阅读说明：本技术 一种独脚金内酯提高酿酒葡萄花色苷和总酚含量的方法 (Method for improving contents of anthocyanin and total phenol of wine grapes by strigolactone ) 是由 鞠延仑 房玉林 龚宇辰 乐小凤 于 2020-04-26 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种独脚金内酯提高酿酒葡萄花色苷和总酚含量的方法,具体方法包括：选取长势一致、无病虫害、统一管理的欧亚种酿酒葡萄品种赤霞珠；将独脚金内酯人工合成类似物GR24配制成终浓度分别为5-20μmol/L的溶液；在花后第6周和第7周,选择无风晴朗的傍晚,用浓度分别为5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L独脚金内酯溶液喷施在葡萄果穗周围,并用蒸馏水代替独脚金内酯溶液作为对照组；处理后立即用白色专用袋保护,24小时后去掉；测定葡萄果实样品花色苷、总酚等指标；通过数据分析,外源独脚金内酯处理可以显著提高酿酒葡萄果实花色苷和总酚含量。(The invention discloses a method for improving contents of anthocyanin and total phenol of wine grapes by strigolactone, which comprises the following steps: selecting Eurasian wine grape variety cabernet sauvignon with consistent growth vigor, no plant diseases and insect pests and unified management; preparing strigolactone artificially synthesized analogue GR24 into solutions with final concentrations of 5-20 mu mol/L respectively; in the 6 th week and the 7 th week after flowering, selecting windless and sunny evening, spraying strigolactone solutions with the concentrations of 5 mu mol/L, 10 mu mol/L and 20 mu mol/L around grape clusters, and using distilled water to replace the strigolactone solution as a control group; after treatment, the mixture is immediately protected by a white special bag and is removed after 24 hours; determining indexes such as anthocyanin and total phenol of a grape fruit sample; through data analysis, the content of anthocyanin and total phenol in the grapes for wine production can be obviously improved by processing exogenous strigolactone.)

一种独脚金内酯提高酿酒葡萄花色苷和总酚含量的方法

技术领域

本发明属于酿酒葡萄种植技术领域，涉及一种独脚金内酯提高酿酒葡萄花色苷和总酚含量的方法。

背景技术

酿酒葡萄果实中的花色苷和酚类物质含量是衡量葡萄品质的两个重要指标。葡萄果实中花色苷和酚类物质的含量能够显著影响葡萄果皮以及葡萄酒的颜色，并且对葡萄酒颜色的稳定性和葡萄酒的感官质量有极大的影响。目前，酿酒葡萄生产过程中主要通过人工摘叶、疏果等栽培措施提高果实花色苷和酚类物质等风味物质的含量，浪费大量人力物力，增加了葡萄管理过程中的财力投入，而且通常会由于管理技术水平落后，很容易引起酿酒葡萄果实着色差、着色不均匀等现象，最终造成葡萄酒颜色稳定性差、口感质量差等一系列问题。

植物激素在农业生产中广泛应用，具有用量少，见效快的效果，对改善果实品质、提高产量和植株生长发育等方面具有重要作用，农业生产中激素的应用可以节省大量的人力和物力，以提高果实品质和产量，增加经济效益。独脚金内酯(strigolactones，SLs)是一类新型植物激素，在植物中具有很多生物学功能，包括促进种子萌发和侧根的生长、抑制侧枝萌发等。独脚金内酯还可以提高植物对干旱胁迫、低温胁迫等生物和非生物胁迫的抵抗能力。然而，目前未有关于独脚金内酯提高酿酒葡萄果实花色苷和酚类物质含量的研究报道，现提出一种独脚金内酯提高酿酒葡萄果实花色苷和总酚含量的方法，为农业生产中改善果实品质提供一条高效、省力的新途径。

发明内容

本发明的目的是提供一种独脚金内酯提高酿酒葡萄花色苷和总酚含量的方法，解决了现有技术中存在的酿酒葡萄管理中费时费力，着色差、着色不均匀的问题。

本发明所采用的技术方案是，一种独脚金内酯提高酿酒葡萄花色苷和总酚含量的方法，具体包括如下步骤：

步骤1、酿酒葡萄培养：

酿酒葡萄植株在温室中进行培养的条件设置为：温度25℃-30℃，湿度75％-85％，每周浇水2次；

步骤2、独脚金内酯溶液配制：

将独脚金内酯人工合成类似物GR24用丙酮溶液溶解，再加入适量蒸馏水稀释，配制成终浓度分别为5μmol/L-20μmol/L的溶液，并加入体积分数为0.1％的Tween-80，混合后备用；

步骤3、处理时间：

在酿酒葡萄果实转色期开始前一周及转色期开始时各进行一次处理；

步骤4、独脚金内酯处理：

用步骤2中配备好的独脚金内酯溶液，按照步骤3的处理时间均匀的喷施在葡萄果穗周围，直到液滴覆盖整个果穗，但不滴下为止；

步骤5、处理后的保护：

把处理好的果穗立即用白色保护袋裹住进行保护，防止蒸发，24个小时后去掉保护袋；

步骤6、样品采集和指标测定：

在果实成熟时采集样品，每个处理随机取样若干粒葡萄，立即在冰块的保护下运回实验室，-20℃保存，用于花色苷、总酚、糖、酸含量以及pH值的指标测定。

本发明的特点还在于：

步骤1中独脚金内酯GR24的结构式为：

步骤3中酿酒葡萄果实转色期开始前一周及转色期开始时即为开花后第6周和第7周，共处理2次，处理时间设定在无风晴朗的傍晚17:00-18:00。

步骤4中每棵5-8个果穗的葡萄树独脚金内酯溶液的用量为150-250mL。

步骤6中酿酒葡萄样品总花色苷含量的测定使用pH示差法，结果以矢车菊素-3-葡萄糖苷等价值表示；总酚含量的测定采用福林肖卡法，结果以没食子酸计；用菲林试剂滴定法测定样品糖含量，用酸碱滴定法测定样品酸含量，用pH计测定pH值，每个指标重复测定3次。

一种独脚金内酯提高酿酒葡萄花色苷和总酚含量的方法，具体包括如下步骤：

步骤1、酿酒葡萄培养：

酿酒葡萄植株在温室中进行培养的条件设置为：温度25℃-30℃，湿度75％-85％，每周浇水2次；

步骤2、独脚金内酯溶液配制：

将独脚金内酯人工合成类似物GR24用1mL丙酮溶液溶解，再加入适量蒸馏水稀释，配制成终浓度分别为5μmol/L的溶液，并加入体积分数为0.1％的Tween-80，混合后备用；

步骤3、处理时间：

在酿酒葡萄果实转色期开始前一周及转色期开始时各进行一次处理，处理时间设定在无风晴朗的傍晚17:00；

步骤4、独脚金内酯处理：

用步骤2中配备好的独脚金内酯溶液，按照步骤3的处理时间均匀的喷施在葡萄果穗周围，直到液滴覆盖整个果穗，但不滴下为止，每棵5-8个果穗的葡萄树独脚金内酯溶液的用量为200mL；

步骤5、处理后的保护：

把处理好的果穗立即用白色保护袋裹住进行保护，防止蒸发，24个小时后去掉保护袋；

步骤6、样品采集和指标测定：

在果实成熟时采集样品，每个处理随机取样500粒葡萄，立即在冰块的保护下运回实验室，-20℃保存，用于花色苷、总酚、糖、酸含量以及pH值的指标测定。

一种独脚金内酯提高酿酒葡萄花色苷和总酚含量的方法，具体包括如下步骤：

步骤1、酿酒葡萄培养：

酿酒葡萄植株在温室中进行培养的条件设置为：温度25℃-30℃，湿度75％-85％，每周浇水2次；

步骤2、独脚金内酯溶液配制：

将独脚金内酯人工合成类似物GR24用1mL丙酮溶液溶解，再加入适量蒸馏水稀释，配制成终浓度分别为10μmol/L的溶液，并加入体积分数为0.1％的Tween-80，混合后备用；

步骤3、处理时间：

在酿酒葡萄果实转色期开始前一周及转色期开始时各进行一次处理，处理时间设定在无风晴朗的傍晚17:30；

步骤4、独脚金内酯处理：

用步骤2中配备好的独脚金内酯溶液，按照步骤3的处理时间均匀的喷施在葡萄果穗周围，直到液滴覆盖整个果穗，但不滴下为止，每棵5-8个果穗的葡萄树独脚金内酯溶液的用量为250mL；

步骤5、处理后的保护：

把处理好的果穗立即用白色保护袋裹住进行保护，防止蒸发，24个小时后去掉保护袋；

步骤6、样品采集和指标测定：

在果实成熟时采集样品，每个处理随机取样500粒葡萄，立即在冰块的保护下运回实验室，-20℃保存，用于花色苷、总酚、糖、酸含量以及pH值的指标测定。

一种独脚金内酯提高酿酒葡萄花色苷和总酚含量的方法，具体包括如下步骤：

步骤1、酿酒葡萄培养：

酿酒葡萄植株在温室中进行培养的条件设置为：温度25℃-30℃，湿度75％-85％，每周浇水2次；

步骤2、独脚金内酯溶液配制：

将独脚金内酯人工合成类似物GR24用1mL丙酮溶液溶解，再加入适量蒸馏水稀释，配制成终浓度分别为20μmol/L的溶液，并加入体积分数为0.1％的Tween-80，混合后备用；

步骤3、处理时间：

在酿酒葡萄果实转色期开始前一周及转色期开始时各进行一次处理，处理时间设定在无风晴朗的傍晚18:00；

步骤4、独脚金内酯处理：

用步骤2中配备好的独脚金内酯溶液，按照步骤3的处理时间均匀的喷施在葡萄果穗周围，直到液滴覆盖整个果穗，但不滴下为止，每棵5-8个果穗的葡萄树独脚金内酯溶液的用量为150mL；

步骤5、处理后的保护：

把处理好的果穗立即用白色保护袋裹住进行保护，防止蒸发，24个小时后去掉保护袋；

步骤6、样品采集和指标测定：

在果实成熟时采集样品，每个处理随机取样500粒葡萄，立即在冰块的保护下运回实验室，-20℃保存，用于花色苷、总酚、糖、酸含量以及pH值的指标测定。

本发明的有益效果是：该方法操作简单，高效省力，克服了酿酒葡萄管理中费时费力，着色差、着色不均匀等问题，有效提高了酿酒葡萄果实花色苷和酚类物质含量，本发明提高酿酒葡萄果实花色苷和总酚含量的效果有利于生产上改善酿酒葡萄果实品质，因此为酿酒葡萄的优质栽培生产提供了理论依据和技术支持。

附图说明

图1是利用本发明一种独脚金内酯提高酿酒葡萄花色苷和总酚含量的方法对酿酒葡萄施用不同浓度独脚金内酯后果实花色苷积累的效果图；

图2是利用本发明一种独脚金内酯提高酿酒葡萄花色苷和总酚含量的方法对酿酒葡萄施用不同浓度独脚金内酯后果实花色苷含量的对比图；

图3是利用本发明一种独脚金内酯提高酿酒葡萄花色苷和总酚含量的方法对酿酒葡萄施用不同浓度独脚金内酯后果实总酚含量的对比图；

图4是利用本发明一种独脚金内酯提高酿酒葡萄花色苷和总酚含量的方法对酿酒葡萄施用不同浓度独脚金内酯后果实糖酸及pH值含量的对比图。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施方式对本发明进行详细说明。

本发明一种独脚金内酯提高酿酒葡萄花色苷和总酚含量的方法，具体包括如下步骤：

步骤1、酿酒葡萄培养：

酿酒葡萄植株在温室中进行培养的条件设置为：温度25℃-30℃，湿度75％-85％，每周浇水2次；

步骤2、独脚金内酯溶液配制：

将独脚金内酯人工合成类似物GR24用丙酮溶液溶解，再加入适量蒸馏水稀释，配制成终浓度分别为5μmol/L-20μmol/L的溶液，并加入体积分数为0.1％的Tween-80，混合后备用；

步骤3、处理时间：

在酿酒葡萄果实转色期开始前一周及转色期开始时各进行一次处理；

步骤4、独脚金内酯处理：

用步骤2中配备好的独脚金内酯溶液，按照步骤3的处理时间均匀的喷施在葡萄果穗周围，直到液滴覆盖整个果穗，但不滴下为止；

步骤5、处理后的保护：

把处理好的果穗立即用白色保护袋裹住进行保护，防止蒸发，24个小时后去掉保护袋；

步骤6、样品采集和指标测定：

在果实成熟时采集样品，每个处理随机取样若干粒葡萄，立即在冰块的保护下运回实验室，-20℃保存，用于花色苷、总酚、糖、酸含量以及pH值的指标测定。

本发明的特点还在于：

步骤1中独脚金内酯GR24的结构式为：

步骤3中酿酒葡萄果实转色期开始前一周及转色期开始时即为开花后第6周和第7周，共处理2次，处理时间设定在无风晴朗的傍晚17:00-18:00。

步骤4中每棵5-8个果穗的葡萄树独脚金内酯溶液的用量为150-250mL。

步骤6中酿酒葡萄样品总花色苷含量的测定使用pH示差法，结果以矢车菊素-3-葡萄糖苷等价值表示；总酚含量的测定采用福林肖卡法，结果以没食子酸计；用菲林试剂滴定法测定样品糖含量，用酸碱滴定法测定样品酸含量，用pH计测定pH值，每个指标重复测定3次。

下面结合具体实施例对本发明进一步阐述，实施例中的葡萄植株均选取长势一致、无病虫害、统一管理的7年生欧亚种酿酒葡萄品种赤霞珠(Vitis Vinifera L.,Cabernet Sauvignon)，植株种植在含基质：园土：蛭石＝2：2：1的盆(52×35×28cm)中温室培养：

实施例一

一种独脚金内酯提高酿酒葡萄花色苷和总酚含量的方法，具体包括如下步骤：

步骤1、酿酒葡萄培养：

酿酒葡萄植株在温室中进行培养的条件设置为：温度25℃-30℃，湿度75％-85％，每周浇水2次；

步骤2、独脚金内酯溶液配制：

将独脚金内酯人工合成类似物GR24用1mL丙酮溶液溶解，再加入适量蒸馏水稀释，配制成终浓度分别为5μmol/L的溶液，并加入体积分数为0.1％的Tween-80，混合后备用；

步骤3、处理时间：

在酿酒葡萄果实转色期开始前一周及转色期开始时各进行一次处理，处理时间设定在无风晴朗的傍晚17:00；

步骤4、独脚金内酯处理：

用步骤2中配备好的独脚金内酯溶液，按照步骤3的处理时间均匀的喷施在葡萄果穗周围，直到液滴覆盖整个果穗，但不滴下为止，每棵5-8个果穗的葡萄树独脚金内酯溶液的用量为200mL；

步骤5、处理后的保护：

处理之后，每个果穗用标签做好标记，为防止溶液蒸发，把处理好的果穗立即用白色保护袋裹住进行保护，防止蒸发，24个小时后去掉保护袋；

步骤6、样品采集和指标测定：

在果实成熟时采集样品，每个处理随机取样500粒葡萄，包括果穗的上、中、下部的果粒，立即在冰块的保护下运回实验室，-20℃保存，用于花色苷、总酚、糖、酸含量以及pH值的指标测定。

实施例二

一种独脚金内酯提高酿酒葡萄花色苷和总酚含量的方法，具体包括如下步骤：

步骤1、酿酒葡萄培养：

酿酒葡萄植株在温室中进行培养的条件设置为：温度25℃-30℃，湿度75％-85％，每周浇水2次；

步骤2、独脚金内酯溶液配制：

将独脚金内酯人工合成类似物GR24用1mL丙酮溶液溶解，再加入适量蒸馏水稀释，配制成终浓度分别为10μmol/L的溶液，并加入体积分数为0.1％的Tween-80，混合后备用；

步骤3、处理时间：

在酿酒葡萄果实转色期开始前一周及转色期开始时各进行一次处理，处理时间设定在无风晴朗的傍晚17:30；

步骤4、独脚金内酯处理：

用步骤2中配备好的独脚金内酯溶液，按照步骤3的处理时间均匀的喷施在葡萄果穗周围，直到液滴覆盖整个果穗，但不滴下为止，每棵5-8个果穗的葡萄树独脚金内酯溶液的用量为250mL；

步骤5、处理后的保护：

处理之后，每个果穗用标签做好标记，为防止溶液蒸发，把处理好的果穗立即用白色保护袋裹住进行保护，防止蒸发，24个小时后去掉保护袋；

步骤6、样品采集和指标测定：

在果实成熟时采集样品，每个处理随机取样500粒葡萄，包括果穗的上、中、下部的果粒，立即在冰块的保护下运回实验室，-20℃保存，用于花色苷、总酚、糖、酸含量以及pH值的指标测定。

实施例三

一种独脚金内酯提高酿酒葡萄花色苷和总酚含量的方法，具体包括如下步骤：

步骤1、酿酒葡萄培养：

酿酒葡萄植株在温室中进行培养的条件设置为：温度25℃-30℃，湿度75％-85％，每周浇水2次；

步骤2、独脚金内酯溶液配制：

将独脚金内酯人工合成类似物GR24用1mL丙酮溶液溶解，再加入适量蒸馏水稀释，配制成终浓度分别为20μmol/L的溶液，并加入体积分数为0.1％的Tween-80，混合后备用；

步骤3、处理时间：

在酿酒葡萄果实转色期开始前一周及转色期开始时各进行一次处理，处理时间设定在无风晴朗的傍晚18:00；

步骤4、独脚金内酯处理：

用步骤2中配备好的独脚金内酯溶液，按照步骤3的处理时间均匀的喷施在葡萄果穗周围，直到液滴覆盖整个果穗，但不滴下为止，每棵5-8个果穗的葡萄树独脚金内酯溶液的用量为150mL；；蒸馏水代替独脚金内酯溶液作为对照组；

步骤5、处理后的保护：

处理之后，每个果穗用标签做好标记，为防止溶液蒸发，把处理好的果穗立即用白色保护袋裹住进行保护，防止蒸发，24个小时后去掉保护袋；

步骤6、样品采集和指标测定：

在果实成熟时采集样品，每个处理随机取样500粒葡萄，包括果穗的上、中、下部的果粒，立即在冰块的保护下运回实验室，-20℃保存，用于花色苷、总酚、糖、酸含量以及pH值的指标测定。

如图1所示，在葡萄果实转色前一周和开始转色时分别用独脚金内酯处理后，与蒸馏水处理对照组相比，独脚金内酯处理组显著促进了果实花色苷的积累。

参阅图2，独脚金内酯对酿酒葡萄果实花色苷含量的影响：

由图2可知，蒸馏水对照组赤霞珠葡萄果实花色苷含量为4.56mg/g，喷施独脚金内酯后，赤霞珠葡萄果实花色苷含量均出现不同程度的提高，其中20μmol/L独脚金内酯处理后果实花色苷含量增加最多，达到11.48mg/g，较对照组提高了151.75％；其次是5μmol/L独脚金内酯处理组，处理后果实花色苷含量达到10.12mg/g，较对照组提高了121.93％；10μmol/L独脚金内酯处理后果实花色苷含量达到7.49mg/g，较对照组提高了64.25％。

参阅图3，独脚金内酯对酿酒葡萄果实总酚含量的影响：

由图3可知，蒸馏水对照组赤霞珠葡萄果实花色苷含量为1.78mg/kg，喷施独脚金内酯后，赤霞珠葡萄果实花色苷含量均出现不同程度的提高，其中20μmol/L独脚金内酯处理后果实花色苷含量增加最多，达到5.8mg/kg，较对照组提高了225.84％；其次是5μmol/L独脚金内酯处理组，处理后果实花色苷含量达到3.66mg/kg，较对照组提高了105.62％；10μmol/L独脚金内酯处理后果实花色苷含量达到2.58mg/kg，较对照组提高了44.94％。

参阅图4，独脚金内酯对酿酒葡萄果实糖酸及pH值的影响：

由图4可知，与对照组相比，独脚金内酯处理组显著提高了赤霞珠葡萄果实含糖量，对照组果实含糖量为201g/L，5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L独脚金内酯处理后，果实含糖量分别提高到216g/L、208g/L和225g/L。然而，5μmol/L和20μmol/L独脚金内酯处理后，显著降低了果实含酸量；10μmol/L独脚金内酯处理后，果实的含酸量略有降低，但差异不显著。与对照组相比，5μmol/L和20μmol/L独脚金内酯处理显著提高了果实的pH值，10μmol/L独脚金内酯处理后，果实的pH值与对照组之间无显著差异。

本发明一种独脚金内酯提高酿酒葡萄花色苷和总酚含量的方法，其优点在于：通过外源喷施独脚金内酯溶液使得酿酒葡萄果实花色苷和总酚含量较对照分别增加64.25％-151.75％和44.94％-225.84％，使用本发明的方法操作简单、省力，独脚金内酯处理显著提高了赤霞珠葡萄果实花色苷的含量、总酚的含量以及总糖含量，降低了果实酸含量，促进了果实成熟。