具体实施方式

本公开文本提供了改善或重建泪膜稳态的方法。在一些实施方案中，所述有需要的个体缺乏泪膜稳态。

本公开文本提供了治疗干眼病、增加泪液产生和减轻眼部不适的方法，所述方法包括向有需要的个体施用正向别构调节剂(PAM)或其药学上可接受的盐和nAChR激动剂或其药学上可接受的盐。本公开文本还提供了治疗干眼病、增加泪液产生和减轻眼部不适的方法，所述方法包括向有需要的个体施用PAM或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，眼部不适与接触镜不耐受相关。在一些实施方案中，所述有需要的个体佩戴接触镜有不适感。

以下是对PAM的简要介绍和讨论。

在生物化学和药理学中，别构调节剂(来自希腊语的allo-意指“其他”)是间接影响(调节)直接激活或失活靶蛋白功能的一级配体的作用的物质。别构调节剂结合至不同于正构结合位点的位点。它们稳定影响一级配体结合或功效的蛋白质结构的构象。纯调节剂对蛋白质靶标的功能没有直接影响。调节特性与由靶蛋白、一级配体和调节剂组成的三元复合物相互依赖。

nAChR是一类五聚体配体门控离子通道，其对烟碱和乙酰胆碱(其质子化形式类似于烟碱)两者均具有高亲和力和选择性，并且包含α和β亚基的组合。nAChR亚型的例子包括但不限于α3β4、α4β2、α3α5β4和α4α6β2。例如，参与使鼻泪反射发生的重要的nAChR受体亚型是位于鼻粘膜三叉神经末梢上的α4β2亚型。

在本文中提及“α7”nAChR是指同聚α7亚型，其中nAChR的五聚体亚基完全由α7亚基构成。因此，结合并激活nAChRα7的nAChR激动剂是结合并激活nAChR同聚α7受体的激动剂。在本文所述的一些实施方案中，nAChR激动剂是α7受体激动剂。在本文所述的一些实施方案中，nAChR激动剂不是α7受体激动剂。在本文所述的一些实施方案中，nAChR激动剂不是完全α7受体激动剂。在本文所述的一些实施方案中，nAChR是完全α7受体激动剂。

施用nAChR激动剂可能会使受体脱敏。受体脱敏即使在较高的激动剂浓度下也导致对激动剂的响应降低，这进一步导致治疗功效降低。例如，nAChR受体对激动剂的短期脱敏可能在施用激动剂之后24小时内发生。受体脱敏的可能性可能潜在地限制一段时间内的给药频率，以便保持对激动剂的有效响应。本文所述的方法提供了通过将nAChR激动剂与nAChR PAM组合可以令人惊讶地改善nAChR激动剂的功效。当与单独施用nAChR激动剂相比时，此类组合对于改善nAChR激动剂治疗干眼病、眼部不适或增加泪液产生的功效非常有效。

如本文所述，PAM可以结合至nAChR上的别构位点，并在本文所述的生理配体乙酰胆碱(ACh)或另一种nAChR激动剂的存在下，正向别构地调节受体的活性，或者和/或通过别构结合位点单独充当受体的激动剂或拮抗剂。在一些实施方案中，PAM不单独充当nAChR的激动剂和/或拮抗剂。

实施例1中公开了测量增强作用的一个例子，其描述了评价在非洲爪蟾(Xenopuslaevis)(非洲爪蛙(African clawed frog))卵母细胞中表达的α4β2nAchR中的nAChR激动剂和PAM的测定法。

选择PAM的考虑因素包括但不限于毒性、其使用带来的副作用以及以稳定且易于配制的物理形式存在的能力。另一个考虑因素是PAM对特定nAChR亚型的选择性。与其他外周nAChR亚型相比，对包含特定外周nAChR亚型的受体具有选择性的PAM对这种受体具有更高程度的功能亲和力。选择性可能与EC50值的至少5倍亲和力差异、EC50值的至少10倍亲和力差异、EC50值的至少20倍亲和力差异或EC50值的至少50倍亲和力差异相关。

PAM可以通过增强激动剂的功效和/或效力来增强作用。例如，相对于其他外周nAChR亚型，α4β2选择性PAM可以选择性地增强例如α4β2外周nAChR的作用。特定的外周nAChR亚型包括但不限于α3β4、α4β2、α7、α3α5β4和α4α6β2。

在本文公开的一些实施方案中，PAM可以对一种或多种外周nAChR亚型具有选择性，而对其他受体亚型显示出很小的亲和力。如果对特定类型的受体亚型的选择性在个体中引起的副作用比非选择性PAM少，则其可能是有益的。

在本文所述的一些实施方案中，可以通过与α4β2nAChR亚型选择性PAM组合来令人惊讶地改善α4β2nAChR激动剂的功效。当与单独施用α4β2受体配体相比时，此类组合对于改善α4β2激动剂治疗干眼病、眼部不适或增加泪液产生的功效非常有效。

在本文所述的一些实施方案中，PAM或其药学上可接受的盐对选自α3β4、α4β2、α7和α3α5β4的至少一种外周nAChR亚型具有选择性。在本文所述的一些实施方案中，PAM或其药学上可接受的盐对选自α3β4、α4β2、α7、α3α5β4和α4α6β2的至少一种外周nAChR亚型具有选择性。在本文所述的一些实施方案中，PAM或其药学上可接受的盐对选自α3β4、α4β2、α3α5β4和α4α6β2的至少一种外周nAChR亚型具有选择性。

在本文所述的一些实施方案中，PAM或其药学上可接受的盐对一种外周nAChR亚型具有选择性。在本文所述的一些实施方案中，PAM或其药学上可接受的盐对两种外周nAChR亚型具有选择性。在本文所述的一些实施方案中，PAM或其药学上可接受的盐对α3β4具有选择性。在本文所述的一些实施方案中，PAM或其药学上可接受的盐对α4β2具有选择性。在本文所述的一些实施方案中，PAM或其药学上可接受的盐对α7具有选择性。在本文所述的一些实施方案中，PAM或其药学上可接受的盐对α3α5β4具有选择性。在本文所述的一些实施方案中，PAM或其药学上可接受的盐对α4α6β2具有选择性。

在本文所述的一些实施方案中，PAM或其药学上可接受的盐对α7没有选择性。

Br-PBTC可以增加受体亚型α2和α4nAChR的乙酰胆碱诱发的响应，并且是这些靶受体的亚型选择性PAM。

NS-9283(3-[3-(3-吡啶基)-1,2,4-噁二唑-5-基]苄腈)是对α4β2nAChR具有选择性的PAM。

在本文所述的一些实施方案中，单独的或与nAChR激动剂组合的PAM选择性地结合至选自α3β4、α4β2、α7和α3α5β4的外周nAChR亚型中的至少一种。在本文所述的一些实施方案中，单独的或与nAChR激动剂组合的PAM选择性地结合至选自α3β4、α4β2、α7、α3α5β4和α4α6β2的至少一种外周nAChR亚型。在本文所述的一些实施方案中，单独的或与nAChR激动剂组合的PAM选择性地结合至选自α3β4、α4β2、α3α5β4和α4α6β2的至少一种外周nAChR亚型。在本文所述的一些实施方案中，单独的或与nAChR激动剂组合的PAM选择性地结合至外周nAChR亚型α3β4。在本文所述的一些实施方案中，单独的或与nAChR激动剂组合的PAM选择性地结合至外周nAChR亚型α4β2。在本文所述的一些实施方案中，单独的或与nAChR激动剂组合的PAM选择性地结合至外周nAChR亚型α7。在本文所述的一些实施方案中，单独的或与nAChR激动剂组合的PAM选择性地结合至外周nAChR亚型α3α5β4。在本文所述的一些实施方案中，单独的或与nAChR激动剂组合的PAM选择性地结合至外周nAChR亚型α4α6β2。在本文所述的一些实施方案中，单独的或与nAChR激动剂组合的PAM不选择性地结合至外周nAChR亚型α7。

在本文所述的一些实施方案中，PAM选自17-β-雌二醇、Br-PBTC、伊维菌素、加兰他敏、染料木黄酮、5-羟基吲哚、4BP-TQS、A-86774、CCMI、左旋咪唑、莫仑太尔、LY-2087101、美加明、薄荷醇、NS206、NS1738、NS9283、PNU-120596、RO5126946、TBS-345、dFBR和HEPES或上述任一种的药学上可接受的盐。由每个代号表示的化学名称在下文叙述，并且在本文中可以互换使用。

Br-PBTC (R)-7-溴-N-(哌啶-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺

NS9283 3-[3-(3-吡啶基)-1,2,4-噁二唑-5-基]苄腈

4BP-TQS 4-(4-溴苯基)-3a,4,5,9b-四氢-3H-环戊二烯并[c]喹啉-8-磺酰胺

A-86774 4-[5-(4-氯苯基)-2-甲基-3-(1-氧丙基)-1H-吡咯-1-基]苯磺酰胺

CCMI [N-(4-氯苯基)]-α-[(4-氯苯基)-氨基亚甲基]-3-甲基-5-异噁唑乙酰胺

LY-2087101 [2-[(4-氟苯基)氨基]-4-甲基-5-噻唑基]-3-噻吩基甲酮

NS206 3-N-苄氧基-3-羟基亚氨基-2-氧代-6,7,8,9-四氢-1H-苯并[g]吲哚-5-磺酰胺

NS1738 N-(5-氯-2-羟基苯基)-N'-[2-氯-5-(三氟甲基)苯基]脲

PNU-120596 N-(5-氯-2,4-二甲氧基苯基)-N'-(5-甲基-3-异噁唑基)-脲

RO5126946 (5-氯-N-[(1S,3R)-2,2-二甲基-3-(4-氨磺酰基-苯基)-环丙基]-2-甲氧基-苯甲酰胺)

TBS-345 TBS-345，4-(3-(4-溴苯基)-5-苯基-1H-1,2,4-三唑-1-基)苯磺酰胺

dFBR 6-溴-2-(1,1-二甲基-2-丙烯基)-N-1H-吲哚-3-乙胺盐酸盐

HEPES 4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-乙磺酸

在本文所述的一些实施方案中，PAM是(R)-7-溴-N-(哌啶-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺(Br-PBTC)或3-[3-(3-吡啶基)-1,2,4-噁二唑-5-基]苄腈(NS9283)或上述任一种的药学上可接受的盐。

在本文所述的一些实施方案中，PAM是(R)-7-溴-N-(哌啶-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺(Br-PBTC)或其药学上可接受的盐。在本文所述的一些实施方案中，PAM是3-[3-(3-吡啶基)-1,2,4-噁二唑-5-基]苄腈(NS9283)或其药学上可接受的盐。

烟碱型乙酰胆碱受体在整个本公开文本中可以互换地称为nAChR。nAChR激动剂结合至特定受体，从而激活所述受体以产生相关的生物响应。

可以将nAChR激动剂表征为完全或部分激动剂，如通过其激活给定受体以产生与在针对乙酰胆碱(ACh)的该受体处的响应相比的响应的能力所确定的。通常，如果nAChR激动剂在结合至给定受体时诱发的响应等于或大于ACh的响应，则其是完全激动剂。如果nAChR激动剂在结合至所述受体时诱发的响应与ACh产生的响应相比更低，则其是部分激动剂。

例如，可以使用适当的基于细胞的测定法来产生可以确定受体激活的nAChR激动剂响应。设计成表达特定nAChR受体亚型且在与nAChR激动剂结合并被其激活时产生电流响应的细胞可以用于表征化合物的激动剂谱以及由此确定的受体激活量。下文描述了通用方案的例子。

首先，将表达特定人nAChR亚型的细胞暴露于ACh。ACh结合并激活受体，从而诱发电流。选择ACh的浓度以引起受体的最大响应(例如，1280微摩尔ACh)。将此电流记录为ACh响应，并用作100％nAChR激动剂响应，并且与其他nAChR激动剂的响应进行比较。在洗涤后，将细胞暴露于各种浓度(例如，0.1、0.3、1、3、10、30、100和300微摩尔)的nAChR激动剂。测量并记录每种nAChR浓度下通过暴露于nAChR激动剂诱发的电流。然后，将此nAChR激动剂响应数据相对于最大ACh诱发电流归一化为单位，并绘制为nAChR激动剂浓度的对数的函数。然后，将nAChR激动剂响应计算为ACh响应的百分比。

在一些情况下，确定nAChR激动剂的相对激动剂活性的方法包括这样的条件，其中ACh响应是由1或多毫摩尔ACh溶液诱发的。

诱发等于或大于在相同受体类型处确定的最大ACh响应的nAChR激动剂是完全激动剂。在一些情况下，考虑到实验变异性，诱发的响应小于100％ACh响应的nAChR激动剂仍可以被表征为完全激动剂。例如，测试或测量方法之间的变异性以及统计误差可能导致响应结果的差异。在一些情况下，诱发80％至120％的ACh响应的nAChR激动剂被视为完全激动剂。在一些情况下，诱发99％或更高的ACh响应的nAChR激动剂被视为完全激动剂。在一些情况下，诱发95％或更高的ACh响应的nAChR激动剂被视为完全激动剂。在一些情况下，诱发90％或更高的ACh响应的nAChR激动剂被视为完全激动剂。在一些情况下，诱发85％或更高的ACh响应的nAChR激动剂被视为完全激动剂。在一些情况下，诱发80％或更高的ACh响应的nAChR激动剂被视为完全激动剂。

考虑到实验变异性，如果nAChR激动剂诱发小于100％的ACh响应，则通常所述激动剂被视为部分激动剂。在一些情况下，诱发小于95％的ACh响应的nAChR激动剂被视为部分激动剂。在一些情况下，诱发小于90％的ACh响应的nAChR激动剂被视为部分激动剂。在一些情况下，诱发小于85％的ACh响应的nAChR激动剂被视为部分激动剂。在一些情况下，诱发小于80％的ACh响应的nAChR激动剂被视为部分激动剂。

在一些情况下，诱发5％至95％的ACh响应的nAChR激动剂被视为部分激动剂。在一些情况下，诱发5％至90％的ACh响应的nAChR激动剂被视为部分激动剂。在一些情况下，诱发5％至85％的ACh响应的nAChR激动剂被视为部分激动剂。在一些情况下，诱发5％至80％的ACh响应的nAChR激动剂被视为部分激动剂。

在一些情况下，诱发10％至95％的ACh响应的nAChR激动剂被视为部分激动剂。在一些情况下，诱发10％至90％的ACh响应的nAChR激动剂被视为部分激动剂。在一些情况下，诱发10％至85％的ACh响应的nAChR激动剂被视为部分激动剂。在一些情况下，诱发10％至80％的ACh响应的nAChR激动剂被视为部分激动剂。

在相对较高激动剂浓度下产生低水平电活动的nAChR激动剂可以被描述为弱部分激动剂。在一些情况下，诱发30％或更少的ACh响应的nAChR激动剂被视为弱部分激动剂。在一些情况下，诱发25％或更少的ACh响应的nAChR激动剂被视为弱部分激动剂。在一些情况下，诱发20％或更少的ACh响应的nAChR激动剂被视为弱部分激动剂。在一些情况下，nAChR激动剂的相对较高浓度是至少100微摩尔。在一些情况下，nAChR激动剂的相对较高浓度是至少200微摩尔。在一些情况下，nAChR激动剂的相对较高浓度是至少300微摩尔或更高。例如，诱发25％的最大Ach诱发电流的300微摩尔浓度的nAChR激动剂被视为弱部分激动剂。

在一些实施方案中，nAChR激动剂是完全激动剂。在一些实施方案中，nAChR激动剂是部分激动剂。在一些实施方案中，nAChR激动剂是弱部分激动剂。

在一些实施方案中，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是选自α3β4、α3α5β4、α4β2和α4α6β2的nAChR亚型中的至少一种的激动剂。在一些实施方案中，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是选自α3β4、α3α5β4、α4β2和α4α6β2的nAChR亚型中的至少两种的激动剂。在一些实施方案中，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是选自α3β4、α3α5β4、α4β2和α4α6β2的nAChR亚型中的至少三种的激动剂。在一些实施方案中，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是nAChR亚型α3β4的激动剂。在一些实施方案中，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是nAChR亚型α3α5β4的激动剂。在一些实施方案中，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是nAChR亚型α4β2的激动剂。在一些实施方案中，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是nAChR亚型α4α6β2的激动剂。在一些实施方案中，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是nAChR亚型α7的激动剂。在一些实施方案中，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐不是nAChR亚型α7的激动剂。在一些实施方案中，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐不是nAChR亚型α7的完全激动剂。在一些实施方案中，nAChR激动剂是前述亚型的完全激动剂。在一些实施方案中，nAChR激动剂是前述亚型的部分激动剂。在一些实施方案中，nAChR激动剂是前述亚型的弱部分激动剂。

在一些实施方案中，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐选择性地结合至选自α3β4、α3α5β4、α4β2和α4α6β2的nAChR亚型中的至少一种。在一些实施方案中，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐选择性地结合至nAChR亚型α3β4。在一些实施方案中，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐选择性地结合至nAChR亚型α3α5β4。在一些实施方案中，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐选择性地结合至nAChR亚型α4β2。在一些实施方案中，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐选择性地结合至nAChR亚型α4α6β2。在一些实施方案中，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐选择性地结合至nAChR亚型α7。在一些实施方案中，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐不选择性地结合至nAChR亚型α7。

在本公开文本中考虑的nAChR激动剂包括伐尼克兰、其药学上可接受的盐，和化合物1或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，nAChR激动剂不是伐尼克兰。

将伐尼克兰表征为nAChR亚型α7的完全激动剂以及亚型α3β4、α4β2、α6β2、α3α5β4和α4α6β2的部分激动剂。其具有激活三叉神经-副交感神经通路从而刺激所有三层泪膜产生的潜力，并有可能作为改善干眼病体征和症状的新候选者。在本文所述的一些实施方案中，nAChR激动剂是伐尼克兰或其药学上可接受的盐。伐尼克兰的药学上可接受的盐包括酒石酸伐尼克兰。伐尼克兰的专利相关信息可以在美国专利9,504,644、美国专利9,504,645、美国专利9,532,944和美国专利9,597,284中找到。

如本文所述的化合物1是指结构：此处示出了化合物1的替代结构表示：化合物1还可以用其化学名称来提及。例如，化合物1也被称为(R)-5-((E)-2-吡咯烷-3-基乙烯基)嘧啶或其变体，包括5-{(E)-2-[(3R)-吡咯烷-3-基]乙烯基}嘧啶和(R,E)-5-((2-吡咯烷-3-基)乙烯基)嘧啶。

化合物1是nAChR亚型α4β2、α3β4、α3α5β4和α4α6β2的完全激动剂。化合物1是nAChR亚型α4β2和α3β4的完全激动剂。

化合物1是亚型α3β2的部分激动剂。

化合物1是亚型α7的弱部分激动剂。在一个例子中，300微摩尔浓度的化合物1柠檬酸盐仅诱发了25％的最大ACh诱发电流。

在本文所述的一些实施方案中，nAChR激动剂可以是化合物1或其药学上可接受的盐。化合物1的药学上可接受的盐包括粘酸盐(例如，半粘酸盐二水合物)和柠檬酸盐(例如，单柠檬酸盐)。化合物1的专利相关信息可以在美国专利7,098,331、美国专利7,714,001、美国专利8,063,068、美国专利8,067,443、美国专利8,604,191、美国专利9,145,396、美国专利9,981,949、美国专利8,633,222和PCT公开案WO 2017/177024中找到。

在本文所述的一些实施方案中，nAChR激动剂是(R)-5-((E)-2-吡咯烷-3-基乙烯基)嘧啶或其药学上可接受的盐。在本文所述的一些实施方案中，nAChR激动剂是(R)-5-((E)-2-吡咯烷-3-基乙烯基)嘧啶半粘酸盐二水合物。在本文所述的一些实施方案中，nAChR激动剂是(R)-5-((E)-2-吡咯烷-3-基乙烯基)嘧啶单柠檬酸盐。

在本文所述的一些实施方案中，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是伐尼克兰或其药学上可接受的盐，并且PAM是Br-PBTC或其药学上可接受的盐。在本文所述的一些实施方案中，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是伐尼克兰或其药学上可接受的盐，并且PAM是NS-9283或其药学上可接受的盐。在本文所述的一些实施方案中，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是化合物1或其药学上可接受的盐，并且PAM是Br-PBTC或其药学上可接受的盐。在本文所述的一些实施方案中，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是化合物1或其药学上可接受的盐，并且PAM是NS-9283或其药学上可接受的盐。

三叉神经-副交感神经通路

在此简要讨论三叉神经副交感神经通路的表征及其对本文所述方法的重要性。三叉神经包括眼神经、上颌神经和下颌神经。三叉神经的眼和上颌分支形成传入路径。鼻粘膜上皮和伤害感受神经衬有启动鼻内反射传入支的受体。反射的传出路径从上唾液核沿着面神经(中间部)到达膝状神经节，并且经由蝶腭神经节从那里通过浅岩大神经到达泪腺功能单位的腺体(泪腺、睑板腺和杯状细胞)。健康的泪膜组成是复杂的，并且由表面脂质层、中间粘蛋白层和深粘蛋白层组成。这些层的每种组分都来源于不同的腺体；睑板腺(脂质层)、泪腺(水层)和杯状细胞(粘蛋白层)。动物的神经解剖学研究说明，三叉神经-副交感神经通路支配了这些腺体中的每一个。本公开文本提供了包括刺激三叉神经-副交感神经通路作为排泄泪膜组分的手段的方法。

在本文所述的一些实施方案中，所述方法可以包括激活鼻泪反射。在本文所述的一些实施方案中，所述方法可以包括激活三叉神经。在本文所述的一些实施方案中，所述方法可以包括激活筛前神经。

在本文所述的一些实施方案中，所述方法包括改善泪膜稳态。在本文所述的一些实施方案中，所述方法包括重建泪膜稳态。在一些实施方案中，所述有需要的个体缺乏泪膜稳态或泪膜稳态受损。

有效治疗的指标

在用本文公开的任何方法治疗之前、期间和之后，有多种测试可用于评价个体的病症。在本文公开的一些实施方案中，通过选自以下的一种或多种测试来指示对所述个体的有效治疗：a)根据视觉模拟量表的眼睛干燥得分测试，b)Schirmer测试，c)角膜荧光素染色测试，和d)眼表疾病指数测试。可以在标准化或可复制的条件下施用评价眼部病症体征和症状的测试，以便获得个体的测试得分。条件包括将所述个体暴露于人为创造的不利地激发所述个体的环境、或者对环境(温度、湿度、空气流量)进行监测和仔细控制的条件。

接下来的章节提供了关于根据视觉模拟量表的眼睛干燥得分测试、Schirmer测试、角膜荧光素染色测试和眼表疾病指数测试的进一步的细节。

眼睛干燥得分测试

根据视觉模拟量表的眼睛干燥得分测试可以用于评价个体的干眼病、流泪水平或眼部不适。所述测试涉及使用视觉模拟量表，并包括一条100mm水平线，其中0处的一个端点标记为“没有不适”并且100处的另一个端点标记为“最大不适”。图1示出了视觉模拟量表的例子(未以实际标度示出)。通过在水平线上放置垂直标记物以指示所述个体的不适水平，要求他们对由于眼睛干燥引起的眼部症状进行评定。然后，通过鉴定所述个体的回答在100mm量表上的位置来获得眼睛干燥得分。

以mm为单位测量的眼睛干燥得分可以用于评价眼部症状的严重程度以及个体的特定治疗的有效性。此测试的优点是以每5分钟的频率对所述个体施用，这允许测试管理员密切监测所述个体的症状随时间推移的变化。相比于指示不适程度相对较低的较低数字，较高数字指示眼部症状的更加不适。眼睛干燥得分的减小证明所述治疗在治疗干眼病、增加泪液产生或改善眼部不适中是有效的。眼睛干燥得分随时间推移的降低是眼部症状减轻或缓解的证据，并且通常指示所述个体的病症有所改善。

在本文公开的一些实施方案中，通过所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小来指示有效治疗，并且其中在向所述个体施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量、以及PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量之后确定所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小，其中将所述个体的眼睛干燥得分与以下进行比较：a)在施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之前所述个体的眼睛干燥得分；b)施用对照的个体的眼睛干燥得分；或c)施用比较化合物的个体的眼睛干燥得分。

在本文公开的一些实施方案中，将所述个体的眼睛干燥得分与在施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之前所述个体的眼睛干燥得分进行比较。

在本文公开的一些实施方案中，将所述个体的眼睛干燥得分与施用对照的个体的眼睛干燥得分进行比较。

在本文公开的一些实施方案中，将所述个体的眼睛干燥得分与施用比较化合物的个体的眼睛干燥得分进行比较。

在本文所述的一些实施方案中，所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小是至少5％、10％、15％、20％、25％、50％、75％、80％、90％、95％、100％、125％、150％、200％、250％、300％或350％。

在本文所述的一些实施方案中，所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小是至少3mm、至少5mm、至少10mm、至少15mm、至少20mm、至少25mm、至少30mm、至少35mm、至少40mm、至少45mm或至少50mm。

在本文所述的一些实施方案中，所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小在3mm和10mm之间、在3mm和20mm之间、在3mm和25mm之间、在3mm和30mm之间、在3mm和35mm之间、在3mm和40mm之间、在3mm和45mm之间、在3mm和50mm之间、在5mm和10mm之间、在5mm和20mm之间、在5mm和25mm之间、在5mm和30mm之间、在5mm和35mm之间、在5mm和40mm之间、在5mm和45mm之间、在5mm和50mm之间、在10mm和15mm之间、在10mm和20mm之间、在10mm和25mm之间、在10mm和30mm之间、在10mm和35mm之间、在10mm和40mm之间、在10mm和45mm之间、在10mm和50mm之间、在15mm和20mm之间、在20mm和30mm之间、在25mm和35mm之间、在30mm和40mm之间、在30mm和45mm之间或在30mm和50mm之间。

在本文所述的一些实施方案中，所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小的特征在于p值为0.05或更小、0.01或更小、0.005或更小或者0.001或更小。在本文所述的一些实施方案中，所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小的特征在于p值为0.05或更小。在本文所述的一些实施方案中，所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小的特征在于p值为0.01或更小。

在本文所述的一些实施方案中，所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小是在施用有效量的nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量的5分钟内、10分钟内、15分钟内、20分钟内、30分钟内、45分钟内或60分钟内。在本文所述的一些实施方案中，所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小是在有效量的nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量的5分钟或10分钟内。

在本文所述的一些实施方案中，其中所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小是基于在施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量之后确定的所述个体的眼睛干燥得分。

在本文所述的一些实施方案中，统计学显著减小是基于在施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的一个或多个后续剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一或者一个或多个后续剂量之后确定的所述个体的眼睛干燥得分。

SCHIRMER得分测试

干眼病影响泪液量和泪液产生。Schirmer测试可以用于评价个体的泪液产生并评估干眼病、泪液不足或眼部不适的严重程度。所述测试测量每只眼睛产生的泪液量。所述测试通常涉及首先将麻醉剂放入所述个体的一只或两只眼睛中。这些药滴防止眼睛因对测试条反应而流泪水。然后，测试管理员将一张滤纸放在一个或两个下眼睑内，并且人闭上眼睛。5分钟后，测试管理员将滤纸取出，并评估泪液在滤纸上的行进距离。可以对一只或两只眼睛施用Schirmer测试。

通常，滤纸上的水分量越少，人产生的泪液越少。在健康的眼睛中，每条滤纸通常含有多于10毫米的水分。少于10毫米的水分的Schirmer得分可能指示以下一种或多种情况，包括干眼病、异常低的流泪或眼部不适。

Schirmer测试可以用于评价特定疗法在个体中的有效性，并且可以被施用多次以监测一段时间内所述个体的症状严重程度的任何变化。对于因干眼病、流泪不足或眼部不适而治疗的个体，Schirmer得分随时间推移的增加是泪液量或泪液产生增加的证据，并且通常指示所述个体的病症有所改善。Schirmer得分随时间推移的增加证明治疗在治疗干眼病、增加泪液产生或改善眼部不适中是有效的。

在本文公开的一些实施方案中，通过所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加来指示有效治疗，并且其中在向所述个体施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量、以及PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量之后确定所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加，其中将所述个体的Schirmer得分与以下进行比较：a)在施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之前所述个体的Schirmer得分；b)施用对照的个体的Schirmer得分；或c)施用比较化合物的个体的Schirmer得分。

在本文公开的一些实施方案中，将所述个体的Schirmer得分与在施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之前所述个体的Schirmer得分进行比较。在本文公开的一些实施方案中，将所述个体的Schirmer得分与施用对照的个体的Schirmer得分进行比较。在本文公开的一些实施方案中，将所述个体的Schirmer得分与施用比较化合物的个体的Schirmer得分进行比较。

在本文所述的一些实施方案中，所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加是至少5％、10％、15％、20％、25％、50％、75％、80％、90％、95％、100％、125％、150％、200％、250％、300％或350％。在本文所述的一些实施方案中，所述个体的Schirmer得分的增加是至少100％、200％或300％。

在本文所述的一些实施方案中，所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加是至少3mm、至少5mm、至少10mm、至少15mm、至少20mm、至少25mm、至少30mm、至少35mm、至少40mm、至少45mm或至少50mm。

在本文所述的一些实施方案中，所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加在3mm和5mm之间、在3mm和10mm之间、在3mm和15mm之间、在3mm和20mm之间、在3mm和25mm之间、在3mm和30mm之间、在5mm和10mm之间、在5mm和15mm之间、在5mm和20mm之间、在5mm和25mm之间、在5mm和30mm之间、在10mm和15mm之间、在10mm和20mm之间、在10mm和25mm之间、在10mm和30mm之间、在15mm和20mm之间、在15mm和25mm之间、在15mm和30mm之间、在20mm和25mm之间或在20mm和30mm之间。

在本文所述的一些实施方案中，所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加的特征在于p值为0.05或更小、0.01或更小、0.005或更小或者0.001或更小。

在本文所述的一些实施方案中，所述个体的Schirmer得分的统计学显著减小是在施用有效量的nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量的5分钟内、10分钟内、15分钟内、20分钟内、30分钟内、45分钟内或60分钟内。在本文所述的一些实施方案中，所述个体的Schirmer得分的统计学显著减小是在有效量的nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量的5分钟内。

在本文所述的一些实施方案中，其中所述个体的Schirmer得分的统计学显著减小是基于在施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量之后确定的所述个体的Schirmer得分。

在本文所述的一些实施方案中，统计学显著减小是基于在施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的一个或多个后续剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一或者一个或多个后续剂量之后确定的所述个体的Schirmer得分。

角膜荧光素染色测试

角膜表面变化与泪液流动不足和过度干燥、以及干眼病和眼部不适相关。角膜表面变化可以包括保护表面上皮细胞的粘蛋白涂层破裂、和/或上皮细胞壁受损。

角膜荧光素染色测试是用于确定角膜表面健康的诊断性测试，并且可以指示角膜表面的受损区域。正常的角膜表面不吸收滴入泪膜的水溶性染料。然而，受损的上皮细胞允许水溶性染料扩散到表面细胞中。对受损的上皮细胞进行染色的荧光素可以在角膜表面上可视化，从而指示由于角膜表面干燥造成的损伤。

为了施用角膜荧光素染色测试，将荧光素涂在一只或两只眼睛上。允许荧光素渗透并染色表面细胞之间的区域。失活的细胞和失活的表面组织的缕(细丝)可以用这种染色剂可视化。然后，测试管理员使用已开发的角膜表面评分系统来评定观察到的损伤的严重程度。此评分系统可用于监测随时间推移的干眼治疗。图2描绘了所述评分系统中使用的NEI/行业研讨会量表。可以使用其他等效的标准化评分系统。测试管理员对受损的角膜表面区域进行分级，并计算出反映角膜表面受损的严重程度的角膜得分。

测试管理员可以使用角膜得分来评价特定治疗在个体中的有效性。所述测试可以施用多次，以监测一段时间内所述个体的眼表严重程度的任何变化。通常，与指示角膜表面受损程度较低的较低数字相比，较高数字指示角膜表面受损更大。角膜得分随时间推移的降低是角膜表面受损减少的证据。角膜得分的减小通常指示所述个体的病症有所改善。角膜得分随时间推移的减小还证明所述治疗在治疗干眼病、增加泪液产生或改善眼部不适中是有效的。

在本文公开的一些实施方案中，通过所述个体的角膜得分的统计学显著减小来指示有效治疗，并且其中在向所述个体施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量、以及PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量之后确定所述个体的角膜得分的统计学显著减小，其中将所述个体的角膜得分与以下进行比较：a)在施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之前所述个体的角膜得分；b)施用对照的个体的角膜得分；或c)施用比较化合物的个体的角膜得分。

在本文公开的一些实施方案中，将所述个体的角膜得分与在施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之前所述个体的角膜得分进行比较。在本文公开的一些实施方案中，将所述个体的角膜得分与施用对照的个体的角膜得分进行比较。在本文公开的一些实施方案中，将所述个体的角膜得分与施用比较化合物的个体的角膜得分进行比较。

在本文所述的一些实施方案中，所述个体的角膜得分的统计学显著减小是至少5％、10％、15％、20％、25％、50％、75％、80％、90％、95％、100％、125％、150％、200％、250％、300％或350％。

在本文所述的一些实施方案中，所述个体的角膜得分的统计学显著减小的特征在于p值为0.05或更小、0.01或更小、0.005或更小或者0.001或更小。

在本文所述的一些实施方案中，所述个体的角膜得分的统计学显著减小是在施用有效量的nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量的5分钟内、10分钟内、15分钟内、20分钟内、30分钟内、45分钟内或60分钟内。在本文所述的一些实施方案中，所述个体的角膜得分的统计学显著减小是在有效量的nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量的5分钟内。

在本文所述的一些实施方案中，其中所述个体的角膜得分的统计学显著减小是基于在施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量之后确定的所述个体的角膜得分。

在本文所述的一些实施方案中，统计学显著减小是基于在施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的一个或多个后续剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一或者一个或多个后续剂量之后确定的所述个体的角膜得分。

眼表疾病指数测试

因干眼病、增加泪液产生或改善眼部不适而治疗的个体可以通过问卷调查来提供用于诊断其病症并确定干眼症状严重程度的重要信息。设计良好的问卷调查可以验证可重复性，并且应由引起响应性答案的相关问题组成。干眼问卷调查的一个例子是眼表疾病指数(OSDI)，这是针对干眼患者的12个问题的调查，其已被证明是直接评估症状频率的可靠且有效的工具。评价的眼部症状包括但不限于烧灼/刺痛、瘙痒、异物感、眼睛不适、眼睛干燥、畏光和疼痛。大多数人都熟悉问卷调查，并了解它们是健康提供者收集信息的有效方法。问卷调查还减少了偏见，因为没有语言或视觉线索来无意中影响调查对象。OSDI问卷调查的例子在图3中示出。测试管理员收集来自所述个体的回答，并基于所述个体对问题的答案计算出OSDI。

OSDI得分可以用于评价眼部症状的严重程度以及个体的特定治疗的有效性。数字越高指示干眼病的严重程度越高。OSDI得分随时间推移的降低是眼部症状减轻或缓解的证据，并且通常指示所述个体的病症有所改善。OSDI得分的减小还证明所述治疗在治疗干眼病、增加泪液产生或改善眼部不适中是有效的。

在本文公开的一些实施方案中，通过所述个体的OSDI得分的统计学显著减小来指示有效治疗，并且其中在向所述个体施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量、以及PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量之后确定所述个体的OSDI得分的统计学显著减小，其中将所述个体的OSDI得分与以下进行比较：a)在施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之前所述个体的OSDI得分；b)施用对照的个体的OSDI得分；或c)施用比较化合物的个体的OSDI得分。

在本文公开的一些实施方案中，将所述个体的OSDI得分与在施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之前所述个体的OSDI得分进行比较。在本文公开的一些实施方案中，将所述个体的OSDI得分与施用对照的个体的OSDI得分进行比较。在本文公开的一些实施方案中，将所述个体的OSDI得分与施用比较化合物的个体的OSDI得分进行比较。

在本文所述的一些实施方案中，所述个体的OSDI得分的统计学显著减小是至少5％、10％、15％、20％、25％、50％、75％、80％、90％、95％、100％、125％、150％、200％、250％、300％或350％。

在本文所述的一些实施方案中，所述个体的OSDI得分的统计学显著减小的特征在于p值为0.05或更小、0.01或更小、0.005或更小或者0.001或更小。

在本文所述的一些实施方案中，所述个体的OSDI得分的统计学显著减小是在施用有效量的nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量的5分钟内、10分钟内、15分钟内、20分钟内、30分钟内、45分钟内或60分钟内。在本文所述的一些实施方案中，所述个体的OSDI得分的统计学显著减小是在有效量的nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量的5分钟内。

在本文所述的一些实施方案中，其中所述个体OSDI得分的统计学显著减小是基于在施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量之后确定的所述个体的OSDI得分。

在本文所述的一些实施方案中，统计学显著减小是基于在施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的一个或多个后续剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一或者一个或多个后续剂量之后确定的所述个体的OSDI得分。

有效治疗随时间推移的维持

本公开文本提供了在维持个体得分的统计学显著改善的一段时间内的有效治疗。如本公开文本所用的术语“维持”并且当涉及个体得分(EDS、Schirmer、角膜或OSDI)的统计学显著改善的维持时是指统计学显著改善不随时间推移减小到低于某个阈值。即使所述个体的得分在稍后的某个时间点发生变化，也可以维持统计学显著改善。在nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后的改善可以在没有另外给药的情况下或在一个或多个后续剂量后加以维持。

例如，眼睛干燥得分“维持在10％以内”意指在指定时间内，个体眼睛干燥得分不会减小多于10％。所述个体的眼睛干燥得分的进一步改善也被视为维持统计学显著改善(例如，如果眼睛干燥得分在指定时间内进一步改善了15％，则这被视为“维持在10％以内”)。

在另一个例子中，如果在服用nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后30分钟，个体的眼睛干燥得分存在统计学显著减小(改善)，并且在稍后的时间点，所述个体的得分相同或更低(指示对所述个体有益)，则可以说维持了统计学显著改善。可替代地，如果在稍后的时间点，所述个体的眼睛干燥得分大于在服用nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后30分钟的眼睛干燥得分，则所述个体可能仍在接受治疗益处，并且与第一剂量的先前施用或其治疗前基线得分相比，后来确定的得分可能仍是统计学显著改善。

请注意，根据所测量的得分，构成改善的内容有所不同。例如，眼睛干燥得分、角膜得分和OSDI得分的改善是得分数值的减小。对于Schirmer测试，改善通常是Schirmer得分数值的增加。

在本文所述的一些实施方案中，维持所述个体的得分(例如，EDS、Schirmer、角膜或OSDI)的统计学显著改善意味着统计学显著改善不会减小多于10％、20％、30％、40％、50％或60％。

在本文所述的一些实施方案中，所述个体的得分(例如，EDS、Schirmer、角膜或OSDI)的统计学显著改善维持至少30分钟、至少45分钟、至少60分钟、至少2小时、至少4小时、至少6小时、至少8小时、至少1天、至少1周、至少1个月、至少3个月、至少6个月、至少9个月或至少12个月。在本文所述的一些实施方案中，所述个体的得分的统计学显著改善自施用nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量起维持至少30分钟，其中统计学显著改善不会减小多于30％。

在本文所述的一些实施方案中，所述个体的得分(例如，EDS、Schirmer、角膜或OSDI)的统计学显著改善在施用nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后维持至少30分钟、至少45分钟、至少60分钟、至少2小时、至少4小时、至少6小时、至少8小时、至少1天、至少1周、至少1个月、至少3个月、至少6个月、至少9个月或至少12个月，其中与施用nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后5分钟内的所述个体的得分相比，统计学显著改善不会减小多于10％、20％、30％、40％、50％或60％。

在本文所述的一些实施方案中，所述个体的得分(例如，EDS、Schirmer、角膜或OSDI)的统计学显著改善在施用nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后维持至少30分钟、至少45分钟、至少60分钟、至少2小时、至少4小时、至少6小时、至少8小时、至少1天、至少1周、至少1个月、至少3个月、至少6个月、至少9个月或至少12个月，其中与施用nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后5分钟内的所述个体的相应的眼睛干燥得分、角膜得分或OSDI得分相比，统计学显著改善不会减小多于20％。

在本文所述的一些实施方案中，所述个体的得分(例如，EDS、Schirmer、角膜或OSDI)的统计学显著改善在施用nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后维持至少30分钟，其中与施用nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后5分钟内的所述个体的得分相比，统计学显著改善不会减小多于10％、20％或30％。

在本文所述的一些实施方案中，在施用nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后至少30分钟、至少45分钟、至少60分钟、至少2小时、至少4小时、至少6小时、至少8小时、至少1天、至少1周、至少1个月、至少3个月、至少6个月、至少9个月或至少12个月的所述个体的Schirmer得分，与施用nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后5分钟内的所述个体的相应的Schirmer得分相比，不会减小多于10％、20％、30％、40％、50％或60％。

在本文所述的一些实施方案中，在施用nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后至少30分钟、至少45分钟、至少60分钟、至少2小时、至少4小时、至少6小时、至少8小时、至少1天、至少1周、至少1个月、至少3个月、至少6个月、至少9个月或至少12个月的所述个体的Schirmer得分，与施用nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后5分钟内的所述个体的相应的Schirmer得分相比，不会减小多于30％。

在本文所述的一些实施方案中，在施用nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后至少30分钟的所述个体的Schirmer得分，与施用nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后5分钟内的所述个体的相应的Schirmer得分相比，不会减小多于30％、20％或10％。

在本文所述的一些实施方案中，在施用nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后至少30分钟、至少45分钟、至少60分钟、至少2小时、至少4小时、至少6小时、至少8小时、至少1天、至少1周、至少1个月、至少3个月、至少6个月、至少9个月或至少12个月的所述个体的眼睛干燥得分、角膜得分或OSDI得分，与施用nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后5分钟内的所述个体的相应的眼睛干燥得分、角膜得分或OSDI得分相比，不会增加多于10％、20％、30％、40％、50％或60％。

在本文所述的一些实施方案中，在施用nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后至少30分钟、至少45分钟、至少60分钟、至少2小时、至少4小时、至少6小时、至少8小时、至少1天、至少1周、至少1个月、至少3个月、至少6个月、至少9个月或至少12个月的所述个体的眼睛干燥得分、角膜得分或OSDI得分，与施用nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后5分钟内的所述个体的相应的眼睛干燥得分、角膜得分或OSDI得分相比，不会增加多于30％。

在本文所述的一些实施方案中，在施用nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后至少30分钟的所述个体的眼睛干燥得分、角膜得分或OSDI得分，与施用nAChR或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后5分钟内的所述个体的相应的眼睛干燥得分、角膜得分或OSDI得分相比，不会增加多于30％、20％或10％。

湿度

术语“湿度”可以指相对湿度，其是在给定温度下水蒸气的分压与水的平衡蒸气压之比。相对湿度取决于目标系统的温度和压力。在低温下达到高的相对湿度需要较少的水蒸气；在温空气或热空气中需要更多的水蒸气来达到高的相对湿度。在本文所述的一些实施方案中，在确定所述个体的得分(眼睛干燥、Schirmer、角膜、OSDI)之间，所述个体存在于相对湿度降低的环境中。

在确定个体在特定测试中的评分之间，所述个体可能存在于或暴露于人为创造的不利地激发所述个体的环境。例如，所述个体可能在这样的房间中，其中的温度、湿度、空气流量被监测和控制以创造不利条件。在另一个例子中，所述个体可能佩戴干燥的护目镜，并且他们的眼睛可能受到低相对湿度的激发。

在本文所述的一些实施方案中，在确定所述个体的眼睛干燥得分之间、在确定所述个体的Schirmer得分之间、在确定所述个体的角膜得分之间以及在确定所述个体的OSDI得分之间，所述个体存在于湿度降低的环境中。在本文所述的一些实施方案中，在确定所述个体的眼睛干燥得分之间、在确定所述个体的Schirmer得分之间、在确定所述个体的角膜得分之间以及在确定所述个体的OSDI得分之间，所述个体存在于湿度降低且温度低于或高于室温的环境中。在本文所述的一些实施方案中，在室温下降低的相对湿度小于40％、小于30％、小于20％、小于10％或小于5％。室温在15摄氏度(59华氏度)和25摄氏度(77华氏度)之间。

给药时间和施用方法

施用至个体的剂量时间表取决于多种考虑因素，包括每个剂量的有效性的持续时间、药物的药代动力学特征以及剂量对身体的影响。例如，在所述患者的病症没有改善的情况下，根据健康提供者的判断，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐的频率可以增加或长期施用，以便改善或以其他方式控制或限制所述患者的疾病或病症的症状。在另一个例子中，如果个体的病症确实有所改善，则根据健康提供者的判断，在维持对所述个体的有效治疗的同时可以降低一定剂量的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者一定剂量的PAM或其药学上可接受的盐的施用频率。例如，延长施用一个或多个剂量之间的时间段，或者延长向所述个体施用一个或多个剂量的天数之间的时间段。作为非限制性例子，将每天施用一个或多个剂量修改为每隔一天或每周一次施用一个或多个剂量。

如本文所用，术语“剂量”可以指nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的剂量或者PAM或其药学上可接受的盐的剂量。

在本文所述的一些实施方案中，在第一天施用后每天一至四次、在第一天施用后一天一次、在第一天施用后一天两次或在第一天施用后一天三次向所述有需要的个体施用剂量。

在本文所述的一些实施方案中，随时间推移向所述个体施用一个或多个后续剂量，其中即使随时间推移向所述个体施用的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐的量降低，也维持对所述个体的有效治疗。在本文所述的一些实施方案中，随时间推移降低向所述个体施用的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐的剂量频率。例如，将一天两次施用的剂量降低为一天一次施用的剂量。

在本文所述的一些实施方案中，给药之间的时间长度增加。例如，将每4小时施用剂量修改为每8或12小时施用剂量。

在本文所述的一些实施方案中，随时间推移降低每剂量的nAChR激动剂的总量或其药学上可接受的盐的相应量或者PAM的总量或其药学上可接受的盐的相应量。例如，将2000微克的剂量降低到1000微克，其中施用降低的剂量维持对所述个体的有效治疗。在本文所述的一些实施方案中，降低的剂量是通过nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐施用的减少来提供。例如，在以鼻喷雾剂的形式施用的情况下，通过仅施用一次喷雾来降低包含nAChR或其药学上可接受的盐的两次施用或喷雾的剂量。

在本文所述的一些实施方案中，所述剂量包括向每个鼻孔多次施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐。在本文所述的一些实施方案中，所述剂量包括向一个鼻孔多次施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐。

在本文所述的一些实施方案中，所述剂量包括向每个鼻孔单次施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐。在本文所述的一些实施方案中，所述剂量包括向一个鼻孔单次施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐。

在本文所述的一些实施方案中，每剂量向一个鼻孔施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐。在本文所述的一些实施方案中，每剂量向两个鼻孔施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐。

在本文所述的一些实施方案中，将nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐施用至少28天。在本文所述的一些实施方案中，将nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐施用至少一个或多个月。

在本文所述的一些实施方案中，将nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐施用至少2个月、至少3个月、至少4个月、至少5个月、至少6个月、至少7个月、至少8个月、至少9个月、至少10个月、至少11个月或至少1年。在本文所述的一些实施方案中，将nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐施用2-52周、2-40周、2-36周、2-24周、2-12周、2-8周、4-52周、4-40周、4-36周、4-24周、4-12周、4-8周、5-52周、5-40周、5-36周、5-24周、5-12周、5-8周、6-52周、6-40周、6-36周、6-24周、6-12周或6-8周。

在本文所述的一些实施方案中，所述方法包括有效量的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量和一个或多个后续剂量。在第一剂量后的一段时间之后，施用一个或多个后续剂量。第一剂量和下一后续剂量之间的这段时间为至少1小时、至少2小时、至少3小时、至少4小时、至少5小时、至少6小时、至少7小时或至少8小时。第一剂量和下一后续剂量之间的时间段在1-3小时、2-4小时、3-6小时或4-8小时之间。一个或多个后续剂量之间的时间段为至少1小时、至少2小时、至少3小时、至少4小时、至少5小时、至少6小时、至少7小时或至少8小时。一个或多个后续剂量之间的时间段在1-3小时、2-4小时、3-6小时或4-8小时之间。

在本文所述的一些实施方案中，在nAChR激动剂或其药学上可接受的盐之后，向所述有需要的个体施用PAM或其药学上可接受的盐。在本文所述的一些实施方案中，在nAChR激动剂或其药学上可接受的盐之前，向所述有需要的个体施用PAM或其药学上可接受的盐。在本文所述的一些实施方案中，同时向所述有需要的个体施用PAM或其药学上可接受的盐和nAChR激动剂或其药学上可接受的盐。

在本文所述的一些实施方案中，所述方法包括施用一定剂量的有效量的PAM或其药学上可接受的盐和一定剂量的有效量的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，对于施用的nAChR激动剂的每个剂量，在nAChR之前施用一定剂量的PAM。在一些实施方案中，对于施用的nAChR激动剂的每个剂量，在nAChR激动剂之后施用一定剂量的PAM。在一些实施方案中，对于施用的nAChR激动剂的每个剂量，与nAChR激动剂同时施用一定剂量的PAM。

在长期治疗过程中，在向所述个体在一段时间内施用多个剂量的情况下，可以向所述个体施用比PAM或其药学上可接受的盐的剂量更多的nAChR或其药学上可接受的盐的剂量，或反之亦然。向个体施用的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的剂量与PAM或其药学上可接受的盐的剂量的比率不需要为1:1。所述比率将取决于给所述个体开出的给药方案。在本文公开的一些实施方案中，在治疗过程中，向个体施用的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的剂量与PAM或其药学上可接受的盐的剂量的比率为1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:9、1:10、10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1。

在本文所述的一些实施方案中，所述方法包括施用有效量的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量和一个或多个后续剂量、以及有效量的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和一个或多个后续剂量。

在本文所述的一些实施方案中，施用一定剂量的PAM或其药学上可接受的盐和一定剂量的有效量的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐之间的时间段小于5分钟、在5-60分钟之间、在30-90分钟之间、在1-3小时之间、在1-8小时之间、在1-12小时之间、在1-24小时之间、在8-12小时之间、在8-24小时之间、在12-24小时之间、在1-3天之间、在1-7天之间、在1-14天之间、在1-28天之间、在3-7天之间、在3-14天之间、在3-28天之间、在7-14天之间或在7-28天之间。

在本文所述的一些实施方案中，所述方法包括施用nAchR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和一个或多个后续剂量、以及PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量和一个或多个后续剂量。在第一剂量后的一段时间之后，施用一个或多个后续剂量。第一剂量和下一后续剂量之间的这段时间为至少1小时、至少2小时、至少3小时、至少4小时、至少5小时、至少6小时、至少7小时或至少8小时。第一剂量和下一后续剂量之间的时间段在1-3小时、2-4小时、3-6小时或4-8小时之间。一个或多个后续剂量之间的时间段为至少1小时、至少2小时、至少3小时、至少4小时、至少5小时、至少6小时、至少7小时或至少8小时。一个或多个后续剂量之间的时间段在1-3小时、2-4小时、3-6小时或4-8小时之间。

在本文所述的一些实施方案中，以分开的剂型向所述有需要的个体施用PAM或其药学上可接受的盐和nAChR激动剂或其药学上可接受的盐。在本文所述的一些实施方案中，以组合剂型向所述有需要的个体施用PAM或其药学上可接受的盐和nAChR激动剂或其药学上可接受的盐。

剂量量和体积

在本文所述的一些实施方案中，施用本文所述的剂量用于预防性和/或治疗性治疗。对于治疗性治疗有效的剂量取决于疾病或病症的严重程度和病程、先前的疗法、患者的健康状况、状态、体重和对药物的反应以及治疗健康提供者的判断。治疗有效量任选地通过包括但不限于剂量递增临床试验的方法来确定。

在预防性应用中，向易患特定疾病、障碍或病症或者以其他方式处于其风险中的患者施用本文所述的药物配制品。将这样的量定义为“预防有效量或剂量”。在这种使用中，所述量将取决于疾病、障碍或病症的严重程度和病程、先前的疗法、患者的健康状态和对药物的反应以及治疗健康提供者的判断。

在本文所述的一些实施方案中，向所述个体施用的每剂量的nAChR激动剂或PAM的量为5-4000微克、5-1000微克、10-2000微克、10-700微克、100-700微克、100-600微克、100-500微克、200-700微克、200-600微克、200-500微克、300-600微克、300-500微克、900-4000微克、900-3000微克、900-2500微克、900-2000微克、1000-4000微克、1000-2500微克、1000-2000微克、1250-4000微克、1250-2500微克、1250-2000微克、1500-4000微克、1500-3000微克、1500-2500微克、1500-2000微克、1800-4000微克、1800-3000微克、1800-2500微克、1800-2250微克、2000-4000微克、2000-3000微克或2000-2500微克、或者其药学上可接受的盐的相应量。

在本文所述的一些实施方案中，向所述个体施用的每剂量的nAChR激动剂或PAM的量为900-2500微克、1000-2500微克、1500-3000微克、1800-2500微克、1800-2250微克、或者其药学上可接受的盐的相应量。在本文所述的一些实施方案中，向所述个体施用的每剂量的伐尼克兰或化合物1的量为900-2500微克、1000-2500微克、1500-3000微克、1800-2500微克、1800-2250微克、或者其药学上可接受的盐的相应量。

在本文所述的一些实施方案中，向所述个体施用的每剂量的伐尼克兰的量为5-15微克、50-65微克、100-125微克、或者其药学上可接受的盐的相应量。

在本文所述的一些实施方案中，向所述个体施用的每剂量的化合物1的量为150-300微克、900-1200微克、2100-2400微克、或者其药学上可接受的盐的相应量。

在本文所述的一些实施方案中，施用nAChR激动剂或PAM的药学上可接受的盐。在本文所述的一些实施方案中，施用nAChR激动剂或PAM的游离碱。

向个体施用的药物配制品的体积取决于多种因素，包括施用途径和递送装置的类型。对于鼻腔施用，药物配制品的体积应足以将有效量的药物递送至鼻腔。体积太小可能导致药物无法到达鼻腔。另一方面，体积不应太大，以致于不实用、不舒服或太难施用至所述个体。此外，体积太大可能导致药物配制品被递送至不打算递送的身体区域。这可能导致药物配制品的浪费或对组织的刺激。例如，将剂量体积从200微升降低到100微升可以通过减少滴注后的鼻后滴漏来减少上咽喉/软腭的刺激发生率。

在本文所述的一些实施方案中，将nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐以用于鼻腔施用的药物配制品的形式施用，并且每剂量的药物配制品的总体积为50-250微升、75-125微升、150-250微升或175-225微升。

在本文所述的一些实施方案中，将nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐以用于鼻腔施用的药物配制品的形式施用，并且每剂量的药物配制品的总体积为约50微升、约75微升、约100微升、约125微升、约150微升、约175微升、约200微升、约225微升或约250微升。

在本文所述的一些实施方案中，将nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐以用于鼻腔施用的药物配制品的形式施用，并且每鼻孔的药物配制品的总体积为50-250微升、75-125微升、150-250微升或175-225微升。

在本文所述的一些实施方案中，将nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐以用于鼻腔施用的药物配制品的形式施用，并且每鼻孔的药物配制品的总体积为约50微升、约75微升、约100微升、约125微升、约150微升、约175微升、约200微升、约225微升或约250微升。

在本文所述的一些实施方案中，将nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐以用于鼻腔施用的药物配制品的形式施用，所述药物配制品包含在1mg/mL和40mg/mL之间、在1mg/mL和30mg/mL之间、在1mg/mL和20mg/mL之间、在1mg/mL和10mg/mL之间、在1mg/mL和5mg/mL之间、在2mg/mL和40mg/mL之间、在2mg/mL和30mg/mL之间、在2mg/mL和20mg/mL之间、在2mg/mL和10mg/mL之间、在2mg/mL和5mg/mL之间、在5mg/mL和40mg/mL之间、在5mg/mL和30mg/mL之间、在5mg/mL和20mg/mL之间、在5mg/mL和10mg/mL之间或在5mg/mL和15mg/mL之间的nAChR激动剂或相应量的其药学上可接受的盐或者PAM或相应量的其药学上可接受的盐。

在本文所述的一些实施方案中，将nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐以用于鼻腔施用的药物配制品的形式施用，其中每剂量的nAChR激动剂或PAM的浓度为0.01％(w/v)至0.5％(w/v)、0.01％(w/v)至1.0％(w/v)、0.01％(w/v)至1.5％(w/v)、0.01％(w/v)至2.0％(w/v)、0.01％(w/v)至2.5％(w/v)、0.01％(w/v)至3.0％(w/v)、0.5％(w/v)至1.0％(w/v)、0.5％(w/v)至1.5％(w/v)、0.5％(w/v)至2.0％(w/v)、0.5％(w/v)至2.5％(w/v)、0.5％(w/v)至3.0％(w/v)、1.0％(w/v)至1.5％(w/v)、1.0％(w/v)至2.0％(w/v)、1.0％(w/v)至2.5％(w/v)、1.0％(w/v)至3.0％(w/v)、1.5％(w/v)至2.0％(w/v)、1.5％(w/v)至2.5％(w/v)、1.5％(w/v)至3.0％(w/v)、2.0％(w/v)至2.5％(w/v)或2.0％(w/v)至3.0％(w/v)、或者其药学上可接受的盐的相应量。

在本文公开的一些实施方案中，向有需要的个体施用的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的浓度是向所述有需要的个体施用的PAM或其药学上可接受的盐的浓度的10倍、9倍、8倍、7倍、6倍、5倍、4倍、3倍或2倍。在本文公开的一些实施方案中，向有需要的个体施用的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的浓度是向所述有需要的个体施用的PAM或其药学上可接受的盐的浓度的1倍至2倍。在本文公开的一些实施方案中，向有需要的个体施用的PAM或其药学上可接受的盐的浓度是向所述有需要的个体施用的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的浓度的1倍至2倍。

在本文公开的一些实施方案中，向有需要的个体施用的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的量是向所述有需要的个体施用的PAM或其药学上可接受的盐的量的10倍、9倍、8倍、7倍、6倍、5倍、4倍、3倍或2倍。在本文公开的一些实施方案中，向有需要的个体施用的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的量是向所述有需要的个体施用的PAM或其药学上可接受的盐的量的1倍至2倍。在本文公开的一些实施方案中，向有需要的个体施用的PAM或其药学上可接受的盐的量是向所述有需要的个体施用的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的量的1倍至2倍。

在本文所述的一些实施方案中，将伐尼克兰或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐以用于鼻腔施用的药物配制品的形式施用，其中每剂量的伐尼克兰或PAM的浓度为约0.058％(w/v)或约0.12％(w/v)、或者其药学上可接受的盐的相应量。

在本文所述的一些实施方案中，将伐尼克兰或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐以用于鼻腔施用的药物配制品的形式施用，其中每剂量的伐尼克兰或PAM的浓度小于约0.06％(w/v)或小于0.15％(w/v)、或者其药学上可接受的盐的相应量。

在本文所述的一些实施方案中，将伐尼克兰或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐以用于鼻腔施用的药物配制品的形式施用，其中每剂量的伐尼克兰或PAM的浓度为约0.058％(w/v)或约0.12％(w/v)、或者其药学上可接受的盐的相应量；并且其中每剂量的体积为约50微升。

在本文所述的一些实施方案中，将伐尼克兰或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐以用于鼻腔施用的药物配制品的形式施用，其中每剂量的伐尼克兰或PAM的浓度小于约0.06％(w/v)或小于0.15％(w/v)、或者其药学上可接受的盐的相应量；并且其中每剂量的体积为约50微升。

在本文所述的一些实施方案中，将伐尼克兰或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐以用于鼻腔施用的药物配制品的形式施用，其中每剂量的伐尼克兰或PAM的浓度为约0.058％(w/v)或约0.12％(w/v)、或者其药学上可接受的盐的相应量；并且其中每剂量的体积为约100微升。在本文的一些实施方案中，将100微升剂量作为两次50微升喷雾递送。在本文的一些实施方案中，将100微升剂量作为单次100微升喷雾递送。

在本文所述的一些实施方案中，将伐尼克兰或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐以用于鼻腔施用的药物配制品的形式施用，其中每剂量的伐尼克兰或PAM的浓度小于约0.06％(w/v)或小于0.15％(w/v)、或者其药学上可接受的盐的相应量；并且其中每剂量的体积为约100微升。在本文的一些实施方案中，将100微升剂量作为两次50微升喷雾递送。在本文的一些实施方案中，将100微升剂量作为单次100微升喷雾递送。

在本文所述的一些实施方案中，nAChR或PAM是药学上可接受的盐。在本文所述的一些实施方案中，nAChR是化合物1粘酸盐(例如，半粘酸盐二水合物)或化合物1柠檬酸盐(例如，单柠檬酸盐)。在本文所述的一些实施方案中，化合物1是游离碱。在本文所述的一些实施方案中，nAChR激动剂是酒石酸伐尼克兰。

可以基于向有需要的个体施用的药物配制品的nAChR激动剂浓度和药物配制品的体积来计算向所述有需要的个体施用的nAChR激动剂游离碱的量和盐的相应量。以下例子说明了向所述个体施用的药物配制品的浓度和体积与nAChR激动剂盐和游离碱的量之间的关系。

例如，2.0％的化合物1半粘酸盐二水合物溶液相当于每1mL的溶液20mg的所述盐。2.0％的化合物1半粘酸盐二水合物溶液对应于1.1％的化合物1游离碱溶液。1.1％的游离碱溶液相当于11.1mg/mL的化合物1游离碱。

50μL的2.0％的化合物1半粘酸盐二水合物溶液含有约1000μg的化合物1半粘酸盐二水合物，其相当于约554μg的化合物1游离碱。同样，100μL的2.0％的化合物1半粘酸盐二水合物溶液含有约2000μg的化合物1半粘酸盐二水合物，其相当于约1108μg的化合物1游离碱。可以以类似的方式针对其他浓度或体积计算盐的量和游离碱的相应量。

在另一个例子中，2.3％的化合物1单柠檬酸盐溶液相当于每1mL的溶液23.2mg的所述盐。2.3％的化合物1单柠檬酸盐溶液对应于1.1％的化合物1游离碱溶液。1.1％的游离碱溶液相当于11.1mg/mL的化合物1游离碱。

50μL的2.3％的化合物1单柠檬酸盐溶液含有约1161μg的化合物1单柠檬酸盐，其相当于约554μg的化合物1游离碱。同样，100μL的2.3％的化合物1单柠檬酸盐溶液含有约2322μg的化合物1单柠檬酸盐，其相当于约1108μg的化合物1游离碱。可以以类似的方式针对其他浓度或体积计算盐的量和游离碱的相应量。

在另一个例子中，0.10％的酒石酸伐尼克兰溶液相当于每1mL的溶液1.00mg的所述盐。0.10％的酒石酸伐尼克兰溶液对应于溶液中0.0585％的伐尼克兰游离碱。0.0585％的游离碱溶液相当于0.584mg/mL的伐尼克兰游离碱。

50μL的0.10％的酒石酸伐尼克兰溶液含有约50μg的酒石酸伐尼克兰，其相当于约29.2μg的伐尼克兰游离碱。同样，100μL的0.10％的酒石酸伐尼克兰溶液含有约100μg的酒石酸伐尼克兰，其相当于约58.5μg的伐尼克兰游离碱。可以以类似的方式针对其他浓度或体积计算盐的量和游离碱的相应量。

在另一个例子中，0.20％的酒石酸伐尼克兰溶液相当于每1mL的溶液2.00mg的所述盐。0.20％的酒石酸伐尼克兰溶液对应于溶液中0.117％的伐尼克兰游离碱。0.117％的游离碱溶液相当于1.17mg/mL的伐尼克兰游离碱。

50μL的0.20％的酒石酸伐尼克兰溶液含有约100μg的酒石酸伐尼克兰，其相当于约58.5μg的伐尼克兰游离碱。同样，100μL的0.20％的酒石酸伐尼克兰溶液含有约200μg的酒石酸伐尼克兰，其相当于约117μg的伐尼克兰游离碱。可以以类似的方式针对其他浓度或体积计算盐的量和游离碱的相应量。

盐形式的相应量可以通过将游离碱的量乘以倍增因子来计算。倍增因子通过将盐形式的分子量除以游离碱的分子量来计算。例如，用于将一定量的式I化合物游离碱转化为单柠檬酸盐的倍增因子为2.096。用于将一定量的式I化合物游离碱转化为半粘酸盐二水合物的倍增因子为1.805。用于将一定量的伐尼克兰游离碱转化为酒石酸伐尼克兰的倍增因子为1.710。

游离碱的相应量可以通过将盐形式的量乘以倍增因子来计算。所述因子通过将游离碱的分子量除以盐形式的分子量来计算。例如，用于将一定量的酒石酸伐尼克兰转化为游离碱的倍增因子为0.5846。用于将一定量的式I化合物单柠檬酸盐转化为游离碱的倍增因子为0.477。用于将一定量的式I化合物半粘酸盐二水合物转化为游离碱的倍增因子为0.554。

在本文公开的一些实施方案中，向受试者的鼻腔施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐。本文所述的药物配制品包括但不限于液体、悬浮液、气雾剂、凝胶、软膏、干粉、乳膏、糊剂、洗剂或止痛药膏(balm)。

在本文公开的一些实施方案中，将nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐通过喷雾泵、注射器、滴管、瓶式喷雾器、雾化泵、吸入器、粉末喷雾装置、蒸发器、贴片、药棒、移液管或液体射流施用至鼻腔中。

在本文公开的一些实施方案中，向所述受试者的鼻腔施用PAM或其药学上可接受的盐。在本文公开的一些实施方案中，口服施用PAM或其药学上可接受的盐。

副作用

本公开本文提供了局部施用(鼻内)nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐的方法。局部施用比全身施用具有优势，包括通过限制可能穿过血脑屏障的药物量来减少潜在的副作用。在本文公开的一些实施方案中，施用的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐或者PAM或其药学上可接受的盐不是全身生物可利用的。在本文公开的一些实施方案中，所述方法不会导致不期望的全身性副作用。在本文公开的一些实施方案中，所述方法不会导致不期望的精神活性副作用。

在本文所述的一些实施方案中，所述个体未经历选自以下的一种或多种副作用：泪液的过量产生、咳嗽、喉咙刺激、滴注部位刺激、打喷嚏、鼻咽炎、鼻刺激、牙痛、口干和头痛。

在本文所述的一些实施方案中，其中在施用第一剂量或者一个或多个后续剂量的5分钟-60分钟内，所述个体未经历选自以下的一种或多种副作用：泪液的过量产生、咳嗽、喉咙刺激、滴注部位刺激、打喷嚏、鼻咽炎、鼻刺激、牙痛、口干和头痛。

在本文所述的一些实施方案中，通过个体的Schirmer得分增加大于20mm来指示泪液的过量产生。在本文所述的一些实施方案中，通过以不切实际或不期望的量过度流泪来指示泪液的过量产生。例如，以干扰个体的眼部化妆或导致个体用纸巾擦去或吸收多余的泪液的量流泪既是不切实际的也是不期望的影响。

屈光手术

在本文所述的一些实施方案中，所述个体将进行或已经进行了眼睛的屈光手术。屈光手术的例子包括激光辅助原位角膜磨镶术(LASIK)、散光性角膜切开术(AK)、光性屈光性角膜切削术(PRK)和角膜缘松弛切口(LRI)。在所述方法、用途和用于所述用途的组合物的一些实施方案中，屈光手术是激光辅助原位角膜磨镶术(LASIK)。在所述方法、用途和用于所述用途的组合物的一些实施方案中，屈光手术是散光性角膜切开术(AK)。在所述方法、用途和用于所述用途的组合物的一些实施方案中，屈光手术是光性屈光性角膜切削术(PRK)。在所述方法、用途和用于所述用途的组合物的一些实施方案中，屈光手术是角膜缘松弛切口(LRI)。在一些实施方案中，一些实施方案，在手术之前施用本文所述的化合物或组合物。在一些实施方案中，在手术之前施用本文所述的化合物或组合物。在一些实施方案中，在手术之前和之后均施用本文所述的化合物或组合物。在本文所述的一些实施方案中，所述个体已经在2周内进行了眼睛的屈光手术，或者计划在2周内进行眼睛的屈光手术。

LASIK群体

在一些实施方案中，一些实施方案，在手术之前施用本文所述的化合物或组合物。在一些实施方案中，在手术之前施用本文所述的化合物或组合物。在一些实施方案中，在手术之前和之后均施用本文所述的化合物或组合物。在本文所述的一些实施方案中，所述个体已经在2周内进行了Lasik手术，或者计划在2周内进行Lasik手术。

角膜炎

正常泪膜含有许多生物活性生长因子，包括神经生长因子、表皮生长因子、转化生长因子-β、肝细胞生长因子、血小板源性生长因子、血管内皮生长因子、成纤维细胞生长因子、角质形成细胞生长因子和胰岛素样生长因子。当角膜感觉到刺激或压力时，眼睑将闭合并且将产生泪液以保护角膜和眼睛。

神经营养性角膜炎导致角膜敏感性降低。患有神经营养性角膜炎(NK)的受试者角膜功能受损，因为支配角膜的神经不能正常工作；这些神经携带有助于角膜功能的脉冲。因为这些神经在NK中不能正常发挥功能，因此称为上皮的角膜外层可能分解，从而导致上皮缺损。在更晚期的神经营养性角膜炎中，称为角膜基质的内层也可能分解，从而导致角膜变薄。这称为基质“熔化(melting)”。在晚期基质熔化中，角膜可能变薄到严重程度，这可能导致眼睛内部的洞或开口，从而可能导致眼睛的感染和潜在损失。NK可能导致多种并发症，包括角膜伤口愈合不良、角膜瘢痕形成和视力损失。有许多不同的病症可能损伤为角膜服务的神经。

根据所述障碍在个体中的进展程度，可以使用多种疗法来治疗这种障碍。最近，重组人神经生长因子(rhNGF)(Oxervate，Dompe)已被批准用于治疗NK。不幸的是，这种疗法存在几个缺点，包括以下事实，即所述产品需要每天以2小时的间隔施用6次持续8周；所述产品用移液管递送，这对于自我施用来说可能是麻烦的；所述产品必须冷藏；并且4周的供应成本多于$10K。

本公开文本提供了用于治疗患有角膜炎的受试者的方法、用途和组合物。在一些实施方案中，角膜炎是NK。在一些实施方案中，本文公开的用于治疗患有NK的受试者的方法和组合物刺激天然泪膜。在一些实施方案中，每天一次或两次向患有NK的受试者施用本文提供的组合物。在一些实施方案中，每天一次或两次向患有NK的受试者施用本文提供的组合物持续至少4周、至少5周、至少6周、至少7周或至少8周。在一些实施方案中，每天两次向患有NK的受试者施用本文提供的组合物持续至少8周。在一些实施方案中，每天两次向患有NK的受试者鼻内施用本文提供的组合物持续至少8周。

Cmax血浆浓度

本文所述的方法和用途包括局部鼻内施用。因为所公开的方法和用途是用于局部鼻内施用，所以与从全身施用形式(例如，口服配制品的摄入)实现的浓度相比，循环血浆中nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的浓度较低。低血浆浓度的nAChR激动剂避免了在体循环中与nAChR激动剂相关的潜在不期望的副作用，诸如恶心、睡眠障碍、便秘、气胀、呕吐、皮肤病症如皮疹和瘙痒、头痛、腹痛、消化不良、胃食管返流病和口干。

表征nAChR激动剂或其药学上可接受的盐在个体中的血浆浓度的一种方法是测量Cmax-在向所述个体施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐之后且在施用第二剂量之前，nAChR激动剂或其药学上可接受的盐实现的最大或峰值血清浓度。确定Cmax的方法是本领域已知的。在实施例3中提供了用于确定式I化合物的药代动力学特征(包括确定Cmax)的方案的非限制性例子。

在本文所述的一些实施方案中，为个体计算Cmax。在一些实施方案中，从两名或更多名个体的平均Cmax计算Cmax。在一些实施方案中，从子集群体的平均Cmax计算Cmax。

在本文所述的一些实施方案中，所述有需要的个体的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的血浆Cmax小于5ng/mL、小于4ng/mL、小于3ng/mL或小于2ng/mL。

在本文所述的一些实施方案中，所述有需要的个体的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的血浆Cmax小于5ng/mL、小于4ng/mL、小于3ng/mL或小于2ng/mL；并且其中向所述有需要的个体施用一定剂量，所述剂量包含在10微克至150微克、10微克至100微克、10微克至50微克、50微克至150微克、50微克至100微克、100微克至1500微克、100微克至600微克、200微克至400微克、400微克至600微克或750微克至1200微克之间的nAChR激动剂、或者相应量的其药学上可接受的盐。

在本文所述的一些实施方案中，所述有需要的个体的化合物1或其药学上可接受的盐的血浆Cmax小于5ng/mL、小于4ng/mL、小于3ng/mL或小于2ng/mL；并且其中向所述有需要的个体施用一定剂量，所述剂量包含在100微克至1500微克、100微克至600微克、200微克至400微克、400微克至600微克或750微克至1200微克之间的化合物1、或者相应量的其药学上可接受的盐。

在本文所述的一些实施方案中，所述有需要的个体的化合物1或其药学上可接受的盐的血浆Cmax小于5ng/mL、小于4ng/mL、小于3ng/mL或小于2ng/mL；并且其中向所述有需要的个体施用一定剂量，所述剂量包含在150微克至300微克、900微克至1200微克、2100微克至2400微克之间的化合物1、或者相应量的其药学上可接受的盐。

在本文所述的一些实施方案中，所述有需要的个体的伐尼克兰或其药学上可接受的盐的血浆Cmax小于5ng/mL、小于4ng/mL、小于3ng/mL或小于2ng/mL；并且其中向所述有需要的个体施用一定剂量，所述剂量包含在5微克至15微克、50微克至65微克、100微克至125微克之间的伐尼克兰、或者相应量的其药学上可接受的盐。

在本文所述的一些实施方案中，通过根据视觉模拟量表的眼睛干燥得分测试和/或Schirmer测试来指示对所述个体的有效治疗，所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小是在施用有效量的化合物1或其药学上可接受的盐的第一剂量的5分钟内，并且其特征在于p值小于0.05。在本文所述的一些实施方案中，所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小是至少10mm。在本文所述的一些实施方案中，所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小是至少5mm。在本文所述的一些实施方案中，所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小是至少3mm。在本文所述的任何实施方案的又进一步的实施方案中，向所述个体施用每剂量1800-2500微克的化合物1或相应量的其药学上可接受的盐。在本文所述的任何实施方案的又进一步的实施方案中，向所述个体施用每剂量3500-4500微克的化合物1或相应量的其药学上可接受的盐。在本文所述的一些实施方案中，将化合物1或其药学上可接受的盐以用于鼻腔施用的药物配制品的形式施用，并且每剂量的药物配制品的总体积为50微升-250微升。在本文所述的一些实施方案中，每剂量的药物配制品的总体积为75微升-150微升。在本文所述的一些实施方案中，每剂量的药物配制品的总体积为150微升-250微升。在本文所述的一些实施方案中，每剂量的药物配制品的总体积为约100微升或约200微升。在本文所述的一些实施方案中，用于鼻腔施用的药物配制品包含在1mg/mL和40mg/mL之间的化合物1或相应量的其药学上可接受的盐。在本文所述的一些实施方案中，用于鼻腔施用的药物配制品包含在5mg/mL和25mg/mL之间的化合物1或相应量的其药学上可接受的盐。在本文所述的一些实施方案中，用于鼻腔施用的药物配制品包含2mg/mL、10mg/mL或20mg/mL的化合物1或相应量的其药学上可接受的盐。在本文所述的一些实施方案中，所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小自施用有效量的化合物1或其药学上可接受的盐的第一剂量起至少30分钟维持在10％或20％以内。在本文所述的一些实施方案中，所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小自施用有效量的化合物1或其药学上可接受的盐的第一剂量起至少60分钟维持在10％或20％以内。在本文所述的一些实施方案中，在施用有效量的化合物1或其药学上可接受的盐的第一剂量之后30分钟的所述个体的眼睛干燥得分在施用有效量的化合物1或其药学上可接受的盐的第一剂量之后5分钟内的所述个体的眼睛干燥得分的10％以内。

在本文所述的一些实施方案中，所述方法包括向所述有需要的个体的鼻腔中施用有效量的化合物1或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量，其中所述方法导致对所述有需要的个体的有效治疗。在本文所述的一些实施方案中，通过选自以下的一种或多种测试来指示对所述个体的有效治疗：a)根据视觉模拟量表的Schirmer得分测试和b)Schirmer测试。在本文所述的一些实施方案中，将所述个体的Schirmer得分与在施用化合物1或其药学上可接受的盐的第一剂量之前所述个体的Schirmer得分进行比较；所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加是在施用有效量的化合物1或其药学上可接受的盐的第一剂量的5分钟内，并且其特征在于p值小于0.05。在本文所述的一些实施方案中，所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加是至少100％、200％或300％。在本文所述的一些实施方案中，所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加是至少10mm。在本文所述的一些实施方案中，所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加是至少5mm。在本文所述的一些实施方案中，所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加是至少3mm。在本文所述的任何实施方案的又进一步的实施方案中，向所述个体施用每剂量1800-2500微克的化合物1的药学上可接受的盐。在本文所述的任何实施方案的又进一步的实施方案中，向所述个体施用每剂量3500-4500微克的化合物1的药学上可接受的盐。在本文所述的一些实施方案中，将化合物1或其药学上可接受的盐以用于鼻腔施用的药物配制品的形式施用，并且每剂量的药物配制品的总体积为50微升-250微升。在本文所述的一些实施方案中，每剂量的药物配制品的总体积为75微升-150微升。在本文所述的一些实施方案中，每剂量的药物配制品的总体积为150微升-250微升。在本文所述的一些实施方案中，每剂量的药物配制品的总体积为约100微升或约200微升。在本文所述的一些实施方案中，用于鼻腔施用的药物配制品包含在1mg/mL和40mg/mL之间的化合物1或相应量的其药学上可接受的盐。在本文所述的一些实施方案中，用于鼻腔施用的药物配制品包含在5mg/mL和25mg/mL之间的化合物1或相应量的其药学上可接受的盐。在本文所述的一些实施方案中，用于鼻腔施用的药物配制品包含约2mg/mL、10mg/mL或20mg/mL的化合物1或相应量的其药学上可接受的盐。在本文所述的一些实施方案中，所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加自施用有效量的化合物1或其药学上可接受的盐的第一剂量起至少30分钟维持在10％或20％以内。在本文所述的一些实施方案中，所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加自施用有效量的化合物1或其药学上可接受的盐的第一剂量起至少60分钟维持在10％或20％以内。在本文所述的一些实施方案中，在施用有效量的化合物1或其药学上可接受的盐的第一剂量之后30分钟的所述个体的Schirmer得分在施用有效量的化合物1或其药学上可接受的盐的第一剂量之后5分钟内的所述个体的Schirmer得分的10％以内。

如本文所用，比较化合物包括但不限于和

如本文所用，可以从个体的得分的增加或减少来计算用于描述所述个体的得分的统计学显著变化。确定个体的得分变化是否在统计上显著以及两组数据是否彼此显著不同的非限制性例子包括基于ANCOVA模型的计算以及统计假设检验，诸如t检验和非参数Wilcoxon秩和检验。考虑了本领域公知的其他模型和统计假设检验。

在整个本公开文本中，公开的nAChR激动剂或PAM的量是指配制品中存在的nAChR激动剂游离形式或PAM游离形式的量。如本文所用的术语“相应量”是指获得配制品中列举的nAChR游离形式或PAM游离形式的量所需的nAChR激动剂或PAM的药学上可接受的盐的量。本领域技术人员将清楚如何考虑化合物的游离形式和盐形式之间的分子量差异来计算化合物的盐的“相应量”，诸如化合物1的药学上可接受的盐的相应量。例如，175.24g的化合物1游离碱将对应于316.34g的半粘酸盐二水合物盐或367.36的单柠檬酸盐。在另一个例子中，211.267g的伐尼克兰游离碱将对应于361.354的伐尼克兰酒石酸盐。

如本文所用，术语“约”与术语“大约”可同义使用。说明性地，关于量使用术语“约”指示稍微超出引用值的值，例如±0.1％至20％、±0.1％至10％、±0.1％至5％或±0.1％至2％。

在整个本公开文本中，在治疗干眼病、增加泪液产生和减轻眼部不适的方法的上下文中讨论的各种实施方案也可以应用于与用于在制造药物中使用的化合物、在用于各种方法中使用的化合物、药物配制品和试剂盒相关的实施方案。

示例性实施方案

实施方案I-1.一种在有需要的个体中治疗干眼病、增加泪液产生或减轻眼部不适的方法，所述方法包括将有效量的烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量、以及有效量的正向别构调节剂(PAM)或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量施用至所述有需要的个体的鼻腔中，其中所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是伐尼克兰或其药学上可接受的盐或者具有结构的化合物1或其药学上可接受的盐，其中所述方法导致对所述有需要的个体的有效治疗。

实施方案I-2.一种用于在有需要的个体中治疗干眼病、增加泪液产生或减轻眼部不适的方法中使用的化合物，其中所述化合物是nAChR激动剂或其药学上可接受的盐，其中所述方法包括将有效量的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量、有效量的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量施用至所述有需要的个体的鼻腔中，其中所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是伐尼克兰或其药学上可接受的盐或者具有结构的化合物1或其药学上可接受的盐。

实施方案I-3.一种用于在有需要的个体中治疗干眼病、增加泪液产生或减轻眼部不适的方法中使用的化合物，其中所述化合物是PAM或其药学上可接受的盐，其中所述方法包括将有效量的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量、以及有效量的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量施用至所述有需要的个体的鼻腔中，并且其中所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是伐尼克兰或其药学上可接受的盐或者具有结构的化合物1或其药学上可接受的盐。

实施方案I-4.一种以下的组合制剂：(i)nAChR激动剂或其药学上可接受的盐，和(ii)PAM或其药学上可接受的盐，所述组合制剂用于在有需要的个体中治疗干眼病、增加泪液产生或减轻眼部不适的方法中同时、分开或顺序使用，

其中所述nAChR激动剂是伐尼克兰、具有结构的化合物1或其药学上可接受的盐，并且其中所述方法包括将有效量的所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量、以及有效量的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量施用至所述有需要的个体的鼻腔中。

实施方案I-5.根据实施方案I-2或I-3所述的用于所述用途的化合物或根据实施方案I-4所述的组合制剂，其中所述方法导致对所述有需要的个体的有效治疗。

实施方案I-6.根据实施方案I-1所述的方法、根据实施方案I-5所述的用于所述用途的化合物或根据实施方案I-5所述的组合制剂，其中通过选自以下的一种或多种测试来指示对所述个体的有效治疗：a)根据视觉模拟量表的眼睛干燥得分测试，b)Schirmer测试，c)角膜荧光素染色测试，和d)眼表疾病指数测试。

实施方案I-7.根据实施方案I-6所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中通过所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小来指示所述有效治疗，并且其中在向所述个体施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量、以及所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量之后确定所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小，其中将所述个体的眼睛干燥得分与以下进行比较：a)在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之前所述个体的眼睛干燥得分；b)施用对照的个体的眼睛干燥得分；或c)施用比较化合物的个体的眼睛干燥得分。

实施方案I-8.根据实施方案I-7所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小是至少15％。

实施方案I-9.根据实施方案I-7或实施方案I-8所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小在10mm和20mm之间。

实施方案I-10.根据实施方案I-7至I-9中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小是至少10mm。

实施方案I-11.根据实施方案I-7至I-10中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小的特征在于p值为0.05或更小、0.01或更小、0.005或更小或者0.001或更小。

实施方案I-12.根据实施方案I-7至I-11中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小是在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量的5分钟内。

实施方案I-13.根据实施方案I-7至I-12中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著改善自施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量起维持至少30分钟。

实施方案I-14.根据实施方案I-7至I-13中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后至少30分钟的所述个体的眼睛干燥得分不会增加多于施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后5分钟内的所述个体的眼睛干燥得分的30％。

实施方案I-15.根据实施方案I-7至I-14中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中，在确定所述个体的眼睛干燥得分之间，所述个体存在于湿度降低的环境中。

实施方案I-16.根据实施方案I-7至I-15中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其包括施用有效量的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量和一个或多个后续剂量、以及有效量的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和一个或多个后续剂量。

实施方案I-17.根据实施方案I-7至I-16中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小是基于在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量之后确定的所述个体的眼睛干燥得分。

实施方案I-18.根据实施方案I-7至I-16中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述统计学显著减小是基于在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的一个或多个后续剂量、以及任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一或者一个或多个后续剂量之后确定的所述个体的眼睛干燥得分。

实施方案I-19.根据实施方案I-6至I-18中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中通过所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加来指示所述有效治疗，并且其中在向所述个体施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量、以及所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量之后确定至少一只眼睛中所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加，其中将所述个体的Schirmer得分与以下进行比较：a)在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之前所述个体的Schirmer得分；b)施用对照的个体的Schirmer得分；或c)施用比较化合物的个体的Schirmer得分。

实施方案I-20.根据实施方案I-19所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加是至少15％。

实施方案I-21.根据实施方案I-19或I-20所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加在10mm和20mm之间。

实施方案I-22.根据实施方案I-19至I-21中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加是至少10mm。

实施方案I-23.根据实施方案I-19至I-22中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加的特征在于p值为0.05或更小、0.01或更小、0.005或更小或者0.001或更小。

实施方案I-24.根据实施方案I-19至I-23中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加是在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量的5分钟内。

实施方案I-25.根据实施方案I-19至I-24中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的Schirmer得分的统计学显著改善自施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量起维持至少30分钟。

实施方案I-26.根据实施方案I-19至I-25中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后至少30分钟的所述个体的Schirmer得分不会减小多于施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后5分钟内的所述个体的Schirmer得分的30％。

实施方案I-27.根据实施方案I-19至I-26中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中，在确定所述个体的Schirmer得分之间，所述个体存在于湿度降低的环境中。

实施方案I-28.根据实施方案I-19至I-27中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其包括施用有效量的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量和一个或多个后续剂量、

以及有效量的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和一个或多个后续剂量。

实施方案I-29.根据实施方案I-19至I-28中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加是基于在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量之后确定的所述个体的Schirmer得分。

实施方案I-30.根据实施方案I-19至I-28中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述统计学显著增加是基于在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的一个或多个后续剂量、以及任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一或者一个或多个后续剂量之后确定的所述个体的Schirmer得分。

实施方案I-31.根据实施方案I-6至I-30中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中通过所述个体的角膜得分的统计学显著减小来指示所述有效治疗，并且其中在向所述个体施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量、以及所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量之后确定所述个体的角膜得分的统计学显著减小，其中将所述个体的角膜得分与以下进行比较：

a)在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之前所述个体的角膜得分；b)施用对照的个体的角膜得分；或c)施用比较化合物的个体的角膜得分。

实施方案I-32.根据实施方案I-31所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的角膜得分的统计学显著减小是至少15％。

实施方案I-33.根据实施方案I-31或I-32所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的角膜得分的统计学显著减小的特征在于p值为0.05或更小、0.01或更小、0.005或更小或者0.001或更小。

实施方案I-34.根据实施方案I-31至I-33中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的角膜得分的统计学显著减小是在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量的5分钟内。

实施方案I-35.根据实施方案I-31至I-34中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的角膜得分的统计学显著改善自施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量起维持至少30分钟。

实施方案I-36.根据实施方案I-31至I-35中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后至少30分钟的所述个体的角膜得分不会增加多于施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后5分钟内的所述个体的角膜得分的30％。

实施方案I-37.根据实施方案I-31至I-36中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中，在确定所述个体的角膜得分之间，所述个体存在于湿度降低的环境中。

实施方案I-38.根据实施方案I-31至I-37中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其包括施用有效量的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量和一个或多个后续剂量、以及有效量的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和一个或多个后续剂量。

实施方案I-39.根据实施方案I-31至I-38中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的角膜得分的统计学显著减小是基于在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量之后确定的所述个体的角膜得分。

实施方案I-40.根据实施方案I-31至I-38中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述统计学显著减小是基于在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的一个或多个后续剂量、以及任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一或者一个或多个后续剂量之后确定的所述个体的角膜得分。

实施方案I-41.根据实施方案I-6至I-40中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中通过所述个体的OSDI得分的统计学显著减小来指示所述有效治疗，并且其中在向所述个体施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量、以及所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量之后确定所述个体的OSDI得分的统计学显著减小，其中将所述个体的OSDI得分与以下进行比较：

a)在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之前所述个体的OSDI得分；b)施用对照的个体的OSDI得分；或c)施用比较化合物的个体的OSDI得分。

实施方案I-42.根据实施方案I-41所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的OSDI得分的统计学显著减小是至少15％。

实施方案I-43.根据实施方案I-41或I-42所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的OSDI得分的统计学显著减小的特征在于p值为0.05或更小、0.01或更小、0.005或更小或者0.001或更小。

实施方案I-44.根据实施方案I-41至I-43中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的OSDI得分的统计学显著减小是在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量的5分钟内。

实施方案I-45.根据实施方案I-41至I-44中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的OSDI得分的统计学显著改善自施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量起维持至少30分钟。

实施方案I-46.根据实施方案I-41至I-45中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后至少30分钟的所述个体的OSDI得分不会增加多于施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之后5分钟内的所述个体的OSDI得分的30％。

实施方案I-47.根据实施方案I-41至I-46中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中，在确定所述个体的OSDI得分之间，所述个体存在于湿度降低的环境中。

实施方案I-48.根据实施方案I-41至I-47中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其包括施用有效量的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量和一个或多个后续剂量、以及有效量的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和一个或多个后续剂量。

实施方案I-49.根据实施方案I-41至I-48中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的OSDI得分的统计学显著减小是基于在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量之后确定的所述个体的OSDI得分。

实施方案I-50.根据实施方案I-41至I-48中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述统计学显著减小是基于在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的一个或多个后续剂量、以及任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一或者一个或多个后续剂量之后确定的所述个体的OSDI得分。

实施方案I-51.根据实施方案I-1至I-50中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中向所述个体施用每剂量5-4000微克的所述nAChR激动剂或相应量的其药学上可接受的盐。

实施方案I-52.根据实施方案I-1至I-51中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中将所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐以用于鼻腔施用的药物配制品的形式施用，所述药物配制品包含在1mg/mL和40mg/mL之间的nAChR激动剂或相应量的其药学上可接受的盐。

实施方案I-53.根据实施方案I-1至I-52中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中将所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量以用于鼻腔施用的药物配制品的形式施用，并且向所述个体施用的每剂量的所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的所述药物配制品的总体积为50微升-250微升。

实施方案I-54.根据实施方案I-1至I-53中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中将所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量以用于鼻腔施用的药物配制品的形式施用，并且向所述个体施用的每鼻孔的所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的所述药物配制品的总体积为50微升-250微升。

实施方案I-55.根据实施方案I-1至I-54中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述nAChR激动剂的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量是其药学上可接受的盐。

实施方案I-56.根据实施方案I-1至I-55中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中以分开的剂型向所述有需要的个体施用所述PAM或其药学上可接受的盐和所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐。

实施方案I-57.根据实施方案I-1至I-55中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中以组合剂型向所述有需要的个体施用所述PAM或其药学上可接受的盐和所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐。

实施方案I-58.根据实施方案I-1至I-55中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中在所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐之后，向所述有需要的个体施用所述PAM或其药学上可接受的盐。

实施方案I-59.根据实施方案I-1至I-56中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中在所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐之前，向所述有需要的个体施用所述PAM或其药学上可接受的盐。

实施方案I-60.根据实施方案I-1至I-57中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中同时向所述有需要的个体施用所述PAM或其药学上可接受的盐和所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐。

实施方案I-61.根据实施方案I-1至I-60中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中在第一天施用后每天一至四次，向所述有需要的个体施用一定剂量的所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和任选的一定剂量的所述PAM或其药学上可接受的盐。

实施方案I-62.根据实施方案I-1至I-61中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中随时间推移降低每剂量的a)所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的剂量频率，或b)所述nAChR激动剂的总量或其药学上可接受的盐的相应量。

实施方案I-63.根据实施方案I-62所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的每个剂量包括将所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐多于一次施用至所述个体的鼻腔中，并且其中每剂量的所述nAChR激动剂的总量或其药学上可接受的盐的相应量随时间推移的降低是通过减少将所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐施用至所述个体的鼻腔中的次数来完成的。

实施方案I-64.根据实施方案I-1至I-63中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的剂量包括将所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐多于一次施用至一个或两个鼻孔。

实施方案I-65.根据实施方案I-1至I-63中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的剂量包括将所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐单次施用至一个或两个鼻孔。

实施方案I-66.根据实施方案I-1至I-65中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中每剂量将所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐施用至一个鼻孔。

实施方案I-67.根据实施方案I-1至I-65中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中每剂量将所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐施用至两个鼻孔。

实施方案I-68.根据实施方案I-1至I-67中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中将所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐施用至少28天。

实施方案I-69.根据实施方案I-1-67中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中将所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐施用至少3个月。

实施方案I-70.根据实施方案I-1至I-69中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中施用的所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的量不是全身生物可利用的。

实施方案I-71.根据实施方案I-1至I-70中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述方法不会导致不期望的全身性副作用。

实施方案I-72.根据实施方案I-1至I-71中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述方法不会导致不期望的精神活性副作用。

实施方案I-73.根据实施方案I-1至I-72中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体未经历选自以下的一种或多种副作用：泪液的过量产生、咳嗽、喉咙刺激、滴注部位刺激、打喷嚏、鼻咽炎、鼻刺激、牙痛、口干和头痛。

实施方案I-74.根据实施方案I-73所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量或者一个或多个后续剂量的5分钟-60分钟内，所述个体未经历选自以下的一种或多种副作用：泪液的过量产生、咳嗽、喉咙刺激、滴注部位刺激、打喷嚏、鼻咽炎、鼻刺激、牙痛、口干和头痛。

实施方案I-75.根据实施方案I-73或I-74所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中通过所述个体的Schirmer得分增加大于20mm来指示泪液的过量产生。

实施方案I-76.根据实施方案I-1至I-75中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体已经在2周内进行了Lasik手术，或者计划在2周内进行Lasik手术。

实施方案I-77.根据实施方案I-1至I-76中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述PAM或其药学上可接受的盐选择性地结合至选自α3β4、α4β2、α7和α3α5β4的外周烟碱型乙酰胆碱受体亚型中的至少一种。

实施方案I-78.根据实施方案I-1至I-77中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐选择性地结合至选自α3β4、α4β2、α7和α3α5β4的烟碱型乙酰胆碱受体亚型中的至少一种。

实施方案I-79.根据实施方案I-1至I-78中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述nAChR激动剂是伐尼克兰或其药学上可接受的盐。

实施方案I-80.根据实施方案I-1至I-78中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述nAChR激动剂是化合物1或其药学上可接受的盐。

实施方案I-81.根据实施方案I-1至I-80中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述PAM选自17-β-雌二醇、(R)-7-溴-N-(哌啶-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺、伊维菌素、加兰他敏、染料木黄酮、5-羟基吲哚、4BP-TQS、A-86774、CCMI、左旋咪唑、莫仑太尔、LY-2087101、美加明、薄荷醇、NS206、NS1738、NS9283、PNU-120596、RO5126946、TBS-345、dFBR和HEPES或上述任一种的药学上可接受的盐。

实施方案I-82.根据实施方案I-81所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述PAM是(R)-7-溴-N-(哌啶-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺或3-[3-(3-吡啶基)-1,2,4-噁二唑-5-基]苄腈或上述任一种的药学上可接受的盐。

实施方案I-83.根据实施方案I-81所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述PAM是(R)-7-溴-N-(哌啶-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺或其药学上可接受的盐。

实施方案I-84.根据实施方案I-81所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述PAM是3-[3-(3-吡啶基)-1,2,4-噁二唑-5-基]苄腈或其药学上可接受的盐。

实施方案I-85.根据实施方案I-1至I-84中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中三叉神经被激活。

实施方案I-86.根据实施方案I-1至I-84中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中筛前神经被激活。

实施方案I-87.根据实施方案I-1至I-86中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中鼻泪反射被激活。

实施方案I-88.一种用于局部施用至个体的鼻腔中的药物配制品，所述药物配制品包含nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和PAM或其药学上可接受的盐，其中所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是配制用于鼻腔施用的伐尼克兰或其药学上可接受的盐或者具有结构的化合物1或其药学上可接受的盐。

实施方案I-89.根据实施方案I-88所述的药物配制品，其中所述nAChR激动剂是伐尼克兰或其药学上可接受的盐。

实施方案I-90.根据实施方案I-88所述的药物配制品，其中所述nAChR激动剂是化合物1或其药学上可接受的盐。

实施方案I-91.根据实施方案I-88至I-90中任一项所述的药物配制品，所述药物配制品每剂量包含5-4000微克的所述nAChR激动剂或相应量的其药学上可接受的盐。

实施方案I-92.根据实施方案I-88至I-91中任一项所述的药物配制品，其中所述PAM选自17-β-雌二醇、(R)-7-溴-N-(哌啶-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺、伊维菌素、加兰他敏、染料木黄酮、5-羟基吲哚、4BP-TQS、A-86774、CCMI、左旋咪唑、莫仑太尔、LY-2087101、美加明、薄荷醇、NS206、NS1738、NS9283、PNU-120596、RO5126946、TBS-345、dFBR和HEPES或上述任一种的药学上可接受的盐。

实施方案I-93.根据实施方案I-92所述的药物配制品，其中所述PAM是(R)-7-溴-N-(哌啶-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺或NS9283或上述任一种的药学上可接受的盐。

实施方案I-94.根据实施方案I-88至I-93中任一项所述的药物配制品，其中单独的或与nAChR激动剂组合的所述PAM选择性地结合至选自α3β4、α4β2、α7和α3α5β4的外周烟碱型乙酰胆碱受体亚型中的至少一种。

实施方案I-95.根据实施方案I-88至I-94中任一项所述的药物配制品，其中所述药物配制品是液体、悬浮液、气雾剂、凝胶、软膏、干粉、乳膏、糊剂或止痛药膏。

实施方案I-96.根据实施方案I-88至I-95中任一项所述的药物配制品，其中将所述配制品通过注射器、滴管、瓶式喷雾器、雾化泵、吸入器、粉末喷雾装置、蒸发器、贴片、药棒、移液管或液体射流施用至鼻腔中。

实施方案I-97.根据实施方案I-88至I-96中任一项所述的药物配制品，所述药物配制品用于在有需要的个体中治疗干眼病、增加泪液产生或改善眼部不适中使用。

实施方案I-98.nAChR激动剂或其药学上可接受的盐在制造药物中的用途，其中所述药物在治疗干眼病、增加泪液产生或减轻眼部不适的方法中使用，其中所述方法在实施方案I-1至I-87中任一项中进行定义。

实施方案I-99.一种试剂盒，所述试剂盒包含nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和PAM或其药学上可接受的盐，其中所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是伐尼克兰或其药学上可接受的盐或者具有结构的化合物1或其药学上可接受的盐。

实施方案I-100.根据实施方案I-99所述的试剂盒，其中以组合剂型提供所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和所述PAM或其药学上可接受的盐。

实施方案I-101.根据实施方案I-99所述的试剂盒，其中以分开的剂型提供所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和所述PAM或其药学上可接受的盐。

实施方案I-102.根据实施方案I-99至I-101中任一项所述的试剂盒，其中所述nAChR激动剂是伐尼克兰或其药学上可接受的盐。

实施方案I-103.根据实施方案I-99至I-102中任一项所述的试剂盒，其中所述nAChR激动剂是化合物1或其药学上可接受的盐。

实施方案I-104.根据实施方案I-99至I-103中任一项所述的试剂盒，所述试剂盒每剂量包含5-4000微克的所述nAChR激动剂或相应量的其药学上可接受的盐。

实施方案I-105.根据实施方案I-99至I-104中任一项所述的试剂盒，其中所述PAM选自17-β-雌二醇、(R)-7-溴-N-(哌啶-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺、伊维菌素、加兰他敏、染料木黄酮、5-羟基吲哚、4BP-TQS、A-86774、CCMI、左旋咪唑、莫仑太尔、LY-2087101、美加明、薄荷醇、NS206、NS1738、NS9283、PNU-120596、RO5126946、TBS-345、dFBR和HEPES或上述任一种的药学上可接受的盐。

实施方案I-106.根据实施方案I-105所述的试剂盒，其中所述PAM是(R)-7-溴-N-(哌啶-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺或NS9283或上述任一种的药学上可接受的盐。

实施方案I-107.根据实施方案I-99至I-106中任一项所述的试剂盒，其中单独的或与nAChR激动剂组合的所述PAM选择性地结合至选自α3β4、α4β2、α7和α3α5β4的外周烟碱型乙酰胆碱受体亚型中的至少一种。

实施方案I-108.根据实施方案I-99至I-107中任一项所述的试剂盒，所述试剂盒用于在有需要的个体中治疗干眼病、增加泪液产生或改善眼部不适中使用。

实施方案I-109.根据实施方案I-99至I-108中任一项所述的试剂盒，所述试剂盒包含药物配制品，其中所述药物配制品是液体、悬浮液、气雾剂、凝胶、软膏、干粉、乳膏、糊剂或止痛药膏。

实施方案I-110.根据实施方案I-99至I-109中任一项所述的试剂盒，其中将所述配制品通过喷雾泵、注射器、滴管、瓶式喷雾器、雾化泵、吸入器、粉末喷雾装置、蒸发器、贴片、药棒、移液管或液体射流施用至鼻腔中。

实施方案II-1.根据实施方案I-1至I-87中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述有需要的个体的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的血浆Cmax小于5ng/mL。

实施方案II-2.根据实施方案I-1至I-87或II-1中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中向所述个体施用每剂量5-15微克的所述nAChR激动剂或相应量的其药学上可接受的盐。

实施方案II-3.根据实施方案I-1至I-87或II-1中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中向所述个体施用每剂量50-65微克的所述nAChR激动剂或相应量的其药学上可接受的盐。

实施方案II-4.根据实施方案I-1至I-87或II-1中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中向所述个体施用每剂量100-125微克的所述nAChR激动剂或相应量的其药学上可接受的盐。

实施方案II-5.根据实施方案I-1至I-87或II-1中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中向所述个体施用每剂量150-300微克的所述nAChR激动剂或相应量的其药学上可接受的盐。

实施方案II-6.根据实施方案I-1至I-87或II-1中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中向所述个体施用每剂量900-1200微克的所述nAChR激动剂或相应量的其药学上可接受的盐。

实施方案II-7.根据实施方案I-1至I-87或II-1中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中向所述个体施用每剂量2100-2400微克的所述nAChR激动剂或相应量的其药学上可接受的盐。

实施方案III-1.根据实施方案I-1至I-77、I-79至I-87和II-1至II-7中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是选自α3β4、α4β2、α7、α3α5β4和α4α6β2的烟碱型乙酰胆碱受体亚型中的至少一种的激动剂。

实施方案III-2.根据实施方案III-1所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是选自α3β4、α4β2、α7、α3α5β4和α4α6β2的烟碱型乙酰胆碱受体亚型中的至少一种的完全激动剂。

实施方案III-3.根据实施方案I-1至I-76、I-78至I-87、II-1至II-7和III-1至III-2中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述PAM或其药学上可接受的盐选择性地结合至选自α3β4、α4β2、α7、α3α5β4和α4α6β2的外周烟碱型乙酰胆碱受体亚型中的至少一种。

实施方案III-4.根据实施方案I-1至I-77、I-79至I-87、II-1至II-7和III-1至III-3中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐选择性地结合至选自α3β4、α4β2、α7、α3α5β4和α4α6β2的烟碱型乙酰胆碱受体亚型中的至少一种。

实施方案III-5.根据实施方案I-88至I-93和I-95至I-98中任一项所述的药物配制品，其中所述nAChR激动剂是选自α3β4、α4β2、α7、α3α5β4和α4α6β2的外周烟碱型乙酰胆碱受体亚型中的至少一种的激动剂。

实施方案III-6.根据实施方案III-5所述的药物配制品，其中所述nAChR激动剂是选自α3β4、α4β2、α7、α3α5β4和α4α6β2的外周烟碱型乙酰胆碱受体亚型中的至少一种的完全激动剂。

实施方案III-7.根据实施方案I-88至I-93、I-95至I-98和III-5至III-6中任一项所述的药物配制品，其中单独的或与nAChR激动剂组合的所述PAM选择性地结合至选自α3β4、α4β2、α7、α3α5β4和α4α6β2的外周烟碱型乙酰胆碱受体亚型中的至少一种。

实施方案III-8.根据实施方案I-88至I-93、I-95至I-98和III-5至III-7中任一项所述的药物配制品，所述药物配制品每剂量包含5-15微克的所述nAChR激动剂或相应量的其药学上可接受的盐。

实施方案III-9.根据实施方案I-88至I-93、I-95至I-98和III-5至III-7中任一项所述的药物配制品，所述药物配制品每剂量包含50-65微克的所述nAChR激动剂或相应量的其药学上可接受的盐。

实施方案III-10.根据实施方案I-88至I-93、I-95至I-98和III-5至III-7中任一项所述的药物配制品，所述药物配制品每剂量包含100-125微克的所述nAChR激动剂或相应量的其药学上可接受的盐。

实施方案III-11.根据实施方案I-88至I-93、I-95至I-98和III-5至III-7中任一项所述的药物配制品，所述药物配制品每剂量包含150-300微克的所述nAChR激动剂或相应量的其药学上可接受的盐。

实施方案III-12.根据实施方案I-88至I-93、I-95至I-98和III-5至III-7中任一项所述的药物配制品，所述药物配制品每剂量包含900-1200微克的所述nAChR激动剂或相应量的其药学上可接受的盐。

实施方案III-13.根据实施方案I-88至I-93、I-95至I-98和III-5至III-7中任一项所述的药物配制品，所述药物配制品每剂量包含2100-2400微克的所述nAChR激动剂或相应量的其药学上可接受的盐。

实施方案III-14.根据实施方案I-99至I-106和I-108至I-110中任一项所述的试剂盒，其中所述nAChR激动剂是选自α3β4、α4β2、α7、α3α5β4和α4α6β2的外周烟碱型乙酰胆碱受体亚型中的至少一种的激动剂。

实施方案III-15.根据实施方案III-14所述的试剂盒，其中所述nAChR激动剂是选自α3β4、α4β2、α7、α3α5β4和α4α6β2的外周烟碱型乙酰胆碱受体亚型中的至少一种的完全激动剂。

实施方案III-16.根据实施方案I-99至I-106、I-108至I-110和III-14至III-15中任一项所述的试剂盒，其中单独的或与nAChR激动剂组合的所述PAM选择性地结合至选自α3β4、α4β2、α7、α3α5β4和α4α6β2的外周烟碱型乙酰胆碱受体亚型中的至少一种。

实施方案IV-1.一种在有需要的个体中治疗干眼病、增加泪液产生或减轻眼部不适的方法，所述方法包括将有效量的烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量、以及有效量的正向别构调节剂(PAM)或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量施用至所述有需要的个体的鼻腔中，其中所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是伐尼克兰或其药学上可接受的盐或者具有结构的化合物1或其药学上可接受的盐，

其中所述方法导致对所述有需要的个体的有效治疗。

实施方案IV-2.一种用于在有需要的个体中治疗干眼病、增加泪液产生或减轻眼部不适的方法中使用的化合物，其中所述化合物是nAChR激动剂或其药学上可接受的盐，其中所述方法包括将有效量的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量、以及有效量的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量施用至所述有需要的个体的鼻腔中，其中所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是伐尼克兰或其药学上可接受的盐或者具有结构的化合物1或其药学上可接受的盐。

实施方案IV-3.一种用于在有需要的个体中治疗干眼病、增加泪液产生或减轻眼部不适的方法中使用的化合物，其中所述化合物是PAM或其药学上可接受的盐，其中所述方法包括将有效量的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量、以及有效量的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量施用至所述有需要的个体的鼻腔中，并且其中所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是伐尼克兰或其药学上可接受的盐或者具有结构(1)的化合物1或其药学上可接受的盐。

实施方案IV-4.一种以下的组合制剂：(i)nAChR激动剂或其药学上可接受的盐，和(ii)PAM或其药学上可接受的盐，所述组合制剂用于在有需要的个体中治疗干眼病、增加泪液产生或减轻眼部不适的方法中同时、分开或顺序使用，其中所述nAChR激动剂是伐尼克兰、具有结构

的化合物1或其药学上可接受的盐，并且其中所述方法包括将有效量的所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量、以及有效量的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量施用至所述有需要的个体的鼻腔中。

实施方案IV-5.根据实施方案IV-2或IV-3所述的用于所述用途的化合物或根据实施方案IV-4所述的组合制剂，其中所述方法导致对所述有需要的个体的有效治疗。

实施方案IV-6.根据实施方案IV-1所述的方法、根据实施方案IV-5所述的用于所述用途的化合物或根据实施方案IV-5所述的组合制剂，其中通过选自以下的一种或多种测试来指示对所述个体的有效治疗：a)根据视觉模拟量表的眼睛干燥得分测试，b)Schirmer测试，c)角膜荧光素染色测试，和d)眼表疾病指数测试。

实施方案IV-7.根据实施方案IV-6所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中通过所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小来指示所述有效治疗，并且其中在向所述个体施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量、以及所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量之后确定所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小，其中将所述个体的眼睛干燥得分与以下进行比较：a)在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之前所述个体的眼睛干燥得分；b)施用对照的个体的眼睛干燥得分；或c)施用比较化合物的个体的眼睛干燥得分。

实施方案IV-8.根据实施方案IV-7所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小是至少15％。

实施方案IV-9.根据实施方案IV-7或IV-8所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小在10mm和20mm之间。

实施方案IV-10.根据权利要求实施方案IV-7至IV-9中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著减小是在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量的5分钟内。

实施方案IV-11.根据实施方案IV-7至IV-10中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的眼睛干燥得分的统计学显著改善自施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量起维持至少30分钟。

实施方案IV-12.根据实施方案IV-7至IV-11中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中，在确定所述个体的眼睛干燥得分之间，所述个体存在于湿度降低的环境中。

实施方案IV-13.根据实施方案IV-7至IV-12中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其包括施用有效量的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量和一个或多个后续剂量、以及有效量的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和一个或多个后续剂量。

实施方案IV-14.根据实施方案IV-6至IV-13中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中通过所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加来指示所述有效治疗，并且其中在向所述个体施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量、以及所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量之后确定至少一只眼睛中所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加，其中将所述个体的Schirmer得分与以下进行比较：a)在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之前所述个体的Schirmer得分；b)施用对照的个体的Schirmer得分；或c)施用比较化合物的个体的Schirmer得分。

实施方案IV-15.根据实施方案IV-14所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加是至少15％。

实施方案IV-16.根据实施方案IV-14或IV-15所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加在10mm和20mm之间。

实施方案IV-17.根据实施方案IV-14至IV-16中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的Schirmer得分的统计学显著增加是在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量的5分钟内。

实施方案IV-18.根据实施方案IV-14至IV-17中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的Schirmer得分的统计学显著改善自施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量起维持至少30分钟。

实施方案IV-19.根据实施方案IV-14至IV-18中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中，在确定所述个体的Schirmer得分之间，所述个体存在于湿度降低的环境中。

实施方案IV-20.根据实施方案IV-6至IV-19中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中通过所述个体的角膜得分的统计学显著减小来指示所述有效治疗，并且其中在向所述个体施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量、以及所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量之后确定所述个体的角膜得分的统计学显著减小，其中将所述个体的角膜得分与以下进行比较：a)在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之前所述个体的角膜得分；b)施用对照的个体的角膜得分；或c)施用比较化合物的个体的角膜得分。

实施方案IV-21.根据实施方案IV-20所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的角膜得分的统计学显著减小是至少15％。

实施方案IV-22.根据实施方案IV-20至IV-21中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的角膜得分的统计学显著减小是在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量的5分钟内。

实施方案IV-23.根据实施方案IV-20至IV-22中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的角膜得分的统计学显著改善自施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量起维持至少30分钟。

实施方案IV-24.根据实施方案IV-20至IV-23中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中，在确定所述个体的角膜得分之间，所述个体存在于湿度降低的环境中。

实施方案IV-25.根据实施方案IV-20至IV-24中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其包括施用有效量的PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量和一个或多个后续剂量、以及有效量的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和一个或多个后续剂量。

实施方案IV-26.根据实施方案IV-6至IV-25中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中通过所述个体的OSDI得分的统计学显著减小来指示所述有效治疗，并且其中在向所述个体施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量、以及所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量或任选的一个或多个后续剂量之后确定所述个体的OSDI得分的统计学显著减小，其中将所述个体的OSDI得分与以下进行比较：a)在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量之前所述个体的OSDI得分；b)施用对照的个体的OSDI得分；或c)施用比较化合物的个体的OSDI得分。

实施方案IV-27.根据实施方案IV-26所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的OSDI得分的统计学显著减小是至少15％。

实施方案IV-28.根据实施方案IV-26至IV-27中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的OSDI得分的统计学显著减小是在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量的5分钟内。

实施方案IV-29.根据实施方案IV-26至IV-28中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体的OSDI得分的统计学显著改善自施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐的第一剂量起维持至少30分钟。

实施方案IV-30.根据实施方案IV-26至IV-29中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中，在确定所述个体的OSDI得分之间，所述个体存在于湿度降低的环境中。

实施方案IV-31.根据实施方案IV-1至IV-30中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中向所述个体施用每剂量5-4000微克的所述nAChR激动剂或相应量的其药学上可接受的盐。

实施方案IV-32.根据实施方案IV-1至IV-31中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中将所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐以用于鼻腔施用的药物配制品的形式施用，所述药物配制品包含在1mg/mL和40mg/mL之间的nAChR激动剂或相应量的其药学上可接受的盐。

实施方案IV-33.根据实施方案IV-1至IV-32中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中将所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量以用于鼻腔施用的药物配制品的形式施用，并且向所述个体施用的每剂量的所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的所述药物配制品的总体积为50微升-250微升。

实施方案IV-34.根据实施方案IV-1至IV-33中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中将所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量和任选的一个或多个后续剂量以用于鼻腔施用的药物配制品的形式施用，并且向所述个体施用的每鼻孔的所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的所述药物配制品的总体积为50微升-250微升。

实施方案IV-35.根据实施方案IV-1至IV-34中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中以分开的剂型向所述有需要的个体施用所述PAM或其药学上可接受的盐和所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐。

实施方案IV-36.根据实施方案IV-1至IV-34中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中以组合剂型向所述有需要的个体施用所述PAM或其药学上可接受的盐和所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐。

实施方案IV-37.根据实施方案IV-1至IV-35中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中在所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐之后，向所述有需要的个体施用所述PAM或其药学上可接受的盐。

实施方案IV-38.根据实施方案IV-1至IV-35中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中在所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐之前，向所述有需要的个体施用所述PAM或其药学上可接受的盐。

实施方案IV-39.根据实施方案IV-1至IV-36中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中同时向所述有需要的个体施用所述PAM或其药学上可接受的盐和所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐。

实施方案IV-40.根据实施方案IV-1至IV-39中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中在第一天施用后每天一至四次，向所述有需要的个体施用一定剂量的所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和任选的一定剂量的所述PAM或其药学上可接受的盐。

实施方案IV-41.根据实施方案IV-1至IV-40中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中随时间推移降低每剂量的a)所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的剂量频率，或b)所述nAChR激动剂的总量或其药学上可接受的盐的相应量。

实施方案IV-42.根据实施方案IV-41所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的每个剂量包括将所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐多于一次施用至所述个体的鼻腔中，并且其中每剂量的所述nAChR激动剂的总量或其药学上可接受的盐的相应量随时间推移的降低是通过减少将所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐施用至所述个体的鼻腔中的次数来完成的。

实施方案IV-43.根据实施方案IV-1至IV-42中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中每剂量将所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐施用至一个鼻孔。

实施方案IV-44.根据实施方案IV-1至IV-42中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中每剂量将所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐施用至两个鼻孔。

实施方案IV-45.根据实施方案IV-1至IV-44中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中将所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐施用至少28天。

实施方案IV-46.根据实施方案IV-1至IV-44中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中将所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和任选的所述PAM或其药学上可接受的盐施用至少3个月。

实施方案IV-47.根据实施方案IV-1至IV-46中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中施用的所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的量不是全身生物可利用的。

实施方案IV-48.根据实施方案IV-1至IV-47中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述方法不会导致不期望的全身性副作用。

实施方案IV-49.根据实施方案IV-1至IV-48中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述方法不会导致不期望的精神活性副作用。

实施方案IV-50.根据实施方案IV-1至IV-49中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体未经历选自以下的一种或多种副作用：泪液的过量产生、咳嗽、喉咙刺激、滴注部位刺激、打喷嚏、鼻咽炎、鼻刺激、牙痛、口干和头痛。

实施方案IV-51.根据实施方案IV-50所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中在施用所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的第一剂量或者一个或多个后续剂量的5分钟-60分钟内，所述个体未经历选自以下的一种或多种副作用：泪液的过量产生、咳嗽、喉咙刺激、滴注部位刺激、打喷嚏、鼻咽炎、鼻刺激、牙痛、口干和头痛。

实施方案IV-52.根据实施方案IV-50或IV-51所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中通过所述个体的Schirmer得分增加大于20mm来指示泪液的过量产生。

实施方案IV-53.根据实施方案IV-1至IV-52中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述个体已经在2周内进行了Lasik手术，或者计划在2周内进行Lasik手术。

实施方案IV-54.根据实施方案IV-1至IV-53中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述PAM或其药学上可接受的盐选择性地结合至选自α3β4、α4β2、α7、α3α5β4和α4α6β2的外周烟碱型乙酰胆碱受体亚型中的至少一种。

实施方案IV-55.根据实施方案IV-1至IV-54中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐选择性地结合至选自α3β4、α4β2、α7、α3α5β4和α4α6β2的烟碱型乙酰胆碱受体亚型中的至少一种。

实施方案IV-56.根据实施方案IV-1至IV-55中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述nAChR激动剂是伐尼克兰或其药学上可接受的盐。

实施方案IV-57.根据实施方案IV-1至IV-55中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述nAChR激动剂是化合物1或其药学上可接受的盐。

实施方案IV-58.根据实施方案IV-1至IV-57中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述PAM选自17-β-雌二醇、(R)-7-溴-N-(哌啶-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺、伊维菌素、加兰他敏、染料木黄酮、5-羟基吲哚、4BP-TQS、A-86774、CCMI、左旋咪唑、莫仑太尔、LY-2087101、美加明、薄荷醇、NS206、NS1738、NS9283、PNU-120596、RO5126946、TBS-345、dFBR和HEPES或上述任一种的药学上可接受的盐。

实施方案IV-59.根据实施方案IV-57所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述PAM是(R)-7-溴-N-(哌啶-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺或3-[3-(3-吡啶基)-1,2,4-噁二唑-5-基]苄腈或上述任一种的药学上可接受的盐。

实施方案IV-60.根据实施方案IV-58所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述PAM是(R)-7-溴-N-(哌啶-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺或其药学上可接受的盐。

实施方案IV-61.根据实施方案IV-58所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述PAM是3-[3-(3-吡啶基)-1,2,4-噁二唑-5-基]苄腈或其药学上可接受的盐。

实施方案IV-62.根据实施方案IV-1至IV-61中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中三叉神经被激活。

实施方案IV-63.根据实施方案IV-1至IV-61中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中筛前神经被激活。

实施方案IV-64.根据实施方案IV-1至IV-63中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中鼻泪反射被激活。

实施方案IV-65.根据实施方案IV-1至IV-64中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述有需要的个体的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的血浆Cmax小于5ng/mL。

实施方案IV-66.根据实施方案IV-1至IV-65中任一项所述的方法、用于所述用途的化合物或组合制剂，其中所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是选自α3β4、α4β2、α7、α3α5β4和α4α6β2的烟碱型乙酰胆碱受体亚型中的至少一种的激动剂。

实施方案IV-67.一种用于局部施用至个体的鼻腔中的药物配制品，所述药物配制品包含nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和PAM或其药学上可接受的盐，其中所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是配制用于鼻腔施用的伐尼克兰或其药学上可接受的盐或者具有结构的化合物1或其药学上可接受的盐。

实施方案IV-68.根据实施方案IV-67所述的药物配制品，其中所述nAChR激动剂是伐尼克兰或其药学上可接受的盐。

实施方案IV-69.根据实施方案IV-67所述的药物配制品，其中所述nAChR激动剂是化合物1或其药学上可接受的盐。

实施方案IV-70.根据实施方案IV-67至IV-69中任一项所述的药物配制品，所述药物配制品每剂量包含5-4000微克的所述nAChR激动剂或相应量的其药学上可接受的盐。

实施方案IV-71.根据实施方案IV-67至IV-70中任一项所述的药物配制品，其中所述PAM选自17-β-雌二醇、(R)-7-溴-N-(哌啶-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺、伊维菌素、加兰他敏、染料木黄酮、5-羟基吲哚、4BP-TQS、A-86774、CCMI、左旋咪唑、莫仑太尔、LY-2087101、美加明、薄荷醇、NS206、NS1738、NS9283、PNU-120596、RO5126946、TBS-345、dFBR和HEPES或上述任一种的药学上可接受的盐。

实施方案IV-72.根据实施方案IV-67至IV-71中任一项所述的药物配制品，其中所述PAM是(R)-7-溴-N-(哌啶-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺或NS9283或上述任一种的药学上可接受的盐。

实施方案IV-73.根据实施方案IV-67至IV-72中任一项所述的药物配制品，其中单独的或与nAChR激动剂组合的所述PAM选择性地结合至选自α3β4、α4β2、α7、α3α5β4和α4α6β2的外周烟碱型乙酰胆碱受体亚型中的至少一种。

实施方案IV-74.根据实施方案IV-67至IV-73中任一项所述的药物配制品，其中所述药物配制品是液体、悬浮液、气雾剂、凝胶、软膏、干粉、乳膏、糊剂或止痛药膏。

实施方案IV-75.根据实施方案IV-67至IV-74中任一项所述的药物配制品，其中将所述配制品通过注射器、滴管、瓶式喷雾器、雾化泵、吸入器、粉末喷雾装置、蒸发器、贴片、药棒、移液管或液体射流施用至鼻腔中。

实施方案IV-76.根据实施方案IV-67至IV-75中任一项所述的药物配制品，所述药物配制品用于在有需要的个体中治疗干眼病、增加泪液产生或改善眼部不适中使用。

实施方案IV-77.根据实施方案IV-67至IV-76中任一项所述的药物配制品，其中所述nAChR激动剂是选自α3β4、α4β2、α7、α3α5β4和α4α6β2的外周烟碱型乙酰胆碱受体亚型中的至少一种的激动剂。

实施方案IV-78.nAChR激动剂或其药学上可接受的盐在制造药物中的用途，其中所述药物在治疗干眼病、增加泪液产生或减轻眼部不适的方法中使用，其中所述方法在实施方案IV-1至IV-66中任一项中进行定义。

实施方案IV-79.一种试剂盒，所述试剂盒包含nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和PAM或其药学上可接受的盐，其中所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐是伐尼克兰或其药学上可接受的盐或者具有结构的化合物1或其药学上可接受的盐。

实施方案IV-80.根据实施方案IV-79所述的试剂盒，其中以组合剂型提供所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和所述PAM或其药学上可接受的盐。

实施方案IV-81.根据实施方案IV-79所述的试剂盒，其中以分开的剂型提供所述nAChR激动剂或其药学上可接受的盐和所述PAM或其药学上可接受的盐。

实施方案IV-82.根据实施方案IV-79至IV-81中任一项所述的试剂盒，其中所述nAChR激动剂是伐尼克兰或其药学上可接受的盐。

实施方案IV-83.根据实施方案IV-79至IV-82中任一项所述的试剂盒，其中所述nAChR激动剂是化合物1或其药学上可接受的盐。

实施方案IV-84.根据实施方案IV-79至IV-83中任一项所述的试剂盒，所述试剂盒每剂量包含5-4000微克的所述nAChR激动剂或相应量的其药学上可接受的盐。

实施方案IV-85.根据实施方案IV-79至IV-84中任一项所述的试剂盒，其中所述PAM选自17-β-雌二醇、(R)-7-溴-N-(哌啶-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺、伊维菌素、加兰他敏、染料木黄酮、5-羟基吲哚、4BP-TQS、A-86774、CCMI、左旋咪唑、莫仑太尔、LY-2087101、美加明、薄荷醇、NS206、NS1738、NS9283、PNU-120596、RO5126946、TBS-345、dFBR和HEPES或上述任一种的药学上可接受的盐。

实施方案IV-86.根据实施方案IV-85所述的试剂盒，其中所述PAM是(R)-7-溴-N-(哌啶-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺或NS9283或上述任一种的药学上可接受的盐。

实施方案IV-87.根据实施方案IV-79至IV-86中任一项所述的试剂盒，所述试剂盒用于在有需要的个体中治疗干眼病、增加泪液产生或改善眼部不适中使用。

实施方案IV-88.根据实施方案IV-79至IV-87中任一项所述的试剂盒，所述试剂盒包含药物配制品，其中所述药物配制品是液体、悬浮液、气雾剂、凝胶、软膏、干粉、乳膏、糊剂或止痛药膏。

实施方案IV-89.根据实施方案IV-79至IV-88中任一项所述的试剂盒，其中将所述配制品通过喷雾泵、注射器、滴管、瓶式喷雾器、雾化泵、吸入器、粉末喷雾装置、蒸发器、贴片、药棒、移液管或液体射流施用至鼻腔中。

实施方案IV-90.根据实施方案IV-79至IV-89中任一项所述的试剂盒，其中单独的或与nAChR激动剂组合的所述PAM选择性地结合至选自α3β4、α4β2、α7、α3α5β4和α4α6β2的外周烟碱型乙酰胆碱受体亚型中的至少一种。

实施方案IV-91.根据实施方案IV-79至IV-90中任一项所述的试剂盒，其中所述nAChR激动剂是选自α3β4、α4β2、α7、α3α5β4和α4α6β2的外周烟碱型乙酰胆碱受体亚型中的至少一种的激动剂。

实施例

实施例1：nAChR激动剂和PAM组合对在非洲爪蟾卵母细胞中表达的人α4β2nAChR的 体外活性

此实施例描述了用于表征化合物1半粘酸盐二水合物和酒石酸伐尼克兰在非洲爪蟾卵母细胞中表达的人神经元烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)α4β2处的作用的实验。所述实验还评价了两种PAM(Br-PBTC，(R)-7-溴-N-(哌啶-3-基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺；NS-9283，3-[3-(3-吡啶基)-1,2,4-噁二唑-5-基]苄腈)的激动剂活性和受体脱敏作用。所述数据提供了以下证据，即使用PAM增强酒石酸伐尼克兰的活性、减少α4β2受体的脱敏并增强受体响应的恢复。

在不存在和存在正向别构调节剂Br-PBTC和/或NS-9283(1μM)的情况下化合物1半粘酸盐二水合物的浓度激活曲线的确定显示了显著向左移动，对于Br-PBTC伴随着最大诱发电流的增加。这些数据证实，在化合物1半粘酸盐二水合物的存在下，两种化合物均在人α4β2nAChR处充当正向别构调节剂。

然而，由于酒石酸伐尼克兰在α4β2处的持久结合，因此不能使用相同的实验方案，使用替代方法获得了PAM作用的确认，所述方法还揭示，增强作用与激动剂或PAM施加的顺序无关。

已知持续暴露于激动剂会使α4β2nAChR脱敏，并且响应的恢复取决于多种因素。测量由1mM化合物1半粘酸盐二水合物或300μM酒石酸伐尼克兰诱发的响应以及从暴露于这些化合物一小时中恢复的情况揭示，虽然化合物1半粘酸盐二水合物在此模型中没有引起持久的脱敏，但施加酒石酸伐尼克兰引起了极大的抑制，其即使在三小时的洗涤期后也无法消除。

检查了Br-PBTC和NS-9283对由1mM化合物1半粘酸盐二水合物诱发的响应及其恢复和/或对300μM酒石酸伐尼克兰的影响。虽然在此模型中，共同施加调节剂对化合物1半粘酸盐二水合物脱敏和恢复的概况影响很小，但观察到酒石酸伐尼克兰在Br-PBTC存在下的显著差异，允许在3小时内几乎完全恢复。

1.1测试化合物

·化合物1半粘酸盐二水合物

·酒石酸伐尼克兰

·Br-PBTC

·NS-9283

1.2参考

·氯化乙酰胆碱

·重蒸馏水中的100mM储备溶液

1.3测试系统

仪器：自动化注射和记录仪器，HiQScreen

供体动物的物种：非洲爪蟾属

动物品系：非洲爪蟾

动物的来源(供应商)：HiQScreen Sàrl，日内瓦

动物的体重：150g至300g

动物饲养每个动物饲养所3至5只

室温：20℃-22℃

照明时间：将动物饲养所暴露于日光，进行另外的人工照明(夏季6am-8pm；冬季8am-7pm)。

食物：食团，随意取食

生物材料的来源和分离程

序：腹部切口切除卵巢

体外实验条件：卵母细胞孵育：巴氏溶液(Barth solution)，含有(以mM计)NaCl88、KCl 1、NaHCO₃ 2.4、HEPES 10、MgSO₄.7H₂O 0.82、Ca(NO₃)₂.4H₂O 0.33、CaCl₂.6H₂O 0.41，pH 7.4，并补充有100个单位/ml青霉素卵母细胞记录：OR2介质，含有(以mM计)：NaCl 88.5、KCl 2.5、HEPES 5、CaCl₂.2H₂O 1.8、MgCl₂.6H₂O 1，pH 7.4。

测试程序：双电极电压钳，使用配备有Geneclamp放大器(Axon Instrument，美国加利福尼亚州福斯特市)或HiClamp(Multichannel Systems，德国)的专有自动化系统

缩写：Ach，乙酰胆碱；nAChR，烟碱型乙酰胆碱受体；SEM，平均值的标准误差；PAM，正向别构调节剂

卵母细胞的制备

所有实验均使用cDNA表达方法在非洲爪蟾卵母细胞中表达的人nAChR上进行。制备了非洲爪蟾卵母细胞并使用标准程序注射。

简而言之，从已经通过在4℃下冷却和在碳酸氢钠(300mg/L)中的三卡因甲基磺酸盐(MS-222，浓度为150mg/L)进行深度麻醉的非洲爪蟾雌性收获卵巢。一旦实施了麻醉，便按照日内瓦州的动物权利规则将动物斩首并刺毁脑脊髓。分离出一小块卵巢用于立即制备，同时将剩余部分放在4℃的无菌巴氏溶液中，所述溶液含有(以mM计)NaCl 88、KCl 1、NaHCO₃ 2.4、HEPES 10、MgSO₄.7H₂O 0.82、Ca(NO₃)₂.4H₂O 0.33、CaCl₂.6H₂O 0.41，pH 7.4，并补充有20μg/ml卡那霉素、100个单位/ml青霉素。所有记录均在18℃下进行，并且用OR2介质灌流细胞，所述介质含有(以mM计)：NaCl 88、KCl 2.5、HEPES 5、CaCl₂.2H₂O 1.8、MgCl₂.6H₂O 1，pH 7.4。

电生理学记录

使用配备有标准双电极电压钳配置(TEVC)的自动化过程记录由ACh或其他激动剂诱发的电流。使用在Matlab(Mathworks Inc.)下运行的HiQScreen专有数据采集和分析软件来捕获和分析数据。

激动剂的制备

在水中将ACh制备成浓缩的储备溶液(10^-1M)，然后在记录介质中稀释以获得所需的测试浓度。将化合物溶解在OR2中作为储备溶液(1mM)，并在实验当天最终稀释至所需浓度。

数据分析与统计

对于统计分析，使用Excel(Microsoft)或Matlab(mathworks Inc.)计算值。为了获得具有标准偏差的平均测量值，所有实验均使用至少三个细胞进行。

实验程序

使用专有自动化注射装置进行在至少95个卵母细胞中进行的编码人α4β2的cDNA的注射(Hogg等人,J.Neurosci.Methods,2008)，并在至少两天后检查受体表达。用两个电极戳卵母细胞，并且除非说明，否则在整个实验过程中，将它们的膜电位保持在-80mV。

开发了用于确定在表达受体的卵母细胞中α4β2nAChR处的别构调节的方案。将表达α4β2nAChR的卵母细胞暴露于浓度渐增的ACh，同时评价响应。通过添加固定浓度的别构调节剂重复此过程。记录由暴露于激动剂和调节剂诱发的电流，并将其与不存在调节剂的情况下诱发的电流进行比较。

1.4PAM对α4β2nAChR对化合物1半粘酸盐二水合物的响应的作用

为了评估正向别构调节剂(Br-PBTC和NS-9283)的作用，设计了在不存在和存在PAM的情况下确定浓度激活曲线的方案。这些数据说明，暴露于1μM Br-PBTC增强由化合物1半粘酸盐二水合物诱发的电流幅度。

在不存在和存在调节剂(PAM)的情况下记录的峰值电流幅度图进一步揭示，化合物1半粘酸盐二水合物的浓度激活曲线向左移动，并且在存在1μM Br-PBTC的情况下电流增加。这些数据证实，在化合物1半粘酸盐二水合物的存在下，Br-PBTC在人α4β2nAChR处充当正向调节剂。

为了评估NS-9283在化合物1半粘酸盐二水合物处的正向别构调节剂作用，使用1μM调节剂进行了相同的实验方案。这些实验的结果说明，在化合物1半粘酸盐二水合物的存在下，此化合物也充当正向别构调节剂。然而，暴露于此化合物不会引起由化合物1半粘酸盐二水合物诱发的最大电流的显著增加，这表明Br-PBTC和NS-9283的作用方式不同。

1.5 PAM对α4β2nAChR对酒石酸伐尼克兰的响应的作用

当用酒石酸伐尼克兰重复相同的实验方案时，在所有测试的细胞中均观察到技术困难。施加调节剂后观察到大信号。在所有测试的细胞中均观察到类似的结果。在施加调节剂时观察到的内向电流表明，酒石酸伐尼克兰可能仍与受体结合，并且暴露于PAM不能激活受体。

由于这些技术困难，不能使用所述实验方案来确定PAM对酒石酸伐尼克兰浓度激活曲线的影响。

1.6施加对PAM调节的影响

为了进一步评价PAM作用，在第一次施加时测量所述调节，并将其与后续的激动剂诱发响应进行比较，或者相反，首先将细胞单独暴露于激动剂，然后暴露于PAM和在持续PAM暴露期间施加的激动剂。

作为第一步，在由3μM ACh(所述浓度处于浓度激活曲线的较低范围中，在所述范围内可以显示最大的PAM作用)诱发的响应处确定PAM作用。

然后针对化合物1半粘酸盐二水合物作为激动剂和Br-PBTC作为调节剂或NS-9283作为调节剂进行了相同的实验。总之，这些数据说明，对于至少化合物1半粘酸盐二水合物和BR-PBTC或NS-9283，调节剂的增强作用与暴露方案无关，并且先前暴露于激动剂并不妨碍正向别构调节剂的活性。

1.7从持续的激动剂暴露中恢复

为了模拟患者的病症，先前已经检查了从持续暴露于激动剂(化合物1半粘酸盐二水合物或酒石酸伐尼克兰)中恢复的情况。这些实验的结果清楚地揭示，尽管酒石酸伐尼克兰引起α4β2受体的重大脱敏，但在这些模型中，暴露于化合物1半粘酸盐二水合物仅引起适度的抑制，随后诱发的响应随时间的变化逐渐增加。

在对照条件下和在不同的恢复时间(长达18小时)下对大量细胞中由化合物1半粘酸盐二水合物诱发的电流的测定揭示，在这些模型中，化合物1半粘酸盐二水合物不会引起对α4β2nAChR的持久抑制。

相比之下，暴露于一小时300μM的酒石酸伐尼克兰引起了持续的抑制，并且经过3小时的洗涤未观察到显著的恢复。

1.8调节剂对长时间激动剂暴露的影响

有效的正向别构调节剂的可用性提供了评估暴露于PAM是否改变脱敏和恢复时间进程的可能性。为了确定Br-PBTC和/或NS-9283的推定作用，进行了与先前进行的实验相似的实验。

1.8.1调节剂和由1mM化合物1半粘酸盐二水合物引起的脱敏

为了评价两种调节剂(即Br-PBTC和NS-9283)在人α4β2受体处的作用，设计了使用与先前在不存在调节剂的情况下进行的相似暴露的实验。通常，在1μM调节剂的存在下，测试了以1:1比率注射了相应cDNA的人α4β2的卵母细胞对15秒内施加的测试脉冲1mM化合物1半粘酸盐二水合物的响应。

然后在1μM调节剂的存在下，将显示显著电流的细胞暴露于1小时的1mM化合物1半粘酸盐二水合物，然后将介质更换为对照。在1、3和18小时的恢复期后，用1mM化合物1半粘酸盐二水合物的测试脉冲再次激发细胞，并使用与对照相同的条件记录它们的响应。

1.8.2调节剂和由300μM酒石酸伐尼克兰引起的脱敏

为了检查两种调节剂Br-PBTC和NS-9283对人α4β2受体处由酒石酸伐尼克兰诱发的响应的影响，进行了相同的实验方案。

酒石酸伐尼克兰响应时间进程的检查示出了对照条件和存在调节剂之间的显著差异。记录在对照中或者在1μM NS-9283或1μM Br-PBTC的存在下测得的细胞数量中记录的平均电流。鉴于在1μM Br-PBTC的存在下观察到的响应的幅度和时间进程明显不同，应保持谨慎，因为这些响应不是在同一批次的细胞中同时记录的。

结论

在不存在或存在Br-PBTC和/或NS-9283的情况下化合物1半粘酸盐二水合物的浓度激活曲线的确定证实，两种PAM均能增强化合物1半粘酸盐二水合物的激动活性，从而导致受体敏感性增加。然而，在两种调节剂之间观察到差异，其中仅对于Br-PBTC观察到由饱和浓度的激动剂诱发的电流幅度的增加。

通过首先监测暴露开始时诱发电流的幅度并通过在范围长达18小时的不同洗涤期(针对化合物1半粘酸盐二水合物)后响应的恢复来检查持续暴露(1小时)于1mM化合物1半粘酸盐二水合物或300μM酒石酸伐尼克兰的作用。这些实验揭示，在此模型中，即使暴露于浓度高达1mM的化合物1半粘酸盐二水合物也不会引起持久的抑制，并且在3小时后观察到几乎完全的恢复。此外，在18小时后观察到响应的显著增加，表明受体可能上调。

相比之下，暴露于300μM酒石酸伐尼克兰(其仅诱发最大Ach诱发电流的一小部分)对后续的响应产生了重大抑制，甚至在洗涤3小时后也没有恢复。

当在1μM Br-PBTC的存在下用300μM酒石酸伐尼克兰重复相同的实验时，出现了不同的画面。首先，由酒石酸伐尼克兰诱发的电流幅度由于这种调节剂的存在而大大增强；其次，在洗涤3小时后观察到响应几乎完全恢复。相反，虽然施加1μM NS-9283也增强了对酒石酸伐尼克兰的响应，但暴露于此化合物并不能显著改变恢复时间进程。

总之，这些数据揭示，持续暴露于激动剂(诸如化合物1半粘酸盐二水合物或酒石酸伐尼克兰)引起受体的明显脱敏，并且通过使用Br-PBTC改善了从酒石酸伐尼克兰脱敏中的恢复。特别地，这些数据说明，在非洲爪蟾卵母细胞中可以容易地检查人α4β2nAChR的功能特性，并且通过使用正向别构调节剂(诸如Br-PBTC)可以部分地逆转由酒石酸伐尼克兰引起的持久脱敏。

实施例2：nAChR激动剂对各种nAChR亚型的体外活性

此实施例描述了用于表征酒石酸伐尼克兰和化合物1半粘酸盐二水合物在非洲爪蟾卵母细胞中表达的人神经元烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)α3β4、α3α5β4、α4β2和α7处的作用的实验。

对化合物1半粘酸盐二水合物在α3β4、α3α5β4、α4β2和α7受体处的激动作用的测定揭示，此化合物在10至100μM的范围内在这些受体处充当激动剂。然而，在受体亚型的功能方面观察到明显的差异。即，化合物1半粘酸盐二水合物在人α7受体处是弱的激动剂，在300μM下仅诱发最大ACh诱发电流的24％。相比之下，来自α4β2的数据揭示，化合物1半粘酸盐二水合物诱发的电流是最大ACh响应的约2倍。此外，暴露于化合物1半粘酸盐二水合物增强了后续的ACh诱发电流。在α3β4和α3α5β4处记录的数据揭示，化合物1半粘酸盐二水合物在这些受体处充当激动剂，诱发最大ACh诱发电流的约94％。

对酒石酸伐尼克兰在人α3β4、α3α5β4、α4β2和α7nAChR处的激动特性的测定证实，此化合物在α3β4、α3α5β4和α4β2处充当部分激动剂，其中EC50在低微摩尔范围内。在人α7受体处获得的结果证实，酒石酸伐尼克兰在这种受体亚型处充当完全激动剂，其中EC₅₀为约11μM。

在α3β4、α3α5β4、α4β2和α7nAChR处进行的脱敏实验揭示了受体亚型功能的显著差异。尽管α3β4和α7受体对持续暴露于浓度高达300nM的化合物1半粘酸盐二水合物不敏感，但在α3α5β4和α4β2受体处观察到明显的抑制。然而，在测试的最高浓度下，抑制达到了稳定水平，表明此化合物在实验条件下可能仅引起部分脱敏。在α3β4、α3α5β4、α4β2和α7nAChR处进行的脱敏实验揭示了在这些不同受体亚型之间可以观察到的显著差异。即，尽管酒石酸伐尼克兰在纳摩尔范围内抑制高达78％的α4β2受体，但暴露于相同的浓度和持续时间在α3β4受体处仅具有非常适度的作用。然而，α3α5β4组合中α5受体的共表达增加了对酒石酸伐尼克兰的敏感性，导致高达45％的抑制。观察到的酒石酸伐尼克兰在此受体亚型处的稳定作用与其部分激动剂活性非常一致。重要的是，对于数百纳摩尔范围内的浓度，将α7nAChR暴露于酒石酸伐尼克兰也导致抑制。在三分钟内施加的300μM酒石酸伐尼克兰在α3β4或α4β2nAChR处引起的脱敏证实了这两种亚型之间的敏感性差异。即，尽管酒石酸伐尼克兰在α4β2处仅诱发了约10％-20％的ACh响应，但在α3β4受体处观察到更大的电流幅度。长达36分钟的时间观察不到恢复证实了由暴露于酒石酸伐尼克兰引起的持久脱敏。

观察和测量

卵母细胞的制备

参见实施例1。

电生理学记录

参见实施例1。

激动剂的制备

参见实施例1。化合物1半粘酸盐和酒石酸伐尼克兰的测试浓度为(以微摩尔计)0.1、0.3、1、3、10、30、100和300。氯化乙酰胆碱的测试浓度为1280微摩尔。

数据分析与统计

参见实施例1。

实验程序

使用专有自动化注射装置进行在至少95个卵母细胞中进行的编码人α3β4、α3α5β4、α4β2和α7的cDNA的注射，并在至少两天后检查受体表达。用两个电极戳卵母细胞，并且除非说明，否则在整个实验过程中，将它们的膜电位保持在-80mV。

开发了用于确定表达nAChR的卵母细胞中的激动活性的方案。以两分钟的间隔，将细胞暴露于一系列浓度递增的化合物激动剂，每次10秒。记录暴露于每种浓度的激动剂诱发的电流。对于表达α7nAChR的卵母细胞，将暴露于激动剂的时间减少到5秒。对于针对每种类型的nAChR表达细胞进行测试的每种激动剂，重复此过程。

化合物1半粘酸盐二水合物的激动特性

为了评价化合物1半粘酸盐二水合物的激动特性，使用了短暂暴露于一系列浓度不断增加的化合物1半粘酸盐二水合物的方案。

在人nAChR处进行的实验证实，化合物1半粘酸盐二水合物在所考虑的受体处起激动剂的作用。然而，值得注意的是，化合物1半粘酸盐二水合物在异聚α4β2受体处诱发比内源性配体乙酰胆碱(ACh)更大的电流，并且对此受体亚型也显示出更高的效力。

化合物1半粘酸盐二水合物在nAChRα3β4处几乎充当完全激动剂，产生的EC₅₀为42.09±5.36微摩尔。

化合物1半粘酸盐二水合物在nAChRα3α5β4处几乎充当完全激动剂，产生的EC₅₀为32.15±2.16μM。

化合物1半粘酸盐二水合物在nAChRα4β2处充当比ACh更有效的激动剂，产生的EC₅₀为48.82±17.41μM。

化合物1半粘酸盐二水合物在nAChRα7处是比ACh更有效的激动剂。鉴于由化合物1半粘酸盐二水合物诱发的小部分电流，1261±500μM的EC₅₀仅是估计值。

酒石酸伐尼克兰的激动特性

酒石酸伐尼克兰在人α4β2受体处充当非常弱的激动剂，并且对后续的ACh诱发电流产生重大抑制。相比之下，酒石酸伐尼克兰在α7受体处是完全激动剂，其中EC₅₀为约15μM，并且不会引起对后续的ACh诱发电流的显著抑制。

针对酒石酸伐尼克兰获得的数据证实，此分子在异聚α3β4、α3α5β4和α4β2处充当部分激动剂，但能够在α7受体处诱发相当于ACh的响应。

化合物1半粘酸盐二水合物和酒石酸伐尼克兰的拮抗剂特性

使用低浓度范围内的累积暴露来确定化合物1半粘酸盐二水合物和酒石酸伐尼克兰的拮抗活性。针对化合物1半粘酸盐二水合物获得的结果揭示，此化合物以浓度依赖性方式抑制α3α5β4和α4β2受体，并且抑制是不完全的，并在所测试的最高浓度下达到稳定。相比之下，在这些实验所测试的范围内，在α3β4或α7受体处均未观察到显著抑制。

在α3α5β4、α4β2和α7受体处观察到酒石酸伐尼克兰的拮抗活性，而对于高达300nM的浓度，α3β4受体几乎不显示出任何抑制。在人α3β4处获得的结果说明，浓度高达约300nM的酒石酸伐尼克兰不会引起对ACh诱发电流的显著抑制。这些数据与先前的报告非常一致，并且仅对于微摩尔范围内的浓度，酒石酸伐尼克兰将充当激动剂。然而，在注射了α3α5β4的卵母细胞上进行的实验揭示了不同的模式，因为即使暴露在纳摩尔范围内，也可以观察到对ACh诱发响应的小但显著的抑制。在300nM下，最大抑制达到约45％。针对在人α4β2处获得的酒石酸伐尼克兰的数据完美地说明了由持续暴露于此分子引起的抑制。尽管ACh诱发电流的逐渐抑制随浓度的变化被清楚地观察到，但数据揭示，抑制达到78％的最大值，这与酒石酸伐尼克兰的部分激动剂活性非常一致。这些结果说明，酒石酸伐尼克兰也引起α7nAChR的脱敏。

持续暴露于300μM酒石酸伐尼克兰及其恢复

因为预期受体可以持续暴露于相当高浓度的酒石酸伐尼克兰，所以在人α3β4和α4β2处进行了另外的实验。这些数据说明了这两种nAChR亚型的敏感性差异，并且虽然暴露于300μM酒石酸伐尼克兰在人α3β4处诱发了相当大的响应，但其在α4β2处仅引起小的激活。此外，由酒石酸伐尼克兰引起的脱敏显示出持久的作用，即使在洗涤36分钟后也不能恢复。

总之，这些数据说明，人nAChR在非洲爪蟾卵母细胞中的表达为测试给定化合物的功能性激动和拮抗活性提供了有效的模型，并且激动剂在比激活所需浓度更低的浓度下引起受体脱敏。

实施例3：最大血浆浓度的测量

此实施例描述了在施用包含nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的药物配制品之后，测量个体中nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的最大血浆浓度(Cmax)的方法。

给药

向个体施用一定剂量的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐。本文描述了剂量和体积范围的例子。

血液采集和样品处理

在施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐之前，从个体收集血液样品。在向个体施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐之后，在一定时间内以一定间隔收集多个血液样品。例如，在施用nAChR激动剂或其药学上可接受的盐之后10分钟、20分钟、30分钟、1小时、2小时、3小时和4小时收集血液样品。

从手臂静脉将血液样品(4mL，在K2EDTA管中)采集到含有K2EDTA的Vacutainer管中。轻轻混合血液样品并维持冷冻直至在收集后2小时内离心。

将血浆样品分成两等份，并用个体身份和标称时间点标记，并且冷冻保存(在<-70℃下)直至分析。

药代动力学样品的生物分析方法

使用液相色谱、随后是串联质谱(LC-MS/MS)生物分析方法(具有质谱检测的高效液相色谱[HPLC])处理来自个体的血液样品，以获得血浆和nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的血浆浓度。

药代动力学分析

所有药代动力学(PK)分析和报告均根据普遍接受的标准操作程序和方案规范进行。通过使用普遍接受的软件工具(例如 8.0)来计算药代动力学参数。

通过绘制随时间变化的nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的浓度来产生血浆浓度时间图。通过检查个体的血浆浓度时间图来计算Cmax。另一个与Cmax相关的参数是nAChR激动剂或其药学上可接受的盐的最大观察浓度除以毫克剂量(Cmax/D)。为治疗后的个体计算Cmax。如果为多于一名的个体计算Cmax，则也可以为所述组计算算术平均Cmax和中位Cmax。

实施例4：用化合物1半粘酸盐二水合物处理之后测得的Cmax

使用实施例3中描述的方案，分析了30个经由鼻喷雾剂(200微升总体积；约2216微克的化合物1游离碱)用1.1％化合物1游离碱(2.0％化合物1半粘酸盐二水合物)处理的个体的血浆。测得的化合物1的平均Cmax为2.92ng/mL。

实施例5：在非洲爪蟾卵母细胞中表达的人nAChR中的化合物1柠檬酸盐和酒石酸 伐尼克兰激动剂活性

此实施例描述了用于表征化合物1柠檬酸盐在非洲爪蟾卵母细胞中表达的人神经元烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)α3β4、α3α5β4、α4β2、α4α6β2和α7处的激动剂活性的实验。此外，测量了酒石酸伐尼克兰对非洲爪蟾卵母细胞中表达的α4α6β2的影响。

方法

测试化合物：化合物1柠檬酸盐、酒石酸伐尼克兰

参考化合物：氯化乙酰胆碱

测试系统：参见实施例1。

卵母细胞的制备：参见实施例1。

电生理学记录：参见实施例1。

激动剂的制备：参见实施例1。化合物1柠檬酸盐和酒石酸伐尼克兰的测试浓度为0.1、0.3、1、3、10、30、100、300(微摩尔)。氯化乙酰胆碱的测试浓度为1280微摩尔。

数据分析与统计：参见实施例1。

实验程序：使用专有自动化注射装置在至少95个卵母细胞中注射编码人α3β4、α3α5β4、α4β2、α4α6β2和α7的cDNA。在至少两天后检查细胞受体表达。用两个电极戳卵母细胞，并且除非说明，否则在整个实验过程中，将它们的膜电位保持在-80mV。

开发了用于确定表达nAChR的卵母细胞中的激动活性的方案。将表达nAChR亚型的卵母细胞暴露于乙酰胆碱(1280微摩尔)的短暂测试脉冲，同时评价维持电流和响应。将显示强电流的细胞洗涤90秒。然后以两分钟的间隔，将细胞暴露于一系列浓度递增的nAChR激动剂，每次10秒。nAChR激动剂测试浓度为0.1、0.3、1、3、10、30、100、300(微摩尔)。记录暴露于每种浓度的激动剂诱发的电流。对于表达α7nAChR的卵母细胞，将暴露于激动剂的时间减少到5秒。对于针对每种类型的nAChR表达细胞进行测试的每种激动剂，重复此过程。

结果

用双电极电压钳研究了化合物1柠檬酸盐在非洲爪蟾卵母细胞中表达的人神经元烟碱型乙酰胆碱受体处的作用。对化合物1柠檬酸盐在α3β4、α3α5β4、α4β2、α4α6β2和α7受体处的激动作用的测定揭示，此化合物在10至300微摩尔的范围内在这些受体处充当激动剂。然而，在受体亚型之间的响应方面观察到明显的差异。即，化合物1柠檬酸盐在300微摩尔浓度下在人α7受体处是弱部分激动剂。300微摩尔化合物1柠檬酸盐溶液诱发的响应仅为ACh诱发电流的25％。相比之下，针对nAChR亚型α3β4、α3α5β4、α4β2和α4α6β2记录的数据揭示，化合物1柠檬酸盐在这些受体处几乎充当完全激动剂。

化合物1柠檬酸盐在nAChRα3β4处几乎充当完全激动剂，产生的EC₅₀为34.87±4.53微摩尔。

化合物1柠檬酸盐在nAChRα3α5β4处几乎充当完全激动剂，产生的EC₅₀为83.00±9.05微摩尔。

化合物1柠檬酸盐在nAChRα4β2处几乎充当完全激动剂，产生的EC₅₀为13.48±2.06微摩尔。由第二次Ach暴露诱发的电流的显著抑制归因于由化合物1柠檬酸盐暴露引起的脱敏。

化合物1柠檬酸盐在nAChRα4α6β2处几乎充当完全激动剂，产生的EC₅₀为13.14±3.68微摩尔。

化合物1柠檬酸盐在nAChRα7处充当弱激动剂，在300微摩尔下仅诱发最大ACh诱发电流的25％，产生的EC₅₀为125.63±28.52微摩尔。鉴于由化合物1柠檬酸盐诱发的小部分电流，EC₅₀仅是估计值。

伐尼克兰在nAChRα4α6β2处充当弱部分激动剂。在0.1微摩尔至300微摩尔的浓度下，伐尼克兰诱发的响应与ACh响应相比为6％或更少。计算出的EC₅₀为5.02±1.21微摩尔。观察到暴露于伐尼克兰引起后续的ACh诱发电流的显著抑制。

实施例6：PAM和nAChR激动剂组合施用在动物中的7天耐受性和药代动力学研究

可以在啮齿动物(大鼠和小鼠)、兔和更大的物种(包括狗和非人灵长类动物)中进行鼻内施用nAChR激动剂与施用PAM相组合，尽管用于施用测试物品的实验技术(例如，每个鼻孔的剂量体积、递送装置)可能因物种而异。在啮齿动物和非啮齿动物中，分别使用大鼠和狗或猴来评价鼻内药物产品是最常见的。然而，还使用了兔，并且在安全性评估研究中组织病理学评价兔鼻腔的方法已由Pereira等人开发出(Pereira ME,Macri NP,CreasyDM.Evaluation of the rabbit nasal cavity in inhalation studies and acomparison with other common laboratory species and man.ToxicologicPathology.2011.39:893-900)。也可以鼻内施用PAM。可替代地，可以通过其他途径(诸如口服或局部)施用PAM。

大鼠

可以在大鼠(例如，Sprague Dawley大鼠)的7天鼻内施用研究中评估PAM和nAChR激动剂组合的潜在毒性和毒代动力学行为。每天3次向大鼠鼻内施用60μL的剂量浓度为0％、0.5％、2％和6％(例如化合物1，基于半粘酸盐)的nAChR激动剂(例如，化合物1)持续7天。将60μL的总施用体积在每个鼻孔之间平均分配(每剂量每鼻孔30μL)，并且每天施用3次(每天总体积为180μL)。

此外，用PAM(例如，Br-PBTC或NS-9283)处理大鼠。可以测试一系列PAM浓度。相对于nAChR激动剂，PAM施用的剂量频率和时间可能有所不同。例如，在整个7天的研究中，PAM可以每天、几次或一次施用。

可以评价以下参数和终点：临床体征、体重、体重增加、食物消耗、眼科学、毒代动力学参数、肉眼尸检调查结果、器官重量以及选定组织的组织病理学检查，包括I-IV级鼻腔和所有剂量组的详细眼部组织病理学；脑、咽、喉、气管、肺和选定靶组织(即，肾上腺、肝和脾)的组织病理学；和肉眼病变。临床观察可以提供毒理学相关信息。将处理的大鼠的结果与施用磷酸盐缓冲盐水的对照组进行比较。

关于毒代动力学测量，为nAChR激动剂和PAM计算以下参数：

只要可行，这些参数是从第1天和第7天随时间推移的血浆复合浓度产生的。基于这些参数，可以计算出nAChR激动剂或PAM的吸收速率、半衰期以及对积累和清除的洞察。

兔

可替代地，在鼻内毒性和毒代动力学研究中，可以选择兔(例如，新西兰兔)来评价nAChR激动剂和PAM。

剂量施用。将剂量施用的第一天定义为第1天。通过使用连接到注射器的鼻内粘膜雾化器来施用nAChR激动剂测试物品和对照物品。将大约100μL的对照物品磷酸盐缓冲盐水溶液喷入第1组动物的每个鼻孔中。将大约100μL的指定浓度的测试物品化合物1喷入第2组、第3组和第4组动物的每个鼻孔中。第1组和第4组的动物一天给药两次，间隔大约8小时。第2组和第3组的动物每天给药一次。连续七(7)天对所有动物给药。

此外，向第2组、第3组和第4组的测试兔施用PAM(例如，Br-PBTC)。可以测试一系列PAM浓度。例如，PAM的浓度范围可以从nAChR激动剂浓度的十分之一至nAChR激动剂的相似浓度。PAM可以与nAChR激动剂分开或同时施用。可替代地，PAM施用的剂量频率和时间可以变化。例如，在整个7天的研究中，PAM可以每天、几次或一次施用。PAM可以与nAChR激动剂的每次施用一起施用。关于施用途径，可以鼻内施用PAM。可替代地，可以口服施用PAM。

下文总结了研究方案。

组织病理学。对于组织的组织病理学评价，通过最具体的地形学和形态学诊断、严重程度和分布将每个病变列出并编码。将五步/严重程度分级系统(最小、轻度、中度、明显和重度)用于定义可分级病变。当病理学家在显微镜下检查标本时，标本的来自死后观察的粗略调查结果的记录可供使用。

临床观察。在每次给药后观察动物一次，在给药后30-60分钟观察动物的毒性临床体征。将观察到的调查结果记录下来。临床观察包括但不限于皮肤、毛皮、眼睛和粘膜、呼吸系统、循环系统、自主中枢神经系统、躯体活动、自主活动和行为模式的变化。

鼻内/鼻评估。通过使用鼻窥器，在终止之前进行了鼻内/鼻评估。使用Draize评分量表进行了鼻内刺激。评估包括观察和记录打喷嚏。下文总结了用于对皮肤刺激评分的Draize分类系统。

实施例7：在鼻内施用化合物1半粘酸盐28天之后，人类受试者中的药代动力学测 量

此实施例描述了用于确定在用1.1％化合物1(2.0％半粘酸盐)治疗四周之后以及在第29天进行单次双侧鼻喷雾之后血浆的全身暴露和药代动力学的研究。结果证明，在施用后10分钟，在所有受试者中均检测到化合物1，这表明了化合物1的快速鼻吸收。此外，此实施例证明，化合物1在鼻内施用后表现出低的全身暴露，并且在重复施用后不应在体循环中表现出任何积累。

在每个鼻孔中以50μL鼻内喷雾剂的形式递送，向七名患者施用了1.1％化合物1(2.0％半粘酸盐)，BID持续28天。在第29天，向患者提供单次鼻内施用1.1％化合物1(2.0％半粘酸盐)。

在给药前第29天(时间0)和单次施用药物后的一系列时间点(10min、20min、30min、1h、2h、4h、5h、6h、7h、8h和24h)后收集患者的血浆。分析了血浆中的化合物1。

计算了化合物1的以下药代动力学参数：

·Cmax：通过检查单个研究参与者的血浆浓度时间图观察到的最大观察浓度。

·Tmax：直接从观察浓度时间数据获得的最大观察浓度的时间。

·AUClast：通过线性和对数梯形法的组合(线性上升/对数下降法(Linear up/log down method))计算的从时间0至最后一次可测量的非零浓度的血浆浓度时间曲线下面积。

·AUC0-4h：通过线性和对数梯形法的组合(线性上升/对数下降法)计算的从时间0至4h时间点的血浆浓度时间曲线下面积。

·AUCinf：从零点时间(给药前)外推至无限时间的面积(AUCinf)将如下计算：AUCinf＝AUClast+Cz/λz

·AUC％Extrap：通过外推法获得的AUCinf的百分比(AUC％Extrap)将如下计算：

·半衰期：末端消除半衰期。

血浆浓度数据。在BID施用1.1％化合物1的28天之后，在时间零点(给药前)在7名受试者中的4名中检测到化合物1，其中平均浓度为0.264ng/mL。在施用后十分钟，在来自所有受试者的血浆中均检测到化合物1，这表明了快速的鼻吸收。在鼻内施用后，化合物1的平均血浆暴露随时间增加，其中在1h时的暴露峰值为2.07ng/mL，然后在24h的采样期内下降。下降是双相的，其中在2和4h之间是稳定的。七名受试者中的四名在给药后5h具有可量化的水平，并且在接下来的三个时间点(6、7和8h)中的每一个时间点，一名受试者丧失了可量化的化合物1。仅一名受试者在施用后8h具有可量化的化合物1，并且没有受试者在施用后24h具有的可量化化合物1超过量化下限0.200ng/mL。

药代动力学参数数据。化合物1的平均(SD)Cmax为2.26±1.96ng/mL，其中来自七名受试者的单个受试者最大值为5.49ng/mL。中位Tmax在0.50h时出现，并且平均(SD)半衰期为1.58±0.818h。七名受试者中的四名的AUC％Extrap>20％，这应妨碍半衰期和AUCinf的计算，然而，这些个体受试者的值已被报告并包括在PK参数AUCinf和半衰期的概要统计中。平均(SD)AUClast在5.22±4.52h*ng/mL下是可变的，并且最大单个个体值为12.1h*ng/mL。然而，最低AUC％Extrap为3.69％的一名受试者也是最大AUClast和AUCinf分别为12.1h*ng/mL和12.5h*ng/mL的受试者。在6.22±4.63h*ng/mL下，平均(SD)AUCinf比平均AUClast高21.3％。个体受试者的最大半衰期为2.83h，这表明一般来说，如果每12小时施用化合物1，则在下一次施用之前，将从所有受试者的体循环中清除>94％(4个半衰期)的化合物1。总体而言，化合物1的全身暴露较低。

在下表中总结了药代动力学结果。

结论。在BID施用1.1％化合物1的28天之后，化合物1对7名受试者中的4名(57.1％)表现出较低的全身暴露，其中平均浓度为0.264ng/mL，表现出给药前全身暴露。在施用后十分钟，在来自所有受试者的血浆中均检测到化合物1，这表明了快速的鼻吸收。化合物1的清除在本质上是双相的，其中在2和4h之间是稳定的，这可能表明可能的口服组分吸收进入了全身分布。然而，仅一名受试者在施用后8h具有可量化量的化合物1，并且没有受试者在施用后24h具有可量化量的化合物1。这与观察到的1.58±0.818h的平均(SD)半衰期相关。个体受试者的最大半衰期为2.83h，这表明一般来说，如果每12小时施用化合物1，则在下一次施用之前，将从所有受试者的体循环中清除>94％(4个半衰期)的化合物1。总体而言，化合物1的全身暴露较低，其中平均(SD)Cmax为2.26±1.96ng/mL，其中来自七名受试者的单个受试者最大值为5.49ng/mL。