一种用于治疗高尿酸及其相关疾病的雀嘴茶提取物及其制备方法、制剂与应用
阅读说明：本技术 一种用于治疗高尿酸及其相关疾病的雀嘴茶提取物及其制备方法、制剂与应用 (Tea extract of sparrow mouth for treating hyperuricemia and related diseases, and preparation method, preparation and application thereof ) 是由 丛力 高志奎 任杨帆 沈报春 尹开云 马彦 于 2021-07-30 设计创作，主要内容包括：本发明涉及一种用于治疗高尿酸及其相关疾病的雀嘴茶提取物及其制备方法、制剂与应用,属于生物医药技术领域。本发明采用雀嘴茶顶尖上新生嫩叶作为原料,经过提取、结晶、干燥等工艺,所得到的雀嘴茶提取物中6’-O-咖啡酰熊果苷质量含量大于85%,对苯二酚质量含量小于0.08%。该雀嘴茶提取物可以在制备治疗、预防高尿酸及其相关疾病药物中应用。经科学研究和多年的临床研究证实,本发明以富含6’-O-咖啡酰熊果苷的雀嘴茶提取物对高尿酸及其并发症有较好的治疗作用,尤其对高尿酸结石引起的肾衰竭有很好的治愈功效,能够在30天左右治疗周期很好地排出肾积水,显著降低肌酐,并明显改善患者的生存质量。(The invention relates to a sparrow tea extract for treating hyperuricemia and related diseases, and a preparation method, a preparation and application thereof, and belongs to the technical field of biological medicines. The method adopts the newly-born tender leaves on the tip of the tea leaves of the sparrow mouth as raw materials, and the 6' -O-caffeoyl arbutin mass content in the obtained extract of the tea leaves of the sparrow mouth is more than 85 percent and the hydroquinone mass content is less than 0.08 percent through the processes of extraction, crystallization, drying and the like. The tea extract can be used for preparing medicines for treating and preventing hyperuricemia and related diseases. Scientific research and years of clinical research prove that the Quezui tea extract rich in 6' -O-caffeoyl arbutin has better treatment effect on hyperuricemia and complications thereof, particularly has good curative effect on renal failure caused by hyperuricemia, can well discharge hydronephrosis in a treatment period of about 30 days, remarkably reduces creatinine, and obviously improves the life quality of patients.)
技术领域
本发明属于生物医药
技术领域
，具体涉及一种用于治疗高尿酸及其相关疾病的雀嘴茶提取物及其制备方法、制剂与应用，尤其富含6’-O-咖啡酰熊果苷的雀嘴茶提取物在制备治疗高尿酸疾病及其相关疾病药物中的应用。背景技术
人类因发展很快，生活富裕了，但随之而来的就是各种现代病、富贵病等慢性病。除了三高(高血压、高血糖、高血脂)之外，近年来备受关注的是高尿酸。从前我们只知道痛风是一种神秘的疾病，是一种富裕病，现在我们知道痛风的主要病因是高尿酸血症，高尿酸患者中10％的人会进一步发展为痛风。且痛风已由少数人患的神秘的疾病变成了发病率高达1％的常见病。越来越多的证据证明高尿酸不仅是痛风的主要病因，也是心脑血管疾病的主要诱因，亦是一些关节炎、肾病的主要危险因素。这类疾病亦称为高尿酸相关疾病(或并发症)。
虽然高尿酸的危害已日益引起医药界的重视，但是尿酸不仅是人体代谢的必然产物，且尿酸也是体内重要的抗氧化剂，具有重要的生理作用。鉴于尿酸的重要性，以及过量带来的健康问题，全世界医药界都在积极开发药品，目前临床认为比较好的药品有老药别嘌醇、苯溴马隆等，以及新药非布司他等，和治疗痛风急性期的老牌药物秋水仙碱。这些化学药不良反应较多、较重，有些药如苯溴马隆已被很多国家取消了(禁用)。即使是新药非布司他也被美国FDA加了黑框警示其对心脑血管的风险。
在化药安全性受到关注的同时，传统药也受到关注，植物中的很多黄酮类物质、多酚类物质、纤维素等都受到关注和证明其有效性。如芒果苷元是很强的XOD抑制剂，芒果苷、芹菜素等均有人在高尿酸和痛风研究上发表了论文和申请了专利。尽管至今已有很多研究和报道，但能对降尿酸具有公认疗效的产品仍然很少，化药非布司他片是公认效果较好、安全性尚可接受的好产品。社会需要更加安全有效的降尿酸药物！
作为一种天然植物雀嘴茶，民间传说其曾作为贡品的，盛传其具有清热解毒等多种保健功效。但也有研究者指出其存在安全隐患、质量和效果不稳定、降尿酸效果不明显等缺点。雀嘴茶的有效成分也有较多的研究和报道，已有的专利申请和技术公开的资料显示：CN103120624A和CN101085792A中科院昆明植物研究所张颖君等，公开了一种雀嘴茶提取物，其对其中含有的成分的美白功效进行了研究。云南白药集团赵守仁等，以及华侨大学等也有对雀嘴茶中化学成分的研究。李菊等发表的“雀嘴茶半数致死量及病理学的初步研究”显示其存在的安全性问题。相关公开专利申请有：CN111939189A、CN111939190A、CN111533770A等。
专利CN111471078A和CN1153370A公开的提取方法用乙醇提取，用乙酸乙酯萃取，并采用柱层析，工艺较为复杂，难以大量工业生产；且采用有机溶剂，还没有确定了提取物中主要成分的含量和有毒成分的含量，
赵守仁等在对越桔属植物化学成分试验研究中，曾分离到以下化合物6-O-乙酰基熊果苷(6-O-Acetylarbutin)、熊果苷(Arbutin)、篇蓄苷(Avicularin)、2-O-咖啡酰基熊果苷(2-O-Carffeoylarbutin)、(-)表儿茶素((-)-Epicachin)、氢醌(Hydroquinone)、4-羟苯基-β-龙胆二糖苷(4-Hydroxyphenyl-β-gentiobioside)、前花靛A2(ProanthocyanidinA2)、毛柳苷(Salidroside)、矢车菊素-3-O-β-D-半乳糖苷(Cyanidin-3-O-β-D-galactoside)。
从化学物质安全性手册和文献报道可知，雀嘴茶中主要活性酚类成分的相对毒性大小依次为：氢醌(对苯二酚)>熊果苷>6’-O-咖啡酰熊果苷(只是熊果苷毒性的1/2)。对苯二酚为白色结晶，又叫氢醌。有毒，成人误服1克，即可出现头痛、头晕、耳鸣、面色苍白等症状。因此，雀嘴茶活性成分中毒性存在，影响了人们对其的使用欲望和研发积极性这也正是雀嘴茶没有更好地被开发利用的重要原因之一。如何控制其中活性成分的毒性，发挥雀嘴茶提取物活性成分的功效，需要从源头和技术层面加以解决。
发明内容
本发明为了解决现有技术的不足，第一目的在于提供一种低毒安全的富含6’-O-咖啡酰熊果苷的用于治疗高尿酸及其相关疾病的雀嘴茶提取物；第二目的在于提供一种降低雀嘴茶提取物毒性的制备方法；第三目的在于提供一种含有富含6’-O-咖啡酰熊果苷的雀嘴茶提取物的药物制剂；第四目的在于提供雀嘴茶提取物在制备治疗高尿酸症及其相关疾病药物中的应用，尤其是在制备改善肾功能药物中的应用。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
一种用于治疗高尿酸及其相关疾病的雀嘴茶提取物，所述雀嘴茶提取物中6’-O-咖啡酰熊果苷质量含量大于85％，对苯二酚质量含量小于0.08％。
进一步，优选的是，还含有质量含量为0.5％～15％的酚类化合物，所述的酚类化合物中包括乌金苷A、咖啡酸和熊果苷中的至少一种。
乌金苷A结构式：
Robustaside A(乌金苷A)
咖啡酸的结构式：
熊果苷的结构式：
本发明同时提供用于治疗高尿酸及其相关疾病的雀嘴茶提取物的制备方法，包括如下步骤：
步骤(1)，原料选择：选择4-8月份雀嘴茶新发嫩叶，采摘后将新鲜叶子用自来水清洗干净；
步骤(2)，提取：在铁质容器内对步骤(1)处理后的原料进行提取；从采摘到提取的时间不超过12h；
所述的提取的具体方法为：加饮用水至盖住原料，大火煮沸30-40分钟(以叶子煮烂为准)，放冷至50±10℃，再将叶子进一步搓碎，继续放冷至40℃±10℃时用过滤，滤液冷却至30℃±10℃时持续开始搅拌30-40分钟，待出现白色物质时候停止搅拌，避光下静置待结晶；
步骤(3)，后处理：在避光和避热条件下，移除结晶溶液的上清液，过滤或离心，取结晶物，然后用4～10℃的水清洗结晶物，将结晶物真空干燥，得到雀嘴茶提取物。
雀嘴茶和对苯二酚对照品HPLC色图谱如图1所示。6’-O-咖啡酰熊果苷、咖啡酸和乌金苷A的HPLC图谱如图2所示；精密称取本发明雀嘴茶提取物0.5g，甲醇定容至25.00mL，0.45μm微孔滤膜过滤，进样分析，色谱图见图3。
图2的色谱条件为：色谱柱：20RB-AX SB-C18(9.4*250mm，5μm)；岛津LC-2010AHT高效液相色谱仪，流动相：甲醇-水梯度洗脱，条件见表1，流速：3.0ml/min，柱温：30℃，检测波长：254nm，进样量：10μl。
表1梯度洗脱程序表
时间
甲醇
0-40min
30-70％
40-50min
65-35％
图3的色谱条件为：色谱柱：Agilent ZOBXa-C18柱(4.6×250mm，5μm)；岛津LC-2010A高效液相色谱仪，流动相：甲醇-1％醋酸水，梯度洗脱程序见表2，流速：1.0mL/min，柱温：25℃，检测波长：280nm，进样量：2μL。
表2 HPLC梯度洗脱程序
时间
甲醇
0-10min
25-30％
10-15min
30-34％
15-20min
34％
20-27min
34-40％
27-32min
40-100％
采用制备型液相色谱获得两个主要成分纯品，经NMR分析并与文献对比，确定为6′-O-咖啡酰基熊果苷(tR19.317)和乌金苷A(tR27.562)。两者在样品中占97.3％。
注：上述梯度洗脱时，洗脱比例是线性变化的。
进一步，优选的是，若不能在12小时内及时提取的，对采摘后的茶叶先进行杀青处理，之后于55～65℃温度下干燥成干品，接着粉碎或切成过5-10目的粗粉后直接作为提取药材。
进一步，优选的是，还包括精制步骤；所述的精制步骤为1次或多次；
将清洗后的结晶物在避光惰性气氛下，加入质量是结晶物质量2～3倍的水，于蒸汽浴上加热回流至结晶完全溶解，然后冷却至75～85℃，之后加入活性炭回流进行脱色，过滤，滤液自然冷却结晶，过滤，用5～15℃的水洗涤结晶体，后真空干燥，得到雀嘴茶提取物精制品。
进一步，优选的是，活性炭与清洗后的结晶物的质量比为10-50：1000；真空干燥的具体方法为：在80～100mmHg，60±5℃下，进行真空干燥10～14h。
本发明同时提供一种含有上述用于治疗高尿酸相关疾病的雀嘴茶提取物的药物制剂，包括活性成分及辅料；所述的活性成分为包括雀嘴茶提取物；所述的药物制剂的剂型包括片剂、颗粒剂、胶囊剂、膏剂、口服液、肌肉注射针剂和静脉注射针剂。
进一步，优选的是，当所述的药物制剂为颗粒剂、胶囊剂或片剂时，由重量比的下列原料组成，按1000粒或片计，组成为雀嘴茶提取物100～120g、糊精22～38g、微晶纤维素9～11g、车前籽胶4.7～5.3g、魔芋多糖9～11g、羧甲基淀粉钠9～11g、硬酯酸镁1.9～1.1g；
当所述的药物制剂为饮品时，由重量比的下列原料组成，按1000支、10-200ml/支瓶计，组成为：雀嘴茶提取物50～170g，车前籽胶39.7～40.3g，魔芋多糖59～61g，甜叶菊苷3～7g，余量为水；
当所述的药物制剂为冻干粉针剂时，由重量比的下列原料组成，按1000瓶、5-10ml/瓶计，组成为：雀嘴茶提取物50～150g，甘露醇40～60g，加注射用水至总量。
本发明还提供上述用于治疗高尿酸及其相关疾病的雀嘴茶提取物作为制备治疗、预防高尿酸相关疾病药物中的应用。
进一步，优选的是，所述的高尿酸及其相关疾病包括高尿酸、痛风、高尿酸关节炎、高尿酸血症肾病、高尿酸肾结石、以及高尿酸心脑血管疾病。
本发明提取设备使用铁质设备即可，提取方法为全程水提法(绿色环保)。
本发明储存备用的干品作为原料，之后按照步骤(2)～步骤(5)的方法进行处理，可得到本发明雀嘴茶提取物。
本发明步骤(2)中，本发明对于过滤方式没有具体限制，例如采用粗滤布过滤，所得到的滤液通常是红色的。结晶的时间没有具体限制，视实际情况而定，例如24h。搅拌速度没有具体限制，缓慢搅拌即可，例如10～20r/min。
过滤后得到的结晶物通常需要沥干液体后，再进行清洗；清洗采用的水优选纯水，清洗结晶物时，优选采用过滤的方式，边加纯水边过滤，但不限于此。
本发明精制步骤中，所采用的水优选采用蒸馏水，回流脱色时间优选为10～30min，但不限于此。雀嘴茶提取物精制品中，6’-O-咖啡酰熊果苷含量大于99.0％，对苯二酚含量不大于0.02％。
本发明惰性气体下，优选为氮气环境下。
本发明雀嘴茶提取物在制备治疗与尿酸相关疾病药物上可以作为有效成分使用。所述雀嘴茶提取物在制备治疗高尿酸以及并发症的抗炎、抑菌、抗氧化和降尿酸药物中应用。
本发明中所述的辅料为医学上可以接受的辅料。
当所述的药物制剂为颗粒剂、胶囊剂或片剂时，按处方量称取雀嘴茶提取物、糊精、微晶纤维素、车前籽胶、魔芋多糖和羧甲基淀粉钠，置湿法制粒机中混合10±1min，加入体积浓度为50％的乙醇，设定制粒工艺参数(搅拌速度为700r·min-1、切碎速度1000r·min-1、制粒时间5min)，干燥，控制颗粒水分在4～6％，过20目筛整粒，取颗粒加入硬酯酸镁，混匀，然后装入1号胶囊即得胶囊剂；颗粒压片得到片剂。成人日用量(按提取物含量计)不超过5～8g，分三次服用。建议作为用于治疗高尿酸及其相关疾病药物。
当所述的药物制剂为饮品时，按处方量称取雀嘴茶提取物、车前籽胶、魔芋多糖、甜叶菊苷后，混合，加水至处方量，溶解，再按1000瓶分装、灭菌，即得雀嘴茶标准提取物饮品；成人日用量(按提取物含量计)不超过3～6g，分三次服用。建议作为用于治疗高尿酸及其相关疾病药物。
当所述的药物制剂为冻干粉针剂时，在cGMP条件下，按处方量称取雀嘴茶提取物、甘露醇，加注射用水至注射用水总量的80％，温热至45～50℃内，溶解后再加剩余的注射用水，搅匀，先经0.45μm粗滤，再经0.2μm精滤，在5ml西林瓶里灌装2ml药液，冷冻真空干燥，即得注射用冻干粉针；成人日用量(按6’-O-咖啡酰熊果苷计)不超过1～2g，分三次注射使用。建议作为用于治疗痛风或急性期高尿酸症、肾衰竭药物。
本发明雀嘴茶提取物作为制备治疗、预防痛风或高尿酸症及其相关并发症药物中的应用。具体为，所述雀嘴茶提取物作为：
(1)制备治疗痛风或高尿酸症药物制剂中的应用；
(2)制备预防高尿酸或抑制高尿酸进一步生成药物中的应用；
(3)制备治疗痛风或尿酸结石药物中的应用；
(4)制备治疗肾衰竭药物中的应用，即在制备包括治疗高尿酸、痛风、高尿酸(痛风性)关节炎、高尿酸血症肾病、高尿酸肾结石、以及高尿酸心脑血管疾病药物中的应用；
(5)在制备治疗尿酸相关疾病中的高尿酸引发的高肌酐性肾病药物中的应用；
所述雀嘴茶提取物制备治疗痛风或高尿酸症药物中的应用，可以制备有助于改善尿酸患者症状的产品，包括食品、茶品、饮料、保健食品、医院制剂、医疗营养品和药品中的应用。
用于治疗用于高尿酸相关疾病的雀嘴茶提取物具体的使用剂量为0.5g-8g/天。
本发明提供了一个集成创新的高尿酸及其相关疾病的治疗产品、以及疗效表征，为医学难题—肾衰竭也提供了一个很有希望的产品。
申请人研究发现雀嘴茶在采摘后处理和提取过程中，若处理不当的话，主要有效成分(6’-O-咖啡酰熊果苷或称乌金苷A)很易代谢或水解成毒性较大的熊果苷，再进一步代谢或水解成毒性更大的氢醌。这是现有技术研究中认为雀嘴茶提取物有毒性的核心原因所在，也是现有技术亟待解决的关键问题。本发明在于从根本解决了这一问题，并通过实验研究证明，其“脱毒的雀嘴茶提取物”其用于制备治疗与痛风相关的，以及改善肾脏功能的药物有非常好的临床效果，而且毒性试验证明是安全，有效且可控。
本发明直接用水提取，确定了提取物中6’-O-咖啡酰熊果苷质量含量不低于85％，有毒成分对苯二酚(氢醌)质量含量小于0.08％；动物试验除了发现有降尿酸作用外，还发现有降低尿蛋白作用，这对于治疗肾病及肾功能衰竭有积极意义；本发明对多例痛风和高尿酸患者使用后作了疗效评价，发现有较好治疗作用。
本发明中6’-O-咖啡酰熊果苷，又称乌金苷，是主要活性成分；对苯二酚，又称氢醌，是主要毒性成分。
经过研究发现雀嘴茶提取物毒性产生(增加)的原因为：熊果苷及其衍生物都可以经过连续的水解(降解)后产生最终降解产物氢醌，氢醌尚会继续氧化为醌及其他聚合物等。
这几个成分在植物中的代谢途径、或提取过程中的水解路径为乌金苷→熊果苷→氢醌。
在采摘后处理和提取过程中，若处理不当的话，主要成分(6’-O-咖啡酰熊果苷或称乌金苷A)很易代谢或水解成毒性较大的熊果苷，再进一步代谢或水解成毒性更大的氢醌。这是一个非常关键的问题。本技术方案通过两个创新而有效的方案切实很好的解决了这个问题，进而使得的产品的安全性得到极大的提高，可使用的剂量也可增大，根据量效关系，产品的临床效果也变得显著改善。
其一：本技术方案发明者经过长期和大量的研究和亲身临床实践，发明了选择雀嘴茶特殊时期的顶叶、以及采用12小时内快速提取加工新鲜嫩叶，避免叶子在存放过程中有效成分乌金苷的水解而增加毒性；
其二，克服多酚类化合物提取分离时避免铁器的传统理论(或认知)，反而采用铸铁锅以及纯水提取，实施产地加工，达到把游离(或水解出)的氢醌在铁离子的催化下完成氧化-聚合-形成不溶于水的聚合物，进而易于除去的效果，确保产品的安全低毒；
其三，该技术方案，具有经济实用、易于产业化和产品安全性高的优点。
特殊的加工法和适当的剂量及对应的适应症，能更好的解决高尿酸及其并发症、尤其是严重危及生命的高尿酸性肾衰竭——按照本技术方案已成功解救了数名因高尿酸肾结石导致的生命垂危患者。
本技术方案发明者在深入研究人体尿酸生成、代谢、转运、排泄、沉积、变成结石、影响人体肾脏、远端血液流动不畅的地方，沉积变大的结石，刺激周围的组织发生炎症、引发病变。这是高尿酸危害的根本原因。再加上人体是个非常复杂和有机的整体，高尿酸及其并发症的预防、治疗、康复必须是个多靶点、多环节的综合整体治疗措施，方能凑效。而安全、稳定、高效的产品是关键。为此，发明者根据雀嘴茶安全性的研究，发现其主要毒性物质是氢醌和脂溶性较高的部分(如生物碱和萜类)，而对降尿酸及其并发症有更好效果的有效物质是水溶性较好的咖啡酰熊果苷类有效部位，尤其是发现选择在4-8月份的嫩叶中咖啡酰熊果苷含量较高时采摘和及时加工，此时相伴的有毒物质聚集的也相对较多，故须采用合适的提取工艺尽可能提取到有用物质，而又尽可能去除有害物质，这是本技术方案选择在铁制设备中全程纯水提取的绿色环保工艺路线的原因，因这些技术创新点：1、用材的讲究—选用4-8月份顶尖上新出的嫩叶，其6’-咖啡酰熊果苷含量最高；2、加工过程用铁器，促使氧化和聚合氢醌毒性物质等，进而将其除去；3、采用低温真空干燥，防止氧化和颜色变深；4、全程只用水作为唯一溶剂，成本低且绝对绿色环保。而成就了该工艺具有适用产地加工的实用价值、进而实现本技术发明目的。
在得到含量在85％以上的高含量6’-O-咖啡酰熊果苷提取物、而对苯二酚(氢醌)<0.08％的有效部位(即用于治疗用于高尿酸相关疾病的雀嘴茶提取物，简称QZC-1060)后，经过多年的临床实践，探索量-效关系，找到了实施患者分级服不同剂量的较佳剂量(0.5-8g)，作为治疗剂量这是一个比较高的剂量，需要把握其各种特性，才能获得安全有效的结果，这也是该技术方案具有意想不到的创新性和临床效果的地方。
由高尿酸引发的疾病中，对生命危害最重的是晚期并发症肾衰竭，肾衰竭是迄今尚难治疗的疾病，绝大部分患者只能采用透析法维持低质量的生存。能找到适合的移植肾源进行肾移植的话，也需要终生服用价高且副作用较大的抗排斥药物(环孢菌素等)。总之，肾衰竭是医学难治的疾病。本技术方案提供的产品具有意想不到的治疗效果。该法采用大剂量的6’-O-咖啡酰熊果苷2g-5g/d，分4-6次服用、尽量多喝水，在患者尚有一定尿液(>100ml/d)的情况下，使用这个剂量可以起到清洗肾脏、排出肾结石、恢复肾脏功能，直至逐步治愈(1个月左右)。这是了不起的成果。
发明者在临床中发现产品有效发挥作用的表征：尿液变臭(浓氨味)、接着变成墨色，之后状况就会逐渐好转起来。其中，亦有可能因为把尿道、肾脏结石逐步溶化过程中会划伤结石周围组织而有少量出血尿现象，这些都是产品有效发挥作用的表征。
总之，本技术方案提供了一个集成创新的高尿酸及其相关疾病的治疗产品、以及疗效表征。为医学难题—肾衰竭也提供了一个很有希望的产品。
在用确定的集成创新工艺得到安全、有效、可控的有效部位之后，根据对高尿酸及其并发症的深刻、独到理解，发明者根据研究确定不同的使用剂量和方法，本发明的产品可以全程用于高尿酸及其并发症的预防、治疗和康复，更能体现QZC-1060的大健康价值和更好的为高尿酸及其并发症患者提供完善、完整的解决方案：作为预防高尿酸的发生以及高尿酸患者进一步恶化，使用剂量为0.5g-2g/天；对于尿酸值在480μmol/L-580μmol/L的患者、已有痛风发生的患者，使用剂量为1.0g-3g/天；对于尿酸值高于580μmol/L的患者、已有痛风和尿酸结石发生的患者，使用剂量为1.5g-4g/天；对于尿酸值高于580μmol/L的患者、已有痛风、尿酸结石和肾衰竭发生的患者，使用剂量为2.0g-8g/天。
制剂的选择，口服制剂使用方便、成本低，适合于预防、治疗和康复使用，是一种基本的产品。对于危急重症，根据特殊的需要选用注射剂、甚至是静脉给药注射剂。
选择不同的原料，因其有效成分含量不一样，如5-7月份、新叶在3-5片、新鲜加工，则提取物中6’-O-咖啡酰熊果苷含量高；反之叶片质量差些，则提取物中含量少些。这是本技术方案在长期艰苦的实践中经过探索后的创新性发明成果。
雀嘴茶提取物用于制备治疗高尿酸以及并发症的药物，多靶点、多环节的，作用于高尿酸及其并发症的作用机制为抗炎、抑菌、抗氧化和降尿酸。
发明人在临床中发现本发明产品有效发挥作用的表征：尿液变臭(浓氨味)、接着变成墨色，之后状况就会逐渐好转起来。其中，亦有可能因为把尿道、肾脏结石逐步溶化过程中会划伤结石周围组织而有少量出血尿现象，这些都是产品有效发挥作用的表征。
本发明与现有技术相比，其有益效果为：
1、本发明之技术方案对雀嘴茶的前处理工艺条件进行了明确的限定，特定时间段采摘的雀嘴茶顶叶，需要在12小时内快速提取，避免鲜叶存放过程中有效成分乌金苷的水解而增加毒性；若不能在12小时内完成提取，就需要进行杀青并进行干燥处理，以便保存后待提取，可以有效避免乌金苷水解成毒性物质的产生。
2、本发明改变现有技术“多酚类化合物提取分离时避免铁器的传统理论或认知”，即“克服了技术偏见”，采用就近原料产地加工，使用铁质提取容器，达到把游离(或水解出)的氢醌在铁离子的催化下完成氧化-聚合-形成不溶于水的聚合物，进而易于除去的效果，确保产品的安全低毒。
3、本发明还具有经济实用、易于产业化和产品安全性高的优点。
4、本发明特殊的加工法和适当的剂量及对应的适应症，能更好的解决高尿酸及其并发症、尤其是严重危及生命的高尿酸性肾衰竭——按照本技术方案已成功解救了数名因高尿酸肾结石导致的生命垂危患者。
本发明在深入研究人体尿酸生成、代谢、转运、排泄、沉积、变成结石、影响人体肾脏、远端血液流动不畅的地方，沉积变大的结石，刺激周围的组织发生炎症、引发病变。这是高尿酸危害的根本原因。再加上人体是个非常复杂和有机的整体，高尿酸及其并发症的预防、治疗、康复必须是个多靶点、多环节的综合整体治疗措施，方能凑效。而安全、稳定、高效的产品是关键。
5、本发明根据雀嘴茶安全性的研究，发现其主要毒性物质是氢醌和脂溶性较高的部分(如生物碱和萜类)，而对降尿酸及其并发症有更好效果的有效物质是水溶性较好的6’-咖啡酰熊果苷类有效部位，尤其是发现选择在4～8月份的嫩叶中6’-咖啡酰熊果苷含量较高时采摘和及时加工，此时相伴的有毒物质聚集的也相对较多，故须采用合适的提取工艺尽可能提取到有用物质，而又尽可能去除有害物质，这是本技术方案选择在铁制设备中全程纯水提取的绿色环保工艺路线的原因。
6、本发明原料选用4～8月份顶尖上新出的嫩叶，其6’-咖啡酰熊果苷含量最高；采用低温真空干燥，防止氧化和颜色变深；全程只用水作为唯一溶剂，成本低且绝对绿色环保。不使用有机溶剂，避免了有机溶剂残留，对人体带来的危害。
7、本发明6’-O-咖啡酰熊果苷(有效部位)在85％以上，而对苯二酚(氢醌)则小于0.08％，其制剂量效比高，取得意想不到临床效果。不仅对由高尿酸引发的疾病中，对生命危害最重的是晚期并发症肾衰竭，肾衰竭是迄今尚难治疗的疾病，达到了比较理想的治疗效果。采用安全大剂量的6’-O-咖啡酰熊果苷服用，可以起到清洗肾脏、排出肾结石、恢复肾脏功能，1个月左右即可达到治愈效果。
附图说明
图1为雀嘴茶和对苯二酚对照品HPLC色图谱；其中，1-A为雀嘴茶的HPLC色图谱；1-B为对苯二酚对照品的HPLC色图谱；
图2为6’-O-咖啡酰熊果苷、咖啡酸和乌金苷A的HPLC图谱；从左到右，第一个色谱峰为咖啡酸；第二个色谱峰为6’-O-咖啡酰熊果苷；第三个色谱峰为乌金苷A；
图3为本发明雀嘴茶提取物的HPLC图谱；从左到右，第一个色谱峰为6’-O-咖啡酰熊果苷；第二个色谱峰为乌金苷A。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的详细描述。
本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用材料或设备未注明生产厂商者，均为可以通过购买获得的常规产品。
本发明除非另有说明，否则百分号为质量百分数。
实施例1
一种用于治疗高尿酸及其相关疾病的雀嘴茶提取物，其特征在于，所述雀嘴茶提取物中6’-O-咖啡酰熊果苷质量含量大于85％，对苯二酚质量含量小于0.08％。
实施例2
一种用于治疗高尿酸及其相关疾病的雀嘴茶提取物，其特征在于，所述雀嘴茶提取物中6’-O-咖啡酰熊果苷质量含量大于85％，对苯二酚质量含量小于0.08％。
还含有质量含量为0.5％的酚类化合物，所述的酚类化合物中包括乌金苷A。
实施例3
一种用于治疗高尿酸及其相关疾病的雀嘴茶提取物，其特征在于，所述雀嘴茶提取物中6’-O-咖啡酰熊果苷质量含量大于85％，对苯二酚质量含量小于0.08％。
还含有质量含量为15％的酚类化合物，所述的酚类化合物中包括乌金苷A、咖啡酸和熊果苷(三者质量比为5：1：2)。
实施例4
一种用于治疗高尿酸及其相关疾病的雀嘴茶提取物，其特征在于，所述雀嘴茶提取物中6-O-咖啡酰熊果苷质量含量大于85％，对苯二酚质量含量小于0.08％。
还含有质量含量为10％的酚类化合物，所述的酚类化合物中包括咖啡酸和熊果苷(质量比为1：9)。
实施例5
一种用于治疗高尿酸及其相关疾病的雀嘴茶提取物的制备方法，包括如下步骤：
步骤(1)，原料选择：选择4-8月份雀嘴茶新发嫩叶，采摘后将新鲜叶子用自来水清洗干净；
步骤(2)，提取：在铁质容器内对步骤(1)处理后的原料进行提取；从采摘到提取的时间不超过12h；
所述的提取的具体方法为：加饮用水至盖住原料，大火煮沸30分钟(以叶子煮烂为准)，放冷至40℃，再将叶子进一步搓碎，继续放冷至30℃时用过滤，滤液冷却至20℃时持续开始搅拌30分钟，待出现白色物质时候停止搅拌，避光下静置待结晶；
步骤(3)，后处理：在避光和避热条件下，移除结晶溶液的上清液，过滤或离心，取结晶物，然后用4℃的水清洗结晶物，将结晶物真空干燥，得到雀嘴茶提取物。
实施例6
一种用于治疗高尿酸及其相关疾病的雀嘴茶提取物的制备方法，包括如下步骤：
步骤(1)，原料选择：选择4-8月份雀嘴茶新发嫩叶，采摘后将新鲜叶子用自来水清洗干净；
步骤(2)，提取：在铁质容器内对步骤(1)处理后的原料进行提取；从采摘到提取的时间不超过12h；
所述的提取的具体方法为：加饮用水至盖住原料，大火煮沸30分钟(以叶子煮烂为准)，放冷至40℃，再将叶子进一步搓碎，继续放冷至30℃时用过滤，滤液冷却至20℃时持续开始搅拌10分钟，待出现白色物质时候停止搅拌，避光下静置待结晶；
步骤(3)，后处理：在避光和避热条件下，移除结晶溶液的上清液，过滤或离心，取结晶物，然后用4℃的水清洗结晶物，将结晶物真空干燥，得到雀嘴茶提取物。
若不能在12小时内及时提取的，对采摘后的茶叶先进行杀青处理，之后于55℃温度下干燥成干品，接着粉碎或切成过5目的粗粉后直接作为提取药材。
还包括精制步骤；所述的精制步骤为1次；
将清洗后的结晶物在避光惰性气体下，加入质量是结晶物质量2倍的水，于蒸汽浴上加热回流至结晶完全溶解，然后冷却至75℃，之后加入活性炭回流进行脱色，过滤，滤液自然冷却结晶，过滤，用5℃的水洗涤结晶体，后真空干燥，得到雀嘴茶提取物精制品。
活性炭与清洗后的结晶物的质量比50：1000；真空干燥的具体方法为：在100mmHg，65℃下，进行真空干燥14h。
实施例7
一种用于治疗高尿酸及其相关疾病的雀嘴茶提取物的制备方法，包括如下步骤：
步骤(1)，原料选择：选择4-8月份雀嘴茶新发嫩叶，采摘后将新鲜叶子用自来水清洗干净；
步骤(2)，提取：在铁质容器内对步骤(1)处理后的原料进行提取；从采摘到提取的时间不超过12h；
所述的提取的具体方法为：加饮用水至盖住原料，大火煮沸40分钟(以叶子煮烂为准)，放冷至60℃，再将叶子进一步搓碎，继续放冷至50℃时用过滤，滤液冷却至40℃时持续开始搅拌35分钟，待出现白色物质时候停止搅拌，避光下静置待结晶；
步骤(3)，后处理：在避光和避热条件下，移除结晶溶液的上清液，过滤或离心，取结晶物，然后用7℃的水清洗结晶物，将结晶物真空干燥，得到雀嘴茶提取物。
若不能在12小时内及时提取的，对采摘后的茶叶先进行杀青处理，之后于65℃温度下干燥成干品，接着粉碎或切成过10目的粗粉后直接作为提取药材。
还包括精制步骤；所述的精制步骤为2次；
将清洗后的结晶物在避光惰性气体下，加入质量是结晶物质量3倍的水，于蒸汽浴上加热回流至结晶完全溶解，然后冷却至85℃，之后加入活性炭回流进行脱色，过滤，滤液自然冷却结晶，过滤，用15℃的水洗涤结晶体，后真空干燥，得到雀嘴茶提取物精制品。
活性炭与清洗后的结晶物的质量比为10：1000；真空干燥的具体方法为：在80mmHg，55℃下，进行真空干燥10h。
实施例8
一种用于治疗高尿酸及其相关疾病的雀嘴茶提取物的制备方法，包括如下步骤：
步骤(1)，原料选择：选择4-8月份雀嘴茶新发嫩叶，采摘后将新鲜叶子用自来水清洗干净；
步骤(2)，提取：在铁质容器内对步骤(1)处理后的原料进行提取；从采摘到提取的时间不超过12h；
所述的提取的具体方法为：加饮用水至盖住原料，大火煮沸35分钟(以叶子煮烂为准)，放冷至50℃，再将叶子进一步搓碎，继续放冷至40℃时用过滤，滤液冷却至30℃时持续开始搅拌35分钟，待出现白色物质时候停止搅拌，避光下静置待结晶；
步骤(3)，后处理：在避光和避热条件下，移除结晶溶液的上清液，过滤或离心，取结晶物，然后用6℃的水清洗结晶物，将结晶物真空干燥，得到雀嘴茶提取物。
若不能在12小时内及时提取的，对采摘后的茶叶先进行杀青处理，之后于60℃温度下干燥成干品，接着粉碎或切成过8目的粗粉后直接作为提取药材。
还包括精制步骤；所述的精制步骤为1次或多次；
将清洗后的结晶物在避光惰性气体下，加入质量是结晶物质量2.5倍的水，于蒸汽浴上加热回流至结晶完全溶解，然后冷却至80℃，之后加入活性炭回流进行脱色，过滤，滤液自然冷却结晶，过滤，用10℃的水洗涤结晶体，后真空干燥，得到雀嘴茶提取物精制品。
活性炭与清洗后的结晶物的质量比为30：1000；真空干燥的具体方法为：在90mmHg，60℃下，进行真空干燥12h。
实施例9
一种用于治疗高尿酸及其相关疾病的雀嘴茶提取物的制备方法，包括如下步骤：
步骤(1)，选择4-8月份雀嘴茶新发嫩叶，采摘后将新鲜叶子用自来水清洗干净，若不能在12小时内及时提取的，要尽快进行杀青、<60±5℃低温干燥的干品处理。粉碎(或切)成过5-10目的粗粉后直接作为提取药材。
步骤(2)，取处理好的上述药材40公斤放入铁锅中，加饮用水至盖住叶子(8倍量水)，大火煮沸至叶子煮烂，放冷至50±10℃，再将叶子进一步搓碎，继续放冷至40℃±10℃时用纱布过滤，得红色滤液，冷却至30℃±10℃时持续开始缓缓搅拌，待出现白色物质时候，停止搅拌、避光下静置待结晶；
步骤(3)，在避光和避热下，小心移除上述结晶溶液的上清液，过滤、滤干、用5℃的纯水200ml清洗结晶一次、滤干，避光低温风干或阴干。也可用离心机甩滤沉淀物，甩干，收集滤饼，清洗结晶，即为雀嘴茶提取物。得类白色产物0.9-1.2公斤(干品计)。收率(相对鲜药材)2.25％-3％。
步骤(4)，需要6’-O-咖啡酰熊果苷纯度95％以上时，在避光充氮下，取上述样品1公斤于5L圆底烧瓶中，加入2-3倍量(2-3L)的蒸馏水，于蒸汽浴上加热回流溶解，稍冷至80±5℃后加入活性炭10-50g脱色回流10min，过滤，除去活性炭，收集滤液，滤液自然冷却结晶，过滤，用10±5℃的蒸馏水洗晶；
步骤(5)，取出提取物湿品，置入真空干燥箱内，在100mmHg、60±5℃下，进行真空干燥12±2h。得水份<15％，6’-O-咖啡酰熊果苷有效成分的含量为96.0％-99.5％之间的合格成品(简称QZC-1060)0.85公斤以上，该步收率在85％以上(干品计)。可以重复该操作，得到更纯的样品。
步骤(6)，上述合格的成品，用自动封口的食品级铝塑料袋分装成1kg/袋，置于干燥避光的环境中储存。用于制备治疗因高尿酸引起的相关疾病的产品。提取物产品名称简称QZC-1060。
实施例10
称取杀青干燥的雀嘴茶叶200g，粉碎成过10目的粗粉，将其加入5L铁锅中，加入20倍量(4000ml)的纯化水，加热煮沸0.5h，用冷却水冷却至60℃，用快速(粗)滤布过滤，得红色滤液；冷却至40℃时，持续开始缓缓搅拌30min，待出现白色物质时候，停止搅拌、避光下静置待结晶，24h。
在避光和避热下，小心移除上述结晶溶液的上清液，过滤、沥干水分，用4～10℃的纯水20ml，清洗结晶一次、滤干，避光低温风干或阴干，得类白色产物成品4.1g，即为高含量6’-O-咖啡酰熊果苷有效成分的提取物(简称雀嘴茶提取物)。经检测其中6’-O-咖啡酰熊果苷(乌金苷)含量85.6％、咖啡酸含量为5.76％、乌金苷A含量为0.12％，对苯二酚(氢醌)含量0.075％，收率2.0％。干品用自动封口的食品级铝塑料袋包装好，置于干燥避光的环境中储存备用。
实施例11
选择7～8月份采摘的雀嘴茶新发嫩叶，采摘后将新鲜叶子用自来水清洗干净，将处理好的茶叶40kg放入铁锅中，加原料6倍量的饮用水，使原料没入水中，大火煮沸40min，以茶叶煮烂为准。放冷至50℃，再将叶子进一步搓碎，继续放冷至40℃，用纱布过滤，得红色滤液；再冷却至35℃时，开始持续缓缓搅拌40min，待出现白色物质时候，停止搅拌、避光下静置待结晶，24h。在避光和避热下，小心移除上述结晶溶液的上清液，过滤并沥干水分，用4～10℃的纯水200ml清洗结晶一次，用离心机沥干水分，收集滤饼，清洗结晶，结晶体即为高含量6’-O-咖啡酰熊果苷有效成分的提取物。取出结晶品，置入真空干燥箱内，在100mmHg，60±5℃下，进行真空干燥14h，得到提取物干品。其中6’-O-咖啡酰熊果苷有效成分含量为90.2％的干品0.96公斤，其中乌金苷含量90.2％、乌金苷A含量为6.80％，对苯二酚(氢醌)含量0.067％，收率(相对于原料)2.4％。干品用自动封口的食品级铝塑料袋包装好，置于干燥避光的环境中储存备用。
实施例12
选择采摘于4～5月份的雀嘴茶新发嫩叶3～5叶片，采摘后于5小时内将新鲜叶子粉碎成过5目的粗粉后直接作为提取原料。将粗粉原料80kg放入铁质夹层提取罐中，加12倍于原料的饮用水并将原料没入水中。于提取罐夹层内通蒸汽加热煮沸35min，以叶子煮烂为准。再于夹层内通冷却水将提取罐冷至50℃左右，再将叶子进一步搓碎，继续冷至45℃，用纱布过滤，得红色滤液。滤液继续冷却至35℃，开始持续缓缓搅拌35min，待出现白色物质时，停止搅拌，避光下静置待结晶，24h。在避光和避热下，小心移除结晶溶液的上清液，过滤，沥干水分，用4～10℃的纯水400ml清洗结晶一次，滤干、避光低温风干或阴干。收集食品，清洗结晶，结晶即为高含量6’-O-咖啡酰熊果苷有效成分的提取物。取出结晶品，置入真空干燥箱内，在80mmHg，60±5℃下，进行真空干燥10h，得到白色提取物干品2.55公斤，其中乌金苷含量95.5％，乌金苷A含量为0.72％，对苯二酚(氢醌)含量0.059％，收率(相对鲜原料)3.18％。干品用自动封口的食品级铝塑料袋包装好，置于干燥避光的环境中储存备用。
实施例13
选择实施例12所得的结晶干品(其中乌金苷含量95.5％、乌金苷A含量为0.72％，对苯二酚(氢醌)含量0.059％)1kg，在避光充氮下，加入5L圆底烧瓶中，加入2～3倍量(2～3L)的蒸馏水，避光下于蒸汽浴上加热回流至结晶完全溶解，稍冷至80±5℃后加入活性炭25g，脱色回流10min，过滤，除去活性炭，收集滤液，滤液自然冷却结晶，过滤，用50ml 10℃的蒸馏水洗晶，将精制结晶品置入真空干燥箱内，在100mmHg，60±5℃下，进行真空干燥13h。得白色产物干品0.86kg，其中乌金苷含量99.2％、乌金苷A含量为0.19％，对苯二酚(氢醌)含量0.020％，收率86％。该工艺为精制工艺，重复本工序可以得到更高纯度的精制品。精制品用自动封口的食品级塑料袋分装成0.5kg/袋，置于干燥避光的环境中储存，备用于制备本发明的治疗因高尿酸引起的相关疾病的药品。
经过实验研究，发明人确认在本发明集成创新工艺下，可得到安全、有效、可控的雀嘴茶提取物之有效部位(简称QZC-1060)。根据对高尿酸及其并发症的深刻、独到理解，发明人通过动物及临床实验研究，确定了制剂的不同使用剂量和使用方法。本发明产品可以全程用于高尿酸及其并发症的预防、治疗和康复，更能体现QZC-1060的大健康价值和更好的为高尿酸及其并发症患者提供完善、完整的解决方案。
临床上，患者的使用剂量(按有效成分含量计)2～6g/天，1～3次/天为宜。如对于预防高尿酸的发生以及高尿酸进一步恶化患者，使用剂量为2～6g/天，1～3次/天。而对于尿酸值高于480μmol/L的患者、已有痛风发生的患者，使用剂量为2～3g/天，1～3次/天；对于尿酸值高于580μmol/L的患者、已有痛风和尿酸结石发生的患者，使用剂量为2～4g/天，2～3次/天；对于尿酸值高于580μmol/L的患者、已有痛风、尿酸结石和肾衰竭发生的患者，使用剂量为2～5g/天，3次/天。
本发明选择口服制剂使用方便，而且成本低，适合于预防、治疗和康复使用，是一种基本的产品。对于危急重症，根据特殊需要选用注射剂，静脉给药注射剂也是安全的。
实施例14
本发明雀嘴茶标准提取物胶囊剂的制备，按1000粒计，处方组成为：
雀嘴茶提取物(QZC-1060)50g，糊精16g，微晶纤维素9g，甲基淀粉钠7g，硬酯酸镁1g。并按下列工序制备：按处方量称取QZC-1060、糊精、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠，置湿法制粒机中，混合均匀(混合10min±1min)，加入体积浓度为50％的乙醇，设定制粒工艺参数(搅拌速度为700r·min-1、切碎速度1000r·min-1、制粒时间5min)，干燥，控制颗粒水分在5％，整粒(20目筛网)，取颗粒加入硬酯酸镁，混匀，然后装入2号胶囊即得。
实施例15
本发明雀嘴茶标准提取物胶囊剂的制备，按1000粒计，处方组成为：
雀嘴茶提取物(QZC-1060)110g，糊精28g，微晶纤维素10g，车前籽胶5g，魔芋多糖10g，甲基淀粉钠10g，硬酯酸镁1g。并按下列工序制备：按处方量称取QZC-1060、糊精、微晶纤维素、车前籽胶、魔芋多糖和羧甲基淀粉钠，置湿法制粒机中，混合均匀(混合10min±1min)，加入体积浓度为50％的乙醇，设定制粒工艺参数(搅拌速度为700r·min-1、切碎速度1000r·min-1、制粒时间5min)，干燥，控制颗粒水分在5％，整粒(20目筛网)，取颗粒加入适量硬酯酸镁，混匀，然后装入1号胶囊即得。
实施例16
本发明雀嘴茶标准提取物片剂的制备，按1000片计，处方组成为：
雀嘴茶提取物(QZC-1060)200g，糊精41g，微晶纤维素20g，车前籽胶5g，魔芋多糖10g，甲基淀粉钠18g，硬酯酸镁1g。并按下列工序制备：按处方量称取QZC-1060、糊精、微晶纤维素、车前籽胶、魔芋多糖和羧甲基淀粉钠，置湿法制粒机中，混合均匀(混合10min±1min)，加入体积浓度为50％的乙醇，设定制粒工艺参数(搅拌速度为700r·min-1、切碎速度1000r·min-1、制粒时间5min)，干燥，控制颗粒水分在5％，整粒(20目筛网)，取颗粒加入适量硬酯酸镁，混匀，然后按1000片用压片机压片，包装即得。
实施例17
本发明雀嘴茶标准提取物片剂的制备，按10000粒计，处方组成为：
雀嘴茶提取物(QZC-1060)6000g，糊精600g，微晶纤维素280g，车前籽胶180g，魔芋多糖200g，甲基淀粉钠140g，硬酯酸镁10g。并按下列工序制备：按处方量称取QZC-1060、糊精、微晶纤维素、车前籽胶、魔芋多糖和羧甲基淀粉钠，置湿法制粒机中，混合均匀(混合10min±1min)，加入入体积浓度为50％的乙醇，设定制粒工艺参数(搅拌速度为700r·min-1、切碎速度1000r·min-1、制粒时间5min)，干燥，控制颗粒水分在5％，整粒(20目筛网)，取颗粒加入适量硬酯酸镁，混匀，然后按10000片用压片机压片，包装即得。每片含600mg雀嘴茶提取物，临床中选用的是这个处方放大的产品。
实施例18
本发明雀嘴茶标准提取物颗粒剂的制备，按1000袋计，处方组成为：
雀嘴茶提取物(QZC-1060)400g，糊精53g，微晶纤维素31g，车前籽胶12g，魔芋多糖31g，甲基淀粉钠21g，硬酯酸镁1.1g。并按下列工序制备：按处方量称取QZC-1060、糊精、微晶纤维素、车前籽胶、魔芋多糖和羧甲基淀粉钠，置湿法制粒机中，混合均匀(混合10min±1min)，加入入体积浓度为50％的乙醇，设定制粒工艺参数(搅拌速度为700r·min-1、切碎速度1000r·min-1、制粒时间5min)，干燥，控制颗粒水分在5％，整粒(20目筛网)，然后按1000袋包装入包装袋密封即得。
实施例19
雀嘴茶标准提取物口服液，按1000瓶(10ml/瓶)计，处方组成为：雀嘴茶提取物(QZC-1060)170g，车前籽胶40.3g，魔芋多糖61g，甜叶菊苷7g，上述原料混合，加水至处方量10000ml，溶解，再按1000瓶分装、灭菌，即得。
实施例20
雀嘴茶标准提取物冻干粉针剂，按1000支(2ml/支)计，处方组成为：雀嘴茶标准提取物(QZC-1060，其中乌金苷含量>99％)100g，甘露醇50g，注射用水2000ml。注射用冻干粉针剂的制备工艺为：在CGMP条件下，取处方量原料，加注射用水至1600ml，温热至50℃内，溶解后再加注射用水至总配液量2000ml，搅匀，先经0.45μm粗滤，再经0.2μm精滤，在5ml西林瓶里灌装2ml药液，冷冻真空干燥，即得规格为100mg的注射用冻干粉针。
实施例21
雀嘴茶标准提取物冻干粉针剂，按1000支(2ml/支)计，处方组成为：雀嘴茶标准提取物(QZC-1060，其中乌金苷含量>99％)200g，甘露醇60g，注射用水2000ml。注射用冻干粉针剂的制备工艺为：在CGMP条件下，取处方量原料，加注射用水至1600ml，温热至50℃内，溶解后再加注射用水至总配液量2000ml，搅匀，先经0.45μm粗滤，再经0.2μm精滤，在5ml西林瓶里灌装2ml药液，冷冻真空干燥，即得规格为200mg的注射用冻干粉针。
实施例22
雀嘴茶标准提取物冻干粉针剂，按1000支(2ml/支)计，处方组成为：雀嘴茶标准提取物(QZC-1060，其中乌金苷含量>99％)400g，甘露醇80g，注射用水2000ml。注射用冻干粉针剂的制备工艺为：在CGMP条件下，取处方量原料，加注射用水至1600ml，温热至50℃内，溶解后再加注射用水至总配液量2000ml，搅匀，先经0.45μm粗滤，再经0.2μm精滤，在5ml西林瓶里灌装2ml药液，冷冻真空干燥，即得规格为400mg的注射用冻干粉针。
本技术方案是将雀嘴茶的富含咖啡酰熊果苷类有效部位，合适的剂量和合适的制剂统筹集成创新成集有效预防、治疗和康复高尿酸及其并发症的创新方案，其集成了多学科之大成。
本发明技术效果验证实验：
一、不同咖啡酰熊果苷类含量的雀嘴茶提取物QZC-1060的药效筛选实验
1、实验目的
以氧嗪酸钾诱导的小鼠高尿酸血症模型为药效筛选平台，以非布司他、别嘌呤醇为阳性对照药，以咖啡酰熊果苷等摩尔量进行各样品剂量折算，测定血尿酸，开展雀嘴茶总提取物、咖啡酰熊果苷含量为①65％、②70％、③75％、④80％、⑤85％、⑥90％、⑦95％、⑧99.5％的雀嘴茶提取物的降尿酸作用研究，比较各样品降尿酸的活性。(按前述提取工艺进行提取，选用不同的药材来获得不同含量的提取物，在此不赘述)
2、实验材料
2.1实验动物：KM小鼠，雄性，18～22g，由湖南斯莱克景达实验动物有限公司(许可证号：SCXK(湘)2009-0004)提供，适应性喂养3天后，用于实验。
2.2实验样品：①65％、②70％、③75％、④80％、⑤85％、⑥90％、⑦95％、⑧99.5％的雀嘴茶提取物；⑨阳性药非布司他(含量98％以上的原料药)；⑩阳性药别嘌呤醇(上海信谊药业)。
2.3实验试剂：氧嗪酸钾(Sigma)，0.5％CMC-Na
3、实验方法
3.1试剂配制：①受试样品与阳性对照药非布司他及别嘌醇：均用纯水配制混匀；②氧嗪酸钾：临用前采用0.5％CMC-Na配制混匀。
3.1分组和给药
由于筛选样品多，故将分为两批实验开展筛选工作，两批实验分组不同。
3.1.1第一批：雄性小鼠160只随机分为正常组、模型组、①提取物组高、中、低剂量组、②提取物组高、中、低剂量组、③提取物组高、中、低剂量组、④提取物组高、中、低剂量组、阳性药非布司他(含量98％以上的原料药)组、阳性药别嘌呤醇组，共16组，每组10只；正常组和模型组灌胃生理盐水，各给药组灌胃相应药物(高、中、低剂量分别是5mg/kg，10mg/kg，20mg/kg)，0.2ml/10g，别嘌呤醇组按30mg/kg剂量灌胃，给药5天。
3.1.2第二批：雄性小鼠160只随机分为正常组、模型组、总提取物高、中、低剂量组，⑤提取物组高、中、低剂量组；⑥提取物组高、中、低剂量组；⑦提取物组高、中、低剂量组；⑧提取物组高、中、低剂量组；阳性药非布司他(含量98％以上的原料药)组，阳性药别嘌呤醇组，共16组，每组10只；正常组和模型组灌胃生理盐水，各给药组灌胃相应药物(高、中、低剂量分别是5mg/kg，10mg/kg，20mg/kg)，0.2ml/10g，别嘌呤醇组按30mg/kg剂量灌胃，非布司他组按6mg/kg剂量灌胃，给药5天。
3.2高尿酸血症模型的建立及指标检测
最后一次给药前1h，除正常组外均腹腔注射氧嗪酸钾盐(450mg/kg)，正常组给予等剂量的0.5％CMC-Na，给药后1h后从小鼠眼眶后静脉丛进行采血，在室温下静置1h后，3500r/min离心15min分离血清，采用全自动生化仪检测血清尿酸(UA)水平。
4、实验结果
实验结果：由表3可见，氧嗪酸钾所致的高尿酸血症小鼠模型组尿酸较正常组显著性升高，而阳性组别嘌醇和非布司他可显著性降低血清尿酸(P＜0.05)；给药组中，②提取物组高剂量组显示有效趋势、到⑤85％提取物组低剂量组已出现显著降低小鼠血清尿酸(P＜0.05)。部分结果如表3所示。
表3不同含量雀嘴茶提取物对高尿酸血症小鼠血清尿酸(UA)的影响
注：与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与正常组比较，#P＜0.05，##P＜0.01
小结：研究结果显示70％提取物组高剂量组显示有效趋势、到⑤85％提取物组低剂量组已出现显著降低小鼠血清尿酸(P＜0.05)。含量再增加，活性仍有一定程度的提升。加上考虑本品的长期用药的特性，对安全性有更高的要求，所以从效果-安全综合考虑，选择85.0％-99.5％的咖啡酰熊果苷具有较好的安全有效性。
5、讨论
5.1氧嗪酸钾为尿酸酶抑制剂，通过抑制小鼠体内尿酸酶的活性，使尿酸分解减少，从而达到血清尿酸急剧升高，造成高尿酸血症模型。此模型为国际公认高尿酸血症动物模型，本实验采用此模型来进行雀嘴茶咖啡酰熊果苷有效部位的筛选，实验结果中显示，模型组尿酸较正常组显著性升高，阳性药可显著性降低其尿酸，提示，本实验建立的高尿酸血症模型成功，可以用于药效评价。
5.2 8个受试样品中，70％提取物组高剂量组显示有效趋势、到⑤85％提取物组低剂量组已出现显著降低小鼠血清尿酸(P＜0.05)，而纯度更高的90％、95％、99.5％未表现出更明显的降尿酸作用。提示，咖啡酰熊果苷有效部位的降尿酸效应不随其纯度的提高而增大。这可能与雀嘴茶咖啡酰熊果苷有效部位的吸收特性有关。
二、雀嘴茶提取物对阿霉素致慢性肾炎大鼠尿蛋白的影响实验
1、受试物
雀嘴茶提取物QZC-1060(乌金苷含量95.5％)；盐酸贝那普利片，国药准字H20030514，10mg/片，北京诺华制药有限公司生产，批号X1774。
2、主要试剂
注射用盐酸多柔比星(又称盐酸阿霉素)，国药准字H44024359，10mg/瓶，深圳万乐药业有限公司，批号0806E1，2～8℃保存，临用时用氯化钠注射液配成1mg/mL；氯化钠注射液，500ml/瓶，贵州天地药业有限责任公司，批号A11102207；肝素钠，500mg/支，北京鼎国生物技术有限责任公司，批号85810250；尿蛋白定量试剂盒(CBB法)，96T/份，南京建成生物工程研究所，批号20120316；SOD试剂盒(黄嘌呤氧化法)，96T/份，南京建成生物工程研究所，批号20120313；MDA试剂盒(硫代巴比妥酸法)，96T/份，南京建成生物工程研究所，批号20120310；NO试剂盒(一步法)，96T/份，南京建成生物工程研究所，批号20120802。
3、动物
SPF级雄性SD大鼠，6～8周龄，体重200～250g，由昆明医学院实验动物中心提供，生产许可证：SCXK(滇)2005-0008，发证机关：昆明市科学技术局；饲养于IVC动物实验室，温度20～25℃(日温差≤3℃)，湿度40％～70％，照明12h：12h明暗交替，照度150～300lx，噪音≤60dB，实验动物使用许可证：SYXK(滇)2011-0004，发证单位：昆明市科学技术局；PVC透明塑料盒群养，每箱≤6只，每日喂饲鼠用配合饲料，自由饮水，视情况更换笼具和垫料，饲料来源于昆明医学院实验动物中心，生产许可证：SCXK(滇)2011-0004，发证单位：昆明市科学技术局。
4、试验方法
将雄性SD大鼠40只在IVC动物房适应性喂养10天，除留10只为正常对照外，其余30只用于造模，并分别于1天、7天、14天，按2、2、1mg/kg的剂量给每只大鼠尾静脉注射0.1％盐酸阿霉素溶液，正常对照组注射等容量的生理盐水。造模21天收集尿液，测定24小时尿蛋白，结果显示大部分动物24h的尿蛋白普遍升高，表明模型成功。
将造模成功的30只大鼠，按24h尿蛋白总量和体重均匀分为3组：模型对照组10只、洛丁新组10只、雀嘴茶提取物剂量组各10只。各组动物每日按剂量灌胃给药一次，连续56d，容量均为10mL/kg.bw，正常和模型对照组给予等容量1％CMC-Na。每周称重1次，根据体重调整给药量。
5、实验结果
各组给药前24h尿蛋白水平大致均匀，并显著高于空白对照组，表明给药前各模型组肾脏的损伤程度大致相当。给药期间，模型对照组动物尿蛋白水平持续升高，均明显高于正常对照组；各给药组连续给药56天，对盐酸阿霉素所致尿蛋白升高有不同程度的降低，其中阳性对照组给药21天后、QZC-1060低剂量组给药49天、56天和高剂量组在给药7天、28、35、42、56天尿蛋白测定结果明显低于模型对照组。
表明，QZC-1060对肾损伤有治疗作用。
表4给药8周对模型大鼠尿蛋白的影响(±SD)
与对照组相比：▲/▲▲P<0.05/0.01；与模型组相比：*/**P<0.05/0.01。
由以上表格可以看出雀嘴茶提取物以20mg/kg剂量连续灌胃给药8周，能明显降低阿霉素肾炎模型大鼠的蛋白尿，对肾脏的损伤以及肾功能有明显的保护作用。
表5 93例痛风病人服用雀嘴茶片改善效果观察对比表
总评价人数：93例，其中有效77例，不明显(无效)16例。在有效病例中，好者为41例，占44.1％；缓解者为36例，占38.7％；不明显(无效)者为16例，占17.2％。
总有效率(％)＝好+缓解＝44.1+38.7＝82.8
注：人体临床研究用的样品为实施例8放大至10万片的样品，每片含600mg提取物。
三、雀嘴茶提取物(QZC-1060)小鼠灌胃急性毒性试验
1、试验材料
试验样品：QZC-1060(乌金苷含量90.2％)
实验动物：昆明医科大学试验动物中心，SPF级昆明种小鼠，实验动物许可证号：SCXK(滇)2015-0002。
2、试验方法
动物分组：60只小鼠，每组10只、雌雄各半，分成空白组、试验5个剂量组，即6000、4000、2000、1000、500mg/kg。
试验样品用蒸馏水配制成混悬液，5个剂量组动物均按每次20ml/kg.bw等容量灌胃，依据每只小鼠的体重计算给药体积，共两次灌胃给予以达到最终设计的给药剂量(6000、4000、2000、1000、500mg/kg)，两次给药间隔为7小时，每次灌胃前将受试物混悬液摇匀。
按常规连续观察14天。
统计方法：采用SPSS12.0软件，用Bliss统计方法对各组动物死亡数进行统计分析，计算LD50值。
3、试验结果
试验结果如表6。
表6 QZC-1060小鼠灌胃急性毒性试验结果
4、结论
在毒性剂量下，产生毒性的可能靶器官为肝脏和神经系统。对雌性的毒性可能大于雄性。LD50值＝5437.9mg/kg，95％可信区间为3790.1-15403mg/kg，参照《化学品毒性鉴定技术规范》急性毒性分级，雀嘴茶提取物QZC-1060为低毒性物质。
四、典型病例
1、塗某，78岁，男，湖北省襄樊市地质队退休工人，患痛风20余年，手脚有结石，但不大，左肾结石达2.2公分，诊断为中度肾积水，北京医院住院没病床。2019年7月开始服用本发明雀嘴茶片，每天12片(7200毫克/日)至今。
2019年8月31日检查肌酐227，尿素11.69，尿酸704。2019年10月检查肌肝下降为175，尿素7.09，尿酸584，痛风也不痛了，每天可行走五公里以上，并且能做重体力活，饮食起居自如。2020年1月4日检查肌酐162，尿酸543，尿素11.44。原来三楼上楼下楼都困难，现可提瓶装25公斤水上下自如。20年6月21日复查肌酐158.8，尿素10.59，尿酸485μmol/L。
2、邱某，男64岁，家族性高尿酸血症，家族中有多人尿酸较高，本人体检尿酸在500-700μmol/L范围波动，长期交替服用别嘌醇和苯溴马隆控制，但近年来感觉双脚底无触地感觉，X光检查是尿酸结节沉积在足底组织。
2020-11-26血尿酸检查796μmol/L，当心长期高尿酸会产生并发症。2020-12-11日开始服用本发明雀嘴茶片，3片/日，早中晚各一片。2020-12-27在家自测服茶片后近半月的尿酸指标，降到503，自述，左脚底有一点感觉。2021-1-9日自测尿酸383，1-16日自测尿酸428，尿酸回升，估计是茶片量小了，2021-17日加量6片/日，2片/3次。21-1-25自测尿酸486，无疼痛和其它不适感觉，2021-1-31日自测尿酸356，2021-2-1改为4片/日，2021-2-18自测尿酸368。服用茶片4片/日控制，效果比较稳定，2021-3月血尿酸在355-368范围，4月改为每日服3片，早中晚各一片，血尿酸也能控制在355-368μmol/L范围。
3、杨某，男，65岁，几年前体检发现血尿酸高，520umol/L，自己注意饮食后会降低到480，没疼过。2018年去泰国玩喝啤酒海鲜后出现疼痛，回来后用苯溴马隆和去痛药治疗过。近两年每年疼痛发几次。2020-12-23开始服本发明雀嘴茶片，3片/日，早中晚各一片，服茶片1个月(21-1-23随访)，自测尿酸370-420之间，也没忌口，没发病，感觉有效。春节期间出去玩，吃了3次火锅和2次酸辣鱼，有几天没服茶片，尿酸上升到570，还好没疼痛，改为吃6片/日，2片/3次，吃了几天尿酸降到460。2021-3月改为3片/日，尿酸控制在400μmol/L左右。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
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