具体实施方式

原料来源及其规格：

1、聚丙烯酰胺，常作为增稠剂，化学式为(C₃H₅NO)n，分子量介于1×10⁴～2×10⁷Da。密度为1.302g/cm³(23℃)。

2、透明质酸钠，化学式为(C₁₄H₂₀NO₁₁Na)n，分子量介于5×10⁵～12×10⁵Da。

是人体内一种固有的成分，是一种葡聚糖醛酸，没有种属特异性，密度为1.78g/cm³。

防腐剂PE9010，苯氧乙醇和乙基己基甘油复配物质，对细菌、酵母菌和霉菌都具有很好的抑制作用，是一种典型的抑菌防腐产品，同时也具有一定的杀菌能力。

1，2丙二醇，化学式C₃H₈O₂，分子量76.09，密度为1.0381g/cm³。可用作不饱和聚酯树脂的原料，在化妆品、牙膏和香皂中可与甘油或山梨醇配合用作润湿剂。

甘油，分子式C₃H₈O₃，分子量92.09，密度1.261g/cm³(20℃)。无色、透明、无臭、粘稠液体，味甜，具有吸湿性。与水和醇类、胺类、酚类以任何比例混溶，水溶液为中性。

玫瑰纯露，是指精油在蒸馏萃取过程中留下来的水。

金莲花花茎提取物的提取

金莲花粗多糖的提取

将金莲花茎干燥后通过粉粹机粉粹后过100目筛并置入热水中浸提1-3次，热水温度为60-90℃，提取时间为1-3h，料液比为1：20～1：60(g/mL)；通过离心取液并进行过滤，然后减压真空浓缩至原有体积的1/10，醇沉后通过离心分离并经低温冷冻干燥后得到金莲花茎多糖，经冷冻干燥后得金莲花粗多糖；

金莲花粗黄酮的提取

将金莲花茎干燥后通过粉粹机粉粹后过100目筛并置入浓度为60V％的乙醇溶液，温度为60-90℃，提取时间为2-5h，料液比为1：30～1：60(g/mL)，提取金莲花花茎粗黄酮，经冷冻干燥后备用得金莲花粗黄酮。

体外保湿率的测定

将金莲花茎复配提取物、壳聚糖、海藻酸钠、透明质酸钠等化妆品常用保湿剂进行保湿活性研究。将其在100℃烘箱中干燥4h后，置于底部加入干燥变色硅胶的干燥器内，每份样品加入20mL蒸馏水，精确称取质量，放置于干燥器内，并将整个干燥器放置于25℃恒温培养箱中，分别于放置2h、4h、8h、10h、12h后用分析天平精确称取质量。

保湿率(％)＝(样品水分的减少量/样品原质量)×100％

体外抗氧化的测定

羟自由基能杀死红细胞，降解DNA、细胞膜和多糖化合物，会对正常细胞造成伤害，同时制造出新的自由基，而引起一连串的化学反应。自由基会毫无选择性的攻击正常细胞和组织，引起连锁性的过氧化反应，使人体出现各种退化性症候群，如血管变脆弱、免疫功能衰退、脑细胞老化、退化性关节炎、白内障、皮肤松弛和全身性的老化现象。因此，本案例以羟基自由基的清除率，来评价金莲花茎复配提取物的抗氧化活性。

在2.5mL pH＝6.6磷酸缓冲溶液中，分别加入金莲花粗黄酮和金莲花粗多糖不同比例的梯度溶液，即粗黄酮与粗多糖比例分别为9∶1，7∶3，5∶4，4∶5，3∶7，1∶9。取不同比例的梯度溶液1.0mL于试管中，分别加入1.0mL 6mmol/L的FeSO₄溶液，再加入1.0mL6mmol/L的双氧水溶液，充分振荡摇匀，静置10min后，再分别加入1.0mL 6mmol/L的水杨酸(以50％酒精作为溶剂)，静置30min后，置于波长510nm处测定吸光度，实验3次取平均值。其中，蒸馏水代替样品溶液作为空白，蒸馏水代替过氧化氢溶液作为样品对照，以抗坏血酸作为阳性对照。以下列公式计算OH自由基清除率，并利用单因素方差分析分析数据。

式中：A₀为蒸馏水代替过氧化氢溶液体系的；A₁为待测样品组的吸光值；A₂为蒸馏水代替样品溶液体系的吸光值。

实施例

金莲花提取物复配比例的确定

金莲花粗黄酮、金莲花粗多糖，按比例复配后，羟基自由基清除率结果如图1所示。当金莲花粗黄酮与金莲花多糖粗提物复配比例(质量比)为7：3时，羟基自由基清除率最高，且均高于未复配的金莲花单一黄酮(即金莲花粗黄酮)、多糖(即金莲花粗多糖)，有较好的抗氧化活性。

金莲花粗黄酮、金莲花粗多糖，按比例复配后，配制成质量分数为5％的浓度，保湿结果如图2所示。当金莲花粗黄酮、多糖粗提物复配比例为7：3时，保湿活性达73.08％±2.4％，且均高于未复配的金莲花单一黄酮、多糖保湿活性，接近5％的甘油保湿率。

申请人惊奇的发现，当金莲花粗黄酮、多糖粗提物复配重量比例为7：3时不仅具有优异的抗氧化活性，而且具有优异的保湿性能。

金莲花保湿面膜中聚丙烯酰胺重量百分比的确定

为了增加产品稳定性，添加乳化剂即聚丙烯酰胺。聚丙烯酰胺分为0.7％、0.5％、0.3％、0.1％四个组别，分别进行精华液的配制，得到的成品按其粘稠度、涂抹时的延伸度、稳定性进行选择，经6人评价后计算综合得分，根据评分的高低，选出最优的配比。感官评价主要通过制定感官评价标准表，制作感官评分表，挑选感官评价人员，对评价人员进行培训，最后对样品进行感官评价，标准如表1所示。

表1感官评价评分标准

金莲花保湿面膜的单因素实验设计

金莲花花茎复配提取物(复配提取物中金莲花粗黄酮、多糖粗提物复配重量比例为7：3)用量的确定将金莲花花茎复配提取物作为变量，其他组分保持不变，按总质量为10g，以重量百分比计算，1，2-丙二醇用量4％，透明质酸钠用量0.3％，甘油用量4％，玫瑰纯露用量4％，余量为去离子水。金莲花花茎复配提取物用作为变量分别取1％、2％、3％、4％、5％，混合物料，放入铝盒中，称量好的铝盒放入装有变色硅胶的干燥器中，12h之后测定其重量。计算其保湿率。

1，2-丙二醇用量的确定

将1，2-丙二醇作为变量，其他组分保持不变，以重量百分比计算，金莲花花茎复配提取物用量为2％，透明质酸钠用量0.3％，甘油用量4％，玫瑰纯露用量4％，余量为去离子水。选用1，2丙二醇为保湿剂，按1，2丙二醇作为变量添加到组分中配制成5组溶液，用量分别为2％、3％、4％、5％、6％，放入铝盒中，称其重量，将铝盒放入12h之后再次称其重量，计算其保湿率。

透明质酸钠用量的确定

将透明质酸钠作为变量，其他组分保持不变，以重量百分比计算，金莲花花茎复配提取物用量为2％，1，2-丙二醇用量为4％，甘油用量4％，玫瑰纯露用量4％，余量为去离子水。选用透明质酸钠为保湿剂，按透明质酸钠作为变量添加到组分中配制成5组溶液，用量分别为0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％，放入铝盒中，称其重量，将铝盒放入12h之后再次称其重量，计算其保湿率。

甘油用量的确定

将甘油作为变量，其他组分保持不变，以重量百分比计算，金莲花花茎复配提取物用量为2％，1，2-丙二醇用量4％，透明质酸钠用量0.3％，纯露用量4％，余量为去离子水。选用甘油为保湿剂，按甘油作为变量添加到组分中配制成5组溶液，用量分别为3％、3.5％、4％、4.5％、5％，放入铝盒中，称其重量，将铝盒放入12h之后再次称其重量，计算其保湿率。

玫瑰纯露用量的确定

将玫瑰纯露作为变量，其他组分保持不变，以重量百分比计算，金莲花花茎复配提取物用量为2％，1，2-丙二醇用量4％，透明质酸钠用量0.3％，余量为去离子水。选用玫瑰纯露为保湿剂和香味剂，按玫瑰纯露作为变量添加到组分中配制成5组溶液，用量分别为2％、3％、4％、5％、6％，放入铝盒中，称其重量，将铝盒放入12h之后再次称其重量，计算其保湿率。

金莲花保湿面膜的正交实验设计

在单因素试验的基础上，以保湿剂和精华液中金莲花提取液的添加量以及玫瑰纯露的添加量做为因素，做L₁₆(4⁵)五因素四水平正交试验，以精华液的保湿率为指标，筛选最优精华液的最佳配方。正交实验因素水平表如表2所示：

表2正交实验因素水平表

金莲花玫瑰保湿面膜的性能评价

耐热、耐寒稳定性试验

取金莲花保湿面膜精华液10.0g装入容量为20mL的试管中，将试管口进行密封处理，将试管置于高温条件下，温度在80℃以上，放置24小时后取出，并在室温条件下放置20分钟后观察其变化情况；同样，将密封好的试管置于低温条件下，温度在-40℃以上，24小时候取出，并在室温条件下观察变化情况。

离心试验

在常温状态下，取金莲花精华液5.0g均分为两组，分别装入5mL的离心管中，置于离心机中以1000、2000、3000、4000、5000r/min的转速离心10min，取出，观察样品是否分层。

性状与细腻度

取金莲花精华液10.0g置于50mL的烧杯中，观察其外观性状。将金莲花精华液涂布于皮肤上，以细腻度为评价指标进行研究。

酸碱度

按照GB/T 13531.1-2008《化妆品通用检测方法》测定样品的pH值。取金莲花精华液10.0g，溶解于100mL蒸馏水中，加热微沸后，冷却至室温，用pH计测定pH值。

皮肤水分测定

利用皮肤水分测试仪，选择10名受试者进行实验，前臂为测试区域；要求受试者无严重系统疾病、免疫缺陷或自身免疫性疾病；无活动性过敏性疾病；对护肤类化妆品无严重过敏史；近1个月内未使用激素类药物及免疫抑制剂；未参加其他临床实验。选择测试环境温度保持(22±1)℃，相对湿度保持(40±5)％。受试者测试前使用35℃左右的清水擦拭双臂，再进入测试环境休息30min后开始测试。测得的数据分为涂抹前，涂抹完成，涂抹15min后，水洗后四部分。

实验结果与讨论

丙烯酰胺的确定

成品配制成功后，密封存放一段时间后，瓶底会出现沉淀为金莲花复配物，为了增加其稳定性，向成品中添加乳化剂即聚丙烯酰胺，聚丙烯酰胺分为保湿面膜总重量的0.7wt％、0.5wt％、0.3wt％和0.1wt％四个组分，分别进行精华液的配制，得到的成品按其拉丝度、涂抹时的延伸度、稳定性进行选择，结果见表3。

表3聚丙烯酰胺感官评价得分

根据感官评价表得分，当聚丙烯酰胺的用量为0.3％时，成品的拉丝性，粘稠度，延展性，稳定性均更好，所以聚丙烯酰胺的用量确定为0.3％。

单因素实验结果分析

金莲花花茎复配提取物添加量对保湿率的影响

由图3可知，当复配物的用量在1％-2％时，保湿率随着复配物用量的增加而升高，用量达到2％-3％时，保湿率随着复配物用量的增加而减小，用量达3％-5％时，保湿率随着复配物用量的增加而增大，但增大的趋势比用量在1％-2％时增大的趋势小，用量在2％时，保湿率达到最高，部分研究证实在实验中指出保湿性与亲水基团的数量和亲水性的强弱有关，浓度越高含有的羟基数量越多，会减弱和氢键的结合能力，使保湿率下降，研究表明保湿率在浓度超过5％后会呈明显下降趋势。因此确定复配物添加量选择2％作为单因素指标。

1，2-丙二醇添加量对保湿率的影响

由图4可知，当1，2丙二醇的用量在1％-3％时，保湿率随着用量的增大而减小，当1，2丙二醇的用量在3％-5％时，保湿率随着用量的增大而增大，当用量达到5％时，保湿率最高，且部分文献报道1，2丙二醇的用量一般不超过5％，因此确定1，2丙二醇添加量为5％作为单因素指标。

透明质酸钠添加量对保湿率的影响

由图5可知，当透明质酸钠的用量小于0.5％时，保湿率随着用量的增加而增大，所以当用量在0.5％时，保湿率最高，由于透明质酸钠的成本价格较高，因此为了节约成本选择用量在0.5％，具体用量通过正交试验确定。

甘油添加量对保湿率的影响

由图6可知，当甘油用量在3％-3.5％时，保湿率随着甘油用量的增加而减小，当用量在3.5％-4.5％范围时，保湿率随着甘油用量的增加而呈现上升的趋势。当甘油用量达到5％时，保湿率随着甘油用量的增加而逐渐减小。所以甘油用量添加量为4.5％作为单因素指标。

玫瑰纯露添加量对保湿率的影响

如图7所示，当纯露用量达到4％时，保湿率随着纯露用量的升高在一直增大，当用量在4％-5％时，保湿率逐渐减小，当用量超过5％达到6％时，保湿率逐渐增大，但增大幅度减小，所以，当用量达到4％时，保湿率达到最大。由于纯露又作为精华液中的香精成分，浓度较大的话会影响面膜整体香气，因此选择纯露添加量为4％作为单因素指标。

正交实验及验证实验结果分析

正交实验结果分析

在单因素的基础上，对面膜配方进行优化，设计五因素四水平L16(4⁵)的正交试验具体实验结果见表4：

表4正交实验结果

在复配物、透明质酸钠、甘油、纯露、1,2丙二醇单因素实验基础上，进行五因素四水平的正交实验，得到保湿率的正交实验结果表如表4所示，根据表4的正交试验结果显示，通过比较各列的极差结果R值，可以发现D>C>B>E>A，在试验所设定的因素中，甘油对面膜保湿率影响最大，其次是透明质酸钠、1，2-丙二醇、纯露、复配物，而纯露对面膜保湿率影响最小。通过对k值的比较，确定最佳组合为A₄B₂C₂D₂E₄，表格中未列出，经验证试验确定保湿率为99.12％±3.42％，略差于正交表中A₄B₄C₁D₃E₂组合。因此选用A₄B₄C₁D₃E₂组合为最优水平，既金莲花复配物添加量2.5％、1，2-丙二醇添加量6.0％、透明质酸钠添加量0.6％，甘油添加量4.0％，纯露添加量4.0％，保湿率可达99.30％。

面膜的稳定性及性能评价结果

按照正交试验最优配方(A₄B₄C₁D₃E₂)配制面膜产品，其稳定性结果见表5，面膜的耐寒与耐热性较好，离心后未分层，稳定性良好，产品颜色呈淡褐色，有淡淡的玫瑰香气，成品较为均匀且质地较为细腻，pH值为7.27，呈弱碱性。

表5面膜稳定性评价结果

金莲花玫瑰保湿面膜与传统面膜对比结果

保湿率测定

将本产品与其他四款产品进行对比，在铝盒中放入相同量的五种不同产品并全部放入干燥器中，2h和4h后分别测量五种产品的保湿率并进行对比，结果如表6所示。

表6样品与四款产品保湿率对比

经试验分析，1产品和3产品在刚使用时效果较好，但保湿率下降较快。2号和4产品虽然前期保湿率比1号和3号低，但保湿率下降较慢，4h后保湿率相对较高。而本产品前期的保湿率均高于其他四款产品，4h后的保湿率也比其他四款高。综上所述，本产品相比较于其他几种保湿精华液，保湿效果较好。其他四款产品中，2号和4号保湿效果相当，略高于1号和3号，最后选取1号产品与本产品进行水分测试对比。

选择测试环境温度保持(22±1)℃，相对湿度保持(40±5)％。受试者测试前使用35℃左右的清水擦拭双臂，再进入测试环境休息30min后开始测试。测得的数据分为涂抹前，涂抹后，涂抹15min后，水洗后四部分。受试者左手涂抹对比产品，右手涂抹本产品，测试结果如表7所示：

表7产品皮肤水分测试对比表

由图8可知，本产品与对比产品经测试者涂抹后，显示保湿效果较好。涂抹15min后，本产品与对照产品保湿率接近，但两种产品的保湿率差在缩小，水洗后本产品的保湿率以及稳定性也明显偏高于对比产品。由此可以分析，本产品刚涂抹至清洗后，整体保湿率都优于对照产品。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。