一种提升免疫力猫粮及其制备方法

文档序号:691000 发布日期:2021-05-04 浏览:20次 >En<

阅读说明:本技术 一种提升免疫力猫粮及其制备方法 (Immunity-improving cat food and preparation method thereof ) 是由 霍敏凯 于 2021-01-13 设计创作,主要内容包括:本发明公开了一种提升免疫力猫粮及其制备方法,包括螃蟹甲苯乙醇苷微球、发酵鱼肉、复合维生素、蘑菇干、五谷杂粮粉、牛磺酸、食盐、水。采用美拉德反应对褐藻酸钠进行改性,制备褐藻酸钠-甘氨酸共聚物,提升了褐藻酸钠清除自由基的能力。将螃蟹甲苯乙醇苷的脂质体用改性蒙脱石进行修饰,再与褐藻酸钠-甘氨酸共聚物制成微球,可以保护螃蟹甲苯乙醇苷的生物活性。褐藻酸钠具有减糖降脂的作用,可与螃蟹甲苯乙醇苷协同保护猫的肝脏,减少高脂饮食对猫肝脏的负担;利用基因工程手段将猫干扰素基因重组到植物乳杆菌体内,获得产猫干扰素的植物乳杆菌,用来发酵鱼肉获得含有干扰素的鱼肉,食用后提升猫的免疫力。(The invention discloses a cat food for improving immunity and a preparation method thereof. Sodium alginate is modified by adopting Maillard reaction to prepare the sodium alginate-glycine copolymer, so that the capacity of removing free radicals of the sodium alginate is improved. The liposome of the crab methallyl alcohol glycoside is modified by modified montmorillonite and then prepared into microspheres with sodium alginate-glycine copolymer, so that the biological activity of the crab methallyl alcohol glycoside can be protected. The sodium alginate has the effects of reducing sugar and fat, and can be used for protecting liver of cat in cooperation with crab methallyl alcohol glycoside, and reducing burden of high fat diet on liver of cat; the gene of the cat interferon is recombined into the lactobacillus plantarum body by utilizing a genetic engineering means to obtain the lactobacillus plantarum producing the cat interferon, the lactobacillus plantarum is used for fermenting fish meat to obtain fish meat containing the interferon, and the immunity of a cat is improved after the fish meat is eaten.)

一种提升免疫力猫粮及其制备方法

技术领域

本发明涉及食品技术领域,具体为一种提升免疫力猫粮及其制备方法。

背景技术

猫咪是完全肉食者,故此他们的主要能量及营养来源应来自于动物性蛋白质及动物性脂肪,而不是碳水化合物。严格来说,若猫猫日常饮食中有足够的动物性蛋白质及脂肪,他们根本不需要碳水化合物也可健康的生存。但市面上一般给猫猫食用的干粮往往含有大量谷物,以致碳水化合物含量高达35%至40%。猫猫的身体结构并不善于处理大量碳水化合物,如猫猫日复一日的吃着含大量碳水化合物的食物,患上糖尿病及肥胖症的机会会大大提高。

猫不喜欢洗澡,因为水会带走它们皮毛上的油脂。虽然猫喜欢舔自己的爪子、毛,但不可避免会沾染很多病毒,又不适合经常洗澡。舔食毛而进入体内,会形成毛球,不利于,猫的身体健康。

因此,设计低碳水化合物护肝和提升猫自身免疫力抗病毒的一种提升免疫力猫粮及其制备方法是很有必要的。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提升免疫力猫粮及其制备方法,以解决上述背景技术中提出的问题。

为了解决上述技术问题,本发明提供如下技术方案:一种提升免疫力猫粮,包括螃蟹甲苯乙醇苷微球、发酵鱼肉、复合维生素、蘑菇干、五谷杂粮粉、牛磺酸、食盐、水。

根据上述技术方案,所述质量配比,螃蟹甲苯乙醇苷微胶囊0.02-0.1份、发酵鱼肉20-50份、复合维生素0.01-0.5份、蘑菇干1-2份、牛磺酸0.01-0.1份、食盐0.1-0.5份、水5-20份。

根据上述技术方案,所述螃蟹甲苯乙醇苷微胶囊是将螃蟹甲苯乙醇苷的脂质体用改性蒙脱石进行修饰,再与褐藻酸钠与甘氨酸共聚物制成微球结构。

根据上述技术方案,所述发酵鱼肉是由含猫干扰素(FeIFN-ω)基因的植物乳杆菌发酵所得。

一种提升免疫力猫粮的制备方法,包括以下具体步骤:

步骤一:将螃蟹甲苯乙醇苷微脂质体500-800rpm/min搅拌加热至100℃保持3分钟,加入改性蒙脱石,再加入褐藻酸钠与甘氨酸共聚物持续搅拌,待冷却后停止搅拌备用;

步骤二:将发酵鱼肉搅碎后与复合维生素、蘑菇干、牛磺酸、食盐、水及步骤一获得的螃蟹甲苯乙醇苷微球混合搅拌均匀成糊状;

步骤三:将得到的糊状混合物倒入模具中放入烤箱烤制;

步骤四:将成品猫粮冷却后进行包装。

根据上述技术方案,所述褐藻酸钠与甘氨酸共聚物的制备:褐藻酸钠与甘氨酸按照3:1(w/w)配比,在100℃,120-200rpm/min揽拌下,反应96h,形成褐藻酸钠与甘氨酸共聚物。

根据上述技术方案,所述改性蒙脱石的制备:称取蒙脱石溶于超纯水中配制成10%的蒙脱石悬浮液,超声10min后,加入0.5-2倍双十二烷基二甲基溴化铵阳离子交换容量当量的双十二烷基二甲基溴化铵溶液,超声-高速剪切20-30min后,真空冷冻干燥,研磨,过200目(75μm)筛,即得改性蒙脱石。

根据上述技术方案,所述螃蟹甲苯乙醇苷微胶囊的制备:

将磷脂、胆固醇和螃蟹甲苯乙醇苷溶解于无水乙醇,磷脂浓度为20mg/mL,待混合物彻底溶解后,用注射器将混合物溶液迅速注入2倍体积的磷酸缓冲液中(pH6.0,0.01M),搅拌10min,40℃旋转蒸发除去乙醇,脂质体中磷脂浓度调至10mg/mL,20kHz超声5min(工作10s,间歇10s),制备得到螃蟹甲苯乙醇苷脂质体;

在500rpm揽拌下,将同体改性蒙脱石溶液滴入螃蟹甲苯乙醇苷脂质体中,滴加速度为2mL/min,滴加完成后继续揽拌60min,制备得到改性蒙脱石修饰的螃蟹甲苯乙醇苷脂质体。

在500rpm揽拌下,将褐藻酸钠与甘氨酸共聚物滴入改性蒙脱石修饰的螃蟹甲苯乙醇苷脂质体中,体积比为5:2,滴加速度为2mL/min,滴加完成后继续揽拌60min,制备得到螃蟹甲苯乙醇苷微球。

根据上述技术方案,所述发酵鱼肉由含猫干扰素(FeIFN-ω)基因的植物乳杆菌发酵所得:将鱼肉添加植物乳杆菌,25-32℃发酵48h,接种浓度为0.02-0.20g/L。

根据上述技术方案,所述含猫干扰素(FeIFN-ω)基因植物乳杆菌的制备:根据猫干扰素(FeIFN-ω)基因序列,设计合成引物,并在引物上、下游分别添加XbaⅠ与HindⅢ两酶切位点,上游引物FeIFN-ωfor:5’-CCATCTAGAATGTGTGATTTGCCTCAAACTC-3’;下游引物FeIFN-ωfor:3’-GTAAGCTTTATTTCTCAGATCTTAATCTTTT-5’;通过反转录-聚合酶链反应技术,从ConA诱导培养的猫外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到猫干扰素基因成熟区域,并将其连接到克隆型载体pMG36e上;用XbaⅠ、HindⅢ同时双酶切载体pMG36e与FeIFN-ω,然后将二者用T4连接酶连接得到重组载体pMG36e-FeIFN-ω,最后将该载体电转化至植物乳杆菌,获得产猫干扰素的植物乳杆菌。

与现有技术相比,本发明所达到的有益效果是:本发明,

(1)猫是肉食性动物,身体所需的蛋白质是人类的5倍,蛋白质的过多摄入会增加肾脏的压力,在猫粮中加入改性褐藻酸钠作为猫粮抗氧化剂,能够清除自由基,强化猫咪肾脏血管,预防肾小球毛细血管破裂而引发的血尿、尿道炎和膀胱炎;采用美拉德反应对褐藻酸钠进行改性,制备褐藻酸钠-甘氨酸共聚物,提升了褐藻酸钠清除自由基的能力,也提升了其亲水性,反应条件温和,而且褐藻酸钠与甘氨酸都是食品中的天然成分,以二者的共聚物作为食品抗氧化剂来使用避免了化学合成抗氧化剂带来的安全隐患;另外,褐藻酸钠具有减糖降脂的作用,可减少高碳水化物饮食对猫血糖的影响,可与螃蟹甲苯乙醇苷协同保护猫的肝脏,减少高脂饮食对猫肝脏的负担;

(2)螃蟹甲苯乙醇苷对肝脏有良好的保护作用,但稳定性较差,在高温、光照、高pH条件下会快速降解,非常不利于生产和储存;利用阳离子表面活性剂对蒙脱石进行插层改性,使阳离子部分附着在蒙脱石的片层上,有机部分则留在层间,从而使蒙脱石的层间距增大;同时还可改善层间的微环境,使得蒙脱石由亲水性转变为疏水性,降低其表面能,从而提高蒙脱石对药物的吸附性能;将螃蟹甲苯乙醇苷的脂质体用改性蒙脱石进行修饰,螃蟹甲苯乙醇苷被包裹于脂质体中心,改性蒙脱石通过静电作用修饰于脂质体表面;再与褐藻酸钠-甘氨酸共聚物制成微球,该微球结构不但可以保护螃蟹甲苯乙醇苷的生物活性,还可以起到缓释作用,提升螃蟹甲苯乙醇苷的利用效率;在胃液消化下,不可降解的蒙脱石微球出现多孔结构,猫体内毛球可以缠绕在微球表面,进而将毛球排出体外;

(3)根据Genebank上公布的猫干扰素(FeIFN-ω)基因序列,设计合成引物,并在引物上、下游分别添加XbaⅠ与HindⅢ两酶切位点,通过反转录-聚合酶链反应技术,从ConA诱导培养的猫外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到猫干扰素基因成熟区域,并将其连接到克隆型载体pMG36e上;FeIFN-ω基因全长519bp,编码173个氨基酸的成熟蛋白;引物序列如下:上游引物FeIFN-ωfor:5’-CCATCTAGAATGTGTGATTTGCCTCAAACTC-3’;下游引物FeIFN-ωfor:3’-GTAAGCTTTATTTCTCAGATCTTAATCTTTT-5’;用XbaⅠ、HindⅢ同时双酶切载体pMG36e与FeIFN-ω,然后将二者用T4连接酶连接得到重组载体pMG36e-FeIFN-ω,最后将该载体电转化至植物乳杆菌,获得产猫干扰素的植物乳杆菌,用来发酵鱼肉获得含有干扰素的鱼肉,食用后提升猫的免疫力。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。

本发明提供技术方案:一种提升免疫力猫粮,包括螃蟹甲苯乙醇苷微球、发酵鱼肉、复合维生素、蘑菇干、五谷杂粮粉、牛磺酸、食盐、水。

根据上述技术方案,所述质量配比,螃蟹甲苯乙醇苷微胶囊0.02-0.1份、发酵鱼肉20-50份、复合维生素0.01-0.5份、蘑菇干1-2份、牛磺酸0.01-0.1份、食盐0.1-0.5份、水5-20份。

根据上述技术方案,所述螃蟹甲苯乙醇苷微胶囊是将螃蟹甲苯乙醇苷的脂质体用改性蒙脱石进行修饰,再与褐藻酸钠与甘氨酸共聚物制成微球结构。

根据上述技术方案,所述发酵鱼肉是由含猫干扰素(FeIFN-ω)基因的植物乳杆菌发酵所得。

一种提升免疫力猫粮的制备方法,包括以下具体步骤:

步骤一:将螃蟹甲苯乙醇苷微脂质体500-800rpm/min搅拌加热至100℃保持3分钟,加入改性蒙脱石,再加入褐藻酸钠与甘氨酸共聚物持续搅拌,待冷却后停止搅拌备用;

步骤二:将发酵鱼肉搅碎后与复合维生素、蘑菇干、牛磺酸、食盐、水及步骤一获得的螃蟹甲苯乙醇苷微球混合搅拌均匀成糊状;

步骤三:将得到的糊状混合物倒入模具中放入烤箱烤制;

步骤四:将成品猫粮冷却后进行包装。

根据上述技术方案,所述褐藻酸钠与甘氨酸共聚物的制备:褐藻酸钠与甘氨酸按照3:1(w/w)配比,在100℃,120-200rpm/min揽拌下,反应96h,形成褐藻酸钠与甘氨酸共聚物。

根据上述技术方案,所述改性蒙脱石的制备:称取蒙脱石溶于超纯水中配制成10%的蒙脱石悬浮液,超声10min后,加入0.5-2倍双十二烷基二甲基溴化铵阳离子交换容量当量的双十二烷基二甲基溴化铵溶液,超声-高速剪切20-30min后,真空冷冻干燥,研磨,过200目(75μm)筛,即得改性蒙脱石。

根据上述技术方案,所述螃蟹甲苯乙醇苷微胶囊的制备:

1)将磷脂、胆固醇和螃蟹甲苯乙醇苷溶解于无水乙醇,磷脂浓度为20mg/mL,待混合物彻底溶解后,用注射器将混合物溶液迅速注入2倍体积的磷酸缓冲液中(pH6.0,0.01M),搅拌10min,40℃旋转蒸发除去乙醇,脂质体中磷脂浓度调至10mg/mL,20kHz超声5min(工作10s,间歇10s),制备得到螃蟹甲苯乙醇苷脂质体;

2)在500rpm揽拌下,将同体改性蒙脱石溶液滴入螃蟹甲苯乙醇苷脂质体中,滴加速度为2mL/min,滴加完成后继续揽拌60min,制备得到改性蒙脱石修饰的螃蟹甲苯乙醇苷脂质体。

3)在500rpm揽拌下,将褐藻酸钠与甘氨酸共聚物滴入改性蒙脱石修饰的螃蟹甲苯乙醇苷脂质体中,体积比为5:2,滴加速度为2mL/min,滴加完成后继续揽拌60min,制备得到螃蟹甲苯乙醇苷微球。

根据上述技术方案,所述发酵鱼肉由含猫干扰素(FeIFN-ω)基因的植物乳杆菌发酵所得:将鱼肉添加植物乳杆菌,25-32℃发酵48h,接种浓度为0.02-0.20g/L。

根据上述技术方案,所述含猫干扰素(FeIFN-ω)基因植物乳杆菌的制备:根据猫干扰素(FeIFN-ω)基因序列,设计合成引物,并在引物上、下游分别添加XbaⅠ与HindⅢ两酶切位点,上游引物FeIFN-ωfor:5’-CCATCTAGAATGTGTGATTTGCCTCAAACTC-3’;下游引物FeIFN-ωfor:3’-GTAAGCTTTATTTCTCAGATCTTAATCTTTT-5’;通过反转录-聚合酶链反应技术,从ConA诱导培养的猫外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到猫干扰素基因成熟区域,并将其连接到克隆型载体pMG36e上;用XbaⅠ、HindⅢ同时双酶切载体pMG36e与FeIFN-ω,然后将二者用T4连接酶连接得到重组载体pMG36e-FeIFN-ω,最后将该载体电转化至植物乳杆菌,获得产猫干扰素的植物乳杆菌。

实施例1

一种提升免疫力猫粮,包括螃蟹甲苯乙醇苷微球、发酵鱼肉、复合维生素、蘑菇干、五谷杂粮粉、牛磺酸、食盐、水。

根据上述技术方案,所述质量配比,螃蟹甲苯乙醇苷微胶囊0.1份、发酵鱼肉30份、复合维生素0.01份、蘑菇干1份、牛磺酸0.03份、食盐0.1份、水15份。

根据上述技术方案,所述螃蟹甲苯乙醇苷微胶囊是将螃蟹甲苯乙醇苷的脂质体用改性蒙脱石进行修饰,再与褐藻酸钠与甘氨酸共聚物制成微球结构。

根据上述技术方案,所述发酵鱼肉是由含猫干扰素(FeIFN-ω)基因的植物乳杆菌发酵所得。

一种提升免疫力猫粮的制备方法,包括以下具体步骤:

步骤一:将螃蟹甲苯乙醇苷微脂质体500rpm/min搅拌加热至100℃保持3分钟,加入改性蒙脱石,再加入褐藻酸钠与甘氨酸共聚物持续搅拌,待冷却后停止搅拌备用;

步骤二:将发酵鱼肉搅碎后与复合维生素、蘑菇干、牛磺酸、食盐、水及步骤一获得的螃蟹甲苯乙醇苷微球混合搅拌均匀成糊状;

步骤三:将得到的糊状混合物倒入模具中放入烤箱烤制;

步骤四:将成品猫粮冷却后进行包装。

根据上述技术方案,所述褐藻酸钠与甘氨酸共聚物的制备:褐藻酸钠与甘氨酸按照3:1(w/w)配比,在100℃,180rpm/min揽拌下,反应96h,形成褐藻酸钠与甘氨酸共聚物。

根据上述技术方案,所述改性蒙脱石的制备:称取蒙脱石溶于超纯水中配制成10%的蒙脱石悬浮液,超声10min后,加入0.5-2倍双十二烷基二甲基溴化铵阳离子交换容量当量的双十二烷基二甲基溴化铵溶液,超声-高速剪切30min后,真空冷冻干燥,研磨,过200目(75μm)筛,即得改性蒙脱石。

根据上述技术方案,所述螃蟹甲苯乙醇苷微胶囊的制备:

1)将磷脂、胆固醇和螃蟹甲苯乙醇苷溶解于无水乙醇,磷脂浓度为20mg/mL,待混合物彻底溶解后,用注射器将混合物溶液迅速注入2倍体积的磷酸缓冲液中(pH6.0,0.01M),搅拌10min,40℃旋转蒸发除去乙醇,脂质体中磷脂浓度调至10mg/mL,20kHz超声5min(工作10s,间歇10s),制备得到螃蟹甲苯乙醇苷脂质体;

2)在500rpm揽拌下,将同体改性蒙脱石溶液滴入螃蟹甲苯乙醇苷脂质体中,滴加速度为2mL/min,滴加完成后继续揽拌60min,制备得到改性蒙脱石修饰的螃蟹甲苯乙醇苷脂质体。

3)在500rpm揽拌下,将褐藻酸钠与甘氨酸共聚物滴入改性蒙脱石修饰的螃蟹甲苯乙醇苷脂质体中,体积比为5:2,滴加速度为2mL/min,滴加完成后继续揽拌60min,制备得到螃蟹甲苯乙醇苷微球。

根据上述技术方案,所述发酵鱼肉由含猫干扰素(FeIFN-ω)基因的植物乳杆菌发酵所得:将鱼肉添加植物乳杆菌,25-32℃发酵48h,接种浓度为0.10g/L。

根据上述技术方案,所述含猫干扰素(FeIFN-ω)基因植物乳杆菌的制备:根据猫干扰素(FeIFN-ω)基因序列,设计合成引物,并在引物上、下游分别添加XbaⅠ与HindⅢ两酶切位点,上游引物FeIFN-ωfor:5’-CCATCTAGAATGTGTGATTTGCCTCAAACTC-3’;下游引物FeIFN-ωfor:3’-GTAAGCTTTATTTCTCAGATCTTAATCTTTT-5’;通过反转录-聚合酶链反应技术,从ConA诱导培养的猫外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到猫干扰素基因成熟区域,并将其连接到克隆型载体pMG36e上;用XbaⅠ、HindⅢ同时双酶切载体pMG36e与FeIFN-ω,然后将二者用T4连接酶连接得到重组载体pMG36e-FeIFN-ω,最后将该载体电转化至植物乳杆菌,获得产猫干扰素的植物乳杆菌。

实施例2

一种提升免疫力猫粮,包括螃蟹甲苯乙醇苷微球、发酵鱼肉、复合维生素、蘑菇干、五谷杂粮粉、牛磺酸、食盐、水。

根据上述技术方案,所述质量配比,螃蟹甲苯乙醇苷微胶囊0.1份、发酵鱼肉20份、复合维生素0.01份、蘑菇干1份、牛磺酸0.02份、食盐0.1份、水12份。

根据上述技术方案,所述螃蟹甲苯乙醇苷微胶囊是将螃蟹甲苯乙醇苷的脂质体用改性蒙脱石进行修饰,再与褐藻酸钠与甘氨酸共聚物制成微球结构。

根据上述技术方案,所述发酵鱼肉是由含猫干扰素(FeIFN-ω)基因的植物乳杆菌发酵所得。

一种提升免疫力猫粮的制备方法,包括以下具体步骤:

步骤一:将螃蟹甲苯乙醇苷微脂质体800rpm/min搅拌加热至100℃保持3分钟,加入改性蒙脱石,再加入褐藻酸钠与甘氨酸共聚物持续搅拌,待冷却后停止搅拌备用;

步骤二:将发酵鱼肉搅碎后与复合维生素、蘑菇干、牛磺酸、食盐、水及步骤一获得的螃蟹甲苯乙醇苷微球混合搅拌均匀成糊状;

步骤三:将得到的糊状混合物倒入模具中放入烤箱烤制;

步骤四:将成品猫粮冷却后进行包装。

根据上述技术方案,所述褐藻酸钠与甘氨酸共聚物的制备:褐藻酸钠与甘氨酸按照3:1(w/w)配比,在100℃,200rpm/min揽拌下,反应96h,形成褐藻酸钠与甘氨酸共聚物。

根据上述技术方案,所述改性蒙脱石的制备:称取蒙脱石溶于超纯水中配制成10%的蒙脱石悬浮液,超声10min后,加入0.5倍双十二烷基二甲基溴化铵阳离子交换容量当量的双十二烷基二甲基溴化铵溶液,超声-高速剪切20-30min后,真空冷冻干燥,研磨,过200目(75μm)筛,即得改性蒙脱石。

根据上述技术方案,所述螃蟹甲苯乙醇苷微胶囊的制备:

1)将磷脂、胆固醇和螃蟹甲苯乙醇苷溶解于无水乙醇,磷脂浓度为20mg/mL,待混合物彻底溶解后,用注射器将混合物溶液迅速注入2倍体积的磷酸缓冲液中(pH6.0,0.01M),搅拌10min,40℃旋转蒸发除去乙醇,脂质体中磷脂浓度调至10mg/mL,20kHz超声5min(工作10s,间歇10s),制备得到螃蟹甲苯乙醇苷脂质体;

2)在500rpm揽拌下,将同体改性蒙脱石溶液滴入螃蟹甲苯乙醇苷脂质体中,滴加速度为2mL/min,滴加完成后继续揽拌60min,制备得到改性蒙脱石修饰的螃蟹甲苯乙醇苷脂质体。

3)在500rpm揽拌下,将褐藻酸钠与甘氨酸共聚物滴入改性蒙脱石修饰的螃蟹甲苯乙醇苷脂质体中,体积比为5:2,滴加速度为2mL/min,滴加完成后继续揽拌60min,制备得到螃蟹甲苯乙醇苷微球。

根据上述技术方案,所述发酵鱼肉由含猫干扰素(FeIFN-ω)基因的植物乳杆菌发酵所得:将鱼肉添加植物乳杆菌,30℃发酵48h,接种浓度为0.20g/L。

根据上述技术方案,所述含猫干扰素(FeIFN-ω)基因植物乳杆菌的制备:根据猫干扰素(FeIFN-ω)基因序列,设计合成引物,并在引物上、下游分别添加XbaⅠ与HindⅢ两酶切位点,上游引物FeIFN-ωfor:5’-CCATCTAGAATGTGTGATTTGCCTCAAACTC-3’;下游引物FeIFN-ωfor:3’-GTAAGCTTTATTTCTCAGATCTTAATCTTTT-5’;通过反转录-聚合酶链反应技术,从ConA诱导培养的猫外周血淋巴细胞总RNA中扩增得到猫干扰素基因成熟区域,并将其连接到克隆型载体pMG36e上;用XbaⅠ、HindⅢ同时双酶切载体pMG36e与FeIFN-ω,然后将二者用T4连接酶连接得到重组载体pMG36e-FeIFN-ω,最后将该载体电转化至植物乳杆菌,获得产猫干扰素的植物乳杆菌。

为验证本发明的有益效果,特做以下试验:

试验1.褐藻酸钠-甘氨酸共聚物对自由基的清除能力测试

羟自由基的清除采用利用Fenton反应

取3支10mL比色管,分别依次加入1.0mL7.5mmol/L硫酸亚铁铁溶液,1.0mL7.5mmol/L水杨酸溶液,1.0mL7.5mmol/L过氧化氢溶液,在2号比色管中依次加入1.0mL的褐藻酸钠-甘氨酸共聚物,用去离子水定容至刻度,水浴加热1h后,在3号比色管中依次加入1.0mL的褐藻酸钠,用去离子水定容至刻度,水浴加热1h后。在510nm波长下测吸光度值,再计算清除率。

清除率公式:清除率(%)=(A0-As)/A0*100%

式中:A0-未加被测物吸光度值;As-加入被测物后吸光值

编号 光吸收值(510nm) 清除百分比(%)
褐藻酸钠-甘氨酸共聚物 0.083 88.6
褐藻酸钠 0.092 56.4

表1褐藻酸钠-甘氨酸共聚物对自由基清除率统计

由试验结果可见,褐藻酸钠-甘氨酸共聚物具有良好的清除自由基能力,比单纯的褐藻酸钠清除自由基能力强。

试验2.本发明猫粮对脂肪肝脂肪降解试验

2.1脂肪肝模型的制备

所有大鼠适应性喂养7d后,随机分为2组,分别是高脂模型组(HF,20只)和空白对照组(NC,Normal control,10只)。HF大鼠饲喂高脂饲料(78.5%常规饲料+0.5%胆酸钠+1%胆固醇+10%蛋黄粉+10%猪油),NC组大鼠饲喂常规饲料,自由饮水,12h光照/12h黑暗,温度为23℃±2℃。造模时间为14d。

2.2动物分组与试验处理

将高脂模型组随机分成两组,每组10只,一组(HF1)喂食猫粮8天,二组(HF2)与空白对照组(NC)喂食常规饲料6周,喂养饲料质量相同。处死所有大鼠,取肝脏称量,具体数值如表1:

组别 平均肝脏重(g) 平均体重(g) 肝脏与体重质量比(%)
空白对照组(NC) 0.841 352 0.239
高脂模型组一组(HF1) 0.899 367 0.245
高脂模型组二组(HF2) 0.974 373 0.261

表1大鼠肝脏与体重统计表

由表1可知,喂食猫粮的高脂模型组大鼠比未喂食猫粮的高脂模型组大鼠体重下降不明显,但肝脏重量下降明显,且肝脏重量与体重质量比接近空白对照,说明猫粮对改善大鼠脂肪肝脂肪降解有良好的效果。

需要说明的是,在本文中,诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来,而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且,术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含,从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素,而且还包括没有明确列出的其他要素,或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。

最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

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