阅读说明：本技术 用于制备曲前列环素二乙醇胺盐的多晶型b的方法 (Process for preparing polymorph B of treprostinil diethanolamine salt ) 是由 I·霍托巴吉 I·拉斯洛 Z·瓦尔加 I·尤哈斯 I·里茨 Z·卡多斯 于 2019-03-07 设计创作，主要内容包括：本发明涉及用于制备曲前列环素二乙醇胺盐的多晶型B的稳健且可重现的方法,其包括以下步骤：a.将曲前列环素溶于甲醇中,b.向步骤a)的溶液中添加二乙醇胺或其甲醇溶液,c.将步骤b)的反应混合物搅拌直至溶解,d.当在步骤c)中完成了盐的形成时,将第一部分的非质子溶剂添加至所述溶液中,e.过滤步骤d)的溶液以除去不溶性杂质,f.将步骤e)的滤液用曲前列环素二乙醇胺盐的多晶型B进行种晶,g.向步骤f)中所获得的晶体悬浮液中添加第二部分的所述非质子溶剂,h.搅拌步骤g)的悬浮液直到结晶完成,i.将所述晶体分离、洗涤并干燥。(The present invention relates to a robust and reproducible process for the preparation of polymorph B of treprostinil diethanolamine salt, comprising the steps of: a. dissolving treprostinil in methanol, B. adding diethanolamine or its methanol solution to the solution of step a), c. stirring the reaction mixture of step B) until dissolution, d. when the salt formation is completed in step c), adding a first portion of aprotic solvent to the solution, e. filtering the solution of step d) to remove insoluble impurities, f. seeding the filtrate of step e) with polymorph B of treprostinil diethanolamine salt, g. adding a second portion of the aprotic solvent to the crystal suspension obtained in step f), h. stirring the suspension of step g) until crystallization is completed, i. isolating, washing and drying the crystals.)

用于制备曲前列环素二乙醇胺盐的多晶型B的方法

技术领域

式(II)的曲前列环素

是一种具有抑制血小板聚集和血管舒张作用的合成前列环素衍生物。它是唯一的可以经皮下、静脉内或吸入和口服形式使用的前列环素衍生物。

它的治疗领域涉及肺动脉高压(Pulmonary Arterial Hypertension，PAH)，Drugs，2012，72(18)2351-2363)和慢性血栓栓塞性肺动脉高压。

http://www.ema.europa.eu/docs/en_GB/document_library/Orphan_ designation/2009/10/WC500005505.pdf，下载：2017年2月15日)。

式(III)的曲前列环素钠盐

在市场上以

的名称用于注射用途，以的名称用于吸入用途。

式(I)的曲前列环素二乙醇胺盐是制成片剂的

的活性成分。

专利说明书WO2005/007081中首先描述了晶体曲前列环素二乙醇胺盐的两种多晶型(型A和型B)。这些多晶型的特征在于它们的熔点、X射线粉末衍射图、DSC(差示扫描量热法)和TGA(热重分析)曲线，以及它们的吸湿性。

他们指出

·亚稳型A具有吸湿性，在103℃熔化，DSC曲线在103℃出现吸热峰，并且如TGA所示，晶体不含任何溶剂化的溶剂

·更稳定的型B吸湿性小得多，在107℃熔化，DSC曲线在107℃出现吸热峰，TGA曲线在100℃显示最小失重。

·型A和B展现不同的粉末衍射图：更稳定的晶型B的特征峰为17.2°θ。

·由各种有机溶剂(1,4-二噁烷、异丙醇、四氢呋喃、甲苯)制成的悬浮液中的型A在不同温度搅拌下转化为型B。

出版物Organic Process&Development，2009，13，242-249(CrystallizationProcess Development for Stable Polymorph of Treprostinil；Batra，H.；Penmasta，R.；Phares，K.；Staszewski，J.；Tuladhar，S.M,；D.A.Walsh，United Therapeutics)详细描述了这两种多晶型的物理特性，并进行了其制备实验。首先被分离的亚稳型A静置后转化为热力学上更稳定的型B。

研究了几种不同比例的溶剂-反溶剂混合物。从异丙醇:甲基叔丁基醚(TBME)混合物中主要得到型A，但将晶体悬浮液搅拌数小时，型A转化为型B，然而，按比例放大时未发生这种转化。

若溶液用型B种晶，并且冷却非常缓慢，用几个温度步骤来控制，则从乙醇:丙酮＝7:1(产率85-90％)和从乙醇:乙酸乙酯＝7:1(产率90％)混合物中结晶均匀地产生型B。

专利说明书WO 2009/078965公开了通过结晶曲前列环素二乙醇胺盐制备高纯度曲前列环素钠盐。

向曲前列环素在乙酸乙酯中的溶液中加入无水乙醇和二乙醇胺。将澄清溶液在60-75℃搅拌30-60分钟，冷却至55±5℃，并用1％量的曲前列环素二乙醇胺盐的多晶型B进行种晶。在保持温度的同时搅拌沉淀的晶体1小时，然后将晶体悬浮液冷却至20-22℃。搅拌16-24小时后，通过过滤收集晶体，用乙酸乙酯洗涤并干燥，产率88％。

若曲前列环素二乙醇胺晶体的熔点>104℃，则获得型B。

若所得曲前列环素二乙醇胺晶体的熔点<104℃，则存在型A和型B的混合物。在那种情况下，将晶体混合物用乙醇:乙酸乙酯溶剂混合物反复结晶。

因此，上述方法既不是稳健的，也不是可重现的，通常得到型A+B的混合物。

专利说明书WO 2014/089385描述了制备曲前列环素、曲前列环素钠和曲前列环素二乙醇胺盐。

对于制备曲前列环素二乙醇胺盐，将曲前列环素的乙酸乙酯溶液用二乙醇胺的无水乙醇溶液处理，加热所得悬浮液，并在所有组分溶解的同时将所得悬浮液保持在回流温度15分钟。然后在18小时内将溶液缓慢冷却至室温。滤出沉淀的白色结晶物质，用乙酸乙酯洗涤，并在50℃真空干燥24小时。产率76％。并未给出该盐的物理特性。

专利说明书IN 2014CH02963-A公开了制备曲前列环素、曲前列环素钠和曲前列环素二乙醇胺盐。

在25-30℃向二乙醇胺的水溶液中加入曲前列环素的丙酮溶液。任选地，将溶液进行种晶，然后在保持温度的同时搅拌15分钟。将晶体悬浮液冷却至0-5℃，搅拌90分钟后，将晶体滤出，洗涤并干燥。产率：79％，多晶型A。

将曲前列环素二乙醇胺盐的多晶型A晶体悬浮在丙酮中，然后在回流温度将约0.2％量的乙醇加入悬浮液中。在回流温度搅拌6小时，接着冷却至25-30℃后，将晶体滤出，洗涤并干燥。产率100％，多晶型B。

在上述方法中，曲前列环素二乙醇胺盐的多晶型B只能分两步制备。

在专利说明书US 2016/0152548中描述的方法中，为了形成盐，将曲前列环素和二乙醇胺在70℃溶解于乙醇和乙酸乙酯中，搅拌30分钟后将溶液冷却至55℃，用1wt％的曲前列环素二乙醇胺盐多晶型B晶种进行种晶，将悬浮液在55℃搅拌1小时并冷却至室温。搅拌16小时后，将晶体滤出，洗涤并干燥。产率：93％。并未给出晶体的物理特性(熔点、X射线粉末图、DSC、TGA)。

再次在上述方法中，与专利说明书WO 2014/089385的方法类似，使用乙醇-乙酸乙酯混合物混合物进行结晶，已知该方法不是稳健的和可重现的并且在许多情况下会产生型A+B的混合物。

我们的目的是开发一种制备结晶曲前列环素二乙醇胺盐的稳健且可重现性好的方法，且该方法在一个步骤(即曲前列环素二乙醇胺盐的一个结晶步骤，其包括包括种晶、添加反溶剂、冷却和过滤的顺序)中提供该盐的更稳定的多晶型B。

从文献中可知，曲前列环素二乙醇胺盐可以以两种多晶型结晶。熔点较低(熔点为103℃)的多晶型为亚稳型A，而熔点较高(熔点为107℃)的多晶型是热力学上较稳定的型B，因此，为了制备药物活性成分，多晶型B是所需的晶型。

然而，制备热力学上更稳定的型B不是一件容易的事：即使我们找到适合的溶剂/反溶剂比，在回流温度进行溶解，使用型B进行种晶，以可控的方式用几个温度步骤非常缓慢地冷却，仍不能保证该方法在每种情况下都能提供更稳定的型B。如文献所示，即使严格遵照预定的参数，也经常发生型A和B一起结晶，并且经过额外的操作步骤(重复结晶、长时间搅拌晶体悬浮液)后最终从晶型A和B的混合物中获得所需的多晶型。

我们整理了文献数据，并研究了通过使用各种溶剂或溶剂混合物获得何种晶型。(表I)

表I.文献中制备结晶曲前列环素DEA的方法

*从溶液中结晶**搅拌含有型A或型A+B的晶体悬浮液

***按比例放大结晶****若A+B沉淀，则重复结晶

从简化的且不包含结晶温度曲线的表I中，可以得出以下结论：

·专利说明书WO 2005/007081(1)的结晶方法获得型A或型A+B的混合物。通过将晶体悬浮液随后搅拌几天，可以获得所需的型B。

·根据出版物(2)Org.Proc.Res.&Dev.：

ο在实验室实验期间，在与异丙醇或异丙醇:甲基叔丁基醚的混合物长时间搅拌的作用下，最初获得的型A以及型A+B混合物完全转变为型B，然而，在按比例放大期间，没有成功获得型B。

ο从异丙醇:甲基叔丁基醚混合物中结晶获得型A。

ο通过从EtOH:丙酮混合物中结晶，1:7比率的混合物通常产生型B，但有时获得型A+B的混合物。在这种情况下，必须重复结晶直到均一地获得型B晶体。在此过程中，溶液必须用型B进行种晶，必须遵循复杂的温度曲线，且整个结晶过程花费3天。然而，该方法不是稳健的，因为仅溶剂比率的小变化可能导致型A+B的混合物结晶。令人惊讶的是，在按比例放大过程中选择了EtOH:丙酮＝1:10混合物来代替实验室实验中确定的EtOH:丙酮＝1:7的溶剂混合物。

ο通过从EtOH:乙酸乙酯混合物中结晶，1:7比率的混合物通常产生型B，但在某些情况下获得型A+B的混合物。在那种情况下，必须重复结晶直到均一地获得型B晶体。在此过程中，溶液必须用晶型B进行种晶，且必须遵循复杂的温度曲线，整个结晶过程需要较短的时间，大约为1.5天。但是，在用该溶剂混合物的情况下，该方法也不是稳健的，因为溶剂比率的小变化可能导致型A+B的混合物的结晶。令人惊讶的是，在该方法中，同样在按比例放大中，选择了另一种溶剂比率(EtOH:乙酸乙酯＝1:8)，而不是在实验室实验中发现最适合的溶剂比率(EtOH:乙酸乙酯＝1:7)。

·在专利说明书WO 2009/078965 A1(3)中，曲前列环素二乙醇胺盐的结晶用EtOH:乙酸乙酯＝1:7的混合物进行。若未结晶出型B，则需要重复结晶，因此该方法不是稳健的。

·在专利说明书WO 2014/089385 A2(4)中，曲前列环素二乙醇胺盐的结晶用EtOH:乙酸乙酯＝1:8的混合物进行。并未表征晶体，但可从文献数据中得知，该方法对于制备型B不是稳健的。

·根据专利说明书IN 2014CH02963(5)，曲前列环素二乙醇胺盐从丙酮:水混合物中结晶，得到型A。在丙酮:EtOH混合物中搅拌后，结晶型A转化为型B。

·在专利说明书US 2016/0152548 A1(6)的方法中，曲前列环素二乙醇胺盐用EtOH:乙酸乙酯＝1:7溶剂混合物结晶。根据说明书，得到型B，但从文献数据中得知，该方法不是稳健的。

然而，对于工业实施而言，技术必须稳健、简单、可放大、可重现且易于实施。

鉴于上述情况，我们旨在地开发一种方法，该方法在各种情况下在一个步骤中可重现地以热力学上更稳定的结晶多晶型B的形式提供式I的曲前列环素二乙醇胺盐。

我们进行了许多实验以开发制备曲前列环素二乙醇胺盐的多晶型B的方法。我们的目标是使用仅多晶型B结晶的溶剂进行成盐。

在实验中，将1.0g的曲前列环素(II)溶解在选定的溶剂中。向该溶液中添加0.3g的二乙醇胺(IV)，并将该反应混合物在35℃搅拌30分钟。向均相溶液中添加第一部分的反溶剂，然后将混合物冷却至室温，并用曲前列环素二乙醇胺盐(I)的多晶型B进行种晶。搅拌1-2小时后，将第二部分的反溶剂添加至晶体悬浮液中，并在室温继续搅拌另外的16-24小时。

滤出曲前列环素二乙醇胺(I)晶体，洗涤并在真空中于45℃干燥。通过DSC和X射线粉末衍射(XRPD)研究确定晶型。

令我们惊讶的是，我们发现从甲醇与任何一种反溶剂(甲基叔丁基醚，丙酮、乙酸乙酯、二异丙基醚、乙腈)中仅结晶出型B，(关于X-射线粉末衍射图，参见图1)，而使用文献中描述的溶剂则同时形成了型A和B。

表II：从甲醇中制备结晶曲前列环素二乙醇胺盐

要注意的是，甲苯不是使曲前列环素二乙醇胺盐结晶的适合的反溶剂，无法成功使用甲苯获得结晶形式的盐。

发现最适合制备曲前列环素二乙醇胺盐的结晶性多晶型B的溶剂是甲醇，因为从该溶剂中进行结晶总是使型B均一地结晶均匀。

选择甲基叔丁基醚作为反溶剂，由于技术原因，该溶剂被证明是最适合的。

使用甲醇-甲基叔丁基醚作为溶剂-反溶剂混合物，以1g的规模将曲前列环素二乙醇胺盐的形成重复四次，然后将该方法按比例放大，从70g曲前列环素(II)开始(实施例7)。在每种情况下，均一地获得盐的多晶型B。

因此，我们的方法是稳健、可重现的，并且一步就得到了所需的型B。

另外，我们的方法在技术上更加方便，因为不需要在现有技术方法中使用的程序化冷却。

为了进一步证明我们方法的稳健性，将以1g的规模制备曲前列环素二乙醇胺盐重复5次。用于结晶的反溶剂甲基叔丁基醚的量在宽范围内变化。

将曲前列环素(II)溶于甲醇(4ml)，将二乙醇胺(0.3g)添加至溶液中。成盐完成后，添加第一部分的甲基叔丁基醚(15ml)。过滤溶液，并滴加第二部分的甲基叔丁基醚以完成结晶。

在所有情况下，如XRPD和DSC所证实，结晶出曲前列环素二乙醇胺的型B。XRPD图中存在型B的特征峰，即17.2°2θ，而型A的特征峰完全消失。另外，在所有情况下，DSC在等于或高于105℃左右的温度均显示出吸热峰。

实施例	TBME的量	Me:OH:TBME的比率	产率
				8	15ml+20ml	1:8.75*	91％
9	15ml+25ml	1:10	91％
				10	15ml+29ml	1:11	92％
11	15ml+9ml	1:6	81％
				12	15ml+5ml	1:5	75％

*按比例放大所使用的比率

还使用乙醇-乙酸乙酯溶剂/反溶剂混合物进行结晶。在这种情况下，与文献数据一致，得到了型A+B的混合物(实施例13)。若该曲前列环素二乙醇胺盐的型A和B的混合物从甲醇-甲基叔丁基醚溶剂混合物中结晶，则均一地得到盐的多晶型B(实施例14)。

在水性甲醇(约30％的水)中溶解曲前列环素二乙醇胺盐，并用丙酮进行沉淀，我们再次均一地得到多晶型B，但产率仅为61％(实施例15)。

若将盐溶解在甲醇中，也得到曲前列环素二乙醇胺盐的多晶型B，在45℃，用甲基叔丁基醚使溶液变为乳白色，然后在室温完成结晶(产率87％)(实施例16)。

然而，在-70℃从甲醇-甲基叔丁基醚溶剂溶液中结晶，得到低熔点、高吸湿性的晶体。这种形式被称为多晶型C(实施例17)。基于DSC曲线，多晶型C是一种较不稳定的形式，熔点为86-88℃，并且在DSC管中它转变为更稳定、更高熔点(101-103℃)的形式。

基于上述，本发明的主题是用于制备曲前列环素二乙醇胺盐的多晶型B的方法，其包括以下步骤：

a.将曲前列环素溶于甲醇中，

b.向步骤a)的溶液中添加二乙醇胺或其甲醇溶液，

c.将步骤b)的反应混合物搅拌直至溶解，

d.当步骤c)中完成了盐的形成时，将第一部分的非质子溶剂添加至溶液中，

e.过滤步骤d)的溶液以除去不溶性杂质，

f.将步骤e)的滤液用曲前列环素二乙醇胺盐的多晶型B进行种晶，

g.向步骤f)中所获得的晶体悬浮液中添加第二部分的非质子溶剂，

h.搅拌步骤g)的所述悬浮液直到结晶完成，

i.将所述晶体分离、洗涤并干燥。

本发明的另一主题是将曲前列环素二乙醇胺盐的多晶型A或多晶型A和B的混合物均一地转化为多晶型B的方法，其包括以下步骤：

a.将曲前列环素二乙醇胺盐溶于甲醇中，

b.向步骤a)的溶液中添加第一部分的非质子溶剂，

c.过滤步骤b)的溶液，以除去不溶性杂质，

d.将步骤c)的滤液用曲前列环素二乙醇胺盐的多晶型B进行种晶，

e.向步骤d)的结晶悬浮液中添加第二部分的非质子溶剂，

f.搅拌步骤e)的所述悬浮液直到结晶完成，

g.将所述晶体分离、洗涤并干燥。

在本发明的优选实施方案中，曲前列环素和二乙醇胺的溶解或曲前列环素二乙醇胺盐的溶解在25-50℃进行，优选在30-40℃进行。

对于非质子溶剂醚，施用例如甲基叔丁基醚、二异丙基醚，酮类溶剂，例如丙酮，酯类溶剂，例如乙酸乙酯或乙腈，优选甲基叔丁基醚。

溶剂(甲醇):反溶剂的比率优选为1:4-20，更优选1:5-15，甚至更优选1:7-11。

在根据本发明的方法的一个实施方案中，按以下方式制备曲前列环素二乙醇胺盐的结晶型B：在35℃将曲前列环素溶于甲醇中，向其中添加固体二乙醇胺碱，并将混合物在35℃搅拌直至溶解。然后向其中添加第一部分的反溶剂甲基叔丁基醚，将溶液过滤，将滤液溶液用曲前列环素二乙醇胺盐的多晶型B进行种晶，并将混合物在室温搅拌。向结晶悬浮液中添加第二部分的反溶剂，并将混合物在室温搅拌，直至结晶完成。多晶型A或曲前列环素二乙醇胺盐的多晶型A和B的混合物从甲醇-甲基叔丁基醚中重结晶，得到曲前列环素二乙醇胺盐的型B。

与先前的方法相比，我们的方法的优势为：

·该方法简单、稳健、可放大且可重现性好，

·一步提供所需的型B，

·由于不需要复杂的加热-冷却曲线，因此应用易于按比例放大

·不需要以下内容：晶型的后续转变，

ο反复结晶和/或

ο长时间搅拌晶体悬浮液，和/或

ο复杂的加热-冷却曲线

·可重现地提供所需的、更稳定的多晶型B，

·该方法同样适用于获得曲前列环素二乙醇胺盐的型B

ο通过从曲前列环素和二乙醇胺(IV)开始形成盐，然后将所得盐结晶

ο通过结晶将型A或型A+B的混合物均一地转化为型B。

通过以下实施例说明本发明的细节，但本发明不限于此。

在根据本发明的方法中应用的测量条件：

X-射线衍射图：

起始位置[°2θ]：2.0084

结束位置[°2θ]：39.9864

测量温度[℃]：25.00

阳极材料：Cu

K-α11.54060

K-α21.54443

DSC：

仪器：METTLER TOLEDO DSC1 STARe系统，Stare Basic V9.30

方法：起始温度：30℃

最终温度：150℃

加热速率：5℃/min

量：2-6mg，多孔铝坩埚(40μl)

NMR：

仪器：Bruker Avance III 500MHz

溶剂：DMSO

具体实施方式

图1：从作为溶剂的甲醇和不同反溶剂中结晶的曲前列环素二乙醇胺盐的不同多晶型的X-射线粉末衍射谱图(实施例1至6)：

1.1：MeOH/甲基叔丁基醚

1.2：MeOH/丙酮

1.3：MeOH/乙酸乙酯

1.4：MeOH/二异丙基醚

1.6：MeOH/乙腈

”A”：曲前列环素二乙醇胺多晶型A

”B”：曲前列环素二乙醇胺多晶型B

图2：从MeOH/甲基叔丁基醚混合物中结晶的曲前列环素二乙醇胺盐多晶型B的XRPD谱图(实施例7)

图3：从MeOH/甲基叔丁基醚混合物中结晶的曲前列环素二乙醇胺盐多晶型B的DSC曲线(峰：106.56℃，实施例7)

图4：从MeOH/甲基叔丁基醚混合物中结晶的曲前列环素二乙醇胺盐多晶型B的XRPD谱图(实施例8)

图5：从MeOH/甲基叔丁基醚混合物中结晶的曲前列环素二乙醇胺盐多晶型B的DSC曲线(峰：106.23℃，实施例8)

图6：从MeOH/甲基叔丁基醚混合物中结晶的曲前列环素二乙醇胺盐多晶型B的XRPD谱图(实施例9)

图7：从MeOH/甲基叔丁基醚混合物中结晶的曲前列环素二乙醇胺盐多晶型B的DSC曲线(峰：105.37℃，实施例9)

图8：从MeOH/甲基叔丁基醚混合物中结晶的曲前列环素二乙醇胺盐多晶型B的XRPD谱图(实施例10)

图9：从MeOH/甲基叔丁基醚混合物中结晶的曲前列环素二乙醇胺盐多晶型B的DSC曲线(峰：104.91℃，实施例10)

图10：从MeOH/甲基叔丁基醚混合物中结晶的曲前列环素二乙醇胺盐多晶型B的XRPD谱图(实施例11)

图11：从MeOH/甲基叔丁基醚混合物中结晶的曲前列环素二乙醇胺盐多晶型B的DSC曲线(峰：106.10℃，实施例11)

图12：从MeOH/甲基叔丁基醚混合物中结晶的曲前列环素二乙醇胺盐多晶型B的XRPD谱图(实施例12)

图13：从MeOH/甲基叔丁基醚混合物中结晶的曲前列环素二乙醇胺盐多晶型B的DSC曲线(峰：107.42℃，实施例12)

图14：从EtOH/乙酸乙酯混合物中结晶的曲前列环素二乙醇胺盐多晶型A+B的XRPD谱图(实施例13)

图15：从EtOH/乙酸乙酯混合物中结晶的曲前列环素二乙醇胺盐多晶型A+B的DSC曲线(峰：103.84℃和105.94℃，实施例13)

图16：从MeOH/甲基叔丁基醚混合物中结晶的曲前列环素二乙醇胺盐多晶型B的DSC曲线(峰：107.34℃，实施例14)

图17：从MeOH/水/丙酮混合物中结晶的曲前列环素二乙醇胺盐多晶型B的DSC曲线(峰：106.56℃，实施例15)

图18：在40℃至50℃，从MeOH/甲基叔丁基醚混合物中结晶的曲前列环素二乙醇胺盐多晶型B的DSC曲线(峰：106.23℃，实施例16)

图19：在-70℃，从MeOH/甲基叔丁基醚混合物中结晶的曲前列环素二乙醇胺盐多晶型C的XRPD谱图(实施例17)

图20：在-70℃，从MeOH/甲基叔丁基醚混合物中结晶的曲前列环素二乙醇胺盐多晶型C的DSC曲线(峰：87.66℃和102.58℃，实施例17)

图21：在500MHz、在DMSO中获得的曲前列环素二乙醇胺盐的¹³C和¹HNMR数据

实施例

制备曲前列环素二乙醇胺盐(I)

(1R,2R,3aS,9aS)-2-[2-羟基-1-[3(S)-羟基辛基]-2,3,3a,4,9,9a-六氢-1H-苯并[f]茚-5-基氧基]乙酸二乙醇胺盐

实施例1(JIM-562/1)

在室温，将1g的曲前列环素(II)溶于4ml的甲醇。向溶液中添加0.3g的二乙醇胺(IV)并将反应混合物在35±5℃搅拌半个小时，然后添加15ml的甲基叔丁基醚(TBME)。将溶液过滤，用约10mg的多晶型B晶体进行种晶，将悬浮液在室温搅拌2小时，然后逐滴添加20ml的甲基叔丁基醚。在室温继续搅拌16-24小时，然后滤去晶体，洗涤并在45±5℃真空干燥。

产率：1.15g(91％)，无色晶体，对应于多晶型B。

实施例2(JIM-562/2)

在室温，将1g的曲前列环素(II)溶于4ml的甲醇。向溶液中添加0.3g的二乙醇胺(IV)，并将反应混合物在35±5℃搅拌半个小时，然后添加15ml丙酮，将溶液过滤，用约10mg的多晶型B晶体进行种晶，在室温搅拌2小时，然后逐滴添加30ml丙酮。将悬浮液在室温搅拌16-24小时，然后滤去晶体，洗涤并在45±5℃真空干燥。

产率：0.92g(73％)，无色晶体，对应于多晶型B。

实施例3(JIM-562/3)

在室温，将1g的曲前列环素(II)溶于4ml的甲醇。向溶液中添加0.3g的二乙醇胺(IV)，并将反应混合物在35±5℃搅拌半个小时，然后添加15ml的乙酸乙酯，将溶液过滤，用约10mg的多晶型B晶体进行种晶，在室温搅拌2小时，然后逐滴添加20ml乙酸乙酯。将悬浮液在室温搅拌16-24小时，然后滤去晶体，洗涤并在45±5℃真空干燥。

产率：1.16g(92％)，无色晶体，对应于多晶型B。

实施例4(JIM-562/4)

在室温，将1g的曲前列环素(II)溶于6ml的甲醇。向溶液中添加0.3g的二乙醇胺(IV)，将反应混合物在35±5℃搅拌半个小时，然后添加10ml的二异丙基醚(DIPE)，将溶液过滤，用约10mg的多晶型B晶体进行种晶，在室温搅拌2小时，然后逐滴添加20ml二异丙基醚。将悬浮液在室温搅拌16-24小时，然后滤去晶体，洗涤并在45±5℃真空干燥。

产率：1.20g(95％)，无色晶体，对应于多晶型B。

实施例5(JIM-562/5)

在室温，将1g的曲前列环素(II)溶于6ml的甲醇。向溶液中添加0.3g的二乙醇胺(IV)，将反应混合物在35±5℃搅拌半个小时，然后添加10ml的甲苯，将溶液过滤，用约10mg的多晶型B晶体进行种晶，在室温搅拌2小时，然后逐滴添加30ml的甲苯。未发生结晶。

实施例6(JIM-562/6)

在室温，将1g的曲前列环素(II)溶于4ml的甲醇。向溶液中添加0.3g的二乙醇胺(IV)，将反应混合物在35±5℃搅拌半个小时，然后添加15ml的乙腈，将溶液过滤，用约10mg的多晶型B晶体进行种晶，在室温搅拌2小时，然后逐滴添加20ml乙腈。将悬浮液在室温搅拌16-24小时，然后滤去晶体，洗涤并在45±5℃真空干燥。

产率：1.15g(91％)，无色晶体，对应于多晶型B。

如实施例1-6所描述制备的曲前列环素二乙醇胺盐的粉末X-射线衍射谱图示于图1中。

实施例7

在25±5℃，将70g的曲前列环素(II)溶于280ml的甲醇。向溶液中添加20.73g的二乙醇胺(IV)，并将反应混合物在35±5℃搅拌半个小时，然后添加1050ml的甲基叔丁基醚(TBME)。将溶液过滤进配有搅拌器的装置中，用约700mg的多晶型B晶体进行种晶，并在室温搅拌2小时，然后逐滴添加1400ml的甲基叔丁基醚。在室温继续搅拌16-24小时，然后滤去晶体，洗涤并在45±5℃真空干燥。

产率：87.2g(98％)，无色晶体，对应于多晶型B。

DSC曲线示于图3中，X-射线粉末衍射图示于图2中。

曲前列环素二乙胺的¹³C和¹H NMR数据示于图21中。

实施例8

在25±5℃，将1g的曲前列环素(II)溶于4ml的甲醇。向溶液中添加0.3g的二乙醇胺(IV)，并将反应混合物在35±5℃搅拌半个小时，然后添加15ml的甲基叔丁基醚(TBME)。将溶液过滤进配有搅拌器的装置中，用约10mg的多晶型B晶体进行种晶，并在室温搅拌2小时，然后逐滴添加20ml的甲基叔丁基醚。在室温继续搅拌16-24小时，然后滤去晶体，洗涤并在45±5℃真空干燥。

产率：1,15g(91％)，无色晶体，对应于多晶型B。

DSC曲线示于图5中，X-射线粉末衍射图示于图4中。

实施例9

在25±5℃，将1g的曲前列环素(II)溶于4ml的甲醇。向溶液中添加0.3g的二乙醇胺(IV)，并将反应混合物在35±5℃搅拌半个小时，然后添加15ml的甲基叔丁基醚(TBME)。将溶液过滤进配有搅拌器的装置中，用约10mg的多晶型B晶体进行种晶，并在室温搅拌2小时，然后逐滴添加25ml的甲基叔丁基醚。在室温继续搅拌16-24小时，然后滤去晶体，洗涤并在45±5℃真空干燥。

产率：1.15g(91％)，无色晶体，对应于多晶型B。

DSC曲线示于图7中，X-射线粉末衍射图示于图6中。

实施例10

在25±5℃，将1g的曲前列环素(II)溶于4ml的甲醇。向溶液中添加0.3g的二乙醇胺(IV)，并将反应混合物在35±5℃搅拌半个小时，然后添加15ml的甲基叔丁基醚(TBME)。将溶液过滤进配有搅拌器的装置中，用约10mg的多晶型B晶体进行种晶，并在室温搅拌2小时，然后逐滴添加29ml的甲基叔丁基醚。在室温继续搅拌16-24小时，然后滤去晶体，洗涤并在45±5℃真空干燥。

产率：1.16g(92％)，无色晶体，对应于多晶型B。

DSC曲线示于图9中，X-射线粉末衍射图示于图8中。

实施例11

在25±5℃，将1g的曲前列环素(II)溶于4ml的甲醇。向溶液中添加0.3g的二乙醇胺(IV)，并将反应混合物在35±5℃搅拌半个小时，然后添加15ml的甲基叔丁基醚(TBME)。将溶液过滤进配有搅拌器的装置中，用约10mg的多晶型B晶体进行种晶，并在室温搅拌2小时，然后逐滴添加9ml的甲基叔丁基醚。在室温继续搅拌16-24小时，然后滤去晶体，洗涤并在45±5℃真空干燥。

产率：1.02g(81％)，无色晶体，对应于多晶型B。

DSC曲线示于图11中，X-射线粉末衍射图示于图10中。

实施例12

在25±5℃，将1g的曲前列环素(II)溶于4ml的甲醇。向溶液中添加0.3g的二乙醇胺(IV)并将反应混合物在35±5℃搅拌半个小时，然后添加15ml的甲基叔丁基醚(TBME)。将溶液过滤进配有搅拌器的装置中，用约10mg的多晶型B晶体进行种晶，并在室温搅拌2小时，然后逐滴添加5ml的甲基叔丁基醚。在室温继续搅拌16-24小时，然后滤去晶体，洗涤并在45±5℃真空干燥。

产率：0.95g(75％)，无色晶体，对应于多晶型B。

DSC曲线示于图13中，X-射线粉末衍射图示于图12中。

实施例13

在室温，将1g的曲前列环素(II)溶于5ml的乙醇。向溶液中添加0.3g的二乙醇胺(IV)，并将反应混合物在35±5℃搅拌半个小时，然后添加15ml的乙酸乙酯，将溶液过滤，用约10mg的多晶型B晶体进行种晶，在室温搅拌2小时，然后逐滴添加20ml的乙酸乙酯(EtOH:EtOAc＝1:7)。将悬浮液在室温搅拌16-24小时，然后滤去晶体，洗涤并在45±5℃真空干燥。

产率：1.1g(87％)，无色结晶，多晶型A和B的混合物。

DSC曲线示于图15中，X-射线粉末衍射图示于图14中。

实施例14

在35±5℃，将1g的曲前列环素二乙醇胺盐(I，多晶型A和B的混合物)溶于4ml的甲醇。在室温，向均相溶液中添加15ml的甲基叔丁基醚，并将混合物用约10mg的多晶型B晶体进行种晶，在室温搅拌2小时，然后逐滴添加20ml的甲基叔丁基醚。在室温继续搅拌16-24小时，然后滤去晶体，洗涤并在45±5℃真空干燥。

产率：1.23g(97％)，无色晶体，对应于多晶型B。

DSC曲线示于图16中。

实施例15

在室温，将0.5g的曲前列环素二乙醇胺盐溶于2ml的甲醇和0.6ml水的混合物中。在室温，向均相溶液中滴加20ml的丙酮，将乳白色溶液用约5mg的多晶型B晶体进行种晶，在室温搅拌2小时，然后逐滴添加10ml的丙酮。搅拌20小时后，滤去晶体，洗涤并在45±5℃真空干燥。

产率：0.39g(61％)，无色晶体，对应于多晶型B。

DSC曲线示于图17。

实施例16

在45±5℃，将0.5g的曲前列环素二乙醇胺盐溶于2ml的甲醇。在45±5℃，向均相溶液中添加20ml的甲基叔丁基醚，并将混合物用约5mg的多晶型B晶体进行种晶。将乳白色溶液冷却至室温。搅拌20小时后，滤去晶体，洗涤并在45±5℃真空干燥。

产率：0.55g(87％)，无色晶体，对应于多晶型B。

DSC曲线示于图18中

实施例17

在-70℃，将0.5g的曲前列环素二乙醇胺盐溶于5ml的甲醇。在-70℃，向均相溶液中添加30ml的甲基叔丁基醚，并将混合物用约5mg的多晶型B晶体进行种晶。搅拌2小时后，将乳白色溶液温热至室温。不能很好过滤的晶体被滤除，洗涤并在45±5℃真空干燥。

产率：0.31g(49％)，对应于多晶型C。

DSC曲线示于图20中，X-射线粉末衍射图示于图19中。