一种药物组合物及其制备方法和应用
阅读说明：本技术 一种药物组合物及其制备方法和应用 (Pharmaceutical composition and preparation method and application thereof ) 是由 贾雯靖 毕齐茂 赵晓辉 岳会兰 陶吉红 刘丽莹 于 2021-09-10 设计创作，主要内容包括：一种药物组合物及其制备方法和应用,涉及中药组合物技术领域,其该药物组合物中含有60％乙醇提取的党参提取物,制备方法包括浸提：取10～50kg党参,切成2～5cm段,用乙醇冷浸提取,料液比为1:10,提取1～3次,每次一天,混合几次提取液浓缩干燥,得到乙醇提取的浸膏；得到的60％乙醇提取的浸膏用纯水溶解后上D-101大孔吸附树脂柱脱糖；脱糖后的溶液再用60％的乙醇洗脱；洗脱后浓缩干燥得到60％乙醇提取的党参提取物。本发明的有益效果在于：60％乙醇提取的党参提取物具有较好的降低餐后血糖效果。(A pharmaceutical composition and a preparation method and application thereof relate to the technical field of traditional Chinese medicine compositions, wherein the pharmaceutical composition contains a codonopsis pilosula extract extracted by 60% ethanol, and the preparation method comprises the following steps: taking 10-50 kg of codonopsis pilosula, cutting into sections of 2-5 cm, and performing cold soaking extraction by using ethanol, wherein the material-liquid ratio is 1:10, extracting for 1-3 times, mixing extracting solutions for several times each day, concentrating and drying to obtain an ethanol-extracted extract; dissolving the obtained extract with 60% ethanol with pure water, and removing sugar with D-101 macroporous adsorbent resin column; eluting the desugarized solution with 60% ethanol; eluting, concentrating, and drying to obtain radix Codonopsis extract extracted with 60% ethanol. The invention has the beneficial effects that: the codonopsis pilosula extract extracted by 60% ethanol has better effect of reducing postprandial blood sugar.)
技术领域
本发明涉及中药组合物的技术领域，特别是涉及一种药物组合物及其制备方法和应用。
背景技术
血糖是诊断糖尿病的惟一标准，糖尿病的诊断通过空腹血糖大于或等于7.0毫摩尔/升，和/或餐后两小时血糖大于或等于11.1毫摩尔/升即可确诊，目前尚无根治糖尿病的方法，但通过多种治疗手段可以控制好糖尿病，目前也有许多控制血糖活性的药物如阿卡波糖，阿卡波糖是一种葡萄糖苷酶抑制剂，是复杂的低聚糖，其结构类似寡糖。阿卡波糖别名又称为拜糖平，主要是用于糖尿病的治疗。糖尿病作为现在时代的富贵病，需要更多的研究以及药物研制。关于党参在治疗糖尿病的中药配方中经常提到，但党参提取物在治疗糖尿病以及降血糖方面没有详细的研究报道。
发明内容
针对上述问题，本发明提供一种药物组合物及其制备方法和应用，进一步研究党参提取物对降低血糖活性的效果，解决党参提取物在降低血糖和糖尿病治疗方面应用的问题。
本发明提供一种药物组合物及其制备方法和应用，其该药物组合物中含有党参提取物。
进一步地，所述党参提取物为乙醇提取的党参提取物。
进一步地，所述乙醇提取为20％～95％乙醇提取。
进一步地，所述乙醇提取的党参提取物制备方法包括以下步骤：
步骤一、浸提：取10～50kg党参，切成2～5cm段，用乙醇冷浸提取，料液比为1:10，提取1～3次，每次一天，混合几次提取液浓缩干燥，得到乙醇提取的浸膏；
步骤二、脱糖：得到的乙醇提取的浸膏用纯水溶解后上D-101大孔吸附树脂柱脱糖；
步骤三、洗脱：脱糖后的溶液再用乙醇洗脱；
步骤四、浓缩干燥：洗脱后浓缩干燥得到乙醇提取的党参提取物。
进一步地，所述含有党参提取物的药物组合物在制备降血糖药物中的应用。
进一步地，所述降血糖药物可制成片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂或口服液。
进一步地，所述20％～95％乙醇中60％乙醇提取部位的党参提取物降低血糖活性高于其他浓度乙醇提取部位的党参提取物。
本发明的有益效果在于：乙醇提取的党参提取物对降低餐后血糖的研究有建设性的帮助，在临床研究以及制药方面都有很大的作用，特别是60％乙醇提取的党参提取物，实验验证了60％乙醇提取的党参提取物具有较好的降低餐后血糖效果。
附图说明
图1为本发明的α-葡萄糖苷酶抑制活性变化图；
图2为本发明的蔗糖酶抑制活性变化图；
图3为本发明的麦芽糖酶抑制活性变化图；
图4为本发明的淀粉酶抑制活性变化图；
图5为本发明的糖尿病小鼠的口服淀粉耐量血糖变化图；
图6为本发明的糖尿病小鼠的口服蔗糖耐量血糖变化图；
图7为本发明的糖尿病小鼠的口服麦芽糖耐量糖变化图。
具体实施方式
实施例1
本发明提供一种药物组合物及其制备方法和应用，其该药物组合物中含有党参提取物。
进一步地，所述党参提取物为乙醇提取的党参提取物。
进一步地，所述乙醇提取为20％乙醇提取。
进一步地，所述乙醇提取的党参提取物制备方法包括以下步骤：
步骤一、浸提：取20kg党参，切成3cm段，用乙醇冷浸提取，料液比为1:10，提取3次，将3提取液浓缩干燥，得到乙醇提取的浸膏；
步骤二、脱糖：得到的乙醇提取的浸膏用纯水溶解后上D-101大孔吸附树脂柱脱糖；
步骤三、洗脱：脱糖后的溶液再用乙醇洗脱；
步骤四、浓缩干燥：洗脱后浓缩干燥得到乙醇提取的党参提取物。
实施例2
本发明提供一种药物组合物及其制备方法和应用，其该药物组合物中含有党参提取物。
进一步地，所述党参提取物为乙醇提取的党参提取物。
进一步地，所述乙醇提取为60％乙醇提取。
进一步地，所述乙醇提取的党参提取物制备方法包括以下步骤：
步骤一、浸提：取20kg党参，切成3cm段，用乙醇冷浸提取，料液比为1:10，提取3次，将3提取液浓缩干燥，得到乙醇提取的浸膏；
步骤二、脱糖：得到的乙醇提取的浸膏用纯水溶解后上D-101大孔吸附树脂柱脱糖；
步骤三、洗脱：脱糖后的溶液再用乙醇洗脱；
步骤四、浓缩干燥：洗脱后浓缩干燥得到乙醇提取的党参提取物。
实施例3
本发明提供一种药物组合物及其制备方法和应用，其该药物组合物中含有党参提取物。
进一步地，所述党参提取物为乙醇提取的党参提取物。
进一步地，所述乙醇提取为95％乙醇提取。
进一步地，所述乙醇提取的党参提取物制备方法包括以下步骤：
步骤一、浸提：取20kg党参，切成3cm段，用乙醇冷浸提取，料液比为1:10，提取3次，将3提取液浓缩干燥，得到乙醇提取的浸膏；
步骤二、脱糖：得到的乙醇提取的浸膏用纯水溶解后上D-101大孔吸附树脂柱脱糖；
步骤三、洗脱：脱糖后的溶液再用乙醇洗脱；
步骤四、浓缩干燥：洗脱后浓缩干燥得到乙醇提取的党参提取物。
实施例4
根据图1-7所示，本发明提供一种药物组合物及其制备方法和应用，其该药物组合物中含有党参提取物。
通过体外实验和体内实验分别检测20％、60％、95％的乙醇提取的党参提取物的降糖活性。
进一步地，所述体外实验为α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选、蔗糖酶抑制活性筛选、麦芽糖酶抑制活性筛选、α-淀粉酶抑制活性筛选、大鼠小肠糖苷酶的提取及活力测定；所述体内实验为糖尿病小鼠的口服淀粉耐量实验、糖尿病小鼠的口服蔗糖耐量实验、糖尿病小鼠的口服麦芽糖耐量实验。
进一步地，所述α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选方法为：在冰浴条件下，在96孔板里加入50μL 5mg/mL的党参提取物样品和50uL 0.5U/mL的酶液，放入37℃恒温振荡器，100r/min孵育10min，再在冰浴的条件下加入50uL0.5 mmol/mL的p-NPG，然后放入37℃恒温振荡器，100r/min孵育20min，立即投入冰水浴5min，降低酶活性，继续加入0.1mol/L Na2CO3溶液50μL终止反应，重复三次；在409nm的波长下检测，并计算样品对酶的抑制活性，如图1所示。
进一步地，所述蔗糖酶抑制活性筛选方法为：将50μL含有17.5U/mL的酶液和50μL5mg/mL党参提取物样品加入48孔板，在37℃下预孵育10min；然后加入50μL0.5mol/L蔗糖溶液，将该混合物在37℃下孵育20min；立即投入冰水浴5min，降低酶活性，继续加入0.1mol/LNa2CO3溶液50μL终止反应，重复三次；采用葡萄糖试剂盒测定葡萄糖浓度，并计算样品对蔗糖酶的抑制活性，如图2所示。
进一步地，所述麦芽糖酶抑制活性筛选方法为：将50μL含有11.56U/mL的酶液和50μL5mg/mL党参提取物样品加入48孔板，在37℃下预孵育10min；然后，加入50μL1.39mmol/mL麦芽糖溶液，将该混合物在37℃下孵育20min；立即投入冰水浴5min，降低酶活性，继续加入0.1mol/L Na2CO3溶液50μL终止反应，重复三次；采用葡萄糖试剂盒测定葡萄糖浓度，并计算样品对麦芽糖酶的抑制活性，如图3所示。
进一步地，所述α-淀粉酶抑制活性筛选方法为：在冰浴的条件下，在96孔板里加入50μL5mg/mL的党参提取物样品和50μL10U/mL的酶液，放入37℃恒温振荡器，100r/min孵育10min，再在冰浴的条件下加入50μL0.1％(w/v)的淀粉，然后放入37℃恒温振荡器，100r/min孵育20min，立即投入冰水浴5min，降低酶活性，继续加入100μLDNS溶液，100℃下反应5min，重复三次；降至常温后在540nm的波长下检测，并计算样品对酶的抑制活性，如图4所示。
进一步地，所述大鼠小肠糖苷酶的提取及活力测定方法为：大鼠禁食12h后脱颈椎处死，立即取出小肠置冰台上，剖开小肠并翻转暴露肠粘膜，用4℃预冷的PBS冲洗后拭干，用玻片刮取小肠粘膜，按质量体积比1：5加入4℃预冷的PBS中匀浆，再在离心机上以4℃8000r/min离心20min，取上清液分装，-20℃贮备备用；取上清酶液0.1mL加0.35mLPBS，37℃水浴10min，加入0.25mol/L蔗糖或麦芽糖溶液50μL，20min后立即投入冰水浴中5min，继续加入Na2CO3溶液0.5mL终止反应；3孔平行测定，将37℃、pH 6.8条件下，1L溶液中每分钟生成1μmoL葡萄糖定义为1个酶活力单位；酶活力＝糖浓度×2×1000/20。
进一步地，所述体外实验通过20％、60％、95％乙醇提取的党参提取物的α-葡萄糖苷酶抑制活力的比较，发现20％、60％的乙醇提取党参提取物的抑制活力较高，抑制率均在80％以上；并且对党参20％、60％、95％乙醇提取物以及阳性药阿卡波糖进行IC50值的测定，结果发现党参20％、60％、95％乙醇提取物的蔗糖酶的IC50值分别为0.1383、0.2413、0.7169mg/mL，阳性药阿卡波糖IC50值为0.4634μg/mL，对比阳性对照药的IC50值，党参20％、60％、95％的提取物的蔗糖酶抑制活性优于阿卡波糖；党参20％、60％、95％的提取物的麦芽糖IC50值分别为0.2318、0.3258、1.208mg/mL，阳性药阿卡波糖IC50值为0.2525μg/mL，对比阳性对照药的IC50值，党参20％、60％乙醇部位的麦芽糖具有抑制活性。
进一步地，所述糖尿病小鼠的口服淀粉耐量实验方法为：糖尿病小鼠禁食12h，并将小鼠随机分为4组，每组10只小鼠；第1组为对照组：用3g/kg淀粉灌胃糖尿病小鼠；第2组为阳性药组：用8mg/kg阿卡波糖和3g/kg淀粉混合物灌胃糖尿病小鼠；第3-4组为实验组：分别用200mg/kg和600mg/kg的60％乙醇提取的样品和3g/kg淀粉混合物灌胃糖尿病小鼠；在0、30、60和120min时从尾静脉采血，并使用血糖仪测定血糖浓度，通过Prism7.0绘制餐后血糖变化曲线并计算血糖水平曲线下的面积，如图5所示。
进一步地，所述糖尿病小鼠的口服蔗糖耐量实验方法为：糖尿病小鼠禁食12h，并将小鼠随机分为4组，每组10只小鼠；第1组为对照组：用3g/kg蔗糖灌胃糖尿病小鼠；第2组为阳性药组：用8mg/kg阿卡波糖和3g/kg蔗糖混合物灌胃糖尿病小鼠；第3-4组为实验组：分别用200mg/kg和600mg/kg的60％乙醇提取的样品和3g/kg蔗糖混合物灌胃糖尿病小鼠；在0、30、60和120min时从尾静脉采血，并使用血糖仪测定血糖浓度，通过Prism7.0绘制餐后血糖变化曲线并计算血糖水平曲线下的面积，如图6所示。
进一步地，所述糖尿病小鼠的口服麦芽糖耐量实验方法为：糖尿病小鼠禁食12h，并将小鼠随机分为4组，每组10只小鼠；第1组为对照组：用3g/kg麦芽糖灌胃糖尿病小鼠；第2组为阳性药组：用8mg/kg阿卡波糖和3g/kg麦芽糖混合物灌胃糖尿病小鼠；第3-4组为实验组：分别用200mg/kg和600mg/kg的60％乙醇提取的样品和3g/kg麦芽糖混合物灌胃糖尿病小鼠；在0、30、60和120min时从尾静脉采血，并使用血糖仪测定血糖浓度，通过Prism7.0绘制餐后血糖变化曲线并计算血糖水平曲线下的面积，如图7所示。
进一步地，所述体内实验选取体外活性较强的党参60％的乙醇提取物，进行糖尿病小鼠体内降低餐后血糖活性实验，糖尿病小鼠的淀粉、蔗糖、麦芽糖的耐量测试，剂量均3g/kg，对剂量为200mg/kg、600mg/kg的党参60％的乙醇提取物以及8mg/kg阳性药阿卡波糖的餐后降血糖作用进行了评估，实验结果显示，60％乙醇提取的党参提取物具有较好的降低小鼠餐后血糖效果。
实施例5
所述含有60％乙醇提取的党参提取物的降血糖药物制成片剂。
实施例6
所述含有60％乙醇提取的党参提取物的降血糖药物制成丸剂。
实施例7
所述含有60％乙醇提取的党参提取物的降血糖药物制成胶囊剂。
实施例8
所述含有60％乙醇提取的党参提取物的降血糖药物制成颗粒剂。
实施例9
所述含有60％乙醇提取的党参提取物的降血糖药物制成口服液。
- 上一篇：一种医用注射器针头装配设备
- 下一篇：一种修复肾脏损伤的鹅肌肽组合物及其应用