具体实施方式

本发明抑菌洗手液，含有8～15wt％的抑菌活性成分，所述抑菌活性成分由一清药渣提取物、桉树叶提取物和金银花提取物组成，且一清药渣提取物、桉树叶提取物和金银花提取物的重量比为1～3∶0.5～1.5∶1；

其中，一清药渣提取物采用以下方法得到：一清胶囊药渣与乙醇溶液混合，超声提取，然后固液分离，液体浓缩至干，得到一清药渣提取物，其中，一清胶囊药渣与乙醇溶液的料液比为1∶10～25g/mL；乙醇溶液体积浓度为50～60％；提取温度为60～80℃，提取时间为1～2h；

桉树叶提取物采用以下方法得到：桉树叶与乙醇溶液混合，超声提取，然后固液分离，液体浓缩至干，得到桉树叶提取物，其中，桉树叶与乙醇溶液的料液比为1∶8～12g/mL；乙醇溶液体积浓度为55～65％；超声温度为55～65℃，超声时间为0.8～1.2h；

金银花提取物采用以下方法得到：金银花与乙醇溶液混合，水浴回流，然后固液分离，液体浓缩至干，得到金银花提取物，其中，金银花与乙醇溶液的料液比为1∶10～14g/mL；乙醇溶液体积浓度为55～65％；提取温度为45～55℃，回流时间为3～5h。

本发明抑菌洗手液，采用超声辅助提取法提取一清胶囊药渣，得到一清药渣提取物，不仅可以回收利用药渣，成功实现了变废为宝，绿色环保，还能将其作为抑菌主要成分制备洗手液，同时配合桉树叶提取物和金银花提取物，各组分相互配合，得到的洗手液抑菌效果好，甚至与原药材提取液的抑菌效果相当。

在本发明的一个具体实施方式中，一清药渣提取物、桉树叶提取物和金银花提取物的重量比为2∶1∶1。

在本发明的一个具体实施方式中，该抑菌洗手液中含有12wt％的抑菌活性成分。

在本发明的一个具体实施方式中，一清药渣、桉树叶和金银花均为粉末。采用粉末状的原料，可以方便提取，得到提取物。

在本发明优选的实施方式中，一清药渣提取物制备时，一清胶囊药渣与乙醇溶液的料液比为1∶15g/mL；乙醇溶液体积浓度为60％；提取温度为70℃，提取时间为1h。

在本发明优选的实施方式中，桉树叶提取物制备时，桉树叶与乙醇溶液的料液比为1∶10g/mL；乙醇溶液体积浓度为60％；超声温度为60℃，超声时间为1h。

在本发明优选的实施方式中，金银花提取物制备时，金银花与乙醇溶液的料液比为1∶12g/mL；乙醇溶液体积浓度为60％；提取温度为50℃，回流时间为4h。

本发明采用超声辅助提取，本领域常用的超声功率均可适用于本发明。在本发明的一个具体实施方式中，超声的功率为200～250W。在本发明的一个具体实施例中，超声功率为220W。

本发明一清胶囊药渣，可采用市售的，为黄芩、黄连和大黄水提后的残渣。

在本发明的一个具体实施方式中，所述一清胶囊药渣为黄芩药渣、黄连药渣和大黄药渣的组合物，且黄芩药渣、黄连药渣和大黄药渣的重量比为4～6∶8～12∶3～4。

在本发明一个具体实施例中，黄芩药渣、大黄药渣和黄连药渣的重量比为5∶10∶3.3。

在本发明的一个实施方式中，所述抑菌洗手液中还包括表面活性剂、保湿剂、增稠剂、精油中的至少一种。

在本发明一个具体实施方式中，所述抑菌洗手液由以下重量百分比的组分组成：表面活性剂10～30％，保湿剂4～8％，增稠剂1～3％，抑菌活性成分8～15％，薄荷精油0.05～0.2％，其余为水。在本发明一个具体实施例中，所述抑菌洗手液由以下重量百分比的组分组成：表面活性剂20％，保湿剂6％，增稠剂2％，抑菌活性成分12％，薄荷精油0.1％，其余为水。。

在本发明一个具体实施方式中，所述表面活性剂为脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AES)、椰油酰胺丙基甜菜碱(CAB)、月桂基糖苷(APG)中的至少一种；所述保湿剂为丙二醇。

在本发明一个具体实施方式中，所述表面活性剂为脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠、椰油酰胺丙基甜菜碱和月桂基糖苷，且脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠、椰油酰胺丙基甜菜碱和月桂基糖苷的重量比为＝5～8∶2～4∶2。在一个具体的实施例中，脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠、椰油酰胺丙基甜菜碱和月桂基糖苷的重量比为＝6∶3∶2。

本发明抑菌洗手液可以采用现有方法制备，比如，将洗手液所有成分混合后，搅拌均匀即可。在本发明一个具体实施方式中，采用以下方法制备：首先将表面活性剂加入至烧杯中，加热，搅拌至均匀，再加入保湿剂，搅匀，然后加入水和增稠剂，不停搅拌至固体全部溶解。适当降温后，加入一清药渣提取液，桉树提取液，金银花提取液，适量薄荷精油，搅拌均匀后定容，得到抑菌洗手液。

在本发明一个具体实施例中，所述加热为水浴加热，温度为70～90℃，优选温度为80℃。

在本发明一个具体实施例中，所述水为去离子水。采用去离子水，可以减少杂质的引入。

下面结合实施例对本发明的具体实施方式做进一步的描述，并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。实施例中的乙醇浓度均为体积浓度，实施例中所用的仪器与试剂为：

FA200413万分之一电子天平(上海越平科学仪器有限公司)；KQ3200E超声波清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司)；WK-800A高速药物粉碎机(青州市精诚机械有限公司)；YRE-2000B旋转蒸发器(巩义市予华仪器有限公司)；SHB-ⅢG循环水式多用真空(郑州长城科工贸有限公司)；UPH-I-20T优谱超纯水机(四川优普超纯科技有限公司)；GZX-GF101型电热恒温鼓风干燥箱(上海跃进医疗器械有限公司)；立式压力蒸汽灭菌锅(上海博讯实业有限公司医疗设备厂)；SHP-160生化培养箱(金坛市盛蓝仪器制造有限公司)；SW-CJ-1D单人单面超净工作台。

金黄葡萄球菌来自成都中医药大学医学技术学院菌种保存室。营养琼脂(北京奥博星生物)。无水乙醇为分析纯(成都科隆化学品有限公司)。脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠、椰油酰胺丙基甜菜碱、月桂基糖苷(均为山东优索化工科技有限公司)。丙二醇为分析纯(山东优索化工科技有限公司)。增稠剂886和增稠剂524购自山东优索化工科技有限公司，薄荷精油购自长沙研邦化工科技有限公司。试验用水为超纯水。一清胶囊药渣由成都康弘药业集团股份有限公司提供，该药渣中，黄芩药渣、大黄药渣和黄连药渣的重量比为5∶10∶3.3。

实施例1

一清药渣提取物采用以下方法得到：称取干燥的一清胶囊药渣，并加入浓度为60％的乙醇溶液，超声提取，超声功率220W，提取温度70℃，提取时间1h，料液比为1:15g/mL，提取后，用纱布过滤，得提取液，用旋转蒸发仪(60℃、160r/min)减压浓缩至干，得到药渣提取物。

桉树叶提取物采用以下方法得到：称取干燥的桉树叶粉末，并加入体积浓度为60％的乙醇溶液，超声提取，超声功率220W，提取温度70℃，提取时间1h，料液比为1:15g/mL，提取后，用纱布过滤，得提取液，用旋转蒸发仪(60℃、160r/min)减压浓缩至干，得到药渣提取物。

金银花提取物采用以下方法得到：金银花粉末与乙醇溶液混合，水浴回流，然后固液分离，液体浓缩至干，得到金银花提取物，其中，金银花与乙醇溶液的料液比为1:12g/mL；乙醇溶液浓度为60％；提取温度为50℃，提取时间为1h；

洗手液组分：表面活性剂20％(AES:CAB:APG＝6:3:2)，保湿剂(丙二醇)6％，增稠剂2％(增稠剂886:增稠剂524＝1:1)，抑菌活性成分12％(一清药渣提取物6％，桉树提取物3％，金银花提取物3％)，薄荷精油0.1％，其余为水。

洗手液制作方法：以配制100ml洗手液为基准。用200mL的烧杯，按配方要求用加量法准确称取AES，CAB和APG在一个250ml的烧杯中，在80℃的水浴锅中加热并用玻璃棒适当搅匀，再加入丙二醇，搅匀然后加入去离子水约30g和增稠剂(增稠剂886:增稠剂524＝1:1)，不停搅拌至固体全部溶解。适当降温后，加入一清药渣提取物，桉树提取物，金银花提取物，薄荷精油，搅拌均匀后定容，得到抑菌洗手液。

测定上述抑菌洗手液的抑菌效果，具体方法如下：

菌种的活化：将冷藏保存的金黄葡萄球菌菌种在琼脂平板上划线，37℃培养24h进行复苏，用生理盐水将菌洗下得菌悬液，采用麦氏比浊法得1×10⁶CFU/mL菌悬液，现用现配。

抑菌效果的测定：采用滤纸片平板扩散法测抑菌效果。用微量移液枪吸取上述菌悬液200μL至已完全凝固的营养琼脂培养基表面，立即用无菌玻璃涂布棒均匀涂布，盖好平皿，置室温下干燥5～10min。将灭菌后直径6mm的滤纸片置于50％体积浓度的洗手液中，浸泡30min后取出，60℃烘干，按无菌操作贴于含菌平板上，阴性对照组为不加提取物溶液的处理液，每皿贴3片，置于37℃培养箱中培养18～24h后，测量其抑菌圈的大小，取平均值。

结果：抑菌圈直径为16.5mm。

对比例1(一清原药洗手液)

参照实施例1，采用一清原药提取物来制备抑菌洗手液。

一清原药提取物采用以下方法得到：称取干燥的一清胶囊复方药材10g(黄芩：大黄：黄连＝5∶10∶3.3)，并加入体积浓度为60％的乙醇溶液，超声提取，超声功率220W，提取温度70℃，提取时间1h，料液比为1:15g/mL，提取后，用纱布过滤，得提取液，用旋转蒸发仪(60℃、160r/min)减压浓缩至干，得到一清原药提取物。

洗手液组分和制作方法同实施例1，仅是将一清药渣提取物替换为一清原药提取物，得到抑菌洗手液。

参照实施例1中记载的方法测定该抑菌洗手液对金黄葡萄球菌的抑菌活性，其结果见表1。

对比例2(不加抑菌活性成分的洗手液，阴性对照)

洗手液组分：表面活性剂20％(AES:CAB:APG＝6:3:2)，保湿剂(丙二醇)6％，增稠剂2％(增稠剂886:增稠剂524＝1:1)，薄荷精油0.1％，其余为水。

洗手液制作方法：以配制100ml洗手液为基准。用200mL的烧杯，按配方要求用加量法准确称取AES，CAB，APG在一个250ml的烧杯中，在80℃的水浴锅中加热并用玻璃棒适当搅匀，再加入丙二醇，搅匀然后加入去离子水约30g和增稠剂，不停搅拌至固体全部溶解。适当降温后，加入薄荷精油，搅拌均匀后定容，得到洗手液。

参照实施例1中记载的方法测定该洗手液对金黄葡萄球菌的抑菌活性，其结果见表1。

对比例3(缺少一清药渣提取物的抑菌洗手液)

洗手液组分：表面活性剂20％(AES:CAB:APG＝6:3:2)，保湿剂(丙二醇)6％，增稠剂2％(增稠剂886:增稠剂524＝1:1)，抑菌活性成分12％(桉树提取物6％，金银花提取物6％)，薄荷精油0.1％，其余为水。

洗手液制作方法：以配制100ml洗手液为基准。用200mL的烧杯，按配方要求用加量法准确称取AES，CAB，APG在一个250ml的烧杯中，在80℃的水浴锅中加热并用玻璃棒适当搅匀，再加入丙二醇，搅匀然后加入去离子水约30g和增稠剂，不停搅拌至固体全部溶解。适当降温后，加入桉树提取液，金银花提取液，薄荷精油，搅拌均匀后定容，得到洗手液。

参照实施例1中记载的方法测定该洗手液对金黄葡萄球菌的抑菌活性，其结果见表1。

对比例4(现有抑菌洗手液的阳性对照)

参照实施例1中记载的方法测定现有市售的抑菌洗手液(蓝月亮抑菌洗手液)对金黄葡萄球菌的抑菌活性，其结果见表1。

对比例5(改变一清药渣提取方法，其余不变)

参照实施例1，改变一清药渣提取方法来制备得到洗手液。

一清药渣提取物采用以下方法得到(乙醇回流法回收药渣)：称取干燥的一清胶囊药渣10g，置于具塞锥形瓶中，并加入100mL乙醇，水浴回流1h，用纱布过滤，得提取液，用旋转蒸发仪(60℃、160r/min)减压浓缩至干，得到一清药渣提取物。

洗手液组分和制作方法同实施例1，得到抑菌洗手液。

参照实施例1中记载的方法测定该抑菌洗手液对金黄葡萄球菌的抑菌活性，其结果见表1。

表1

可见，本发明采用一清药渣提取液，制备得到的抑菌洗手液，一清药渣提取物可以和桉树叶提取物和金银花提取物互相配合，得到的洗手液抑菌效果好，甚至与原药材提取物的抑菌效果相当，与现有抑菌洗手液抑菌效果类似。

实施例2

参照实施例1的方法，其中，改变洗手液的配方，得到抑菌洗手液。

洗手液组分：表面活性剂20％(AES:CAB:APG＝6:3:2)，保湿剂(丙二醇)6％，增稠剂2％(增稠剂886:增稠剂524＝1:1)，抑菌活性成分12％(一清药渣提取物4％，桉树提取物4％，金银花提取物4％)，薄荷精油0.1％，其余为水。

制作方法同实施例1，得到抑菌洗手液。

参照实施例1中记载的方法测定该抑菌洗手液对金黄葡萄球菌的抑菌活性，抑菌圈直径为14.0mm。