阅读说明：本技术 一种用于抗炎镇痛的药物组合物及其制备方法 (Pharmaceutical composition for resisting inflammation and easing pain and preparation method thereof ) 是由 伏莹 韩晓霞 范明月 于 2020-06-04 设计创作，主要内容包括：本发明提供一种用于抗炎镇痛的药物组合物及其制备方法。具体提供一种优化的那如-3药材的提取工艺,并对不同提取方法得到的膏状物的抗炎镇痛药理活性进行了评价,最终筛选出三种最优的提取工艺,其制备获得的药物组合物能够在抗炎镇痛方面具有更佳的疗效,同时其提取工艺简便易行,更适合于工业化生产。(The invention provides a pharmaceutical composition for resisting inflammation and easing pain and a preparation method thereof. The method specifically provides an optimized extraction process of the Nae-3 medicinal material, the anti-inflammatory analgesic pharmacological activity of the paste obtained by different extraction methods is evaluated, three optimal extraction processes are finally screened, the pharmaceutical composition prepared by the method has better curative effect on anti-inflammatory analgesic, and meanwhile, the extraction process is simple, convenient and feasible and is more suitable for industrial production.)

一种用于抗炎镇痛的药物组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及药物技术领域，具体涉及一种用于抗炎镇痛的药物组合物及其制备方法。

背景技术

蒙药那如-3，原本是一种蒙药口服制剂，对消“粘”，除“协日乌素”，祛风，止痛，散寒有显著疗效。但是口服药使用不方便，而且不能直达病患部位，治疗效果缓慢。经过外用贴膏专家的多年研究发现此药品做成外用贴膏制剂效果显著。所以我们把这种民族的传统用药方式与现代先进技术相结合，研究、开发和生产出操作简单、使用方便、生物利用度高、不经过肝肾吸收、毒副作用小、对肝肾无损害更能让广大患者接受的外用剂型的蒙药产品，是本新药研发的动力。

然而，在蒙药那如-3贴膏的研发过程中，药材提取是其制备工艺的关键，影响着药品的临床疗效，只有选择好提取工艺方可使该药品达到最好的疗效。在申请人前期提出的专利申请CN 201910219007.5中公开了一种那如-3的消炎镇痛贴膏，其是采用荜茇醇提，诃子和草乌同时水提的提取方法制备而成的，然而该提取工艺在生产过程中需要对原料分组操作，增加了生产成本。因此，还需要对那如-3贴膏药材提取的工艺进行优化研究，以期获得一种抗炎镇痛效果更好并且生产工艺更简便的药物组合物。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是优化那如-3药材的提取工艺，从而提供一种抗炎镇痛效果更好的药物组合物及其制备方法。

为此，本发明根据那如-3处方中三种药材的主要化学成分的理化性质及药理作用，设计了六种提取工艺，并对不同提取方法得到的膏状物的抗炎镇痛药理活性进行了评价，考察了不同提取工艺获得的膏状物对小鼠的镇痛效果和对大鼠的抗炎效果的影响，最终筛选出三种最优的提取工艺。

具体而言，本发明提供一种用于抗炎镇痛的药物组合物的制备方法，该方法包括如下步骤：

(1)分别称取诃子、荜茇、制草乌，粉碎成粗粉，置煎煮容器中，加药材总量6倍的水，加热至沸1.5小时，倾取煎煮液，备用；

(2)用同样的方法再煎煮二次，最后弃去药渣，合并煎液，将煎煮液浓缩至相对密度为1.16～1.21(55～60℃热测)浸膏，称重，即得。

本发明还提供一种用于抗炎镇痛的药物组合物的制备方法，该方法包括如下步骤：

(1)分别称取诃子、荜茇、制草乌，粉碎成粗粉，置煎煮容器中，加药材总量6倍的3％醋酸溶液，加热至沸3小时，倾取煎煮液，备用；

(2)再用同样的方法煎煮二次，最后弃去药渣，合并煎液，将煎煮液浓缩至相对密度为1.16～1.21(55～60℃热测)浸膏，称重；

(3)醇沉操作：将步骤(2)煎煮浓缩后的浸膏用95％的乙醇调制成含80％乙醇的醇溶液，加热，减压浓缩成相对密度为1.16～1.21(55～60℃热测)浸膏，称重，即得。

本发明还提供一种用于抗炎镇痛的药物组合物的制备方法，该方法包括如下步骤：

分别称取诃子、荜茇、制草乌，粉碎成粗粉，置回流提取器中，加药材总量6倍的75％乙醇，回流三次，每次1.5小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.16～1.21(55～60℃热测)浸膏，称重，即得。

另一方面，本发明提供一种用于抗炎镇痛的药物组合物，采用前述方法制备而成。

优选地，所述药物组合物可加入常规辅料，按照常规工艺制成外用制剂。

本发明进一步提供一种用于抗炎镇痛的贴膏的制备方法，该方法包括如下步骤：

(1)分别称取诃子、荜茇、制草乌，粉碎成粗粉，置煎煮容器中，加药材总量6倍的水，加热至沸1.5小时，倾取煎煮液，备用；

(2)用同样的方法再煎煮二次，最后弃去药渣，合并煎液，将煎煮液浓缩至相对密度为1.16～1.21(55～60℃热测)浸膏，称重；

(3)将步骤(2)制备的浸膏加入常规贴膏辅料，按照常规贴膏制剂的制备工艺，制成贴膏。

本发明还提供一种用于抗炎镇痛的贴膏的制备方法，该方法包括如下步骤：

(1)分别称取诃子、荜茇、制草乌，粉碎成粗粉，置煎煮容器中，加药材总量6倍的3％醋酸溶液，加热至沸3小时，倾取煎煮液，备用；

(2)再用同样的方法煎煮二次，最后弃去药渣，合并煎液，将煎煮液浓缩至相对密度为1.16～1.21(55～60℃热测)浸膏，称重；

(3)醇沉操作：将步骤(2)煎煮浓缩后的浸膏用95％的乙醇调制成含80％乙醇的醇溶液，加热，减压浓缩成相对密度为1.16～1.21(55～60℃热测)浸膏，称重；

(4)将步骤(3)制备的浸膏加入常规贴膏辅料，按照常规贴膏制剂的制备工艺，制成贴膏。

本发明还提供一种用于抗炎镇痛的贴膏的制备方法，该方法包括如下步骤：

(1)分别称取诃子、荜茇、制草乌，粉碎成粗粉，置回流提取器中，加药材总量6倍的75％乙醇，回流三次，每次1.5小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.16～1.21(55～60℃热测)浸膏，称重；

(2)将步骤(1)制备的浸膏加入常规贴膏辅料，按照常规贴膏制剂的制备工艺，制成贴膏。

更进一步，本发明还提供一种采用上述方法制备而成的用于抗炎镇痛的贴膏。

下面将结合具体实验例以及实施例对本发明涉及的提取工艺筛选的实施方案及其效果进行描述。但是，应当理解，这些描述只是用于说明性的目的，而绝非对本发明的权利要求构成任何限制。

具体实施方式

实验例1：本发明药物组合物的不同提取工艺设计

试验采用水、酸水、乙醇三种溶媒提取技术，采用①水煎煮工艺、②酸水煎煮工艺、③酸水煎煮醇沉工艺、④90％乙醇回流工艺、⑤75％乙醇回流工艺、⑥30％乙醇回流工艺，共计6种工艺进行提取试验研究。

1.工艺一：水煎提取工艺

1.1试验处方

诃子600g 荜茇180g 制草乌300g

总量合计：1080g

1.2制法：分别称取处方量的诃子、荜茇、制草乌，粉碎成粗粉，置煎煮容器中，加水6480ml(药材总量6倍)，加热至沸1.5小时，倾取煎煮液，备用。用同样的方法再煎煮二次，最后弃去药渣，合并煎液，将煎煮液浓缩至相对密度为1.16～1.21(55～60℃热测)浸膏，称重。

2.工艺二：酸水煎提取工艺

2.1试验处方：

诃子600g 荜茇180g 制草乌300g

总量合计：1080g

2.2制法：分别称取诃子、荜茇、制草乌，粉碎成粗粉，置煎煮容器中，加3％醋酸溶液6480ml，加热至沸1.5小时，倾取煎煮液，备用。用同样的方法再煎煮二次，最后弃去药渣，合并煎液，将煎煮液浓缩至相对密度为1.16～1.21(55～60℃热测)浸膏。

3.工艺三：酸水煎煮醇沉提取工艺

3.1试验处方：

诃子600g 荜茇180g 制草乌300g

总量合计：1080g

3.2制法：分别称取诃子、荜茇、制草乌，粉碎成粗粉，置煎煮容器中，加3％醋酸溶液6480ml(药材总量6倍)，加热至沸3小时，倾取煎煮液，备用。再用同样的方法煎煮2次，最后弃去药渣，合并煎液，将煎煮液浓缩至相对密度为1.16～1.21(55～60℃热测)浸膏，称重。然后进行醇沉操作：将煎煮浓缩后的浸膏用95％的乙醇调制成含80％乙醇的醇溶液，加热，减压浓缩成相对密度为1.16～1.21(55～60℃热测)浸膏，称重。

4.工艺四：90％乙醇回流提取工艺

4.1试验处方：

诃子600g 荜茇180g 制草乌300g

总量合计：1080g

4.2制法：分别称取诃子、荜茇、制草乌，粉碎成粗粉，置回流提取器中，加90％乙醇6480ml(药材总量6倍)，回流三次，每次回流1.5小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.16～1.21(55～60℃热测)浸膏。

5.工艺五：75％乙醇回流提取工艺

5.1试验处方：

诃子600g 荜茇180g 制草乌300g

总量合计：1080g

5.2制法：分别称取诃子、荜茇、制草乌，粉碎成粗粉，置回流提取器中，加75％乙醇6480ml(药材总量6倍)，回流三次，每次1.5小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.16～1.21(55～60℃热测)浸膏，称重。

6.工艺六：30％乙醇回流提取工艺

6.1试验处方：

诃子600g 荜茇180g 制草乌300g

总量合计：1080g

6.2制法：分别称取诃子、荜茇、制草乌，粉碎成粗粉，置回流提取器中，加30％乙醇6480ml(药材总量6倍)，回流三次，每次1.5小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.16～1.21(55～60℃热测)浸膏，称重。

实验例2：本发明药物组合物不同提取工艺的药效学研究

1.试验目的：探讨实验例1中六种提取工艺对小鼠的镇痛效果和对大鼠的抗炎效果的影响，进一步为工艺合成路线提供参考。

2.供试品和对照品

2.1供试品

名称：那如-3贴膏工艺一、工艺二、工艺三、工艺四、工艺五、工艺六

批号：18001、18002、18003、18004、18005、18006

规格：300g

制备及物理状态：分别采用实验例1中六种工艺制备获得的褐色膏状物

提供单位：内蒙古科尔沁药业有限公司

保存条件：2-4℃保存

2.2对照品

名称:0.9％氯化钠注射液

成份:1.活性成分：氯化钠

2.辅料：盐酸、注射用水

物理性状：无色的澄明液体

规格：250mL：2.25g

保存条件：密闭保存

批号：S17113505-2

生产厂家：吉林康乃尔药业有限公

2.3阳性对照品1

名称：双氯芬酸二乙胺乳胶剂(商品名：扶他林)

规格：1％(50克：0.5克，以双氯芬酸钠计)

批号：VS4H

生产厂家：GSK Consumer Healthcare Schweiz AG

2.4阳性对照品2

名称：复方醋酸***乳膏(商品名：五环牌)

规格：20g:15mg/支

批号：180406

生产厂家：广东泰恩康药业有限公司

3.材料与方法

3.1主要仪器设备

名称：电子天平

型号：QUINTIX224-1CN

生产厂家：赛多利斯公司

3.2试验体系

3.2.1试验体系1

名称:小鼠

品系:昆明

等级:SPF级

提供单位：辽宁长生生物技术股份有限公司

动物许可证号：SCXK(辽)2015-0001

动物合格证号：No.211002300040245

品系选择理由：昆明种小鼠是进行此类试验常用的啮齿类动物，其遗传性状稳定，背景数据清晰，对供试品敏感。

动物数及性别：引入雄性动物90只，使用80只，剩余10只用于预试。

年龄：引入时7-8周龄

健康检查与适应：动物引入当天由兽医对引入动物的健康状况进行检查。

3.2.2试验体系2：

名称：大鼠

品系：SD

等级：SPF级

提供单位：辽宁长生生物技术股份有限公司

动物许可证号：SCXK(辽)2015-0001

动物合格证号：No.211002300041011

品系选择理由：SD大鼠是进行此类试验常用的啮齿类动物，其遗传性状稳定，背景数据清晰，对供试品敏感。

动物数及性别：引入雄性动物85只，使用80只，剩余5只用于预试。

年龄：引入时7-8周龄

健康检查与适应：动物引入当天由兽医对引入动物的健康状况进行检査。

3.3试验条件

试验场所：本中心短期毒理动物房。

饲育条件：试验场所本机构A楼实验室，大、小鼠均饲养于特定的饲育笼内内，小鼠每盒饲育5只，大鼠单笼饲养。动物笼具、不锈钢食盒、水瓶定期消毒。

环境条件：动物房的温湿度自动控制，每天记录，控制温度16-26℃,控制湿度40％-70％人工光照，光周期自动控制，12小时明，12小时暗，噪音在60dB以下。

摄食及饮水：动物饲料为大小鼠专用饲料。饲料营养成分和污染物含量符合国标的标准。饮水为本中心HT-R01000型净水系统制备纯净水，水质每年检测一次，检测指标符合国家标准。适应期和试验期间允许动物自由摄食饮水。饲料和水不包含任何影响试验目的、完整性及结果的污染物。

动物福利：动物使用遵守国家动物福利法规《关于善待动物的指导性意见》(2006年，科技部)。动物使用方案经机构动物管理委员会(IACUC)批准，试验过程接受其监督。试验结束时存活动物采用二氧化碳安乐死，尸体由试验技术部委托专业公司处理。

3.4试验方法

3.4.1小鼠醋酸扭体法镇痛作用筛选

釆用80只昆明种小白鼠，分为对照组、阳性药组、工艺一组、工艺二组、工艺三组、工艺四组、工艺五组、工艺六组共8组。每组10只动物。正式试验前一天剃去除模型组外其余小鼠的腹部毛发。正式试验当天所有给药组均给药一次，涂抹范围是一直径约为1.5cm的近似圆形区域,给药体积均为0.2mL，均涂抹于腹部的相同位置。给药后约半小时左右用棉球蘸少许温水将药物擦掉，然后每只动物腹腔注射0.6％的冰醋酸溶液0.2mL,连续观察10分钟，记录10分钟内小鼠的扭体次数；对照组小鼠直接注射0.6％冰醋酸后进行扭体观察；阳性对照药釆用市售的双氯芬酸二乙胺乳胶剂(商品名：扶他林)，均匀涂抹于小鼠的腹部，其余操作同上。

3.4.2大鼠棉球肉芽肿法抗炎作用筛选

釆用SD大鼠80只，分为对照组、阳性药组、工艺一组、工艺二组、工艺三组、工艺四组、工艺五组、工艺六组共8组。每组10只动物。实验开始前准备若干重量约为20mg的棉球和一定量的手术器械，经过高压灭菌后备用。大鼠经麻醉后，在肩颈部剃毛、用碘伏消毒，剪开皮下一小切口，把灭菌后的一个棉球放入肩颈部皮下(放入前称量所放棉球的重量并记录)，缝合切口。造模当天开始给药，每天给药一次，连续给药10天，阳性药组于棉球放置部位的皮肤处涂抹市售的复方醋酸***软膏外用制剂，各工艺组于棉球放置部位的皮肤处涂抹相应的膏状物(提取物0.35g,以干燥物计)，对照组涂抹生理水。给药结束后安乐死，小心剥离并取出植入的棉球，在约60℃的烘箱中烘干棉球。

棉球烘干后称量每一个棉球的重量，减去棉球植入前自身的重量即为肉芽肿的净重量。

3.5数据处理和结果评定

数据以表格形式汇总，小鼠醋酸扭体试验和大鼠肉芽肿试验分别采用卡方检验和T检验统计不同组别之间的小鼠扭体次数和棉球肉芽肿的重量。

4.结果

4.1小鼠醋酸扭体试验结果

比较各组与对照组扭体次数，以镇痛抑制率来表示受试物的镇痛效果。镇痛抑制率＝(对照组扭体次数-给药组扭体次数)/对照组扭体次数。其中阳性药、工艺一、工艺二、工艺三、工艺四、工艺五组与对照组相比，扭体次数均有显著性差异，各组结果见表1(试验研究号：PE19003RI)。

表1小鼠醋酸扭体试验各组扭体次数(均值土标准差)

组别	扭体次数	镇痛抑制率(％)
			对照组	31.33±7.75	--
阳性药组	12.89±3.30*	58.87
			工艺一组	22.78±6.20*	27.30
工艺二组	20.17±8.42*	35.64
			工艺三组	19.75±8.92*	36.97
工艺四组	18.78±3.96*	40.07
			工艺五组	20.50±6.00*	34.57
工艺六组	23.86±6.89	23.86

注：*代表相对于对照组具有显著性差异p<0.05

4.2大鼠棉球肉芽肿试验结果

比较各组与对照组棉球肉芽肿重量，以棉球肉芽肿重量来表示受试物的抗炎效果。棉球肉芽肿重量(mg)＝取出后棉球重量-植入前棉球重量。其中阳性药、工艺一、工艺三、工艺五组与对照组相比，棉球肉芽肿重量均有显著性差异，各组结果见表2。

表2各组棉球肉芽肿重量(mg)

注：*代表相对于对照组具有显著性差异p<0.05

由表1和表2的实验结果可以看出，通过对本发明药物组合物不同提取工艺的研究，观察其抗炎镇痛效果，与对照组相比，在镇痛效果方面，工艺一至工艺五均有较好的镇痛效果；在抗炎效果方面，工艺一、三、五制备获得的药物组合物具有较好的效果。综合上述结果可以得出，采用工艺一、三、五制备的药物组合物能够在抗炎镇痛方面具有更佳的疗效，同时其提取工艺简便易行，更适合于工业化生产。

实施例1：采用工艺一制备的用于抗炎镇痛的药物组合物贴膏

1.活性成分组成：

诃子600g 荜茇180g 制草乌300g

总量合计：1080g

2.制备方法：

(1)分别称取处方量的诃子、荜茇、制草乌，粉碎成粗粉，置煎煮容器中，加水6480ml(药材总量6倍)，加热至沸1.5小时，倾取煎煮液，备用；

(2)用同样的方法再煎煮二次，最后弃去药渣，合并煎液，将煎煮液浓缩至相对密度为1.16～1.21(55～60℃热测)浸膏，称重；

(3)将步骤(2)制备的浸膏加入常规贴膏辅料，按照常规贴膏制剂的制备工艺，制成贴膏。

实施例2：采用工艺三制备的用于抗炎镇痛的药物组合物贴膏

1.活性成分组成：

诃子600g 荜茇180g 制草乌300g

总量合计：1080g

2.制备方法：

(1)分别称取诃子、荜茇、制草乌，粉碎成粗粉，置煎煮容器中，加3％醋酸溶液6480ml(药材总量6倍)，加热至沸3小时，倾取煎煮液，备用；

(2)再用同样的方法煎煮二次，最后弃去药渣，合并煎液，将煎煮液浓缩至相对密度为1.16～1.21(55～60℃热测)浸膏，称重；

(3)醇沉操作：将步骤(2)煎煮浓缩后的浸膏用95％的乙醇调制成含80％乙醇的醇溶液，加热，减压浓缩成相对密度为1.16～1.21(55～60℃热测)浸膏，称重；

(4)将步骤(3)制备的浸膏加入常规贴膏辅料，按照常规贴膏制剂的制备工艺，制成贴膏。

实施例3：采用工艺五制备的用于抗炎镇痛的药物组合物贴膏

1.活性成分组成：

诃子600g 荜茇180g 制草乌300g

总量合计：1080g

2.制备方法：

(1)分别称取诃子、荜茇、制草乌，粉碎成粗粉，置回流提取器中，加75％乙醇6480ml(药材总量6倍)，回流三次，每次1.5小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.16～1.21(55～60℃热测)浸膏，称重；

(2)将步骤(1)制备的浸膏加入常规贴膏辅料，按照常规贴膏制剂的制备工艺，制成贴膏。

显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。