指其量高于起始材料中的量。例如,富含MAG的油是MAG含量大于富集过程之前的起始MAG含量的油,或起始油的MAG的百分比高于富集过程之前加工的油。富集过程可以通过将TAG转化为MAG进行,从而增加MAG含量和百分比并降低TAG含量或百分比。

三酰基甘油(“TAG”)也称为甘油三酯,是由三条脂肪酸链组成的甘油酯,这些脂肪酸链通过酯链键与甘油分子共价键合。TAG也可以被分类为具有长链或中链长度。长链TAG含有具有14个或更多碳的脂肪酸,而中链TAG含有具有6至12个碳的脂肪酸。长链TAG可以包含ω-3和ω-6脂肪酸。中链TAG具有饱和脂肪酸,且因此不含ω-3或ω-6脂肪酸。长链TAG(LCT)和中链甘油三酯(MCT)可用作能源。

二酰基甘油(“DAG”)也称为甘油二酯,是由两条脂肪酸链组成的甘油酯,这些脂肪酸链通过酯链键与甘油分子共价键合。

单酰基甘油(“MAG”)也称为单甘油酯,是由一条脂肪酸链组成的甘油酯,所述脂肪酸链通过酯链键与甘油分子共价键合。

如本文所用,术语“加工油”是指相对于预修饰或预加工油基本上不含TAG或具有减少量的TAG的非天然存在的油组合物。

如本文所用,术语“酶修饰油”或“EMO”指其中诸如例如使用本公开的酶促转化将TAG酶促转化为MAG的加工油。

如本文所用,术语“食物产品”是指制造的或非天然存在的食物产品。应当理解,本文所提及的食物产品,尽管作为整体被制造和非天然存在,但可以包括天然成分的各种组合,其中所述组合不是天然存在的,或者其中所述组合确实存在于天然中,它们不以在食物产品中使用的相对量存在。

术语“患者”、“个体”和“受试者”在本文中可互换使用,且是指待治疗的哺乳动物受试者,优选人类患者。在一些情况下,本发明的方法用于实验动物、兽医应用和疾病动物模型的开发,包含但不限于啮齿动物,包含小鼠、大鼠和仓鼠,以及灵长类动物。

“治疗”是指旨在预防障碍发展或改变障碍病理或症状的干预措施。因此,“治疗”可指治疗性治疗和预防性或预防措施两者。需要治疗的那些包含已经患有障碍的那些以及需要预防障碍的那些。在肿瘤(例如,癌症)治疗中,治疗剂可直接降低肿瘤细胞的病理,或使肿瘤细胞更易通过其他治疗剂例如放疗和/或化疗来治疗。

如本文所用,“非油成分”是天然存在于油源中的成分,所述油源不是MAG、DAG、TAG、FFA或脂质。

在一些实施例中,起始油可以包括,例如但不限于,源自植物的油,诸如橄榄油、杏仁油、卡诺拉油、椰子油、棉籽油、棕榈仁油、棕榈油精油、棕榈硬脂油、花生油、亚麻籽油、向日葵籽油、玉米油、葡萄籽油、棕榈油、大豆油,或源自动物的油,诸如鱼油、沙丁鱼油或凤尾鱼油,或海藻油,或任何前述植物油和/或动物油的混合物。在一个方面,起始油包括橄榄油、向日葵籽油和亚麻籽油的混合物,其中起始油总重量的约50重量%至约80重量%是橄榄油,起始油总重量的约10重量%至约30重量%是向日葵籽油,且起始油总重量的约5重量%至约20重量%是亚麻籽油。在另一方面,起始油的总重量的约50重量%至约80重量%是橄榄油,起始油总重量的约10重量%至约30重量%是亚麻籽油,且起始油总重量的约5重量%至约20重量%是向日葵籽油。

在一些实施例中,起始油包括MCPD化合物。MCPD化合物的量可以是约0.30mg/kg至约12.0mg/kg,或约1.0mg/kg至约11.00mg/kg,或约2.00mg/kg至约10.50mg/kg。包括MCPD化合物的起始油的实例包含杏仁、卡诺拉、椰子、玉米、棉籽、葡萄籽、橄榄、棕榈、棕榈仁、棕榈油精、棕榈硬脂、花生、大豆和向日葵。

在一些实施例中,制作富含MAG的产品的工艺包括水解TAG的第一步。例如但不限于此,TAG的水解可以通过脂肪酶诸如脂肪酶AY(Amano Enzymes,USA Elgin IL,USA),或任何在sn-1、sn-2和sn-3位切割的非区域特异性脂肪酶进行。

在一些实施例中,水解TAG的第一步可以在约30℃至35℃的温度下进行。例如但不限于,水解TAG的第一步可在30℃至35℃、31℃至35℃、32℃至35℃、33℃至35℃、34℃至35℃、30℃至34℃、31℃至34℃、32℃至34℃、33℃至34℃、30℃至33℃、31℃至33℃、32℃至33℃、30℃至32℃、31℃至32℃、30℃至31℃或30℃、31℃、32℃、33℃、34℃或35℃的温度下进行。

在一些实施例中,水解TAG的第一步可以进行约14小时至24小时。例如但不限于,水解TAG的第一步可以进行14小时至20小时、14小时至16小时、18小时至24小时、22小时至24小时、18小时至20小时,或约14小时、15小时、16小时、17小时、18小时、19小时、20小时、21小时、22小时、23小时或24小时。

在一些实施例中,水解TAG的第一步导致基本上所有TAG的水解。例如但不限于,水解TAG的第一步导致94%至100%、95%至100%、96%至100%、97%至100%、98%至100%、99%至100%、94%至99%、95%至99%、96%至99%、97%至99%、98%至99%、94%至98%、95%至98%、96%至98%、97%至98%、94%至97%、95%至97%、96%至97%、94%至96%、95%至96%或94%至95%的TAG或至少94%、95%、96%、97%、98%、99%或100%的TAG水解。

在一些实施例中,制作富含MAG的产品的工艺包括用甘油酯化以富集MAG油含量的第二步。例如但不限于此,此第二酯化步骤可通过脂肪酶诸如脂肪酶G(Amano Enzymes,USAElgin IL,USA)或任何催化sn-1位酯化但不有效催化甘油上第二或第三酯形成的区域特异性脂肪酶进行(以制作DAG和TAG)。

在一些实施例中,用甘油酯化以富集MAG油含量的第二步导致产品中的MAG富集约70%至95%。例如但不限于,MAG油含量可富集70%至95%、75%至95%、80%至95%、85%至95%、90%至95%、70%至90%、75%至90%、80%至90%、85%至90%、70%至85%、75%至85%、80%至85%、70%至80%、75%至80%、70%至75%或70%、75%、80%、85%、90%或95%。

在一些实施例中,用甘油酯化的第二步可以在约17℃至23℃的温度下进行。例如但不限于,用甘油的酯化可在17℃至23℃、18℃至23℃、19℃至23℃、20℃至23℃、21℃至23℃、22℃至23℃、17℃至22℃、18℃至22℃、19℃至22℃、20℃至22℃、21℃至22℃、17℃至21℃、18℃至21℃、19℃至21℃、20℃至21℃、17℃至20℃、18℃至20℃、19℃至20℃、17℃至19℃、18℃至19℃、17℃至18℃或17℃、18℃、19℃、20℃、21℃、22℃或23℃的温度下进行。

在一些实施例中,用甘油酯化的第二步可以进行约24小时至72小时。例如但不限于,用甘油酯化的第二步可以进行24小时至72小时、36小时至72小时、48小时至72小时、60小时至72小时、24小时至60小时、36小时至60小时、48小时至60小时、24小时至48小时、36小时至48小时、24小时至36小时或24小时、30小时、36小时、42小时、48小时、54小时、60小时、66小时或72小时。

在一些实施例中,制作富含MAG的产品的工艺包括使脂肪酶失活和相分离的第三步。

来自上述实施例的所得产物得到的加工油的MAG含量基于加工油的总重量等于或大于40重量%。在某些方面,基于加工油的总重量,MAG含量为约40重量%至约99重量%。在某些方面,基于加工油的总重量,MAG含量为约50重量%至约99重量%。在某些方面,基于加工油的总重量,MAG含量为约60重量%至约99重量%。在某些方面,基于加工油的总重量,MAG含量为约70重量%至约99重量%。在某些方面,基于加工油的总重量,MAG含量为约80重量%至约99重量%。在某些方面,基于加工油的总重量,MAG含量为约50重量%至约80重量%。在上述任一方面,基于加工油的总重量,TAG含量等于或小于5重量%。在上述任何方面,基于加工油的总重量,TAG含量等于或小于4重量%,等于或小于3重量%,等于或小于2重量%,等于或小于1重量%。

来自上述实施例的所得产物得到的加工油通常基本上不含MCPD化合物,但当起始油具有大于0.30mg/kg的MCPD化合物且在一些情况下为约1.0mg/kg至约12.00mg/kg时也是如此。更具体地说,由上述方法得到的加工油包括小于100mg/kg的MCPD,且甚至达到标准测定无法检测的水平。如本文所用,相对于本发明加工油中MCPD水平的量,术语“基本上不含”意指低于下面实例11中所述测定的检测极限的水平。

来自上述实施例的所得产物得到的加工油富含MAG,特别是1-MAG(在sn-1位酯化的MAG)。在由具有油酸含量的起始油制成的加工油的情况下,这会导致产生1-油烯基单酰基甘油酯(1-OG)。已经发现,本公开的制造工艺实施例甚至可以高效地将sn-2油酸TAG转化为1-OG。例如,从三油精开始,本公开的制造工艺实施例可以从单个三油精分子产生三个1-OG分子,而通过胰脂肪酶消化三油精只能产生单酰基甘油形式的总油酸的三分之一,特别是作为2-单酰基甘油(2-OG)而不是1-OG,因为脂肪酶释放sn-1和sn-3位的油酸部分作为游离脂肪酸。因此,与正常消化过程相比,通过本公开的制造方法生产的加工油可产生至多三倍的1-OG含量。下面的反应示意图显示将三油精转化为2-OG和两个游离油酸分子(工艺A-正常消化)以及通过本公开的工艺(工艺B)将三油精转化为3个1-OG分子。

还已经发现,本公开的制造工艺实施例可以保持加工油中的起始油的脂肪酸谱。下表2显示各种起始油的代表性脂肪酸谱,该表提供总脂肪酸甲酯(FAME)的百分比。Nd-不确定。SAF-红花油、GRP-葡萄油、SIL-水飞蓟油、HMP-麻油、SFL-向日葵油、WHG-小麦胚芽油、PMS-南瓜籽油、SES-芝麻油、RB-米糠油、ALM-杏仁油、RPS-菜籽(卡诺拉)油、PNT-花生油、OL-橄榄油和COC-椰子油。表2还提供每种油的油酸/亚油酸和油酸/亚麻酸的比率。

特别是,已知亚油酸(ω-3脂肪酸)和亚麻酸(ω-6脂肪酸)对人类是必需的,因为它们可用于产生更长和更去饱和的脂肪酸,也称为长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA),包含二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)。

在一些实施例中,一种产品包括本公开的加工油。在一些实施例中,加工油本身是独立的产品。

在一些实施例中,加工油包括的MAG含量等于或大于加工油总重量的30重量%。例如但不限于,加工油包括的MAG含量为加工油总重量的约30重量%至95重量%、40重量%至95重量%、50重量%至95重量%、60重量%至95重量%、70重量%至95重量%、80重量%至95重量%、90重量%至95重量%、30重量%至90重量%、40重量%至90重量%、50重量%至90重量%、60重量%至90重量%、70重量%至90重量%、80重量%至90重量%、30重量%至80重量%、40重量%至80重量%、50重量%至80重量%、60重量%至80重量%、70重量%至80重量%、30重量%至70重量%、40重量%至70重量%、50重量%至70重量%、60重量%至70重量%、30重量%至60重量%、40重量%至60重量%、50重量%至60重量%、30重量%至50重量%、40重量%至50重量%或者约30重量%、35重量%、40重量%、45重量%、50重量%、55重量%、60重量%、65重量%、70重量%、75重量%、80重量%、85重量%、90重量%或95重量%。

在一些实施例中,包含关于MAG含量的上述实施例,加工油包括的DAG含量等于或大于加工油总重量的5重量%。例如但不限于,加工油包括的MAG含量为加工油总重量的约5重量%至66重量%、10重量%至66重量%、20重量%至66重量%、30重量%至66重量%、40重量%至66重量%、50至66重量%、5重量%至50重量%、10重量%至50重量%、20重量%至50重量%、30重量%至50重量%、40重量%至50重量%、5重量%至40重量%、10重量%至40重量%、20重量%至40重量%、30重量%至40重量%、5重量%至30重量%、10重量%至30重量%、20重量%至30重量%、5重量%至20重量%、10重量%至20重量%、5重量%至10重量%或者约5重量%、10重量%、15重量%、20重量%、25重量%、30重量%、35重量%、40重量%、45重量%、50重量%、55重量%、60重量%或66重量%。

在一些实施例中,包含关于MAG和/或DAG含量的上述实施例,加工油包括的FFA含量等于或大于加工油总重量的5重量%。例如但不限于,加工油包括的MAG含量为加工油总重量的约5重量%至66重量%、10重量%至66重量%、20重量%至66重量%、30重量%至66重量%、40重量%至66重量%、50至66重量%、5重量%至50重量%、10重量%至50重量%、20重量%至50重量%、30重量%至50重量%、40重量%至50重量%、5重量%至40重量%、10重量%至40重量%、20重量%至40重量%、30重量%至40重量%、5重量%至30重量%、10重量%至30重量%、20重量%至30重量%、5重量%至20重量%、10重量%至20重量%、5重量%至15重量%、10重量%至15重量%、5重量%至10重量%或者约5重量%、10重量%、15重量%、20重量%、25重量%、30重量%、35重量%、40重量%、45重量%、50重量%、55重量%、60重量%或66重量%。

在一些实施例中,包含关于MAG、DAG和/或FFA含量的上述实施例,加工油不含TAG或包括等于或小于加工油总重量的5重量%的TAG含量。例如但不限于,加工油包括的TAG含量为加工油总重量的约0重量%至5重量%、1重量%至5重量%、2重量%至5重量%、3重量%至5重量%、4重量%至5重量%、0重量%至4重量%、1重量%至4重量%、2重量%至4重量%、3重量%至4重量%、0重量%至3重量%、1重量%至3重量%、2重量%至3重量%、0重量%至2重量%、1重量%至2重量%、0重量%至1重量%或者0重量%、1重量%、2重量%、3重量%、4重量%或5重量%。通过进一步的实例但不限于,TAG含量可以小于5%、4%、3%、2%、1%、0.5%或0.1%。

在一些实施例中,加工油包括加工油总重量的约30重量%至80重量%的MAG,加工油总重量的约10重量%至约30重量%的DAG,加工油总重量的约0重量%至约5重量%的TAG,以及加工油总重量的约5重量%至约60重量%的FFA。

在本文的任何实施例中,加工油包括源自油源并天然存在于油源中的非油成分,使得非油成分不被添加到加工油中。例如但不限于,这种非油成分可以包含抗氧化剂诸如生育酚,其包含α-生育酚、β-生育酚、δ-生育酚、γ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、δ-生育三烯酚或γ-生育三烯酚,以及其他维生素诸如维生素K和结构相似的2-甲基-1,4-萘醌(3-)衍生物。在一些实施例中,抗氧化剂选自天然的(例如,混合的生育酚或抗坏血酸)和合成的(例如,丁基化羟基茴香醚或丁基化羟基甲苯)抗氧化剂。非油成分的进一步实例包含神经酰胺磷酸酯、单半乳糖基二酰基甘油、磷脂酰甲醇、谷甾醇酯、菜油甾醇酯、鞘脂、磷脂酰甘油、蜡酯和鞘磷脂。

在本文的任何实施例中,加工油包括油酸单甘油酯(MOG)并具有总脂肪酸含量。MOG可占加工油总脂肪酸含量的约5重量%至约75重量%。在一些实施例中,例如但不限于,MOG可占加工油总脂肪酸含量的约10重量%至约75重量%、约20重量%至约75重量%、约30重量%至约75重量%、约40重量%至约75重量%、约50重量%至约75重量%或约60重量%至约75重量%。在一些实施例中,加工油包括加工油总脂肪酸含量的约5重量%至约75重量%的量的油酸。在一些实施例中,例如但不限于,油酸可占加工油总脂肪酸含量的约10重量%至约75重量%、约20重量%至约75重量%、约30重量%至约75重量%、约40重量%至约75重量%、约50重量%至约75重量%或约60重量%至约75重量%。

在本文的任何实施例中,加工油包括MOG,并且MOG包括MOG总量的至少50重量%的1-油烯基单甘油酯(1-OG)。例如但不限于,加工油可包括MOG总量的至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或至少99%的1-OG。

在本文的任何实施例中,加工油包括加工油总脂肪酸含量的约10重量%至约75重量%的量的油酸。例如但不限于,油酸可以加工油总脂肪酸含量的约10重量%至约75重量%、约20重量%至约75重量%、约30重量%至约75重量%、约40重量%至约75重量%、约50重量%至约75重量%、约60重量%至约75重量%、约10重量%至约20重量%、约10重量%至约30重量%、约10重量%至约40重量%、约10重量%至约50重量%或约10重量%至约60重量%的量存在。在本文的任何实施例中,油酸在sn-1位被酯化。例如但不限于,加工油可包括油酸总量的至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或至少99%的在sn-1位被酯化的油酸。

在本文的任何实施例中,加工油包括占加工油总脂肪酸含量的约1.5重量%至约90重量%的量的亚油酸。例如但不限于,亚油酸可以加工油总脂肪酸含量的约10重量%至约90重量%、约20重量%至约90重量%、约30重量%至约90重量%、约40重量%至约90重量%、约50重量%至约90重量%、约60重量%至约90重量%、约70重量%至约90重量%、约80重量%至约90重量%、约10重量%至约25重量%、约10重量%至约20重量%的量存在。在一些实施例中,加工油包括油酸和亚油酸,油酸与亚油酸的比率在约0.01至5之间。例如但不限于,油酸与亚油酸的比率可以在约1至约5、约1至约4、约1至约3、约1至约2、约1.5至约5、约1.5至约4、约1.5至约3、约1.5至约2、约2至约5、约2至约4、约2至约3、约2.5至约5、约2.5至约4.5、约2.5至约4、约2.5至约3.5、约2.5至约3、约3至约5或约3至约4之间。

在本文的任何实施例中,加工油包括加工油总脂肪酸含量的约0.01重量%至约2重量%的量的亚麻酸。例如但不限于,亚麻酸可以以加工油的总脂肪酸含量的约0.1重量%至约2重量%、约0.5重量%至约2重量%、约1重量%至约2重量%或约1.5重量%至约2重量%的量存在。在一些实施例中,加工油包括油酸和亚麻酸,油酸与亚麻酸的比率是约1至约100。例如但不限于,油酸与亚麻酸的比率可以在约10至约100、约20至约100、约30至约100、约40至约100、约50至约100、约60至约100、约70至约100、约10至约90、约10至约80、约10至约70、约10至约60、约10至约50、约10至约40、约10至约30或约10至约20之间。应当理解,权利要求中提及的脂肪酸不应理解为仅限于游离脂肪酸,并且可以指甘油酯形式的脂肪酸。在本公开的加工油中,脂肪酸将主要以MAG形式存在,而在预加工油中,它将主要以TAG形式存在。在某些情况下,脂肪酸在较小程度上可以是游离形式或DAG形式。在加工油中,游离脂肪酸通常将小于10%。

在本文的任何实施例中,加工油的脂肪酸谱与生产加工油的预加工油的脂肪酸谱基本上相同。例如但不限于,对于脂肪酸谱的每种组分,加工油的脂肪酸谱可以在约10%、约9%、约8%、约7%、约6%、约5%、约4%、约3%、约2%或约1%以内。在一些实施例中,脂肪酸谱包括油酸、亚油酸和亚油酸。然而,脂肪酸的任何组合都可能形成脂肪酸谱。例如但不限于,脂肪酸谱可以包括表2中所列脂肪酸以及EPA和DHA的任意组合。

在本文的任何实施例中,与生产油的预加工油中的TAG分子的数量相比,加工油包括三倍量的MAG分子。例如,以摩尔计,加工油中MAG形式的油酸量可能是预加工油中TAG形式的油酸量的至多三倍。例如但不限于,加工油中MAG形式的油酸的量可以是预加工油中TAG形式的油酸的量的1.1、1.25、1.5、1.75、2.0、2.25、2.5、2.75或3倍。例如,预加工油中TAG形式的每个油酸部分可以被转化为油酸MAG,使得至多三个油酸部分,如在三油精中,将被转化为三个油酸MAG。在一些实施例中,加工油中MAG的量是生产加工油的预加工油中TAG的量的三倍。例如,产生的MAG数量约对应于预加工油中TAG数量的三倍。在一些实施例中,加工油包括与生产加工油的预加工油中油酸的量大致相同的量的油酸单甘油酯形式的油酸。

在一些实施例中,产品或食物产品可以包括至少1%的MAG。例如但不限于,食物产品可以包括所述产品或食物产品重量的至少1%、2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%或更多MAG以及它们之间的任何范围或量。作为进一步的实例但不限于,产品或食物产品可以包括产品或食物产品总重量的5重量%至15重量%的MAG。

在一些实施例中,产品或食物产品可包括产品或食物产品总重量的至少3重量%的本文任何实施例的加工油。例如但不限于,食物产品可以包括产品或食物产品重量的至少3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%或更多本文任何实施例的加工油以及它们之间的任何范围或量。

在一些实施例中,食物产品可以进一步包括碳水化合物源。例如但不限于,这种碳水化合物源可以包括单糖,诸如葡萄糖和果糖,其源自碳水化合物源,诸如水果和龙舌兰糖浆。其他碳水化合物源包含其他基于植物的糖浆、淀粉和糖醇。

在一些实施例中,食物产品可以进一步包括蛋白质源。在某些方面,蛋白质源可以被水解或部分水解。例如但不限于,这种蛋白质源可以包括乳蛋白(酪蛋白和乳清),和其他植物蛋白,包含来自大豆、大米和米糠、扁豆、鹰嘴豆、花生、杏仁、螺旋藻(藻类)、藜麦、真菌蛋白、野鼠尾草籽和麻籽的蛋白。水解蛋白可以被广泛水解,其中豌豆蛋白富含长度为1至10个氨基酸的肽。在一些实施例中,与商业部分水解的蛋白质和其他基于乳清的水解产物诸如Peptamen和Crucial相比,所述蛋白质富含长度为1至10个氨基酸的肽约25%至75%。例如但不限于,蛋白质富含长度为1至10个氨基酸的肽至少25%至75%、35%至75%、45%至75%、55%至75%、65%至75%、25%至65%、35%至65%、45%至65%、55%至65%、25%至55%、35%至55%、45%至55%、25%至45%、35%至45%、25%至35%或者25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%或75%。

在一些实施例中,食物产品可以是液体、半固体或固体。例如但不限于,半固体可以包含布丁、慕斯、冰棒或类似冰淇淋的产品。例如但不限于,液体可以是奶昔或其他饮品。例如但不限于,固体可以是棒或其他固体食物产品。

在一些实施例中,产品或食物产品进一步包括粘度改变剂。粘度改变剂可以是例如但不限于黄原胶或金合欢胶。在一些实施例中,产品或食物产品可以进一步包括结构或稳定性增强组分,诸如但不限于阿拉伯树胶、向日葵卵磷脂和黄原胶。在一些实施例中,产品或食物产品进一步包括纤维源,诸如但不限于寡糖。在一些实施例中,产品或食物产品可以进一步包括食物防腐剂,诸如但不限于苯甲酸钠或山梨酸钾。

在一些实施例中,产品或食物产品进一步包括调味剂、掩蔽剂或阻断剂。例如但不限于,调味剂可以包含巧克力、香草、草莓或其他调味剂。

在一些实施例中,食物产品具有至少25克的总重量。例如但不限于,食物产品可以具有至少25克、50克、100克、250克、500克、1000克、1500克、2000克、2500克、3000克或更多的重量。在一些实施例中,食物产品具有约25克至约3000克的总重量。例如但不限于,食物产品可以具有25克至3000克、25克至2500克、25克至2000克、25至1000克、25克至500克、50克至3000克、50克至2500克、50克至2000克、50克至1500克、50克至1000克、50克至500克、100克至3000克、100克至2500克、100克至2000克、100克至1500克、100克至1000克、100克至500克、250克至3000克、250克至2500克、250克至2000克、250克至1500克、250克至1000克、250克至500克、500克至3000克、500克至2500克、500克至2000克、500克至1500克、500克至1000克、1000克至3000克、1000克至2500克、1000克至2000克、1000克至1500克、1500克至3000克、1500克至3000克、2000克至3000克、2000克至2500克、25克至250克、50克至250克、100克至250克、25克至100克、50克至100克、25克至50克的重量或者小于或等于25克、50克、100克、150克、200克、250克、300克、350克、400克、450克、500克、1000克、1500克、2000克、2500克或3000克的总重量。

在一些实施例中,食物产品具有约200kcal至1000kcal的总热量含量。例如但不限于,食物产品可以具有约200kcal至1000kcal、400kcal至1000kcal、600kcal至1000kcal、800kcal至1000kcal、200kcal至800kcal、400kcal至800kcal、600kcal至800kcal、200kcal至600kcal、400kcal至600kcal、200kcal至400kcal的热量含量或者小于或等于200kcal、300kcal、400kcal、500kcal、600kcal、700kcal、800kcal、900kcal或1000kcal的量。

在一些实施例中,食物产品中约20%至75%的热量源自油或脂肪。在一个方面,油或脂肪是本文任一实施例的加工油。在又一方面,加工油的MAG含量等于或大于加工油总重量的30重量%。在其他方面,加工油的MAG含量是加工油总重量的约40重量%至约99重量%。在又一方面,加工油的TAG含量小于加工油总重量的5重量%。例如但不限于,食物产品中20%至50%、30%至50%、40%至50%、20%至40%、30%至40%、20%至30%、20%至75%、30%至75%、40%至75%、50%至75%、60%至75%、70%至75%、20%至70%、30%至70%、40%至70%、50%至70%、60%至70%、20%至60%、30%至60%、40%至60%、50%至60%或约20%、21%、22%、23%、24%、25%、26%、27%、28%、29%、30%、31%、32%、33%、34%、35%、36%、37%、38%、39%、40%、41%、42%、43%、44%、45%、46%、47%、48%、49%、50%、51%、52%、53%、54%、55%、56%、57%、58%、59%、60%、61%、62%、63%、64%、65%、66%、67%、68%、69%、70%、71%、72%、73%、74%或75%的热量源自任何上述加工油。

在关于食物产品的任何上述实施例中,食物产品中约20%至50%的热量源自碳水化合物源。例如但不限于,食物产品中20%至50%、30%至50%、40%至50%、20%至40%、30%至40%、20%至30%或约20%、21%、22%、23%、24%、25%、26%、27%、28%、29%、30%、31%、32%、33%、34%、35%、36%、37%、38%、39%、40%、41%、42%、43%、44%、45%、46%、47%、48%、49%或50%的热量源自碳水化合物源。

在关于食物产品的任何上述实施例中,食物产品中约10%至50%的热量源自蛋白质源。例如但不限于,食物产品中10%至50%、20%至50%、30%至50%、40%至50%、10%至40%、20%至40%、30%至40%、10%至30%、20%至30%、10%至20%或约10%、11%、12%、13%、14%、15%、16%、17%、18%、19%、20%、21%、22%、23%、24%、25%、26%、27%、28%、29%、30%、31%、32%、33%、34%、35%、36%、37%、38%、39%、40%、41%、42%、43%、44%、45%、46%、47%、48%、49%或50%的热量源自蛋白质源。

应当理解,食物产品的上述公开的实施例可以组合。

在一些实施例中,本公开的食物产品包括本公开的加工油。

在一些实施例中,基于EMO的产品由消化系统功能不良的个体例如但不限于患有EPI的个体或与食物一起服用PERT的个体服用。在一些实施例中,基于EMO的产品由希望更快或更完全地将脂质转化为血清甘油三酯的个体服用。因此,提供一种用于喂养消化系统功能不良的人或动物受试者的方法。所述方法包括向所述患者施用上述实施例中任一个或这些实施例的组合中所述的食物产品。在一个方面,人或动物受试者患有EPI。在其他方面,人或动物受试者患有囊性纤维化、胰腺炎、胰腺癌或胆汁淤积。

在一些实施例中,提供一种用于促进有需要的受试者中的葡萄糖稳态的方法,包括向所述受试者施用包括本公开的加工油的组合物。在一些实施例中,受试者患有影响葡萄糖稳态的病症。在一些实施例中,所述病症是胰岛素抗性或糖尿病。在一些实施例中,所述病症是II型糖尿病。

在一些实施例中,提供一种用于治疗有需要的受试者中的糖尿病的方法,包括向所述受试者施用包括本公开的加工油的组合物。在一些实施例中,所述糖尿病是II型糖尿病。

实例

实例1:与起始富含TAG的油相比,制作富含MAG的产品的工艺。

与富含TAG的起始油相比,制作富含MAG的产品的方法包含3个关键步骤:(1)以将天然油转化为FFA、MAG、DAG和低残留TAG的特定组合的顺序水解甘油三酯(TAG)的温和酶催化反应;(2)用甘油酯化,产生主要是高含量的MAG,留下低浓度的FFA;和(3)分离修饰的脂质产物;这是通过有或没有离心机辅助的相分离来实现的。

步骤1.三酰基甘油的酶转化

缓冲溶液的制备。在搅拌釜式反应器中制备柠檬酸钠溶液(100mM,pH 5.8)。将11.1L去离子(DI)水放入混合容器中,将搅拌器设置为200RPM,并加入0.213kg柠檬酸(无水)。粉末溶解后,用氢氧化钠溶液将pH值调节至pH=5.8(约0.121kg)。取出220mL用于随后的酶制剂。

酶溶液的制备。在一个单独的250mL瓶中,在温和搅拌下制备酶溶液:将200mL柠檬酸盐缓冲溶液置于混合容器中。加入10g AMANO脂肪酶AY,且摇晃所述瓶,直至酶溶解。

甘油三酯油混合物的转化。向容器中加入三种植物油,橄榄油、亚麻籽油和向日葵籽油,得到总计10kg的植物油混合物。施加真空将压力降至约20mmHg,并对材料进行除气(特别是从任何溶解氧中)。将搅拌设定为200RPM,并且将混合物加热至33℃并搅拌约15Min,以去除任何溶解的气体。然后用氮气气氛代替真空。将混合物充分分散后,加入220mL在缓冲溶液中的酶制剂。继续搅拌,并监测反应24小时,直至根据TLC分析完全转化为FFA。

将反应器温度升至70℃,并继续搅拌1小时以使酶失活。

停止搅拌,且在约60分钟后使相分离。

去除了水相(下部)和少量油相,以确保去除界面处的残留蛋白质。

步骤2.用甘油酯化。通常,当FFA用甘油再酯化时,它们会产生MAG、DAG和TAG的混合物。我们发现,通过显著降低温度(低于25℃)并去除反应中形成的水(通过蒸发),可以高度富集产物中的MAG比例(至少60%,但高达95%)。这是意料之外的。

在反应中,将来自步骤1的反应产物(约10L)冷却至约30℃,并以300RPM搅拌。向脂质混合物中加入10kg食物级甘油,且温度保持在约30℃。搅拌混合物以产生油和甘油的分散体。为了干燥反应混合物,施加真空:首先施加真空(25mmHg,托),接收器就位以收集水。停止蒸发残留水后,向反应器中加入20g溶于水(50mL)中的Amano脂肪酶G。使用油隔膜泵和收集水的冷阱,将温度降至23℃,并将真空变为5mmHg。将混合物在23℃下以300RPM的速度在真空下搅拌72小时,此时真空被打破,且混合物被氮气毯覆。72小时后用TLC分析混合物,以评估向MAG的转化,如图1所示。

步骤3.脂肪酶失活和相分离。反应完成后,通过将混合物(在氮气毯覆下)加热至70℃达1小时,使脂肪酶失活。此时,MAG油和甘油充分混合,且很难通过传统的重力或离心方法分离。经过大量实验后,我们发现可以通过在搅拌下向反应混合物中加入0.3重量%的盐(NaCl)将脂质与过量的甘油分离。然后将产物混合物冷却至约60℃,并在不搅拌的情况下静置约1小时。

脂质油相与剩余的较重甘油相分离。甘油相被去除:它含有一些盐、残留水和可见界面中含有的溶解的失活酶。甘油相可在膜过滤后重复使用,并应保持再循环。添加生育酚(维生素E)得到浓度为200ppm(0.02重量%)的产品油。水解油(约10kg已准备就绪,且可在氮气毯覆下存储)。

产品存储。将最终水解产物转移至覆盖有氮气的食物级容器中存储和运输。

实例2:在实例1中生产的油的表征。

可以使用薄层色谱法和气相色谱法评估反应产物和整个过程。

薄层色谱测试。使用TLC板(Analtech Uniplate硅胶GHL,含无机粘合剂,20x20cm,250μm)分离油样本的组分。溶剂为己烷:二乙醚:乙酸(70:30:1)溶液。典型样本大小为3μL。溶剂前沿接近板顶部(约1cm)后,从TLC罐中取出板,并在通风柜中蒸发溶剂。在TLC罐中用碘蒸气(在室温下)对各组分进行可视化,并通过比色成像(Amersham 600成像仪)估计相对强度。在罐中15分钟后,取出板并拍照。30-60分钟后,斑点强度减弱。

进行物理性质确定以确立产品稠度、颜色、水含量、脂肪和油(可混溶)。

图1描绘与实例1中所述的起始富含TAG的油相比,制作富含MAG的产品的工艺中步骤1至3的最终结果。图2示出最初存在于橄榄油中的生育酚按照实例1中所述的步骤被保存。在图2中,可以看到生育酚斑点在所有三条泳道的TAG斑点上方追踪。

脂肪酸谱测试-气相色谱法。衍生化为脂肪酸甲酯后,分析脂质组分,包含C10:0癸酸、C12:0月桂酸、C14:0肉豆蔻酸、C16:0棕榈酸、C18:0硬脂酸、C18:1油酸、C18:2亚油酸和C18:3α亚麻酸,并与标准进行比较。为了进行衍生化,将一份样本(500μl)加入一个5-ml的反应管中,反应管中含有2ml三氟化硼溶液(在甲醇中为12%)、20μl二甲氧基丙烷和100μl十三烷酸内标溶液(10mg/ml)。使反应管涡流,并且在60℃的加热块中孵育30分钟。

将反应管从加热块上取下,并让其冷却15分钟。然后,加入1ml蒸馏水以使反应淬火,然后加入1ml己烷。使反应管涡流60秒,并使相分离3分钟。将顶部(疏水)相移至含约50mg硫酸钠(无水)的1.5-ml管中。涡旋60秒后,将1.5-ml管离心分离,并将约500μl澄清、干燥的疏水相转移至气相色谱样本瓶中。

使用具有火焰离子化检测器的Agilent 7890A气相色谱仪和Agilent OpenlabCDS Chemstation软件分析样本。GC柱:Omegawax 100(15m x 0.1mm x 0.1um)柱。通过内部标准参考将结果换算为重量%。

图3描绘FFA、MAG、DAG和TAG在Ensure和本公开的GBFS产品中的分布。通过薄层色谱法确定的油中FFA、MAG、DAG和TAG的百分比。

实例3:与起始富含TAG的油相比,制作富含MAG的产品的工艺的另一个实例。

图4中的方框流程图描绘以下程序。

将植物油加入到DI水中的柠檬酸和氢氧化钠(苛性)中,并加热至33℃+/-2℃。采用低真空进行除气以去除氧。添加脂肪酶AY。在33℃+/-2℃的温度下在氮气毯覆下水解混合物14-24小时。

将脂肪酶在70℃+/-2℃的温度下失活1小时。将具有失活酶的水相排出。加入甘油。然后将反应冷却至22℃+/-2℃。然后加入脂肪酶G,并且在中等真空下蒸发水。

在20℃+/-2℃的温度下在高真空(约720mmHg)下进行72小时的再酯化。将脂肪酶G在70℃+/-2℃下失活一小时,并且向反应中加入盐。

酶失活和相分离在70℃+/-2℃下在氮气毯覆下进行1小时。排出含有失活酶、甘油和盐的水相。将反应冷却至60℃+/-2℃。添加抗氧化剂。将最终产品在氮气下在4℃+/-2℃下存储。

实例4:包括MAG和水解蛋白的即饮制剂

本公开的产品以常规的“奶昔”制剂生产,除了通常在这些产品中发现的常规表面活性剂和稳定剂之外,所述制剂还包含脂肪、蛋白质、碳水化合物、维生素和纤维的来源。每份250ml。成分标签上将会出现的成分如下:水、有机龙舌兰糖浆、水解豌豆蛋白、水解调和油、阿拉伯胶、向日葵卵磷脂、黄原胶、寡糖、山梨酸钾、苯甲酸钠、速溶咖啡、天然有机香草香精、维生素C、维生素E琥珀酸盐、维生素A棕榈酸盐、烟酰胺、D-泛酸钙、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素、核黄素、维生素D3、叶酸、氰钴胺素、维生素K2。

碳水化合物以单糖(葡萄糖和果糖)的形式从水果和龙舌兰糖浆中提供。

产品中的蛋白为部分水解的豌豆蛋白(PURIS豌豆蛋白870H,World FoodProcessing LLC,Turtle Lake,WI 54889)。

我们还生产了大量水解的豌豆蛋白(EHP),其中肽的大小在更适合生物转运穿过肠壁的范围内。通过进一步酶水解生产EHP。例如,将部分水解的豌豆蛋白(如上所述的Puris豌豆蛋白870H)蛋白溶解在100mM磷酸盐缓冲液中,使浓度达到25mg/ml。加入酶,且反应在50℃下孵育过夜。评估了三种不同的商业GRAS酶:碱性蛋白酶、嗜热酶和风味酶。

使用大小排阻色谱法评估蛋白质样本中肽的平均大小和分布。将样本溶解在pH6.8的100mM磷酸盐缓冲液中,使浓度达到25mg/ml,并在具有紫外检测器(214nm)的Shimadzu HPLC上使用Phenomenex Yarra 3um SEC-2000柱(用100mM磷酸钠缓冲液(pH6.8)稀释,在室温下流速0.8mL/min)进行分析。将样本与分子量标准品(Phenomenex SEC标准品部分ALO-3042)进行比较。使用由已知分子量标准产生的校准曲线估计大小。未水解豌豆蛋白的平均大小为约200个氨基酸。Puris豌豆870H部分水解材料的平均大小为34个氨基酸,其中相当一部分在2-40个氨基酸范围内,与其他(基于乳清的)蛋白质水解产物相似。

图5描绘与广泛水解上述豌豆蛋白的GBFS相比E.Phillips等人2005年《基于肽的配方:肠内喂养的营养药物?(Peptide-Based Formulas:the Nutraceuticals ofEnternal Feeding?)》EPCN 10月:40-45中报告的即饮营养饮料中氨基酸和肽的分布。图5描绘本公开的产品Peptamen、Perative、Crucial、Pivot和GBFS(X轴)中大小为1个氨基酸、2-4个氨基酸、9-10个氨基酸、10-40个氨基酸或大于40个氨基酸的氨基酸百分比(Y轴)。GBFS EHP的平均大小为3-4个氨基酸,大多数为1-7个氨基酸。

脂肪以重构脂质MAG的形式提供,且由橄榄油(70%)、向日葵油(21%)和亚麻籽油(9%)的混合物制成,提供多不饱和脂肪酸(PUFA)、ω-6PUFA和ω-3PUFA的能量和其他益处。ω-6/ω-3比率为约4/1。

阿拉伯树胶、向日葵卵磷脂和黄原胶是用于为饮料提供结构和稳定性的常用的GRAS食物成分。寡糖提供不可消化的纤维。山梨酸钾和苯甲酸钠是常用的食物防腐剂。速溶咖啡和香草提供风味。

包含包含有脂溶性和水溶性维生素的维生素包。

表3示出原型产品营养标签。在表3中,**每日百分比值(%DV)基于2,000热量的饮食。日值(DV)未确定。

感觉评估。品尝小组发现,从植物油混合物中生产的FFA不好吃。令人惊讶的是,用这种混合物生产的MAG油味道可口,且口感和质地与原甘油三酯油相似。在将MAG油配制成上述RTDS产品时,其风味是可接受的,且与含有完整(未消化)脂质和蛋白质的类似商业产品无法区分。

实例5:多批次EMO的生产

评估制造EMO的实例1中所述工艺的时间,以产生大于70%MAG、大于>85%MAG+FFA且TAG含量为5%或更低的油。

表4描绘TLC板的扫描,示出从橄榄油/亚麻油/向日葵油混合物(比率为7/2/1)中生产的酶修饰的EMO中的MAG和FFA的浓度。在这些实验中,将步骤2延长至84小时,以确定避免形成TAG的时间和温度上限。

实验 TAG DAG MAG FFA FFA+MAG
1 4 26 57 13 70
2 4 11 72 13 85
3 5 10 76 9 85

可通过TLC分析对反应进行基本实时的监测,并在步骤2期间的任何时间点停止反应,以得到期望量的MAG、DAG、TAG和FFA。发现步骤2的72小时反应时间是一个实用且富有成效的停止点,且如实例6所示。

实例6:通过NMR分析评估不含TAG的酶修饰的杏仁油。

使用杏仁油生产不含TAG的EMO。反应条件如实例1所述。步骤2是72小时,以最少化TAG的生产。

图6A-6B描绘从杏仁油生产的EMO的13C-NMR分析。图6A示出与真实TAG(三硬脂酸甘油酯)相关联的13C-NMR信号以及在62.173ppm和68.921ppm处的特征峰。图6B示出EMO的13C-NMR信号。它表明没有可辨别的TAG信号。对实际信号进行积分表明,88%:12%的MAG:DAG之间的酰基甘油分布。使用在600MHz质子和150MHz碳下工作的JEOL ECA600II型NMR光谱仪分析样本。在5mm管中制作样本,并在环境温度下用CDCl3锁定运行。

实例7:基于EMO的即饮奶昔的临床测试

研究被设计成显示患有EPI的患者可以消耗用我们生产的不含TAG的油生产的食物,无需服用酶补充药物,但仍会吸收脂质并在其血清中产生TAG。

临床研究是一项单中心、随机、双盲、交叉试验,与胰酶替代治疗胶囊(“PERT”)配合使用的标准营养补充剂相比,评估基于EMO的即饮奶昔(RTDS)的血脂水平、安全性、耐受性和适口性。

本研究的纳入标准包含:

1.提供签署并注明日期的知情同意书。

2.表明愿意遵守所有研究程序,并在研究期间随时可用。

3.男性或女性,12岁或以上。

4.CF的诊断

5.目前正在接受多于3个月的市售胰酶产品治疗。

6.招募后1个月内临床状况稳定,无急性呼吸道疾病迹象。

7.定义为在招募后3个月内下降不超过5%的稳定体重。

8.有生育潜力的女性应同意在整个研究期间以及最后一次服用研究药物后的30天内继续使用医学上可接受的节育方法。医学上可接受的节育方法包含双侧输卵管结扎,或使用避孕植入物、避孕注射剂(Depo-ProveraTM)、宫内节育器或过去3个月内服用的口服避孕药(如果受试者同意在研究期间继续使用或采用另一种节育方法),或使用由以下任何两种方法的组合组成的双屏障方法:膈膜、宫颈帽、避孕套或杀精子剂。

9.能够服用口服药物和口服液营养补充剂,并愿意遵守研究干预措施。

10.同意在整个研究期间遵守生活方式注意事项(见第5.3节)。

本研究的排除标准包含:

1.有心血管、呼吸(基础疾病除外)、泌尿生殖、胃肠/肝脏(基础疾病除外)、血液学/免疫学、头、耳、眼、鼻、喉、皮肤学/结缔组织、肌肉骨骼、代谢/营养(基础疾病除外)、内分泌(控制性糖尿病除外)、神经/精神、牛奶、坚果或大豆过敏、近期重大手术或病史、体格检查和/或实验室评估揭示的可能限制参与或完成本研究的其他相关疾病的迹象。

2.过去一年的急腹症病史。

3.纤维化性结肠病病史。

4.招募前6个月内有远端肠梗阻综合征(DIOS)病史。

5.影响大肠的实体器官移植或手术(阑尾切除术除外)。

6.显著影响吸收能力的小肠手术(例如,胃切除术或胰腺切除术)。

7.肠道炎症性疾病,包含与胰腺功能不全无关的慢性腹泻疾病。

8.乳糜泻或克罗恩病。

9.接受≥50%每日热量摄入量的肠内管饲。

10.怀孕或哺乳。

11.过去5年中任何类型的累及消化道的恶性肿瘤。

12.已知对胰酶或胰酶胶囊的非活性成分(赋形剂)过敏。

13.疑似不遵守或不合作。

14.研究开始前30天内摄入试验药物。

15.研究者认为妨碍受试者参与或能够完成本研究的精神残疾或任何其他健康状况缺失。

16.人类免疫缺陷病毒的病史诊断。

17.列出用于肺移植或其他实体器官移植或记录的用力呼气量(FEV)≤25%。

18.使用降脂疗法,包含他汀类、贝特类、烟酸和前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶kexin型9(PCSK9)抑制剂,在研究第1天之前至少14天和第15天内不能停用。患者为男性或女性,年龄12岁或以上,诊断为囊性纤维化。患者目前还在接受多于3个月的市售胰酶产品治疗,且在招募后1个月内临床状况稳定,无急性呼吸道疾病迹象。

患者在隔夜禁食和标准化晚餐后来到诊所。支臂1中的那些(10个患者)与PERT安慰剂一起服用RTDS,且支臂2中的那些(10个患者)施用含有PERT的标准营养补充剂。在6小时(0、1、2、3、4、5、6小时)内连续采集两个研究支臂中患者的血样,未重复服用RTDS或标准营养补充剂。在研究期间可能会喝水。

患者在隔夜禁食和标准化晚餐后返回诊所治疗2(交叉治疗)。支臂1中的患者被施用含有PERT的标准营养补充剂,且支臂2中的患者被施用RTDS和PERT安慰剂。在6小时(0、1、2、3、4、5、6小时)内连续采集两个研究支臂中患者的血样,未重复服用RTDS或标准营养补充剂。

标准营养补充剂含有:水、葡萄糖浆、糖、植物油(卡诺拉、高油酸向日葵、玉米)、浓缩乳蛋白和不到2%的大豆分离蛋白、酪蛋白酸钙、酪蛋白酸钠、金合欢胶、低聚果糖、菊粉(来自菊苣)、大豆卵磷脂、盐、天然和人工香料、卡拉胶柠檬酸钾、磷酸钙、磷酸镁、氯化镁、抗坏血酸钠、酒石酸氢胆碱、DL-α-生育酚乙酸酯、抗坏血酸、氯化钾、硫酸亚铁、硫酸锌、烟酰胺、泛酸钙、硫酸锰、硫酸铜、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素、β-胡萝卜素、维生素A棕榈酸酯、核黄素、叶酸、氯化铬、生物素、碘化钾、植物甲萘醌、亚硒酸钠、钼酸钠、维生素D3、维生素B12。

RTDS含有:水、有机枣糖浆、酶修饰杏仁油、酶水解豌豆蛋白、可溶性玉米纤维、可可粉、天然香料、盐、维生素C、维生素E(dl-α-生育酚乙酸酯)、烟酰胺、泛酸(D-泛酸钙)、维生素B6(盐酸吡哆醇)、维生素A(棕榈酸视黄酯)、维生素B2(核黄素)、维生素B1(盐酸硫胺素)、L-甲基叶酸、维生素K1、维生素D3(胆钙化醇)、生物素、维生素B12(氰钴胺素)。

营养补充剂为5.9重量%的脂肪、5.9重量%的蛋白质和19重量%的碳水化合物,而RTDS为7.4重量%的脂肪、4.7重量%的蛋白质和9.8重量%的碳水化合物。

脂质剂量为0.5g/kg体重。标准营养补充剂中的脂质是来自卡诺拉、高油酸向日葵油和玉米油的TAG混合物。在介入饮料中,MAG由杏仁油生产。每个患者的脂质剂量基于完善的“脂质耐受测试”,这些测试的设计和范围与众所周知的葡萄糖耐量测试相似。这些测试的建议剂量为在20-30分钟内施用0.5-1.0g/kg。在测试开始时取样,每小时取样6小时。血清甘油三酯水平使用标准实验室方法来测量。

研究中使用的PERT剂量遵循制造商推荐的剂量指南,即每克摄入的脂肪中脂肪酶活性为2,500iu。这在研究的交叉阶段转化为3-4粒胶囊。

图7描绘两个患者摄入基于EMO的即饮奶昔后血清甘油三酯的升高。在图7中,虚线表示接受0.5g/Kg体重的酶修饰杏仁油的患者,且实线表示接受0.5g/Kg体重的在半小时内消耗的RTDS中所含的卡诺拉油、高油酸向日葵油和玉米油的患者。图7示出RTDS中的酶修饰油被患者吸收并转化为血清甘油三酯。

图8描绘另一患者摄入测试饮料后血清甘油三酯的升高。在图8中,虚线表示在摄入不含PERT的基于MAG的RTDS之后的血清甘油三酯,且实线表示含PERT的RTDS护理标准。患者接受0.5g/Kg体重的酶修饰杏仁油或0.5g/Kg体重的玉米油,并入在半小时内消耗的RTDS中。

在此患者中,摄入不含PERT的基于MAG的RTDS血清后,脂质吸收和转化为血清甘油三酯的速度明显快于摄入含PERT的基于TAG的(护理标准)产品。这表明,除EPI外,患者还患有胆汁淤积症(肝内胆汁流动中断),而不仅仅是缺乏足够的酶,因此无法适当乳化在标准护理饮料中的卡诺拉油、高油酸向日葵油和玉米油。需要将油乳化为非常小的液滴,以产生胰脂肪酶将油水解为转运至肠细胞的MAG和FFA所需的表面积。这项活动需要肝脏中的胆汁酸。标准护理饮料中的TAG无法乳化为小肠中最佳脂肪酶活性所需的微乳液,因此血清甘油三酯的增加速度不如不需要脂肪酶活性的MAG制剂快。

所有病例中,每个患者的实际脂质剂量相同:0.5g/kg体重。

下表5显示针对标准营养补充剂和RTDS在研究中假设的65kg患者的糖摄入量。对照饮料中的大部分糖和碳水化合物是葡萄糖或淀粉,且很容易转化为葡萄糖。在研究饮料中,假设65kg患者将会消耗的饮料量较少(研究饮料的脂质浓度较高),且碳水化合物以较低的量供应,且作为果糖和葡萄糖的50:50混合物。因此,实际消耗的葡萄糖更少。

图9描绘研究中支臂1和支臂2各8个患者在六小时采样期内的平均血糖升高。消耗RTDS的患者餐后最大血糖水平显著下降,且保持低于标准营养补充剂队列。这些结果表明,与含有PERT的标准营养补充剂相比,基于EMO的营养补充剂(富含1-单酰基甘油,诸如1-油烯基单甘油)能够对葡萄糖稳态产生积极影响,含有PERT的标准营养补充剂预计只会产生少量2-单酰基甘油,诸如2-油烯基单甘油。根据施用的葡萄糖量,RTDS队列中的血糖水平预计会更高,且显示的效果出乎意料。

图10描绘研究中支臂1和支臂2各8个患者在六小时采样期内的平均血清甘油三酯水平。测试组和对照组均表现出相似的甘油三酯水平,这表明患者从含有PERT的标准营养补充剂或不含PERT的RTDS中吸收了相同量的脂质。

实例8:高热量、不含PERT的即饮奶昔

高热量RTDS可以如下制备:向主混合容器中加入DI水(最终体积的约60%),并将水加热至约60℃。在水解蛋白中混合,然后加入龙舌兰糖浆。使用手动混合机进行组合。在单独的容器中,将温热(60℃)的EMO和卵磷脂组合。当卵磷脂溶解时,向水相中加入EMO/卵磷脂并混合。添加额外的水以达到最终重量(体积)。用剪切搅拌机乳化。要制备非常高热量的RTDS,添加更高含量的组分。

生产饮料基料后,可添加各种调味剂、掩蔽剂和阻断剂,以生产独特的产品,诸如巧克力、香草、草莓等。

此方法也可用于使用饮料基料配方并加入粘度改变剂诸如黄原胶和金合欢胶来生产半固体形式的高热量产品,诸如布丁、慕斯、“冰棍”和冰淇淋类产品。

表6显示高热量(1.5kcal/mL)RTDS的主要成分和营养价值。

表7显示非常高热量(2.5kcal/mL)RDTS的主要成分和营养价值。

实例9:高热量、不含PERT的棒

高热量棒可以如下制备:向主混合容器中加入DI水(最终体积的约60%),并将水加热至约60℃。在水解蛋白中混合,然后加入龙舌兰糖浆。在单独的容器中,用手动混合机将温热(60℃)的EMO和卵磷脂组合。当卵磷脂溶解时,向水相中加入EMO/卵磷脂并混合。添加额外的水以达到最终重量(体积)。

表8显示高热量不含PERT的棒的主要成分和营养价值。

生产棒基料后,可在烘烤之前添加各种调味剂、掩蔽剂和阻断剂,以生产独特的产品,诸如巧克力、香草等。

实例10:即饮奶昔的制造

向主混合容器中加入DI水,并将水加热至约60+/-2℃。一旦水达到60℃后,在低搅拌条件下缓慢加入糖浆(诸如龙舌兰或枣糖浆)。混合成溶液。称出各种干质量材料(维生素/矿物质混合物和水解蛋白),并在单独的容器中混合。将干成分充分混合。在低搅拌下进行扫频搅拌的条件下,缓慢将混合的干成分直接加入主混合容器中。在单独的容器中称出EMO。将EMO加热至60+/-2℃。将向日葵卵磷脂缓慢加入到温热的EMO中,并在适度搅拌下混合(根据需要),直到向日葵卵磷脂完全混合到溶液中。将EMO/向日葵卵磷脂混合物缓慢加入主混合容器中。加入蒸馏水,使体积增加至总流体质量的95%,使温度返回到70+/-2℃。缓慢向主混合容器中加入调味剂和颜料。向主混合容器中缓慢加入稳定剂(诸如金合欢胶)。混合溶液20分钟(以增加粘度)。将溶液的温度保持在70+/-2℃。将QS溶液用蒸馏水调至最终体积。使材料通过压降均质机,以生产稳定的乳液。对材料进行巴氏消毒或灭菌。将材料冷却至室温。将产品填充到包装中。

实例11:从杏仁油中除去MCPD

如实例6所述制备酶修饰杏仁油。

将酶修饰杏仁油的样本送往第三方实验室(Eurofins Eurofins ScientificInc.Nutrition Analysis Center 2200Rittenhouse Street,Suite 150Des Moines,IA50321),使用下述标准方法进行分析。

AOCS官方方法Cd 29b-13(2017年修订)-通过碱性酯交换和GC/MS得到的食用油和脂肪中的2-和3-MCPD脂肪酸酯和缩水甘油脂肪酸酯(2-and 3-MCPD Fatty Acid Estersand Glycidol Fatty Acid Esters in Edible Oils and Fats by AlkalineTransesterification and GC/MS)。本方法用于确定食用油和脂肪中2-氯丙烷-1,3-二醇(2-MCPD)、3-氯丙烷-1,2-二醇(3-MCPD)和缩水甘油的脂肪酸酯。也参见AOCS官方方法Cd29a-13或Cd 29c-13。结合的缩水甘油是被碱催化的醇解作用裂解的所有缩水甘油衍生物的总和。以毫克/千克(mg/kg)报告结合的缩水甘油含量。结合的2-MCPD是被碱催化的醇解作用裂解的所有2-MCPD-衍生物的总和。以毫克/千克(mg/kg)报告结合的2-MCPD含量。结合的3-MCPD是被碱催化的醇解作用裂解的所有3-MCPD-衍生物的总和。以毫克/千克(mg/kg)报告结合的3-MCPD含量。此方法描述平行确定油和脂肪中以结合或游离形式存在的缩水甘油以及2-MCPD和3-MCPD的程序。所述方法基于碱催化的酯裂解,将释放的缩水甘油转化为一溴丙二醇(MBPD)和衍生的游离二醇(MCPD和MBPD)以及苯基硼酸(PBA)。虽然游离MCPD和缩水甘油仅在脂肪和油中以低至可忽略不计的量存在,但显著的含量将会使结合分析物的确定成比例增加。本方法适用于固体和液体脂肪和油。

结果。起始油中的2-MCPD(游离和结合)和3-MCPD(游离和结合)总量分别为0.65mg/kg和1.17mg/kg。酶修饰杏仁油(实例6)的总2-MCPD(游离和结合)和3-MCPD(游离和结合)均为<0.10mg/kg,低于测量MCPD的测定的定量限(0.10mg/kg)。因此,起始杏仁油和酶修饰杏仁油中检测到的总MCPD的和分别为1.82mg/kg和<0.10mg/kg。

因此,本发明很适合于实现上述目的和优点以及其中固有的那些。虽然本领域技术人员可以做出许多改变,但是这些改变包含在部分由所附权利要求书说明的本发明的精神内。

实例12:起始油和MAG油中的脂肪酸谱

根据本公开的制造方法加工MCT油、卡诺拉油和杏仁油。如下表9所示,在起始油和MAG油中均测量了每种油的脂肪酸谱。

衍生化为脂肪酸甲酯后,分析脂肪酸,并与标准品进行比较。为了进行衍生化,将一份样本(500μl)加入一个5-ml的反应管中,反应管中含有2ml三氟化硼溶液(在甲醇中为12%)、20μl二甲氧基丙烷和100μl十三烷酸内标溶液(10mg/ml)。使反应管涡流,并且在60℃的加热块中孵育30分钟。将反应管从加热块上取下,并让其冷却15分钟。然后,加入1ml蒸馏水以使反应淬火,然后加入1ml己烷。使反应管涡流60秒,并使相分离3分钟。将顶部(疏水)相移至含约50mg硫酸钠(无水)的1.5-ml管中。涡旋60秒后,将1.5-ml管离心分离,并将约500μl澄清、干燥的疏水相转移至气相色谱样本瓶中。使用具有火焰离子化检测器的Agilent 7890A气相色谱仪和Agilent Openlab CDS Chemstation软件分析样本。GC柱:Omegawax 100(15m x 0.1mm x 0.1um)柱。通过内部标准参考将结果换算为重量%。

如图所示,起始油和MAG油含有基本上相同的脂肪酸谱。

使用杏仁油和卡诺拉油进行单独实验,以获得表10中的数据,这些数据显示油酸、亚油酸和亚麻酸的相同结果。

这些结果表明,本公开的制造工艺能够保存MAG油中起始油的脂肪酸谱。此结果不同于常规“蒸馏”油,基于蒸馏油的功能用途,常规“蒸馏”油的脂肪酸谱与起始油显著不同。

这些结果还表明,本公开的加工油可用于通过提供亚油酸和亚麻酸来提供“完全营养”。对于含有高EPA和DHA的油,诸如鱼油和海藻油,预计也将得到类似的结果,以提供完整的营养制剂。

实例13:EMO过程保存原始油中发现的必需脂肪酸

如实例1所述生产卡诺拉EMO。如实例2所述测量脂肪酸。脂肪酸分析的结果示于图11中。卡诺拉油和由卡诺拉油生产的EMO保持脂肪酸谱的完整性,且包含必需脂肪酸亚油酸和亚麻酸。橄榄油、向日葵油和杏仁油中的EMO也获得了类似结果。商业“单硬脂酸甘油酯”(Profood Products,Naperville,IL)含有很少或不含不饱和脂肪酸,而“Capmul GMO 50”(Abitec Corporation,Janesville,WI)主要含有单饱和脂肪酸油酸,很少亚油酸,且实际上不含亚麻酸或二十碳烯(C20:1)脂肪酸。

实例14:保存有益化合物

植物油含有有助于油的味道和健康益处的微量的许多脂质、类固醇、酯和酚类化合物。这些化合物中的许多在EMO过程中得到保存或富集。这在图12A-12B中示出。如实例1所述制备卡诺拉EMO。脂质样本用3-皮考基酰胺衍生化,用于LC/MS/MS分析。简言之,将150μL的标准品(0.1-100μg/mL)和20μL的内标混合物混合,并在氮气下干燥。向干燥的残留物中加入200μL草酰氯(在二氯甲烷中为2M),且将混合物在65℃下在加热块上孵育5min,然后在氮气下干燥。向残留物中加入150μL的3-皮考基胺(在乙腈中为1%,v/v),形成3-皮考基酰胺(FA-PA)。将混合物在室温下孵育5min,然后在氮气下干燥,得到衍生化的FA。将干燥的FA衍生物溶解在1000μL乙醇中,并在LC-MS分析前用乙醇进一步稀释至10倍。LC-MS分析处于电离模式:阳性(总脂肪酸和脂质组学)和阴性(脂质组学)电离。用于分析的软件:ThermoScientific Freestyle&LipidSearch。Orbitrap融合方法:数据相关采集MS2(总脂肪酸)和MS。

保留或增强的化合物包含:鞘糖脂(例如,神经酰胺磷酸酯)、糖基甘油脂质(例如,单半乳糖基甘油)、磷脂酰甲醇、类固醇(例如,谷甾醇酯)、中性脂质(例如,菜油甾醇酯)、鞘脂、磷脂酰甘油、蜡酯和鞘磷脂。辅酶也被发现是增强的。

这些化合物不会保留在商业(蒸馏)单甘油酯产品中。

在第一实施例中,食物产品包括油,并且具有约25kcal至约1,000kcal的总热量含量,其中约5%至约75%的总热量含量源自所述油,并且其中基于油的总重量,油包括小于10重量%的三酰基甘油酯(TAG),其中油基本上不含一氯丙二醇(MCPD)。

在第一实施例的一个方面,基于油的总重量,油包括大于50重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第一实施例的另一方面,基于油的总重量,油包括大于60重量%的MAG。

在第一实施例的另一方面,基于油的总重量,油包括大于70重量%的MAG。

在第一实施例的另一方面,基于油的总重量,油包括大于80重量%的MAG。

在第一实施例的另一方面,基于油的总重量,油包括大于90重量%的MAG。

在第一实施例的另一方面或第一实施例的任何前述方面,总热量含量的约10%至约60%源自所述油。

在第一实施例的另一方面或第一实施例的任何前述方面,总热量含量的约20%至约50%源自所述油。

在第一实施例的另一方面或第一实施例的任何前述方面,总热量含量的约25%至约45%源自所述油。

在第一实施例的另一方面或第一实施例的任何前述方面,总热量含量的约30%至约40%源自所述油。

在第一实施例的另一方面或第一实施例的任何前述方面,食物产品进一步包括碳水化合物源。

在第一实施例的另一方面或第一实施例的任何前述方面,食物产品进一步包括碳水化合物源,并且所述碳水化合物源包括水果或龙舌兰糖浆。

在第一实施例的另一方面或第一实施例的任何前述方面,食物产品进一步包括碳水化合物源,并且所述碳水化合物源包括单糖。

在第一实施例的另一方面或第一实施例的任何前述方面,食物产品进一步包括碳水化合物源,并且约20%至约50%的热量源自碳水化合物源。

在第一实施例的另一方面或第一实施例的任何前述方面,食物产品包括碳水化合物源并且进一步包括蛋白质源。

在第一实施例的另一方面或第一实施例的任何前述方面,所述食物产品包括碳水化合物源并且进一步包括蛋白质源,并且约10%至约50%的热量源自蛋白质源。

在第一实施例的另一方面或第一实施例的任何前述方面,所述食物产品包括碳水化合物源并且进一步包括蛋白质源,并且所述蛋白质源包括水解或部分水解的蛋白质。

在第一实施例的另一方面或第一实施例的任何前述方面,所述食物产品包括碳水化合物源并且进一步包括蛋白质源,并且所述蛋白质源包括水解的或部分水解的蛋白质,其中所述水解的蛋白质选自水解的豌豆蛋白和基于乳清的水解产物。

在第一实施例的另一方面或第一实施例的任何前述方面,食物产品进一步包括蛋白质源。

在第一实施例的另一方面或第一实施例的任何前述方面,食物产品进一步包括蛋白质源,并且约10%至约50%的热量源自蛋白质源。

在第一实施例的另一方面或第一实施例的任何前述方面,所述食物产品进一步包括蛋白质源,其中所述蛋白质源包括水解或部分水解的蛋白质。

在第一实施例的另一方面或第一实施例的任何前述方面,所述食物产品进一步包括蛋白质源,其中所述蛋白质源包括水解的或部分水解的蛋白质,并且其中所述水解的蛋白质选自水解的豌豆蛋白和基于乳清的水解产物。

在第一实施例的另一方面或第一实施例的任何前述方面,油是源自油源的加工油。

在第一实施例的另一方面或第一实施例的任何前述方面,油是源自油源的加工油,其中加工油包括源自油源并天然存在于油源中的非油成分,使得非油成分不被添加到加工油中。

在第一实施例的另一方面或第一实施例的任何前述方面,油是源自油源的加工油,其中加工油包括源自油源并天然存在于油源中的非油成分,使得非油成分不被添加到加工油中,并且其中非油成分选自抗氧化剂、维生素及其混合物。

在第一实施例的另一方面或第一实施例的任何前述方面,油是源自油源的加工油,其中加工油包括源自油源并天然存在于油源中的非油成分,使得非油成分不被添加到加工油中,其中非油成分选自抗氧化剂、维生素及其混合物,并且其中抗氧化剂是生育酚。

在第一实施例的另一方面或第一实施例的任何前述方面,油是源自油源的加工油,其中加工油包括源自油源并天然存在于油源中的非油成分,使得非油成分不被添加到加工油中,其中非油成分选自抗氧化剂、维生素及其混合物,其中所述抗氧化剂是生育酚,并且其中所述生育酚选自α-生育酚、β-生育酚、δ-生育酚、γ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、δ-生育三烯酚和γ-生育三烯酚。

在第二实施例中,一种食物产品包括加工油、碳水化合物源和蛋白质源,并且具有约25克至约500克的总重量和约1kcal/克至约5kcal/克的热量密度,其中加工油构成总热量含量的约10%至约50%,并且其中所述加工油具有基于所述加工油的总重量等于或大于40重量%的MAG含量和基于所述加工油的总重量等于或小于10重量%的TAG含量,并且其中所述加工油具有小于0.10mg/kg的MCPD。

在第三实施例中,一种产品包括源自油源的加工油,其中加工油包括等于或大于加工油总重量的40重量%的MAG含量,其中加工油不含TAG或包括等于或小于加工油总重量的10重量%的TAG含量,并且其中所述加工油包括源自油源并天然存在于油源中的非油成分,使得所述非油成分不被添加到加工油中,其中所述油源包括约1.00mg/kg至约12.00mg/kg的MCPD,并且其中所述加工油包括小于0.100mg/kg的MCPD。

在第三实施例的一个方面,所述油源来自选自植物、动物、藻类或鱼的来源。

在第三实施例的另一方面,所述油源是植物来源的。

在第三实施例的另一方面,所述油源选自由橄榄油、向日葵油、玉米油、杏仁油、菜籽油、棕榈油、大豆油、亚麻籽油及其混合物组成的群组。

在第三实施例的另一方面或第三实施例的任何前述方面,非油成分选自由抗氧化剂、维生素及其混合物组成的群组。

在第三实施例的另一方面或第三实施例的任何前述方面,非油成分选自由抗氧化剂、维生素及其混合物组成的群组,且抗氧化剂是生育酚。

在第三实施例的另一方面或第三实施例的任何前述方面,非油成分选自由抗氧化剂、维生素及其混合物组成的群组,抗氧化剂是生育酚,且生育酚选自由α-生育酚、β-生育酚、δ-生育酚、γ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、δ-生育三烯酚和γ-生育三烯酚组成的群组。

在第三实施例的另一方面或第三实施例的任何前述方面,基于加工油的总重量,加工油包括约50重量%至约95重量%的MAG含量。

在第三实施例的另一方面或第三实施例的任何前述方面,基于加工油的总重量,加工油包括约50重量%至约95重量%的MAG含量,并且基于加工油的总重量,加工油包括约5重量%至约0.5重量%的TAG含量。

在第三实施例的另一方面或第三实施例的任何前述方面,基于加工油的总重量,加工油包括约5重量%至约0.5重量%的TAG含量。

在第四实施例中,一种制作富含单酰基甘油的油的方法,包括:将包括三酰基甘油(TAG)和约1.00mg/kg至约12.00mg/kg的MCPD的起始油、缓冲溶液和能够将所述TAG水解为游离脂肪酸(FFA)的第一酶混合以产生第一反应混合物,其中所述TAG的量大于起始油总重量的50重量%;使所述第一反应混合物在足以使所述第一酶水解所述TAG的条件下反应第一时间段以产生水相和包括FFA的第一脂质反应产物;使所述第一脂质反应产物中的所述第一酶失活;通过将其从水相中除去来收集所述第一脂质反应产物;将所述第一脂质反应产物与食物级甘油和能够酯化FFA的第二酶混合以形成第二反应混合物;使所述第二反应混合物反应第二时间段以产生包括脂质油相和甘油相的第二脂质反应产物;使所述第二脂质反应产物中的所述第二酶失活;向反应产物中加入盐并从所述甘油相中分离脂质油相;以及收集所述脂质油相,其中所述脂质油相基本上不含MCPD。

在第四实施例的一个方面,起始油是源自植物、动物或鱼的油。

在第四实施例的另一方面,起始油是植物油或植物油的混合物。

在第四实施例的另一方面,起始油是选自由橄榄油、向日葵油、玉米油、杏仁油、菜籽油、棕榈油、大豆油、亚麻籽油及其混合物组成的群组的植物油。

在第四实施例的另一方面,所述第一酶是脂肪酶。

在第四实施例的另一方面,所述第一酶是脂肪酶AY。

在第四实施例的另一方面,所述缓冲溶液是柠檬酸钠溶液。

在第四实施例的另一方面,所述第一时间段是足以水解所述起始油中至少94%的TAG的时间段。

在第四实施例的另一方面,所述第一时间段在约14小时至约24小时之间。

在第四实施例的另一方面,使所述反应混合物在足以使所述第一酶水解所述TAG的条件下反应的所述步骤在约30℃至约35℃之间的温度下进行。

在第四实施例的另一方面,混合包括三酰基甘油(TAG)、缓冲溶液和能够将所述TAG水解为游离脂肪酸(FFA)的第一酶的起始油并使所述反应混合物在足以使所述第一酶将所述TAG水解为FFA的条件下反应的所述步骤在氮气气氛下进行。

在第四实施例的另一方面,所述第二酶是脂肪酶。

在第四实施例的另一方面,所述第二种酶是脂肪酶G。

在第四实施例的另一方面,所述第二时间段是足以导致脂质油相中MAG富集约60%至95%的时间段。

在第四实施例的另一方面,所述第二时间段在约24小时至约72小时之间。

在第四实施例的另一方面,使所述第二反应混合物反应第二时间段以产生脂质油相和甘油相的所述步骤在约17℃至23℃之间的温度下进行。

在第四实施例的另一方面或第四实施例的任何前述方面,所述方法进一步包括通过施加足以从第二脂质反应产物中除去至少一部分水的第三时间段的真空来干燥所述第二脂质反应产物。

在第四实施例的另一方面或第四实施例的任何前述方面,所述方法进一步包括通过施加足以从第二脂质反应产物中除去至少一部分水的第三时间段的真空来干燥所述第二脂质反应产物,其中所述干燥所述第二脂质反应产物的步骤在20℃-30℃之间的温度下进行。

在第四实施例的另一方面或第四实施例的任何前述方面,所述方法进一步包括通过施加足以从第二脂质反应产物中除去至少一部分水的第三时间段的真空来干燥所述第二脂质反应产物,其中所述干燥步骤在整个第二时间段内进行。

在第四实施例的另一方面或第四实施例的任何前述方面,通过加热所述第二脂质反应产物来进行使所述第二酶失活的所述步骤。

在第四实施例的另一方面或第四实施例的任何前述方面,通过加热所述第二脂质反应产物来进行使所述第二酶失活的所述步骤,其中所述加热在至少70℃的温度下进行至少1小时。

在第四实施例的另一方面或第四实施例的任何前述方面,将所述脂质油相与所述甘油相分离的所述步骤包括向所述第二脂质反应产物中加入氯化钠。

在第四实施例的另一方面或第四实施例的任何前述方面,将所述脂质油相与所述甘油相分离的所述步骤包括向所述第二脂质反应产物中加入氯化钠,其中氯化钠的最终浓度包括至多0.3重量%的氯化钠。

在第四实施例的另一方面或第四实施例的任何前述方面,所述方法进一步包括在混合所述第一脂质反应产物和食物级甘油以及能够酯化FFA和甘油的第二酶之前,在所述第一脂质反应产物上重建氮气气氛。

在第四实施例的另一方面或第四实施例的任何前述方面,所述方法进一步包括在收集所述脂质油相之后将生育酚加入到所述脂质油相中。

在第四实施例的另一方面或第四实施例的任何前述方面,基于脂质油相的总重量,脂质油相包括约40重量%至约99重量%的量的MAG,并且其中基于脂质油相的总重量,脂质油相不含TAG或包括约0.1重量%至约10重量%的量的TAG。

在第五实施例中,一种加工油包括油酸单甘油酯(MOG)并具有总脂肪酸含量,其中所述MOG占加工油总脂肪酸含量的约5重量%至约75重量%。

在第五实施例的一个方面,基于加工油的总重量,加工油包括小于10重量%的三酰基甘油酯(TAG)。

在第五实施例的另一方面,基于加工油的总重量,加工油包括大于50重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第五实施例的另一方面,基于加工油的总重量,加工油包括大于60重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第五实施例的另一方面,基于加工油的总重量,加工油包括大于70重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第五实施例的另一方面,基于加工油的总重量,加工油包括大于80重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第五实施例的另一方面,基于加工油的总重量,加工油包括大于90重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,加工油是源自油源的加工油。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,加工油是源自油源的加工油,并且加工油包括源自油源并天然存在于油源中的非油成分,使得非油成分不被添加到加工油中。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,加工油是源自油源的加工油,并且加工油包括源自油源并天然存在于油源中的非油成分,使得非油成分不被添加到加工油中,其中非油成分选自抗氧化剂、维生素及其混合物。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面中,加工油是源自油源的加工油,并且加工油包括源自油源并天然存在于油源中的非油成分,使得非油成分不被添加到加工油中,其中非油成分选自抗氧化剂、维生素及其混合物,并且其中抗氧化剂是生育酚。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,加工油是源自油源的加工油,并且加工油包括源自油源并天然存在于油源中的非油成分,使得非油成分不被添加到加工油中,其中非油成分选自抗氧化剂、维生素及其混合物,其中所述抗氧化剂是生育酚,并且其中所述生育酚选自α-生育酚、β-生育酚、δ-生育酚、γ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、δ-生育三烯酚和γ-生育三烯酚。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,加工油基本上不含一氯丙二醇(MCPD)。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,加工油具有小于0.10mg/kg的一氯丙二醇(MCPD)。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,所述油源来自选自植物、动物、藻类或鱼的来源。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,所述油源是植物来源的。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,所述油源选自由红花油、葡萄油、水飞蓟油、麻油、向日葵油、小麦胚芽油、南瓜籽油、芝麻油、米糠油、杏仁油、菜籽油、花生油、橄榄油和椰子油组成的群组。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,基于加工油的总重量,所述加工油包括约50重量%至约95重量%的MAG含量。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,基于加工油的总重量,所述加工油包括约5重量%至约0.5重量%的TAG含量。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,所述加工油中的MOG包括MOG总量的至少50重量%的1-油烯基单甘油酯。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,所述加工油中的MOG包括MOG总量的至少60重量%的1-油烯基单甘油酯。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,所述加工油中的MOG包括MOG总量的至少70重量%的1-油烯基单甘油酯。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,所述加工油中的MOG包括MOG总量的至少80重量%的1-油烯基单甘油酯。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,加工油进一步包括亚油酸,其中所述亚油酸在所述加工油中以占加工油总脂肪酸含量的约1.5重量%至约90重量%的量存在。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,加工油进一步包括亚油酸,其中所述亚油酸在所述加工油中以占加工油总脂肪酸含量的约10重量%至约90重量%的量存在。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,加工油进一步包括亚油酸,其中所述亚油酸在所述加工油中以占加工油总脂肪酸含量的约20重量%至约90重量%的量存在。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,加工油进一步包括亚油酸,其中所述亚油酸在所述加工油中以占加工油总脂肪酸含量的约10重量%至约25重量%的量存在。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,加工油进一步包括亚麻酸,其中所述亚麻酸在所述加工油中以占加工油总脂肪酸含量的约0.01重量%至约2重量%的量存在。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,其中所述加工油中油酸和亚油酸的量之间的比率在约0.01至约5之间。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,其中所述加工油中油酸和亚油酸的量之间的比率在约1至约4之间。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,其中所述加工油中油酸和亚油酸的量之间的比率在约3至约4之间。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,其中所述加工油中油酸和亚麻酸的量之间的比率在约1至约100之间。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,其中所述加工油中油酸和亚麻酸的量之间的比率在约10至100之间。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,其中所述加工油中油酸和亚麻酸的量之间的比率在约10至30之间。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,其中所述加工油的脂肪酸谱与生产加工油的预加工油的脂肪酸谱基本上相同。

在前述方面的一个方面,其中所述脂肪酸谱包括油酸、亚油酸和亚麻酸。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,其中加工油中油酸、亚油酸和亚麻酸的量分别在生产加工油的预加工油中油酸、亚油酸和亚麻酸的量的约10%以内。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,其中加工油中油酸、亚油酸和亚麻酸的量分别在生产加工油的预加工油中油酸、亚油酸和亚麻酸的量的约1%以内。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,其中所述加工油包括相对于生产加工油的预加工油中的TAG的量的三倍量的MAG。

在第五实施例的另一方面或第五实施例的任何前述方面,其中加工油包括与生产加工油的预加工油中油酸的量大致相同的量的油酸单甘油酯形式的油酸。

在第六实施例中,一种加工油具有包括油酸、亚油酸和亚麻酸的脂肪酸谱,其中加工油中油酸、亚油酸和亚麻酸的量分别在生产加工油的预加工油中油酸、亚油酸和亚麻酸的量的约10%以内,并且其中加工油包括基于加工油的总重量大于50重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第七实施例中,一种加工油具有包括油酸、亚油酸和亚麻酸的脂肪酸谱,其中加工油中油酸、亚油酸和亚油酸的量分别在生产加工油的预加工油中油酸、亚油酸和亚麻酸的量的约1%以内,并且其中加工油包括基于加工油的总重量大于50重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第八实施例中,一种加工油包括油酸和亚油酸,其中加工油中油酸与亚油酸的比率在约0.01至约5之间,并且其中加工油包括基于加工油的总重量大于50重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第八实施例的一个方面,加工油中油酸与亚油酸的比率在约1至约4之间。

在第八实施例的另一方面,加工油中油酸与亚油酸的比率在约3至约4之间。

在第八实施例的另一方面或第八实施例的任何前述方面,加工油进一步包括亚油酸,其中加工油中油酸与亚麻酸的比率在约1至约100之间。

在第八实施例的另一方面或第八实施例的任何前述方面,加工油进一步包括亚油酸,其中加工油中油酸与亚麻酸的比率在约10至约100之间。

在第八实施例的另一方面或第八实施例的任何前述方面,加工油进一步包括亚油酸,其中加工油中油酸与亚麻酸的比率在约10至约30之间。

在第九实施例中,一种加工油包括油酸和亚麻酸,其中加工油中油酸与亚麻酸的比率在约1至约100之间,并且其中加工油包括基于加工油的总重量大于50重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第十实施例中,一种加工油包括油酸和亚麻酸,其中加工油中油酸与亚麻酸的比率在约10至约100之间,并且其中加工油包括基于加工油的总重量大于50重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第十一实施例中,一种加工油包括油酸和亚麻酸,其中加工油中油酸与亚麻酸的比率在约10至约30之间,并且其中加工油包括基于加工油的总重量大于50重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第九、第十或第十一实施例的一个方面,加工油进一步包括亚油酸,其中加工油中油酸与亚油酸的比率在约0.01至约5之间。

在第九、第十或第十一实施例的一个方面,加工油进一步包括亚油酸,其中加工油中油酸与亚油酸的比率在约1至约4之间。

在第九、第十或第十一实施例的一个方面,加工油进一步包括亚油酸,其中加工油中油酸与亚油酸的比率在约3至约4之间。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,至少一部分所述油酸以油酸单甘油酯(MOG)的形式存在。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,至少一部分所述油酸以油酸单甘油酯(MOG)的形式存在,并且是占MOG总量的至少50重量%的1-油烯基单甘油酯。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,至少一部分所述油酸以油酸单甘油酯(MOG)的形式存在,并且是占MOG总量的至少60重量%的1-油烯基单甘油酯。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,至少一部分所述油酸以油酸单甘油酯(MOG)的形式存在,并且是占MOG总量的至少70重量%的1-油烯基单甘油酯。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,至少一部分所述油酸以油酸单甘油酯(MOG)的形式存在,并且是MOG总量的至少80重量%的1-油烯基单甘油酯。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,基于加工油的总重量,加工油包括小于10重量%的三酰基甘油酯(TAG)。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,基于加工油的总重量,加工油包括大于50重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,基于加工油的总重量,加工油包括大于60重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,基于加工油的总重量,加工油包括大于70重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,基于加工油的总重量,加工油包括大于80重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,基于加工油的总重量,加工油包括大于90重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,加工油源自油源。

在前述方面的一个方面,加工油包括源自油源并天然存在于油源中的非油成分,使得非油成分不被添加到加工油中。

在前述方面的一个方面,非油成分选自抗氧化剂、维生素及其混合物。

在前述方面的一个方面,所述抗氧化剂是生育酚。

在前述方面的一个方面,所述生育酚选自α-生育酚、β-生育酚、δ-生育酚、γ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、δ-生育三烯酚和γ-生育三烯酚。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,加工油基本上不含一氯丙二醇(MCPD)。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,加工油具有小于0.10mg/kg的一氯丙二醇(MCPD)。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,油源来自选自植物、动物、藻类或鱼的来源。

在前述方面的一个方面,所述油源是植物来源的。

在前述方面的一个方面,所述油源选自由红花油、葡萄油、水飞蓟油、麻油、向日葵油、小麦胚芽油、南瓜籽油、芝麻油、米糠油、杏仁油、菜籽油、花生油、橄榄油和椰子油组成的群组。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,基于加工油的总重量,所述加工油包括约50重量%至约95重量%的MAG含量。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,基于加工油的总重量,所述加工油包括约5重量%至约0.5重量%的TAG含量。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,所述加工油的脂肪酸谱与生产加工油的预加工油的脂肪酸谱基本上相同。

在前述方面的一个方面,所述脂肪酸谱包含油酸、亚油酸和亚麻酸。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,加工油中油酸、亚油酸和亚麻酸的量分别在生产加工油的预加工油中油酸、亚油酸和亚麻酸的量的约10%以内。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,加工油中油酸、亚油酸和亚麻酸的量分别在生产加工油的预加工油中油酸、亚油酸和亚麻酸的量的约1%以内。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,所述加工油包括相对于生产加工油的预加工油中的TAG的量的三倍量的MAG。

在第八、第九、第十或第十一实施例的一个方面以及第八、第九、第十或第十一实施例的任何前述方面,加工油包括与生产加工油的预加工油中油酸的量大致相同的量的油酸单甘油酯形式的油酸。

在第十二实施例中,加工油包括油酸和亚油酸并且具有总脂肪酸含量,其中所述亚油酸以加工油总脂肪酸含量的约10重量%至约90重量%的量存在,并且其中加工油包括基于加工油的总重量大于50重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第十二实施例的一个方面,所述亚油酸以占加工油总脂肪酸含量的约20重量%至约90重量%的量存在。

在第十二实施例的另一个方面,所述亚油酸以占加工油总脂肪酸含量的约10重量%至约25重量%的量存在。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,加工油进一步包括亚麻酸,其中所述亚麻酸以占加工油总脂肪酸含量的约0.01重量%至约2重量%的量存在。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,加工油中油酸与亚油酸的比率在约0.01至约5之间。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,加工油中油酸与亚油酸的比率在约1至约4之间。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,加工油中油酸与亚油酸的比率在约3至约4之间。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,加工油中油酸与亚麻酸的比率在约1至约100之间。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,加工油中油酸与亚麻酸的比率在约10至约100之间。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,加工油中油酸与亚麻酸的比率在约10至约30之间。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,其中至少一部分所述油酸以油酸单甘油酯(MOG)的形式存在。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,加工油中的MOG包括MOG总量的至少50重量%的1-油烯基单甘油酯。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,加工油中的MOG包括MOG总量的至少60重量%的1-油烯基单甘油酯。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,所述加工油中的MOG包括MOG总量的至少70重量%的1-油烯基单甘油酯。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,加工油中的MOG包括MOG总量的至少80重量%的1-油烯基单甘油酯。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,基于加工油的总重量,加工油包括小于10重量%的三酰基甘油酯(TAG)。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,基于加工油的总重量,加工油包括大于50重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,基于加工油的总重量,加工油包括大于60重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,基于加工油的总重量,加工油包括大于70重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,基于加工油的总重量,加工油包括大于80重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,基于加工油的总重量,加工油包括大于90重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,加工油是源自油源的加工油。

在前述方面的一个方面,加工油包括源自油源并天然存在于油源中的非油成分,使得非油成分不被添加到加工油中。

在前述方面的一个方面,非油成分选自抗氧化剂、维生素及其混合物。

在前述方面的一个方面,所述抗氧化剂是生育酚。

在前述方面的一个方面,所述生育酚选自α-生育酚、β-生育酚、δ-生育酚、γ-生育酚、α-生育三烯酚、β-生育三烯酚、δ-生育三烯酚和γ-生育三烯酚。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,加工油基本上不含一氯丙二醇(MCPD)。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,加工油具有小于0.10mg/kg的一氯丙二醇(MCPD)。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,所述油源来自选自植物、动物、藻类或鱼的来源。

在前述方面的一个方面,所述油源是植物来源的。

在前述方面的一个方面,所述油源选自由红花油、葡萄油、水飞蓟油、麻油、向日葵油、小麦胚芽油、南瓜籽油、芝麻油、米糠油、杏仁油、菜籽油、花生油、橄榄油和椰子油组成的群组。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,基于加工油的总重量,所述加工油包括约50重量%至约95重量%的MAG含量。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,基于加工油的总重量,所述加工油包括约5重量%至约0.5重量%的TAG含量。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,所述加工油的脂肪酸谱与生产加工油的预加工油的脂肪酸谱基本上相同。

在前述方面的一个方面,所述脂肪酸谱包括油酸、亚油酸和亚麻酸。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,加工油中油酸、亚油酸和亚麻酸的量分别在生产加工油的预加工油中油酸、亚油酸和亚麻酸的量的约10%以内。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,加工油中油酸、亚油酸和亚麻酸的量分别在生产加工油的预加工油中油酸、亚油酸和亚麻酸的量的约1%以内。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,所述加工油包括相对于生产加工油的预加工油中的TAG的量的大致相同量的MAG。

在第十二实施例的一个方面或第十二实施例的任何前述方面,加工油包括与生产加工油的预加工油中油酸的量大致相同的量的油酸单甘油酯形式的油酸。

在第十三实施例中,一种加工油具有包括油酸、亚油酸和亚麻酸的脂肪酸谱,其中加工油中油酸、亚油酸和亚麻酸的量分别在生产加工油的预加工油中油酸、亚油酸和亚麻酸的量的约10%以内,并且其中加工油包括基于加工油的总重量大于50重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第十四实施例中,一种加工油具有包括油酸、亚油酸和亚麻酸的脂肪酸谱,其中加工油中油酸、亚油酸和亚油酸的量分别在生产加工油的预加工油中油酸、亚油酸和亚麻酸的量的约1%以内,并且其中加工油包括基于加工油的总重量大于50重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第十五实施例中,一种用于促进有需要的受试者中的葡萄糖稳态的方法,包括:向所述受试者施用包括加工油的组合物。

在第十六实施例中,一种用于治疗有需要的受试者中的II型糖尿病的方法,包括:向所述受试者施用包括加工油的组合物。

在第十七实施例中,一种用于促进有需要的受试者中的葡萄糖稳态的方法,包括:向所述受试者施用包括加工油的组合物,所述加工油包括油酸单甘油酯(MOG),其中至少50重量%的所述MOG是1-油烯基单甘油酯。

在第十八实施例中,一种用于治疗有需要的受试者中的糖尿病的方法,包括:向所述受试者施用包括加工油的组合物,所述加工油包括油酸单甘油酯(MOG),其中至少50重量%的所述MOG是1-油烯基单甘油酯。

在第十七或第十八实施例的一个方面,所述MOG的至少60重量%是1-油烯基单甘油酯。

在第十七或第十八实施例的另一方面,所述MOG的至少70重量%是1-油烯基单甘油酯。

在第十七或第十八实施例的另一方面,所述MOG的至少80重量%是1-油烯基单甘油酯。

在第十五、第十六、第十七或第十八实施例的一个方面或第十七或第十八实施例的任何前述方面,所述加工油是根据第五至第十四实施例中的任何一个及其任何前述方面的加工油。

在第十五、第十六、第十七或第十八实施例的一个方面或第十五、第十六、第十七或第十八实施例的任何前述方面,所述组合物是包括第一、第二或第三实施例中任一个及其任何前述方面的食物产品的加工油的食物产品。

在第十五或第十七实施例的一个方面或第十五或第十七实施例的任何前述方面,所述受试者患有影响葡萄糖稳态的病症。

在前述方面的一个方面,所述病症是胰岛素抗性或II型糖尿病。

在第五、第六或第七实施例的一个方面或第五、第六或第七实施例的任何前述方面,所述MOG占加工油的总脂肪酸含量的约10重量%至约75重量%。

在第五、第六或第七实施例的一个方面或第五、第六或第七实施例的任何前述方面,所述MOG占加工油的总脂肪酸含量的约20重量%至约75重量%。

在第五、第六或第七实施例的一个方面或第五、第六或第七实施例的任何前述方面,所述MOG占加工油的总脂肪酸含量的约30重量%至约75重量%。

在第五、第六或第七实施例的一个方面或第五、第六或第七实施例的任何前述方面,所述MOG占加工油的总脂肪酸含量的约40重量%至约75重量%。

在第五、第六或第七实施例的一个方面或第五、第六或第七实施例的任何前述方面,所述MOG占加工油的总脂肪酸含量的约50重量%至约75重量%。

在第五、第六或第七实施例的一个方面或第五、第六或第七实施例的任何前述方面,所述MOG占加工油的总脂肪酸含量的约60重量%至约75重量%。

在第八、第九、第十、第十一、第十二、第十三或第十四实施例的一个方面或第八、第九、第十、第十一、第十二、第十三或第十四实施例的任何前述方面,所述加工油包括占加工油的脂肪酸含量的5重量%至约75重量%的量的油酸单甘油酯(MOG)。

在第八、第九、第十、第十一、第十二、第十三或第十四实施例的一个方面或第八、第九、第十、第十一、第十二、第十三或第十四实施例的任何前述方面,所述加工油包括占加工油的总脂肪酸含量的约10重量%至约75重量%的量的油酸单甘油酯(MOG)。

在第八、第九、第十、第十一、第十二、第十三或第十四实施例的一个方面或第八、第九、第十、第十一、第十二、第十三或第十四实施例的任何前述方面,所述加工油包括占加工油的总脂肪酸含量的约20重量%至约75重量%的量的油酸单甘油酯(MOG)。

在第八、第九、第十、第十一、第十二、第十三或第十四实施例的一个方面或第八、第九、第十、第十一、第十二、第十三或第十四实施例的任何前述方面,所述加工油包括占加工油的总脂肪酸含量的约30重量%至约75重量%的量的油酸单甘油酯(MOG)。

在第八、第九、第十、第十一、第十二、第十三或第十四实施例的一个方面或第八、第九、第十、第十一、第十二、第十三或第十四实施例的任何前述方面,所述加工油包括占加工油的总脂肪酸含量的约40重量%至约75重量%的量的油酸单甘油酯(MOG)。

在第八、第九、第十、第十一、第十二、第十三或第十四实施例的一个方面或第八、第九、第十、第十一、第十二、第十三或第十四实施例的任何前述方面,所述加工油包括占加工油的总脂肪酸含量的约50重量%至约75重量%的量的油酸单甘油酯(MOG)。

在第八、第九、第十、第十一、第十二、第十三或第十四实施例的一个方面或第八、第九、第十、第十一、第十二、第十三或第十四实施例的任何前述方面,所述加工油包括占加工油的总脂肪酸含量的约60重量%至约75重量%的量的油酸单甘油酯(MOG)。

在第十九实施例中,一种加工油具有脂肪酸谱,其中加工油的脂肪酸谱与生产加工油的预加工油基本上相同,并且其中加工油包括基于加工油总重量大于50重量%的单酰基甘油酯(MAG)。

在第二十实施例中,一种食物产品包括第五、第六、第七、第八、第九、第十、第十一、第十二、第十三或第十四实施例中任一个或第五、第六、第七、第八、第九、第十、第十一、第十二、第十三或第十四实施例中任一前述方面的加工油。

在第二十一实施例中,一种加工油包括基于加工油总重量大于50重量%的单酰基甘油酯(MAG),并且具有总脂肪酸含量。

在第二十二实施例中,一种加工油包括基于加工油的总重量大于60重量%的单酰基甘油酯(MAG),并且具有总脂肪酸含量。

在第二十三实施例中,一种加工油包括基于加工油总重量大于70重量%的单酰基甘油酯(MAG),并且具有总脂肪酸含量。

在第二十四实施例中,一种加工油包括基于加工油总重量大于80重量%的单酰基甘油酯(MAG),并且具有总脂肪酸含量。

在第二十五实施例中,一种加工油包括基于加工油总重量大于90重量%的单酰基甘油酯(MAG),并且具有总脂肪酸含量。

在第二十一、第二十二、第二十三、第二十四或第二十五实施例的一个方面,加工油进一步包括占加工油总脂肪酸含量的约5重量%至约75重量%的量的油酸。

在第二十一、第二十二、第二十三、第二十四或第二十五实施例的另一方面,加工油进一步包括占加工油总脂肪酸含量的约10重量%至约75重量%的量的油酸。

在第二十一、第二十二、第二十三、第二十四或第二十五实施例的另一方面,加工油进一步包括占加工油总脂肪酸含量的约20重量%至约75重量%的量的油酸。

在第二十一、第二十二、第二十三、第二十四或第二十五实施例的另一方面,加工油进一步包括占加工油总脂肪酸含量的约30重量%至约75重量%的量的油酸。

在第二十一、第二十二、第二十三、第二十四或第二十五实施例的另一方面,加工油进一步包括占加工油总脂肪酸含量的约40重量%至约75重量%的量的油酸。

在第二十一、第二十二、第二十三、第二十四或第二十五实施例的另一方面,加工油进一步包括占加工油总脂肪酸含量的约50重量%至约75重量%的量的油酸。

在第二十一、第二十二、第二十三、第二十四或第二十五实施例的另一方面,加工油进一步包括占加工油总脂肪酸含量的约60重量%至约75重量%的量的油酸。

在第二十一、第二十二、第二十三、第二十四或第二十五实施例的一个方面或第二十一、第二十二、第二十三、第二十四或第二十五实施例的任何前述方面,加工油进一步包括占加工油总脂肪酸含量的约1.5重量%至约90重量%的量的亚油酸。

在第二十一、第二十二、第二十三、第二十四或第二十五实施例的一个方面或第二十一、第二十二、第二十三、第二十四或第二十五实施例的任何前述方面,加工油进一步包括占加工油总脂肪酸含量的约10重量%至约25重量%的量的亚油酸。

在第二十一、第二十二、第二十三、第二十四或第二十五实施例的一个方面或第二十一、第二十二、第二十三、第二十四或第二十五实施例的任何前述方面,加工油进一步包括占加工油总脂肪酸含量的约0.1重量%至约2重量%的量的亚麻酸。

在第二十一、第二十二、第二十三、第二十四或第二十五实施例的另一方面,加工油进一步包括油酸和亚油酸,其中油酸与亚油酸的比率在约0.01至5之间。

在第二十一、第二十二、第二十三、第二十四或第二十五实施例的另一方面,加工油进一步包括油酸和亚油酸,其中油酸与亚油酸的比率在约1至4之间。

在第二十一、第二十二、第二十三、第二十四或第二十五实施例的另一方面,加工油进一步包括油酸和亚油酸,其中油酸与亚油酸的比率在约3至4之间。

在第二十一、第二十二、第二十三、第二十四或第二十五实施例的另一方面,加工油进一步包括油酸和亚麻酸,其中油酸与亚麻酸的比率在约1至100之间。

在第二十一、第二十二、第二十三、第二十四或第二十五实施例的另一方面,加工油进一步包括油酸和亚麻酸,其中油酸与亚麻酸的比率在约10至100之间。

在第二十一、第二十二、第二十三、第二十四或第二十五实施例的另一方面,加工油进一步包括油酸和亚麻酸,其中油酸与亚麻酸的比率在约10至30之间。

出于说明和描述的目的,已经呈现了本公开的特定实施例的前述描述。选择和描述示例性实施例是为了最好地解释本公开的原理及其实际应用,从而使本领域的其他技术人员能够最好地利用本主题,并且具有各种修改的各种实施例适合于预期的特定用途。本公开中的各种实施例的不同特征和公开内容可以在本公开的范围内组合。

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