阅读说明：本技术 一种鳄鱼提取物在抗癌中的应用 (Application of crocodile extract in anticancer ) 是由 张树华 于 2020-05-11 设计创作，主要内容包括：本发明提供一种鳄鱼提取物在制备抗癌药物或者抗癌辅助药物的制备中的应用方式,属于鳄鱼提取物应用技术领域,所述的鳄鱼提取物是鳄鱼多肽,其通过对鳄鱼组织进行加热软化,再进行高温恒温水解,再对水解产物进行浓缩干燥得到鳄鱼多肽提取物粉末,具有制作流程简单、低成本和具有一定的抑癌活性的优点。(The invention provides an application mode of a crocodile extract in preparation of an anti-cancer drug or an anti-cancer auxiliary drug, which belongs to the technical field of crocodile extract application.)

一种鳄鱼提取物在抗癌中的应用

技术领域

本发明属于鳄鱼提取物应用技术领域，尤其涉及一种鳄鱼提取物在抗癌中的应用。

背景技术

鳄鱼属脊椎动物爬行虫纲，广泛生长于越南、泰国、马来西亚等南亚国家，作为祖龙现存唯一的后代，鳄鱼具有体形大、繁殖力强、生长快、抗病力强等特点。鳄鱼全身是宝，鳄鱼的肉、骨、甲及内脏含有丰富的优良蛋白质和人体必需的氨基酸、不饱和脂肪酸、维生素及各种微量元素。

蛋白作为人体必需的营养素，对人体的生命健康极为重要。流行病学调查结果表明，如果每天蛋白摄入量过低，就容易患食管癌、胃癌、肝癌等。另外，大量科学研究表明，通过控制水解的程度和水解的条件，水解某些蛋白质可得到大量生物活性多肽，这些生物活性多肽不仅具有活性高、易消化吸收和安全性高等优点，而且具有特殊的生理调节功能，例如降低血脂、延缓衰老、美体养颜、抗氧化、抗忧郁、抗疲劳、改善睡眠、增强记忆、抑制肿瘤等；还能促进人体对蛋白质、维生素及各种有益微量元素的吸收。科学研究发现，机体内的活性多肽是沟通细胞与细胞之间、器官与器官之间的重要化学信使，通过内分泌、旁分泌、神经内分泌以及神经分泌等作用方式，传递各种特异信息，从而可调节生长、发育、繁殖、代谢和行为等生命过程。

生物活性多肽研究领域发展很快，已经受到了各国科学家和政府的高度重视，通过对食物蛋白进行水解或加工以获得生物活性多肽，具有原料丰富、成本低廉、安全性好、便于工业生产、应用性好等独特的优点，受到各国科学的推崇。活性多肽作为药物，其活性作用点集中于较短多肽链上，不仅可以提高药物有效值和生物活性，而且可以减少非目标活性成分的不良反应，提高其专一性。

发明内容

基于上述现状，本发明提供一种鳄鱼提取物在制备抗癌药物或者抗癌辅助药物的制备中的应用方式，所述的鳄鱼提取物是鳄鱼多肽，其通过对鳄鱼组织进行加热软化，再进行高温恒温水解，再对水解产物进行浓缩干燥得到鳄鱼多肽提取物粉末，具有制作流程简单、低成本和具有一定的抑癌活性的优点。

本发明通过以下详细技术方案达到上述目的：

一种鳄鱼提取物在制备抗癌药物或者抗癌辅助药物中的应用。

其中，所述的鳄鱼提取物是鳄鱼骨多肽和鳄鱼肉多肽中的一种或者两种的组合。

其中，所述的鳄鱼骨多肽和鳄鱼肉多肽由以下步骤制成：

步骤S10，取鳄鱼组织充分洗净，将洗净的鳄鱼组织加热水解；

步骤S20，取步骤S10中获得的水解产物进行静置沉淀，再进行过滤取滤液，为粗提物；

步骤S30，取步骤S20中获得的粗提物，加入硅藻土和活性炭搅拌，再次进行静置沉淀，并过滤取滤液，为精提取液；

步骤S40，取步骤S30中获得的精提取液，进行干燥，得鳄鱼肽粉末；

所述的鳄鱼组织是鳄鱼骨或者鳄鱼肉。

其中，所述的步骤S10中的加热水解是将鳄鱼组织放入蒸馏水中，并于110-130℃的油浴锅中加热搅拌7-9h；所述的鳄鱼组织和蒸馏水的质量比是鳄鱼组织：蒸馏水＝1：5。

其中，所述的步骤S10中还包括步骤S11，取鳄鱼组织于70-80℃清水中浸泡25-35min。

其中，所述的步骤S40中包括步骤S41，取步骤S30中获得的精提取液，使用真空水泵浓缩得到浓缩提取液。

其中，所述的步骤S40中包括步骤S42，取步骤S41中获得的浓缩提取液，使用冷冻干燥机干燥成粉末。

本发明具有的有益效果：鳄鱼多肽在抑癌抗肿瘤方面具有一定的活性，且通过本发明的方法制备鳄鱼多肽并应用于抗癌药物的制备中，能降低药物的制作成本。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做详细的描述。

实施例一：鳄鱼多肽粉末的制备。

分别称取10g鳄鱼骨、鳄鱼皮和鳄鱼肉，分别按如下步骤制成鳄鱼骨多肽、鳄鱼皮多肽和鳄鱼肉多肽：

步骤S10，将鳄鱼骨、鳄鱼皮或者鳄鱼肉置于70-80℃清水中浸泡30min，再用水充分洗净，然后将洗净的鳄鱼组织置于盛有50mL蒸馏水的有底烧瓶中，并于120℃的油浴锅中加热搅拌8h，充分水解；

步骤S20，取步骤S10中获得的水解产物进行静置沉淀，再进行过滤取滤液，为粗提物；

步骤S30，取步骤S20中获得的粗提物，加入硅藻土和活性炭搅拌，再次进行静置沉淀，并过滤取滤液，得到略带浅黄色的纯清的精提取液；

步骤S40，取步骤S30中获得的精提取液，使用真空水泵浓缩得到浓缩提取液；取浓缩提取液进一步使用冷冻干燥机干燥成粉末，提取结果如下表1。

表1，鳄鱼组织提取结果表。

鳄鱼组织种类	组织用量(g)	多肽获得量(mg)
			鳄鱼骨	10	40
鳄鱼皮	10	125
			鳄鱼肉	10	160

实施例二：鳄鱼多肽抗癌活性测试。

收集对数生长期的肿瘤细胞以1×10⁵个/mL的浓度接种于96孔板，100μL/孔，于37℃，5％CO₂培养箱中培养24h使细胞贴壁；吸去上清液，加入含实验所需浓度样品液的维持液，于37℃，5％CO₂培养箱中培养48h；弃药液，每孔加含5mg/mL的MTT 20μL，继续培养4h，弃孔内培养液，加DMSO 150μL/孔，置于摇床上震荡10min，使结晶充分溶解，于酶标仪570nm处测各孔吸光值。

实验同时设置调零孔(培养基，MTT，DMSO)，对照孔(细胞，相同浓度的物溶解介质DMSO，培养液，MTT，DMSO)。

计算：细胞抑制率＝[(对照-本底)-(给药-本底)]/(对照-本底)×100％。实验数据以平均值±标准差表示，多个样本均数的比较用单因素方差分析，组间比较用t检验，检验水准α＝0.05，数据处理用SPSS 16.0软件完成。具体实验结果如下表2所示：

表2，鳄鱼多肽抗癌活性测试结果表。

实验结果表明鳄鱼骨多肽和鳄鱼肉多肽在100μg/mL的浓度下，对于四种不同癌细胞A549、HeLa、NCI-H460、CNE有一定的抗肿瘤活性，而鳄鱼皮多肽不具有抗癌活性。实验结果也暗示着鳄鱼骨多肽和鳄鱼肉多肽基本没有明显的体外细胞毒性，能够安全的使用。

以上所述实施例仅表达了本发明的一种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。