本发明公开了一种全基因组甲基化单链DNA建库方法,其步骤包括：重亚硫酸盐处理待建库的基因组DNA,获得单链DNA；加入引物1,引物1的随机引物与单链DNA互补,在DNA聚合酶1的作用下合成第一链；产物纯化后先高温解链,然后在新合成的第一链的3’端添加2～4个ATP,形成一个核糖核苷酸的尾巴；RNA连接酶催化下,在第一链的核糖核苷酸的尾巴后连接上引物2；加入与引物2互补的引物3,在DNA聚合酶2的作用下合成第二链,获得双链DNA；文库扩增。本发明的单链DNA建库方法,可以有效利用重亚硫酸盐处理后的DNA样本,将处理后的单链DNA顺利扩增,文库转化率比传统方法高,要求的初始DNA用量可低至1ng。

公开了用于进行无细胞RNA转录和/或无细胞蛋白质合成(CFPS)的组合物、方法和试剂盒。所公开的组合物、方法和试剂盒包括或利用从梭菌属物种制备的组分,例如来自产乙醇梭菌的细胞提取物。

发现通过使构成肽化合物的氨基酸中的至少一个为具有能形成分子内氢键的侧链的氨基酸能够改善肽化合物的膜透过性。

提供用于筛选能在CAR-T细胞中发挥作用的scFv的CAR文库、及使用了其的scFv的制造方法。本发明的嵌合抗原受体(CAR)文库包含编码第1CAR的核酸,所述第1CAR包含第1抗原结合结构域、第1跨膜结构域、及第1细胞内信号转导结构域,所述第1抗原结合结构域包含能筛选与靶抗原的结合的第1单链抗体(scFv),所述第1scFv包含第1重链可变区和第1轻链可变区,所述第1重链可变区和所述第1轻链可变区满足规定的条件。

本发明将金属纳米粒子探针与靶蛋白或靶蛋白结合受体蛋白偶联,加入事先制备好的DNA编码化合物库中孵育进行分子垂钓,通过PCR扩增与DNA测序获得靶向药物信息。然后,分别制备金属纳米粒子探针和磁珠探针并与拉曼信号分子耦联,再将金属纳米粒子探针或磁珠探针分别与靶蛋白或靶蛋白结合受体蛋白耦联,加入到筛选获得的靶向药物中检测拉曼信号,判断所述待筛选化合物是否为靶向抑制剂,通过对PCR扩增及DNA测序获得筛选化合物的结构。本发明首次将分子垂钓与DNA编码化合物库相结合,在蛋白互作水平上进行药物筛选,并结合表面增强的拉曼散射光谱,形成简单灵敏的新药筛选方法。

本发明属于基因编辑技术领域,公开了一种基于TALE组装的线粒体DNA编辑系统。该编辑系统,包括RVD文库、线粒体定位骨架载体、细胞核定位骨架载体,RVD文库包含至少192个RVD模块,包括：160个双RVD模块、16个单RVD模块及16个半RVD模块。该编辑系统可显著提高TALE模块组装效率,显著降低TALE模块组装成本和时间；该发明使用的组装方法操作简单,适合推广应用；通过该方法可快速高效实现线粒体DNA编辑,并用于制作各种动物模型,以模拟人类线粒体DNA突变导致的疾病；可潜在应用于线粒体DNA突变疾病基因治疗。