一种川芎嗪纳米晶体、川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶、制备方法及其应用
阅读说明：本技术 一种川芎嗪纳米晶体、川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶、制备方法及其应用 (Ligustrazine nanocrystal, ligustrazine nanocrystal temperature-sensitive hydrogel, preparation method and application thereof ) 是由 陈芹 陈彦 吴星伟 管怀进 刘聪燕 于 2021-07-27 设计创作，主要内容包括：本发明提出了一种川芎嗪纳米晶体、川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶、制备方法及其应用,涉及药物技术领域。该川芎嗪温敏性水凝胶由川芎嗪纳米晶体、泊洛沙姆和增溶剂维生素E聚乙二醇琥珀酸酯组成,所述中药单体川芎嗪包裹于纳米晶体胶束中。眼用温敏性水凝胶是基于泊洛沙姆共聚物的温敏水凝胶所制成,载难溶性药物川芎嗪。本发明的优点在于川芎嗪温敏性水凝胶具有温度依赖型可快速发生溶胶-凝胶转变的物理交联方式,缓释效果佳,药物粒径小、组织穿透力强、药物溶解度增加、载药量提高、包封率大于95％,生物利用度及生物相容性高,无明显全身毒副反应。此制备方法工艺简单,耗时短且成本低,便于推广。本发明具有良好的临床应用前景和开发价值。(The invention provides a ligustrazine nanocrystal, a ligustrazine nanocrystal temperature-sensitive hydrogel, a preparation method and application thereof, and relates to the technical field of medicines. The ligustrazine thermosensitive hydrogel is composed of ligustrazine nanocrystals, poloxamer and a solubilizer vitamin E polyethylene glycol succinate, and the traditional Chinese medicine monomer ligustrazine is wrapped in the nanocrystal micelles. The eye temperature sensitive hydrogel is prepared from temperature sensitive hydrogel based on poloxamer copolymer, and carries insoluble drug ligustrazine. The ligustrazine temperature-sensitive hydrogel has a temperature-dependent physical crosslinking mode capable of rapidly generating sol-gel conversion, has a good slow release effect, small drug particle size, strong tissue penetration, increased drug solubility, improved drug loading rate, an encapsulation rate of more than 95 percent, high bioavailability and biocompatibility and no obvious systemic toxic and side effects. The preparation method has the advantages of simple process, short time consumption, low cost and convenient popularization. The invention has good clinical application prospect and development value.)
技术领域
本发明涉及药物技术领域，具体而言，涉及一种川芎嗪纳米晶体、川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶、制备方法及其应用。
背景技术
视网膜新生血管形成(Retinal neovascularization，RNV)和脉络膜新生血管形成(Choroid neovascularization，CNV)与多种眼病相关，如糖尿病视网膜病变(diabeticretinopathy,DR)、湿性年龄相关性黄斑变性(neovascular age-related maculardegeneration，nAMD)、早产儿视网膜病以及视网膜中央和分支静脉阻塞等。在发达国家，nAMD是50岁以上人群失明的主要原因，其特征是CNV的形成。CNV的形成源于不成熟的新生血管破坏布鲁赫膜，并从下面的脉络膜向外视网膜生长，是一个涉及炎症和血管生成的过程。
针对眼底出血性疾病的治疗方法中，玻璃体腔内注射抗血管内皮生长因子抑制剂(anti－vascular endothelial growth factor therapy，Anti－VEGF)的抗新生血管药物治疗已被认为是针对CNV的一线治疗策略，虽然这些药物在治疗新生血管性眼病中取得了一定的疗效，但同时也存在很大的局限性。主要缺点是药物分子量较大且疗效较短，而玻璃体蛋白清除率高，因此需要经眼内玻璃体腔反复注射，感染、出血和血管栓塞等并发症的发生几率大大增加。并非所有患者都从这种治疗中获益。有部分患者需要反复注射，甚至终生治疗，并且治疗效果不理想。
川芎作为祖国传统中草药，生物活性成分2，3，5，6四甲基吡嗪(TMP)，也称为川芎嗪，具有活血化瘀、抗氧化、调节血脂、改善血液流变学等作用，常用于治疗冠心病心绞痛等疾病。川芎嗪潜在治疗机制包括调节免疫系统和增强抗炎作用。川芎嗪是一种脂溶性药物，在水中溶解度低，如何增加其在水溶剂中的溶解度以利于吸收一直是药品研发的挑战。
CNV需要活性物质的持续释放才能获得成功的疗效，研发新的持续有效释放的活性药物能避免药物的快速清除和减少多次注射的风险。温敏水凝胶材料是环境温度下的低粘度聚合物水溶液，该类水凝胶可通过胶束的增溶作用改善药物包载性能，从而实现药物的长效缓释，以良好的生物相容性和药物在靶器官的安全有效释放，成为“药物仓库”延长药物在眼部的滞留时长。基于纳米复合温敏水凝胶的药物载体，药物先从纳米晶体颗粒释放到水凝胶，再从水凝胶扩散至眼部，因此具有更好的缓释效果。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶，该温敏性水凝胶的载药量高，包封率大于95％，可用于玻璃体内的长效缓释，减少注射频次。
本发明的第二目的在于提供一种川芎嗪纳米晶体，该川芎嗪纳米晶体可用于眼部注射。
本发明的第三目的在于提供一种前述川芎嗪纳米晶体的制备方法，此制备方法工艺简单，晶体粒径均一，可用于后续温敏性水凝胶的制备。
本发明的第四目的在于提供一种前述川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶的制备方法，此制备方法工艺简单，耗时短，生产成本低，并且整个过程安全无毒，便于推广。
本发明的第五目的在于提供一种前述的川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶在制备用于治疗眼部出血性疾病的温敏水凝胶纳米递药系统中的应用。
本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。
第一方面，本申请实施例提供一种川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶，川芎嗪纳米晶体包裹于温敏水凝胶中，所述川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶用于眼部注射用。
第二方面，本申请实施例提供一种川芎嗪纳米晶体，由川芎嗪和泊洛沙姆制备而成。
第三方面，本申请实施例提供一种前述的川芎嗪纳米晶体的制备方法，包括如下步骤，将川芎嗪和泊洛沙姆溶解于有机溶剂中，将含有药物的有机溶剂通过旋转蒸发和真空干燥除去后，水合旋转再通过冰浴超声法即得到川芎嗪纳米晶体制剂。
第四方面，本申请实施例提供一种川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶的制备方法，向前述的川芎嗪纳米晶体制剂中再加入泊洛沙姆和增溶剂，冰浴搅拌混匀，得到所述川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶。
第五方面，本申请实施例提供一种前述的川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶在制备用于治疗眼部出血性疾病的温敏水凝胶纳米递药系统中的应用。
相对于现有技术，本发明的实施例至少具有如下优点或有益效果：
效果一，川芎嗪是脂溶性难溶药物，如何增加其在水溶液中的溶解度一直是药品研发的挑战。CNV需要活性物质的持续释放才能获得成功的治疗效果，研发新的制剂能够持续有效的释放活性药物是积极有效、势在必行的，这也能避免药物的快速清除和减少多次注射的风险。本发明结合温敏水凝胶基于环境温度变化而产生可逆溶胶-凝胶改变的优势，设计溶解度及穿透力均提高的川芎嗪纳米晶体温敏水凝胶，其能够在局部病灶实现原位缓释效果，从而发挥中药单体的局部长期应用疗效。
效果二，玻璃体内给药的药物作用时间可能部分取决于所注射药物在给药部位的保留时长。玻璃体内半衰期越长，预期的治疗反应持续时间就越长。温敏水凝胶材料是环境温度下的低粘度聚合物水溶液，可以轻松进行药物包封和玻璃体腔注射给药。当给药环境超过其临界成胶温度时，便能发生快速凝胶化的物理交联方式的改变，从而实现局部原位缓释给药，以有效的生物相容性和安全并有效延长荷载药物的释放，成为“药物仓库”延长药物在眼部滞留时长。因此，本发明提供的川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶，通过温敏性水凝胶包载川芎嗪纳米晶体，可以使药物靶向作用于原发病灶，减少全身毒副作用，同时水凝胶可以发挥局部长效缓释效果，对症状起到一个长时间的治疗作用。这种制剂不仅可以减少注射的次数，降低病人对药物的依赖性，使血药浓度长时间稳定于治疗浓度，使其发挥缓释作用，从而提高药物的疗效，增加患者的顺应性。
效果三，本发明提供的川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶的制备方法工艺简单，耗时短，生产成本低，易于工业化生产和大规模推广，具有良好的产业化前景。同时，本发明提供的制备方法其载药量高，治疗效果更好。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为本发明实施例1中川芎嗪纳米晶体(TMP-NCs)的粒径图；
图2为本发明实施例1中川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶(TMP-NCs-gel)的粒径图。
图3为本发明实施例2中川芎嗪纳米晶体(TMP-NCs)的透射电镜图(TEM图)。
图4为本发明实施例2中川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶(TMP-NCs-gel)的透射电镜图(TEM图)；
图5为本发明实施例2中川芎嗪纳米晶体(TMP-NCs)的粒径图；
图6为本发明实施例2中川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶(TMP-NCs-gel)的粒径图；
图7为本发明实施例2中川芎嗪纳米晶体(TMP-NCs)及川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶(TMP-NCs-gel)的体外缓释曲线；
图8为本发明实施例3中川芎嗪纳米晶体(TMP-NCs)的粒径图；
图9为本发明实施例3中川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶(TMP-NCs-gel)的粒径图；
图10为本发明实施例4中川芎嗪纳米晶体(TMP-NCs)的粒径图；
图11为本发明实施例4中川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶(TMP-NCs-gel)的粒径图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将参考具体实施例来详细说明本发明。
第一方面，本申请实施例提供一种川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶，川芎嗪纳米晶体包裹于温敏水凝胶中，所述川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶用于眼部注射用。
在本发明的一些实施例中，上述川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶，所述川芎嗪纳米晶体温敏水凝胶的相变温度为24℃～25℃，温敏性水凝胶选自泊洛沙姆嵌段共聚物水凝胶，所述泊洛沙姆在所述川芎嗪纳米晶体温敏水凝胶的质量浓度为15％～25％，所述泊洛沙姆嵌段共聚物水凝胶用于负载川芎嗪纳米晶体。
在本发明的一些实施例中，上述川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶，所述川芎嗪纳米晶体是由中药单体川芎嗪和泊洛沙姆制备而成的水溶剂，所述水溶剂中川芎嗪和泊洛沙姆的质量比为1:2.5～1:4。
在本发明的一些实施例中，上述川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶，还包括维生素E聚乙二醇琥珀酸酯，所述维生素E聚乙二醇琥珀酸酯的浓度为0.05～0.2％(w/w)。
在本发明的一些实施例中，上述川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶，所述川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶中川芎嗪的浓度为0.5mg/ml～4mg/ml。
在本发明的一些实施例中，上述川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶，所述川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶中川芎嗪的浓度为0.5mg/ml～2.75mg/ml。
在本发明的一些实施例中，上述川芎嗪纳米晶体以及川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶，所述川芎嗪纳米晶体的粒径为100～1000nm；所述川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶的粒径10nm～1000nm。
在本发明的一些实施例中，上述川芎嗪纳米晶体以及川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶，所述川芎嗪纳米晶体的粒径为100～200nm；所述川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶的粒径10nm～200nm。
第二方面，本申请实施例提供一种川芎嗪纳米晶体，由川芎嗪和泊洛沙姆制备而成。
第三方面，本申请实施例提供一种前述的川芎嗪纳米晶体的制备方法，包括如下步骤，将川芎嗪和泊洛沙姆溶解于有机溶剂中，将溶有药物的有机溶剂通过旋转蒸发和真空干燥除去后，水合旋转再通过冰浴超声法即得到川芎嗪纳米晶体制剂。
在本发明的一些实施例中，上述川芎嗪纳米晶体的制备方法，所述干燥的具体步骤包括，将溶有川芎嗪和泊洛沙姆的有机溶剂混合物真空干燥30～90min，去除全部的有机溶剂至药物析出形成药物膜，再向其中加入与初始有机溶剂等量的蒸馏水，使药物膜溶解于蒸馏水中，水合30～60min后涡旋5～15min，于20～40W下冰浴超声粉碎10～30min，即为所述川芎嗪纳米晶体制剂。
第四方面，本申请实施例提供一种川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶的制备方法，向前述的川芎嗪纳米晶体制剂中再加入泊洛沙姆和增溶剂，冰浴搅拌混匀，得到所述川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶。
第五方面，本申请实施例提供一种前述的川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶在制备用于治疗眼部出血性疾病的温敏水凝胶纳米递药系统中的应用。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例的目的在于提供一种川芎嗪纳米晶体以及川穹嗪纳米晶体温敏性水凝胶，其主要通过如下步骤制备而成：
首先将川芎嗪和非离子型表面活性剂泊洛沙姆F127按重量比为1:2.5分别称取置于茄形瓶中，加入对应浓度相当剂量的有机溶剂二氯甲烷，然后在旋转蒸发器上蒸发二氯甲烷，旋转蒸发器温度设置为二氯甲烷沸点40℃，同时利用真空干燥泵和干燥箱抽真空干燥40分钟，真空抽吸去除有机溶剂二氯甲烷，茄形瓶底可见溶有川芎嗪和泊洛沙姆的二氯甲烷有机溶剂抽真空后形成的药物膜，茄形瓶中加入等量于有机溶剂初始入量的蒸馏水，使茄形瓶底的膜溶解于蒸馏水中，然后在旋转蒸发器上水合30分钟，紧接着于涡旋仪上涡旋5分钟，最后冰浴法在超声细胞粉碎仪中20W超声25分钟，即为所述川芎嗪纳米晶体制剂。
川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶按照如下冰浴方法制备，具体如下：在川芎嗪纳米晶体制剂中加入表面活性剂F127以及增溶剂D-α-维生素E聚乙二醇琥珀酸酯，使最终表面活性剂质量浓度为15％(w/w)，增溶剂质量终浓度为0.1％(w/w)。然后在冰浴中用磁力搅拌器搅拌混合物，直到表面活性剂以及增溶剂完全溶解，得到透明澄清的溶液(TMP-NCs-Gel)，样品以固态凝胶保存在室温(RT)中。该凝胶中，川芎嗪的浓度为0.5mg/ml。
通过Malvern Zetasizer(ZEN3600 Nano ZS,Worcestershire,UK)粒径仪分别对川芎嗪纳米晶体(TMP-NCs)和川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶(TMP-NCs-gel)进行粒径和电位差测量，图1为川芎嗪纳米晶体(TMP-NCs)的粒径图，其粒径为213.4nm，分散系数Pdi为0.876，电位差为-5.05；图2为川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶(TMP-NCs-gel)的粒径图，其粒径为191nm，分散系数Pdi为0.667，电位差-5.71，包封率大于95％。
实施例2
本实施例的目的在于提供川芎嗪纳米晶体以及川穹嗪纳米晶体温敏性水凝胶，其主要通过如下步骤制备而成：
首先将川芎嗪和非离子型表面活性剂泊洛沙姆F127按重量比为1:3分别称取置于茄形瓶中，加入对应浓度相当剂量的有机溶剂二氯甲烷，然后在旋转蒸发器上蒸发二氯甲烷，旋转蒸发器温度设置为二氯甲烷沸点37℃，同时在真空干燥泵和干燥箱下抽真空干燥60分钟，真空抽吸去除有机溶剂二氯甲烷，茄形瓶底可见溶有川芎嗪和泊洛沙姆的二氯甲烷有机溶剂抽真空后形成的药物膜，茄形瓶中加入等量于有机溶剂初始入量的蒸馏水，使茄形瓶底的膜溶解于蒸馏水中，然后在旋转蒸发器上水合40分钟，紧接着于涡旋仪上涡旋10分钟，最后冰浴法在超声细胞粉碎仪中30W超声15分钟，即为所述川芎嗪纳米晶体制剂。
川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶按照如下冰浴方法制备，具体如下：在川芎嗪纳米晶体制剂中加入表面活性剂F127以及增溶剂D-α-维生素E聚乙二醇琥珀酸酯，使最终表面活性剂质量浓度为20％(w/w)，增溶剂质量终浓度为0.1％(w/w)。然后在冰浴中用磁力搅拌器搅拌混合物，直到表面活性剂以及增溶剂完全溶解，得到透明澄清的溶液(TMP-NCs-Gel)，样品以固态凝胶保存在室温(RT)中。该凝胶中，川芎嗪的浓度为1mg/ml。
通过电镜观察川芎嗪纳米晶体(TMP-NCs)和川芎嗪纳米晶体温敏水凝胶(TMP-NCs-gel)的粒径，结果如图3所示，通过图3可见粒径均一，图3中四图为川芎嗪纳米晶体(TMP-NCs)的透射电镜图(不同倍率)，由图中可见，川芎嗪纳米晶体(TMP-NCs)为棒状结构。图4中四图为川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶(TMP-NCs-gel)透射电镜图(不同倍率)，当纳米晶体制成凝胶后其形态发生变化，变成不流动的透明固态，微观形态可见温敏水凝胶为圆球状的纳米粒。
通过Malvern Zetasizer(ZEN3600 Nano ZS,Worcestershire,UK)粒径仪分别对川芎嗪纳米晶体(TMP-NCs)和川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶(TMP-NCs-gel)进行粒径和电位差测量，图5为川芎嗪纳米晶体(TMP-NCs)的粒径图，其粒径为149.7nm，分散系数Pdi为1.0，电位差为-5.23；图6为川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶(TMP-NCs-gel)的粒径图，粒径分别为132.8nm和10.35nm，分散系数Pdi为0.309，电位差-9.52，包封率大于95％。图7为1mg/ml川芎嗪纳米晶体及川芎嗪温敏性水凝胶(TMP-NCs-gel)的体外缓释曲线，由图7可见，本实施例制备的川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶相较于川芎嗪纳米晶体能够达到缓慢稳定的释放效果。
实施例3
本实施例的目的在于提供川芎嗪纳米晶体以及川穹嗪纳米晶体温敏性水凝胶，其主要通过如下步骤制备而成：
首先将川芎嗪和非离子型表面活性剂泊洛沙姆F127按重量比为1:3.5分别称取置于茄形瓶中，加入对应浓度相当剂量的有机溶剂二氯甲烷，然后在旋转蒸发器上旋转蒸发二氯甲烷，旋转蒸发器温度设置为二氯甲烷沸点38℃，同时在真空干燥泵和干燥箱下抽真空干燥70分钟，真空抽吸去除有机溶剂二氯甲烷，茄形瓶底可见溶有川芎嗪和泊洛沙姆的二氯甲烷有机溶剂抽真空后形成的药物膜，茄形瓶中加入等量于有机溶剂初始入量的蒸馏水，使茄形瓶底的膜溶解于蒸馏水中，然后在旋转蒸发器上水合50分钟，接着于涡旋仪上涡旋15分钟，最后冰浴法在超声细胞粉碎仪中40W超声25分钟，即得所述川芎嗪纳米晶体制剂。
川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶按照如下冰浴方法制备，具体如下：在川芎嗪纳米晶体制剂中加入泊洛沙姆F127以及增溶剂D-α-维生素E聚乙二醇琥珀酸酯，使最终F127浓度为25％(w/w)，增溶剂终浓度为0.15％(w/w)。然后在冰浴中用磁力搅拌器搅拌混合物，直到泊洛沙姆以及增溶剂完全溶解，得到透明澄清的溶液(TMP-NCs-Gel)，样品以固态凝胶保存在室温(RT)中。该凝胶中，川芎嗪的浓度为2.75mg/ml。
通过Malvern Zetasizer(ZEN3600 Nano ZS,Worcestershire,UK)粒径仪分别对川芎嗪纳米晶体(TMP-NCs)和川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶(TMP-NCs-gel)进行粒径和电位差测量，图8为川芎嗪纳米晶体(TMP-NCs)的粒径图，其粒径为312.6nm，分散系数Pdi为0.621，电位差为-7.65；图9为川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶(TMP-NCs-gel)的粒径图，粒径分别为9.002nm和112.9nm，分散系数Pdi为0.329，电位差-14.6，包封率大于95％。
实施例4
本实施例的目的在于提供川芎嗪纳米晶体以及川穹嗪纳米晶体温敏性水凝胶，其主要通过如下步骤制备而成：
首先将川芎嗪和非离子型表面活性剂泊洛沙姆F127按重量比为1:4分别称取置于茄形瓶中，加入对应浓度相当剂量的有机溶剂二氯甲烷，然后在旋转蒸发器上旋转蒸发二氯甲烷，旋转蒸发器温度设置为二氯甲烷沸点40℃，同时在真空干燥泵和干燥箱下抽真空干燥90分钟，真空抽吸去除有机溶剂二氯甲烷，茄形瓶底可见溶有川芎嗪和泊洛沙姆的二氯甲烷有机溶剂抽真空后形成的药物膜，茄形瓶中加入等量于有机溶剂初始入量的蒸馏水，使茄形瓶底的膜溶解于蒸馏水中，然后在旋转蒸发器上水合60分钟，接着于涡旋仪上涡旋15分钟，最后冰浴法在超声细胞粉碎仪中40W超声30分钟，即得所述川芎嗪纳米晶体制剂。
川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶按照如下冰浴方法制备，具体如下：在川芎嗪纳米晶体制剂中加入表面活性剂F127以及增溶剂D-α-维生素E聚乙二醇琥珀酸酯，使最终F127浓度为25％(w/w)，增溶剂终浓度为0.15％(w/w)。然后在冰浴中用磁力搅拌器搅拌混合物，直到泊洛沙姆以及增溶剂完全溶解，得到透明澄清的溶液(TMP-NCs-Gel)，样品以固态凝胶保存在室温(RT)中。该凝胶中，川芎嗪的浓度为4mg/ml。
通过Malvern Zetasizer(ZEN3600 Nano ZS,Worcestershire,UK)粒径仪分别对川芎嗪纳米晶体(TMP-NCs)和川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶(TMP-NCs-gel)进行粒径和电位差测量，图9为川芎嗪纳米晶体(TMP-NCs)的粒径图，其粒径为818.9nm，分散系数Pdi为0.289，电位差为-12.1；图11为川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶(TMP-NCs-gel)的粒径图，粒径包括6.839nm、16.27nm和254.7nm，分散系数Pdi为0.447，电位差-13.3，包封率大于95％。
前述实施例中除了使用F127外，还可以使用其他类型的泊洛沙姆。
综上所述，本发明实施例的提供的川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶，具有如下优点：
效果一，川芎嗪是脂溶性难溶药物，如何将其制成水溶性制剂一直是药品研发的挑战。CNV需要活性物质的持续释放才能获得成功的治疗结果，研发新的制剂能够持续有效的释放活性药物对于CNV的临床治疗具有重要意义，这也能避免药物的快速清除和减少多次注射的风险。本制剂以泊洛沙姆温敏水凝胶为载体，包载川芎嗪纳米晶体，可以达到最佳的原位长效缓释效果，使血药浓度长时间稳定于治疗浓度，最大程度发挥缓释和局部起效的作用，从而提高药物的疗效，增加患者的顺应性，相对于其他温敏性水凝胶载体，具有更优的治疗效果。
效果二，玻璃体内给药的药物作用时间可能部分取决于所注射药物在给药部位的保留时长。玻璃体内半衰期越长，预期的治疗反应持续时间就越长。而玻璃体内注射的缺点可通过配方修改和药物剂型的优化来缓解。本发明提供的川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶的相变温度为24℃～25℃，在眼部玻璃体内环境下，纳米晶体胶束逐渐膨胀，在表面形成稠厚的凝胶屏障，直达病灶，对症状起到一个长时间治疗的作用，无明显全身其他不良反应。同时本制剂不仅可以减少注射的次数及病人对药物的依赖性，而且可使血药浓度长时间稳定于治疗浓度，使其发挥缓释和局部起效的作用，从而提高药物的疗效，增加患者的顺应性。
效果三，本发明提供的川芎嗪温敏性水凝胶的制备方法工艺简单，耗时短，生产成本低，易于工业化生产和大规模推广，具有良好的产业化前景。同时，制剂通过相对无创的局部玻璃体腔注射法，直接注射至眼后段，制剂在体温下迅速转化为透明半固态的凝胶储库，达到局部缓慢释放治疗作用，药物安全性高，无论是川芎嗪晶体制剂还是川芎嗪纳米晶体温敏性水凝胶制剂都呈现透明性状。眼球是具有高透光性的屈光成像视光转换器官，是人类与外界环境进行信息及情感交换交流的重要感官。良好的视觉对眼睛屈光成像系统有很高的要求，因此，泊洛沙姆温敏水凝胶有望在透明度需求较高的眼部尤其是眼底病领域起到重要作用。本发明具有良好的临床应用前景和开发价值。
以上所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。