发明内容

为了解决上述问题，本发明第一个方面提供了一种含左旋聚乳酸的透明质酸复合微球，所述复合微球包括透明质酸微球和左旋聚乳酸粉体，所述左旋聚乳酸粉体位于透明质酸微球内部。

左旋聚乳酸粉体

为了促进形成聚乳酸和透明质酸的复合微球，本发明通过添加亲水改性剂和左旋聚乳酸共混，形成凝胶，经干燥后得到带有亲水改性剂的聚乳酸粉体，从而在微球形成过程中，得到粉体可以进入含有透明质酸的水相中，形成复合微球，且发明人发现，通过本发明提供粉体得到的复合粉体不会对微球的圆润饱满程度、以及微球的压缩弹性产生影响。在一种实施方式中，左旋聚乳酸粉体的制备原料包括左旋聚乳酸和亲水改性剂，所述左旋聚乳酸占左旋聚乳酸和亲水改性剂总重量的30～80wt％。

在一种实施方式中，所述亲水改性剂的制备原料包括：

质量浓度为1～15wt％的透明质酸水溶液，可列举的有1wt％、2wt％、3wt％、4wt％、5wt％、6wt％、7wt％、8wt％、9wt％、10wt％、11wt％、12wt％、13wt％、 14wt％、15wt％；本发明所述透明质酸水溶液的pH为3～8，可列举的有，3、4、 5、6、7、8。

本发明不对亲水改性剂中透明质酸水溶液的制备方法做具体限定，如将透明质酸加入1～3mol/L的无机盐水溶液中，得到所述透明质酸水溶液。作为无机盐的实例，包括但不限于，氯化钠、氯化钾、溴化钠、硫酸钠等。

交联剂；本发明所述交联剂可为本领域熟知的醛类交联剂、环氧类交联剂、碳酰亚胺类交联剂，如戊二醛、丁二醇双缩水甘油醚、碳化二亚胺等小分子交联剂，也可为羧酸活化的交联剂，如1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、 4-(4,6-二甲氧基三嗪-2-基)-4-甲基吗啉盐酸盐、N-羟基磺基琥珀酰亚胺及其复合物等，为了减少刺激，提高生物安全性，优选为羧酸活化的交联剂。

质量浓度为1～9wt％的可降解高分子水溶液，可列举的有1wt％、2wt％、3wt％、4wt％、5wt％、6wt％、7wt％、8wt％、9wt％。所述可降解高分子选自壳聚糖、甲壳素、海藻酸钠、葡聚糖中的一种或多种，优选为壳聚糖，通过添加少量聚阳离子和透明质酸共同作为亲水改性剂，可促进形成凝胶的同时，提高聚乳酸表面的改性剂密度和附着性，从而促进后续进入透明质酸微球水相，并分散在微球内部，减少粉体聚集。

本发明不对亲水改性剂中可降解高分子水溶液的制备方法做具体限定，如将可降解高分子加入质量浓度为0.5～2wt％的有机酸水溶液，得到所述可降解高分子水溶液。作为有机酸溶液的实例，包括但不限于甲酸、乙酸、丁酸等。

在一种实施方式中，所述可降解高分子水溶液中可降解高分子占透明质酸水溶液中透明质酸的3～10wt％，可列举的有，3wt％、4wt％、5wt％、6wt％、7wt％、 8wt％、9wt％、10wt％。

在一种实施方式中，每克透明质酸中交联剂的摩尔量为0.005～0.02mol，可列举的有，0.005mol、0.006mol、0.008mol、0.01mol、0.012mol、0.015mol、0.017mol、 0.02mol。发明人发现，通过添加少量的交联剂，对透明质酸进行活化，可进一步促进静置凝固成胶状，当烘干后，促进透明质酸和壳聚糖等可降解高分子附着在聚乳酸表面，当和透明质酸微球作用时，提高界面处的相容性，促进物理交联密度，且发挥一定的固定作用，促进压缩弹性。本发明所述交联剂可为一种或两种及以上的复合，当为两种及以上时，如1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、N-羟基磺基琥珀酰亚胺的混合物时，其摩尔比可为(1～5)：(1～5)，可列举的有，1：5、3：5、1：1、3：1、5：1。

在一种实施方式中，所述左旋聚乳酸粉体的制备方法包括：将透明质酸水溶液、交联剂和可降解高分子水溶液混合后，加入左旋聚乳酸后，静置凝固、烘干、粉碎得到所述左旋聚乳酸。

在一种实施方式中，所述左旋聚乳酸粉体的制备方法包括：

将透明质酸水溶液、交联剂在-2～5℃(如冰浴)混合，静置6～12h(如静置过夜，约为6～9h)，加入可降解高分子水溶液混合后，加入左旋聚乳酸，静置凝固、烘干、粉碎得到所述左旋聚乳酸。本发明粉碎可通过研磨粉碎，并筛分出 20～40μm的左旋聚乳酸粉体。本发明透明质酸水溶液、交联剂混合过程中，交联剂可先加少量的水溶解后再混合，因为交联剂用量很少，溶解所需水也很少，不做具体限定。

透明质酸微球

本发明透明质酸微球可参考申请号为2021109412967的微球的制备方法，也可使用其他活性剂或亲水高分子作为透明质酸微球的材料。在一种实施方式中，所述透明质酸微球为透明质酸-亲水高分子微球，所述亲水高分子选自壳聚糖、甲壳素、海藻酸钠、葡聚糖、聚乙烯醇、聚乙二醇、聚乙丙交酯中的一种或多种，优选为生物相容性高的亲水高分子。优选为壳聚糖。本发明通过壳聚糖作为复合微球的成分的同时，还可作为交联剂，将透明质酸及其衍生物复合交联，且将左旋聚乳酸包裹在微球中，制备得到微球，反应条件简单，交联剂利用天然高分子材料，得到的凝胶微球具有高的热稳定性和生物相容性。

在一种实施方式中，透明质酸微球的制备原料包括：

质量浓度为1～15wt％的透明质酸水溶液，可列举的有1wt％、2wt％、3wt％、4wt％、5wt％、6wt％、7wt％、8wt％、9wt％、10wt％、11wt％、12wt％、13wt％、 14wt％、15wt％；本发明所述透明质酸水溶液的pH为3～8，可列举的有，3、4、5、6、7、8；本发明所述透明质微球和亲水改性剂中透明质酸水溶液的质量浓度可相同或不同，不做具体限定。

活性剂；本发明不对活性剂做具体限定，可列举的有，1-(3-二甲氨基丙基)-3- 乙基碳二亚胺盐酸盐、4-(4,6-二甲氧基三嗪-2-基)-4-甲基吗啉盐酸盐、N-羟基磺基琥珀酰亚胺及其复合物。

质量浓度为1～9wt％的亲水高分子水溶液，可列举的有1wt％、2wt％、3wt％、4wt％、5wt％、6wt％、7wt％、8wt％、9wt％，本发明不对亲水高分子水溶液的制备方法做具体限定，如将亲水高分子加入质量浓度为0.5～2wt％的有机酸水溶液，得到所述亲水高分子水溶液。作为有机酸溶液的实例，包括但不限于甲酸、乙酸、丁酸等。

所述左旋聚乳酸粉体占透明质酸微球的制备原料的10～40wt％，可列举的有，10wt％、12wt％、15wt％、17wt％、20wt％、22wt％、25wt％、30wt％、32wt％、 35wt％、37wt％、40wt％。

本发明第二个方面提供了一种所述的含左旋聚乳酸的透明质酸复合微球的制备方法，包括：

水相制备：将透明质酸微球的制备原料混合后，得到水相；

反向悬浮聚合：在水相加入左旋聚乳酸粉体后，加入油相，在50～75℃反应 4～7h，过滤、洗涤、干燥，得到所述复合微球。

在一种实施方式中，所述水相制备中，将透明质酸微球制备原料中的透明质酸水溶液、活化剂在-2～5℃(如冰浴)混合，静置6～12h(如静置过夜，约为6～9h)，加入亲水高分子水溶液混合，得到所述水相。

本发明所述油相可为油相溶剂，如液态石蜡、乙酸乙酯、石油醚、乙酸丁酯等，也可为乳化剂和油相溶剂的混合溶液，当包括乳化剂时，所述乳化剂在油相中的质量浓度为1～6wt％，本发明不对乳化剂做具体限定，如醋酸丁酸纤维素、醋酸纤维素、聚氧乙烯蓖麻油、失水山梨醇酯、聚氧乙烯失水山梨醇酯等。

在一种实施方式中，所述油相和水相的重量比大于1，优选为(5～12)：1，不做具体限定。

本发明与现有技术相比具有以下有益效果：

(1)本发明提供一种含有左旋聚乳酸的透明质酸钠交联微球反应条件，且均使用高度生物相容性、生物降解性的原料，得到的微球具有高的热稳定性和生物相容性。

(2)通过将左旋聚乳酸包裹在透明质酸微球的内部，在注射后能激发细胞二次活力并刺激肌体自身胶原增加来达到抗衰和预防衰老的作用，可用于化妆品、组织填充与修复、生物支架、眼科、药物缓释与靶向给药等化妆品、医药、医美等多个领域，具有广泛的应用前景。

(3)本发明通过在含有透明质酸和亲水高分子，如壳聚糖为主要原料的体系中进行活化交联得到水凝胶后，再在油水混合体系中加入对左旋聚乳酸使用亲水改性剂进行处理后的粉体，通过反相悬浮聚合的聚合方式，可将左旋聚乳酸粉体包覆在微球内部，得到玻尿酸微米级微球状水凝胶，制备简单。

(4)本发明制备得到的复合微球圆润饱满，且粒径均匀，左旋聚乳酸粉体分散在微球内部，形成聚乳酸-透明质酸两相体系，不会对微球的压缩弹性造成影响。