阅读说明：本技术 提高牛胚胎移植中受体牛可用率的方法 (Method for improving availability of acceptor cattle in cattle embryo transplantation ) 是由 郝少强 王小武 赵明礼 王娜 郭春明 许晓椿 于 2020-05-28 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种提高牛胚胎移植中受体牛可用率的方法。本发明通过使用母牛注射促黄体素释放激素A3,可以获得如本发明所述一个或者多个方面的技术效果。本发明方法包括如下步骤：(1)提供供体牛；(2)对供体牛肌肉注射促黄体素释放激素A3；(3)从注射药物起连续观察3d内母牛的发情、排卵情况,记录母牛开始出现发情时间和发情结束时间,每天早晚各观察一次,并以母牛外观发情征状,结合直肠检查来确定发情时间、发情程序及排卵状况,以注射药物后3d内表现发情的判断为发情同期化,并对发情排卵的母牛,按冻配技术操作规程适时进行人工授精,精液为同种供体牛的冻精；(4)以配种后90d,直肠检查结果为依据确定母牛是否怀孕,按常规方法进行孕期饲养。(The invention discloses a method for improving the availability of a receptor cow in cow embryo transplantation. The present invention achieves the technical result of one or more aspects of the present invention by injecting luteinizing hormone releasing hormone a3 into a cow. The method comprises the following steps: (1) providing a donor bovine; (2) intramuscular injection of luteinizing hormone releasing hormone a3 in donor cattle; (3) continuously observing the oestrus and ovulation conditions of the cows within 3d from the time of injecting the medicaments, recording the oestrus starting time and the oestrus ending time of the cows, observing the oestrus starting time and the oestrus ending time once every morning and evening, determining the oestrus time, the oestrus program and the ovulation condition by combining rectal examination according to the appearance oestrus symptoms of the cows, determining the oestrus appearing within 3d after injecting the medicaments as oestrus synchronization, and carrying out artificial insemination on the cows in oestrus and ovulation at the right time according to a freeze-matching technical operation rule, wherein semen is the frozen semen of the cows of the same donor; (4) and (5) determining whether the cow is pregnant according to the rectal examination result 90 days after mating, and feeding the cow in the pregnancy period according to a conventional method.)

提高牛胚胎移植中受体牛可用率的方法

技术领域

本发明属于畜牧领域，涉及一种牛养殖技术，尤其涉及一种提高牛胚胎移植中受体牛可用率的方法。本发明通过使用母牛注射促黄体素释放激素A3即LHRH-A3，可以获得如本发明所述一个或者多个方面的技术效果。

背景技术

目前，生产中选择受体牛时，受体牛有自然发情或者注射药剂使同期发情两种方案，而后一种方案对于提高生产效率具有非常重要的作用。

同期发情是指利用某些激素制剂人为地控制并调整一群母畜发情周期的进程，使之在预定时间内集中发情。抑制发情的制剂，如孕酮类。控制的方法有前列腺素法和孕激素法。通常地讲，同期发情是指利用激素制剂调整母畜的发情周期，使其在相对集中的时间内发情的技术。常用的同期发情药物，一类是抑制发情的制剂，如孕酮类，在其处理期间，提高了处于卵泡期母畜的孕酮水平，卵泡的发育成熟受到抑制，自然发情停止，实际上延长了发情周期。经过一定时期，同时停止药物处理，使孕酮水平降低，处理母畜的卵泡同时开始迅速生长，同时出现。

同期发情是一种控制发情的新技术。世界各国从60年代起已开始研究，随着研究的深入，也显示出它对各国牛育种、改良的威力。所以我国也在七八十年代开始了研究，许多单位进行了试验并取得了一定成效。利用药物激素对一群母牛进行处理，有意识地调整改变其自然发情周期，使每个母牛的分散发情调整到一定时间内全群母牛集中统一发情，集中配种，可以大大提高生产效率。

同期发情的重要性是多方面的。例如，1.可将牛群的发情、配种、妊娠、分娩调整到一定时间内同时进行，这样做的好处是犊牛同时出生，可以统一哺乳期的管理培育，可以集中精力大规模搞好犊牛、育成牛的科学饲养管理，缺点是利用的设备多，人员的工作一年四季不匀；2.冷冻精液、人工授精是技术性强的工作，集中力量搞可以提高效率及工作质量。定时输精可不抓发情鉴定；3.同时发情、超数排卵、胚胎移植是繁殖新技术的几个重要环节，缺一不可，只有供体牛、受体牛同时发情，生殖器处于同一的生理状态，胚胎移植才能实现。

同期发情是以动物的生理机理作为理论基础。母牛的生殖生理中卵巢的形状与机能起重要作用，母牛的发情周期中卵巢要经过卵泡期和黄体期两个期。两期交替、反复出现就形成了发情周期。但两期中的黄体期的控制对发情周期的控制是关键。牛群中的每头母牛都是处在发情周期的不同阶段，控制发情就是通过激素或药物处理控制黄体期黄体的寿命，使所有母牛发情周期调整到相同的阶段，达到同期化发情的目的。控制黄体的作法大体说来主要有两种，一种是施用孕激素，另一种是施用前列腺素来打断牛自然发情周期规律。利用孕激素孕酮及其类似物的效果在于连续使用使血液中的孕激素保持一定水平，抑制了卵巢上卵泡的生长发育和发情，老是处于人为的黄体期，有时卵巢上的黄体已经消失，这也意味着内源性激素水平下降，但由于外源性激素仍在起作用，母牛不会发情，这就等于延长了发情周期，推迟了发情期。第二种方法是利用前列腺素，如前列腺素F2。及其类似物。目的是溶解黄体降低孕酮水平，停止黄体期，促进脑下垂体促性腺激素的释放，使发情来临。这样就缩短了发情周期，使发情期提前到来。

以有一些文献采用促黄体素释放激素A3来改善动物生殖善状况的方法。例如，CN101711513A(申请号200910272961.7)公开了一种提高母猪排卵数的方法及其注射剂，属于农业生物制品技术领域。采用发情前同时注射PG(氯前列醇钠)和PMSG(血清性促性腺激素)，或者注射PG和PMSG的合剂，发情时注射HCG(绒毛膜促性腺激素)或LHRH-A3(促黄体素释放激素A3)方法，达到促进青年母猪或经产母猪排卵数达到正常排卵量2-3倍效果，从而提高母猪的繁殖性能，使母猪产子数明显增加，据信该方法技术稳定，效果明显；不诱发卵巢囊肿，对于后备母猪，在性成熟前的任何时候，用上述方法，亦可达到同样超数排卵效果。

CN103083110A(申请号201210578058.5)公开了一种提高胚胎移植受体牛同期发情率和妊娠率的方法对有无周期的受体牛，在任意一天肌注维生素ADE10毫升，并放置孕激素阴道栓9-12天，取栓前1天肌注孕马血清激素1000单位，取栓时肌注氯前列烯醇0.5毫克。取栓后2-3天发情，并肌注绒毛膜激素2000单位或促排3号25微克，对处理后已发情有轻微子宫炎的受体牛，当天进行子宫灌注消炎药物，净化子宫，同时肌注维生素ADE10毫升，使受体牛子宫内环境更有利于妊娠。在发情的第7-7.5天进行胚胎移植，对移植时黄体不够坚实的受体牛肌注黄体酮100单位或促黄体生成素25微克。据信此发情方案发情率大于90％。

CN107372349A(申请号201710791995.1)涉及平凉红牛与和牛的杂交繁育方法，以和牛为父本，以平凉红牛为母本；确认平凉红牛母牛发情后，与和牛公牛冻精进行冻配，冻配前注射维生素ADE，冻配时再注射促黄体素释放激素A3；平凉红牛母牛围产期根据体况进行精饲料补充调控，并补充钙镁制剂；犊牛出生后立即与母牛分离，犊牛饲喂洁净初乳后，连续一周服用犊牛腹泻预防包。本发明培育的平凉红牛与和牛种间杂交F1代抗逆性强，育肥生产性能好，肌间脂肪沉积能力强，为我国地方良种牛平凉红牛的进一步改良、资源的合理利用及杂交F1代优越的商业价值提供科学依据。

CN109964878A(申请号201910384234.3)涉及新疆哈萨克牛与安格斯牛的杂交繁育方法，以安格斯牛为父本，以新疆哈萨克牛为母本；确认新疆哈萨克牛母牛发情后，与安格斯牛公牛冻精进行冻配，冻配前注射维生素ADE，冻配时再注射促黄体素释放激素A3；新疆哈萨克牛母牛围产期根据体况进行精饲料补充调控，并补充维生素A及钙镁制剂；犊牛出生后立即与母牛分离，犊牛饲喂洁净初乳后，连续一周服用犊牛腹泻预防包。本发明培育的新疆哈萨克牛与安格斯牛种间杂交F1代抗逆性强，育肥生产性能好，为我国地方良种牛新疆哈萨克牛的进一步改良、资源的合理利用及杂交F1代优越的中档牛肉商业价值提供科学依据。

然而，本领域仍然期待有提高动物例如牛的发情、排卵、受胎的新方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提高动物例如牛的发情、排卵、受胎的新方法。已经出人意料地发现，通过注射促黄体素释放激素A3使牛实现同期发情、进而使试验动物排卵、受胎，获得了出人意料的效果，本发明基于此类发现而得以完成。

本发明通过给母牛注射促黄体素释放激素A3使牛实现同期发情、进而使试验动物排卵、受胎，本质上讲，这是一种提高牛胚胎移植中受体牛可用率的方法。

为此，本发明第一方面提供了一种提高牛胚胎移植中受体牛可用率的方法，其包括如下步骤：

(1)提供供体牛：供体牛是空怀、未发过情的经产母牛，经直肠检查确认无生殖道疾病；整个试验期间白天以放牧为主，夜间补饲草料；

(2)给药：对供体牛肌肉注射促黄体素释放激素A3；

(3)发情和授精：从注射药物当天为0d算起，连续观察1～3d内母牛的发情、排卵情况，记录母牛开始出现发情时间和发情结束时间，每天早晚各观察一次，每次2～3h，并以母牛外观发情征状，结合直肠检查来确定发情时间、发情程序及排卵状况，以注射药物后3d内表现发情的判断为发情同期化，并对发情排卵的母牛，按冻配技术操作规程适时进行人工授精，精液为同种供体牛的冻精；

(4)妊娠判断：以配种后90d，直肠检查结果为依据确定母牛是否怀孕，计算情期受胎率，并按常规方法进行孕期饲养。

根据本发明第一方面的方法，其中所述供体牛选自：和牛、南阳黄牛、平凉红牛、新疆哈萨克牛、安格斯牛。

根据本发明第一方面的方法，其中所述供体牛是产后4个月以上的牛。

根据本发明第一方面的方法，其中所述供体牛是牛龄3～8岁牛。

根据本发明第一方面的方法，其中所述促黄体素释放激素A3的剂量为1～20μg/100kg体重。

根据本发明第一方面的方法，其中所述促黄体素释放激素A3的剂量为2～10μg/100kg体重。

根据本发明第一方面的方法，其中所述促黄体素释放激素A3的剂量为5μg/100kg体重。

根据本发明第一方面的方法，其中所述促黄体素释放激素A3是以其组合物注射给药的。

根据本发明第一方面的方法，其中所述组合物包含促黄体素释放激素A3以及盐酸精氨酸、甘油三乙酯。

根据本发明第一方面的方法，其中所述组合物包含促黄体素释放激素A3以及盐酸精氨酸、甘油三乙酯，三者重量比为5μg：10～200mg：1～20mg。

根据本发明第一方面的方法，其中所述组合物包含促黄体素释放激素A3以及盐酸精氨酸、甘油三乙酯，三者重量比为5μg：20～100mg：2～10mg。

根据本发明第一方面的方法，其中所述组合物包含促黄体素释放激素A3以及盐酸精氨酸、甘油三乙酯，三者重量比为5μg：50mg：5mg。

根据本发明第一方面的方法，其中所述组合物是用水溶解后注射给药的。

根据本发明第一方面的方法，其中所述组合物是冷冻干燥粉针剂。

根据本发明第一方面的方法，其中所述组合物是照包括如下步骤的方法制备得到的：将促黄体素释放激素A3和盐酸精氨酸、甘油三乙酯三者按比例用适量注射用水溶解(例如至LHRH-A3浓度为1～20μg/ml，例如2～10μg/ml，例如5μg/ml)，用0.22μm微孔滤膜过滤除菌，分装到西林瓶中，冷冻干燥，即得。

根据本发明第一方面的方法，其中所述组合物在注射给药时，用注射用水稀释至LHRH-A3浓度为1～20μg/ml，例如2～10μg/ml，例如5μg/ml，按规定剂量注射给药。

进一步的，本发明第二方面的提供了一种组合物，其中包含促黄体素释放激素A3、盐酸精氨酸、甘油三乙酯。

根据本发明第二方面的组合物，其中包含促黄体素释放激素A3以及盐酸精氨酸、甘油三乙酯，三者重量比为5μg：10～200mg：1～20mg。

根据本发明第二方面的组合物，其中包含促黄体素释放激素A3以及盐酸精氨酸、甘油三乙酯，三者重量比为5μg：20～100mg：2～10mg。

根据本发明第二方面的组合物，其中包含促黄体素释放激素A3以及盐酸精氨酸、甘油三乙酯，三者重量比为5μg：50mg：5mg。

根据本发明第二方面的组合物，其是用水溶解后注射给药的。

根据本发明第二方面的组合物，其是冷冻干燥粉针剂。

根据本发明第二方面的组合物，其是照包括如下步骤的方法制备得到的：将促黄体素释放激素A3和盐酸精氨酸、甘油三乙酯三者按比例用适量注射用水溶解(例如至LHRH-A3浓度为1～20μg/ml，例如2～10μg/ml，例如5μg/ml)，用0.22μm微孔滤膜过滤除菌，分装到西林瓶中，冷冻干燥，即得。

根据本发明第二方面的组合物，其在注射给药时，用注射用水稀释至LHRH-A3浓度为1～20μg/ml，例如2～10μg/ml，例如5μg/ml，按规定剂量注射给药。

进一步的，本发明第三方面提供了促黄体素释放激素A3在制备用于提高牛胚胎移植中受体牛可用率的药物组合物中的用途。

根据本发明第三方面的方法，其中所述组合物如本发明第二方面任一实施方案所述。

根据本发明第三方面的方法，其中提高牛胚胎移植中受体牛可用率的方法如本发明第一方面任一实施方案所述。

本发明任一方面或该任一方面的任一实施方案所具有的任一技术特征同样适用其它任一实施方案或其它任一方面的任一实施方案，只要它们不会相互矛盾，当然在相互之间适用时，必要的话可对相应特征作适当修饰。下面对本发明的各个方面和特点作进一步的描述。

本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。

在本发明中，所用的促黄体素释放激素A3，英文名：Luteinizing HormoneReleasing Hormone A3，又名促排卵3号、促排三号、促排卵素三号、多胎素等，英文缩写LHRH-A3。

促黄体素释放激素A3(LHRH-A3)作为一种激素类药，能促使动物垂体前叶释放促黄体素(LH)和促卵泡素(FSH)促使卵巢的卵泡成熟而排卵，不但可使垂体以合成的激素立即释放，也能够刺激激素合成。用于治疗奶牛排卵迟滞，卵巢静止、持久黄体、卵巢囊肿及早期妊娠诊断：也可用于鱼类的诱发排卵。对雄性动物，可促进精子形成。

促黄体素释放激素A3畜牧业领域常用于：1.提高产仔数。2.提高情期受胎率。3.治疗卵泡成熟度差、排卵迟缓、卵泡囊肿。4.加强超数排卵效果。5.加强黄体功能。6.用于鱼类诱发排卵。

促黄体素释放激素A3在牛繁殖上的应用主要有：

促进卵巢功能的修复，缩短产犊间隔，在产后8～18天内肌内注射5～15μg，每天1次，连用3天；

提高受胎率：a、配种时肌内注射25μg，可明显提高情期受胎率；b、产后40天左右肌注25μg，间隔6天肌注氯前列醇钠(多宝素)0.4～0.6mg，间隔1天肌注20μg，可明显提高产后60天内的受胎率；

治疗卵泡发育不良、排卵迟缓：配种时或配种前2小时，肌注25～30μg；

治疗多卵泡发育：每天肌注25μg，连用3天；

治疗卵巢囊肿：每天肌注25μg，连用5天，同时每天肌注100mg黄体酮，为防止复发，孕后3个月应多次注射黄体酮。

促黄体素释放激素A3在猪繁殖上的应用主要有：

提高母猪情期受胎率、产仔数：母猪在发情的第2天下午肌注25～50μg，第3天上、下午各配种1次，母猪平均每窝产仔数增加1.5～2头；

公猪性欲不强，每天用25μg，连用3～5天。

促黄体素释放激素A3在羊繁殖上的应用主要有：

母羊正常发情后，立即肌注本品5～10μg，4～6小时后即配种(如未发情，可用三合激素每只0.5～1ml先催情)，按此操作，山羊双胎率明显增加，绵羊增加产仔数量。

促黄体素释放激素A3在其它家畜上的应用主要有：

提高受胎率和产仔数，配种同时或配种前数小时肌注：鹿15μg/头、兔0.2～0.5μg/头、犬狐15μg/头、皮用兽5μg/头。

促黄体素释放激素A3在水产上的应用主要有：促排卵：腹腔注射，每尾鱼，一次量，草鱼2-5μg，鲢鱼、鳙鱼3-5μg。

本发明已经出人意料的发现，通过使用本发明的方法，可以显著地提高动物同期发情、排卵、受孕的效果。

具体实施方式

通过下面的实施例可以对本发明进行进一步的描述，然而，本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解，在不背离本发明的精神和范围的前提下，可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料均为市售商品。

实施例1：同期发情效果试验

照以下步骤进行同期发情效果试验。

(1)提供供体牛：南阳黄牛，产后4个月以上、牛龄3～8岁、空怀、未发过情的经产母牛若干头，经直肠检查确认无生殖道疾病；整个试验期间白天以放牧为主，夜间补饲草料；

(2)给药：对供体牛肌肉注射促黄体素释放激素A3(LHRH-A3)，注射剂量为5μg/100kg体重；

(3)发情和授精：从注射药物当天为0d算起，连续观察1～3d内母牛的发情、排卵情况，记录母牛开始出现发情时间和发情结束时间，每天早晚各观察一次，每次2～3h，并以母牛外观发情征状，结合直肠检查来确定发情时间、发情程序及排卵状况，以注射药物后3d内表现发情的判断为发情同期化，并对发情排卵的母牛，按冻配技术操作规程适时进行人工授精，精液为南阳黄牛的冻精；

(4)妊娠判断：以配种后90d，直肠检查结果为依据确定母牛是否怀孕，计算情期受胎率，并按常规方法进行孕期饲养。

本实施例步骤(2)所用药物的配制：将促黄体素释放激素A3市售原料药(>99％)用注射用水溶解(5μg/ml)，用0.22μm微孔滤膜过滤除菌，分装到西林瓶中，冷冻干燥，备用；使用时，用注射用水稀释至5μg/ml，按规定剂量注射给药。

本申请的一些实施例的结果如下表：

注：表中，排卵动物是以同期发情动物为基础统计的，情期受胎动物是以排卵动物为基础统计的，总受胎率是以总试验动物数统计的。已经出人意料的发现，本发明在注射促黄体素释放激素A3的同时，还一起注射盐酸精氨酸、甘油三乙酯二者，可以显著地增加受胎率。

实施例2：同期发情效果试验

照以下步骤进行同期发情效果试验。

(1)提供供体牛：南阳黄牛，产后4个月以上、牛龄3～8岁、空怀、未发过情的经产母牛若干头，经直肠检查确认无生殖道疾病；整个试验期间白天以放牧为主，夜间补饲草料；

(2)给药：对供体牛肌肉注射包含促黄体素释放激素A3(LHRH-A3)的组合物，注射剂量以LHRH-A3计为5μg/100kg体重；

(3)发情和授精：从注射药物当天为0d算起，连续观察1～3d内母牛的发情、排卵情况，记录母牛开始出现发情时间和发情结束时间，每天早晚各观察一次，每次2～3h，并以母牛外观发情征状，结合直肠检查来确定发情时间、发情程序及排卵状况，以注射药物后3d内表现发情的判断为发情同期化，并对发情排卵的母牛，按冻配技术操作规程适时进行人工授精，精液为南阳黄牛的冻精；

(4)妊娠判断：以配种后90d，直肠检查结果为依据确定母牛是否怀孕，计算情期受胎率，并按常规方法进行孕期饲养。

本实施例步骤(2)给药的组合物包含LHRH-A3、盐酸精氨酸、甘油三乙酯，三者重量比为5μg：50mg：5mg，组合物的配制方法为：将促黄体素释放激素A3市售原料药(>99％)和盐酸精氨酸、甘油三乙酯三者按比例用注射用水溶解(至LHRH-A3浓度为5μg/ml)，用0.22μm微孔滤膜过滤除菌，分装到西林瓶中，冷冻干燥，备用；使用时，用注射用水稀释至LHRH-A3浓度为5μg/ml，按规定剂量注射给药。

实施例3：同期发情效果试验

照以下步骤进行同期发情效果试验。

(1)提供供体牛：南阳黄牛，产后4个月以上、牛龄3～8岁、空怀、未发过情的经产母牛若干头，经直肠检查确认无生殖道疾病；整个试验期间白天以放牧为主，夜间补饲草料；

(2)给药：对供体牛肌肉注射包含促黄体素释放激素A3(LHRH-A3)的组合物，注射剂量以LHRH-A3计为5μg/100kg体重；

(3)发情和授精：从注射药物当天为0d算起，连续观察1～3d内母牛的发情、排卵情况，记录母牛开始出现发情时间和发情结束时间，每天早晚各观察一次，每次2～3h，并以母牛外观发情征状，结合直肠检查来确定发情时间、发情程序及排卵状况，以注射药物后3d内表现发情的判断为发情同期化，并对发情排卵的母牛，按冻配技术操作规程适时进行人工授精，精液为南阳黄牛的冻精；

(4)妊娠判断：以配种后90d，直肠检查结果为依据确定母牛是否怀孕，计算情期受胎率，并按常规方法进行孕期饲养。

本实施例步骤(2)给药的组合物包含LHRH-A3、盐酸精氨酸，二者重量比为5μg：50mg，组合物的配制方法为：将促黄体素释放激素A3市售原料药(>99％)和盐酸精氨酸二者按比例用注射用水溶解(至LHRH-A3浓度为5μg/ml)，用0.22μm微孔滤膜过滤除菌，分装到西林瓶中，冷冻干燥，备用；使用时，用注射用水稀释至LHRH-A3浓度为5μg/ml，按规定剂量注射给药。

实施例4：同期发情效果试验

照以下步骤进行同期发情效果试验。

(1)提供供体牛：南阳黄牛，产后4个月以上、牛龄3～8岁、空怀、未发过情的经产母牛若干头，经直肠检查确认无生殖道疾病；整个试验期间白天以放牧为主，夜间补饲草料；

(2)给药：对供体牛肌肉注射包含促黄体素释放激素A3(LHRH-A3)的组合物，注射剂量以LHRH-A3计为5μg/100kg体重；

(3)发情和授精：从注射药物当天为0d算起，连续观察1～3d内母牛的发情、排卵情况，记录母牛开始出现发情时间和发情结束时间，每天早晚各观察一次，每次2～3h，并以母牛外观发情征状，结合直肠检查来确定发情时间、发情程序及排卵状况，以注射药物后3d内表现发情的判断为发情同期化，并对发情排卵的母牛，按冻配技术操作规程适时进行人工授精，精液为南阳黄牛的冻精；

(4)妊娠判断：以配种后90d，直肠检查结果为依据确定母牛是否怀孕，计算情期受胎率，并按常规方法进行孕期饲养。

本实施例步骤(2)给药的组合物包含LHRH-A3、甘油三乙酯，二者重量比为5μg：5mg，组合物的配制方法为：将促黄体素释放激素A3市售原料药(>99％)和甘油三乙酯二者按比例用注射用水溶解(至LHRH-A3浓度为5μg/ml)，用0.22μm微孔滤膜过滤除菌，分装到西林瓶中，冷冻干燥，备用；使用时，用注射用水稀释至LHRH-A3浓度为5μg/ml，按规定剂量注射给药。

实施例5：同期发情效果试验

参照实施例2的方法对41头日本纯血和牛进行同期发情效果试验，结果显示：发情数38头(同期率92.7％)、排卵数35头(排卵率92.1％)、受胎数31头(情期受胎率88.6％)、总受胎率75.6％。

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。