具体实施方式

下面的实施例可使本专业技术人员可全面的理解本发明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1目标化合物的合成

1.1目标化合物1、2的合成

1)丙二酸单右莰醇酯(目标化合物1)的合成

合成路线：

取冰片(5.00mmol)，溶于10mL甲苯中，加入丙二酸环异丙酯(5.00mmol)，回流反应5h。反应结束后，旋干甲苯，加入50mL乙酸乙酯，用饱和食盐水洗涤，有机层分离加入无水硫酸钠静置。制沙，EA∶PE＝2∶1过柱，得到产物。¹H NMR(400MHz，Chloroform-d)δ4.96(d，1H)，3.44(s，2H)，2.40-2.31(m，1H)，1.87(d，1H)，1.79-1.66(m，2H)，1.34-1.18(m，2H)，1.02(d，1H)，0.89(s，3H)，0.86(s，3H)，0.83(s，3H).

2)丙二酸3-甲酯右莰醇酯(目标化合物2)的合成

合成路线：

取丙二酸单右莰醇酯(目标化合物1，2.40g，10.0mmol)，溶于40mL甲醇中，氯化亚砜1.0mL，回流反应5h。反应结束后，旋干。制沙，EA∶PE＝2∶1过柱，得到产物。¹H NMR(400MHz，Chloroform-d)δ4.97(d，1H)，3.68(s，3H)，3.46(s，2H)，2.42-2.31(m，1H)，1.88(d，1H)，1.79-1.65(m，2H)，1.34-1.16(m，2H)，1.03(d，1H)，0.89(s，3H)，0.86(s，3H)，0.83(s，3H).

3)丙二酸3-乙酯右莰醇酯(目标化合物3)的合成

参考目标化合物2同样方法，以丙二酸单右莰醇酯和乙醇为原料合成，白色粉末。¹H NMR(400MHz，Chloroform-d)δ4.97(d，1H)，4.13(t，2H)，3.46(s，2H)，2.43-2.31(m，1H)，1.89(d，1H)，1.79-1.64(m，2H)，1.35-1.16(m，5H)，1.03(d，1H)，0.89(s，3H)，0.86(s，3H)，0.83(s，3H).

4)丙二酸3-异丙酯右莰醇酯(目标化合物4)的合成

参考目标化合物2同样方法，以丙二酸单右莰醇酯和异丙醇为原料合成，白色粉末。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ4.96-4.92(m,2H),3.44(s,2H),2.41–2.31(m,1H),1.87(d,1H),1.80–1.66(m,2H),1.36–1.18(m,8H)，1.02(d,1H),0.89(s,3H),0.86(s,3H),0.83(s,3H).

5)丙二酸3-(2-N,N-二甲基乙)酯右莰醇酯(目标化合物5)的合成

参考目标化合物2同样方法，以丙二酸单右莰醇酯和N,N-二甲基乙醇胺为原料合成，白色粉末。¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)1H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ4.97(d,1H),4.46(t,2H),4.35(s,3H),3.52-3.43(m,4H),2.82(s,6H),2.42–2.31(m,1H),1.88(d,1H),1.79–1.65(m,2H),1.34–1.16(m,2H),1.03(d,1H),0.89(s,3H),0.86(s,3H),0.83(s,3H).

6)1，1-二甲酸单右莰醇酯环丙烷(目标化合物6)的合成

参考目标化合物1同样方法，以6,6-二甲基-5,7-二恶螺旋2.5辛烷-4,8-二酮和右莰醇为原料合成，白色粉末。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.78(d,1H),2.26–2.16(m,1H),1.85(dd,1H),1.65(d,2H),1.31–1.10(m,6H),0.91(d,1H),0.81(d,6H),0.75(s,3H).

7)1，1-二甲酸甲酯右莰醇酯环丙烷(目标化合物7)的合成

参考目标化合物2同样方法，以1，1-二甲酸单右莰醇酯环丙烷和甲醇为原料合成，白色粉末。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.78(d,1H),3.66(s,3H),2.26–2.15(m,1H),1.85(dd,1H),1.65(d,2H),1.31–1.10(m,6H),0.91(d,1H),0.81(d,6H),0.75(s,3H).

8)1，1-二甲酸甲酯右莰醇酯环丙烷(目标化合物8)的合成

参考目标化合物2同样方法，以1，1-二甲酸单右莰醇酯环丙烷和甲醇为原料合成，白色粉末。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.78(d,1H),4.13(t,2H),2.26–2.15(m,1H),1.85(dd,1H),1.65(d,2H),1.31–1.10(m,8H),0.91(d,1H),0.81(d,6H),0.75(s,3H).

9)丝氨酸右莰醇酯(目标化合物9)的合成

合成路线：

取N-Boc-O-苄基-L-丝氨酸(6.00mmol)，冰片(6.60mmol)，DMAP(3.00mmol)，DCC(9.00mmol)，溶于15mL二氯甲烷，40℃反应12h，抽滤，旋干，制沙，PE:EA＝10:1过柱，得透明油状物(9-1)。取油状物(9-1)，加入二氯甲烷:三氟乙酸＝2:1溶液中，反应3h，旋干，用二氯甲烷旋蒸带除三氟乙酸，得黄色油状物(9-2)。取黄色油状物(9-2)，溶于二氯甲烷，氢气钯碳还原，40℃反应12h，反应完成后，抽滤，旋干过柱(二氯：甲醇＝30：1)，所得产物旋干后为油状物，溶于EA，通入HCl气体，生成沉淀，抽滤得终产物(9)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ5.56(q,1H),4.93–4.81(m,1H),4.08(t,1H),3.80(p,2H),2.30–2.18(m,1H),1.89-1.82(m,1H),1.65(d,2H),1.24-1.18(m,2H),1.00(d,1H),0.84(d,3H),0.81(s,3H),0.77(d,3H).

实施例2目标化合物对含不同α亚基GABAA受体的作用

通过重组表达了α1/β2/γ2和α2/β3/γ2两种GABAAR的HEK293细胞，利用电生理全细胞记录GABA电流，选取了从0.01、0.1、1、10、100、1000nM浓度进行了检测。结果如表1所示，给予目标化合物后，α2/β3/γ2亚型的GABAAR上的GABA电流显著增大，α1/β2/γ2且呈现出良好的剂量依赖性和选择性，α1/β2/γ2亚型的GABAAR上的GABA电流没有变化。根据计算机拟合出的量效曲线，计算得到α2/β3/γ2类型的GABAAR的GABA的Emax、EC₅₀。

由表1可见：本发明所述的化合物1对α2亚基构成的GABAA受体均具有良好的选择性，提示具有良好的安全性。同法测定了其他目标化合物对α2亚基构成的GABAA受体的激动作用。

表1目标化合物对于α2/β3/γ2 GABAA受体的GABA电流Emax和EC₅₀(nM)

由表1可见：本发明所述的目标化合物1、目标化合物6、目标化合物9，对α2亚基构成的GABAA受体具有良好的激动作用。对照化合物没有显示明显的激动作用。目标化合物2、目标化合物3、目标化合物4、目标化合物5为目标化合物1的酯类衍生物，在体内能够代谢为目标化合物1。目标化合物7、目标化合物8为目标化合物6的酯类衍生物，在体内能够代谢为目标化合物6。

实施例3目标化合物在大鼠局灶性脑缺血再灌注模型的保护作用

采用大脑中动脉线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(Middle cerebral arteryocclusion,MCAO)脑缺血再灌注模型。药效学研究：共设5个组，即模型组、依达拉奉组(6.0mg/kg)化合物1组(10mg/kg)、化合物2组(10mg/kg)、化合物3组(10mg/kg)。各组动物于脑缺血再灌注后1小时尾静脉注射给药1次脑缺血再灌注后24小时观察神经缺陷症状，测定脑梗死面积。

3.1脑缺血模型的制备

采用大脑中动脉线栓法制备大脑中动脉阻塞(Middle cerebral arteryocclusion,MCAO)脑缺血再灌注模型。动物用气体麻醉(异氟烷)，采用进行麻醉，首先将大鼠放入MSS-3小动物麻醉机的诱导盒中麻醉，然后将大鼠仰卧位固定于连接呼吸面罩的鼠板上，消毒皮肤，颈部正中切开，分离右侧颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉，轻轻剥离迷走神经，结扎并剪断颈外动脉。夹闭颈总动脉近心端，从颈外动脉的结扎线的远端作一切口，插入的2438-A5线栓(顶端为半球形，前端5-6mm包被硅胶)，经过颈总动脉分叉进入颈内动脉，然后徐徐插入至有轻微阻力为止(自分叉处约20mm)，阻断大脑中动脉的血供，缝合颈部皮肤，消毒，放回笼中。缺血90min后，再次将大鼠诱导麻醉，固定在鼠板上，剪开颈部皮肤，找到线栓将其轻轻拔出，恢复血供进行再灌注，缝合颈部皮肤，消毒，放回笼中饲养。

3.2神经缺陷症状评价

采用改良Bederson 5分制法进行神经缺陷症状评价。

0：提尾悬空时，动物的两前肢均伸向地板方向，且无其他行为缺陷

1：提尾悬空时，动物的手术对(左)侧前肢表现为腕肘屈曲、肩内旋、肘外展、紧贴胸壁

2：将动物置于光滑平板上，推手术侧肩向对侧移动时阻力降低

3：动物自由行走时，向手术对侧环行或转圈

4：肢体软瘫，肢体无自发活动

3.3脑梗死面积测定

采用文献报道的方法进行。动物用10％的水合氯醛麻醉，断头取脑，去除嗅球、小脑和低位脑干，用生理盐水冲洗大脑表面血迹，吸去表面残留水迹，于-80℃放置7min，取出后立即于视线交叉平面垂直向下作冠状切面，并向后每隔2mm切一片，将脑片置于用生理盐水新鲜配制的TTC(20g/L)染液中于37℃温育90min，正常脑组织染成深红色，缺血脑组织则呈苍白色，用生理盐水冲洗后，迅速将脑片从前向后按顺序排列，吸干表面残留水迹，拍照。用图像分析软件(Image Tool)对照片进行统计，圈定右侧缺血面积(白色区域)和右侧面积，用如下公式计算脑梗死面积的百分比。

3.4统计学分析

定量资料表示为均值±标准误。脑梗死面积、神经缺陷症状评分采用单因素方差分析，Scheffe`s检验测定两组间的差异显著性，死亡率、体重采用ANOVA检验，使用Stata统计软件进行分析，将差异P<0.05定义为差异显著。

3.5受试物对神经缺陷症状的影响

目标化合物1、目标化合物5、目标化合物6、目标化合物9、对照化合物1、右崁醇对神经缺陷症状的影响见图1，目标化合物1(10.0mg/kg)、目标化合物5(10.0mg/kg)、目标化合物6(10.0mg/kg)、目标化合物9(10.0mg/kg)、右崁醇组(1.5mg/kg)与模型组相比，对神经缺陷症状有显著的改善作用。对照化合物3组(10.0mg/kg)没有显著的改善作用。

3.6受试物对脑梗死面积(％)的影响

目标化合物1、目标化合物5、目标化合物6、目标化合物9、对照化合物1、右崁醇对脑梗死面积(％)的影响见图2，目标化合物1(10.0mg/kg)、目标化合物5(10.0mg/kg)、目标化合物6(10.0mg/kg)、目标化合物9(10.0mg/kg)、右崁醇组(1.5mg/kg)与模型组相比，对脑梗死面积有显著的改善作用。对照化合物3组(10.0mg/kg)没有显著的改善作用。