阅读说明：本技术 N,n-二甲基甲酰胺在抗凝血杀鼠剂渗透剂中的应用 (Application of N, N-dimethylformamide in anticoagulant rodenticide penetrant ) 是由 姜洪雪 姚丹丹 冯志勇 于 2020-06-29 设计创作，主要内容包括：本发明公开了N,N-二甲基甲酰胺在抗凝血杀鼠剂渗透剂中的应用。该N,N-二甲基甲酰胺作为渗透剂可以提高抗凝血杀鼠剂的水溶性,增加药物进入谷壳内米粒的含量,提升了药物的利用率,即对抗凝血杀鼠剂有增效作用,可以在降低抗凝血杀鼠剂使用浓度的情况下保证不降低灭鼠效果,且该渗透剂的使用可以提高抗凝血杀鼠剂的适口性。因此,本发明中的渗透剂的使用可以降低灭鼠成本,减轻环境污染的风险,减少人畜中毒事件发生的概率,保证人畜安全,同时,可以延长抗凝血杀鼠剂的使用寿命,延缓杀鼠剂的抗性发展。(The invention discloses application of N, N-dimethylformamide in an anticoagulant rodenticide penetrant. The N, N-dimethylformamide can be used as a penetrant to improve the water solubility of the anticoagulant rodenticide, increase the content of rice grains entering the rice husks of the medicine, improve the utilization rate of the medicine, namely, the anticoagulant rodenticide has a synergistic effect, the rodenticide effect can be ensured not to be reduced under the condition of reducing the use concentration of the anticoagulant rodenticide, and the palatability of the anticoagulant rodenticide can be improved by using the penetrant. Therefore, the use of the penetrant in the invention can reduce the deratization cost, reduce the risk of environmental pollution, reduce the probability of poisoning events of people and livestock, ensure the safety of people and livestock, prolong the service life of the anticoagulant rodenticide and delay the resistance development of the rodenticide.)

N,N-二甲基甲酰胺在抗凝血杀鼠剂渗透剂中的应用

技术领域

本发明属于灭鼠技术领域，特别涉及N,N-二甲基甲酰胺在抗凝血杀鼠剂渗透剂中的应用。

背景技术

啮齿动物是哺乳动物中种类最多、分布最广、数量最大的类群，其中一些种类对农业生产、人民生命安全及公共安全造成巨大危害。为控制害鼠的危害，通常采用以生态调控为基础的综合治理技术，其中化学防治是极其重要的防控措施。

从世界范围来看，使用化学杀鼠剂仍然是目前主要的防控方法，该方法成本低、见效快、效果好且容易推广。而抗凝血类杀鼠剂是一类相对安全、适口性好、灭鼠效率高的杀鼠剂，是当前最重要的防控鼠害的慢性化学药剂，自上世纪80年代，在我国农牧区和城市广泛使用。但是连续使用超过6年的地区陆续报道了鼠类抗药性的产生，交互抗性和抗性种群的出现，大大降低了灭鼠效果，提高了灭鼠难度和成本。而新药创制难度大，且必须同时满足“适口性好、高效、安全、经济”的特点。为此，探索和研究一些化学成分对抗凝血杀鼠剂的增效作用，延长杀鼠剂的使用寿命成为近年来的研究热点，如阿司匹林、双氯芬酸钠、水杨酸等物质与抗凝血杀鼠剂具有协同抗凝血作用，但增效作用有限。

在我国南方气候潮湿多雨，稻谷是农区灭鼠的最适诱饵，具有适口性更好、保鲜期长和来源广泛的优点。但是抗凝血杀鼠剂不溶于水，稻壳对药物具有阻滞作用，90％左右的杀鼠剂粘附在稻壳表面，米中含量甚微，鼠类剥壳食米，药物利用率低，由此造成的环境污染和非靶标动物中毒风险也更大。渗透剂属于农药助剂的一种，具有提高药剂有效成分渗透性的作用，可提高药效及降低农药使用量。而渗透剂用在杀鼠剂中的情况极少，中国专利201310316842.3、名称为“一种抗凝血灭鼠剂渗透剂及其制备方法和应用”中公开了一种以氢氧化钠、氯化钠、乙醇、二甲基亚砜复配的抗凝血渗透剂，但此研究复配的成分较多，制备方法相对复杂，实际应用受到限制。

截止目前，N,N-二甲基甲酰胺这种有机溶剂尚未在灭鼠实践中应用，有重要的研究价值和应用前景。

发明内容

为了克服上述现有技术的缺点与不足，本发明的首要目的在于提供N,N-二甲基甲酰胺在制备抗凝血杀鼠剂渗透剂中的应用，以提高杀鼠剂利用率及防控效果、减少杀鼠剂使用量、降低杀鼠剂的生态风险。

本发明的另一目的在于提供N,N-二甲基甲酰胺作为抗凝血杀鼠剂渗透剂在制备增效抗凝血杀鼠剂毒饵中的应用。

本发明的再一目的在于提出一种增效抗凝血杀鼠剂毒饵。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

N,N-二甲基甲酰胺在制备抗凝血杀鼠剂渗透剂中的应用。

所述的抗凝血杀鼠剂渗透剂中还可以含有其他溶剂。

所述的溶剂优选为水。

所述的N,N-二甲基甲酰胺与水的体积比为1～3:1～3。

N,N-二甲基甲酰胺作为抗凝血杀鼠剂渗透剂中的应用。

N,N-二甲基甲酰胺作为抗凝血杀鼠剂渗透剂在制备增效抗凝血杀鼠剂毒饵中的应用。

所述的增效抗凝血杀鼠剂毒饵还含有谷物(即抗凝血杀鼠剂诱饵)和溴敌隆等。

所述的谷物为稻谷、小麦、玉米等常见的谷物中的至少一种；优选为稻谷。

所述的N,N-二甲基甲酰胺的用量为按每1000g谷物添加20～60mL N,N-二甲基甲酰胺配比计算；优选为按每1000g谷物添加40mL N,N-二甲基甲酰胺配比计算。

所述的溴敌隆优选为采用有效成分含量为0.5％的溴敌隆母液。

所述的溴敌隆中有效成分的含量占谷物重量的0.0025％～0.01％；优选为占谷物重量的0.0025％。

一种增效抗凝血杀鼠剂毒饵，包括N,N-二甲基甲酰胺、谷物和溴敌隆。

所述的N,N-二甲基甲酰胺的用量为按每1000g谷物添加20～60mL N,N-二甲基甲酰胺配比计算；优选为按每1000g谷物添加40mL N,N-二甲基甲酰胺配比计算。

所述的谷物为稻谷、小麦、玉米等常见的谷物中的至少一种；优选为稻谷。

所述的溴敌隆优选为采用有效成分含量为0.5％的溴敌隆母液。

所述的溴敌隆中有效成分的含量占谷物重量的0.0025％～0.01％；优选为占谷物重量的0.0025％。

所述的增效抗凝血杀鼠剂毒饵还可以含有其他溶剂。

所述的溶剂优选为水。

所述的增效抗凝血杀鼠剂毒饵的制备方法，包括如下步骤：将N,N-二甲基甲酰胺加入到水中，再加入溴敌隆混合均匀，然后将其与谷物混合均匀，待药液吸干后晾干，得到增效抗凝血杀鼠剂毒饵。

本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：

(1)多数抗凝血杀鼠剂不溶于水，南方地区气候湿润、雨量充沛，常用稻谷毒饵灭鼠，约90％的药物黏附在稻壳表面，易受雨水冲刷或自然脱落降低防控效果，鼠类摄食后遗留下毒稻壳污染环境。因此，本发明提供了一种渗透剂提高抗凝血杀鼠剂的溶解性和渗透性，增加药物进入谷壳内米粒的含量，从而提升药物的利用率，降低杀鼠剂的使用浓度，保证降雨频繁条件下的灭鼠效果，减轻环境污染，减少人畜中毒事件发生的概率；同时，延长抗凝血杀鼠剂的使用寿命，延缓杀鼠剂的抗性发展。

(2)本发明提供的抗凝血杀鼠剂在降低抗凝血杀鼠剂使用浓度的情况下保证灭鼠效果不减，该效果是由于渗透剂能提高抗凝血杀鼠剂的水溶性，增加药物进入谷壳内米粒的含量，提升药物的利用率。

(3)南方地区降雨频繁，使用本发明的渗透剂后能耐雨水冲刷，在极端天气条件下具有显著的增效作用，该优点是由于渗透剂能提高抗凝血杀鼠剂的水溶性，增加药物进入谷壳内米粒的含量，提升了药物的利用率。

(4)本发明中的渗透剂的使用降低了灭鼠成本，减轻了环境污染的风险，保证了人畜安全，该效果是由于渗透剂使药物更多的渗入米中从而降低了药物的使用浓度。

(5)本发明中的渗透剂的使用提高了抗凝血杀鼠剂的适口性，该特点可能是由于该渗透剂的特殊气味从而提高了适口性。

附图说明

图1是不同助剂配制的毒谷米粒中杀鼠剂的含量图。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。除非特别说明，本发明采用的药剂、方法和设备为本技术领域常规药剂、方法和设备。下列实施例中未注明具体实验条件的试验方法，通常按照常规实验条件。除非特别说明，本发明所用药剂、试剂和原材料均可通过市售获得。

实施例中涉及的有效成分含量0.5％(即每500ml母液中含有溴敌隆2.5g)溴敌隆母液购自河南商丘市大卫化工有限公司。

实施例1添加2％渗透剂的0.0025％溴敌隆毒谷

2％渗透剂与杀鼠剂的复配方法如下：

以配制1000g浓度为0.0025％的溴敌隆稻谷为例，准确称量20ml的N,N-二甲基甲酰胺，与60ml水混合，再加入5ml有效成分含量0.5％溴敌隆母液，混匀后再与1000g稻谷搅拌混合均匀，待药液吸干后晾干。

实施例2添加4％渗透剂的0.0025％溴敌隆毒谷

4％渗透剂与杀鼠剂的复配方法如下：

以配制1000g浓度为0.0025％的溴敌隆稻谷为例，准确称量40ml的N,N-二甲基甲酰胺，与40ml水混合，再加入5ml有效成分含量0.5％溴敌隆母液，混匀后再与1000g稻谷搅拌混合均匀，待药液吸干后晾干。

实施例3添加6％渗透剂的0.0025％溴敌隆毒谷

6％渗透剂与杀鼠剂的复配方法如下：

以配制1000g浓度为0.0025％的溴敌隆稻谷为例，准确称量60ml的N,N-二甲基甲酰胺，与20ml水混合，再加入5ml有效成分含量0.5％溴敌隆母液，混匀后再与1000g稻谷搅拌混合均匀，待药液吸干后晾干。

实施例4比较不同助剂配制毒谷米粒中杀鼠剂的含量

(1)试验助剂为：聚乙二醇、丙二醇、丙三醇及N,N-二甲基甲酰胺。

(2)配制方法如下:

①准确称量20ml N,N-二甲基甲酰胺，与20ml水混合，再加入10ml有效成分含量0.5％溴敌隆母液，混匀后再与500g稻谷搅拌混合均匀，待药液吸干后晾干，配制成添加4％的N,N-二甲基甲酰胺的0.01％溴敌隆毒谷；其它助剂(聚乙二醇、丙二醇、丙三醇)的配制方法同上；

②常规浓度0.01％的溴敌隆毒谷的配制方法如下：有效成分含量0.5％的溴敌隆母液50ml兑水200ml，充分搅拌倒入2.5kg稻谷中，待药液被吸干后，晾干，配制成浓度0.01％的溴敌隆毒谷。

(3)采用高效液相色谱法分别测定上述添加助剂后毒谷米粒中溴敌隆的含量，以南方地区常用的浓度0.01％溴敌隆毒谷米粒中溴敌隆含量为对照，样品前处理以及测定方法如下：

①甲醇提取：手工将毒谷稻壳与糙米分离，分别用粉碎机研磨，过60目筛，得到壳粉和米粉；然后分别准确称取1g壳粉及4g米粉，置于100ml具塞离心管中，加入甲醇40ml，加塞后振荡15min，超声(超声频率40KHZ)提取15min，3000r/min离心5min，分离上清，得到壳粉上清液和米粉上清液；

②中性氧化铝固相萃取小柱净化：预先以5ml甲醇活化中性氧化铝柱(AL5006-N,Alumina N SPE,500mg/6ml)，弃流出液，分别取壳粉上清液4ml，米粉上清液5ml上样，用10ml甲醇-乙酸(95％+5％，v/v)溶液洗脱，收集洗脱液，60℃氮吹近干，用1ml甲醇溶解残渣，过有机滤头(0.2μm，13mm)，待测；

③高效液相色谱法测定，其仪器工作条件如下：C18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)；柱温：30℃；流速：0.5ml/min；进样量：20μl；检测器：荧光检测器检测，激发波长310nm，发射波长390nm；流动相A：水+0.25％(v/v)乙酸，流动相B：甲醇+0.25％(v/v)乙酸，梯度洗脱如表1所示。

表1梯度洗脱方案

时间(分钟)	(A)％	(B)％
			0	75	25
5	5	95
			20	0	100

结果如图1所示：结果表明，添加4％二甲基甲酰胺配制的浓度0.01％溴敌隆毒谷米粒中溴敌隆的含量显著高于其他助剂配制的毒谷及对照米粒中溴敌隆的含量(F＝145.829，P＝0.000)。因此，本发明选择N,N-二甲基甲酰胺作为溴敌隆毒谷渗透剂。

实施例5添加渗透剂后毒谷的适口性及毒杀效果

(1)添加渗透剂的毒谷对小白鼠的有选择试验结果

选择成年、健康、非孕、无外伤的昆明小白鼠(购自广州市黄埔区长胜养殖场)，鉴别雌雄，称量体重，采用有选择摄食试验，单笼饲养，体重平均大于20g，雌性31只，雄性29只。

将实验小白鼠分为A、B、C三组(每组20只)，其中：

A组：以5g的0.01％溴敌隆毒谷(同实施例4)和5g稻谷(即无毒谷)为可选择的食饵；

B组：以5g添加4％渗透剂的0.0025％溴敌隆毒谷(实施例2制备)和5g稻谷(无毒谷)为可选择的食饵；

C组：以添加4％渗透剂的0.01％溴敌隆毒谷(同实施例4)和5g稻谷(无毒谷)为可选择的食饵；

具体过程如下：每组小白鼠分别先用稻谷饲养2d，然后分别将5g稻谷和5g的溴敌隆毒谷对角线放入饲养笼内，让小白鼠自由选择取食，每天称稻谷和毒谷的消耗量，更换新饵并交换位置。连续选择摄食3d后，清除毒谷，改用常规饲料正常饲养，计算摄食系数。

试验结果如表2所示，添加4％渗透剂的0.0025％溴敌隆毒谷(B组)摄食系数高于0.01％溴敌隆毒谷(A组)(t＝-2.971，P＝0.006)和添加4％渗透剂的0.01％溴敌隆毒谷(C组)(t＝2.459，P＝0.019)，适口性佳。而且试验结束后，添加4％渗透剂的0.0025％溴敌隆毒谷处理组的小白鼠全部死亡(死亡率100％)，其他两组死亡率为95％。

表2添加渗透剂的毒谷对小白鼠的有选择试验结果

(2)添加渗透剂的毒谷对小白鼠的无选择试验结果

选择成年、健康、非孕、无外伤的昆明小白鼠(购自广州市黄埔区长胜养殖场)，鉴别雌雄，称量体重，采用无选择定量摄食试验，单笼饲养，体重平均大于20g，雌性26只，雄性28只。

将实验小白鼠分为A、B、C三组，其中：

A组：0.01％溴敌隆毒谷(制备方法同实施例4)；

B组：0.0025％溴敌隆毒谷，其配制方法如下：有效成分含量0.5％的溴敌隆母液5ml兑水80ml，充分搅拌倒入1.0kg稻谷中，待药液被吸干后，晾干，配制成0.0025％的溴敌隆毒谷；

C组：添加4％渗透剂的0.0025％溴敌隆毒谷(实施例2制备)；

具体过程如下：每组小白鼠分别先用稻谷饲养2d，然后按体重15％重量的毒谷连续饲喂小白鼠3d，每天称毒谷的消耗量，更换新饵。3d后，清除毒谷，改用常规饲料正常饲养，观察14天，记录死亡时间，计算死亡率。

试验结果如表3所示，添加4％渗透剂的0.0025％溴敌隆毒谷(C组)毒杀效果与0.01％溴敌隆毒谷(A组)一致，毒杀率均达到100％，显著高于未加渗透剂的0.0025％溴敌隆毒谷的毒杀率(χ²＝19.259，P＝0.000)，而且添加4％渗透剂的毒谷平均致死天数短于0.0025％溴敌隆毒谷(B组)，说明添加4％渗透剂的0.0025％溴敌隆毒谷具有显著增效作用。

表3添加渗透剂的毒谷对小白鼠的无选择试验结果

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。