具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合具体实施方式对本发明作进一步地详细描述。

实施例1ε-聚赖氨酸(ε-PL)对橡胶树炭疽的抑制效果测定

实验方法：将PDA培养基于高压蒸汽灭菌锅中121℃灭菌20min后取出，在培养皿中分别加入不同质量浓度的ε-PL和PDA培养基充分混匀，使每个平板培养基中ε-PL溶液的浓度分别为0、50、100、200、400、600、800mg/L，备用。从用PDA培养基培养7d的橡胶树炭疽菌菌落边缘取直径为4mm的菌饼，将菌饼分别接种于平板培养基正中央，每个平板接种一个菌饼，菌丝面朝下，28℃培养箱中培养7d。每组重复4次。其中，ε-PL溶液浓度为0的为对照组，其他为试验组。

实验结束后，测量各组菌落直径D_i，并计算抑制率ω_i。进而以ε-PL浓度的对数值作为横坐标，抑制率为纵坐标，计算ε-PL对橡胶树炭疽菌菌丝体生长的毒力方程和半最大效应浓度EC₅₀。

其中，抑制率由下述公式组计算得到：

Δd_i＝D_i-d_i

其中，d_i为实验前第i组的菌落直径，D_i为实验后第i组的菌落直径，Δd_i为第i组菌落增长直径，Δd_c为对照组菌落增长直径。

实验结果：随着ε-PL浓度的升高，对橡胶树炭疽菌菌丝体生长的抑制作用逐渐增强。培养2d后，与对照组相比ε-PL处理组可以显著抑制橡胶树炭疽菌菌丝体的生长(P＜0.05)，当ε-PL的添加量≥600mg/L时，橡胶树炭疽菌基本无生长。培养7d后，对照组菌丝体生长迅速，菌落直径达到了75.53±0.15mm。经 800mg/L的ε-PL处理后，能抑制99.50％以上的菌丝体生长。ε-PL处理对橡胶树炭疽菌菌丝体生长有抑制作用，其毒力回归方程为Y＝1.5672X+1.2145， R²＝0.9964，半最大效应浓度EC₅₀为263.027mg/L。

实施例2ε-聚赖氨酸(ε-PL)与纳他霉素配合对橡胶树炭疽病菌的抑制效果测定

2.1纳他霉素对橡胶树炭疽的抑制效果测定

将PDA培养基于高压蒸汽灭菌锅中121℃灭菌20min后取出，在培养皿中分别加入不同质量浓度的纳他霉素和PDA培养基充分混匀，使每个平板培养基中纳他霉素溶液的浓度分别为0、5、10、15、20、25、30mg/L，备用。从用PDA 培养基培养7d的橡胶树炭疽菌菌落边缘取直径为4mm的菌饼，将菌饼分别接种于平板培养基正中央，每个平板接种一个菌饼，菌丝面朝下，28℃培养箱中培养7d。每组重复4次。其中，纳他霉素溶液浓度为0的为对照组，其他为试验组。

实验结束后，测量各组菌落直径D_i，并计算抑制率ω_i。进而以纳他霉素浓度的对数值作为横坐标，抑制率为纵坐标，计算纳他霉素对橡胶树炭疽菌菌丝体生长的毒力方程和半最大效应浓度EC₅₀。

其中，抑制率由下述公式组计算得到：

Δd_i＝D_i-d_i

其中，d_i为实验前第i组的菌落直径，D_i为实验后第i组的菌落直径，Δd_i为第i组菌落增长直径，Δd_c为对照组菌落增长直径。

实验结果：随着纳他霉素浓度的升高，对橡胶树炭疽菌菌丝体生长的抑制作用逐渐增强。培养2d后，与对照组相比纳他霉素处理组可以显著抑制橡胶树炭疽菌菌丝体的生长(P＜0.05)，当纳他霉素的添加量≥25mg/L时，橡胶树炭疽菌基本无生长。培养7d后，对照组菌丝体生长迅速，菌落直径达到了85.67± 0.13mm。经30mg/L的纳他霉素处理后，能抑制99.50％以上的菌丝体生长。纳他霉素处理对橡胶树炭疽菌菌丝体生长有抑制作用，其毒力回归方程为 Y＝4.8764X+0.1438，R²＝0.9872，半最大效应浓度EC₅₀为9.91mg/L。

2.2ε-聚赖氨酸(ε-PL)与纳他霉素配合橡胶树炭疽的抑制效果测定

实验方法：分别设定以下八种配方：

混剂A、ε－聚赖氨酸：纳他霉素＝6:4

混剂B、ε－聚赖氨酸：纳他霉素＝6:3

混剂C、ε－聚赖氨酸：纳他霉素＝6:2

混剂D、ε－聚赖氨酸：纳他霉素＝6:1

混剂E、ε－聚赖氨酸：纳他霉素＝1:6

混剂F、ε－聚赖氨酸：纳他霉素＝2:6

混剂G、ε－聚赖氨酸：纳他霉素＝3:6

混剂H、ε－聚赖氨酸：纳他霉素＝4:6。

将PDA培养基于高压蒸汽灭菌锅中121℃灭菌20min后取出，在培养皿中分别加入不同质量浓度比的ε-PL和纳他霉素和PDA培养基充分混匀，使每个平板培养基中ε-PL和纳他霉素混配比溶液的总浓度分别为0、10、20、30、40、 50mg/L备用。从用PDA培养基培养7d的橡胶树炭疽菌菌落边缘取直径为4mm 的菌饼，将菌饼分别接种于平板培养基正中央，每个平板接种一个菌饼，菌丝面朝下，28℃培养箱中培养7d。每组重复4次。其中，ε-PL和纳他霉素溶液浓度为0的为对照组，其他为试验组。

实验结束后，测量各组菌落直径D_i，并计算抑制率ω_i。进而以ε-PL和纳他霉素的总浓度的对数值作为横坐标，抑制率为纵坐标，计算毒力方程和半最大效应浓度EC₅₀。

此外，根据公式下述公式组计算增效系数SR，具体的，当SR≥1.5表示具有增效作用；SR≤0.5表示具有拮抗作用；0.5＜SR＜1.5为相加作用。

其中，w_i是混剂中第i组分所占的重量百分比；EC50_i为混剂中第i组分单独的半最大效应浓度，E_ob为实际观测得到的混剂的半最大效应浓度，E_th为计算得到的混剂的半最大效应浓度。

其中，抑制率由下述公式组计算得到：

Δd_i＝D_i-d_i

其中，d_i为实验前第i组的菌落直径，D_i为实验后第i组的菌落直径，Δd_i为第i组菌落增长直径，Δd_c为对照组菌落增长直径。

实验结果如下表所示：

从表中可以看出，将ε-聚赖氨酸和纳他霉素复配，可有效降低半最大效应浓度EC₅₀。具体的，相较单独的ε-聚赖氨酸而言，其下降幅度达到了21.3～91.4 倍。表明两者具有良好的协同作用。尤其是当纳他霉素与ε-聚赖氨酸的重量比为(1～2)：3时，这种协同效果更为明显。

实施例3

本实施例提供一种用于防治植物炭疽病菌病害的农药，其包括以下组分：

ε-聚赖氨酸40份，纳他霉素20份，玉米醇溶蛋白1份，柠檬酸2份，丙三醇5份，吐温80 3份，水29份。

其制备方法为：

将除吐温80外的各种原料混合均匀，然后加入吐温，混合均匀即得。

实施例4芒果大田试验

本试验安排在海南省儋州市海南大学植物保护学院试验基地，试用地为平地块，土壤为沙土。栽培管理按照农药田间药效试验统一进行规范。

1、供试材料

药剂：应用实施例3的农药。对照药剂为30％吡唑醚菌酯悬浮剂，稀释800 倍液使用，喷清水为空白对照。

病原物：炭疽病病菌(Colletotrichum gloeosporioides)

寄主植物：芒果

2、试验方法

试验小区面积为40平方米，每个小区6株芒果树，四次重复。于芒果叶片炭疽病发病初期(零星发病时)第一次兑水喷雾，连喷2次，间隔5-7天，喷施药液量为90L/亩。

3、调查方法

每小区随机取样，每点调查3株，梢期每小区随机取样调查3株，每株按东、西、南、北、中五点取样，每点调查2条梢的全部叶片，记录调查总叶数、各级病叶数，然后计算病情指数和防治效果。

调查发病分级标准参照防治芒果炭疽病行业标准，分为6个级别：

0级：无病斑；

1级：病斑面积占整个叶面积的5％以下；

3级：病斑面积占整个叶面积的6％～15％；

5级：病斑面积占整个叶面积的16％～25％；

7级：病斑面积占整个叶面积的26％～50％；

9级：病斑面积占整个叶面积的51％以上。

4、药效计算方法

5、试验结果

各处理变化病情指数和防效如下表：

采用邓肯氏新复极差法(DMRT)对试验数据进行生物统计分析。

实施例5西瓜大田试验

本试验安排在海南省乐东县佛罗镇福塘村，试用地为平原地块，土壤为沙土。栽培管理按照农药田间药效试验统一进行规范。

1、供试材料

药剂：应用实施例3的农药。对照药剂为30％吡唑醚菌酯悬浮剂，稀释800 倍液使用，喷清水为空白对照。

病原物：西瓜炭疽病(Colleetotrichum lagenarium)

寄主植物：西瓜

2、试验方法

试验小区面积为40平方米，每亩种植西瓜1500株西瓜，四次重复。于西瓜叶片炭疽病发病初期(零星发病时)第一次兑水喷雾，连喷2次，间隔5-7 天，喷施药液量为60L/亩。

3、调查方法

每小区随机五点取样，每点调查3株，每株自上而下调查5片-10片叶，分别记载病害级数，然后计算病情指数和防治效果。

调查发病分级标准参照防治西瓜炭疽病行业标准，分为6个级别：

0级：无病斑；

1级：病斑面积占整个叶面积的5％以下；

3级：病斑面积占整个叶面积的6％～15％；

5级：病斑面积占整个叶面积的16％～25％；

7级：病斑面积占整个叶面积的26％～50％；

9级：病斑面积占整个叶面积的51％以上。

4、药效计算方法

5、试验结果

各处理变化病情指数和防效如下表：

采用邓肯氏新复极差法(DMRT)对试验数据进行生物统计分析。

实施例6槟榔大田试验

本试验安排在海南省海南大学海甸校区植物保护学院试验基地，试用地为平原地块，土壤为沙土。栽培管理按照农药田间药效试验统一进行规范。

1、供试材料

药剂：应用实施例3的农药。对照药剂为30％吡唑醚菌酯悬浮剂，稀释800 倍液使用，喷清水为空白对照。

病原物：炭疽病病菌(Colletotrichum gloeosporioides)

寄主植物：槟榔

2、试验方法

试验小区面积为20平方米，每个小区6株槟榔树，四次重复。于槟榔叶片炭疽病发病初期(零星发病时)第一次兑水喷雾，连喷2次，间隔5-7天，喷施药液量为90L/亩。

3、调查方法

每小区随机取样，每点调查3株，梢期每小区随机取样调查3株，调查每株槟榔树的全部叶片，记录调查总叶数、各级病叶数，然后计算病情指数和防治效果。

调查发病分级标准参照防治槟榔炭疽病行业标准，分为6个级别：

0级：无病斑；

1级：病斑面积占整个叶面积的5％以下；

3级：病斑面积占整个叶面积的6％～15％；

5级：病斑面积占整个叶面积的16％～25％；

7级：病斑面积占整个叶面积的26％～50％；

9级：病斑面积占整个叶面积的51％以上。

4、药效计算方法

5、试验结果

各处理变化病情指数和防效如下表：

采用邓肯氏新复极差法(DMRT)对试验数据进行生物统计分析。

从实施例4～6可以看出，本发明中的农药对炭疽病菌病害具有良好的防治作用。

以上所述是发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。