阅读说明：本技术 一种检测发酵酱油制品中毛发水的方法 (Method for detecting hair water in fermented soy product ) 是由 李丰 毓志超 文永贤 于 2020-09-28 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种检测发酵酱油制品中毛发水的方法,包括以下：步骤a,前处理；步骤b,第一样液测定；步骤c,第二样液测定；步骤d,第三样液测定；步骤e,定性判定。本发明的检测方法以氯丙醇作为毛发水的指示物,将氯丙醇通过反应转化为乙酰丙酮作为检测目标物,来判定酱油样品是否含有毛发水。检测方法操作简便,现象稳定、快速、明显,专属性强,灵敏度高,不需要大型的分析仪器,对实验环境要求低,极大的降低了假阳性的情况产生,适用于对发酵酱油制品中是否含有毛发水进行大批量快速检测。(The invention discloses a method for detecting hair water in a fermented soy product, which comprises the following steps: step a, pretreatment; step b, measuring the first sample solution; step c, measuring the second sample liquid; d, measuring the third sample liquid; and e, qualitatively judging. The detection method provided by the invention uses chloropropanol as an indicator of hair water, and converts chloropropanol into acetylacetone through reaction as a detection target object to judge whether a soy sauce sample contains hair water. The detection method is simple and convenient to operate, stable, rapid and obvious in phenomenon, strong in specificity, high in sensitivity, free of large-scale analytical instruments, low in requirement on experimental environment, capable of greatly reducing the generation of false positive conditions, and suitable for rapidly detecting whether the fermented soy sauce product contains the hair water in a large scale.)

一种检测发酵酱油制品中毛发水的方法

技术领域

本发明涉及酱油检测领域，特别是涉及一种检测发酵酱油制品中毛发水的方法。

背景技术

近年来部分不法分子将毛发水解液添加到酱油等产品中，取代黄豆等粮食发酵，提高产品中虚假氨基酸类物质含量，人工合成假酱油。这些用头发加工成的酱油等产品生产成本低廉，在市场上具有价格竞争力，欺骗消费者。毛发水，就是利用人类或动物的毛发，由于其含有丰富的蛋白质，经过酸水解生产氨基酸液，违法添加在食品中充当营养成分。2009年，***发布的《食品中可能违法添加的非食用物质名单（第三批）》中明确将毛发水列入非食用物质，重点产品是酱油调味料。

毛发等属于非食品原料，而且毛发本身就含有铅、砷等较多的有害物质，根本就不能被用来加工食品、调味品用的原料。毛发在水解等反应中所用的工业盐酸，及其他试剂中也含过量砷、铅、汞等有毒物质。此外，在盐酸水解植物蛋白的过程中，还会形成致癌物质三氯丙醇等有毒有害物质，因此这种提取了胱氨酸后的“毛发水”中，含有大量的有毒有害物质。如果消费者食用了用这种“毛发水酱油”，可能会导致砷中毒及其他急、慢性毒害，对身体造成伤害。

目前检测毛发水以氯丙醇为主要指标，《GB 5009.191-2016 食品安全国家标准食品中氯丙醇及其脂肪酸酯含量的测定》,其中第一法操作原理为:采用同位素稀释技术,以D5-3-氯-1,2-丙二醇(D5-3-MCPD)为内标。试样中加入内标,以硅藻土为吸附剂,进行固相支持液-液萃取,用正己烷-无水***溶液(9+1)淋洗去除非极性脂质成分,用无水***洗脱3-氯-1,2-丙二醇(3-MCPD)。以七氟丁酰基咪唑衍生,采用气相色谱-质谱仪测定,内标法定量。但是该方法的前处理复杂，需要使用气相色谱-质谱仪这种大型昂贵仪器，操作难度高，成本高，对实验员水平要求较高，仅限于实验室常规检测，不利于快速检测得到结果的目标和要求。

因此，需要开发一种操作简便、快速，不需要大型的分析仪器，耗时较少，专属性强，灵敏度高，检验结果正确率高，分析成本低，对实验环境要求低，适用于检测发酵酱油制品中是否含有毛发水的快速检测方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测发酵酱油制品中毛发水的方法。根据本发明的一个方面，提供了一种检测发酵酱油制品中毛发水的方法，包括以下：

步骤a，前处理：量取一定量的酱油样品于容器中，加入氯化钠、活性炭、铁屑和水，混匀后加入无水***，混合后进行离心，取上层溶液分为三等份，分别为第一样液、第二样液和第三样液；

步骤b，第一样液测定：向所述第一样液中加入甲基氯化镁的四氢呋喃溶液，振荡混匀，加入第一催化剂和无水***，进行磁力搅拌，过滤，得到第一待测液，向所述第一待测液中逐滴加入硝酸银溶液，每加入一滴所述硝酸银溶液，观察所述第一待测液中是否生成沉淀，所述第一催化剂为卤化亚铜化合物；

步骤c，第二样液测定：向所述第二样液中加入甲基氯化镁的四氢呋喃溶液和无水***，振荡混匀，静置，得到第二待测液，向所述第二待测液中加入硝酸银溶液，每加入一滴所述硝酸银溶液，观察所述第二待测液中是否生成沉淀；

步骤d，第三样液测定：

d1，将所述第三样液氮气吹干，加入氢氧化钠溶液，振荡混匀，静置，得到第三待测液；

d2，向所述第三待测液中加入乙酸溶液，调节所述第三待测液的pH值为7.0±0.1；

d3，加入第二催化剂，在不间断通入氧气的条件下，一定温度条件下加热反应后，过滤，除去不溶物，得到第三滤液，所述第二催化剂为金属单质；

d4，将所述第三滤液蒸干后，加入甲基氯化镁的四氢呋喃溶液和无水***，进行第一次复溶，得到第一复溶液；

d5，取所述第一复溶液进行吹干，吹干后加入乙酸-乙酸钠缓冲溶液进行第二次复溶，加入氢氧化钠溶液调节pH值为7.0±0.1，得到第二复溶液；

d6，向所述第二复溶液中加入所述第二催化剂，在不间断通入氧气的条件下，一定温度条件下加热反应后，过滤，除去不溶物，得到第四滤液；

d7，向所述第四滤液中加入甲醛溶液、乙酸-乙酸钠缓冲溶液，观察所述第四滤液是否变色；

步骤e，定性判定：

若同时满足以下三个条件：所述第一待测液中有白色沉淀生成，所述第二待测液中没有沉淀生成，所述第四滤液由无色变为黄色，则判定酱油样品中含有毛发水。

本发明的有益效果：本发明的检测方法以氯丙醇作为毛发水的指示物，将氯丙醇通过反应转化为乙酰丙酮作为检测目标物，来判定样品中是否含有毛发水。利用铁屑和活性炭对酱油样品进行除色，利用氯化钠提高氯丙醇的析出度，无水***将样品中的氯丙醇萃取到上层溶液中进行测定。第一样液测定时，以卤化亚铜作为第一催化剂，对氯丙醇与甲基氯化镁的反应进行催化，反应后氯丙醇中的氯离子释放出，与硝酸银溶液反应，生成沉淀，说明第一样液中含有氯元素。第二样液测定时，没有加入第一催化剂，氯丙醇与甲基氯化镁不发生反应，氯丙醇和甲基氯化镁均不会与硝酸银发生沉淀反应，从而证明第一样液中生成沉淀是由氯丙醇反应后释放出的氯离子与硝酸银发生沉淀反应生成的。第三样液测定时，将氯丙醇通过反应转化为乙酰丙酮，通过甲醛-乙酰丙酮显色反应，来判断第四滤液中含有乙酰丙酮，说明第三样液中含有丙醇基团，由此，判定样品中含有氯丙醇，进而判定样品中含有毛发水。

本发明的检测方法操作简便，现象稳定、快速、明显，专属性强，灵敏度高，不需要大型的分析仪器，对实验环境要求低，极大的降低了假阳性的情况产生，适用于对发酵酱油制品是否含有添加毛发水进行大批量快速检测。

在一些实施方式中，本发明的一种检测发酵酱油制品中毛发水的方法，包括以下：

步骤a，前处理：量取1.0-3.0ml的酱油样品于离心管中，加入2-4g氯化钠、2.0-2.5g活性炭、0.2-0.5g铁屑和5-10ml水，混合后加入5ml无水***，混合后在3500-4000转/分钟的转速下离心5-6分钟，取4.5ml上层溶液分为三等份，分别为第一样液、第二样液和第三样液；

步骤b，第一样液测定：向所述第一样液中加入0.05-0.10ml甲基氯化镁的四氢呋喃溶液，振荡混匀，加入0.2-0.4g第一催化剂，补充加入无水***使溶液体积为20ml，在室温条件下500转/分钟搅拌15-20分钟后过滤，得到第一待测液，向所述第一待测液中逐滴加入硝酸银溶液，每加入一滴所述硝酸银溶液，观察所述第一待测液中是否生成沉淀，所述第一催化剂为卤化亚铜化合物；

步骤c，第二样液测定：向所述第二样液中加入0.05-0.10ml甲基氯化镁的四氢呋喃溶液和无水***，使溶液体积为20ml，振荡混匀，静置10-15分钟，得到第二待测液，向所述第二待测液中加入硝酸银溶液，每加入一滴所述硝酸银溶液，观察所述第二待测液中是否生成沉淀；

步骤d，第三样液测定：

d1，将所述第三样液氮气吹干，加入2-4ml氢氧化钠溶液，振荡混匀，静置，得到第三待测液；

d2，向所述第三待测液中加入1mol/L乙酸溶液，调节所述第三待测液的pH值为7.0±0.1；

d3，加入第二催化剂，在不间断通入氧气的条件下，45-65℃加热反应25-35分钟后，过滤，除去不溶物，得到第三滤液，所述第二催化剂为金属单质；

d4，将所述第三滤液蒸干后，加入0.05-0.10ml甲基氯化镁的四氢呋喃溶液和无水***，进行第一次复溶，得到第一复溶液；

d5，取所述第一复溶液进行氮气吹干，吹干后加入4-6ml乙酸-乙酸钠缓冲溶液进行第二次复溶，加入氢氧化钠溶液调节pH值为7.0±0.1，得到第二复溶液；

d6、向所述第二复溶液中加入所述第二催化剂，在不间断通入氧气的条件下，45-65℃加热反应25-35分钟后，过滤，除去不溶物，得到第四滤液；

d7，向所述第四滤液中加入0.1-0.3ml甲醛溶液、4-6ml乙酸-乙酸钠缓冲溶液，观察所述第四滤液是否变色；

步骤e，定性判定：

若同时满足以下三个条件：所述第一待测液中有白色沉淀生成，所述第二待测液中没有沉淀生成，所述第四滤液由无色变为黄色，则判定酱油样品中含有毛发水。

在一些实施方式中，第一催化剂为氯化亚铜、溴化亚铜或碘化亚铜中的任一种。使用卤化亚铜作为第一催化剂，甲基氯化镁可以与卤化亚铜形成有机铜配合物，有利于促进以下反应向正反应方向进行，促进氯化镁生产，有利于氯丙醇中的氯转变为氯离子释放到第一待测液中，便于后续氯离子与硝酸银溶液发生沉淀反应，进行判定。

在一些实施方式中，第二催化剂为铜、锌或铁中的任一种。以铜、锌或铁中的任一种金属单质作为第二催化剂，对丙二醇进行催化氧化，将羟基基团转化为醛基基团，生成丙二醛，便于后续反应进行。

在一些实施方式中，甲醛溶液中甲醛的质量分数为37%-40%。此质量分数的甲醛溶液，在进行甲醛-乙酰丙酮显色反应时，显色效果明显，且容易获得。

在一些实施方式中，氢氧化钠溶液的浓度为1.0mol/L。1.0mol/L的氢氧化钠溶液与氯丙醇反应生成丙二醇，便于进行后续反应生成乙酰丙酮。1.0mol/L的氢氧化钠溶液还可以用于调节第二复溶液的pH值，使其处于中性pH环境。

在一些实施方式中，步骤d中氧气的流速为7-8m/s。通入氧气，便于醇催化氧化为醛的反应的进行。

在一些实施方式中，乙酸-乙酸钠缓冲溶液的pH值为6.0。乙酸-乙酸钠缓冲溶液为甲醛-乙酰丙酮显色反应提供酸性环境。

在一些实施方式中，甲基氯化镁的四氢呋喃溶液中甲基氯化镁的浓度为3mol/L。提供充足的甲基氯化镁与氯丙醇反应。

在一些实施方式中，硝酸银溶液的浓度为0.05mol/L。硝酸银溶液与第一待测液中的氯离子发生沉淀反应，证明第一样液中含有氯元素。

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明作进一步详细的说明。

实施例1

本实施例中的氢氧化钠选择国药集团化学试剂有限公司供应的分析纯氢氧化钠，乙酸钠选择国药集团化学试剂有限公司供应的分析纯无水乙酸钠，冰乙酸选择国药集团化学试剂有限公司供应的分析纯冰乙酸，氯化钠选择国药集团化学试剂有限公司供应的分析纯氯化钠，活性炭选择国药集团化学试剂有限公司供应的分析纯活性炭粉，无水***选择国药集团化学试剂有限公司供应的分析纯无水***，甲基氯化镁的四氢呋喃溶液选择国药集团化学试剂有限公司供应的3.0mol/L 甲基氯化镁的四氢呋喃溶液，氯化亚铜选择国药集团化学试剂有限公司供应的分析纯氯化亚铜，硝酸银溶液选择国药集团化学试剂有限公司供应的0.05mol/L硝酸银水溶液，单质铜选择国药集团化学试剂有限公司供应的99.5%铜片，甲醛水溶液选择国药集团化学试剂有限公司供应的分析纯37%-40%甲醛水溶液，溴化亚铜选择国药集团化学试剂有限公司供应的化学纯溴化亚铜，碘化亚铜选择国药集团化学试剂有限公司供应的分析纯碘化亚铜。

本实施例中的振荡器选择上海达姆实业有限公司供应的MIT135C多管涡旋振荡器，磁力搅拌器选择艾卡（广州）仪器设备有限公司供应的RH basic磁力搅拌器，氮吹仪选择上海沪析实业有限公司供应的MD200-2干式氮吹仪，离心机选择湘仪离心机仪器有限公司供应的HT175R台式高速冷冻离心机。

本实施例中需要配制的试剂：

1mol/L乙酸溶液：准确量取58.8ml冰乙酸于1000mL烧杯中，加水转移至1000mL容量瓶中定容，摇匀备用。

乙酸-乙酸钠缓冲溶液：取100g乙酸钠，加入300ml蒸馏水混匀后加入7ml冰乙酸，充分混匀后，调pH值至6.0即可。

1.0mol/L氢氧化钠溶液：称取8g氢氧化钠，溶解于100ml水中。

以下实施例2-4均采用本实施例1中的试剂、仪器、配制的溶液。

实施例2

本发明的一种检测发酵酱油制品中毛发水的方法，包括以下：

步骤a，前处理：量取1.0ml的酱油样品于离心管中，加入2g氯化钠、2.0g活性炭、0.2g铁屑和5ml水，混匀后加入5ml无水***，混合后在3500转/分钟的转速下离心5分钟，取4.5ml上层溶液分为三等份，分别为第一样液、第二样液和第三样液；

本步骤中加入氯化钠可以提高指示物氯丙醇的析出度，便于后续萃取氯丙醇。加入铁屑和活性炭为除去酱油样品的颜色干扰。加入无水***为萃取氯丙醇，并且为后续反应提供无水环境。

步骤b，第一样液测定：向第一样液中加入0.05ml 3mol/L甲基氯化镁的四氢呋喃溶液，振荡混合，加入0.2g第一催化剂，第一催化剂为氯化亚铜，加入无水***将溶液体积补充至20ml，在室温条件下500转/分钟搅拌15分钟后过滤，得到第一待测液，向第一待测液中逐滴加入5滴0.05mol/L硝酸银溶液，每加入一滴0.05mol/L硝酸银溶液，观察第一待测液，观察到第一待测液中生成沉淀；

本步骤中在氯化亚铜的催化下，氯丙醇与甲基氯化镁反应，反应生成了氯化镁，将氯丙醇中的氯元素转化为游离的氯离子释放带第一样液中，滴加硝酸银溶液，硝酸银与游离的氯离子发生沉淀反应，生成白色沉淀，证明第一样液中含有氯。反应方程式如下：

步骤c，第二样液测定：向第二样液中加入0.05ml甲基氯化镁的四氢呋喃溶液，加入无水***将溶液体积补充至20ml，振荡混合，静置10分钟，得到第二待测液，向第二待测液中加入5滴0.05mol/L硝酸银溶液，每加入一滴0.05mol/L硝酸银溶液，观察第二待测液，观察到第二待测液中没有生成沉淀；

本步骤中没有加入氯化亚铜，氯丙醇与甲基氯化镁不会发生反应，加入硝酸银溶液后没有白色氯化银沉淀生成，说明第二样液和第二待测液中均没有游离的氯离子，从而证明，第一待测液中的氯离子来源于氯丙醇。

步骤d，第三样液测定：

d1，将第三样液氮气吹干，加入2ml 1.0mol/L氢氧化钠溶液，振荡混匀，静置，得到第三待测液；本步骤中加入氢氧化钠，氯丙醇与氢氧化钠反应，生成丙二醇，反应式如下：

d2，向第三待测液中加入1mol/L乙酸溶液，调节所述第三待测液的pH值为6.9；加入乙酸溶液，将第三待测液的pH值调节至中性，为后续反应提供中性反应环境。

d3，加入2g第二催化剂，第二催化剂为单质铜，在以7m/s的流速不间断通入氧气的条件下，45-65℃加热反应25分钟后，过滤，除去不溶物，得到第三滤液；以单质铜为催化剂，在通氧的条件下，进行丙二醇催化氧化生成丙二醛的反应，第三滤液中含有丙二醛，反应式如下：

d4，将第三滤液蒸干后，加入0.05ml 3mol/L甲基氯化镁的四氢呋喃溶液，加入无水***将溶液体积补充至5ml，进行第一次复溶，得到第一复溶液；本步骤中对第三滤液蒸干，对丙二醛进行浓缩，加入甲基氯化镁，丙二醛与甲基氯化镁反应，生成2，4-戊二醇，第一复溶液中含有2，4-戊二醇。反应式如下：

d5，取所述第一复溶液进行氮气吹干，吹干后加入4ml pH值为6.0的乙酸-乙酸钠缓冲溶液进行第二次复溶，加入1.0mol/L氢氧化钠溶液调节pH值为6.9，得到第二复溶液；对第一复溶液进行氮气吹干，浓缩第一复溶液中的2，4-戊二醇，加入乙酸-乙酸钠缓冲溶液保护2，4-戊二醇，加入氢氧化钠溶液调节pH至中性，为后续反应提供中性环境。

d6，向第二复溶液中加入2g单质铜，在以7m/s的流速不间断通入氧气的条件下，45℃加热反应25分钟后，过滤，除去不溶物，得到第四滤液；以单质铜为催化剂，在通氧的条件下，进行2，4-戊二醇催化氧化生成乙酰丙酮的反应，第四滤液中含有乙酰丙酮，反应式如下：

d7，向第四滤液中加入0.1ml 37%甲醛溶液、4ml乙酸-乙酸钠缓冲溶液，观察到第四滤液由无色变为黄色；第四滤液中的乙酰丙酮与37%的甲醛溶液在酸性条件下，发生甲醛-乙酰丙酮显色反应，使第四滤液由无色变为黄色。反应如下：

步骤e，定性判定：

被检测的酱油样品，同时满足以下三个条件：第一待测液中有白色沉淀生成，第二待测液中没有沉淀生成，第四滤液由无色变为黄色，则判定酱油样品中含有毛发水。第一待测液中有白色沉淀，证明样品中含有氯，第二待测液中没有沉淀生成，证明样品中不含有游离的氯离子，综合以上二者，证明样品中的氯是以共价键形式结合在有机物上。第四滤液由无色变为黄色，证明第四滤液中含有乙酰丙酮，进而证明样品中含有丙醇基团。综合以上，同时满足以上三个条件，即可判定酱油样品中含有氯丙醇，而氯丙醇是毛发水的指示物，进而可判定，酱油样品中含有毛发水。

实施例3

本发明的一种检测发酵酱油制品中毛发水的方法，包括以下：

步骤a，前处理：量取3.0ml的酱油样品于离心管中，加入3.0g氯化钠、2.5g活性炭、0.5g铁屑和10ml水，混匀后加入5ml无水***，混合后在4000转/分钟的转速下离心6分钟，取4.5ml上层溶液分为三等份，分别为第一样液、第二样液和第三样液；

步骤b，第一样液测定：向所述第一样液中加入0.10ml 3mol/L甲基氯化镁的四氢呋喃溶液，振荡混匀，加入0.4g第一催化剂，第一催化剂为溴化亚铜，补充加入无水***使溶液体积为20ml，在室温条件下500转/分钟搅拌20分钟后过滤，得到第一待测液，向第一待测液中逐滴加入5滴 0.05mol/L硝酸银溶液，每加入一滴0.05mol/L硝酸银溶液，对第一待测液进行观察，观察到第一待测液中没有生成沉淀；

步骤c，第二样液测定：第二样液中加入0.10ml 3mol/L甲基氯化镁的四氢呋喃溶液，加入无水***将溶液体积补充至20ml，振荡混匀，静置15分钟，得到第二待测液，向第二待测液中加入5滴0.05mol/L硝酸银溶液，每加入一滴0.05mol/L硝酸银溶液，观察第二待测液，观察到第二待测液中没有生成沉淀；

步骤d，第三样液测定：

d1，将第三样液氮气吹干，加入4ml 1.0mol/L氢氧化钠溶液，振荡混匀，静置，得到第三待测液；

d2，向第三待测液中加入1mol/L乙酸溶液，调节第三待测液的pH值为7.1；

d3，加入2g第二催化剂，第二催化剂为单质铁，在以8m/s的流速不间断通入氧气的条件下，65℃加热反应35分钟后，过滤，除去不溶物，得到第三滤液；

d4，将第三滤液蒸干后，加入0.10 ml 3mol/L甲基氯化镁的四氢呋喃溶液，加入无水***将溶液体积补充到5ml，进行第一次复溶，得到第一复溶液；

d5，取所述第一复溶液进行氮气吹干，吹干后加入6ml pH值为6.0的乙酸-乙酸钠缓冲溶液进行第二次复溶，加入1.0mol/L氢氧化钠溶液调节pH值7.1，得到第二复溶液；

d6，向第二复溶液中加入2g单质铁，在以8m/s的流速不间断通入氧气的条件下，65℃加热反应35分钟后，过滤，除去不溶物，得到第四滤液；

d7，向第四滤液中加入0.3ml 40%甲醛溶液、6ml乙酸-乙酸钠缓冲溶液，观察到第四滤液为无色，没有变色；

步骤e，定性判定：

该酱油样品没有同时满足以下三个条件：第一待测液中有白色沉淀生成，第二待测液中没有沉淀生成，第四滤液由无色变为黄色，则判定该酱油样品中不含毛发水。

实施例4

本发明的一种检测发酵酱油制品中毛发水的方法，包括以下：

步骤a，前处理：量取2.0ml的酱油样品于离心管中，加入4g氯化钠、2.25g活性炭、0.35g铁屑和7.5ml水，混匀后加入5ml无水***，混合后在3750转/分钟的转速下离心5.5分钟，取4.5ml上层溶液分为三等份，分别为第一样液、第二样液和第三样液；

步骤b，第一样液测定：向所述第一样液中加入0.075 ml 3mol/L甲基氯化镁的四氢呋喃溶液，振荡混匀，加入0.3g第一催化剂，第一催化剂为碘化亚铜，补充加入无水***使溶液体积为20ml，在室温条件下500转/分钟搅拌17.5分钟后过滤，得到第一待测液，向第一待测液中逐滴加入5滴 0.05mol/L硝酸银溶液，每加入一滴0.05mol/L硝酸银溶液，对第一待测液进行观察，观察到第一待测液中生成沉淀；

步骤c，第二样液测定：第二样液中加入0.075 ml 3mol/L甲基氯化镁的四氢呋喃溶液，加入无水***将溶液体积补充至20ml，振荡混匀，静置12.5分钟，得到第二待测液，向第二待测液中加入5滴0.05mol/L硝酸银溶液，每加入一滴0.05mol/L硝酸银溶液，观察第二待测液，观察到第二待测液中没有生成沉淀；

步骤d，第三样液测定：

d1，将第三样液氮气吹干，加入3ml 1.0mol/L氢氧化钠溶液，振荡混匀，静置，得到第三待测液；

d2，向第三待测液中加入1mol/L乙酸溶液，调节第三待测液的pH值为7.0；

d3，加入2g第二催化剂，第二催化剂为单质锌，在以7.5m/s的流速不间断通入氧气的条件下，55℃加热反应30分钟后，过滤，除去不溶物，得到第三滤液；

d4，将第三滤液蒸干后，加入0.075 ml 3mol/L甲基氯化镁的四氢呋喃溶液，加入无水***将溶液体积补充到5ml，进行第一次复溶，得到第一复溶液；

d5，取所述第一复溶液进行氮气吹干，吹干后加入5ml pH值为6.0的乙酸-乙酸钠缓冲溶液进行第二次复溶，加入1.0mol/L氢氧化钠溶液调节pH值为7.0，得到第二复溶液；

d6，向第二复溶液中加入2g单质锌，在以7.5m/s的流速不间断通入氧气的条件下，55℃加热反应30分钟后，过滤，除去不溶物，得到第四滤液；

d7，向第四滤液中加入0.2ml 38%甲醛溶液、5ml乙酸-乙酸钠缓冲溶液，观察到第四滤液由无色变为黄色；

步骤e，定性判定：

该酱油样品同时满足以下三个条件：第一待测液中有白色沉淀生成，第二待测液中没有沉淀生成，第四滤液由无色变为黄色，则判定该酱油样品中含有毛发水。

本发明的检测方法操作简便，现象稳定、快速、明显，专属性强，灵敏度高，正确率高，试剂需求量少，不需要大型的分析仪器，利于无经验人员操作使用，具有较高的社会意义。同时耗时相对较少，分析成本低，对实验环境要求低，针对性强，抗干扰能力强，极大的降低了假阳性的情况产生，适用于对发酵酱油制品中是否含有毛发水进行大批量快速检测。

以上所述的仅是本发明的一些实施方式，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明创造构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。