一种猪用桃叶发酵饲料添加剂的制备方法
阅读说明：本技术 一种猪用桃叶发酵饲料添加剂的制备方法 (Preparation method of peach leaf fermented feed additive for pigs ) 是由 陈军 彭孝杰 叶玲 杨杨 郭苹 杨剑波 于 2021-09-16 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种猪用桃叶发酵饲料添加剂的制备方法,该方法包括：(1)配制含牛肉膏8-15g、蛋白胨5-12g、三水乙酸钠3-5g、P酸氢二钾、柠檬酸二胺2-3g、酵母膏2-5g、800-1200ml蒸馏水、琼脂20-30g的乳酸杆菌培养基；(2)通过在乳酸杆菌培养基中接种乳酸菌菌液,将接种后的乳酸杆菌培养基分离获得猪肠道乳酸杆菌和猪唾液乳酸杆菌,并混合制得乳酸杆菌菌种；(3)将桃叶粉碎后拌入麦麸得到桃叶麦麸混合物,将桃叶麦麸混合物与水以1:1浸泡,并添加乳酸杆菌菌种后发酵；(4)将发酵后产物烘干制得猪用桃叶发酵饲料添加剂。本发明桃叶发酵饲料添加剂消除了未发酵桃叶引起猪氰酸中毒的风险,且起到了促生长的作用。(The invention discloses a preparation method of a peach leaf fermented feed additive for pigs, which comprises the following steps: (1) preparing a lactobacillus culture medium containing 8-15g of beef extract, 5-12g of peptone, 3-5g of sodium acetate trihydrate, dipotassium hydrogen phosphate, 2-3g of diamine citrate, 2-5g of yeast extract, 1200ml of distilled water and 20-30g of agar; (2) inoculating lactobacillus liquid in a lactobacillus culture medium, separating the inoculated lactobacillus culture medium to obtain porcine intestinal lactobacillus and porcine salivary lactobacillus, and mixing to obtain lactobacillus strains; (3) crushing peach leaves, mixing with wheat bran to obtain a peach leaf and wheat bran mixture, soaking the peach leaf and wheat bran mixture with water at a ratio of 1:1, adding lactobacillus strains, and fermenting; (4) and drying the fermented product to obtain the peach leaf fermented feed additive for pigs. The peach leaf fermented feed additive eliminates the risk of swine cyanic acid poisoning caused by unfermented peach leaves, and plays a role in promoting growth.)
技术领域
本发明涉及畜牧业中猪用饲料添加剂的制备方法，尤其涉及一种猪用桃叶发酵饲料添加剂的制备方法。
背景技术
桃叶作为猪用饲料添加剂，具有驱虫保健，促进生长的效果。桃叶是蔷薇科植物桃的叶子，每年夏秋采摘，鲜用或晒干。叶片多卷缩成条状，湿润展平后呈长圆状披针形。先端渐尖，基部宽楔形，边缘具细锯齿或粗锯齿。桃叶中含三十一烷，β-谷甾醇及其葡萄糖甙，熊果酸，消旋扁桃酸，槲皮素，紫云英甙，蜡梅甙，山柰素-3-双葡萄糖甙，桃皮素，柚皮素，香橙素，橙皮素，桃皮素-5-β-D-吡喃葡萄糖甙，橙皮素-5-O-β-D-吡喃葡萄糖甙，右旋儿茶酚，左旋表儿茶酚没食子酸酯等化学成份，具有清热解毒，杀虫止痒的功效。
但目前使用方法以鲜叶浸泡或者干叶粉碎直接添加为主。该方法容易因桃叶含配糖体，搓碎时经酶作用可放出氢氰酸，而引起动物中毒。
目前国内用于发酵的微生态菌株也存在以下缺陷：①菌种经反复扩培,用于饲料中时，逐渐失去优良特性；且菌种多数引自国外，缺少源头性研究。②因为产品中必须含有相当数量的活菌数和一定添加量才能达到应用效果，而菌株的剂量和浓度不足。
因此，如何通过具体的制备方法，来解决桃叶作为猪用饲料添加剂进而容易中毒的现象，是亟需解决的技术问题。
发明内容
发明目的：本发明提供一种猪用桃叶发酵饲料添加剂的制备方法，以解决桃叶作为猪用饲料添加剂容易造成中毒的技术问题，同时具有清热解毒、杀虫止痒、促生长的功效。
技术方案：本发明猪用桃叶发酵饲料添加剂的制备方法包括以下步骤：
(1)制备乳酸杆菌培养基：配制含牛肉膏8-15g、蛋白胨5-12g、三水乙酸钠3-5g、P酸氢二钾、柠檬酸二胺2-3g、酵母膏2-5g、800-1200ml蒸馏水、琼脂20-30g的乳酸杆菌培养基；
(2)乳酸杆菌菌种制备：通过在步骤(1)中的乳酸杆菌培养基中接种乳酸菌菌液，将接种后的乳酸杆菌培养基分离获得猪肠道乳酸杆菌和猪唾液乳酸杆菌，并将猪肠道乳酸杆菌和猪唾液乳酸杆菌按1:1混合制得乳酸杆菌菌种；
(3)将桃叶晾干粉碎后拌入麦麸得到桃叶麦麸混合物，然后将桃叶麦麸混合物与水以重量为1:1浸泡，在桃叶麦麸混合物中添加步骤(2)中制备的乳酸杆菌菌种后发酵；
(4)将发酵后的产物烘干制得猪用桃叶发酵饲料添加剂。
步骤(1)中，将配置的乳酸杆菌培养基高压灭菌后冷却并冷藏备用。
步骤(1)中的乳酸杆菌培养基为液态。
步骤(2)中的乳酸菌菌液采用无菌甘油冷冻保存，然后接种至液体乳酸杆菌培养基中。
步骤(2)中，接种后的乳酸杆菌培养基在恒温培养箱中培养，并分离获得猪肠道乳酸杆菌和猪唾液乳酸杆菌。
步骤(2)中的乳酸杆菌菌种放置在4～6℃中冷藏。
步骤(3)中，将桃叶晾干粉碎后拌入桃叶1/6～1/5重量的麦麸得到桃叶麦麸混合物。
步骤(3)中，制备的乳酸杆菌菌种发酵时间为20h～30h。
步骤(3)中，制备的乳酸杆菌菌种发酵温度为35～37℃。
步骤(4)中，将发酵后的产物在60～70℃烘干制得猪用桃叶发酵饲料添加剂。
有益效果：与现有技术相比，本发明具有以下优点：
(1)本发明利用桃叶做材料，通过制备乳酸杆菌培养基，并进一步制备乳酸杆菌菌种，并在桃叶麦麸混合物中添加该乳酸杆菌菌种后发酵，获得的猪用桃叶发酵饲料添加剂安全、清热解毒，杀虫止痒，且起到了保健促生长的作用。
(2)本发明的制备方法既消除了未发酵桃叶将引起猪氢氰酸中毒的风险，同时又采集天然菌群培养，增强了发酵效果。
附图说明
图1为本发明猪用桃叶发酵饲料添加剂的制备方法流程图。
具体实施方式
实施例1：
本实施例在句容市茅山风景区福清畜禽养殖场，利用桃叶和相关材料来获得猪用桃叶发酵饲料添加剂的具体过程如下：
(1)配制含牛肉膏10g、蛋白胨10g、三水乙酸钠5g、P酸氢二钾、柠檬酸二胺2g、酵母膏3g、1000ml蒸馏水、琼脂25g的液体乳酸杆菌培养基；然后将液体乳酸杆菌培养基放入120℃的高压锅内高压灭菌20min，拿出冷却至25℃，放于冰箱内以4℃冷藏备用。
(2)通过在步骤(1)中的液体乳酸杆菌培养基中接种乳酸菌菌液，本实施例中，该乳酸菌菌液由40％的无菌甘油在-20℃的环境中冷冻保存；接种后的含乳酸杆菌的培养基在37℃恒温培养箱中培养，分离获得猪肠道乳酸杆菌和猪唾液乳酸杆菌，将猪肠道乳酸杆菌和猪唾液乳酸杆菌按1:1混合制得乳酸杆菌菌种，放置在冰箱中以4℃冷藏待用。
(3)将收集的桃叶晾干粉碎后拌入重量为桃叶1/5的小麦麸皮得到桃叶麸皮混合物，然后将桃叶麸皮混合物与水以重量1:1浸泡；在桃叶麸皮混合物中添加步骤(2)中制备的乳酸杆菌菌种后发酵，本实施例中，发酵时间为24h，发酵温度设定为35℃。
(4)对发酵后的产物进行70℃的自然烘干后制得饲料添加剂，并分装打包。
然后将本实施例中制得的猪用桃叶发酵饲料添加剂和未发酵的桃叶麦麸混合物进行对比测试，具体过程为：
首先进行蛋白浓度和消化酶测定，取猪用桃叶发酵饲料添加剂和未发酵桃叶麦麸混合物，按标准方法测量蛋白浓度、脂肪酶、淀粉酶活力含量如下表：
猪用桃叶发酵饲料添加剂与未发酵对照组相比，蛋白浓度差异不显著(P>0.05)，脂肪酶、淀粉酶活力均差异极显著(P<0.01)。
表1蛋白浓度及消化酶测定数据
使用含本发明猪用桃叶发酵饲料添加剂0.5％的饲料与未添加其它添加剂的饲料，选40千克左右育肥猪20头，随机分成2组，饲喂3个月，增重和发病情况见表2：从表2看出，添加0.5％猪用桃叶发酵饲料添加剂的饲料显著促进肥猪生长(P<0.05)，并减少猪的发病率。
表2添加桃叶发酵饲料添加剂对育肥猪增重及发病的影响
实施例2：
同实施例1的方法，实施例2的具体过程如下：
本实施例2利用桃叶和相关材料来获得猪用桃叶发酵饲料添加剂的具体过程如下：
(1)配制含牛肉膏8g、蛋白胨5g、三水乙酸钠3g、P酸氢二钾、柠檬酸二胺2g、酵母膏4g、800ml蒸馏水、琼脂20g的液体乳酸杆菌培养基；然后将液体乳酸杆菌培养基放入110℃的高压锅内高压灭菌25min，拿出冷却至25℃，放于冰箱内以6℃冷藏备用。
(2)通过在步骤(1)中的液体乳酸杆菌培养基中接种乳酸菌菌液，本实施例中，该乳酸菌菌液由40％的无菌甘油在-20℃的环境中冷冻保存；接种后的含乳酸杆菌的培养基在35℃恒温培养箱中培养，分离获得猪肠道乳酸杆菌和猪唾液乳酸杆菌，将猪肠道乳酸杆菌和猪唾液乳酸杆菌按1:1混合制得乳酸杆菌菌种，放置在冰箱中以6℃冷藏待用。
(3)将收集的桃叶晾干粉碎后拌入重量为桃叶1/6的小麦麸皮得到桃叶麸皮混合物，然后将桃叶麸皮混合物与水以重量1:1浸泡；在桃叶麸皮混合物中添加乳酸杆菌菌种，本实施例中，发酵时间30h，发酵温度35℃。
(4)对发酵后的产物进行60℃的自然烘干后制得饲料添加剂，并分装打包。
实施例3：
实施例3的具体过程如下：
本实施例利用桃叶和相关材料来获得猪用桃叶发酵饲料添加剂的具体过程如下：
(1)配制含牛肉膏15g、蛋白胨10g、三水乙酸钠5g、P酸氢二钾、柠檬酸二胺3g、酵母膏5g、1200ml蒸馏水、琼脂30g的液体乳酸杆菌培养基；然后将液体乳酸杆菌培养基放入120℃的高压锅内高压灭菌25min，拿出冷却至室温，放于冰箱内以4℃冷藏备用。
(2)通过在步骤(1)中的液体乳酸杆菌培养基中接种乳酸菌菌液，本实施例中，该乳酸菌菌液由40％的无菌甘油在-20℃的环境中冷冻保存；接种后的含乳酸杆菌的培养基在35℃恒温培养箱中培养，分离获得猪肠道乳酸杆菌和猪唾液乳酸杆菌，将猪肠道乳酸杆菌和猪唾液乳酸杆菌按1:1混合制得乳酸杆菌菌种，放置在冰箱中以4℃冷藏待用。
(3)将收集的桃叶晾干粉碎后拌入重量为桃叶1/5的小麦麸皮得到桃叶麸皮混合物，然后将桃叶麸皮混合物与水以重量1:1浸泡；在桃叶麸皮混合物中添加乳酸杆菌菌种，本实施例中，发酵时间20h，发酵温度37℃。
(4)对发酵后的产物进行60℃的自然烘干后制得猪用桃叶发酵饲料添加剂，并分装打包。
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