本发明涉及一种构建DNA片段敲除文库的方法,具体涉及基于Cpf1系统构建拟敲除片段上下游sgRNA序列的阵列,形成sgRNA敲除文库。在本发明所述方法中,拟敲除片段上下游的同侧sgRNA间隔在30-100bp；拟敲除片段上下游的两侧sgRNA间隔小于10kb,以此sgRNA设置标准设计得到的sgRNA阵列,对DNA片段删除效率更高更准确。本发明所述的拟敲除片段可以是编码基因、非编码RNA、miRNA、甲基化岛、启动子或增强子中的一种或多种。

本发明公开了一种纳米抗体及其应用,所述纳米抗体具有如SEQ ID NO.1～3所示的CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列。本发明同时提供了编码所述单克隆抗体的核酸分子、含有所述核酸分子的表达载体和宿主细胞。本发明的纳米抗体具有较高的结合活性以及中和活性。