本发明公开了一种α-L-鼠李糖苷酶、其制备方法和应用,属于基因工程和生物催化领域。具体涉及一种新型α-L-鼠李糖苷酶氨基酸序列和编码基因、含有上述基因的重组载体和重组微生物、利用上述重组微生物发酵制备α-L-鼠李糖苷酶的方法以及所述α-L-鼠李糖苷酶在水解薯蓣皂苷制备薯蓣皂素中的应用。本发明提供的α-L-鼠李糖苷酶可以特异性水解植物黄姜中甾体皂苷C-(3)位置外侧α-L-1,2-鼠李糖苷键,具有催化效率高、热稳定性好、糖耐受性高等优点。此外,在所述α-L-鼠李糖苷酶和β-D-葡萄糖苷酶的共催化下,黄姜粗提物中的甾体皂苷几乎完全转化为薯蓣皂素,转化率高达98.5%,表明其在规模化皂素生产中具有良好的应用前景。

本发明公开了一种细胞色素P450单加氧酶CYP109B2及其应用,所述CYP109B2的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明首次从索诺拉沙漠芽孢杆菌Bacillus sonorensis中克隆获得了一个新的细胞色素P450单加氧酶CYP109B2蛋白酶基因,并以pRSFDuet-1作为表达载体,大肠杆菌BL21(DE3)作为宿主细胞实现了该蛋白酶的异源表达,发现该蛋白酶能够对甾体化合物的16β位进行高效选择性的羟基化修饰,为甾体化合物的定点羟基化修饰和甾体羟基化产物合成提供了新思路,且催化效率高、经济环保。

本发明属于医药技术领域,公开了一类白桦脂酮酸衍生物在制备治疗神经系统疾病药物中的应用。本发明利用微生物转化技术,对白桦脂酮酸成功地进行了结构修饰,获得了16个具有母核结构修饰的新型的化合物,通过体外神经小胶质细胞炎症试验证实,这些化合物具有较好的抗神经炎症活性,可以作为治疗神经退行性疾病、创伤性脑损伤、中风药物的活性成分,具有广泛的用途。

本发明公开了一种去氢表雄酮的生物制备方法,其以廉价易得的甾体雄烯二酮酯化物出发通过一步生物酶催化反应,最终能以高达94％的收率得到目标产物。此过程没有中间体A的累积,因此不会产生由于中间体A不稳定而产生的氧化性杂质,因此反应的收率比较高,产品质量比较好。

本发明涉及羟基类固醇脱氢酶,具体涉及7α-羟基类固醇脱氢酶St-2-2的突变体T15G、T15S和T15A。所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:2,3或4所示,是氨基酸序列为SEQ ID NO:1的7α-羟基类固醇脱氢酶的第15位氨基酸由Thr定点突变为Gly、Ser或Ala所得。所述突变体在相同底物TCDCA和NADP～(+)的存在下,酶活分别是野生型的3.18、4.27、7.85倍,在生物转化TCDCA获取TUDCA的过程中具有巨大的应用潜力。