一种高效建立小鼠和大鼠非酒精性脂肪肝模型的饲料配方
阅读说明：本技术 一种高效建立小鼠和大鼠非酒精性脂肪肝模型的饲料配方 (Feed formula for efficiently establishing mouse and rat non-alcoholic fatty liver model ) 是由 吴雨龙 李盛杰 江海涛 霍光明 周峰 徐福飞 华春 于 2020-12-08 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种高效建立小鼠和大鼠非酒精性脂肪肝模型的饲料配方。该配方包括猪油1～15份,蛋黄粉1～15份,胆固醇0.1～3份,胆盐0.1～1份和基础饲料60～90份。动物实验结果表明：该饲料能使ICR小鼠和SD大鼠体重快速增长,在第三周,饲喂配方饲料的小鼠和大鼠体重明显超过饲喂普通饲料的小鼠和大鼠。在第四周,饲喂配方饲料的小鼠和大鼠肝脏出现大量脂滴,基本就能建立小鼠和大鼠非酒精性脂肪肝模型。(The invention discloses a feed formula for efficiently establishing a mouse and rat non-alcoholic fatty liver model. The formula comprises 1-15 parts of lard, 1-15 parts of yolk powder, 0.1-3 parts of cholesterol, 0.1-1 part of bile salt and 60-90 parts of basal feed. The animal experiment results show that: the feed can rapidly increase the body weight of ICR mice and SD rats, and in the third week, the body weight of the mice and rats fed with the formula feed is obviously higher than that of the mice and rats fed with the common feed. In the fourth week, the liver of mice and rats fed with the formula feed shows a large amount of lipid droplets, and then the non-alcoholic fatty liver models of the mice and rats can be basically established.)
技术领域
本发明涉及饲料配方领域，具体涉及一种高效建立小鼠和大鼠非酒精性脂肪肝模型的饲料配方。
背景技术
非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是指除酒精和其他明确的肝损伤因素外所致的肝细胞内脂肪过度沉积(占肝重量的5％以上)为主要特征的临床病理综合征，与胰岛素抵抗和遗传易感性密切相关的获得性代谢应激性肝损伤。NAFLD 在世界上很多国家都有着较高的发病率。NAFLD的发病机制尚未完全阐明。因此，越来越多科研人员开始研发防治NAFLD的药物，在这个过程中常常需要NAFLD动物模型，常用的动物为小鼠和大鼠，建模的手段基本是给小鼠或大鼠饲喂配方饲料造成NAFLD模型。目前，市面上的造模配方饲料价格昂贵，约500元/公斤，给众多科研工作人员造成一定的经济压力。
发明内容
本发明是针对上述存在的技术问题提供一种快速建立小鼠和大鼠非酒精性脂肪肝模型的饲料配方。
本发明的目的可以通过以下技术方案实现：
一种快速建立小鼠和大鼠非酒精性脂肪肝模型的饲料配方，该配方包括猪油1～15份，蛋黄粉1～15份，胆固醇0.1～3份，胆盐0.1～1份和基础饲料60～90份。
本发明技术方案中：猪油、蛋黄粉、胆固醇、胆盐和基础饲料的重量份数依次为8～12 份、8～12份、0.5～1.5份、0.1～1份和70～80份。
本发明技术方案中：所述的基础饲料包括玉米粉、豆粕、麸皮、面粉、酵母、奶粉、骨粉、大米、鱼粉、盐和复合添加剂。
本发明技术方案中：所述的复合添加剂为质量依次比为10～30：1～10：0.1～3：0.01～1：0.5～5的FeSO4(7H2O)、MnSO4(H2O)、Cu SO4(5H2O)、AlCl3(6H2O)和Zn SO4(7H2O)。
本发明技术方案中：玉米粉20～30份，豆粕20～30份，麸皮15～20份，面粉15～25份，酵母0.5～1.5份，奶粉0.5～1.5份，骨粉0.5～1.5份，大米3～8份，鱼粉3～8份，盐3～8份，复合添加剂0.5～1.5份。
一种上述的饲料配方的制备方法，该方法是将上述材料按比例配好，加水混合后放入颗粒饲料机，制得等粒径颗粒饲料，经晒干或烘干后用包装袋装好即可，待用。
本发明的有益效果：
本发明所制配方饲料，组成合理，能够高效造成小鼠或大鼠NAFLD，且价格低廉，成本价约50元/公斤。
附图说明
图1为普通饲料和配方饲料对雌雄小鼠体重的影响。
图2为普通饲料和配方饲料对雌雄小鼠肝脏组织病理变化的影响，其中：A：普通饲料组；B：实施例1组；C：实施例2组；D：实施例3组。。
图3为普通饲料和配方饲料对雄性大鼠体重的影响。
图4为普通饲料和配方饲料对雄性大鼠肝脏组织病理变化的影响，其中：A：普通饲料组；B：实施例1组；C：实施例2组；D：实施例3组。。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明，但本发明的保护范围不限于此：
实施例1
饲料配方：蛋黄粉、胆固醇、胆盐和基础饲料的重量份数依次为10kg、1kg、0.2kg和88.8kg。
基础饲料：玉米粉20kg，豆粕20kg，麸皮15kg，面粉15kg，酵母0.5kg，奶粉0.5kg，骨粉0.5kg，大米3kg，鱼粉3kg，盐3kg，复合添加剂(FeSO4(7H2O)：200g，MnSO4(H2O)： 70g，CuSO4(5H2O)：15.6g，AlCl3(6H2O)：2.4g，Zn SO4(7H2O)：36g)。
实施例2
饲料配方：猪油、胆固醇、胆盐和基础饲料的重量份数依次为10kg、1kg、0.2kg和88.8kg。
基础饲料：玉米粉30kg，豆粕30kg，麸皮20kg，面粉25kg，酵母1.5kg，奶粉1.5kg，骨粉1.5kg，大米8kg，鱼粉8kg，盐8kg，复合添加剂(FeSO4(7H2O)：180g，MnSO4(H2O)： 35g，CuSO4(5H2O)：6.8g，AlCl3(6H2O)：1.2g，Zn SO4(7H2O)：24g)。
实施例3
饲料配方：猪油、蛋黄粉、胆固醇、胆盐和基础饲料的重量份数依次为10kg、10kg、1kg、0.2kg和78.8kg。
基础饲料：玉米粉25kg，豆粕22kg，麸皮18kg，面粉20kg，酵母1kg，奶粉1kg，骨粉1kg，大米5kg，鱼粉5kg，盐1.816kg，复合添加剂(FeSO4(7H2O)：156.4g， MnSO4(H2O)：16.2g，Cu SO4(5H2O)：2g，AlCl3(6H2O)：0.4g，Zn SO4(7H2O)：9g)。
性能检测1：
1.实验动物：ICR小鼠，体重24±2g，80只，雌雄各半。
分为8组，每组10只，雄(普通饲料组)、雄(实施例1组)、雄(实施例2组)、雄(实施例3组)、雌(普通饲料组)、雌(实施例1组)、雌(配方饲料组实施例2组)、雌(实施例3组)，饮用纯净水。
2.每周对所有小鼠进行称重，饲喂4周后，所有小鼠称重后眼眶采集血液，3000r/min 离心10min收集血清，用全自动生化分析仪测定血清甘油三酯和胆固醇含量；随后颈椎脱臼法处死小鼠，剖解取每只小鼠肝脏组织中相同位置的一小块肝脏，立即固定在 10％中性福尔马林溶液中，常规法制作组织切片。具体经不同浓度乙醇与二甲苯脱水与透明，再经石蜡包埋，修片后放在切片机上切4～5μm厚的切片，切片经脱蜡后，用HE染色，显微镜下观察肝脏组织的病理变化。
3.实验结果：
(1)普通饲料和配方饲料对雌雄小鼠体重的影响，结果见图1。
*P＜0.05与普通饲料组比较。
(2)普通饲料和配方饲料对雌雄小鼠血清甘油三酯和胆固醇的影响，结果见表1。
*P＜0.05与普通饲料组比较。
表1
(3)普通饲料和配方饲料对雌雄小鼠肝脏组织病理变化的影响，结果见图2。
结果小结：饲喂雌雄小鼠配方饲料4周后，雌雄小鼠体重均高于普通饲料组，血清中甘油三酯和胆固醇的水平也均有提高，其中实施例3组与普通饲料组相比存在显著差异。实施例3组肝组织可以明显看出体积增大、呈黄色、油腻感、边缘变钝，肝脏指数明显升高，而肝组织HE染色切片可以看出肝细胞明显肿胀，细胞质内明显可见脂肪空泡，脂滴融合导致细胞核偏位，甚至细胞核消失，肝组织内可见弥漫分布的大油滴和微小脂滴，并散布全肝，表明实施例3配方饲料可以造成雌雄小鼠非酒精性脂肪肝。
性能检测2：
1.实验动物：SD雄性大鼠，体重100±2g，40只。
2.分为4组(普通饲料组和配方饲料组实施例1组、实施例2组、实施例3组)，每组10只，饮用纯净水。
3.每周对所有大鼠进行称重，饲喂4周后，所有大鼠称重后麻醉，从腹主动脉采集血液， 3000r/min离心10min收集血清，用全自动生化分析仪测定血清甘油三酯和胆固醇含量；随后处死大鼠，剖解取每只大鼠肝脏组织中相同位置的一小块肝脏，立即固定在 10％中性福尔马林溶液中，常规法制作组织切片。具体经不同浓度乙醇与二甲苯脱水与透明，再经石蜡包埋，修片后放在切片机上切4～5μm厚的切片，切片经脱蜡后，用HE染色，显微镜下观察肝脏组织的病理变化。
4.实验结果：
(1)普通饲料和配方饲料对雄性大鼠体重的影响，结果见图3。
*P＜0.05与普通饲料组比较。
(2)普通饲料和配方饲料对雄性大鼠血清甘油三酯和胆固醇的影响，结果见表2。
表2
*P＜0.05与普通饲料组比较。
(3)普通饲料和配方饲料对雄性大鼠肝脏组织病理变化的影响，结果见图4。
结果小结：饲喂雄性大鼠配方饲料4周后，雄性大鼠体重与普通饲料组相比均有所提高，血清中甘油三酯和胆固醇的水平也均有提高，其中实施例3组与普通饲料组相比存在显著差异。实施例3组肝组织可以明显看出体积增大、呈黄色、油腻感强烈，肝脏指数明显升高，而肝组织HE染色切片可以看出肝细胞胞浆中出现大量大小不一的空泡(脂滴)，边界清晰，将细胞核挤向一侧，胞质疏松，细胞核皱缩，细胞与细胞间界限不清，存在轻度炎症，表明实施例3配方饲料可以造成雄性大鼠非酒精性脂肪肝。
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