具体实施方式

下面我们结合具体实施例对本发明做进一步详细说明，以便在本发明所属领域具备通常知识的技术人员顺利实施本发明。本发明实施方式是为了对本行业具备通常知识的人更加完整地说明本发明而提供的。因此，本发明的实施方式，可以有多种变形，本发明的保护范围并不仅限于以下实施方式。

在本发明所述说明书中，所述某部分“包括”某些组成要素，其意味着在没有特殊排他性意义的记载时，并不排除其他组成要素，而是意味着还包括其他组成要素。

在本发明所述说明书中，所述某个步骤处于某个步骤“之上”或“之前”时，其不仅包括某个步骤与其他某个步骤存在直接时序关系的情形，还包括与各步骤后续混合的步骤，两个步骤的顺序时序顺序可互换的，及存在间接时序关系的情形，其同样受保护。

在本发明所述说明书中所使用的术语“约”和“实际上”等，当所述意义上提供固有制造及物质的允许误差时，其数值或接近其数值的意思来使用，其目的是为了有助于理解本发明，也为了防止恶意的侵权人，非法利用准确或公开有准确数值的内容。在本说明书中，所使用的术语“…步骤”或“…的步骤”，并不代表“为了…的步骤”。

植物在生长过程中，为了抑制其他植物的生长及促进自身生长，会分泌多种化学物质。在没有对植物进行物理作用的情况下，从植物中自然分泌出来的物质叫做渗出物(exudate)。植物的渗出物主要从根部分泌，但也可由其他部位分泌。

随着作为植物资源保护政策的名古屋议定书正式生效，世界各国都积极推行生物资源保护政策。本发明，可以有效的利用从植物根部分泌的全部光合产物的约10-20％的渗出物，同时达到植物资源保护和高效取得有效成分的目的。

植物渗出物，一般通过回收无土栽培种子发芽过程中生长的新芽渗出物，作为有效成分来使用，从而实现了绿色环保的有效成份提取。

萌发过程是为了确保植物生长过程中排出渗出物，此过程是提高植物营养品质和功能性的有效过程。因此，与种子相比从新芽分泌的渗出物可获得更高的营养成分。这是由于新芽与成体活性物含量相比，其生理活性物质多3-4倍的原因。

根据本发明，通过从无土栽培发芽的植物中获得渗出物，可确保成分无分解及变性，通过循环式栽培可实现发芽的同时浓缩有效成分，因此，具有既可节省能源，又环保的优点。

另外，植物渗出物是从种子发芽步骤开始进行，因此不存在原材料中残留重金属等有害成分的危险因素。

另外，本发明的根部渗出物，与最近化妆品领域备受青睐的各种天然素材水一样，具备作为天然水来使用的优点。

本发明的化妆品原料组合物，还包括上述化妆品领域所使用天然水的用途。

另外，根据本发明利用植物渗出物时，还可以利用以往提取物中未能利用过的成分。

具体地，从植物根部分泌出多种渗出物，其中糖类、氨基酸、有机酸等占很大比重。

众所周知，糖类具有皮肤保湿功能，尤其多酚作为优越的抗氧化物质，既有抗癌作用，又有防止心脏病的作用。

另外，氨基酸具有生成皮肤内胶原蛋白和角质层内天然保湿因子的功能。

另外，植物的根部渗出物中还存在大量的植物激素，植物激素具有调节植物生长、分化、防御、老化调节等信号的功能。植物根部渗出物中所含植物激素激动素及赤霉素等，已被认定具有促进皮肤胶原蛋白的生物合成功效，进而使皮肤具有保持水分的能力。

这些植物激素在植物体内以很低的浓度存在，很难分离及定量，因此，可通过植物根部渗出物更加容易地获得植物激素。

不同植物种类，相比新芽的植物提取物，其植物根部渗出物的植物激素含量有时会更高，如与皮肤保湿相关的一种氨基酸、脯氨酸在植物根部的渗出物中含量更高。因此，本发明的根部渗出物，与以往的植物提取物相比，不仅其效能更加优异，而且成本更低。

本发明的渗出物中，确保的渗出物本身已经含有粘性蛋白，将其渗出物直接作为化妆品的原料使用，工艺简单，生产效率高。

具体来讲，70％乙醇获得的秋葵提取物和秋葵新芽渗出物相比较，以干燥残留物0.01％为基准，秋葵提取物中粘性蛋白含量为22.69ppm、渗出物中含量为15.32ppm。即秋葵新芽渗出物与使用有机溶剂的乙醇提取物含量没有多大差别，且本发明的渗出物中，无需补充工艺进行提取，因此采用秋葵新芽渗出物开发含粘性蛋白的化妆品原料时效率较高。

为了制造和评价本发明秋葵发芽渗出物的功效，进行以下试验。

实施例1：秋葵发芽渗出物的制备

(1)秋葵种子占发芽设备50％-80％的面积。种子并不一定100％都发芽，当种子面积50％以下时，渗出物内有效成分的含量会变小，当种子面积为80％以上时，发芽后的面积变小，给新芽的生长带来影响。

(2)将发芽设备与自动循环过滤装置连接起来，然后，用种子总重量的40倍-60倍的蒸馏水，进行8天的萌发，并防止微生物的生长。当蒸馏水含量低于40倍时，渗出物量较少，渗出物制备效率低；当蒸馏水含量高于60倍时，渗出物的有效成分浓度降低，过高过低均不可取。

启动发芽设备的同时启动自动循环装置，每10分钟通过一次0.2μmPES过滤器过滤，抑制微生物在渗出物中的增殖，最终获得的渗出物，在4℃下保存使用。

试验例1：蛋白质及多糖含量检测

蛋白质含量检测采用BCA assay，多糖的含量检测采用苯酚-硫酸法。随着秋葵种子发芽时间测增加，其蛋白质和多糖的含量也逐渐提升。其结果如下表1所示。

表1

当发芽时间不到8天时，新芽生长不充分，蛋白质及多糖等成分含量也不充分。相反，发芽时间超过8天时，由于植物内部再吸收及作为微生物的营养成分使用等原因，多糖的含量减少，不利于过滤和回收。

试验例2：胶原蛋白生物合成检测

胶原蛋白是皮肤的主要结构蛋白，占真皮层的70-80％。由于内因性老化和光老化，胶原蛋白在皮肤中逐渐减少或结构发生变化。由于胶原蛋白具有真皮层内部水分驻留的功能，因此，胶原蛋白越紧密，越能防止皮肤的水分损失。胶原蛋白因分子量大不能通过皮肤表面涂抹达到透皮吸收的效果，因此，通过在皮肤内生物合成胶原蛋白对实现皮肤保湿更为有效。

采用Takara公司的Procollagen Type I C-peptide(PIP)EIA Kit检测试剂盒，检测人真皮成纤维细胞(HDFn)生物液体中I型前胶原C-肽的含量的表达。

其结果如图1所示，秋葵发芽第8天渗出物经过处理后，在所有情况下的PIP-1的表达量均呈现增加趋势。

试验例3：玻尿酸(Hyaluronic acid)的合成检测

存在于皮肤中的玻尿酸，可以在人真皮成纤维细胞及角质形成细胞中产生，其是粘多糖的组成成分。玻尿酸能够吸收大量水分，因此被公认为皮肤最具代表性的保湿因子，可与自身重量1000倍的水分结合，有效地保持肌肤水分。

采用Echelon公司Hyaluronan Enzyme-Linked mmunosorbent Assay Kit进行检测，结果表明在人表皮角质形成细胞(HEKn)及人真皮成纤维细胞(HDFn)中，可以发现玻尿酸表达的变化。

如图2所示，在人表皮角质形成细胞(HEKn)中，以秋葵发芽第8天渗出物处理时，所有浓度下玻尿酸的表达都有增加的趋势。

试验例4：Ceramide synthase 3(CERS3),Hyaluronan synthase 2(HAS2)表达的检测

由脂质成分组成的神经酰胺，占表皮层内细胞间胶质(intercellular cement)的35-40％，形成皮肤屏障，防止水分流失。如果神经酰胺减少，层状(lamella)结构遭到破坏，经皮水分散失增加，皮肤就会变得干燥。

CERS3为神经酰胺的合成酶，它诱发神经酰胺的合成，起到抑制皮肤表皮层水分损失的作用。

HAS2为代表性保湿因子玻尿酸的合成酶，它促进玻尿酸的合成，有助于保持皮肤内的水分。

采用RT-PCR，检测人表皮角质形成细胞(HEKn)及人真皮成纤维细胞(HDFn)中CERS3和HAS2的表达变化。

其结果如图3所示，采用秋葵发芽第8天渗出物进行处理时，发现所有浓度对应的CERS3的表达均有增加，在0.5％以上浓度下HAS2的表达有增加趋势。

试验例5：总多酚含量的检测

多酚有助于皮肤的健康，因此常被作为各种化妆品的有成效成分来使用。为了检测秋葵发芽渗出物中的多酚含量，我们采用Folin-Ciocalteu比色法进行检测，其结果如表2所示。

如表2所示，随着秋葵发芽天数的增加，发芽渗出物中所含多酚的含量增加。当发芽时间不足8天时，新芽的生长不充分，多酚等的成分含量也不够高。

表2

上述化妆品原料组合物，还可包括选自丁二醇、己二醇、乙基己基甘油及苯氧乙醇中一种以上的添加剂。所述添加剂是形成后续剂型所需要的。

所述化妆品原料组合物，可以是选自柔肤水及营养化妆水等的化妆水、营养霜、按摩霜、精华素、面膜、凝胶、乳液、软膏、贴片及喷雾剂来构成的任意一个剂型，但是并不限于此。

以上我们对本发明的实施例进行详细说明，但是本发明的保护范围并不限于此，本领域具备通常知识的技术人员应该理解，在不脱离本发明权利要求技术精神的情况下，有可能对本发明做各种修订及变形。