阅读说明：本技术 一种鳄鱼提取物在抗菌中的应用 (Application of crocodile extract in antibiosis ) 是由 张树华 于 2020-05-11 设计创作，主要内容包括：本发明提供一种鳄鱼提取物在制备抗菌药物中的应用方法,属于动物油脂精制技术领域,所述的鳄鱼提取物是鳄鱼油,鳄鱼油由以下方法制得,先通过对鳄鱼脂肪进行水解得到鳄鱼粗油,再对鳄鱼粗油使用碱性乙醇进行萃取,最后过滤和离心纯化得到鳄鱼精提油,具有制作流程简单、低成本和具有一定的抗菌活性的优点。(The invention provides an application method of crocodile extract in preparation of antibacterial drugs, which belongs to the technical field of refining of animal fat, wherein the crocodile extract is crocodile oil, and the crocodile oil is prepared by the following method, first, crocodile fat is hydrolyzed to obtain crocodile crude oil, then, the crocodile crude oil is extracted by using alkaline ethanol, and finally, crocodile refined oil is obtained by filtering and centrifugal purification.)

一种鳄鱼提取物在抗菌中的应用

技术领域

本发明属于动物油脂精制技术领域，尤其涉及一种鳄鱼提取物在抗菌中的应用。

背景技术

鳄鱼为脊索动物门、爬行纲、鳄目的两栖爬行动物，是迄今存活着的最古老的动物之一。鳄鱼浑身都是宝，有极高的科研究和开发利用价值。鳄鱼皮是高档皮革原料，鳄鱼肉、油、血、肝、胆、甲、掌等组织和器官都有重要的药用保健功能。鳄鱼作为新型经济养殖动物，在我国广东和海南等省大量人工养殖。综合开发利用人工养殖的鳄鱼有重要的经济、社会与环保效益。

鳄鱼油已有几个世纪的药用历史，可用于治疗从皮肤疾病到癌症等多种病症。《本草纲目》记载：“鼍(鳄鱼)脂，主治皮肤病和恶疮。”现代研究表明，鳄鱼油有防冻伤、促进皮肤伤口愈和合减少疤痕形成、延缓皮肤衰老、提高皮肤细胞超氧化物歧化酶活性、降低皮肤组织脂褐质含量和提神醒脑的功效。因此，鳄鱼油在医药保健品和功能护肤品中有广泛的应用。

不同动物油脂的成分差异较大，所需提取和精制方法及其工艺各不相同。鳄鱼是近年来开发的新型养殖经济动物，鳄鱼油的提取与精致方法和工艺的研究很少，特别是鳄鱼油含大量的具有医药保健功能的多烯不饱和脂肪酸，易被氧化分解，制备具有完整生物活性成分的高品质鳄鱼油对鳄鱼油的提取和精制十分重要。

发明内容

基于上述现状，本发明提供一种鳄鱼提取物在制备抗菌药物中的应用方法，所述的鳄鱼提取物是鳄鱼油，鳄鱼油由以下方法制得，先通过对鳄鱼脂肪进行水解得到鳄鱼粗油，再对鳄鱼粗油使用碱性乙醇进行萃取，最后过滤和离心纯化得到鳄鱼精提油，具有制作流程简单、低成本和具有一定的抗菌活性的优点。

本发明通过以下详细技术方案达到上述目的：

一种鳄鱼提取物在制备抗菌药物中的应用。

其中，所述的鳄鱼提取物是鳄鱼精提油。

其中，所述的鳄鱼精提油由以下步骤制成：

步骤S1，取鳄鱼脂肪水解得到鳄鱼粗油；

步骤S2，取步骤S1中制得的鳄鱼粗油使用碱性乙醇溶液进行萃取，再过滤取鳄鱼油滤液；

步骤S3，取步骤S2中获得的鳄鱼油滤液用蒸馏水洗涤多次；

步骤S4，取步骤S3中洗涤过的鳄鱼油滤液进行离心分层，取油脂层即得鳄鱼精提油。

其中，所述的步骤S2中的碱性乙醇是pH9.0的80％乙醇溶液。

其中，所述的步骤S2中进行2次碱性乙醇溶液萃取。

其中，所述的步骤S3中使用蒸馏水洗涤3次。

本发明具有的有益效果：鳄鱼精提油在抗菌方面具有一定的活性，且通过本发明的方法制备鳄鱼精提油并应用于抗菌药物的制备中，能降低药物的制作成本。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做详细的描述。

实施例一：鳄鱼精提油的提取。

步骤S1，称取适量的鳄鱼脂肪或者含有鳄鱼脂肪的鳄鱼组织水解得到鳄鱼粗油；

步骤S2，取100g步骤S1中制得的鳄鱼粗油使用100ml pH 9.0的80％碱性乙醇溶液进行萃取2次，再过滤取鳄鱼油滤液；

步骤S3，取步骤S2中获得的鳄鱼油滤液用蒸馏水洗涤3次；

步骤S4，取步骤S3中洗涤过的鳄鱼油滤液进行离心分层，取油脂层即得浅黄色的澄清的鳄鱼精提油，并且鱼腥味有明显降低。

实施例二：鳄鱼多肽的抗菌活性测试。

分别采用鳄鱼骨多肽、鳄鱼肉多肽、鳄鱼皮多肽和鳄鱼油进行抗菌活性测试。

配制浓度为100ug/mL的刃天青溶液作为指示剂，刃天青溶液与供试菌溶液(108CFU/mL)按照体积比7.5：5混合。然后吸取190uL到孔板的第1至11列的A行测试孔中，并吸取100uL到第1至第11列剩余的所有测试孔中。吸取10uL待测样品(10mg/mL)溶液加入到第一列板孔中，混匀，此时该孔中的待测样品浓度为500ug/mL。再从A孔取出100uL的溶液转移到B孔中，然后接下几列用同样的方法稀释到第H孔中形成系列浓度梯度溶液，以保证每一列的孔中的溶液均为100uL，且同一列中各孔样品浓度呈二倍递减。第12列的孔中均加入100uL的刃天青溶液。最后，将加好样品的孔板放入到恒温培养箱，37℃培养5-6h，直到孔板的颜色发生变化。

检测活性标准：颜色从粉红色到蓝色为有活性，若颜色无变化则无活性或者活性很弱；发生颜色变化的最低稀释浓度被认为是待测化合物的最低抑菌浓度(MIC)。

在一个96孔板，可同时测定5个样品(每个样品测试两个重复)以及1个阳性对照和1个阴性对照。具体的测试结果如下表所示。

上述实验结果表明鳄鱼油具有一定的抗菌活性，对革兰氏阳性菌S.aureus(ATCC6538)、革兰氏阳性菌E.coli(ATCC 8739)以及真菌C.albicans(ATCC10231)菌都具有一定程度上的抑制细菌生产的作用，甚至对于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA(JCSC 3063)也有一定的抑制作用。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。