一种7-adca回收方法
阅读说明：本技术 一种7-adca回收方法 (7-ADCA recovery method ) 是由 杜二洪 宋迎权 郑国荣 方金凤 徐成苗 求满金 何丽 胡敏 于 2021-08-30 设计创作，主要内容包括：本申请提供一种7-ADCA回收方法,属于杂环化合物技术领域。取头孢羟氨苄结晶后的母液,升温至10～30℃,将母液pH调节至7.0～8.0,加入EDTA,搅拌；加入固定化酶,维持pH在7.0～8.0,温度10～30℃,搅拌至头孢羟氨苄浓度不超过0.5mg/ml；分离去除固定化酶,分离所得溶液脱色、过滤；滤液pH调节至5.0～6.0,控制温度为10～30℃,养晶；过滤分离,采用漂洗湿品,即得7-ACDA,纯度98.5%以上。该技术路线绿色环保,操作简单,收率高,稳定可靠,优势明显。(The application provides a 7-ADCA recovery method, and belongs to the technical field of heterocyclic compounds. Taking mother liquor after cefadroxil crystallization, heating to 10-30 ℃, adjusting the pH of the mother liquor to 7.0-8.0, adding EDTA, and stirring; adding an immobilized enzyme, maintaining the pH value at 7.0-8.0 and the temperature at 10-30 ℃, and stirring until the concentration of cefadroxil is not more than 0.5 mg/ml; separating to remove immobilized enzyme, decolorizing the separated solution, and filtering; adjusting the pH value of the filtrate to 5.0-6.0, controlling the temperature to be 10-30 ℃, and growing the crystals; filtering and separating, and rinsing the wet product to obtain 7-ACDA with purity of over 98.5%. The technical route is green and environment-friendly, the operation is simple, the yield is high, the stability and the reliability are realized, and the advantages are obvious.)
技术领域
本申请涉及一种7-ADCA回收方法，属于杂环化合物技术领域。
背景技术
头孢羟氨苄(cefadroxil)为第一代口服头孢菌素，抗菌谱广，口服药效好，用于葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌、大肠杆菌等引起的泌尿系统、呼吸道、皮肤、五官及胃肠道感染等的治疗。传统的合成方法主要通过7-ADCA(7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸)母核与D-对羟基苯甘氨酸邓盐与特戊酰氯在液氮深冷条件下混酐物进行酰化缩合，在通过酸水解、大量DMF溶剂制成头孢羟氨苄DMF复合物，再进行水相转晶得到头孢羟氨苄，整个过程使用二氯甲烷、四甲基胍、DMF等大量溶剂，反应条件苛刻，且污染大。因采用两次结晶，收率比较低。近年来随着生物技术，尤其是酶催化技术的迅速发展，部分化学合成条件苛刻的反应可以采用酶法在水相、亲水相、甚至有机相体系中进行反应成为可能。
青霉素G酰化酶是已经应用比较成功的酶，采用青霉素G酰化酶在水相中，以7-ADCA母核和D-对羟基苯甘氨酸甲酯为侧链，常温条件下就能催化合成头孢羟氨苄，得到产品质量高，已经有研究报道。但目前研究报道针对结晶后的头孢羟氨苄母液仍采用2-萘酚或者萘酚类似物的方式制备成头孢羟氨苄复合物进行回收。一方面头孢羟氨苄萘酚复合物的进一步提纯仍需要使用有机溶剂，污染仍然存在，另一方面萘酚或萘酚类似物的回收头孢羟氨苄萘酚复合物回收率不高，收率偏低。
发明内容
有鉴于此，本申请提供一种7-ADCA回收方法，采用生物酶法将母液中的头孢羟氨苄催化回到起始物料7-ADCA母核，进行循环再利用技术路线。因7-ADCA结晶液的残留浓度更低，极大的提升收率，且产品质量更优，污染更少。
具体地，本申请是通过以下方案实现的：
一种7-ADCA回收方法，包括以下步骤：
(1)取酶法头孢羟氨苄工艺路线制备的头孢羟氨苄结晶后的母液，置入带搅拌的反应器中，并将母液pH调节至7.0～8.0，升温至10～30℃，加入EDTA，搅拌速度50～70rpm，搅拌30min备用；
(2)生物反应器中加入固定化酶，维持pH在7.0～8.0，温度10～30℃，每隔1小时取样检，采用高效液相色谱检测头孢羟氨苄的残留浓度，当反应至头孢羟氨苄浓度不超过0.5mg/ml，再延长30min，进行分离；
(3)分离去除固定化酶，固定化酶颗粒截留在过滤筛网上，可直接回用至步骤(2)，料液通过筛网后，脱色30分钟以上，过滤；
(4)滤液加入盐酸调节pH至5.0～6.0，控制温度为10～30℃，养晶；
(5)过滤分离，采用漂洗湿品，即得7-ACDA。
本申请对头孢羟氨苄结晶母液进行回收并得到可回用的7-ADCA，首先将头孢羟氨苄母液pH调至7.0～8.0，并升温至10～30℃，经简单预处理后，在带有过滤器、搅拌器等部件的生物反应器内，以固定化(生物)酶水解母液中残留的头孢羟氨苄，得到7-ADCA母核，再经养晶处理、甲醇或乙醇简单漂洗，即可获得母核7-ADCA湿品，纯度98.5％以上。该技术路线绿色环保，操作简单；与传统回收路线(通过2-萘酚或者萘酚类似物回收母液中头孢羟氨苄萘酚复合物，再经过有机溶剂提纯)所存在的存在收率差、有机溶剂使用量大等问题相比，本申请回收路线稳定可靠，优势明显；回收得到的上述7-ADCA湿品可直接应用于酶法酰化合成反应中，实现全酶法循环制备头孢羟氨苄路径。
进一步的，作为优选：
步骤(1)中，头孢羟氨苄浓度约为15～20mg/ml，此时头孢羟氨苄在结晶后母液中呈饱和浓度，母液pH＝4.0～5.0，t＝0～20℃。
步骤(1)中，EDTA为头孢羟氨苄总量(体积*浓度)的0.01～0.10倍(g/g)，EDTA作为配合剂，去除原辅料及设备可能的重金属对生物酶的影响。
步骤(1)中还添加有亚硫酸钠，亚硫酸氢钠为头孢羟氨苄的0.01～0.10倍(g/g)。
步骤(1)中，pH采用氨水或者碳酸氢钠调节。
步骤(2)中，固定化酶为头孢羟氨苄总量的0.9～3.0倍(g/g)。
步骤(3)中，脱色采用药用炭，炭量为头孢羟氨苄总量的0.02～0.05倍(g/g)。
步骤(4)中，养晶过程如下：先调pH＝6.0，养晶5min；继续用盐酸调pH＝5.9，养晶5min，以此类推直至养出晶体；或者在pH＝6.0时，直接投入适量晶种。养晶结束后，调pH至3.0～4.0，继续搅拌30～60min。
步骤(5)中，漂洗采用甲醇或乙醇，甲醇添加量为头孢羟氨苄总量的0～3.0倍(g/g)，乙醇添加量为头孢羟氨苄总量的0～3.0倍(g/g)。
与现有技术相比，发明具备如下优势：
头孢羟氨苄母液通过萘酚或萘酚类似物进行回收，进一步提纯套用，摩尔收率83.8％；该发明路线，通过固定化酶1(水解酶)催化头孢羟氨苄生成7-ADCA母核，在进行结晶提固体继续采用固定化酶2(酰化酶)合成头孢羟氨苄工艺路线摩尔收率93.3％；该发明路线收率提升9.5％，且因不使用萘酚及有机溶剂提纯，产品质量明显提升。另外因有机溶剂不使用，仅为一般水相即可，操作方便，安全环保效益更明显。
上述回收工艺对固定化酶1(水解酶)路线进行催化合成7-ADCA母核进行说明，7-ADCA母核进一步在采用固定化酶2(酰化酶)催化合成头孢羟氨苄不再进行详细说明。
上述过程的反应路线可描述如下：
上述反应式(1)中，头孢羟氨苄母液通过固定化酶1(水解酶)催化回收7-ADCA，再进一步通过固定化酶2(酰化酶)合成头孢羟氨苄工艺路线。
而母液如上述反应式(2)介绍，通过螯合法回收合成头孢羟氨苄路线。
具体实施方式
下面结合具体实施例子对本发明进一步描述。
实施案例中固定化生物酶购自广州源恒医药科技有限公司，型号IPA-SPIII；其余原辅料均可市购获得。
实施例1：预处理中助剂投加量对反应效果的影响
预处理过程中，助剂主要包括两个：EDTA和亚硫酸氢钠。
以下结合具体回收过程，首先对EDTA投加量的影响进行实验。
(1)带搅拌的反应器中加入酶法头孢羟氨苄工艺路线制备的头孢羟氨苄结晶后的母液1000ml，头孢羟氨苄浓度约15mg/ml，升温至15℃，控制EDTA投加量，亚硫酸氢钠0.20g，用氨水将母液调pH＝7.0，搅拌备用。
(2)自行设计的生物反应器，向生物反应器中投入适量的固定化生物酶15g，放入(1)配置的料液，酶反应用氨水维持pH 7.0，温度15℃，每隔1小时取样检，采用高效液相色谱检测头孢羟氨苄的残留浓度，待残留浓度不超过0.5mg/ml，在延长30min，进行分离。
(3)固定化酶颗粒截留在过滤筛网上，可直接投入下批(1)进行反应，料液通过筛网进行下一步工序。
(4)投入适量药用炭脱色30分钟以上，过滤。
(5)过滤液加入，养晶30分钟。过程按照以下操作：先调pH＝6.0，养晶5min，未出现固体，继续用盐酸调pH＝5.9，养晶5min，以此类推直至养出晶体，也可在pH＝6.0加入适量晶种。养晶结束后用盐酸继续调pH＝3.0，调毕继续搅拌60min。
(6)过滤分离，湿品用15g甲醇漂洗，得到7-ADCA湿品；
(7)得到7-ADCA可作为起始物料继续使用。
EDTA投加量的影响汇总如表1所示。
表1不同EDTA投加量对反应效果的影响
在反应过程中，EDTA作为预处理剂，其作用效果主要体现在对酶反应时间的影响，使用的原辅料为常规化工品，会带来一定的金属离子，影响酶的催化活性。以表1为例，相同条件下，随着EDTA添加量(EDTA相对母液中头孢羟氨苄质量的倍数)的增加，酶反应时间逐步缩短，因7-ADCA是氮杂环类物质，容易降解，因此反应时间越短得到7-ADCA湿品的外观越好，表现为外观由淡黄色湿品变成类白色湿品；湿品重量降低是因为含量增加，7-ADCA湿品粘性程度逐渐降低。7-ADCA含量(折纯含量/湿品总重)呈递增趋势。该改善状态在EDTA添加量在0.15g(即EDTA投加量为母液中头孢羟氨苄质量的0.01倍)以上时，改善效果较为显著；当EDTA添加量递增至头孢羟氨苄质量的0.09倍(表1中的序号13至14附近时)，该改善趋势趋于平滑，并在EDTA添加量递增至头孢羟氨苄质量的0.1倍(表1中的序号13时)时，达到最佳；继续增加EDTA投加量，对7-ADCA湿品回收效果改善不明显。
母液中头孢羟氨苄浓度从15～20(以15、16、17、18、19、20为代表)mg/ml，上述趋势仍然存在，可见：在7-ADCA回收过程中，适宜将EDTA添加量控制在头孢羟氨苄质量的0.01～0.10倍，尤以0.08～0.10(1.2g～1.5g)倍时最佳。
在预处理过程中，亚硫酸氢钠作为抗氧化剂，亚硫酸氢钠添加量主要影响料液颜色及回收7-ADCA外观性状，其影响趋势表现为：亚硫酸氢钠投加量在母液中头孢羟氨苄质量的0.01倍以下时，料液颜色较深，得到的7-ADCA颜色呈现黄色至淡黄色，外观性状改善效果并不明显；当亚硫酸氢钠投加量提高到母液中头孢羟氨苄质量的0.01倍以上，特别是亚硫酸氢钠投加量在母液中头孢羟氨苄质量的0.013-0.05倍时，料液颜色逐渐变浅，得到回收7-ADCA外观改善逐渐趋于类白色，并在亚硫酸氢钠投加量在母液中头孢羟氨苄质量的0.05-0.10倍时达到最优，在继续添加自0.10以上，外观颜色趋于稳定，并未见明显变化。
两种助剂除上述影响外，添加比之间还适宜控制在EDTA投加量：亚硫酸氢钠(g/g)投加量为1:1～1.7时，具有最佳效果，具体参见表2所示。
表2不同助剂投加比对反应效果的影响
EDTA添加量对酶活影响取决于EDTA去除金属离子程度，金属离子对酶构型产生影响，间接影响酶反应时间。头孢类物质容易发生降解，酶反应时间越长，料液颜色越深，得到7-ADCA外观性状表现为颜色越深，含量及纯度就越低，因此期望酶反应时间越短越优；另一方面亚硫酸氢钠作为抗氧化剂，添加适宜的量有利于料液的保护，氧化程度降低，料液颜色及7-ADCA颜色趋于改善。我们以最佳配比(EDTA/NaHSO4，g/g)1.0～1.7得到7-ADCA外观性状类白色、含量及纯度最佳。
实施例2：预处理中参数对反应效果的影响
酶催化反应需要在适宜的温度下才能表现出最佳催化活性。温度过低，酶活性表现不高，主要温度影响底物分子与酶活性催化中心的接触概率，温度越高，分子运动越剧烈，接触催化中心的概率越高，另一方面，温度过高，又会改变酶分子的空间构象，变性失活。同时过高的温度导致头孢类降解加快，颜色变深，因此需要对料液进行温度预处理在合适范围。本步骤的预处理是为下一步酶反应提供合适条件，因此温度对酶活性进行实验，具体见表3。
表3不同温度对固定化酶活性影响
序号
温度℃
酶活U/g
1
10
355
2
15
393
3
20
415
4
25
440
5
30
450
于不同温度，pH＝8.0的缓冲盐体系中1g固定化水解酶(湿品)每分钟催化水解青霉素钾盐转化成6-APA和苯乙酸的量，用氢氧化钠标准溶液滴定苯乙酸,根据NaOH的消耗量计算即为固定化水解酶的活力。
计算公式：
上式中：
X：本品的酶活力(28℃、以湿品计)，U/g；
C：氢氧化钠滴定液的实际浓度，mol/L；
V：本品消耗氢氧化钠滴定液的体积，ml；
m：样品的质量，g；
t：滴定时间，min。
根据酶活测定实验，在测试范围内固定化酶酶活性随着温度增加酶活增加，在25℃以后趋于平缓，考虑料液本身在高温下不稳定，因此选择10～30℃范围内，最佳20℃。
pH值是影响酶活性的另一个重要因素，pH值过高、过低都会导致酶失去活性。在20℃，不同pH值条件下测定酶活性。
表4不同pH值对酶活性的影响
序号
pH
酶活U/g
1
6.0
182
2
6.5
330
3
7.0
423
4
7.5
480
5
8.0
450
6
8.5
427
于20℃，不同pH缓冲盐体系中1g固定化水解酶(湿品)每分钟催化水解青霉素钾盐转化成6-APA和苯乙酸的量，用氢氧化钠标准溶液滴定苯乙酸,根据NaOH的消耗量计算即为固定化水解酶的活力。
计算公式：
上式中：
X：本品的酶活力(20℃，以湿品计)，U/g；
C：氢氧化钠滴定液的实际浓度，mol/L；
V：本品消耗氢氧化钠滴定液的体积，ml；
m：样品的质量，g；
t：滴定时间，min。
在pH＝6.0～7.5，酶活性随着pH增加而增加，在pH＝7.5～8.0趋于下降，在pH＝8.0以上下降明显，同时考虑酶活及料液在碱性条件下得降解行为，选择pH＝7.0～8.0，最佳pH＝7.0。
pH的调节试剂有很多种，以采用氨水、碳酸钠、碳酸氢钠、三乙胺、二乙胺等，综合考虑原材料成本，选择氨水及碳酸氢钠最佳。
实施例3：固定化酶投加量对反应效果的影响
固定化酶作为催化剂，在反应过程中提供活性催化中心，投入量多少影响酶反应时间，是产品质量及成本的关键因素。
以下结合具体回收过程，首先对固定化酶投加量的影响进行实验。
(1)带搅拌的反应器中加入酶法头孢羟氨苄工艺路线制备的头孢羟氨苄结晶后的母液1000ml，头孢羟氨苄浓度约15mg/ml，升温至20℃，控制EDTA投加量，亚硫酸氢钠0.80g，用氨水将母液调pH＝7.0，搅拌备用。
(2)自行设计的生物反应器，向生物反应器中投入适量的固定化生物酶12.75g～45g，放入(1)配置的料液，酶反应用氨水维持pH 7.0，温度20℃，每隔1小时取样检，采用高效液相色谱检测头孢羟氨苄的残留浓度，待残留浓度不超过0.5mg/ml，在延长30min，进行分离。
(3)固定化酶颗粒截留在过滤筛网上，可直接投入下批(1)进行反应，料液通过筛网进行下一步工序。
(4)投入适量药用炭脱色30分钟以上，过滤。
(5)过滤液加入，养晶30分钟。过程按照以下操作：先调pH＝6.0，养晶5min，未出现固体，继续用盐酸调pH＝5.9，养晶5min，以此类推直至养出晶体，也可在pH＝6.0加入适量晶种。养晶结束后用盐酸继续调pH＝3.0，调毕继续搅拌60min。
(6)过滤分离，湿品用15g甲醇漂洗，得到7-ADCA湿品；
(7)得到7-ADCA可作为起始物料继续使用。
表5不同固定化酶投加比对反应效果的影响
固定化酶投料随着比例由0.75～2.0倍增加，反应时间缩短，因时间缩短，得到料液颜色及7-ADCA颜色外观得到改善，含量及纯度也得到改善。当固定化酶投料比继续增加到2.0～3.0倍，反应时间不再出现继续缩短趋势，含量及纯度趋于平稳，因体系中固定化酶提高的催化中心过量，不再起到加快反应速度的作用。因此固定化酶投料比范围0.85～3.0倍，最佳投比2.0倍。
实施例4：养晶方式对湿品的影响
7-ADCA属于反应结晶，分为反应过程、结晶析出两步，因此结晶过程比较重要，直接对7-ADCA质量产生影响。养晶可采用逐格递减pH来找到最佳的介稳定区进行养晶，但这种方式容易爆发成核，导致7-ADCA比较粘稠，也可以采用添加晶种进行引导，在恒pH下进行养晶。
以下结合具体回收过程，对养晶方式进行实验。
(1)带搅拌的反应器中加入酶法头孢羟氨苄工艺路线制备的头孢羟氨苄结晶后的母液1000ml，头孢羟氨苄浓度约15mg/ml，升温至20℃，控制EDTA投加量，亚硫酸氢钠0.80g，用氨水将母液调pH＝7.0，搅拌备用。
(2)自行设计的生物反应器，向生物反应器中投入适量的固定化生物酶30g，放入(1)配置的料液，酶反应用氨水维持pH 7.0，温度20℃，每隔1小时取样检，采用高效液相色谱检测头孢羟氨苄的残留浓度，待残留浓度不超过0.5mg/ml，在延长30min，进行分离。
(3)固定化酶颗粒截留在过滤筛网上，可直接投入下批(1)进行反应，料液通过筛网进行下一步工序。
(4)投入适量药用炭脱色30分钟以上，过滤。
(5)过滤液加入，养晶30分钟。过程按照以下操作：①先调pH＝6.0，养晶5min，未出现固体，继续用盐酸调pH＝5.9，养晶5min，以此类推直至养出晶体；②在pH＝6.0加入适量晶种。养晶结束后用盐酸继续调pH＝3.0，调毕继续搅拌60min。
(6)过滤分离，湿品用15g甲醇漂洗，得到7-ADCA湿品；
(7)得到7-ADCA可作为起始物料继续使用。
表6不同结晶方式对7-ADCA质量的影响
采用①结晶方式，需要找到合适的介稳区养晶，但往往在调pH过程容易出现爆发析晶，表6实验在ΔPH＝0.1较窄范围出现了爆发析晶。选择②的结晶方式，在pH＝6.0投入0.5％7-ADCA晶种介导，析出过程平稳，得到的7-ADCA外观粘性改善,比较松散，且含量及纯度最高。因此选择在pH＝6.0投入0.5％7-ADCA晶种介导进行养晶。
实施例5：漂洗对湿品的影响
得到7-ADCA湿品，可以采用适当的溶剂进行漂洗，进一步去除杂质和颜色，考虑在7-ADCA合成头孢羟氨苄酶法工艺中，侧链采用甲酯或者乙酯，为不引进新的溶剂，所以选择采用1～3倍甲醇或者乙醇进行漂洗。
以下结合具体回收过程，对漂洗方式进行实验。
(1)带搅拌的反应器中加入酶法头孢羟氨苄工艺路线制备的头孢羟氨苄结晶后的母液1000ml，头孢羟氨苄浓度约16mg/ml，升温至30℃，加入EDTA 0.20g，亚硫酸氢钠0.20g，用氨水将母液调pH＝8.0，搅拌备用。
(2)自行设计的生物反应器(生物反应器由特别设计的可变速机械搅拌、分离网、气管等部件组成)，向生物反应器中投入适量的固定化生物酶15g，放入(1)配置的料液，酶反应用氨水维持pH 8.0，温度30℃，每隔1小时取样检，采用高效液相色谱检测头孢羟氨苄的残留浓度，待残留浓度不超过0.5mg/ml，在延长30min，进行分离。
(3)固定化酶颗粒截留在过滤筛网上，可直接投入下批(1)进行反应，料液通过筛网进行下一步工序。
(4)投入适量药用炭脱色30分钟以上，过滤。
(5)过滤液加入盐酸调pH，温度30℃，养晶30分钟。过程按照以下操作：先调pH＝5.0，养晶5min，未出现固体，继续用盐酸调pH＝4.9，养晶5min，以此类推直至养出晶体，也可在pH＝5.0加入适量晶种。养晶结束后用盐酸继续调pH＝3.0，调毕继续搅拌60min。
(6)过滤分离，湿品用1～3倍甲醇或者乙醇漂洗，得到7-ADCA类白色湿品11.9g(湿品含量72.8％)，纯度98.8％；
(7)得到7-ADCA可作为起始物料继续使用。
表7不同漂洗方式对7-ADCA质量的影响
甲醇、乙醇均能作为漂洗溶剂进行漂洗，漂洗量1.0～3.0倍均能进一步提升含量和纯度，外观性状颜色得到改善，考虑到成本最佳投料比1.0。
实施例6：典型条件实施例
(1)带搅拌的反应器中加入酶法头孢羟氨苄工艺路线制备的头孢羟氨苄结晶后的母液1000ml，头孢羟氨苄浓度约15mg/ml，升温至20℃，加入EDTA 0.80g，亚硫酸氢钠0.80g，用氨水将母液调pH＝7.0，搅拌备用。
(2)自行设计的生物反应器，向生物反应器中投入适量的固定化生物酶30g，放入(1)配置的料液，酶反应用氨水维持pH 7.0，温度20℃，每隔1小时取样检，采用高效液相色谱检测头孢羟氨苄的残留浓度，待残留浓度不超过0.5mg/ml，在延长30min，进行分离。
(3)固定化酶颗粒截留在过滤筛网上，可直接投入下批(1)进行反应，料液通过筛网进行下一步工序。
(4)投入适量药用炭脱色30分钟以上，过滤。
(5)过滤液加入盐酸调pH，温度30℃，在pH＝6.0加入0.5％晶种。养晶结束后用盐酸继续调pH＝3.0，调毕继续搅拌60min。
(6)过滤分离，湿品用15g甲醇漂洗，得到7-ADCA类白色湿品11.9g(湿品含量73％)，纯度98.9％；
(7)得到7-ADCA可作为起始物料继续使用。
从上述实施例1-7可以看出：通过本申请回收路线，能够得到质量较好的7-ADCA母核，可以用于继续合成头孢羟氨苄。
对比例
以头孢羟氨苄母液通过萘酚或萘酚类似物作为对比。
其回收路线和参数描述如下：
(1)头孢羟氨苄母液，pH＝4.5～5.0,投入1.5倍2-萘酚，常温搅拌1h，降温到10℃以下继续搅拌2h，抽滤得到头孢羟氨苄萘酚复合物；
(2)头孢羟氨苄萘酚复合物投入2倍水、2倍二氯甲烷、0.5倍DMF，调pH＝1.00～1.20，搅拌溶清后，静置30min，分层，得到水层为头孢羟氨苄溶解液，套入。
两者头孢羟氨苄母液回收方式对比
表8两种头孢羟氨苄母液回收方式对比
母液酶法回收路线如上述反应式(2)所示，将母液中头孢羟氨苄转化成7-ADCA进行回收，母液螯合路线回收即反应式(1)是将母液中头孢羟氨苄进行回收。两者路线不一致，目标产物也不一致。因此将螯合路线回收头孢羟氨苄过程转化成7-ADCA，进行比较。
母液酶法回收路线如上述反应式(1)所示，7-ADCA结晶总回收率85.1％,母液螯合路线即反应式(2)回收头孢羟氨苄回折算成7-ADCA收率仅有47％；酶法回收路线优势明显。主要因酶法回收7-ADCA最大程度将物料损失转化成7-ADCA，7-ADCA通过结晶，饱和浓度低于0.5mg/ml，残留量低；而螯合路线头孢羟氨苄萘酚螯合物饱和浓度大于5mg/ml，无法拿出来，损失比较大(头孢羟氨苄33％损失)。另外在后续有机溶剂除杂过程，有机层带走部分产品等。因此从收率角度，酶法回收7-ADCA路线更具优势。
上述回收物分别采用如下路线进行套用。
反应式(2)中头孢羟氨苄母液通过萘酚或萘酚类似物进行回收，进一步提纯套用，摩尔收率83.8％(实际产品/理论产量)；而本申请反应式(1)反映的回收方法得到的7-ADCA湿品继续采用固定化酶2(酰化酶)合成头孢羟氨苄的工艺路线摩尔收率93.3％(实际产品/理论产量)；较传统回收路线的收率提升9.5％，且因不使用萘酚及有机溶剂提纯，产品质量明显提升。另外因有机溶剂不使用，仅为一般水相即可，环操作方便，安全环保效益更明显。
表9两种头孢羟氨苄路线对比
路线
7-ADCAg
头孢羟氨苄g
质量收率
摩尔收率
1
60
99
1.65
93.3％
2
60
89.7
1.52
83.8％
路线1即反应式(1)：
路线2即反应式(2)：
质量收率＝(头孢羟氨苄重量+(产出头孢羟氨苄萘酚复合物*含量-投入头孢羟氨苄萘酚复合物*含量))/投入7-ADCA重量
以上对本发明做了详尽的描述，目的是让熟悉该领域技术人员本发明的内容，本发明不限于以上实施案例，凡是根据本发明的精神实质所做的等效变化或者修饰，都应涵盖在本发明的保护范围之内。