对乙醇和乙醛具有降解功能的微生物,包括所述微生物的组合物和试剂盒

文档序号:1255980 发布日期:2020-08-21 浏览:5次 >En<

阅读说明:本技术 对乙醇和乙醛具有降解功能的微生物,包括所述微生物的组合物和试剂盒 (Microorganism having degradation function for ethanol and acetaldehyde, composition and kit comprising the same ) 是由 金容仁 金泰勋 董惠珍 崔禹镇 郑现旭 洪性坤 柳东旭 于 2018-11-08 设计创作,主要内容包括:本公开提供一种对乙醇和乙醛具有降解功能的微生物,包括所述微生物的组合物和试剂盒。(The present disclosure provides a microorganism having a degradation function on ethanol and acetaldehyde, a composition and a kit comprising the same.)

对乙醇和乙醛具有降解功能的微生物,包括所述微生物的组 合物和试剂盒

技术领域

相关申请的交叉引用

本申请要求于2017年12月29日提交的韩国专利申请No.10-2017-0184821的优先权和权益,其通过引用合并于此用于所有目的,如同在此完全阐述一样。

领域

本公开涉及一种对乙醇和乙醛具有降解功能的微生物,包括所述微生物的组合物和试剂盒。

背景技术

乳杆菌(Lactobacillus)属革兰氏阳性、兼性厌氧(facultative anaerobic)或微需氧的(microaerophilic)、杆状,或无芽孢细菌。乳杆菌占乳酸菌(Lactic acidbacteria:LAB)群的主要部分。

人摄取的酒精在胃和小肠的上部通过扩散作用被容易地吸收。酒精代谢通常发生在肝组织中,酒精由酵脱氢酶(alcohol dehydrogenase:ADH)氧化为乙醛,乙醛由乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase:ALDH)转换成乙醇。

乙醛是通过酒精氧化产生的代谢产物,且是反应性高的毒性物质。乙醛与肝内的各种蛋白质共价键结合,从而改变肝功能和结构。通过与微管蛋白结合,减少微管的聚合,从而削弱蛋白质分泌且引起干细胞(hepatocyte)的膨胀。乙醛加合物(adduct)的形成削弱一部分的酶活性。直接地或通过与谷胱甘肽(glutathione:GSH)结合,乙醛促使脂质过氧化(lipid peroxidation)。尤其在使线粒体对乙醛的毒性作用变得敏感的慢性乙醇消耗后,乙醛改变各种粒线体功能。在经培养的肌成纤维细胞中,乙醛刺激胶原蛋白的产生。已有报告,这为慢性酒精摄取者的肝纤维化的原因。并且,慢性的酒精摄取可能引起脂肪肝、酒精性肝炎,和肝硬变等。所述乙醛-蛋白加合物刺激针对乙醛表位的抗体的产生。此类免疫反应可能使由酒精引起的肝损伤加重或永久持续。并且,乙醛导致宿醉(hangover)。

然而,即使根据所述现有技术,仍然存在对具有针对乙醇和乙醛降解活性的乳杆菌属细菌的需求。

发明内容

技术问题

一方面提供对乙醇和乙醛具有降解功能的微生物,其选自由短乳杆菌(Lactobacillus brevis)LMT1-73(保藏号KCTC-13412BP)和发酵乳杆菌(Lactobacillusfermentum)LMT2-75(保藏号KCTC-13413BP)组成的组。

另一方面提供包括所述微生物或其溶解产物(lysate)的组合物。

提供一种试剂盒,其用于从包括所述微生物和稀释剂或载体的试料中除去乙醇和乙醛中的至少一个。

技术方案

一方面提供对乙醇和乙醛具有降解功能的微生物,其选自由短乳杆菌(Lactobacillus brevis)LMT1-73(保藏号KCTC-13412BP)和发酵乳杆菌(Lactobacillusfermentum)LMT2-75(保藏号KCTC-13413BP)的组。

所述微生物不但具有优异的耐乙醇性、对乙醇和/或乙醛的降解功能,还具有优异的耐酸性、耐胆汁酸性以及肠内黏附性。所述微生物是从泡菜中分离出来的。

另一方面提供包括所述微生物或其溶解产物(lysate)的组合物。

所述组合物可以包括在食品上可接受的稀释剂或载体。所述稀释剂可以是如水、培养基或磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline:PBS)的缓冲剂。所述载体可以是通常的赋形剂、崩解剂、结合剂、润滑剂、增稠剂或填充剂。所述稀释剂或载体可以是乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、淀粉、相思胶、海藻酸盐、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、非晶态纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟苯甲脂、羟基安息香酸盐、滑石粉、硬脂酸镁或矿物燃料。并且,所述组合物可以包括诸如硬脂酸镁,滑石粉的润滑剂。

所述组合物可以用于从试料中除去乙醇和乙醛中的至少一个。术语"除去"是指减少在试料中的乙醇和乙醛中至少一个的浓度,也包括完全除去。所述试料可以是体液。所述试料可以是肠内液体或血液。所述肠内液体可以是胃液、十二指肠液、小肠液或大肠液。

所述组合物可以是经口施药剂型。所述组合物可以是颗粒剂、散剂、液剂、片剂、胶囊剂或干燥浆剂。所述组合物例如可以是通过将所述微生物培养在培养基中来获得的培养产物或其干物。

所述组合物可以是食品。所述食品可以是乳制品、用于预防酒精性肝病或解除宿醉的食品,或者食品添加剂。所述乳制品可以是发酵乳、奶油、奶酪,或奶粉。所述食品可以是健康功能食品。所述健康功能食品可以是用于预防酒精性肝病或解除宿醉的健康功能食品。所述食品也可以是饮料类、饼干类、节食饼干、巧克力、比萨饼、拉面、其他面类、口香糖类、冰淇凌类。

所述食品可以包括在制造食品时通常添加的成分,例如包括蛋白质、碳水化合物、脂肪、营养素、调味剂和香味剂。

用于制备食品的碳水化合物可以是诸如葡萄糖、果糖等的单糖;诸如麦芽糖、蔗糖、低聚糖等二糖;以及聚糖,例如糊精、环式糊精等常规的糖和木糖醇、山梨醇和赤藓糖醇等的糖醇。并且,可以使用天然香味剂和诸如糖精和阿斯巴甜等合成香味剂作为香味剂。天然香味剂可以是甜菊糖苷提取物,例如,索马甜、甜菊糖双甙和甘草酸苷等。

健康功能食品是指在摄取时起到健康上的特定效果的食品。

在所述组合物中,基于组合物重量,所述微生物的含量可以属于0.01重量%至50重量%或0.1重量%至20重量%的范围。并且,基于组合物重量,所述组合物可以包括105至1×109CFU/g或1×105至1×108CFU/g的细胞。

另一方面提供从个体中除去乙醇和乙醛中的至少一个的方法,其包括向个体给予选自由短乳杆菌(Lactobacillus brevis)LMT1-73(保藏号KCTC-13412BP)和发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)LMT2-75(保藏号KCTC-13413BP)组成的组的对乙醇和乙醛具有降解功能的微生物。所述方法可以用于预防或治疗与乙醇和/或乙醛的体内积累有关的疾病。所述疾病可以是酒精性肝病或宿醉。所述个体可以是哺乳动物。所述哺乳动物可以是人或人之外的其他哺乳动物。

另一方面提供用于从包括所述微生物及稀释剂或载体的试料中除去乙醇和乙醛中的至少一个的试剂盒。所述试剂盒可以是与所述微生物和稀释剂或载体分开提供的。

根据一方面的微生物、包括所述微生物的组合物和试剂盒可以被用于从试料中除去乙醇和乙醛中的至少一个。

以下将详细参考具体实施例,其示例在附图中示出,并且,在整个说明书中,附图中类似的参照号代表类似的要素。因此,这些具体的实施例可以具有其他不同的形式而不应被解释为限于本说明书中公开的说明。因此,在下面参照附图来简单地说明具体实施例,以说明本发明的各方面。如在本说明书中所使用,术语“和/或(and/or)”包括相关列举的事项中至少一个的任何组合以及所有组合。

有益效果

根据一方面的微生物和分别包括所述微生物的组合物以及试剂盒可以被适用于从试料中除去乙醇和乙醛中的至少一个。

附图说明

通过与附图结合来考虑,这些或/其他方面将根据具体实施例的以下描述变得显而易见且更容易理解。

图1为示出所选拔的菌株附着于肠上皮细胞的程度的图。

具体实施方式

最佳模式

以下,通过实施例更详细地描述本发明。然而,这些实施例的目的仅在于示例性地描述本发明,本发明的范围并不限于这些实施例。

实施例1:对酒精和乙醛具有降解功能的微生物的分离与鉴定

在本实施例中,从泡菜中分离并鉴定对酒精和乙醛具有优异的降解功能的微生物。结果,该微生物对血中酒精和乙醛具有优异的降解功能,并且具有优异的耐酸性、耐胆汁性以及肠黏附性,从而在肠内具有优异的稳定性。

1.菌株的分离与鉴定

(1)菌株的分离

无菌提取20g的泡菜,其直接在家中制备并存储在4℃下,并将所述泡菜稀释在0.85%的Nacl溶液180ml中,并用均质机(stomacher)均质5分钟。将所均质的泡菜逐渐地稀释于装有灭菌的0.85%NaCl溶液9ml的软管中来准备泡菜试料。将泡菜试料涂布在MRS培养基(Difco,美国)琼脂平板培养基并在37度下培养2至3日,将所出现的群体根据形状和颜色区别来重新进行纯粹分离。将所分离的群体在pH6.8的MRS液体培养基中在37℃下培养24小时的同时选别培养液的pH减少到4.5或更低的群体230种。对所选菌株的耐酒精性、对酒精和乙醛的降解功能进行实验,最终选拔对酒精和乙醛的降解功能和肠内稳定性优异的两个菌株,即短乳杆菌(Lactobacillus brevis)LMT1-73(保藏号KCTC-13412BP)和发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)LMT2-75(保藏号KCTC-13413BP)。

(2)对体外耐酒精性的确认

(2.1)对耐酒精性的检查

将经分离的230种菌株在包括不同浓度的乙醇的培养基中培养来确认耐酒精性。

具体地,将乙醇以5%、10%、15%和20%浓度添加于MRS液体培养基中,且最终10ml在使用膜滤器(membrane filter)灭菌后用作为培养基。将在MRS液体培养基中经活化的230种菌株分别以107CFU/ml的分量添加并在37度下进行静置培养。在OD600nm测量吸光度来确认菌株的生长程度。在培养前和培养后四个小时分别进行测量。表1显示所选拔的两个菌株的耐乙醇性。

[表1]

在表1中,与加入乙醇和相同分量的D.W来培养的对照组相比,+、++和+++分别表示生长了80%以上、90%以上和100%的细胞。

如表1所示,发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)LMT2-75和短乳杆菌(Lactobacillus brevis)LMT1-73在包括20%酒精的MRS液体培养基中也显示高度的生长。

(2.2)比较对醇的耐性

对在(2.1)中确认为具有高耐酒精性的两个菌株的耐酒精性与相同类别的其他菌株的耐酒精性进行比较。使用典型菌株(type strain)即短乳杆菌KCTC3498T和发酵乳杆菌KCTC3112T作为比较菌株,该比较菌株是可以从KCTC市售的。

除了使用如以下表2所示的比较菌株之外,通过与(2.1)中的记载相同的方式执行耐酒精性实验。表2显示菌株之间的耐酒精性实验结果。

[表2]

在表2中,+、++和+++如表1所示,-表示细胞并没有成长。如表2所示,相比同种的比较菌株,所选的两个菌株具有相对优异的耐酒精性。

(3)确认体外的对酒精和乙醛的降解功能

(3.1)确认对乙醇的降解功能

将经分离的两个菌株LMT1-73和LMT2-75在MRS液体培养基中在37℃下培养18小时来获得细胞浓度为109CFU/3ml水平的培养物,且准备包括3ml的该培养物的15ml实验软管。向试管中加入乙醇至终浓度为10(v/v)%后,并关闭管盖以阻断空气的进入后在37℃下静置4个小时。

然后,将培养物以3000rpm离心分离来除去细胞并取得上清液,且测量在上清液中酒精浓度。具体地,将所述上清液100ul和6mM的NAD+混合在1.0M Tris/HCL(pH8.8)缓冲剂中,使最终为3ml,并在室温下静置5分钟。在OD340nm测量吸光度后(A1),添加醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase:ADH)(Sigma公司)并测量在340nm的吸光度(A2)。根据以下的式获得乙醇的最终浓度(乙醇检测试剂盒,Cat.No.10176 290 035,r-biopharm/Roche)将其结果显示在表3中。

吸光度的差值(%),△A=(A2-A1)试料-(A2-A1)空白

乙醇最终浓度(g/L)=(0.7256/6.3)*△A

乙醇消耗量(%)=(试料中乙醇残留量/对照组中乙醇残留量)*100

[表3]

编号 菌株 酒精消耗量(%)
1 LMT1-73 97.9
2 LMT2-75 98.6

如表3所示,所选的两个菌株直接地降解约98%的乙醇。这表示这些菌株可以被使用于降解肠内或体内的酒精。这表示所述菌株能够解酒或保护肝等器官不受酒精的影响。

(3.2)确认对乙醛的降解功能

将经分离的两个菌株LMT1-73和LMT2-75在MRS培养基中在37℃下培养18个小时来获得细胞浓度为109CFU/2.7ml水平的培养物,且准备包括2.7ml的该培养物的15ml实验管。将最终浓度0.01M的乙醛添加到所述管中,并用管盖阻断空气的进入后在37℃下静置4个小时。

反应结束后,用0.2um膜滤器过滤培养产物,根据制造商的指导对除去细胞的滤滚(filtrate)试料使用乙醛检测试剂盒(acetaldehyde detection kit,r-biopharm)来测量残留在试料内的乙醛的量。以下的计算式来计算乙醛的最终浓度(乙醛检测试剂盒,Cat.No.10 668 613 035,r-biopharm/Roche)。将其结果显示在表4中。

吸光度的差值(%),△A=(A2-A1)试料-(A2-A1)空白

乙醛最终浓度(g/L)=(0.7158/6.3)*△A

乙醛消耗量(%)=(试料中乙醛残留量/对照组中乙醛残留量)*100

[表4]

编号 菌株 乙醛消耗量(%)
1 LMT1-73 98.2
2 LMT2-75 95.0

如表4中所示,所选拔的两个菌株分别消耗了98.2%和95.0%的乙醛。这就表示这些菌株通过减少由酒精氧化生成且知名为宿醉的主要原因的乙醛的浓度来可以减少摄取酒精后发生在身体的有害症状。

(4)确认体外的对酒精和乙醛的降解功能

使老鼠口服酒精和所选的菌株,并确认对血液中酒精和乙醛浓度的影响。使用五至六周龄(体重140g至160g)的雄性大鼠(Sprague Dawley:SD)系列老鼠((株)orientbio,盛南,韩国)。

使所述大鼠自由摄取固体饲料和自来水,初步饲养1周后区分为正常组、对照组和实验组(每组三只大鼠)。正常组为对老鼠给予PBS的群组,对照组为对老鼠给予40%EtOH的群组,实验组1和实验组2分别为给予(短乳杆菌LMT1-73 1×108CFU/老鼠/日+40%EtOH)和(发酵乳杆菌LMT2-75 1×108CFU/老鼠/日+40%EtOH)的群组。

在初步饲养后,在禁食18小时候,在实验组中,对于每只大鼠以悬浮1x108CFU/日的生菌于磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline:PBS,biosesang)并给予一次。

三十分钟后,使所述对照组和实验组口服40(v/v)浓度的乙醇1.5ml,在5个小时后通过心脏采血获取1.5ml的血液。对所获取的血液在室温下,以13,000rpm离心分离10分钟来分离血浆。针对血浆,使用乙醇测量试剂盒(Roche,美国)来测量乙醇浓度。将其结果显示在表5中。

[表5]

对照组 实验组1 实验组2
酒精残留量(%) 100 24 79.3

如表5所示,与对照组相比,在两个实验组中,从血浆中的酒精检测量相对少。

并且,针对血浆,使用作为乙醇降解产物的乙醛测量试剂盒(Roche,美国)来测量乙醛的浓度。将其结果显示在表6中。

[表6]

对照组 实验组1 实验组2
乙醛残留量(%) 100 4.4 47.6

如表6所示,与对照组相比,在两个实验组中从血浆中的乙醛检测量相对少。因此,这结果就表示菌株能够通过减少在实验动物模型中的酒精和乙醛浓度来减少在摄取酒精后发生在身体上的有害症状。

(5)对所选菌株的遗传性分析

(5.1)16S rDNA的分析

使用序列号3和序列号4的引物组和所分离的两个菌株LMT1-73和LMT2-75的基因组作为模板执行PCR,从而获得16S rDNA扩增产物。通过测序确认所述扩增产物的核苷酸序列。结果,LMT1-73和LMT2-75的16S rDNA分别具有序列号1和2的核苷酸序列。

并且,通过使用NCBI blast(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)来解释所述16SrDNA的核苷酸序列。结果,LMT1-73和LMT2-75的16S rDNA分别与短乳杆菌种和发酵乳杆菌种具有99.9%和100.0%的序列同源性。并且,系统进化树分析结果显示,LMT1-73与短乳杆菌种相同,LMT2-75与发酵乳杆菌种相同。结果确认,LMT1-73和LMT2-75菌株为属于新的短乳杆菌种和发酵乳杆菌种的新菌株。将这两个菌株分别命名为短乳杆菌(Lactobacillusbrevis)LMT1-73和发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)LMT2-75并于2017年12月5日以保藏号KCTC13412BP和KCTC13413BP保藏在位于韩国生命工学研究院的韩国典型菌种保藏中心(Korean Collection for Type Cultures,KCTC)。

(5.2)确认与酒精和乙醛的降解有关的酶基因

在MRS液体培养基中在37℃下将LMT1-73和LMT2-75培养18小时,并回收菌体。通过使用基因组DNA试剂盒(genomic DNA kit)来从菌体中获得基因组DNA。使用表7所示的引物组作为引物且将所述基因组DNA作为模板执行PCT,从而确认ADH、ALDH以及霜功能乙醛-CoA/醇脱氢酶(bifunctional acetaldehyde-CoA/alcohol dehydrogenase:ADHE)基因的存在。

结果,对LMT1-73和LMT2-75获得ADH、ALDH以及ADHE基因扩增产物。对这些产物进行排序,并使用NCBIblast对所获得的序列与其他序列进行比较的结果,LMT1-73的ADH、ALDH和ADHE基因分别与WP_011668736、WP_011668306和WP_024855276一致,LMT2-75的ADH、ALDH和ADHE基因分别与NZ_CP019030、CP002033.1和NC_010610.1一致。

[表7]

(6)检查对所选菌株的形态学及生理特性

(6.1)对形态学特性的分析

将所选的两种LMT1-73和LMT2-75涂抹在MRS琼脂平板培养基上并在37℃下培养且观察所形成的群体的形状。表8显示LMT1-73和LMT2-75的形式特性。

[表8]

LMT1-73 LMT2-75
形状 圆形 圆形
尺寸 2mm 1mm
颜色 淡黄色 淡黄色
不透明度 不透明 不透明
隆起
表面 光滑 光滑
好氧性生长 + +
厌氧性生长 + +

(6.2)所选菌株的糖发酵特性

通过使用API50CHL试剂盒(Biomerieux,法国)根据供应商的实验指针来检查糖发酵特性。表9显示LMT1-73和LMT2-75的糖发酵特性。

[表9]

(7)所选菌株的肠内稳定性

(7.1)检查耐酸性

为了在肠内发挥益生菌的功能,所选的菌株在被摄取后需要通过低pH的胃肠。

将所选的两个菌株接种于MRS液体培养基后在37℃下培养16个小时。然后,将所选的菌株以1%量接种于通过使用HCL将pH调节为2.5来进行灭菌的MRS液体培养基,并在37℃下培养两个小时。回收在菌株接种之后和培养两个小时后的试料,将所述试料稀释在MRS液体培养基中且涂布于MRS平板培养基上,并在37℃下培养24小时后计算平板培养基上的群体数量来测量细胞数。作为对照组,在没有调节pH的MRS(pH6.8)液体培养基以相同的方式进行测量来计算细胞数。使用典型菌株(type strain)即短乳杆菌KCTC3498T和发酵乳杆菌KCTC3112T作为比较菌株,该比较菌株是可以从KCTC市售的。表10显示耐酸性测量结果。

[表10]

如表10所示,与比较菌株相比,所选的菌株在pH2.5下对酸性更加优异的耐性。具体地,所选的LMT1-73和LMT2-75分别存活13.4%和41.2%,相反,作为比较菌株的短乳杆菌KCTC3498T和发酵乳杆菌KCTC3112T分别仅存活10.6%和0.2%。这些所选的菌株的特征表示,由于低于接近胃的生理pH的pH3的pH下保持适当细胞数,因此,在由胃酸分泌引起的低pH下也可以稳定地保持生菌数,且在摄取时到肠内的存活率会非常高。

(7.2)检查耐胆汁性

通过在包括胆汁酸的培养基中培养所选的两种菌株来确认胆汁酸对两种菌株的生长的影响。

具体地,将所选的菌株接种于经灭菌的MRS液体培养基后在37℃下培养24个小时,并且考虑肠管内胆汁酸盐浓度为0.1%左右,将1%分量的所述菌株接种于含有0.3%的胆汁酸盐(bile salts)(sigma,美国)的MRS液体培养基中且在37℃下分别培养两个小时。回收刚接种菌株后的试料和培养两个小时后的试料来将所述试料稀释在MRS液体培养基并涂布在MRS平板培养基上,并在37℃下培养24个小时后计算平板培养基上的群体数来测量菌株的细胞数。作为对照组,在不含有0.3%的胆汁盐酸的MRS液体培养基中以相同的方式进行培养,并计算菌株细胞数。使用典型菌株(type strain)即短乳杆菌KCTC3498T和发酵乳杆菌KCTC3112T作为比较菌株,这些比较菌株是可以从KCTC市售的。表11显示测量耐胆汁酸性的结果。

[表11]

如表11所示,所选的菌株甚至在0.3%下维持合适的细胞数,其中,0.3%高于类似于肠内实际浓度0.1%。具体地,所选的菌株LMT1-73和LMT2-75分别生存12.9%和1.5%,相反,比较菌株即短乳杆菌KCTC3498T和发酵乳杆菌KCTC3112T分别生存11.7%和1.0%。因此,这样的结果表示所选的LMT1-73和LMT2-75充分地能够在人体或动物的肠内存活,并且显示出非常高的肠内到达率。

(7.3)对肠内黏附性的检查

将所选的菌株与肠上皮细胞即Caco-2共培养,并计算结合到所述上皮细胞的所选的菌株细胞的数量来测量所选的菌株附着于肠的程度。Caco-2细胞为人大肠上皮腺癌细胞(human epithelial colorectal adenocarcinoma cell),从韩国细胞株银行(KCLB30037.1)购买。

具体地,使用细胞培养基使Caco-2细胞稀释成7×104cell/100μl并加入于96孔培养板,并在5%二氧化碳,37℃条件下培养使Caco-2形成细胞单一层。所使用的培养板和培养基分别为96孔细胞培养板(康宁,美国)和包括10%胎牛血清(fetal bovine serum:FBS)(Gibco,美国)的达尔伯克改良伊格尔培养基(Dulbecco's modified Eagle's medium,DMEM)(Gibco,美国)培养基。

然后,使用磷酸盐缓冲盐水(Phosphate Buffered Saline:PBS)洗涤在MRS液体培养基经过培养的LMT1-73和LMT2-75后将其悬浮在没有加入抗生素的DMEM培养基中,1×107CFU分量的菌株加入于所述Caco-2细胞单一层,并在5%二氧化碳,37℃条件下培养两个小时。为了除去不附着于Caco-2细胞的细胞,用PBS进行5次的洗涤,使用100μl的0.1%聚乙醇辛基苯基醚(triton X-100)分离所附着的细胞后,将其涂布在MRS固相培养基并在37℃下培养两个小时后计算平板培养基上的群体数来检查所选菌株的肠内黏附性。

图1为示出所选拔的菌株附着于肠上皮细胞的程度的图。如图1所示,所选的LMT1-73和LMT2-75分别附着73.7%和72.9%;相反,比较菌株即短乳杆菌KCTC3498T和发酵乳杆菌KCTC3112T分别附着68.0%和58.3%。

因此,与比较菌株相比,所选的菌株短乳杆菌LMT1-73和发酵乳杆菌LMT2-75对肠上皮细胞即Caco-2细胞更优异的附着力。

应理解,在本说明书中描述的实施例仅是描述性的,而其目的不在于限制本公开。对各实施例中的特征或方面的描述应被视为可适用于其他实施例中的类似特征或方面。

尽管参照附图描述了一个或多个实施例,本领域的普通技术人员应当理解在不脱离附加的权利要求书所公开的本公开的技术思想和范围的同时实施在形式和细节上的各种变化。

<110> 玫帝托克斯股份有限公司

<120> 对乙醇和乙醛具有降解功能的微生物,包括所述微生物的组合物和试剂盒

<130> PN120569KR

<160> 16

<170> KopatentIn 2.0

<210> 1

<211> 1369

<212> DNA

<213> 短乳杆菌LMT1-73

<400> 1

ttgcactgat ttcaacaatg aagcgagtgg cgaactggtg agtaacacgt gggaaatctg 60

cccagaagca ggggataaca cttggaaaca ggtgctaata ccgtataaca acaaaatccg 120

catggatttt gtttgaaagg tggcttcggc tatcacttct ggatgatccc gcggcgtatt 180

agttagttgg tgaggtaaag gcccaccaag acgatgatac gtagccaacc tgagagggta 240

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cttccacaat ggacgaaagt ctgatggagc aatgccgcgt gagtgaagaa gggtttcggc 360

tcgtaaaact ctgttgttaa agaagaacac ctttgagagt aactgttcaa gggttgacgg 420

tatttaacca gaaagccacg gctaactacg tgccagcagc cgcggtaata cgtaggtggc 480

aagcgttgtc cggatttatt gggcgtaaag cgagcgcagg cggtttttta agtctgatgt 540

gaaagccttc ggcttaaccg gagaagtgca tcggaaactg ggagacttga gtgcagaaga 600

ggacagtgga actccatgtg tagcggtgga atgcgtagat atatggaaga acaccagtgg 660

cgaaggcggc tgtctagtct gtaactgacg ctgaggctcg aaagcatggg tagcgaacag 720

gattagatac cctggtagtc catgccgtaa acgatgagtg ctaagtgttg gagggtttcc 780

gcccttcagt gctgcagcta acgcattaag cactccgcct ggggagtacg accgcaaggt 840

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actctggtga gactgccggt gacaaaccgg aggaaggtgg ggatgacgtc aaatcatcat 1140

gccccttatg acctgggcta cacacgtgct acaatggacg gtacaacgag tcgcgaagtc 1200

gtgaggctaa gctaatctct taaagccgtt ctcagttcgg attgtaggct gcaactcgcc 1260

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<213> 发酵乳杆菌LMT2-75

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