阅读说明：本技术 一种肉桂酸衍生物及其制备方法 (Cinnamic acid derivative and preparation method thereof ) 是由 刘文锋 陈勃旭 于 2020-05-11 设计创作，主要内容包括：本发明提供一种肉桂酸衍生物及其制备反方法,在氮气保护下将2mmol肉桂酸、D-丙氨酸甲酯盐酸盐、2.4mmol缩合试剂、1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑加入50ml溶剂中,缓慢滴加0.2mmol催化剂,室温反应2h,浓缩后用硅胶柱分离,然后在强碱的作用下进行水解,接着加酸进行酸化,调节pH值；然后加入1mmol D-苯丙氨酸甲酯盐酸盐、1.2mmol缩合试剂和1.2mmol HOAT、30ml溶剂,0.1mmol催化剂,室温反应2h,浓缩后用硅胶柱纯化,然后在强碱的作用下进行水解,加酸进行酸化,调节pH值。本发明的化合物具有优良的抑制神经炎症活性,能够应用于制备神经炎症抑制剂和治疗老年痴呆药物中。(The invention provides a cinnamic acid derivative and a preparation method thereof, wherein 2mmol cinnamic acid, D-alanine methyl ester hydrochloride, 2.4mmol condensation reagent and 1-hydroxy-7-azobenzotriazole are added into 50ml solvent under the protection of nitrogen, 0.2mmol catalyst is slowly dripped, the reaction is carried out for 2h at room temperature, the reaction is separated by a silica gel column after concentration, then the hydrolysis is carried out under the action of strong base, then the acidification is carried out by adding acid, and the pH value is adjusted; then adding 1mmol of D-phenylalanine methyl ester hydrochloride, 1.2mmol of condensation reagent, 1.2mmol of HOAT, 30ml of solvent and 0.1mmol of catalyst, reacting for 2h at room temperature, concentrating, purifying by using a silica gel column, hydrolyzing under the action of strong base, adding acid for acidification, and adjusting the pH value. The compound has excellent neuroinflammation inhibiting activity, and can be applied to preparing neuroinflammation inhibitors and medicaments for treating senile dementia.)

一种肉桂酸衍生物及其制备方法

技术领域

本发明涉及医药技术领域，尤其是一种肉桂酸衍生物及其制备方法。

背景技术

炎症反应与老年痴呆等神经退行性疾病有着密切的联系。就老年痴呆而言，Aβ形成的寡聚体和多聚体能通过各种受体激活脑部的免疫细胞-小胶质细胞和星形胶质细胞，进而引发局部的慢性炎症反应。被激活的神经胶质细胞会大量释放促炎症细胞因子或其他炎症介质。这些促炎症细胞因子或其他炎症介质能不同程度的对神经元造成损伤，或直接诱导神经元的凋亡。同时，凋亡的神经元能进一步激活未活化的神经胶质细胞，形成恶性循环不断造成神经元的损伤和突触功能的异常。大量的研究结果表明，由小胶质细胞过度激活导致的神经炎症是造成神经元突触功能异常和认知能力下降的最直接的原因之一。

许多研究指出。当前现有的临床药物仅对早期老年痴呆有疗效，因此开发有效的抗老年痴呆药物备受关注。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种肉桂酸衍生物及其制备方法，本发明制备的肉桂酸衍生物具有神经炎症抑制活性，能够作为治疗神经退行性疾病药物使用。

本发明的技术方案为：一种肉桂酸衍生物，该所述肉桂酸衍生物的结构式如下：

其中，R₁、R₃和R₄分别为H、OCH₃中的任何一种；R₃为CH₃、OCH₃、F、CF₃、中的任何一种；

该所述的肉桂酸衍生物具有醛糖还原酶抑制活性。

优选的，所述的肉桂酸衍生物选自下列化合物中的一种或几种的混合：

1.21.(E)-(3-(对甲苯基)丙烯酰基)-D-丙氨酸甲酯(2a)；

1.22.(E)-(3-(对甲氧基苯基)丙烯酰基)-D-丙氨酸甲酯(2b)；

1.23.(E)-(3-(对氟苯基)丙烯酰基)-D-丙氨酸甲酯(2c)；

1.24.(E)-(3-(对三氟甲基苯基)丙烯酰基)-D-丙氨酸甲酯(2d)；

1.25.(E)-(3-(3,4,5-三甲氧基苯基)丙烯酰基)-D-丙氨酸甲酯(2e)；

1.26.(E)-(3-(对甲苯基)丙烯酰基)-D-丙氨酸(3a)；

1.27.(E)-(3-(对甲氧基苯基)丙烯酰基)-D-丙氨酸(3b)；

1.28.(E)-(3-(对氟苯基)丙烯酰基)-D-丙氨酸(3dc)；

1.29.(E)-(3-(对三氟甲基苯基)丙烯酰基)-D-丙氨酸(3d)；

1.30.(E)-(3-(3,4,5-三甲氧基苯基)丙烯酰基)-D-丙氨酸(3e)；

1.31.(E)-3-(对甲苯基)丙烯酰基)-D-丙氨酸-D-苯丙氨酸甲酯(4a)；

1.32.(E)-3-(对甲氧基苯基)丙烯酰基)-D-丙氨酸-D-苯丙氨酸甲酯(4b)；

1.33.(E)-3-(对氟苯基)丙烯酰基)-D-丙氨酸-D-苯丙氨酸甲酯(4c)；

1.34.(E)-3-(对三氟甲基苯基)丙烯酰基)-D-丙氨酸-D-苯丙氨酸甲酯(4d)；

1.35.(E)-3-(3,4,5-三甲氧基苯基)丙烯酰基)-D-丙氨酸-D-苯丙氨酸甲酯(4e)；

1.36.(E)-3-(对甲苯基)丙烯酰基)-D-丙氨酸-D-苯丙氨酸(5a)；

1.37.(E)-3-(对甲氧基苯基)丙烯酰基)-D-丙氨酸-D-苯丙氨酸(5b)；

1.38.(E)-3-(对氟苯基)丙烯酰基)-D-丙氨酸-D-苯丙氨酸(5c)；

1.39.(E)-3-(对三氟甲基苯基)丙烯酰基)-D-丙氨酸-D-苯丙氨酸(5d)；

1.40.(E)-3-(3,4,5-三甲氧基苯基)丙烯酰基)-D-丙氨酸-D-苯丙氨酸(5e)。

优选的，本发明还提供一种肉桂酸衍生物的制备方法，包括以下步骤：

1)、在氮气保护下，将2.0mmol肉桂酸、2.0mmol D-丙氨酸甲酯盐酸盐、2.4mmol缩合试剂和2.4mmol 1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑(HOAT)加入50ml溶剂中，缓慢滴加0.2mmol有机碱作为催化剂，室温反应2h，浓缩后用硅胶柱分离得到第一步产物2a-e；

2)、然后取第一步产物1.5mmol在强碱的作用下进行水解，接着加酸进行酸化，调节pH值得第二步产物3a-e；

3)、取第二步产物1.0mmol、1.0mmol D-苯丙氨酸甲酯盐酸盐、1.2mmol缩合试剂和1.2mmol HOAT加入30ml溶剂中，加入0.1mmol有机碱作为催化剂，室温反应2h，浓缩后用硅胶柱纯化得第三步产物4a-e；

4)、然后取第四步产物0.5mmol在强碱的作用下进行水解，接着加酸进行酸化，调节pH值即第四步产物肉桂酸衍生物5a-e，反应路线如下所示：

优选的，步骤1)和步骤3)中，所述的溶剂为二氯甲烷或四氢呋喃。

优选的，步骤1)和步骤3)中，所述的缩合试剂为氯甲酸乙酯、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)、N,N-二异丙基碳二亚胺(DIC)和六氟磷酸苯并***-1-基-氧基三吡咯烷基磷(PyBOP)中的一种与1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑(HOAT)按1:1摩尔配比混合而成。

优选的，步骤1)和步骤3)中，所述的有机碱为二乙基胺(EEA)、三乙基胺(TEA)和二异丙基乙胺(DIPEA)中的一种。

优选的，步骤2)和步骤4)中，所述的强碱为氢氧化钠、氢氧化钾和氢氧化锂中的一种。

优选的，步骤2)和步骤4)，所加的酸为体积浓度为1-10％的盐酸或硝酸溶液中的一种，调节的pH值为1-4。

优选的，本发明还提供肉桂酸衍生物的应用。

优选的，所述肉桂酸衍生物在制备神经炎症抑制剂中的应用。

优选的，所述的肉桂酸衍生物在制备治疗阿尔茨海默病药物中的应用。

本发明的有益效果为：

1、本发明提供的肉桂酸衍生物可应用于神经炎症的抑制活性以及在治疗神经退行性疾病，尤其是用于治疗老年痴呆；

2、本发明提供的肉桂酸衍生物以小胶质细胞系BV-2细胞为模型，测定不同浓度所述肉桂酸衍生物对BV-2细胞产生的NO的抑制作用，结果显示所述肉桂酸衍生物4e对NO的半数抑制浓度IC₅₀为16.2μmol/L；效果优于多奈哌齐，可用于治疗阿尔茨海默病；

3、本发明的肉桂酸衍生物制备方法简单，制备效率高，且效果优于多奈哌齐。

具体实施方式

下面对本发明的具体实施方式作进一步说明：

实施例1

本实施例提供肉桂酸衍生物2a的制备

(1)所述肉桂酸衍生物2a的制备：氮气保护下将2.0mmol对甲基肉桂酸、2.0mmolD-丙氨酸甲酯盐酸盐、2.4mmol的EDCI.HCl和2.4mmol的HOAT加入50ml二氯甲烷中，缓慢滴加0.2mmol三乙胺作为催化剂，室温反应2h，浓缩后用硅胶柱分离得到白色固体产物2a。

本实施例的产率为81.4％；熔点为171-173℃；

(c＝0.5,CH₂Cl₂)；¹HNMR(500MHz,CDCl₃)δ7.59(d,J＝15.6Hz,1H)，7.37(d,J＝8.0Hz,2H),7.15(d,J＝7.9Hz,2H),6.43(dd,J＝19.7,11.4Hz,2H),4.74(p,J＝7.2Hz,1H),3.76(s,3H),2.34(s,3H),1.46(d,J＝7.2Hz,3H).¹³C NMR(126MHz,CDCl₃)δ173.81,165.62,141.66,140.13,131.90,129.55,127.88,119.00,52.59,48.19,21.45,18.60.ESI-MS:m/z 270.09([M+Na]⁺)。

实施例2

本实施例提供肉桂酸衍生物2b的制备

制备方法同实施例1，将对甲基肉桂酸2.0mmol改为对甲氧基肉桂酸2.0mmol，得白色固体产物2b。

本实施例产率为83.8％；熔点为144-146℃；

(c＝0.5,CH₂Cl₂)；¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ7.57(d,J＝15.6Hz,1H),7.41(t,J＝5.7Hz,2H),6.89–6.84(m,2H),6.40(d,J＝7.3Hz,1H),6.32(d,J＝15.6Hz,1H),4.74(p,J＝7.2Hz,1H),3.81(s,3H),3.76(s,3H),1.46(d,J＝7.2Hz,3H).¹³C NMR(126MHz,CDCl₃)δ173.86,165.75,160.95,141.30,129.47,127.38,117.65,114.23,77.35,77.09,76.84,55.36,52.57,48.16,18.61.ESI-MS:m/z 286.15([M+Na]⁺)。

实施例3

本实施例提供肉桂酸衍生物2c的制备

步骤同实施例1，将对甲基肉桂酸2.0mmol改为对氟肉桂酸2.0mmol，得白色固体产物2c。

本实施例的产率为87.1％；熔点为189-190℃；

(c＝0.5,CH₂Cl₂)；¹HNMR(500MHz,CDCl₃)δ7.57(d,J＝15.6Hz,1H),7.47–7.41(m,2H),7.06–6.99(m,2H),6.48(d,J＝7.2Hz,1H),6.36(d,J＝15.6Hz,1H),4.78–4.69(m,1H),3.77(s,3H),1.46(d,J＝7.2Hz,3H).¹³C NMR(126MHz,CDCl₃)δ173.82,165.24,164.58,162.59,140.43,130.88,129.68,119.78,116.01,115.84,52.63,49.31,18.54.ESI-MS:m/z 274.60([M+Na]⁺)。

实施例4

本实施例提供肉桂酸衍生物2d的制备

步骤同实施例1，将对甲基肉桂酸2.0mmol改为对三氟甲基肉桂酸2.0mmol，得白色固体产物2d。

本实施例的产率为79.3％；熔点为212-213℃；

(c＝0.5,CH₂Cl₂)；¹HNMR(500MHz,CDCl₃)δ7.63–7.51(m,5H),6.63(d,J＝7.3Hz,1H),6.52(d,J＝15.6Hz,1H),4.75(p,J＝7.2Hz,1H),3.77(s,3H),1.47(d,J＝7.2Hz,3H).¹³C NMR(126MHz,CDCl₃)δ173.78,164.77,139.94,138.04,131.41,131.15,127.98,126.15,124.95,122.79,122.51,77.33,77.07,76.82,52.67,48.28,18.45.ESI-MS:m/z 324.19([M+Na]⁺)。

实施例5

本实施例提供肉桂酸衍生物2e的制备

步骤同实施例1，将对甲基肉桂酸2.0mmol改为3,4,5-三甲氧基肉桂酸2.0mmol，得白色固体产物2e。

本实施例的产率为83.8％；熔点为137-138℃；

(c＝0.5,CH₂Cl₂)；¹HNMR(500MHz,CDCl₃)δ7.50(d,J＝15.5Hz,1H),6.68(s,2H),6.47(d,J＝7.4Hz,1H),6.36(d,J＝15.5Hz,1H),4.73(p,J＝7.2Hz,1H),3.85(d,J＝1.5Hz,9H),3.76(s,3H),1.45(d,J＝7.2Hz,3H).¹³C NMR(126MHz,CDCl₃)δ173.85,165.33,153.33,141.57,139.50,130.26,119.45,104.88,60.96,56.08,52.61,48.17,18.57.ESI-MS:m/z 346.18([M+Na]⁺)。

实施例6

肉桂酸衍生物3a的制备

取1.0mmol的2a在0.15mmol的氢氧化锂的作用下进行水解，接着加质量浓度为10％的盐酸溶液进行酸化，调节pH值为1-4得白色固体产物3a。

本实施例的产率为54.8％；熔点为240-241℃；

(c＝0.5,MeOH)；¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.43(d,J＝7.3Hz,1H),7.45(d,J＝8.1Hz,2H),7.39(d,J＝15.8Hz,1H),7.22(d,J＝8.0Hz,2H),6.66(d,J＝15.8Hz,1H),4.32(p,J＝7.3Hz,1H),2.31(s,3H),1.31(d,J＝7.3Hz,3H).¹³C NMR(126MHz,DMSO-d₆)δ174.33,164.93,139.41,139.17,132.15,129.67,127.63,120.77,47.74,21.05,17.40.ESI-MS:m/z 256.39([M+Na]⁺)。

实施例7

肉桂酸衍生物3b的制备

步骤同实施例6，将1.0mmol的2a改为1.0mmol的2b，得白色固体产物3b。

本实施例的产率为66.2％；熔点为219-220℃；(c＝0.5,MeOH)；¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.35(d,J＝7.4Hz,1H),7.56–7.48(m,2H),7.39(d,J＝15.8Hz,1H),7.03–6.93(m,2),6.57(d,J＝15.8Hz,1H),4.33(t,J＝7.3Hz,1H),3.79(s,3H),1.32(d,J＝7.3Hz,3H).¹³C NMR(126MHz,DMSO-d₆)δ174.76,165.43,160.83,139.27,129.59,127.85,119.71,114.87,55.71,48.10,17.83.ESI-MS:m/z 272.10([M+Na]⁺)。

实施例8

肉桂酸衍生物3c的制备

步骤同实施例6，将1.0mmol的2a改为1.0mmol的2c，得白色固体产物3c。

本实施例的产率为70.1％；熔点为233-234℃；

(c＝0.5,MeOH)；¹HNMR(500MHz,DMSO)δ8.44(d,J＝7.3Hz,1H),7.65–7.60(m,2H),7.43(d,J＝15.8Hz,1H),7.25(t,J＝8.8Hz,2H),6.66(d,J＝15.8Hz,1H),4.32(p,J＝7.3Hz,1H),1.32(d,J＝7.3Hz,3H).¹³C NMR(126MHz,DMSO)δ174.67,165.05,164.17,162.20,138.38,131.92,130.17,122.08,116.50,116.32,48.15,17.80.ESI-MS:m/z 260.12([M+Na]⁺)。

实施例9

肉桂酸衍生物3d的制备

步骤同实施例6，将1.0mmol的2a改为1.0mmol的2d，得白色固体产物3d。

本实施例的产率为71.9％；熔点为258-260℃；

(c＝0.5,MeOH)；¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.56(d,J＝7.3Hz,1H),7.83–7.74(m,4H),7.51(d,J＝15.9Hz,1H),6.87(d,J＝15.9Hz,1H),4.34(t,J＝7.3Hz,1H),3.44(q,J＝7.0Hz,1H),1.34(d,J＝7.3Hz,3H),1.05(t,J＝7.0Hz,1H).¹³C NMR(126MHz,DMSO-d₆)δ179.56,170.38,164.20,144.45,134.48,130.98,123.33,121.00,52.84,22.57.ESI-MS:m/z 310.34([M+Na]⁺)。

实施例10

肉桂酸衍生物3e的制备

步骤同实施例6，将1.0mmol的2a改为1.0mmol的2e，得淡黄色固体产物3e。

产率为67.2％；熔点为196-198℃；(c＝0.5,CH₂Cl₂)；¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ7.53(s,1H),6.95(s,1H),6.69(s,2H),6.45(s,1H),4.71(s,1H),3.84(s,9H),1.50(s,3H).¹³C NMR(126MHz,CDCl₃)δ173.80,165.11,140.31,135.62,133.14,129.06,120.59,52.65,48.22,18.51.ESI-MS:m/z 332.11([M+Na]⁺)。

实施例11

肉桂酸衍生物4a的制备

步骤同实施例1，将2.0mmol的对甲基肉桂酸改为2.0mmol的3a，得白色固体产物4a。

本实施例的产率为88.6％；熔点为125-126℃；(c＝0.5,CH₂Cl₂)；¹HNMR(500MHz,CDCl₃)δ7.60(d,J＝15.6Hz,1H),7.38(t,J＝6.8Hz,2H),7.23–6.98(m,8H),6.70(d,J＝7.7Hz,1H),6.40(dd,J＝15.6,2.7Hz,1H),4.84(dd,J＝13.6,6.7Hz,1H),4.74–4.60(m,1H),3.70(d,J＝11.7Hz,3H),3.14(dd,J＝13.9,5.7Hz,1H),3.04(dd,J＝13.8,6.8Hz,1H),2.36(s,3H),1.39(d,J＝7.0Hz,2H),1.27(dd,J＝10.5,3.5Hz,2H).¹³C NMR(126MHz,CDCl₃)δ172.32,171.77,165.97,141.67,140.18,135.81,131.93,129.61,129.29,128.59,127.90,127.06,119.09,77.35,77.09,76.84,53.49,52.42,48.70,37.88,21.47,18.19.ESI-MS:m/z 417.25([M+Na]⁺)。

实施例12

所述肉桂酸衍生物4b的制备：步骤同实施例1，将2.0mmol的对甲基肉桂酸改为2.0mmol的3b，得白色固体产物4b。

本实施例的产率为85.1％；熔点为147-149℃；

(c＝0.5,CH₂Cl₂)；¹HNMR(500MHz,CDCl₃)δ7.58(d,J＝15.6Hz,1H),7.44(dd,J＝8.6,3.9Hz,2H),7.20(d,J＝7.5Hz,2H),7.17–7.13(m,1H),7.09(d,J＝7.0Hz,2H),7.04(d,J＝8.0Hz,1H),6.87(d,J＝8.7Hz,2H),6.49(d,J＝7.6Hz,1H),6.30(dd,J＝15.6,5.5Hz,1H),4.84(dd,J＝13.6,6.7Hz,1H),4.67(dd,J＝14.7,7.4Hz,1H),3.82(s,3H),3.71(d,J＝10.4Hz,3H),3.14(dd,J＝13.8,5.6Hz,1H),3.06–3.00(m,1H),1.39(d,J＝7.0Hz,3H).¹³C NMR(126MHz,CDCl₃)δ172.21,171.75,166.07,161.02,141.38,135.79,129.50,129.28,128.60,127.37,127.07,117.65,114.30,55.38,53.44,52.43,48.70,37.89,18.15.ESI-MS:m/z 433.01([M+Na]⁺)。

实施例13

肉桂酸衍生物4c的制备

步骤同实施例1，将2.0mmol的对甲基肉桂酸改为2.0mmol的3c，得白色固体产物4c。

本实施例的产率为75.6％；熔点为173-175℃；

(c＝0.5,CH₂Cl₂)；¹HNMR(500MHz,CDCl₃)δ7.56(s,1H),7.50–7.43(m,2H),7.30(d,J＝7.6Hz,1H),7.25–7.12(m,3H),7.11–7.07(m,2H),7.06–7.00(m,2H),6.70(d,J＝7.6Hz,1H),6.36(d,J＝15.6Hz,1H),4.85(dd,J＝9.9,3.8Hz,1H),4.74–4.64(m,1H),3.71(d,J＝9.0Hz,3H),3.14(dd,J＝13.9,5.7Hz,1H),3.05(dd,J＝13.8,6.6Hz,1H),2.09(d,J＝19.4Hz,2H),1.40(d,J＝7.0Hz,2H),1.30–1.23(m,1H).¹³C NMR(126MHz,CDCl₃)δ172.21,171.73,165.55,164.62,162.62,140.42,135.73,130.90,129.69,129.27,128.62,127.11,119.87,116.08,115.91,53.46,52.45,48.78,37.88,18.30.ESI-MS:m/z 421.15([M+Na]⁺)。

实施例14

所述肉桂酸衍生物4d的制备：步骤同实施例1，将2.0mmol的对甲基肉桂酸改为2.0mmol的3d，得白色固体产物4d。

本实施例的产率为80.2％；熔点为191-192℃；

(c＝0.5,CH₂Cl₂)；¹HNMR(500MHz,CDCl₃)δ7.65(s,1H),7.62(s,1H),7.59(d,J＝9.9Hz,3H),7.29(t,J＝3.5Hz,1H),7.23(t,J＝7.4Hz,2H),7.20–7.16(m,1H),7.12(d,J＝7.4Hz,2H),7.06(d,J＝7.7Hz,1H),6.57(d,J＝15.6Hz,1H),4.89(dd,J＝13.8,6.3Hz,1H),4.81–4.74(m,1H),3.73(d,J＝6.7Hz,3H),3.17(dd,J＝13.8,5.7Hz,1H),3.09(dd,J＝13.9,6.6Hz,1H),1.44(d,J＝7.0Hz,3H).¹³C NMR(126MHz,CDCl₃)δ172.33,171.72,165.08,139.84,138.14,135.68,129.26,128.62,127.99,127.15,125.85,125.80,122.72,53.53,52.44,48.87,37.89,18.47.ESI-MS:m/z 471.19([M+Na]⁺)。

实施例15

肉桂酸衍生物4e的制备

步骤同实施例1，将2.0mmol的对甲基肉桂酸改为2.0mmol的3e，得白色固体产物4e。

本实施例的产率为84.5％；熔点为183-184℃；

(c＝0.5,CH₂Cl₂)；¹HNMR(500MHz,CDCl₃)δ7.53(d,J＝15.5Hz,1H),7.22(t,J＝7.1Hz,2H),7.16(dd,J＝12.3,1H),7.10(d,J＝7.2Hz,2H),6.87(s,1H),6.71(s,2H),6.38(d,J＝15.5Hz,1H),4.83(dd,J＝13.6,6.6Hz,1H),4.77–4.68(m,1H),3.85(d,J＝6.3Hz,9H),3.70(d,J＝5.2Hz,3H),3.14(dd,J＝13.8,1H),3.06(dd,J＝13.8,1H),1.40(d,J＝6.9Hz,3H),1.24(s,3H).¹³C NMR(126MHz,CDCl₃)δ172.09,171.60,165.83,153.37,141.81,139.60,135.75,130.23,129.27,128.61,127.10,119.35,104.95,60.99,56.10,53.58,52.43,48.89,37.87,29.73,18.42.ESI-MS:m/z 493.24([M+Na]⁺)。

实施例16

本实施例提供肉桂酸衍生物5a的制备

步骤同实施例6，将1.0mmol的2a改为1.0mmol的4a，得白色固体产物5a。

本实施例的产率为74.1％；熔点为220-221℃；(c＝0.5,MeOH)；¹HNMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.30(d,J＝7.7Hz,1H),8.23(d,J＝7.9Hz,1H),7.44(dd,J＝8.1,3.2Hz,1H),7.36(d,J＝15.8Hz,1H),7.24–7.19(m,6H),7.16(s,1H),6.70(d,J＝15.8Hz,1H),4.52–4.31(m,2H),3.43(dd,J＝14.0,7.0Hz,1H),3.05(dd,J＝13.8,5.0Hz,1H),2.91(dd,J＝13.8,8.9Hz,1H),2.31(s,3H),1.20(d,J＝7.1Hz,3H),1.03(dd,J＝14.3,7.3Hz,1H).¹³C NMR(126MHz,DMSO-d₆)δ173.16,172.73,165.17,139.73,139.36,137.91,132.59,130.03,129.66,128.62,127.98,126.88,121.41,56.48,53.92,48.44,36.99,21.42,19.00,18.75.ESI-MS:m/z 403.11([M+Na]⁺)。

实施例17

本实施例提供肉桂酸衍生物5b的制备

步骤同实施例6，将1.0mmol的2a改为1.0mmol的4b，得白色固体产物5b。

本实施例的产率为65.6％；熔点为198-199℃；(c＝0.5,MeOH)；¹HNMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.43(d,J＝7.6Hz,1H),8.25(d,J＝7.8Hz,1H),7.65–7.59(m,2H),7.43(d,J＝15.8Hz,1H),7.29–7.22(m,6H),7.20(dd,J＝9.0,6.8Hz,2H),6.70(d,J＝15.8Hz,1H),4.50–4.42(m,2H),3.61(d,J＝20.2Hz,3H),3.04(dd,J＝13.9,5.7Hz,1H),2.95(dd,J＝13.8,8.8Hz,1H),1.22(d,J＝7.1Hz,3H),1.08–1.00(m,1H)..¹³C NMR(126MHz,DMSO-d₆)δ172.85(s),172.27(s),164.86(s),138.20(s),137.54(s),130.12(d,J＝8.3Hz),129.57(s),128.72(s),127.02(s),122.36(s),116.50(s),116.32(s),54.07(s),52.33(s),48.30(s),36.97(s),18.85(s).ESI-MS:m/z 419.25([M+Na]⁺)。

实施例18

本实施例提供肉桂酸衍生物5c的制备

步骤同实施例6，将1.0mmol的2a改为1.0mmol的4c，得白色固体产物5c。

本实施例的产率为70.9％；熔点为217-219℃；(c＝0.5,MeOH)；¹HNMR(500MHz,DMSO-d₆)δ8.33(d,J＝7.8Hz,1H),8.25(d,J＝7.9Hz,1H),7.65–7.58(m,2H),7.40(d,J＝15.8Hz,1H),7.26(dd,J＝8.9,2.2Hz,6H),7.23(t,J＝3.2Hz,2H),7.19–7.14(m,1H),6.72(d,J＝15.8Hz,2H),3.05(dd,J＝13.7,5.0Hz,1H),2.96–2.85(m,1H),1.20(d,J＝7.1Hz,3H),1.10–0.98(m,1H).¹³C NMR(126MHz,DMSO-d₆)δ173.17,172.67,164.90,162.16,138.05,137.90,130.41,130.14,129.66,128.62,126.87,122.41,116.49,116.32,53.95,48.45,36.99,18.82.ESI-MS:m/z 407.34([M+Na]⁺)。

实施例19

本实施例提供肉桂酸衍生物5d的制备

步骤同实施例6，将1.0mmol的2a改为1.0mmol的4d，得白色固体产物5d。

本实施例的产率为69.1％；熔点为226-227℃；

(c＝0.5,MeOH)；¹HNMR(500MHz,CDCl₃)δ8.40(d,J＝7.8Hz,1H),8.27(d,J＝7.9Hz,1H),7.77(d,J＝3.4Hz,4H),7.49(d,J＝15.9Hz,1H),7.26–7.21(m,4H),7.20–7.13(m,1H),6.90(d,J＝15.9Hz,1H),4.50–4.39(m,2H),3.06(dd,J＝13.8,4.9Hz,1H),2.91(dd,J＝13.8,9.0Hz,1H),1.22(d,J＝7.0Hz,3H).¹³C NMR(126MHz,DMSO-d₆)δ173.22,172.57,164.44,139.47,137.96,137.70,129.69,128.82,126.88,126.33,125.30,53.95,48.46,36.99,18.86.ESI-MS:m/z457.27([M+Na]⁺)。

实施例20

本实施例肉桂酸衍生物5e的制备

步骤同实施例6，将1.0mmol的2a改为1.0mmol的4e，得淡黄色固体产物5e。

本实施例的产率为77.2％；熔点为185-187℃；

(c＝0.5,CH₂Cl₂)；¹HNMR(500MHz,CDCl₃)δ7.51(s,2H),7.16(dd,J＝16.9,9.7Hz,5H),7.11(s,1H),6.71(s,2H),6.38(d,J＝15.2Hz,1H),4.85–4.72(m,2H),3.86(s,3H),3.84(s,6H),3.16(dd,J＝13.8,5.1Hz,1H),2.97(dd,J＝13.7,7.0Hz,1H),2.07(s,1H),1.37–1.30(m,3H).¹³C NMR(126MHz,CDCl₃)δ175.64,173.87,172.68,166.18,153.36,142.20,139.75,135.96,130.08,129.45,128.52,126.99,119.16,105.12,77.34,77.09,76.84,67.96,61.00,56.15,53.73,48.88,37.62,25.60,20.85,18.42.ESI-MS:m/z 479.31([M+Na]⁺)。

实施例21

通过NO释放量的测定(以百分比表示)评价肉桂酸衍生物对脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞BV-2激活作用的抑制情况，从而体现化合物的体外抗神经炎症活性。受试目标物均用DMSO溶解至10mmol·L^-1，然后用培养液稀释至工作浓度(20μmol·L^-1)，备用。

取对数增长期的BV-2小胶质细胞制成细胞悬液(原代分离培养或BV-2细胞系)，以每孔5×10⁴个细胞接种于96孔板中，每孔100μL，培养过夜。

测试物组加入LPS(100mg·L^-1)和20μmol·L^-1的受试目标化合物，对照组与空白对照组加100μL培养液。

分别在加入后24h使用Griess试剂检测各孔细胞液中NO的释放量。

结果显示，所述肉桂酸衍生物在浓度为20μmol/l的时候都对NO的产生都具有一定的抑制作用，其中化合物4e的活性最好，其半数抑制浓度IC₅₀可达到16.2μmol/l，效果优于多奈哌齐，实施例1-20所得化合物与阳性对照多奈哌齐的活性结果见表1。

表1实施例1-20的化合物与多奈哌齐对NO的抑制作用

平均数±SD；n＝3。

本发明为了方便服用，本发明提供的肉桂酸衍生物与其它辅料制备成片剂。

片剂的制备：将10mg实施例1得到的肉桂酸衍生物与180mg乳糖、55mg淀粉、5mg硬脂酸镁，混合物后压片成型即可得到。

实施例22

测试

取健康BALB/C雌性小鼠30只，体重(30±4)g，周龄(4±2)周，随机分为3组。模型组、药物组、对照组。对照组和模型组组用蒸馏水灌胃(体积与药物组相当，0.3-0.5mL/次)，药物组10mg/(kg·d)，共55d。

除对照组外，模型组和药物组从灌胃给药第8天造模，每组动物用LPS 250μg/(kg·d)，腹腔注射，隔日1次，连续7天，以建立LPS诱导老年痴呆模型。空白组用注射生理盐水(体积与其余各组相当，0.2mL/次)腹腔注射，隔日1次，连续7天。

1、NO含量的检测

断头处死，冰台快速取出大脑，加到玻璃匀浆器中进行冰浴匀浆。按脑组织质量与匀浆总体积1∶10的比例，加入冰冻的磷酸盐缓冲液稀释混匀。将制备好的10％脑匀浆在4℃条件下以3500r/min离心15min，取上清液，严格按照Griess试剂测定，如表2。结果显示，与模型组比较，各个化合物都对小鼠脑组织中的NO含量有一定的抑制作用，其中化合物4e的一致作用最明显，提示了化合物4e可有效抑制老年痴呆中所产生的神经炎症。

表2各组脑组织NO含量比较

2、海马细胞形态学观察

以上各组每组取3只动物，最后一次腹腔注射，灌胃后进行病理学观察。心脏灌注5％多聚甲醛后，取出完整小鼠大脑，用前述固定液固定48h，常规包埋石蜡切片，冠状连续切片(厚度50μm)，脑部组织取5张进行尼氏染色，然后在光学显微镜下观察小鼠海马区和皮质区的细胞形态。细胞计量采用每200μm(×400)长度下正常细胞数目，取平均值，为该切片的细胞计数。结果显示，相比于模型组，药物组小鼠正常神经细胞数量明显增多，其中化合物4e的一致作用最明显，提示化合物4e可有效抑制小鼠的神经炎症活性。

表3各组神经细胞比较

	神经细胞数量(个/200μm)
		正常对照组	296.7±21.7
模型组	74.0±4.9
		2a组	107.3±3.6
2b组	114.2±1.4
		2c组	176.9±2.3
2d组	160.1±1.3
		2e组	172.8±3.5
3a组	188.6±2.5
		3b组	143.9±3.1
3c组	118.1±5.8
		3d组	98.0±5.0
3e组	150.3±2.4
		4a组	141.7±1.4
4b组	153.6±2.5
		4c组	107.8±2.8
4d组	148.2±3.4
		4e组	270.8±1.5
5a组	154.0±4.3
		5b组	189.4±2.5
5c组	133.7±6.0
		5d组	178.1±2.1
5e组	132.4±3.4

通过上述实验分析可得，本申请提供的肉桂酸衍生物具有一定的抗神经炎症活性，尤其是化合物4e。此类化合物可以作为制备治疗神经退行性疾病药物，尤其是做为制备治疗阿尔茨海默病的药物。

上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理和最佳实施例，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。