一种猪饲料用益生菌添加剂的制备方法
阅读说明：本技术 一种猪饲料用益生菌添加剂的制备方法 (Preparation method of probiotic additive for pig feed ) 是由 雷江文 于 2020-12-11 设计创作，主要内容包括：本发明属于益生菌技术领域,具体涉及一种猪饲料用益生菌添加剂的制备方法。本发明以新鲜猪肠作为基础原料,通过营养液对新鲜猪肠内部原生态微生物群进行培养,以获得其中优势的菌种,提高菌剂在肠道中的定植性,同时增加了有助于增加家猪体内优势的混合菌剂,随后通过膳食纤维制备得到多孔微球结构,通过多孔微球结构对辅助料吸附,通过微生物吸附在微球表面,利用辅助料对微生物进行提供营养物质,保证微生物稳定生存,而且通过阿拉伯胶进行包裹,同时膳食纤维的存在,可以促进肠道蠕动,形成可以有效解决猪饲料中的活性益生菌在肠道中的定植性能较弱,无法增加家猪的抗病性能,无法对猪进行调理的问题的猪饲料用益生菌添加剂。(The invention belongs to the technical field of probiotics, and particularly relates to a preparation method of a probiotic additive for pig feed. The invention takes the fresh pig intestines as the basic raw material, and the original ecological microbiota in the fresh pig intestines are cultured by the nutrient solution to obtain the dominant strains, improve the planting property of the microbial inoculum in the intestinal tracts, meanwhile, a mixed microbial inoculum which is helpful for increasing the advantages in the domestic pigs is added, and then a porous microsphere structure is prepared by dietary fibers, the auxiliary material is adsorbed by the porous microsphere structure, the microorganism is adsorbed on the surface of the microsphere, the auxiliary material is utilized to provide nutrient substances for the microorganism, the stable survival of the microorganism is ensured, and the gum arabic is used for wrapping, and the existence of dietary fiber can promote intestinal peristalsis, so that the probiotic additive for the pig feed can be used for effectively solving the problems that the colonization performance of active probiotics in the pig feed in the intestinal tract is weak, the disease resistance of domestic pigs cannot be increased, and the pigs cannot be conditioned.)
技术领域
本发明属于益生菌技术领域，具体涉及一种猪饲料用益生菌添加剂的制备方法。
背景技术
猪肉作为居民的日常消费产品，其肉质品质安全极大程度取决于猪饲料的安全状况。虽然在猪饲料中添加抗生素可以显著提高猪的生产性能和对营养物质的利用率，但是也会带来猪肉产品抗生素残留和环境污染等问题。因此开发一类具有无污染、无残留、具有防病促生长等作用的猪饲料或添加剂来代替抗生素，对提高猪肉品质安全等问题具有重要的现实意义。
益生菌是对宿主健康有很大促进作用的有益微生物，有利于宿主肠道微生物平衡。最近几年，通过广泛实践研究，已经证明了益生菌在维持肠道平衡，改善动物健康，促进动物生长方面有着十分重要的作用。目前在养殖领域普遍认为益生菌是抗生素的最佳替代品。试验证明，直接向猪饲料中添加益生菌，能够提高仔猪、育肥猪的生长性能和饲料利用效率，有效降低多种疾病发生。
在现有的猪用微生态饲料添加剂生产过程中，大多仅使用蛋白质类物质和/或糖类物质作为活性益生菌的培养基，虽然菌株数量上可以满足需求，但大多数菌株的活性不高，在肠道中的定植性能较弱，因此活性益生菌作为畜禽饲料所应发挥的作用受到很大的限制；同时，活性益生菌仅能在一定程度上增强家猪的体质，无法增强家猪的防病抗病能力，更不具备疾病治疗作用，无法对猪进行调理，因此，现有的家猪微生态饲料添加剂并不能完全取代抗生素的使用。
发明内容
本发明所要解决的技术问题：针对猪饲料中的活性益生菌在肠道中的定植性能较弱，无法增加家猪的抗病性能，无法对猪进行调理的问题，提供一种猪饲料用益生菌添加剂的制备方法。
为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案是：
一种猪饲料用益生菌添加剂的制备方法，该制备方法包括如下步骤：
（1）将新鲜猪肠与营养液按质量比1:10～15放入粉碎机中进行粉碎，调节pH至6～7，收集粉碎物，将粉碎物置于25～30℃进行静置，过滤，收集滤液，将滤液与混合菌剂按质量比15:1～3混合均匀，得基础液；
（2）按重量份数计，取80～90份蛋白胨、45～50份琼脂、15～25份水、5～10份葡萄糖、3～12份添加剂，搅拌均匀，杀菌消毒，得固体营养物，将固体营养物与基础液按质量比18:7～9，混合均匀，得培养物；
（3）将培养物置于28～35℃，空气湿度为60～65％，进行培养1～2天，随后通过蒸馏水淋洗培养物表面直至表面无菌丝，收集淋洗液；
（4）将膳食纤维、碳酸钙及水按质量比3:2:3～5混合均匀，再加入水等体积的丙酮，再加入碳酸钙质量20～30％的表面活性剂，进行超声震荡，再加入水体积80～85％的液体石蜡，搅拌，升温至30℃，保温，过滤，洗涤，干燥，收集干燥物；
（5）将干燥物放入盐酸溶液中浸泡，过滤，洗涤，干燥，得基础颗粒，将基础颗粒、辅助料、阿拉伯胶及淋洗液按质量比10:3:5:20～25搅拌均匀，静置，冷冻干燥，即得猪饲料用益生菌添加剂。
优选地，所述步骤（1）中营养液为按重量份数计，取230～330份水、50～60份蛋白胨、20～30份酵母提取物、10～13份柠檬酸二铵、8～12份葡萄糖、6～9份氯化钠，搅拌均匀，杀菌消毒，即得营养液。
优选地，所述步骤（1）中混合菌剂为枯草芽孢杆菌、乳酸杆菌按任意质量比混合而成。
优选地，所述步骤（2）中添加剂为磷酸氢二钠、磷酸二氢钠及氯化钠按质量比6:5:1～3混合而成。
优选地，所述步骤（4）中表面活性剂为硬质酸钠、卵磷脂按任意质量比混合而成。
优选地，所述步骤（5）中辅助料为蛋白胨、葡萄糖按质量比10:1混合而成。
本发明与其他方法相比，有益技术效果是：
本发明以新鲜猪肠作为基础原料，通过营养液对新鲜猪肠内部原生态微生物群进行培养，以获得其中优势的菌种，可以有效地适应家猪体内的环境，增加对家猪体内环境的调节，提高菌剂在肠道中的定植性，同时增加了有助于增加家猪体内优势的混合菌剂，配合培养的淋洗的菌液，提高了添加剂对于家猪自身的调节功能，随后通过膳食纤维制备得到多孔微球结构，最后通过多孔微球结构对辅助料进行吸附，并且通过微生物吸附在微球表面，利用辅助料对微生物进行提供营养物质，保证微生物稳定生存，而且通过阿拉伯胶进行包裹，同时膳食纤维的存在，可以促进肠道蠕动，促进效果，由此形成可以有效解决猪饲料中的活性益生菌在肠道中的定植性能较弱，无法增加家猪的抗病性能，无法对猪进行调理的问题的猪饲料用益生菌添加剂。
具体实施方式
营养液为按重量份数计，取230～330份水、50～60份蛋白胨、20～30份酵母提取物、10～13份柠檬酸二铵、8～12份葡萄糖、6～9份氯化钠，搅拌均匀，杀菌消毒，即得营养液。
混合菌剂为枯草芽孢杆菌、乳酸杆菌按任意质量比混合而成。
添加剂为磷酸氢二钠、磷酸二氢钠及氯化钠按质量比6:5:1～3混合而成。
表面活性剂为硬质酸钠、卵磷脂按任意质量比混合而成。
辅助料为蛋白胨、葡萄糖按质量比10:1混合而成。
一种猪饲料用益生菌添加剂的制备方法，该制备方法包括如下步骤：
（1）将新鲜猪肠与营养液按质量比1:10～15放入粉碎机中，以800r/min进行粉碎30min，调节pH至6～7，收集粉碎物，将粉碎物置于25～30℃进行静置过夜，过滤，收集滤液，将滤液与混合菌剂按质量比15:1～3混合均匀，得基础液；
（2）按重量份数计，取80～90份蛋白胨、45～50份琼脂、15～25份水、5～10份葡萄糖、3～12份添加剂，搅拌均匀，杀菌消毒，得固体营养物，将固体营养物与基础液按质量比18:7～9，混合均匀，得培养物；
（3）将培养物置于28～35℃，空气湿度为60～65％，进行培养1～2天，随后通过蒸馏水淋洗培养物表面直至表面无菌丝，收集淋洗液；
（4）将膳食纤维、碳酸钙及水按质量比3:2:3～5混合均匀，再加入水等体积的丙酮，再加入碳酸钙质量20～30％的表面活性剂，进行超声震荡30min，再加入水体积80～85％的液体石蜡，以700r/min搅拌2h，升温至30℃，保温15h，过滤，收集滤饼，使用石油醚进行洗涤，干燥，收集干燥物；
（5）将干燥物放入1.2mol/L盐酸溶液中浸泡1h，过滤，洗涤，干燥，得基础颗粒，将基础颗粒、辅助料、阿拉伯胶及淋洗液按质量比10:3:5:20～25搅拌均匀，室温静置10h，冷冻干燥，即得猪饲料用益生菌添加剂。
实施例1
营养液为按重量份数计，取330份水、60份蛋白胨、30份酵母提取物、13份柠檬酸二铵、12份葡萄糖、9份氯化钠，搅拌均匀，杀菌消毒，即得营养液。
混合菌剂为枯草芽孢杆菌、乳酸杆菌按任意质量比混合而成。
添加剂为磷酸氢二钠、磷酸二氢钠及氯化钠按质量比6:5:3混合而成。
表面活性剂为硬质酸钠、卵磷脂按任意质量比混合而成。
辅助料为蛋白胨、葡萄糖按质量比10:1混合而成。
一种猪饲料用益生菌添加剂的制备方法，该制备方法包括如下步骤：
（1）将新鲜猪肠与营养液按质量比1: 15放入粉碎机中，以800r/min进行粉碎30min，调节pH至7，收集粉碎物，将粉碎物置于30℃进行静置过夜，过滤，收集滤液，将滤液与混合菌剂按质量比15: 3混合均匀，得基础液；
（2）按重量份数计，取90份蛋白胨、50份琼脂、25份水、10份葡萄糖、12份添加剂，搅拌均匀，杀菌消毒，得固体营养物，将固体营养物与基础液按质量比18: 9，混合均匀，得培养物；
（3）将培养物置于35℃，空气湿度为65％，进行培养2天，随后通过蒸馏水淋洗培养物表面直至表面无菌丝，收集淋洗液；
（4）将膳食纤维、碳酸钙及水按质量比3:2: 5混合均匀，再加入水等体积的丙酮，再加入碳酸钙质量30％的表面活性剂，进行超声震荡30min，再加入水体积85％的液体石蜡，以700r/min搅拌2h，升温至30℃，保温15h，过滤，收集滤饼，使用石油醚进行洗涤，干燥，收集干燥物；
（5）将干燥物放入1.2mol/L盐酸溶液中浸泡1h，过滤，洗涤，干燥，得基础颗粒，将基础颗粒、辅助料、阿拉伯胶及淋洗液按质量比10:3:5: 25搅拌均匀，室温静置10h，冷冻干燥，即得猪饲料用益生菌添加剂。
实施例2
营养液为按重量份数计，取280份水、55份蛋白胨、25份酵母提取物、12份柠檬酸二铵、10份葡萄糖、8份氯化钠，搅拌均匀，杀菌消毒，即得营养液。
混合菌剂为枯草芽孢杆菌、乳酸杆菌按任意质量比混合而成。
添加剂为磷酸氢二钠、磷酸二氢钠及氯化钠按质量比6:5:2混合而成。
表面活性剂为硬质酸钠、卵磷脂按任意质量比混合而成。
辅助料为蛋白胨、葡萄糖按质量比10:1混合而成。
一种猪饲料用益生菌添加剂的制备方法，该制备方法包括如下步骤：
（1）将新鲜猪肠与营养液按质量比1:13放入粉碎机中，以800r/min进行粉碎30min，调节pH至6.5，收集粉碎物，将粉碎物置于28℃进行静置过夜，过滤，收集滤液，将滤液与混合菌剂按质量比15:2混合均匀，得基础液；
（2）按重量份数计，取85份蛋白胨、48份琼脂、20份水、8份葡萄糖、8份添加剂，搅拌均匀，杀菌消毒，得固体营养物，将固体营养物与基础液按质量比18:8，混合均匀，得培养物；
（3）将培养物置于32℃，空气湿度为63％，进行培养1.5天，随后通过蒸馏水淋洗培养物表面直至表面无菌丝，收集淋洗液；
（4）将膳食纤维、碳酸钙及水按质量比3:2:4混合均匀，再加入水等体积的丙酮，再加入碳酸钙质量25％的表面活性剂，进行超声震荡30min，再加入水体积83％的液体石蜡，以700r/min搅拌2h，升温至30℃，保温15h，过滤，收集滤饼，使用石油醚进行洗涤，干燥，收集干燥物；
（5）将干燥物放入1.2mol/L盐酸溶液中浸泡1h，过滤，洗涤，干燥，得基础颗粒，将基础颗粒、辅助料、阿拉伯胶及淋洗液按质量比10:3:5:23搅拌均匀，室温静置10h，冷冻干燥，即得猪饲料用益生菌添加剂。
实施例3
营养液为按重量份数计，取230份水、50份蛋白胨、20份酵母提取物、10份柠檬酸二铵、8份葡萄糖、6份氯化钠，搅拌均匀，杀菌消毒，即得营养液。
混合菌剂为枯草芽孢杆菌、乳酸杆菌按任意质量比混合而成。
添加剂为磷酸氢二钠、磷酸二氢钠及氯化钠按质量比6:5:1混合而成。
表面活性剂为硬质酸钠、卵磷脂按任意质量比混合而成。
辅助料为蛋白胨、葡萄糖按质量比10:1混合而成。
一种猪饲料用益生菌添加剂的制备方法，该制备方法包括如下步骤：
（1）将新鲜猪肠与营养液按质量比1:10放入粉碎机中，以800r/min进行粉碎30min，调节pH至6，收集粉碎物，将粉碎物置于25℃进行静置过夜，过滤，收集滤液，将滤液与混合菌剂按质量比15:1混合均匀，得基础液；
（2）按重量份数计，取80份蛋白胨、45份琼脂、15份水、5份葡萄糖、3份添加剂，搅拌均匀，杀菌消毒，得固体营养物，将固体营养物与基础液按质量比18:7，混合均匀，得培养物；
（3）将培养物置于28℃，空气湿度为60％，进行培养1天，随后通过蒸馏水淋洗培养物表面直至表面无菌丝，收集淋洗液；
（4）将膳食纤维、碳酸钙及水按质量比3:2:3混合均匀，再加入水等体积的丙酮，再加入碳酸钙质量20％的表面活性剂，进行超声震荡30min，再加入水体积80％的液体石蜡，以700r/min搅拌2h，升温至30℃，保温15h，过滤，收集滤饼，使用石油醚进行洗涤，干燥，收集干燥物；
（5）将干燥物放入1.2mol/L盐酸溶液中浸泡1h，过滤，洗涤，干燥，得基础颗粒，将基础颗粒、辅助料、阿拉伯胶及淋洗液按质量比10:3:5:20搅拌均匀，室温静置10h，冷冻干燥，即得猪饲料用益生菌添加剂。
对比例1
混合菌剂为枯草芽孢杆菌、乳酸杆菌按任意质量比混合而成。
添加剂为磷酸氢二钠、磷酸二氢钠及氯化钠按质量比6:5:2混合而成。
表面活性剂为硬质酸钠、卵磷脂按任意质量比混合而成。
辅助料为蛋白胨、葡萄糖按质量比10:1混合而成。
一种猪饲料用益生菌添加剂的制备方法，该制备方法包括如下步骤：
（1）将水与混合菌剂按质量比15:2混合均匀，得基础液；
（2）按重量份数计，取85份蛋白胨、48份琼脂、20份水、8份葡萄糖、8份添加剂，搅拌均匀，杀菌消毒，得固体营养物，将固体营养物与基础液按质量比18:8，混合均匀，得培养物；
（3）将培养物置于32℃，空气湿度为63％，进行培养1.5天，随后通过蒸馏水淋洗培养物表面直至表面无菌丝，收集淋洗液；
（4）将膳食纤维、碳酸钙及水按质量比3:2:4混合均匀，再加入水等体积的丙酮，再加入碳酸钙质量25％的表面活性剂，进行超声震荡30min，再加入水体积83％的液体石蜡，以700r/min搅拌2h，升温至30℃，保温15h，过滤，收集滤饼，使用石油醚进行洗涤，干燥，收集干燥物；
（5）将干燥物放入1.2mol/L盐酸溶液中浸泡1h，过滤，洗涤，干燥，得基础颗粒，将基础颗粒、辅助料、阿拉伯胶及淋洗液按质量比10:3:5:23搅拌均匀，室温静置10h，冷冻干燥，即得猪饲料用益生菌添加剂。
对比例2
营养液为按重量份数计，取280份水、55份蛋白胨、25份酵母提取物、12份柠檬酸二铵、10份葡萄糖、8份氯化钠，搅拌均匀，杀菌消毒，即得营养液。
混合菌剂为枯草芽孢杆菌、乳酸杆菌按任意质量比混合而成。
添加剂为磷酸氢二钠、磷酸二氢钠及氯化钠按质量比6:5:2混合而成。
表面活性剂为硬质酸钠、卵磷脂按任意质量比混合而成。
辅助料为蛋白胨、葡萄糖按质量比10:1混合而成。
一种猪饲料用益生菌添加剂的制备方法，该制备方法包括如下步骤：
（1）将新鲜猪肠与营养液按质量比1:13放入粉碎机中，以800r/min进行粉碎30min，调节pH至6.5，收集粉碎物，将粉碎物置于28℃进行静置过夜，过滤，收集滤液，将滤液与混合菌剂按质量比15:2混合均匀，得基础液；
（2）按重量份数计，取85份蛋白胨、48份琼脂、20份水、8份葡萄糖、8份添加剂，搅拌均匀，杀菌消毒，得固体营养物，将固体营养物与基础液按质量比18:8，混合均匀，得培养物；
（3）将培养物置于32℃，空气湿度为63％，进行培养1.5天，随后通过蒸馏水淋洗培养物表面直至表面无菌丝，收集淋洗液；
（4）将辅助料、阿拉伯胶及淋洗液按质量比3:5:23搅拌均匀，室温静置10h，冷冻干燥，即得猪饲料用益生菌添加剂。
将实施例1～3和对比例1～2制备的猪饲料用益生菌添加剂按照添加量质量2％，加入基础猪饲料中，以及空白对照未添加任何猪饲料用益生菌添加剂，对家猪进行正常饲养，平均每组30头猪，喂养30天，检测结果如下表：
实施例1
实施例2
实施例3
对比例1
对比例2
空白对照
平均日采食量/kg
1.53
1.62
1.53
0.92
1.11
0.89
平均日增重量/kg
0.61
0.72
0.65
0.50
0.55
0.49
腹泻率/％
2.6
2.1
2.3
4.6
4.3
22
总发病率/％
3.2
2.6
2.9
4.5
5.2
31.3
综上所述，本发明制备的猪饲料用益生菌添加剂均有较好的效果。