阅读说明：本技术 一种松花粉低聚肽的制备方法及应用 (Preparation method and application of pollen pini oligopeptide ) 是由 何小平 李海龙 戴承恩 郑芬芬 于 2020-06-22 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种松花粉低聚肽的制备方法,包括以下步骤：对松花粉混合液进行水浴超声震荡处理,过滤取其沉淀干燥,接着冷藏使其内水分结晶,然后进行破壁处理,加入水和复合蛋白酶进行水解,将酶解液超滤后进行减压蒸发得到松花粉低聚肽浓缩液,松花粉低聚肽浓缩液经喷雾干燥得到松花粉低聚肽。本发明的松花粉在破壁之前经过一系列处理,使得松花粉破壁彻底,还不会破坏松花粉的营养成分,一些具有活性的低聚肽等营养成分充分溶出,更加适合食用,尤其适合作为保健食品的有效成分,使其营养更加丰富。(The invention discloses a preparation method of pine pollen oligopeptide, which comprises the following steps: performing water bath ultrasonic oscillation treatment on the pollen pini mixed solution, filtering to obtain precipitate, drying, refrigerating to crystallize water in the pollen pini mixed solution, performing wall breaking treatment, adding water and compound protease for hydrolysis, performing reduced pressure evaporation on the enzymolysis solution after ultrafiltration to obtain pollen pini oligopeptide concentrated solution, and performing spray drying on the pollen pini oligopeptide concentrated solution to obtain pollen pini oligopeptide. The pine pollen is subjected to a series of treatments before wall breaking, so that the wall breaking of the pine pollen is thorough, the nutrient components of the pine pollen cannot be damaged, and some active oligopeptide and other nutrient components are fully dissolved out, so that the pine pollen is more suitable for eating, particularly suitable for serving as effective components of health-care food, and richer in nutrition.)

一种松花粉低聚肽的制备方法及应用

技术领域

本发明涉及低聚肽制备技术领域，具体涉及一种松花粉低聚肽的制备方法及应用。

背景技术

松花粉为松科植物马尾松、油松或同属植物的花粉，是中国医学宝库中药食兼用品种。松花粉含有人体所需的大部分营养成分，包括蛋白质、氨基酸、单糖、多糖、核酸、矿物质等多种活性成分，且搭配合理，能够补充、均衡人体所需的营养，素有“绿色黄金”之称，具有增强免疫力、抗疲劳、抗衰老、保护心血管等多种功能活性作用。近年来的研究表明，蛋白质在动物消化道中的消化酶作用下水解最终产物大部分是2或3个氨基酸残基组成的低聚肽。肽的吸收具有速度快、耗能低、不易饱和且各种肽之间转运无竞争性和抑制性的特点。

发明内容

本发明为了解决上述问题，提供了一种松花粉低聚肽的制备方法及应用。

本发明采用如下技术方案：

一种松花粉低聚肽的制备方法，其制备方法包括以下步骤：

①取新鲜成熟松花粉除杂，将松花粉与水以质量比1：2放入烧瓶中搅拌混匀，得到松花粉混合液，进行水浴超声震荡处理5～8分钟。

松花粉细胞外壁被一层高致密度分子结构的纤维外壳所包裹，它的细胞外壳非常坚硬并具有韧性，还具有较强的耐酸性、耐碱性和抗辐射性，因此，松花粉的营养成分不能有效地释放出来被人体吸收。通过超声震荡处理可以使得松花粉的细胞外壳致密度下降，变得疏松、脆弱，易于后续的破壁处理，提高松花粉的破壁效率。

②将步骤①的松花粉混合液进行过滤取其沉淀，得到松花粉沉淀，将松花粉沉淀放入干燥箱中在70℃～85℃温度环境下干燥，至松花粉含水量为12％～15％；

③将步骤②的松花粉装入真空袋中并抽真空密封，然后将装有松花粉的真空袋放入-45℃～-30℃的环境中冷藏12～16小时，使松花粉中12％～15％的水分形成结晶。松花粉中的水分结晶后可增大松花粉的体积，使松花粉膨胀，内部压力增大，利于后续的破壁处理。

④将结晶的松花粉与干冰细粒以质量比2:3～5混合，得到松花粉干冰混合物，然后将松花粉干冰混合物置于超音速气流粉碎机中，通入压缩气体进行超微粉碎，使松花粉粒之间、松花粉粒与干冰细粒之间相互碰撞、摩擦使其破壁粉碎，得到破壁松花粉。加入干冰细粒可以吸热使松花粉在破壁过程中保持在低温环境下，避免松花粉内的水结晶融化或蒸发，而且干冰吸热后是直接蒸发成二氧化碳气体挥发掉，因此不会残留在松花粉中，方便有效。

⑤将破壁松花粉与水以质量比为1：20～30进行溶解搅拌均匀，调节pH为9～11，进行水浴超声震荡2～5分钟，然后加入复合蛋白酶，在震荡状态下进行酶水解4～8小时，得到松花粉酶解液。这里前面的超声震荡是为了激发松花粉的蛋白活性，使其具有活性易于水解，而后面的超声震荡可以加快酶水解反应，同时提高酶水解的水解效率。

⑥将松花粉酶解液置于85℃～100℃下热水浴灭酶20～30分钟，冷却后进行离心取其清液，得到松花粉低聚肽溶液，将松花粉低聚肽溶液经超滤膜进行超滤，得到松花粉低聚肽超滤液；

⑦将松花粉低聚肽超滤液进行减压蒸发得到松花粉低聚肽浓缩液，松花粉低聚肽浓缩液经喷雾干燥得到松花粉低聚肽。

作为本发明的一种优选技术方案，步骤④中的所述压缩气体为二氧化碳气体。

作为本发明的一种优选技术方案，步骤⑤中的复合蛋白酶包括碱性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶。

一种松花粉低聚肽，根据权利要求1～3制备所得，所述松花粉低聚肽作为有效成分应用于保健食品。保健食品还可以含有富硒活性酵母、玉米低聚肽、小麦低聚肽等营养成分。

本发明的有益效果是：

本发明的松花粉在破壁之前经过一系列处理，使得松花粉破壁彻底，还不会破坏松花粉的营养成分，一些具有活性的低聚肽等营养成分充分溶出，更加适合食用，尤其适合作为保健食品的有效成分，使其营养更加丰富。

具体实施方式

下面将结合本发明的实施例，对发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

一种松花粉低聚肽的制备方法，其制备方法包括以下步骤：

①取新鲜成熟松花粉除杂，将松花粉与水以质量比1：2放入烧瓶中搅拌混匀，得到松花粉混合液，进行水浴超声震荡处理5分钟；

②将步骤①的松花粉混合液进行过滤取其沉淀，得到松花粉沉淀，将松花粉沉淀放入干燥箱中在70℃温度环境下干燥，至松花粉含水量为12％；

③将步骤②的松花粉装入真空袋中并抽真空密封，然后将装有松花粉的真空袋放入-45℃的环境中冷藏12小时，使松花粉中12％的水分形成结晶；

④将结晶的松花粉与干冰细粒以质量比2:3混合，得到松花粉干冰混合物，然后将松花粉干冰混合物置于超音速气流粉碎机中，通入压缩气体进行超微粉碎，使松花粉粒之间、松花粉粒与干冰细粒之间相互碰撞、摩擦使其破壁粉碎，得到破壁松花粉；

⑤将破壁松花粉与水以质量比为1：20进行溶解搅拌均匀，调节pH为9，进行水浴超声震荡2分钟，然后加入复合蛋白酶，在震荡状态下进行酶水解4小时，得到松花粉酶解液；

⑥将松花粉酶解液置于85℃下热水浴灭酶20分钟，冷却后进行离心取其清液，得到松花粉低聚肽溶液，将松花粉低聚肽溶液经超滤膜进行超滤，得到松花粉低聚肽超滤液；

⑦将松花粉低聚肽超滤液进行减压蒸发得到松花粉低聚肽浓缩液，松花粉低聚肽浓缩液经喷雾干燥得到松花粉低聚肽。

进一步地，步骤④中的所述压缩气体为二氧化碳气体。

进一步地，步骤⑤中的复合蛋白酶包括碱性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶。

一种松花粉低聚肽，根据权利要求1～3制备所得，所述松花粉低聚肽作为有效成分应用于保健食品。保健食品还可以含有富硒活性酵母、玉米低聚肽、小麦低聚肽等营养成分。

实施例2

一种松花粉低聚肽的制备方法，其制备方法包括以下步骤：

①取新鲜成熟松花粉除杂，将松花粉与水以质量比1：2放入烧瓶中搅拌混匀，得到松花粉混合液，进行水浴超声震荡处理6分钟；

②将步骤①的松花粉混合液进行过滤取其沉淀，得到松花粉沉淀，将松花粉沉淀放入干燥箱中在78℃温度环境下干燥，至松花粉含水量为14％；

③将步骤②的松花粉装入真空袋中并抽真空密封，然后将装有松花粉的真空袋放入-40℃的环境中冷藏14小时，使松花粉中14％的水分形成结晶；

④将结晶的松花粉与干冰细粒以质量比2:4混合，得到松花粉干冰混合物，然后将松花粉干冰混合物置于超音速气流粉碎机中，通入压缩气体进行超微粉碎，使松花粉粒之间、松花粉粒与干冰细粒之间相互碰撞、摩擦使其破壁粉碎，得到破壁松花粉；

⑤将破壁松花粉与水以质量比为1：25进行溶解搅拌均匀，调节pH为10，进行水浴超声震荡3分钟，然后加入复合蛋白酶，在震荡状态下进行酶水解6小时，得到松花粉酶解液；

⑥将松花粉酶解液置于96℃下热水浴灭酶25分钟，冷却后进行离心取其清液，得到松花粉低聚肽溶液，将松花粉低聚肽溶液经超滤膜进行超滤，得到松花粉低聚肽超滤液；

⑦将松花粉低聚肽超滤液进行减压蒸发得到松花粉低聚肽浓缩液，松花粉低聚肽浓缩液经喷雾干燥得到松花粉低聚肽。

进一步地，步骤④中的所述压缩气体为二氧化碳气体。

进一步地，步骤⑤中的复合蛋白酶包括碱性蛋白酶、、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶。

一种松花粉低聚肽，根据权利要求1～3制备所得，所述松花粉低聚肽作为有效成分应用于保健食品。该保健食品还可以含有富硒活性酵母、玉米低聚肽、小麦低聚肽等营养成分。

实施例3

一种松花粉低聚肽的制备方法，其制备方法包括以下步骤：

①取新鲜成熟松花粉除杂，将松花粉与水以质量比1：2放入烧瓶中搅拌混匀，得到松花粉混合液，进行水浴超声震荡处理8分钟；

②将步骤①的松花粉混合液进行过滤取其沉淀，得到松花粉沉淀，将松花粉沉淀放入干燥箱中在85℃温度环境下干燥，至松花粉含水量为15％；

③将步骤②的松花粉装入真空袋中并抽真空密封，然后将装有松花粉的真空袋放入-30℃的环境中冷藏16小时，使松花粉15％的水分形成结晶；

④将结晶的松花粉与干冰细粒以质量比2:5混合，得到松花粉干冰混合物，然后将松花粉干冰混合物置于超音速气流粉碎机中，通入压缩气体进行超微粉碎，使松花粉粒之间、松花粉粒与干冰细粒之间相互碰撞、摩擦使其破壁粉碎，得到破壁松花粉；

⑤将破壁松花粉与水以质量比为1：30进行溶解搅拌均匀，调节pH为11，进行水浴超声震荡5分钟，然后加入复合蛋白酶，在震荡状态下进行酶水解8小时，得到松花粉酶解液；

⑥将松花粉酶解液置于100℃下热水浴灭酶30分钟，冷却后进行离心取其清液，得到松花粉低聚肽溶液，将松花粉低聚肽溶液经超滤膜进行超滤，得到松花粉低聚肽超滤液；

⑦将松花粉低聚肽超滤液进行减压蒸发得到松花粉低聚肽浓缩液，松花粉低聚肽浓缩液经喷雾干燥得到松花粉低聚肽。

进一步地，步骤④中的所述压缩气体为二氧化碳气体。

进一步地，步骤⑤中的复合蛋白酶包括碱性蛋白酶、、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶。

一种松花粉低聚肽，根据权利要求1～3制备所得，所述松花粉低聚肽作为有效成分应用于保健食品。保健食品还可以含有富硒活性酵母、玉米低聚肽、小麦低聚肽等营养成分。

最后应说明的是：这些实施方式仅用于说明本发明而不限制本发明的范围。此外，对于所属领域的技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引申出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之中。