阅读说明：本技术 一种诊疗一体化合物、制备方法及其应用 (Diagnosis and treatment integrated compound, preparation method and application thereof ) 是由 金乐 代浩男 陆睿 王艳翠 于 2020-05-25 设计创作，主要内容包括：本发明涉及医药技术领域,具体公开了一种诊疗一体化合物、制备方法及其应用。一种诊疗一体化合物,为伏立诺他衍生物,上述伏立诺他衍生物通过在伏立诺他的苯环上引入至少一个碘原子；此化合物不仅具有抗肿瘤活性,而且还具有诊断成像功能。诊疗一体化合物的制备方法,包括如下步骤：合成Boc-2,3,5-三碘苯甲酸,合成2,3,5-三碘苯胺,合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯,这种制备方法简单；一种诊疗一体化合物的应用,将其应用于抗肿瘤药物；以用于肿瘤患者的抗肿瘤治疗和诊断成像功能。(The invention relates to the technical field of medicines, and particularly discloses a diagnosis and treatment integrated compound, and a preparation method and application thereof. A theranostic compound is a vorinostat derivative obtained by introducing at least one iodine atom to the benzene ring of vorinostat; the compound not only has anti-tumor activity, but also has diagnostic imaging function. The preparation method of the diagnosis and treatment integrated compound comprises the following steps: synthesizing Boc-2,3, 5-triiodobenzoic acid, synthesizing 2,3, 5-triiodoaniline, and synthesizing 8-oxo-8- ((2,3, 5-triiodophenyl) amino) methyl octanoate, wherein the preparation method is simple; an application of a diagnosis and treatment integrated compound is applied to an anti-tumor drug; for the anti-tumor therapy and the diagnostic imaging function of tumor patients.)

一种诊疗一体化合物、制备方法及其应用

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体而言，涉及一种诊疗一体化合物、制备方法及其应用。

背景技术

癌症是全球主要的死亡原因之一，每年造成近800万人死亡，并且对整个人类造成重大的社会经济危害。遗憾的是，尚未开发出有效且临床有效的癌症治疗方法，这需要迫切需要新型的有效和特定的抗癌药物。

组蛋白乙酰转移酶(HATs)和组蛋白脱乙酰基酶(HDACs)最近已成为癌症治疗的重要目标。实际上，几种HDAC抑制剂已用于治疗T细胞淋巴瘤，包括SAHA(亚磺酰苯胺异羟肟酸，伏立诺他)和Belinostat。Panobinostat最近被批准用于治疗多发性骨髓瘤。

同时，癌症的早期诊断对于延长患者的生存时间也很重要。因此，寻找和开发具有诊断成像功能的更有效的抗癌药可以用作更好的癌症治疗方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种诊疗一体化合物，此化合物不仅具有抗肿瘤活性，而且还具有诊断成像功能。

本发明的另一目的在于提供一种诊疗一体化合物的制备方法，其制备方法简单。

本发明的另一目的在于提供一种诊疗一体化合物的应用，以用于肿瘤患者的抗肿瘤治疗和诊断成像功能。

本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。

第一方面，本发明实施例提出一种诊疗一体化合物，其为伏立诺他衍生物，上述伏立诺他衍生物通过在伏立诺他的苯环上引入至少一个碘原子。

进一步的，在本发明的一些实施例中，上述伏立诺他衍生物通过在伏立诺他的苯环上引入三个碘原子。

进一步的，在本发明的一些实施例中，其分子式为：C₁₄H₁₇I₃N₂O₃。

进一步的，在本发明的一些实施例中，其结构式为：

第二方面，本发明实施例还提出一种如上所述诊疗一体化合物的制备方法，包括如下步骤：合成Boc-2,3,5-三碘苯甲酸：将2,3,5-三碘苯甲酸溶解在t-BuOH中。然后加入DPPA和TEA，并将混合物在氮气气氛下于85-95℃搅拌1.5-2.5小时，然后将混合物减压除去溶剂，将残余物溶于DCM，用饱和NaHCO₃洗涤得到有机相，然后将有机相用无水Na₂SO₄干燥，然后将有机相浓缩，残余物通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA洗脱，得到Boc-2,3,5-三碘苯甲酸；合成2,3,5-三碘苯胺：将Boc-2,3,5-三碘苯甲酸溶于CH₂Cl₂溶液中，在-5-5℃向Boc-2,3,5-三碘苯甲酸的CH₂Cl₂溶液中加入TFA，消耗完原料后，将混合物蒸发，然后加入饱和NaHCO₃水溶液，将有机层用盐水洗涤并用无水Na₂SO₄干燥，并将粗产物通过硅胶色谱法纯化，用PE/EA洗脱，得到2,3,5-三碘苯胺；合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯：在-5-5℃下将草酰氯滴入辛二酸单甲酯在无水CH₂Cl₂的溶液中并搅拌11-13h，然后在减压下蒸发溶剂和过量的草酰氯，然后加入CHCl₃，然后再加入2,3,5-三碘苯胺和三乙胺，并在60-70℃下回流4-5小时，然后减压蒸发溶剂，并将粗产物通过硅胶色谱法纯化，用PE/EA洗脱，得到8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯；合成伏立诺他衍生物：将甲醇钠的甲醇溶液添加到盐酸羟胺的甲醇溶液中，搅拌8-12分钟，并滤出NaCl，将合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯加入滤液中，将所得混合物在23-27℃下搅拌3-5小时，然后减压除去溶剂，将产物溶于乙醇中，然后将草酸加入溶液中，然后将沉淀物过滤并从水中结晶得为到伏立诺他衍生物。

进一步的，在本发明的做一些实施例中，上述合成Boc-2,3,5-三碘苯甲酸过程中，上述PE/EA洗脱的体积比为10:1。

进一步的，在本发明的做一些实施例中，上述合成2,3,5-三碘苯胺过程中，上述PE/EA洗脱的体积比为5:1。

进一步的，在本发明的做一些实施例中，上述合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯过程中，上述PE/EA洗脱的体积比为5:1。

第三方面，本发明实施例还提出了一种上所述诊疗一体化合物的应用，将其应用于抗肿瘤药物。

进一步的，在本发明的一些实施例中，将其应用于肿瘤造影剂。

本发明实施例提供的一种诊疗一体化合物、制备方法及其应用，至少具有以下有益效果：

第一方面，本发明实施例提出一种诊疗一体化合物，其为伏立诺他衍生物，上述伏立诺他衍生物通过在伏立诺他的苯环上引入至少一个碘原子。

因为碘原子具有良好的X射线阻断能力，碘化化合物，如碘苯甲醇，碘海醇，碘克沙醇，泛影酸钠被用于CT成像，并且有许多基于这些碘化化合物的探针的报道，但是，当造影剂通过共价键与药物分子连接时，它或多或少会降低药物活性；而伏立诺他用于治疗T细胞淋巴瘤，因为伏立诺他具有帽基团，通过在伏立诺他的帽基团上引入碘原子，不仅可以衰减X射线作为CT造影剂，还可以保持伏立诺他与HDAC的结合活性(作为HDAC抑制剂)，因此这样的伏立诺他衍生物具备诊疗一体化的功能。

第二方面，本发明实施例还提出一种如上所述诊疗一体化合物的制备方法，包括如下步骤：合成Boc-2,3,5-三碘苯甲酸：将2,3,5-三碘苯甲酸溶解在t-BuOH中。然后加入DPPA和TEA，并将混合物在氮气气氛下于85-95℃搅拌1.5-2.5小时，然后将混合物减压除去溶剂，将残余物溶于DCM，用饱和NaHCO₃洗涤得到有机相，然后将有机相用无水Na₂SO₄干燥，然后将有机相浓缩，残余物通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA洗脱，得到Boc-2,3,5-三碘苯甲酸；合成2,3,5-三碘苯胺：将Boc-2,3,5-三碘苯甲酸溶于CH₂Cl₂溶液中，在-5-5℃向Boc-2,3,5-三碘苯甲酸的CH₂Cl₂溶液中加入TFA，消耗完原料后，将混合物蒸发，然后加入饱和NaHCO₃水溶液，将有机层用盐水洗涤并用无水Na₂SO₄干燥，并将粗产物通过硅胶色谱法纯化，用PE/EA洗脱，得到2,3,5-三碘苯胺；合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯：在-5-5℃下将草酰氯滴入辛二酸单甲酯在无水CH₂Cl₂的溶液中并搅拌11-13h，然后在减压下蒸发溶剂和过量的草酰氯，然后加入CHCl₃，然后再加入2,3,5-三碘苯胺和三乙胺，并在60-70℃下回流4-5小时，然后减压蒸发溶剂，并将粗产物通过硅胶色谱法纯化，用PE/EA洗脱，得到8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯；合成伏立诺他衍生物：将甲醇钠的甲醇溶液添加到盐酸羟胺的甲醇溶液中，搅拌8-12分钟，并滤出NaCl，将合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯加入滤液中，将所得混合物在23-27℃下搅拌3-5小时，然后减压除去溶剂，将产物溶于乙醇中，然后将草酸加入溶液中，然后将沉淀物过滤并从水中结晶得为到伏立诺他衍生物。

这种制备方法十分简单，成本低，且这样制得的伏立诺他衍生物可以最大程度保持伏立诺他原有的活性，同时还具备了灵敏的X射线造影的活性。

第三方面，本发明实施例还提出了一种上所述诊疗一体化合物的应用，将其应用于抗肿瘤药物。这样的抗肿瘤药物不仅可以用于***，还可以用于诊断，集诊疗于一体。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1为本发明中不同浓度伏立诺他衍生物和水以及空管的的X射线体外成像图；

图2为本发明中不同浓度伏立诺他衍生物的CT值；

图3为本发明中用伏立诺他或不同浓度的伏立诺他衍生物处理后U973细胞中AcH3和AcTub的蛋白质印迹分析结果；

图4为本发明中Boc-2,3,5-三碘苯甲酸的核磁共振氢谱；

图5为本发明中2,3,5-三碘苯胺的核磁共振氢谱；

图6为本发明中8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯的核磁共振氢谱；

图7为本发明中伏立诺他衍生物的核磁共振氢谱；

图8为本发明中伏立诺他衍生物的核磁共振碳谱；

图9为本发明中伏立诺他衍生物的高分辨质谱。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将参考具体实施例来详细说明本发明。

第一方面，本发明实施例提出一种诊疗一体化合物，其为伏立诺他衍生物，上述伏立诺他衍生物通过在伏立诺他的苯环上引入至少一个碘原子。

因为碘原子具有良好的X射线阻断能力，碘化化合物，如碘苯甲醇，碘海醇，碘克沙醇，泛影酸钠被用于CT成像，并且有许多基于这些碘化化合物的探针的报道，但是，当造影剂通过共价键与药物分子连接时，它或多或少会降低药物活性；而伏立诺他用于治疗T细胞淋巴瘤，因为伏立诺他具有帽基团，通过在伏立诺他的帽基团上引入碘原子，不仅可以衰减X射线作为CT造影剂，还可以保持伏立诺他与HDAC的结合活性(作为HDAC抑制剂)，因此这样的伏立诺他衍生物具备诊疗一体化的功能。

进一步的，在本发明的一些实施例中，上述伏立诺他衍生物通过在伏立诺他的苯环上引入三个碘原子。在伏立诺他的苯环上引入三个碘原子，这样得到的伏立诺他衍生物可以最大程度保持伏立诺他原有的活性，同时还具备了灵敏的X射线造影的活性。

进一步的，在本发明的一些实施例中，其分子式为：C₁₄H₁₇I₃N₂O₃。这样的伏立诺他衍生物可以最大程度保持伏立诺他原有的活性，同时还具备了灵敏的X射线造影的活性。

进一步的，在本发明的一些实施例中，其结构式为：

这样的伏立诺他衍生物可以最大程度保持伏立诺他原有的活性，同时还具备了灵敏的X射线造影的活性。

第二方面，本发明实施例还提出一种如上所述诊疗一体化合物的制备方法，包括如下步骤：合成Boc-2,3,5-三碘苯甲酸：将2,3,5-三碘苯甲酸溶解在t-BuOH中，然后加入DPPA和TEA，并将混合物在氮气气氛下于85-95℃搅拌1.5-2.5小时，然后将混合物减压除去溶剂，将残余物溶于DCM，用饱和NaHCO₃洗涤得到有机相，然后将有机相用无水Na₂SO₄干燥，然后将有机相浓缩，残余物通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA洗脱，得到Boc-2,3,5-三碘苯甲酸；合成2,3,5-三碘苯胺：将Boc-2,3,5-三碘苯甲酸溶于CH₂Cl₂溶液中，在-5-5℃向Boc-2,3,5-三碘苯甲酸的CH₂Cl₂溶液中加入TFA，消耗完原料后，将混合物蒸发，然后加入饱和NaHCO₃水溶液，将有机层用盐水洗涤并用无水Na₂SO₄干燥，并将粗产物通过硅胶色谱法纯化，用PE/EA洗脱，得到2,3,5-三碘苯胺；合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯：在-5-5℃下将草酰氯滴入辛二酸单甲酯在无水CH₂Cl₂的溶液中并搅拌11-13h，然后在减压下蒸发溶剂和过量的草酰氯，然后加入CHCl₃，然后再加入2,3,5-三碘苯胺和三乙胺，并在60-70℃下回流4-5小时，然后减压蒸发溶剂，并将粗产物通过硅胶色谱法纯化，用PE/EA洗脱，得到8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯；合成伏立诺他衍生物：将甲醇钠的甲醇溶液添加到盐酸羟胺的甲醇溶液中，搅拌8-12分钟，并滤出NaCl，将合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯加入滤液中，将所得混合物在23-27℃下搅拌3-5小时，然后减压除去溶剂，将产物溶于乙醇中，然后将草酸加入溶液中，然后将沉淀物过滤并从水中结晶得为到伏立诺他衍生物。

这种制备方法十分简单，成本低，且这样制得的伏立诺他衍生物可以最大程度保持伏立诺他原有的活性，同时还具备了灵敏的X射线造影的活性。

进一步的，在本发明的做一些实施例中，上述合成Boc-2,3,5-三碘苯甲酸过程中，上述PE/EA洗脱的体积比为10:1。采用这样的比例进行洗脱，使得得到的Boc-2,3,5-三碘苯甲酸纯度佳、且回收率高。

进一步的，在本发明的做一些实施例中，上述合成2,3,5-三碘苯胺过程中，上述PE/EA洗脱的体积比为5:1。采用这样的比例进行洗脱，使得得到的2,3,5-三碘苯胺纯度佳、且回收率高。

进一步的，在本发明的做一些实施例中，上述合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯过程中，上述PE/EA洗脱的体积比为5:1。采用这样的比例进行洗脱，使得得到的8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯纯度佳、且回收率高。

第三方面，本发明实施例还提出了一种上所述诊疗一体化合物的应用，将其应用于抗肿瘤药物。这样的抗肿瘤药物不仅可以用于***，还可以用于诊断，集诊疗于一体。

进一步的，在本发明的一些实施例中，将其应用于肿瘤造影剂。这样的抗肿瘤药物不仅可以用于诊断，还可以用于***，集诊疗于一体。

以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。

实施例1

诊疗一体化合物的制备方法，包括如下步骤：合成Boc-2,3,5-三碘苯甲酸：将2,3,5-三碘苯甲酸溶解在t-BuOH中。然后加入DPPA和TEA，并将混合物在氮气气氛下于85℃搅拌1.5小时，然后将混合物减压除去溶剂，将残余物溶于DCM，用饱和NaHCO₃洗涤得到有机相，然后将有机相用无水Na₂SO₄干燥，然后将有机相浓缩，残余物通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(V:V＝10:1)洗脱，得到Boc-2,3,5-三碘苯甲酸；

合成2,3,5-三碘苯胺：将Boc-2,3,5-三碘苯甲酸溶于CH₂Cl₂溶液中，在-5℃向Boc-2,3,5-三碘苯甲酸的CH₂Cl₂溶液中加入TFA，消耗完原料后，将混合物蒸发，然后加入饱和NaHCO₃水溶液，将有机层用盐水洗涤并用无水Na₂SO₄干燥，并将粗产物通过硅胶色谱法纯化，用PE/EA(V:V＝5:1)洗脱，得到2,3,5-三碘苯胺；

合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯：在-5℃下将草酰氯滴入辛二酸单甲酯在无水CH₂Cl₂的溶液中并搅拌11h，然后在减压下蒸发溶剂和过量的草酰氯，然后加入CHCl₃，然后再加入2,3,5-三碘苯胺和三乙胺，并在60℃下回流4-5小时，然后减压蒸发溶剂，并将粗产物通过硅胶色谱法纯化，用PE/EA(V:V＝5:1)洗脱，得到8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯；

合成伏立诺他衍生物：将甲醇钠的甲醇溶液添加到盐酸羟胺的甲醇溶液中，搅拌8分钟，并滤出NaCl，将合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯加入滤液中，将所得混合物在23℃下搅拌3小时，然后减压除去溶剂，将产物溶于乙醇中，然后将草酸加入溶液中，然后将沉淀物过滤并从水中结晶得为到伏立诺他衍生物。

实施例2

诊疗一体化合物的制备方法，包括如下步骤：合成Boc-2,3,5-三碘苯甲酸：将2,3,5-三碘苯甲酸溶解在t-BuOH中。然后加入DPPA和TEA，并将混合物在氮气气氛下于95℃搅拌2.5小时，然后将混合物减压除去溶剂，将残余物溶于DCM，用饱和NaHCO₃洗涤得到有机相，然后将有机相用无水Na₂SO₄干燥，然后将有机相浓缩，残余物通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(V:V＝10:1)洗脱，得到Boc-2,3,5-三碘苯甲酸；

合成2,3,5-三碘苯胺：将Boc-2,3,5-三碘苯甲酸溶于CH₂Cl₂溶液中，在5℃向Boc-2,3,5-三碘苯甲酸的CH₂Cl₂溶液中加入TFA，消耗完原料后，将混合物蒸发，然后加入饱和NaHCO₃水溶液，将有机层用盐水洗涤并用无水Na₂SO₄干燥，并将粗产物通过硅胶色谱法纯化，用PE/EA(V:V＝5:1)洗脱，得到2,3,5-三碘苯胺；

合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯：在5℃下将草酰氯滴入辛二酸单甲酯在无水CH₂Cl₂的溶液中并搅拌13h，然后在减压下蒸发溶剂和过量的草酰氯，然后加入CHCl₃，然后再加入2,3,5-三碘苯胺和三乙胺，并在70℃下回流5小时，然后减压蒸发溶剂，并将粗产物通过硅胶色谱法纯化，用PE/EA(V:V＝5:1)洗脱，得到8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯；

合成伏立诺他衍生物：将甲醇钠的甲醇溶液添加到盐酸羟胺的甲醇溶液中，搅拌12分钟，并滤出NaCl，将合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯加入滤液中，将所得混合物在27℃下搅拌5小时，然后减压除去溶剂，将产物溶于乙醇中，然后将草酸加入溶液中，然后将沉淀物过滤并从水中结晶得为到伏立诺他衍生物。

实施例3

诊疗一体化合物的制备方法，包括如下步骤：合成Boc-2,3,5-三碘苯甲酸：将2,3,5-三碘苯甲酸溶解在t-BuOH中。然后加入DPPA和TEA，并将混合物在氮气气氛下于90℃搅拌2小时，然后将混合物减压除去溶剂，将残余物溶于DCM，用饱和NaHCO₃洗涤得到有机相，然后将有机相用无水Na₂SO₄干燥，然后将有机相浓缩，残余物通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(V:V＝10:1)洗脱，得到Boc-2,3,5-三碘苯甲酸；

合成2,3,5-三碘苯胺：将Boc-2,3,5-三碘苯甲酸溶于CH₂Cl₂溶液中，在0℃向Boc-2,3,5-三碘苯甲酸的CH₂Cl₂溶液中加入TFA，消耗完原料后，将混合物蒸发，然后加入饱和NaHCO₃水溶液，将有机层用盐水洗涤并用无水Na₂SO₄干燥，并将粗产物通过硅胶色谱法纯化，用PE/EA(V:V＝5:1)洗脱，得到2,3,5-三碘苯胺；

合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯：在0℃下将草酰氯滴入辛二酸单甲酯在无水CH₂Cl₂的溶液中并搅拌12h，然后在减压下蒸发溶剂和过量的草酰氯，然后加入CHCl₃，然后再加入2,3,5-三碘苯胺和三乙胺，并在65℃下回流4.5小时，然后减压蒸发溶剂，并将粗产物通过硅胶色谱法纯化，用PE/EA(V:V＝5:1)洗脱，得到8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯；

合成伏立诺他衍生物：将甲醇钠的甲醇溶液添加到盐酸羟胺的甲醇溶液中，搅拌10分钟，并滤出NaCl，将合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯加入滤液中，将所得混合物在23-27℃下搅拌4小时，然后减压除去溶剂，将产物溶于乙醇中，然后将草酸加入溶液中，然后将沉淀物过滤并从水中结晶得为到伏立诺他衍生物。

实施例4

诊疗一体化合物的制备方法，包括如下步骤：合成Boc-2,3,5-三碘苯甲酸：将2,3,5-三碘苯甲酸溶解在t-BuOH中。然后加入DPPA和TEA，并将混合物在氮气气氛下于88℃搅拌1.8小时，然后将混合物减压除去溶剂，将残余物溶于DCM，用饱和NaHCO₃洗涤得到有机相，然后将有机相用无水Na₂SO₄干燥，然后将有机相浓缩，残余物通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(V:V＝10:1)洗脱，得到Boc-2,3,5-三碘苯甲酸；

合成2,3,5-三碘苯胺：将Boc-2,3,5-三碘苯甲酸溶于CH₂Cl₂溶液中，在-3℃向Boc-2,3,5-三碘苯甲酸的CH₂Cl₂溶液中加入TFA，消耗完原料后，将混合物蒸发，然后加入饱和NaHCO₃水溶液，将有机层用盐水洗涤并用无水Na₂SO₄干燥，并将粗产物通过硅胶色谱法纯化，用PE/EA(V:V＝5:1)洗脱，得到2,3,5-三碘苯胺；

合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯：在-3℃下将草酰氯滴入辛二酸单甲酯在无水CH₂Cl₂的溶液中并搅拌11.5h，然后在减压下蒸发溶剂和过量的草酰氯，然后加入CHCl₃，然后再加入2,3,5-三碘苯胺和三乙胺，并在63℃下回流4.2小时，然后减压蒸发溶剂，并将粗产物通过硅胶色谱法纯化，用PE/EA(V:V＝5:1)洗脱，得到8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯；

合成伏立诺他衍生物：将甲醇钠的甲醇溶液添加到盐酸羟胺的甲醇溶液中，搅拌9分钟，并滤出NaCl，将合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯加入滤液中，将所得混合物在23-27℃下搅拌3.5小时，然后减压除去溶剂，将产物溶于乙醇中，然后将草酸加入溶液中，然后将沉淀物过滤并从水中结晶得为到伏立诺他衍生物。

实施例5

诊疗一体化合物的制备方法，包括如下步骤：合成Boc-2,3,5-三碘苯甲酸：将2,3,5-三碘苯甲酸溶解在t-BuOH中。然后加入DPPA和TEA，并将混合物在氮气气氛下于92℃搅拌2.3小时，然后将混合物减压除去溶剂，将残余物溶于DCM，用饱和NaHCO₃洗涤得到有机相，然后将有机相用无水Na₂SO₄干燥，然后将有机相浓缩，残余物通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(V:V＝10:1)洗脱，得到Boc-2,3,5-三碘苯甲酸；

合成2,3,5-三碘苯胺：将Boc-2,3,5-三碘苯甲酸溶于CH₂Cl₂溶液中，在2℃向Boc-2,3,5-三碘苯甲酸的CH₂Cl₂溶液中加入TFA，消耗完原料后，将混合物蒸发，然后加入饱和NaHCO₃水溶液，将有机层用盐水洗涤并用无水Na₂SO₄干燥，并将粗产物通过硅胶色谱法纯化，用PE/EA洗脱，得到2,3,5-三碘苯胺；

合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯：在3℃下将草酰氯滴入辛二酸单甲酯在无水CH₂Cl₂的溶液中并搅拌12.5h，然后在减压下蒸发溶剂和过量的草酰氯，然后加入CHCl₃，然后再加入2,3,5-三碘苯胺和三乙胺，并在68℃下回流4.8小时，然后减压蒸发溶剂，并将粗产物通过硅胶色谱法纯化，用PE/EA(V:V＝5:1)洗脱，得到8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯；

合成伏立诺他衍生物：将甲醇钠的甲醇溶液添加到盐酸羟胺的甲醇溶液中，搅拌11分钟，并滤出NaCl，将合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯加入滤液中，将所得混合物在26℃下搅拌4.5小时，然后减压除去溶剂，将产物溶于乙醇中，然后将草酸加入溶液中，然后将沉淀物过滤并从水中结晶得为到伏立诺他衍生物。

实施例6

诊疗一体化合物的制备方法，包括如下步骤：合成Boc-2,3,5-三碘苯甲酸：将4mmol的2,3,5-三碘苯甲酸溶解在40mL的t-BuOH中。然后加入4.8mmol的DPPA和4.8mmol的TEA，并将混合物在氮气气氛下于90℃搅拌2小时，然后将混合物减压除去溶剂，将残余物溶于30mL的DCM，用饱和NaHCO₃洗涤得到有机相，然后将有机相用无水Na₂SO₄干燥，然后将有机相浓缩，残余物通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA(V:V＝10:1)洗脱，得到Boc-2,3,5-三碘苯甲酸；

合成2,3,5-三碘苯胺：将1mmol的Boc-2,3,5-三碘苯甲酸溶于5mlCH₂Cl₂溶液中，在0℃向Boc-2,3,5-三碘苯甲酸的CH₂Cl₂溶液中加入2mlTFA，消耗完原料后，将混合物蒸发，然后加入饱和NaHCO₃水溶液，将有机层用盐水洗涤并用无水Na₂SO₄干燥，并将粗产物通过硅胶色谱法纯化，用PE/EA(V:V＝5:1)洗脱，得到2,3,5-三碘苯胺；

合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯：在0℃下将2ml的草酰氯滴入辛二酸单甲酯在无水15ml的CH₂Cl₂的溶液中并搅拌12h，然后在减压下蒸发溶剂和过量的草酰氯，然后加入CHCl₃，然后再加入1mmol的2,3,5-三碘苯胺和三乙胺，并在65℃下回流4.5小时，然后减压蒸发溶剂，并将粗产物通过硅胶色谱法纯化，用PE/EA(V:V＝5:1)洗脱，得到8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯；

合成伏立诺他衍生物：将6mmol的甲醇钠的5ml甲醇溶液添加到4mmol盐酸羟胺的8ml甲醇溶液中，搅拌10分钟，并滤出NaCl，将合成1mmol的8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯加入滤液中，将所得混合物在23-27℃下搅拌4小时，然后减压除去溶剂，将产物溶于10ml的乙醇中，然后将4mmol的草酸加入溶液中，然后将沉淀物过滤并从水中结晶得为到伏立诺他衍生物。

试验例1：CT体外成像

在2ml Eppendorf管中制备具有不同浓度的目标伏立诺他衍生物(0.12mol/L,0.06mol/L,0.03mol/L,0.015mol/L)，并将其与水以及空管放置在自行设计的扫描架中，然后通过16层螺旋CT(美国GE公司)进行扫描。所有扫描均通过以下参数完成：管电压：100KV；管电流：80mA；层厚：1.25mm；螺距：0.562:1。不同浓度伏立诺他衍生物和水以及空管的的X射线体外成像如图1所示，不同浓度伏立诺他衍生物的CT值如图2所示。

根据上述实验结果可以知道：伏立诺他衍生物具有较好的X射线阻滞能力，说明其可以作为CT造影剂，并且其能力随着浓度的升高而升高，呈线性增长趋势。

试验例2：细胞毒测试

将目标化合物溶解在DMSO中，并分别在5种人类癌细胞(MGC-803，U973，SK-OV-3，T-24，A549)和正常人类肝细胞HL-7702中进行评估。在96孔板的每个孔中生长处于对数期的约1.0×10⁵个细胞/mL细胞，并在5％CO₂中于37℃孵育12小时。还将五种不同浓度(2.5、5、10、20和50μM)的测试化合物添加到测试孔中，然后将细胞在5％CO₂气氛中于37℃孵育48小时。使用酶标记仪器读取570/630nm双波长测量的吸光度。与阴性对照相比，在细胞存活百分比上检测到细胞毒性。最终的IC₅₀值通过Bliss方法计算(n＝5)。所有测试重复三次。伏立诺他衍生物和伏立诺他分别对五个选定的肿瘤细胞系和人类正常细胞48h的IC₅₀值，实验结果如下表所示：

根据上述结果可知：伏立诺他衍生物与上市药物伏立诺他相比具有相似的抗肿瘤活性，并且同样对于正常细胞的毒性较低。

试验例3：HDAC抑制活性：

HDAC3/6抑制生物活性验证称取适量的伏立诺他衍生物和物伏立诺，分别用DMSO1mL溶解成1mmol·L^-1母液。取各母液200μL，分别加入DMSO 200μL配成浓度为500μmol·L^-1的溶液，待用。另取各母液100μL，分别加入DMSO 900μL配成浓度为100μmol·L^-1的溶液，待用。用试剂盒中的buffer将2种浓度的待测小分子溶液稀释4倍，同时将TSA溶液稀释10倍。根据说明书进行操作，设置空白孔(不含HDAC和待测样品)以及酶孔(含有HDAC，不含待测样品)。用酶标仪进行荧光强度检测。R_EG，R_S，R_EC分别代表空白孔、待测样品孔或TSA孔、酶孔的荧光强度。计算不同浓度待测样品对HDAC3和HDAC6的抑制率，计算公式为抑制率＝(R_EC-R_S)/(R_EC-R_EG)×100％。伏立诺他衍生物和伏立诺他针对HDAC3、HDAC6的的IC₅₀值如下表所示：

根据上述结果可知：伏立诺他衍生物与上市药物伏立诺他相比具有相近的HDAC3、HDAC6抑制活性。

试验例4：Western Blot检测HDAC抑制活性：

使用Western Blot检测了U973细胞中HDAC3和HDAC6已知底物乙酰组蛋白3(AcH3)和乙酰-α-微管蛋白(AcTub)的表达水平。使用Western Blot检测了U973细胞中AcH3和HDAC6已知底物乙酰-α-微管蛋白(AcTub)的表达水平。将处于对数生长期的U973细胞置于六孔板中培养，向其中加入指定浓度(5,10和20μM)的伏立诺他衍生物和伏立诺他15μM，并用适当的培养基在5％CO₂,37℃的环境中共同孵育24小时。温育24小时后，离心收集细胞，并用冰冷的PBS缓冲液洗涤两次。然后将沉淀重新悬浮于裂解缓冲液中。将细胞在冰上裂解30分钟后，在4℃下将裂解物使用离心机12000r/min，离心5分钟。使用BCA蛋白质测定试剂(Imgenex,USA)检查上清液中的蛋白质浓度。在12％SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳上分离每行等量的蛋白质，并转移至PVDF Hybond-P膜(GE Healthcare)。将膜与5％脱脂乳在Tris盐缓冲液中与吐温20(TBST)缓冲液一起温育1小时，然后在4℃下将膜温和旋转过夜。然后将膜与针对AcH3，AcTub的一抗在4℃下孵育过夜。接着将膜与过氧化物酶标记的二抗一起温育2小时，然后用TBST缓冲液洗涤所有膜三次15分钟，用化学发光试剂(Thermo FischerScientifics Ltd.)检测蛋白质印迹。结果如图3所示。

根据上述实验结果可以知道：伏立诺他衍生物与U973细胞作用后上调了其AcH3，AcTub的水平，说明伏立诺他衍生物能够抑制HDAC3/6的活性。

综上所述，本发明实施例提供的一种诊疗一体化合物、制备方法及其应用，至少具有以下有益效果：

第一方面，本发明实施例提出一种诊疗一体化合物，其为伏立诺他衍生物，上述伏立诺他衍生物通过在伏立诺他的苯环上引入至少一个碘原子。

因为碘原子具有良好的X射线阻断能力，碘化化合物，如碘苯甲醇，碘海醇，碘克沙醇，泛影酸钠被用于CT成像，并且有许多基于这些碘化化合物的探针的报道，但是，当造影剂通过共价键与药物分子连接时，它或多或少会降低药物活性；而伏立诺他用于治疗T细胞淋巴瘤，因为伏立诺他具有帽基团，通过在伏立诺他的帽基团上引入碘原子，不仅可以衰减X射线作为CT造影剂，还可以保持伏立诺他与HDAC的结合活性(作为HDAC抑制剂)，因此这样的伏立诺他衍生物具备诊疗一体化的功能。

第二方面，本发明实施例还提出一种如上所述诊疗一体化合物的制备方法，包括如下步骤：合成Boc-2,3,5-三碘苯甲酸：将2,3,5-三碘苯甲酸溶解在t-BuOH中。然后加入DPPA和TEA，并将混合物在氮气气氛下于85-95℃搅拌1.5-2.5小时，然后将混合物减压除去溶剂，将残余物溶于DCM，用饱和NaHCO₃洗涤得到有机相，然后将有机相用无水Na₂SO₄干燥，然后将有机相浓缩，残余物通过硅胶柱色谱纯化，用PE/EA洗脱，得到Boc-2,3,5-三碘苯甲酸；合成2,3,5-三碘苯胺：将Boc-2,3,5-三碘苯甲酸溶于CH₂Cl₂溶液中，在-5-5℃向Boc-2,3,5-三碘苯甲酸的CH₂Cl₂溶液中加入TFA，消耗完原料后，将混合物蒸发，然后加入饱和NaHCO₃水溶液，将有机层用盐水洗涤并用无水Na₂SO₄干燥，并将粗产物通过硅胶色谱法纯化，用PE/EA洗脱，得到2,3,5-三碘苯胺；合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯：在-5-5℃下将草酰氯滴入辛二酸单甲酯在无水CH₂Cl₂的溶液中并搅拌11-13h，然后在减压下蒸发溶剂和过量的草酰氯，然后加入CHCl₃，然后再加入2,3,5-三碘苯胺和三乙胺，并在60-70℃下回流4-5小时，然后减压蒸发溶剂，并将粗产物通过硅胶色谱法纯化，用PE/EA洗脱，得到8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯；合成伏立诺他衍生物：将甲醇钠的甲醇溶液添加到盐酸羟胺的甲醇溶液中，搅拌8-12分钟，并滤出NaCl，将合成8-氧代-8-((2,3,5-三碘苯基)氨基)辛酸甲酯加入滤液中，将所得混合物在23-27℃下搅拌3-5小时，然后减压除去溶剂，将产物溶于乙醇中，然后将草酸加入溶液中，然后将沉淀物过滤并从水中结晶得为到伏立诺他衍生物。

这种制备方法十分简单，成本低，且这样制得的伏立诺他衍生物可以最大程度保持伏立诺他原有的活性，同时还具备了灵敏的X射线造影的活性。

第三方面，本发明实施例还提出了一种上所述诊疗一体化合物的应用，将其应用于抗肿瘤药物。这样的抗肿瘤药物不仅可以用于***，还可以用于诊断，集诊疗于一体。

以上所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。