一种含发酵辣椒秸秆的饲料

文档序号:108875 发布日期:2021-10-19 浏览:29次 >En<

阅读说明:本技术 一种含发酵辣椒秸秆的饲料 (Feed containing fermented pepper straw ) 是由 杨恋 姚红艳 欧德渊 唐芳 李佳艾 于 2021-07-08 设计创作,主要内容包括:本发明涉及一种含发酵辣椒秸秆的饲料,所述饲料以枯草芽孢杆菌发酵辣椒秸秆粉和基础日粮组成,通过测定肉鸡的生产性能、免疫指标和肠道微生物多样性,研究发酵辣椒秸秆粉对肉鸡的饲用效果,以探讨发酵辣椒秸秆对畜禽的作用机理,为辣椒秸秆在畜牧业中的合理应用提供参考。(The invention relates to a feed containing fermented pepper straws, which consists of bacillus subtilis fermented pepper straw powder and basic ration, and the feed effect of the fermented pepper straw powder on the broiler is researched by measuring the production performance, the immunity index and the intestinal microbial diversity of the broiler so as to discuss the action mechanism of the fermented pepper straws on livestock and poultry and provide a reference for the reasonable application of the pepper straws in the animal husbandry.)

一种含发酵辣椒秸秆的饲料

技术领域

本发明属于畜牧业饲料的领域,具体涉及一种含发酵辣椒秸秆的饲料。

背景技术

目前秸秆多以发酵的形式用于动物养殖,取得了良好的饲养效果,它不仅提高了反刍动物的生产性能,而且降低了饲养成本,且对反刍动物的健康没有负面影响微生物发酵可以有效降解秸秆中的木质素,提高饲料的营养价值,从而提高秸秆的饲用价值。

肠道菌群是所有动物消化系统的重要组成部分,膳食组成和营养水平的变化对肠道微生物区系的数量和种类有显著影响,从而影响肠道消化和吸收营养的能力。然而,由于鸡的消化系统的特点,秸秆在鸡饲料中的使用仍然是一个有争议的问题。目前关于辣椒秸秆粉发酵养鸡的试验报道很少。

因此本发明以枯草芽孢杆菌发酵辣椒秸秆粉添加于基础日粮中,通过测定肉鸡的生产性能、免疫指标和肠道微生物多样性,研究发酵辣椒秸秆粉对肉鸡的饲用效果,以探讨发酵辣椒秸秆对畜禽的作用机理,为辣椒秸秆在畜牧业中的合理应用提供参考。

发明内容

本发明的目的是提供一种含发酵辣椒秸秆的饲料。

所述饲料由基础日粮和发酵辣椒秸秆粉组成,所述基础日粮由以下重量份组成:玉米60-70份、豆粕20-30份、豆油3-5份、石粉0.5-1份、食盐0.1-0.5 份、磷酸氢钙0.1-1份、预混料2-6份;所述发酵辣椒秸秆粉,其重量份为基础日粮的1-4%。

优选的,

所述饲料由基础日粮和发酵辣椒秸秆粉组成,所述基础日由以下重量份组成:玉米62-68份、豆粕22-28份、豆油3.2-4.5份、石粉0.6-0.9份、食盐0.2-0.4 份、磷酸氢钙0.2-0.8份、预混料3-5份;所述发酵辣椒秸秆粉,其重量份为基础日粮的1.5-3%。

进一步优选的,

所述饲料由基础日粮和发酵辣椒秸秆粉组成,所述基础日由以下重量份组成:玉米66.9份、豆粕24份、豆油3.5份、石粉0.8份、食盐0.3份、磷酸氢钙0.5 份、预混料4份;所述添加剂为发酵辣椒秸秆粉,其重量份为基础日粮的2%。

所述发酵辣椒秸秆粉的制备方法包括以下步骤:

1)将辣椒秸秆粉碎长度为1-5cm;

2)将枯草芽孢杆菌菌株复苏扩大培养,制得菌量≥1×1010cfu/mL的菌液;

3)将比例为0.5-1.5:1的水与秸秆拌匀,再添加菌液搅拌均匀,封口,在20-28℃条件下发酵30-40天,即得。

优选的,

所述发酵辣椒秸秆粉的制备方法包括以下步骤:

1)将辣椒秸秆粉碎长度为1.5-3cm;

2)将枯草芽孢杆菌菌株复苏扩大培养,制得菌量≥1×1010cfu/mL的菌液;

3)将比例为0.8-1.2:1的水与秸秆拌匀,再添加10%的菌液搅拌均匀,封口,在22-26℃条件下发酵32-38天,即得。

进一步优选的,

所述发酵辣椒秸秆粉的制备方法包括以下步骤:

1)将辣椒秸秆粉碎长度为2cm;

2)将枯草芽孢杆菌菌株复苏扩大培养,制得菌量≥1×1010cfu/mL的菌液;

3)将比例为1:1的水与秸秆拌匀,再添加10%的菌液搅拌均匀,封口,在25℃条件下发酵35天,即得。

所述辣椒秸秆在畜牧业中的运用。

所述发酵辣椒秸秆粉在肉鸡饲养方面的应用。

所述发酵辣椒秸秆粉在肉鸡生产性能、免疫功能、血清抗氧化指标、盲肠微生物方面的应用。

所述发酵辣椒秸秆粉的具有醇香味或酸香味。

本发明所述的“份”可以是kg、g等本领域公知的单位。

本发明具有以下优点及有益效果:

1.本发明在饲料中添加发酵辣椒秸秆显著提高了肉鸡的日增重,法氏囊指数、胸腺指数和脾脏分别提高了180.95%、70.82%和27.77%。血清免疫球蛋白IgG 影响较大,较对照组提高了39.49%;谷胱甘肽过氧化物酶含量比对照组显著提高32.27%,丙二醛含量显著降低了22.27%。

2、本发明对肉鸡盲肠微生物门、属水平序列分类鉴定,盲肠的优势菌门分为拟杆菌门和厚壁菌门;优势菌属为拟杆菌属、柔嫩梭菌属。盲肠门水平上处理组迷踪菌门和蓝藻门相对丰度显著却低于对照组。在盲肠属水平降低拟杆菌属相对丰度显著低于对照组,且显著提高粪球杆菌属相对丰度显著。

3、本发明通过饲料中添加发酵辣椒秸秆对肉鸡生产性能的影响试验,结果表明,在生长期肉鸡日粮中适度添加2%发酵秸秆饲料能显著增加平均日增重,降低料重比。

4、本发明通过饲料中添加发酵辣椒秸秆对肉鸡免疫功能的影响试验,结果表明在肉鸡日粮中添加发酵的辣椒秸秆可以显著提高胸腺、脾脏和法氏囊指数,其中法氏囊的作用最明显,较空白组提高了180.95%,表明枯草芽孢杆菌发酵辣椒秸秆能够显著改善肉鸡的免疫水平,从而提高肉鸡对疾病的免疫能力;本试验还发现,在基础饲料中添加发酵秸秆可提高肉鸡血清IgG水平,较对照组提高 39.49%,结果表明,饲粮中添加辣椒秸秆对血清免疫球蛋白IgG有较大影响。

5、本发明通过饲料中添加发酵辣椒秸秆对肉鸡血清抗氧化指标的影响试验,结果表明饲喂添加秸秆饲料的肉鸡血清T-AOC、SOD、POD和CAT含量较对照组都有升高趋势,GSH-PX含量较对照组显著提高了32.27%(P<0.05),表明肉鸡日粮中添加发酵辣椒秸秆可提高肉鸡抗氧化酶活性SOD和GSH-PX,进而提高机体总抗氧化力(T-AOC),降低丙二醛活性。

6、本发明通过饲料中添加发酵辣椒秸秆对肉鸡盲肠微生物的影响试验,结果表明肉鸡盲肠拟杆菌属相对丰度较对照组显著减少,柔嫩梭菌属相对丰度显著高于对照组,表明加喂枯草芽孢杆菌发酵辣椒秸秆可以降低机体炎症,改善肉鸡肠道菌群结构,预防肠道疾病因,有利于维护肠道健康,促进肉鸡的生长。研究表明拟杆菌门菌群有利于胃肠道的正常发育,它们可以产生丁酸盐,而丁酸盐是结肠发酵的主要产物,具有抗肿瘤和保持肠道健康的特性。

7、本发明以枯草芽孢杆菌发酵辣椒秸秆粉和基础日粮组成,通过测定肉鸡的生产性能、免疫指标和肠道微生物多样性,研究发酵辣椒秸秆粉对肉鸡的饲用效果,以探讨发酵辣椒秸秆对畜禽的作用机理,为辣椒秸秆在畜牧业中的合理应用提供参考。

附图说明

图1盲肠微生物16S r RNA基因测序稀释度曲线(A表示对照组,B代表试验组);

图2盲肠微生物16S r RNA基因测序等级丰度线(A表示对照组,B代表试验组);

图3NMDS分析(图中的每个点表示一个样品,点与点之间的距离表示差异程度,Stress小0.2时,说明NDNS可以准确反映样品间的差异程度)。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明,但不用来限制本发明的范围。

实施例1饲料组方

发酵辣椒秸秆的饲料组方:玉米66.9g、豆粕24g、豆油3.5g、石粉0.8g、食盐0.3g、磷酸氢钙0.5g、预混料4g;发酵辣椒秸秆粉2g。

实施例2饲料组方

发酵辣椒秸秆的饲料组方:玉米60g、豆粕20g、豆油3g、石粉0.5g、食盐 0.1g、磷酸氢钙0.1g、预混料2g;发酵辣椒秸秆粉1g。

实施例3饲料组方

发酵辣椒秸秆的饲料组方:玉米70g、豆粕30g、豆油5g、石粉1g、食盐0.5g、磷酸氢钙1g、预混料6g;发酵辣椒秸秆粉4g。

实施例4饲料组方

发酵辣椒秸秆的饲料组方:玉米63g、豆粕22g、豆油3.2g、石粉0.6g、食盐0.2g、磷酸氢钙0.2g、预混料3g;发酵辣椒秸秆粉1.5g。

实施例5饲料组方

发酵辣椒秸秆的饲料组方:玉米68g、豆粕28g、豆油4.5g、石粉0.9g、食盐0.4g、磷酸氢钙0.8g、预混料5g;发酵辣椒秸秆粉3g。

实施例6饲料组方

发酵辣椒秸秆的饲料组方:玉米65g、豆粕25g、豆油4.2g、石粉0..7g、食盐0.4g、磷酸氢钙0.3g、预混料4g;发酵辣椒秸秆粉3.5g。

实施例7饲料组方

发酵辣椒秸秆的饲料组方:玉米69g、豆粕29g、豆油4.9g、石粉0.7g、食盐0.3、磷酸氢钙0.7g、预混料5.5g;发酵辣椒秸秆粉3g。

实施例1-7的组方中发酵辣椒秸秆粉分别按实施例8-15中饲料的制备方法制备。

实施例8发酵辣椒秸秆粉的制备

1)将辣椒秸秆粉碎长度为2cm;

2)将枯草芽孢杆菌菌株复苏扩大培养,制得菌量=1×1010cfu/mL的菌液;

3)将比例为1:1的水与秸秆拌匀,再添加10%的菌液搅拌均匀,封口,在25℃条件下发酵35天,即得。

实施例9发酵辣椒秸秆粉的制备

1)将辣椒秸秆粉碎长度为1cm;

2)将枯草芽孢杆菌菌株复苏扩大培养,制得菌量=1×1010cfu/mL的菌液;

3)将比例为0.5:1的水与秸秆拌匀,再添加10%的菌液搅拌均匀,封口,在20℃条件下发酵30天,即得。

实施例10发酵辣椒秸秆粉的制备

1)将辣椒秸秆粉碎长度为5cm;

2)将枯草芽孢杆菌菌株复苏扩大培养,制得菌量≥1×1010cfu/mL的菌液;

3)将比例为1.5:1的水与秸秆拌匀,再添加10%的菌液搅拌均匀,封口,在28℃条件下发酵40天,即得。

实施例11发酵辣椒秸秆粉的制备

1)将辣椒秸秆粉碎长度为3cm;

2)将枯草芽孢杆菌菌株复苏扩大培养,制得菌量≥1×1010cfu/mL的菌液;

3)将比例为0.8:1的水与秸秆拌匀,再添加10%的菌液搅拌均匀,封口,在22℃条件下发酵32天,即得。

实施例12发酵辣椒秸秆粉的制备

1)将辣椒秸秆粉碎长度为4cm;

2)将枯草芽孢杆菌菌株复苏扩大培养,制得菌量≥1×1010cfu/mL的菌液;

3)将比例为1.2:1的水与秸秆拌匀,再添加10%的菌液搅拌均匀,封口,在26℃条件下发酵38天,即得。

实施例13发酵辣椒秸秆粉的制备

1)将辣椒秸秆粉碎长度为3cm;

2)将枯草芽孢杆菌菌株复苏扩大培养,制得菌量≥1×1010cfu/mL的菌液;

3)将比例为1.3:1的水与秸秆拌匀,再添加10%的菌液搅拌均匀,封口,在27℃条件下发酵34天,即得。

下面,通过具体实验例对本发明的有益效果作进一步说明:

1辣椒秸秆的固体发酵

将辣椒秸秆粉碎长度为2cm,将枯草芽孢杆菌菌株复苏扩大培养,菌量≥1×1010cfu/mL,水与秸秆比例为1:1添加菌液搅拌,封口,在25℃条件下发酵35天即得。

2饲料中添加发酵辣椒秸秆对肉鸡饲用效果影响

2.1试验动物

120羽30日龄健康K9肉仔鸡,购自贵阳汇丰禽业公司。

2.2基础日粮的组成

基础日粮是玉米-豆粕型,参考《中国鸡饲养标准2004》(NY/T 33-2004),配制肉鸡基础日粮,其组成与营养水平见表1。

表1基础日粮成分组成及营养水平

注:①预混料为每千克配合饲料提供:维生素A 2 700IU;维生素D 400IU;维生素E10IU;维生素K 0.5mg;维生素B12 0.007mg;硫胺素2mg;核黄素5mg;泛酸10mg;烟酸30mg;吡哆醇3mg;生物素0.1mg;叶酸0.5mg;胆碱750mg;铁11.8mg;铜0.15mg;锰69.4mg;锌56.3mg;碘0.7mg;硒0.27mg。②营养成分均为计算值。

2.3试验分组与处理

试验于2020年10月至2020年11月在贵州大学南校区动物医院进行。

120羽雄性K9肉鸡按照初始体重差异不显著的原则分为随机分为对照组和试验组2个组,每组3个重复,每个重复20羽。对照组饲喂基础日粮,试验组为在肉鸡基础日粮添加2%(2%由预试验得到)的发酵辣椒秸秆饲料。

2.4饲养管理

试验鸡舍为封闭式三层金属笼养舍,平均饲养密度为10只/m2,各笼上下温度,变化为±2℃,正试期28天。每天8:00、12:00和19:00喂食,自由饮水; 24小时光照;饲喂按常规免疫程序对试验鸡进行免疫接种。

2.5样品采集

饲养试验结束、禁食(不禁水)12小时,每个重复组随机抽取6只试验鸡称重,采用颈静脉放血后屠宰,用试管盛取屠宰后血液,在37℃水浴中静置,待析出血清后,4℃条件下下3 000r/min离心15分钟,取上清液分装于1.5mL EP 管中,放置于-20℃低温冰箱中保存,以备后期血液生化指标分析检测用。

将采完血清的试验鸡解剖脾脏、法氏囊和胸腺,用滤纸吸去器官表面水分后, 电子天平称重并记录,并无菌条件下,取出鸡的盲肠内容物放入EP管内,置于 -80℃低温冰箱中保存。

2.6发酵辣椒秸秆对肉鸡饲用效果的影响

2.6.1饲料中添加发酵辣椒秸秆对肉鸡生产性能的影响

2.6.1.1测定指标与方法

记录试验鸡初始体重(IW),平均日增重(ADG)平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

(1)末重:用电子秤直接称量试鸡屠宰前禁食12小时后的活体重量,其单位用千克(kg)表示。

(2)日增重(ADG):日增重=(末重-初重)×1000/天数,单位用克/天(g/d) 表示。

(3)平均日采食量(ADFI):平均日采食量=饲料消耗总量/试验天数

(4)料重比(F/G):料重比=平均日采食量/平均日增重

2.6.1.2测定结果,见表2。

表2饲料中添加发酵辣椒秸秆对肉鸡生产性能的影响

注:表中不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。

结果:由表2可知,与对照组相比,饲粮中添加辣椒秸秆对肉仔鸡的料重比和平均日采食量无显著性影响(P>0.05),显著提高了肉鸡的日增重(P<0.05)。

2.6.2饲料中添加发酵辣椒秸秆对肉鸡免疫功能的影响

2.6.2.1免疫指标

免疫器官指数=免疫器官重(g)/体重(kg)。

血清中的免疫球蛋白A(IgA)、M(IgM)、G(IgG)。用酶标仪按照试剂盒说明书进行测定,试剂盒购自贵州凯信生物公司。

2.6.2.2对肉鸡免疫器官指数的影响,结果见表3。

表3饲料中添加辣椒秸秆对对肉鸡免疫系统的影响

f注b:i表i中不i同d小写字母表示差异显著(P<0.05)。

结果:由表3可见,与对照组相比,试验组肉鸡法氏囊指数、胸腺指数和脾脏分别显著提高了180.95%、70.82%和27.77%(P<0.05),表明在日粮中添加发酵的辣椒秸秆后,对法氏囊的影响效果大于脾和胸腺的效果。

2.6.2.3对肉鸡免疫球蛋白的影响,结果见表4。

表4饲料中添加发酵辣椒秸秆对肉鸡血清免疫指标的影响

注:表中不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。

结果:由表4可见,与对照组相比,处理组血清中IgG提高了39.49%(P<0.05);而血清中IgA、和IgM含量无显著差异。表明日粮中添加辣椒秸秆主要对血清免疫球蛋白IgG影响较大。

2.6.3饲料中添加发酵辣椒秸秆对肉鸡血清抗氧化指标的影响

2.6.3.1抗氧化指标

血清总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、丙二醛(MDA)和过氧化氢酶(CAT)的测定均采用贵州凯信生物公司提供的试剂盒。

2.6.3.2测定结果,见表5。

表5饲料中添加发酵辣椒秸秆对肉鸡血清抗氧化的影响

注:表中不同小写字母表示差异显著(P<0.05)。

结果:发酵辣椒秸秆饲料对肉鸡的血清抗氧化功效的影响如表5所示, GSH-PX含量比对照组显著提高了32.27%(P<0.05),MDA含量降低了22.27%,差异显著(P<0.05)。

2.6.4饲料中添加发酵辣椒秸秆对肉鸡盲肠微生物的影响

2.6.4.1检测标准

Flash 1.2.7软件用于微生物测序原始数据的筛选和质量控制,基于97%的序列相似性,测序数据被组合并分类到操作分类单元(OTU),通过分析反映群落丰富度的Chao1指数、Ace指数、Shannon和Simpson多样性指数,分析了样本群落的α多样性。利用QIIME1.8.0软件,获得了门、属分类水平上各样品的组成和丰度分布表,并且比较门和属之间的丰度差异,利用QIIME软件进行Beta 多样性分析比较物种多样性,对属级的群落组成进行主成分分析(NMDS),不同样品特征成分的分析可以反映样品之间的差异和距离。

2.6.4.2盲肠微生物测序质量分析和α多样性估计

稀释曲线可以用来判断每个样品的测序量是否足够。曲线的急剧上升表明测序量不足,需要增加序列数。反之,表示样本序列足以进行数据分析和比较。见图1、图2。

结果:盲肠稀释曲线结果显示,随着各处理组测序量的增加,OUT数量逐渐饱和(曲线变平缓),表明测序深度足以覆盖样品中的所有物种。

2.6.4.3盲肠微生物α多样性估计

α多样性分析反映微生物群落的多样性和丰度,其中Shannon指数和 Simpson指数评估菌群多样性;Chao1指数和ACE指数评估菌群丰度。Shannon 多样性指数越大,说明群落多样性越高,见表6。

表6饲料中添加发酵辣椒秸秆对对肉鸡盲肠α多样性指数的影响

结果:由表6可知,盲肠α多样性指数显示,对照组和处理组间Shannon 指数、Simpson指数、ACE和Chao1指数均无显著差异(P>0.05);另外,盲肠所有样品的覆盖率都达到了0.999,表明测序结果准确性和重复性良好。

2.6.4.4饲料中添加发酵辣椒秸秆对肉鸡盲肠微生物菌群的影响

通过对肉鸡盲肠微生物门、属水平序列分类鉴定,其中对照组与处理组盲肠的优势菌门分为Bacteroidetes(48.98%、45.85%)和Firmicutes (39.34%、42.85%)、Proteobacteria(3.69%、4.03%)、Actinobacteria(2.26%、 2.86%),在属水平上,对照组与处理组盲肠优势菌属为Bacteroidetes(28.37%、 23.23%)、Alistipes(5.80%、7.37%)、uncultured_bacterium_f_Muribaculaceae (5.19%、7.34%Ruminococcaceae_UCG-014(4.94%、4.88%)。

2.6.4.5细菌群落组成差异

在盲肠门水平上(见表7),处理组Firmicutes的相对丰度虽然比对照组高,但不具有显著性,而Bacteroidetes、Tenericutes和Elusimicrobia相对丰度显著却低于对照组(P<0.05)。在盲肠属水平上(见表7),试验组Bacteroides 相对丰度显著低于对照组(P<0.05)相对丰度而Faecalibacterium相对丰度显著高于对照组(P<0.05),Lactobacillus相对丰度相较于对照组降低了37.46%,但差异显著(P>0.05)。在门和属水平各发现有显著差异的分类单元个数为2、23 个(表3.7),表明处理组和对照组间群落组成有差异(P<0.05)。

2.6.4.6细菌群落组成差异

在盲肠门水平上(表7),处理组Firmicutes的相对丰度虽然比对照组高,但不具有显著性,而Bacteroidetes、Tenericutes和Elusimicrobia相对丰度显著却低于对照组(P<0.05)。在盲肠属水平上(见表7),试验组Bacteroides 相对丰度显著低于对照组(P<0.05)相对丰度而Faecalibacterium相对丰度显著高于对照组(P<0.05),Lactobacillus相对丰度相较于对照组降低了37.46%,但差异显著(P>0.05)。在门和属水平各发现有显著差异的分类单元个数为2、23 个(见表8),表明处理组和对照组间群落组成有差异(P<0.05)。

表7饲料中添加发酵辣椒秸秆对鸡盲肠微生物门、属相对丰度的影响

表8样本(组)之间的Metastats两两比较检验结果统计表

2.6.4.7饲料中添加发酵辣椒秸秆对肉鸡生物群Beta多样性的影响

非度量多维校准(NMDS)是一种非线性模型,能够更好地反映生态数据的非线性结构。根据样本中包含的物种信息,NMDS分析以点的形式反映多维空间,而不同样本之间的差异程度通过点之间的距离来反映,这可以反映样本组之间和组内的差异。基于OTU水平的NMDS分析结果如图3所示,可以看出,对照组和实验组的生物群落有一定的差异。

2.7数据处理与分析

所有数据经Excel 2010初步处理,鸡生产性能、免疫器官指数、血清抗氧化指标和血清免疫指标数据统计分析使用试验数据运用SPSS 19.0软件进行统计,用单因子方差分析进行差异显著性检验,差异显著时使用Duncan's法进行多重比较,结果均以“平均值±标准差”表示,“P<0.05”作为差异显著性判断标准。

2.8结论与问题

(1)饲粮中添加发酵辣椒秸秆显著提高了肉鸡的日增重,法氏囊指数、胸腺指数和脾脏分别提高了180.95%、70.82%和27.77%。血清免疫球蛋白IgG影响较大,较对照组提高了39.49%;谷胱甘肽过氧化物酶含量比对照组显著提高 32.27%,丙二醛含量显著降低了22.27%。

(2)对肉鸡盲肠微生物门、属水平序列分类鉴定,盲肠的优势菌门分为拟杆菌门和厚壁菌门;优势菌属为拟杆菌属、柔嫩梭菌属。盲肠门水平上处理组迷踪菌门和蓝藻门相对丰度显著却低于对照组。在盲肠属水平降低拟杆菌属相对丰度显著低于对照组,且显著提高粪球杆菌属相对丰度显著。

(3)饲料中添加发酵辣椒秸秆对肉鸡生产性能的影响结果:辣椒秸秆纤维含量很高,木质化严重,在单胃动物生产中的饲用价值较低。但随着生物发酵技术的不断发展与普及,通过微生物对辣椒秸秆进行发酵,能够提高辣椒秸秆的饲用价值,对于养殖业发展是一个新方向。由于鸡生长周期和消化系统都短,在短时间内能达到生长的要求,而发酵饲料的预消化作用能改善饲料的品质,促进动物对饲料的消化吸收(陈婷等,2019),促进鸡的生长发育。欧荣娣(2020)等人利用枯草芽孢杆菌固态发酵米糠,拌入日粮中饲喂临武鸭,研究发现日粮中添加枯草芽孢杆菌可有效提高临武鸭平均日增重,降低料肉比和死亡率。秦魁(2020) 在日粮中添加200g/t枯草芽孢杆菌显著提高了22-42d肉鸡平均日增重显著降低了1-21天肉鸡平均日增重和平均日采食量。本实验结果表明,在生长期肉鸡日粮中适度添加2%发酵秸秆饲料能显著增加平均日增重,降低料重比,但对平均日采食量没有显著作用。一部分原因可能是由于枯草芽孢杆菌在发酵秸秆过程中使秸秆露出半纤维素-木聚糖链和木质素聚合物酯键酶解,(陈志敏等,2020) 将部分大分子的蛋白质、复杂多糖、脂肪和蛋白等分解为小分子物质,改善饲料适口性,提高了营养物质的消化利用率和动物生长性能。另一部分与枯草芽孢杆菌发酵过程中产生的植酸酶、蛋白酶等以及在肠道内通过生物夺氧使肠道微生态更加稳定等因素有关(孙焕林,2015)。

(4)饲料中添加发酵辣椒秸秆对肉鸡免疫功能的影响结果:胸腺、脾脏和法氏囊是肉鸡重要免疫器官,是机体内各种免疫细胞形成、分化的主要场所,参与机体的细胞和体液免疫,产生大量抗体以保护机体免受外来病菌的侵袭,免疫器官的重量决定着免疫功能的强弱,其绝对重量和相对重量越大,说明机体的细胞免疫和体液免疫机能越强(崔玉铭,2010;宋卉,2007;Hassan H M A et al., 2010;Rivas et al.,1985)。本试验中,在肉鸡日粮中添加发酵的辣椒秸秆可以显著提高胸腺、脾脏和法氏囊指数,其中法氏囊的作用最明显,较空白组提高了180.95%。表明枯草芽孢杆菌发酵辣椒秸秆能够显著改善肉鸡的免疫水平,从而提高肉鸡对疾病的免疫能力,这与罗远琴(2020)研究结果相似。

免疫球蛋白是动物体内免疫系统中最为关键的物质之一,具有重要的免疫和生理调节作用,能与相应抗原产生特异性结合从而实现各种免疫效应,而血清中的免疫球蛋白的含量反映动物机体的免疫功能的高低(张效荣等,2014;顾有方等,2004)。本试验发现,在基础饲料中添加发酵秸秆可提高肉鸡血清IgG水平,较对照组提高39.49%,血清IgA和IgM含量差异不显著。结果表明,饲粮中添加辣椒秸秆对血清免疫球蛋白IgG有较大影响,但对免疫球蛋白和细胞因子等其他非特异性免疫指标无显著影响。分析其原因可能是枯草芽孢杆菌的菌体成分作为抗原刺激肠道或以免疫佐剂的形式作用于动物免疫器官,在消化道内增殖,不断合成多种有益物质,如维生素、氨基酸等,促进免疫器官的生长发育(余东游等,2010)。

(5)饲料中添加发酵辣椒秸秆对肉鸡血清抗氧化指标的影响结果:活细胞的抗氧化系统包含有三道主要防线:第一道由超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶及抗氧化物质等组成,负责制止自由基的生成和脂质过氧化。通过测定SOD和谷胱甘肽过氧化物酶的含量,可以了解自由基对机体的损伤程度。本试验中,饲喂添加秸秆饲料的肉鸡血清T-AOC、SOD、POD和CAT含量较对照组都有升高趋势,但差异均不显著(P>0.05);GSH-PX含量较对照组显著提高了32.27%(P<0.05),丙二醛含量显著降低了22.27%(P<0.05)。表明肉鸡日粮中添加发酵辣椒秸秆可提高肉鸡抗氧化酶活性SOD和GSH-PX,进而提高机体总抗氧化力(T-AOC),降低丙二醛活性。有关枯草芽孢菌发酵辣椒秸秆抗氧化特性以及在体内所起的抗氧化机制仍需做进一步深入的探究。

(6)饲料中添加发酵辣椒秸秆对肉鸡盲肠微生物的影响结果:正常情况下动物肠道内的微生物菌群保持着一种微生态平衡,肠道微生物菌群的这种平衡在营养物质消化吸收、维系宿主健康中起着关键作用。本研究表明,饲喂枯草芽孢杆菌发酵辣椒秸秆后肉鸡盲肠菌群测序数量与对照组之间差异不显著,说明饲喂加喂枯草芽孢杆菌发酵辣椒秸秆发酵产物对肉鸡盲肠菌群微生物种类没有显著性作用。本试验中盲肠α多样性指数显示,对照组和处理组间Shannon指数、 Simpson指数、ACE和Chao1指数均无显著差异(P>0.05)。表明在肉鸡饲料中添加发酵辣椒秸秆对肉鸡肠道菌群多样性和丰度没有影响。

近些年研究发现,盲肠是畜禽肠道中含有大量微生物浓度最高的部位。本试验通过细菌16S-rDNA高通量测序技术检测在枯草芽孢杆菌发酵辣椒秸秆日粮调控下盲肠内菌群的分度与多样性变化,结果表明Bacteroidetes(拟杆菌门)、 Firmicutes(厚壁菌门)、Proteobacteria(变形菌门)和Actinobacteria(放线菌门)的细菌占优势,这一结果与Park(2014)、王鹏(2015)利用高通量测序研究猪粪便和肠道中微生物种类的研究结果相同。杨利娜(2014)研究也发现单胃动物肠道内盲肠微生物多样性较高,其中优势菌群为厚壁菌门和拟杆菌门。结果表明厚壁菌门、变形菌门,放线菌门和拟杆菌门门类的细菌占优势,这一结果与Park(2014)利用高通量测序研究猪粪便和肠道中微生物种类的研究结果相同。拟杆菌门和厚壁菌门存在一种相互促进的共生关系,他们共同促进宿主吸收或储存能量,拟杆菌门降低或厚壁菌门增加或拟杆菌门/厚壁菌门比例降低,有助于进脂肪吸收累积(郭秀兰,2009;Turnbaugh P J et al.,2006;Ley R E et al.,2005;Ley R E et al.,2006),试验组中拟杆菌门下降,厚壁菌门、变形菌门和放线菌门稍高于对照组,且都具有增高的趋势。此次试验发现肉鸡盲肠中绝对优势菌群为拟杆菌门,变形菌门菌群分布较少,且饲喂加枯草芽孢杆菌发酵辣椒秸秆发酵产物后,微生物物种丰度增高,显著增加了蓝藻门和迷踪门等。

在属的水平,拟杆菌属是人和动物体内大量存在的正常菌群,柔嫩梭菌属是肠道共生菌硬壁菌门的主要成员,是人肠道中最常见的细菌,也是最主要的产丁酸盐细菌之一,而丁酸可为肠道提供能量并发挥抗炎作用(Barcenilla et al, 2000;Louisp et al.,2009)。有研究表明柔嫩梭菌属具有抗炎作用,对宿主有益,而拟杆菌属具有促炎作用,对宿主有害。一些类型的拟杆菌还可产生肠毒素, 诱导结肠癌的发生(Kelly et al.,2004)。本试验中,肉鸡盲肠拟杆菌属相对丰度较对照组显著减少,柔嫩梭菌属相对丰度显著高于对照组,表明加喂枯草芽孢杆菌发酵辣椒秸秆可以降低机体炎症,改善肉鸡肠道菌群结构,预防肠道疾病因,有利于维护肠道健康,促进肉鸡的生长。研究表明拟杆菌门菌群有利于胃肠道的正常发育,它们可以产生丁酸盐,而丁酸盐是结肠发酵的主要产物,具有抗肿瘤和保持肠道健康的特性。

虽然,上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验,对本发明作了详尽的描述,但在本发明基础上,可以对之作出一些修改或改进,这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此,在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进,均属于本发明要求保护的范围。

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