一种中药组合物及其制备方法和应用
阅读说明：本技术 一种中药组合物及其制备方法和应用 (Traditional Chinese medicine composition and preparation method and application thereof ) 是由 刘红旭 周明学 龙德怀 尚菊菊 李思耐 邢文龙 于 2021-10-27 设计创作，主要内容包括：本发明涉及中药技术领域,尤其是涉及一种中药组合物及其制备方法和应用。本发明的中药组合物,其按重量份计包括：当归10～50份、川芎10～50份、鸡血藤10～50份、元胡3～17份和三七1～5份。该中药组合物采用当归、川芎、鸡血藤为君臣药,元胡、三七为佐使药,通过多种药物组分的科学配比,各组分之间的协同配合,使其具有养血活血、化瘀止痛的功效,对心肌损伤和脑血栓具有良好的治疗效果,毒副作用小。(The invention relates to the technical field of traditional Chinese medicines, in particular to a traditional Chinese medicine composition and a preparation method and application thereof. The traditional Chinese medicine composition comprises the following components in parts by weight: 10-50 parts of angelica sinensis, 10-50 parts of ligusticum wallichii, 10-50 parts of caulis spatholobi, 3-17 parts of rhizoma corydalis and 1-5 parts of pseudo-ginseng. The Chinese medicinal composition adopts angelica sinensis, ligusticum wallichii and caulis spatholobi as monarch and minister medicaments, and rhizoma corydalis and pseudo-ginseng as assistant and guide medicaments, has the effects of nourishing blood, promoting blood circulation, removing blood stasis and relieving pain by scientific proportioning of various medicament components and synergistic cooperation of the components, and has good treatment effect on myocardial injury and cerebral thrombosis and small toxic and side effects.)
技术领域
本发明涉及中药技术领域，具体而言，涉及一种中药组合物及其制备方法和应用。
背景技术
目前，心肌缺血、心肌损伤、心绞痛、冠心病、脑血栓等疾病是危害人类健康的主要疾病，其发病率和死亡率高，特别是心肌损伤和脑血栓。
脑血栓是一种常见的缺血性脑血管疾病，主要由于动脉硬化，血管内膜损伤、管腔内膜粗糙、管腔变窄等多种原因使凝血因子在管腔内凝集成块，形成血栓，使血管闭塞，血流中断，从而使血管供血区的脑组织缺血、缺氧、软化、坏死而发病。脑血栓形成可发生在任何一段脑血管内，但在临床上却以颈内动脉、大脑前动脉及大脑中动脉的分支所形成的血栓较常见。脑血栓对身体危害大，严重影响病人的日常生活。脑血栓轻微者表现为一侧肢体活动不灵活、感觉迟钝、失语，严重者甚至死亡。
心肌损伤是指各种原因引起的心肌细胞的损伤，即心肌细胞坏死、凋亡等。心肌损伤可以是缺血性疾病引起的，例如冠心病、心肌梗死等，也可以是炎症引起的，例如心肌炎等，或者也有可能是外伤，例如刺伤心肌等。心肌损伤常表现为胸闷、胸痛、呼吸困难、乏力、恶心，严重者急性心衰、心律失常甚至猝死。由于导致心肌损伤的原因较多，病理机制复杂，所以心肌损伤的治疗一直受到人们的关注，特别是异丙肾上腺素诱导的心肌损伤，异丙肾上腺素可以诱导上述多种类型的心肌损伤。
目前，心肌损伤和脑血栓的治疗主要有中医、西医两种治疗方法，西医治疗的药物副作用较大，长期使用会给人体器官待料不同程度的损伤；而中药毒副作用小，但药物大多发挥作用时间较慢、服用周期长，药效也不甚理想，很容易使患者放弃治疗。
有鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种中药组合物，该中药组合物具有养血活血、化瘀止痛的功效，对心肌损伤和脑血栓具有良好的治疗的效果。
本发明的第二目的在于提供一种上述中药组合物的制备方法，该方法操作简单。
本发明的第三目的在于提供一种上述中药组合物在制备治疗心肌损伤药物中的应用。
本发明的第四目的在于提供一种上述中药组合物在制备治疗脑血管疾病药物中的应用。
为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：
本发明提供了一种中药组合物，其按重量份计包括：当归10～50份、川芎10～50份、鸡血藤10～50份、元胡3～17份和三七1～5份。
本发明还提供了上述中药组合物的制备方法，将当归、川芎、鸡血藤、元胡加入水煎煮，再加入三七混匀得到中药混合液。
本发明还提供了上述中药组合物在制备治疗心肌损伤药物中的应用。
本发明还提供了上述中药组合物在制备治疗脑血管疾病药物中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
(1)本发明提供了一种中药组合物，根据传统中医学理论进行原料的选择，通过对中药成分进行科学的配比，使得各种成分之间的药效相互配合，协同作用。根据中医整体观念，发挥中医辨证施治优势，针对不同病因多角度进行治疗，虚实结合、标本兼治。本发明的中药组合物由当归、川芎、鸡血藤、元胡和三七组成。其中，当归、川芎、鸡血藤属于养血活血类，重用为君臣药；元胡、三七归为化瘀、逐瘀类，轻用为佐使药，使其具有养血活血、化瘀止痛的功效，对心肌损伤和脑血栓具有显著的治疗效果。与当前治疗心肌损伤或脑血栓的化学治疗药物相比，药效稳定，且本发明提供的中药组合物为天然纯植物药，仅包含5种中药组分，由药物导致的不良反应和副作用显著降低，毒副作用小。
(2)本发明提供了上述中药组合物的制备方法，该方法原料易得、制备工艺简便，操作简单，易于推广和应用。
(3)本发明提供了上述中药组合物在制备治疗心肌损伤药物中的应用，对心肌细胞凋亡和心肌缺血具有明显的改善作用。
(4)本发明提供了上述中药组合物在制备治疗脑血管疾病药物中的应用，尤其对脑血栓具有显著的治疗效果，能够明显降低脑血栓的发病率和脑血栓面积。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施方式的技术方案，下面将对实施方式中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为异丙肾上腺素诱发的斑马鱼心肌凋亡表型图。
图2为中药混合液对斑马鱼心脏凋亡细胞荧光强度的影响。
图3为中药混合液对斑马鱼心肌细胞凋亡改善率的影响。
图4为中药混合液对斑马鱼心肌缺血心输出量的影响。
图5为中药混合液对斑马鱼心肌缺血心输出量增加率的影响。
图6为中药混合液对斑马鱼心肌缺血的血流速度的影响。
图7为中药混合液对斑马鱼心肌缺血的血流速度增加率的影响。
图8为中药混合液对斑马鱼脑血栓面积的影响。
具体实施方式
下面将结合具体实施方式对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，但是本领域技术人员将会理解，下列所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本发明实施例的中药组合物及其制备方法和应用进行具体说明。
本发明的一些实施方式提供了一种中药组合物，其按重量份计包括：当归10～50份、川芎10～50份、鸡血藤10～50份、元胡3～17份和三七1～5份。
当归别名干归、秦哪、西当归、岷当归、金当归、当归身、涵归尾、当归曲、土当归，多年生草本，其根可入药；性温，味甘辛；归肝、心、脾经；具有补血活血、调经止痛、润肠通便的功效。主治血虚、血瘀诸症、眩晕头痛、心悸肢麻、月经不调、经闭、痛经、崩漏、结聚、虚寒腹痛、痿痹、赤痢后重、肠燥便难、跌打肿痛和痈疽疮疡。
川芎为伞形科植物，多年生草本；性温，味辛；归肝、胆、心经；具有活血行气、祛风止痛的功效。主治风冷头痛旋晕、胁痛腹疼、寒痹筋挛、经闭、难产、产后瘀阻块痛和痈疽疮疡。
鸡血藤为豆科、被子植物门，双子叶植物纲，蝶形花科等多种植物的别称；性温，味苦、微甘；归心、脾经；具有活血舒筋、养血调经的功效。主治手足麻木、风湿痹痛、妇女有经不调、痛经和闭经。
元胡又名延胡索、玄胡，为罂粟科紫堇属多年生草本植物；性温，味辛苦；入心、脾、肝、肺；具有活血化瘀、行气止痛的功效。可用于治疗全身各部气滞血瘀之痛、痛经、经闭、症瘕、产后瘀阻、跌扑损伤和疝气作痛。
三七为五加科植物；味甘、微苦，性温；归肝、胃经；具有止血、活血散瘀、消肿定痛的功效。主治跌扑瘀肿、胸痹绞痛、血瘀经闭、痛经、产后瘀阴腹痛和疮痈肿痛。
全方由当归、川芎、鸡血藤、元胡和三七组成。当归、川芎、鸡血藤属于养血活血类，重用为君臣药；元胡、三七归为化瘀、逐瘀类，轻用为佐使药。全方功效以养血活血为主，化瘀止痛为辅，对心肌损伤和脑血栓具有良好的治疗效果。
通过对中药成分进行科学的配比，使得各种成分之间的药效相互配合，协同作用，特别是鸡血藤和元胡的使用；鸡血藤有“血分之圣药”之称，鸡血藤、元胡以归肝脾肾经为主，偏于血分，更符合心脏之“心主血脉”的生理特性。鸡血藤配伍元胡在通络的同时，还兼以活血止痛，体现了“标本同治”的原则。本发明的中药组合物中的原料均为植物药，且仅有5种中药组分，原料较少，由此产生的药物副作用明显降低，毒性小。
为了得到治疗效果更加优异的中药组合物，对上述中药组合物中的各原料的比例关系进行了优化，其按重量份计包括：当归25～40份，例如可以为，但不限于25份、28份、30份、33份、35份、38份或者40份；川芎25～40份，例如可以为，但不限于25份、28份、30份、33份、35份、38份或者40份；鸡血藤25～40份，例如可以为，但不限于25份、28份、30份、33份、35份、38份或者40份；元胡8～13份，例如可以为，但不限于8份、9份、10份、11份、12份或者13份；以及三七2.5～4份，例如可以为，但不限于2.5份、3份、3.5份或者4份。
具体地，一些实施方式中，中药组合物中，其按重量份计包括：当归30份、川芎30份、鸡血藤30份、元胡10份和三七3份。
一些实施方式中，上述中药组合物还包括用于将中药组合物制成各种药物剂型的辅料。
在本发明中对中药制剂的剂型不作严格的限制，上述剂型包括汤剂、颗粒剂、片剂、丸剂、饮片剂或胶囊剂。
本发明还提供了上述中药组合物的制备方法，将当归、川芎、鸡血藤、元胡加水煎煮，再加入三七混合得到中药混合液。
具体地，一些实施方式中，上述中药混合液的制备方法为：将当归、川芎、鸡血藤、元胡加入3～6倍量的水，加热至水烧开后，煎煮10～30min，过滤得到滤液，再加入三七混匀得到上述中药混合液。加入水的质量是当归、川芎、鸡血藤和元胡总质量的3～6倍。优选地，上述三七为三七粉。
通过上述参数的限制，以及对各步骤的具体限定，能够提高各中药原料中有效成分的充分释放，有利于提高所制备的中药组合物的治疗效果。
本发明还提供了上述中药组合物在制备治疗心肌损伤药物中的应用。
优选地，心肌损伤包括心肌细胞凋亡和心肌缺血和中的一种或两种。
本发明的中药组合物对异丙肾上腺素引起的心肌细胞凋亡和对心肌缺血具有明显的改善作用；对异丙肾上腺素引起的心输出量减少、血流速度减慢有明显的增加作用。
本发明还提供了上述中药组合物在制备治疗脑血管疾病药物中的应用。
一些实施方式中，脑血管疾病为脑血栓。本发明的中药组合物能够降低脑血栓的发病率和脑血栓面积，对脑血栓具有明显的治疗效果。
上述中药组合物的治疗对象包括人或动物，优选地，动物包括鱼。
实施例1
本实施例提供的一种中药组合物，其按重量份计包括：当归10g、川芎10g、鸡血藤10g、元胡3.3g和三七1g。
将当归、川芎、鸡血藤、元胡加入400mL的水，加热至水烧开后，煎煮20min，过滤得到滤液，再加入三七粉混匀得到中药混合液。
实施例2
本实施例提供的一种中药组合物，其按重量份计包括：当归50g、川芎50g、鸡血藤50g、元胡17g和三七5g。
本实施例的中药混合液的制备方法同实施例1。
实施例3
本实施例提供的一种中药组合物，其按重量份计包括：当归25g、川芎25g、鸡血藤25g、元胡8g和三七2.5g。
本实施例的中药混合液的制备方法同实施例1。
实施例4
本实施例提供的一种中药组合物，其按重量份计包括：当归40g、川芎40g、鸡血藤40g、元胡13g和三七4g。
本实施例的中药混合液的制备方法同实施例1。
实施例5
本实施例提供的一种中药组合物，其按重量份计包括：当归35g、川芎35g、鸡血藤35g、元胡12g和三七4g。
本实施例的中药混合液的制备方法同实施例1。
实施例6
本实施例提供的一种中药组合物，其按重量份计包括：当归30g、川芎30g、鸡血藤30g、元胡10g和三七3g。
本实施例的中药混合液的制备方法同实施例1。
试验例
下面结合药效试验对本发明实施例6提供的中药试剂进行药效学评价：
试验例1、中药混合液对心肌细胞凋亡的改善作用。
将实施例6中的中药混合液用水稀释为浓度分别为8.3μL/mL、25μL/mL和75μL/mL的中药混合溶液(也称为三七中药混合液或中药汤剂)。
随机选取180尾受精后2天(2dpf)野生型AB系斑马鱼于六孔板中，每孔均处理30尾斑马鱼，每孔容量为3mL，分别给予3mL浓度为8.3μL/mL、25μL/mL和75μL/mL的中药混合液(实验组1～3)，丹参滴丸500μg/mL(阳性对照组)，并设置正常对照组(养鱼用水处理斑马鱼)和模型对照组。药物处理斑马鱼4h后，用3mL浓度为5mg/mL盐酸异丙肾上腺素诱导60min建立斑马鱼心肌缺血模型，药物与诱导剂共同处理结束后，用吖啶橙(简称AO)染色，染色结束后每组随机选取10尾斑马鱼在荧光显微镜下观察、拍照，其结果如图1所示。采集数据，分析统计斑马鱼心脏部位凋亡细胞荧光强度，其结果如图2所示。以心脏部位凋亡细胞荧光强度统计学意义评价中药混合液对斑马鱼心肌细胞凋亡的改善作用，其结果如图3所示。中药混合液对斑马鱼心脏凋亡细胞荧光强度和心肌细胞凋亡改善率，其结果记录至表1。用方差分析和Dunnett’s T-检验进行统计学分析，p<0.05表明具有显著性差异。其中，心肌细胞凋亡改善率的计算公式如下：
表1
与模型对照组比较，*p<0.05，***p<0.001
模型对照组斑马鱼心脏部位凋亡细胞荧光强度(307264像素)与正常对照组(117837像素)比较p<0.001，说明模型建立成功。阳性对照组(丹参滴丸500μg/mL)的斑马鱼心脏部位凋亡细胞荧光强度为251615像素，与模型对照组比较p<0.05，心肌凋亡改善率为29％，说明丹参滴丸对心肌缺血斑马鱼心肌细胞凋亡有明显的改善作用。中药混合液浓度分别为8.3μL/mL的实验组1，斑马鱼心脏部位凋亡细胞荧光强度为316590像素，与模型对照组(307264像素)比较p>0.05，心肌细胞凋亡改善率为-5％，说明浓度为8.3μL/mL的中药混合液对心肌缺血斑马鱼心肌细胞凋亡不能起到改善的作用。中药混合液浓度分别为25μL/mL和75μL/mL的实验组2和实验组3，斑马鱼心脏部位凋亡细胞荧光强度分别为242615像素和204233像素，分别与模型对照组(307264像素)比较p<0.05、p<0.001，其心肌细胞凋亡改善率分别为34％和54％，说明浓度为25μL/mL和75μL/mL的中药混合液异丙肾上腺素引起的斑马鱼心肌凋亡有明显的改善作用。
试验例2、中药混合液对心输出量及血流速度的影响。
将实施例6中的中药试剂用水稀释为浓度分别为8.3μL/mL、25μL/mL和75μL/mL的中药混合溶液(也称为三七中药混合液)。随机选取180尾受精后3天(3dpf)野生型AB系斑马鱼于六孔板中，每孔均处理30尾斑马鱼，每孔容量为3mL。分别给予浓度为8.3μL/mL、25μL/mL和75μL/mL的中药混合液(实验组1～3)、丹参滴丸500μg/mL(阳性对照组)，并设置正常对照组(养鱼用水处理斑马鱼)和模型对照组。药物处理斑马鱼4h后，用50mg/mL盐酸异丙肾上腺素诱导60min建立斑马鱼心肌缺血模型，药物与诱导剂共同处理结束后，将斑马鱼置于心跳血流分析系统下录制斑马鱼血流视频，分析斑马鱼心输出量，其结果如图4所示，心输出量增加率如图5所示。并将心输出量和心输出量增加率的数据记录至表2中。分析斑马鱼的血流速度，其结果如图6所示，血流速度增加率如图7所示。并将心输出量和心输出量增加率的数据记录至表3中。以心输出量和血流速度指标定量评价中药混合液对盐酸异丙肾上腺素诱发的斑马鱼心肌缺血的保护作用。用方差分析和Dunnett’s T-检验进行统计学分析，p<0.05表明具有显著性差异。其中，心输出量增加率和血流速度增加率的计算公式如下：
表2
与模型对照组比较，**p<0.01，***p<0.001
模型对照组斑马鱼心输出量(0.10nL/s)与正常对照组(0.39nL/s)比较p<0.001，说明模型建立成功。阳性对照组(丹参滴丸500μg/mL)的斑马鱼心输出量为0.23nL/s，与模型对照组比较p<0.01，心输出量增加率为45％，说明丹参滴丸对心肌缺血斑马鱼心输出量有明显的改善作用。中药混合液浓度分别为8.3μL/mL、25μL/mL和75μL/mL的实验组，斑马鱼心输出量分别为0.25nL/s、0.37nL/s和0.28nL/s，与模型对照组比较均为p<0.001，心输出量增加率分别为52％、93％和62％。说明浓度分别为8.3μL/mL、25μL/mL和75μL/mL的中药混合液对异丙肾上腺素引起的斑马鱼心输出量减少有明显的增加作用，其中浓度为25μL/mL的中药混合液对异丙肾上腺素引起的斑马鱼心输出量减少具有更加优异的增加作用。
表3
与模型对照组比较，**p<0.01，***p<0.001
模型对照组斑马鱼血流速度(293μm/s)与正常对照组(931μm/s)比较p<0.001，说明模型建立成功。阳性对照组(丹参滴丸500μg/mL)的斑马鱼血流速度(628μm/s)，与模型对照组比较p<0.01，血流速度增加率为36％，说明丹参滴丸对心肌缺血斑马鱼血流速度有明显的增加作用。中药混合液浓度分别为8.3μL/mL、25μL/mL和75μL/mL的实验组，斑马鱼血流速度分别为564μm/s、791μm/s和587μm/s，与模型对照组比较均为p<0.001，血流速度增加率分别为29％、53％和32％。说明浓度分别为8.3μL/mL、25μL/mL和75μL/mL的中药混合液对异丙肾上腺素引起的斑马鱼血流速度减慢有明显的增加作用。
综合上述实验结果，在本实验浓度条件下，中药混合液对异丙肾上腺素引起的斑马鱼心肌凋亡有明显的改善作用；对异丙肾上腺素引起的斑马鱼心输出量减少和血流速度减慢有明显的增加作用。
试验例3、中药混合液对斑马鱼脑血栓的改善作用。
将实施例6中的中药混合液用水稀释为浓度分别为1.74μL/mL、5.21μL/mL和15.6μL/mL的中药混合溶液(也称为三七中药混合液或中药汤剂)。
随机选取2dpf黑色素等位基因突变型斑马鱼于6孔板中，每孔均处理30尾斑马鱼，每孔容量为3mL，分别给予浓度为1.74μL/mL，5.21μL/mL和15.6μL/mL的中药混合液(实验组1～3)，浓度为50.0μg/mL的阿司匹林(阳性对照组)，同时设置正常对照组和模型对照组。除正常对照组外，其余各组均水溶给予普纳替尼建立斑马鱼脑血栓模型。28℃处理18h后，用邻联茴香胺进行染色，染色后每个实验组全部斑马鱼置于解剖显微镜下拍照，其结果如图8所示。统计斑马鱼脑血栓数目(N)，计算斑马鱼脑血栓的发生率，以该指标的统计学分析结果评价中药混合液防治功效，并计算脑血栓改善率，其结果如表4所示。统计学处理结果采用mean±SE表示。用Fisher精确检验进行统计学分析，p<0.05表明具有显著性差异。
脑血栓善率计算公式下：
用软件分析并采集数据，分析斑马鱼脑血栓面积，以该指标的统计学分析结果评价中药混合液脑血栓防治功效，计算血栓面积改善率，其结果如图5所示。统计学处理结果采用mean±SE表示。用SPSS26.0软件进行统计学分析，p<0.05表明差异具有统计学意义。
表4
中药混合液浓度为1.74μL/mL的实验组1，斑马鱼脑血栓的发生率为66.7％，与模型对照组(脑血栓发病率为66.7％)相比，其脑血栓防治率分别为0，说明浓度为1.74μL/mL的中药混合液不能起到脑血栓的防治功效。中药混合液浓度分别为5.21μL/mL的实验组2，斑马鱼脑血栓的发生率为56.7％，与模型对照组(脑血栓发病率为66.7％)相比，其脑血栓防治率为15％，说明对斑马鱼脑血栓有一定的改善作用。中药混合液浓度分别为15.6μL/mL的实验组3，斑马鱼脑血栓的发生率为40％，与模型对照组(脑血栓发病率为66.7％)比较P<0.05，其脑血栓防治率为40％，对斑马鱼脑血栓具有明显的改善作用。
表5
与模型对照组比较，*p<0.05，**p<0.01
中药混合液浓度分别为1.74μL/mL、5.21μL/mL和15.6L/mL的实验组，斑马鱼心脏部位凋亡细胞荧光强度分别为4621.9像素、2075.7像素和2973.57像素，分别与模型对照组(6108.2像素)比较P>0.05、p<0.05、p<0.001，其血栓面积改善率分别为24％、66％和51％，说明在浓度分别为1.74μL/mL、5.21μL/mL和15.6μL/mL的中药混合液对斑马鱼脑血栓面积有明显的改善作用。
综上所述，通过将本发明实施方式中的各种中药材组分进行科学配比，使得其各种成分之间的药效能够相互配合，产生协同作用，具有养血活血、化瘀止痛的功效；对心肌细胞凋亡具有改善作用，对心输出量减少、血流速减慢具有明显的增加作用，其中，心输出量增加率可达93％，同时能够降低脑血栓的发病率与脑血栓面积。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。