阅读说明：本技术 烷氧基异噁唑类衍生物及其制备方法与应用 (Alkoxy isoxazole derivative and preparation method and application thereof ) 是由 于丽芳 施文稳 石俊杰 杨帆 汤杰 庞涛 王云杰 于 2019-02-01 设计创作，主要内容包括：本发明属于药物化学领域,公开了一种如式(I)所示的烷氧基异噁唑类衍生物及其药学上可接受的盐,以及其合成方法与应用。本发明提供的烷氧基异噁唑类衍生物对sigma受体具有较好的亲和力,其中部分化合物具有良好的透膜能力,同时具有促神经再生活性,有望发展为治疗中枢神经系统疾病特别是神经退行性疾病的药物。所述sigma受体具有sigma-1和sigma-2两个亚型,其中sigma-1为用于治疗中枢神经系统疾病、可卡因成瘾及镇痛等的靶点,sigma-2为用于抗肿瘤药物的治疗靶点。(The invention belongs to the field of medicinal chemistry, and discloses alkoxy isoxazole derivatives shown as a formula (I), pharmaceutically acceptable salts thereof, a synthetic method and application thereof. The alkoxy isoxazole derivative provided by the invention has better affinity to sigma receptors, wherein a part of compounds have good membrane penetration capability and nerve regeneration promoting activity, and is expected to be developed into a medicament for treating central nervous system diseases, particularly neurodegenerative diseases. The sigma receptor has two subtypes of sigma-1 and sigma-2, wherein the sigma-1 is a target point for treating central nervous system diseases, cocaine addiction, analgesia and the like, and the sigma-2 is a treatment target point for antitumor drugs.)

烷氧基异噁唑类衍生物及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及药物化学领域，涉及烷氧基异噁唑类衍生物及其制备方法与应用，尤其涉及 与sigma-1受体相关的中枢神经系统疾病的治疗和sigma-2受体相关的肿瘤疾病的治疗的烷氧 基异噁唑类衍生物及其制备方法与应用，具体涉及一类新型的具有sigma-1和sigma-2受体亲 和力的烷氧基异噁唑类衍生物及其制备方法与应用。

背景技术

Sigma-1受体(σ1受体)和sigma-2受体(σ2受体)均属于sigma受体家族，其最早于1976年被Martin等人发现。目前，sigma-1受体已经被克隆出来，由223个氨基酸构成，并 且位于线粒体相关的内质网膜上，在同物种间含有90％相同和95％相似的氨基酸序列。在2016 年，人源sigma-1受体蛋白晶体结构被首次报道，其蛋白晶体结构证明，sigma-1受体具有单 次跨膜结构。

近期，有文献报道了sigma-1受体能够作为一种分子伴侣参与调控线粒体相关内质网膜 上的信号通路，从而在正常的神经元细胞中发挥重要的生理学作用。其中，拥有较好的透膜 能力的sigma-1受体配体所具有的神经再生活性与其参与调控细胞生长和繁殖所必需的胆固 醇、神经酰胺和必需氨基酸的转移，以及增加特异性蛋白的基因表达和参与神经元生长的各 种生长因子的合成有着重要的关系。此外，有文献报道了，在sigma-1受体被敲除的动物的 海马体中，其神经再生功能受到抑制。有研究证明sigma-1受体激动剂能够通过促进神经元 突触生长的神经再生活性来增强认知能力。Ruscher等人的研究证明化合物SA4503(2)能够显 著促进大脑皮质神经元突触的生长，并且证明当sigma-1受体被敲除后该活性丧失。另有 sigma-1受体激动剂RC-33，它在细胞模型上有着明显的神经再生活性，同时在药物代谢动力 学实验中体现了良好体外代谢稳定性，经常被用来作为神经再生活性研究的阳性对照化合物。

根据这些研究发现，人们对sigma-1受体作为神经退行性疾病的治疗靶点的兴趣大大增 加。目前研究的烷氧基异噁唑类衍生物是研究最多的sigma-1受体配体，但目前大多sigma-1 受体配体透膜能力较低，较难透过血脑屏障起作用。同很多sigma-1受体配体的促神经再生 作用较弱。本发明中化合物酰胺键的加入能够增强该类化合物的透膜能力，增强该类药物透 过血脑屏障的能力，同时该类化合物中多数具有促神经再生能力，有利于神经退行性疾病的 治疗。

Sigma-2受体目前尚未克隆出来。相关药理实验显示sigma-2受体可能是影响钙信号通路 的脂筏蛋白鞘脂类物质。两种sigma亚型在人和大鼠肿瘤细胞中都高度表达，但是sigma-2 受体在肿瘤细胞中比在正常细胞中有更高的表达，故可作为肿瘤细胞增殖的生物标记物。 PB28作为sigma-2激动剂和sigma-1拮抗剂，能够通过减少经典抗肿瘤药的外排泵P-糖蛋白 的表达而增强现有化疗剂的细胞毒性。因此，sigma-2激动剂具有诱导细胞凋亡的能力，可作 为潜在的抗肿瘤药。

现有技术报道的化合物只有少部分为sigma-2受体配体，且抗肿瘤活性不明显。本发明 的烷氧基异噁唑类衍生物作为sigma-2受体配体，对sigma-2具有较好的亲和力且大部分化合 物具有抗肿瘤活性。

发明内容

本发明提供了一种烷氧基异噁唑类衍生物新化学实体，及其制备方法，所述烷氧基异噁 唑类衍生物是透膜能力更强的化合物，同时对N1E-115神经细胞进行体外实验，实验表明， 此类化合物具有良好的促神经再生作用，为该类化合物进入体内实验奠定基础，为神经退行 性疾病研究提供条件。

本发明提供的烷氧基异噁唑类衍生物及其药学上可接受的盐，其结构如下式(I)所示 (包括式(I)A～式(I)B)：

其中，

L为醚键、酰胺键、烷基，烷氧基，烷硫基，酯键，

R1为氢原子，烷基，烷氧基，烯基，炔基，环烷基；

R2为吡咯烷甲基、环烷基，也可与R1相同；

R3为苯环、含有一个或多个取代基的苯环、或饱和脂肪环；其中，所述取代基为烷基， 烷氧基，卤素，氨基，硝基，羟基，巯基，氰基，或三氟甲基；所述饱和脂肪环为金刚烷环，五元环，六元环，或七元环；

R4为含有3-6个碳原子的氨基。

优选地，L为醚键C₁-C₃酰胺键、C₁-C₃烷基，C₁-C₃烷氧基，C₁-C₃烷硫基，C₁-C₃酯键，

R₁为氢原子，C₁-C₈烷基，C₂-C₈烷氧基，C₂-C₈的烯基，C₂-C₈的炔基，C₃-C₈的环烷基；

R₂为吡咯烷甲基、C₃-C₈的环烷基，也可与R₁相同；

R₃为苯环、含有一个或多个取代基的苯环、或由4-10个碳原子所构成的饱和脂肪环；其 中，所述取代基为C₁-C₆烷基，C₁-C₆烷氧基，卤素，氨基，硝基，羟基，巯基，氰基，或三氟甲基；所述饱和脂肪环为金刚烷环，五元环，六元环，或七元环；

R₄为含有3-6个碳原子的氨基。

进一步优选地，L为醚键酰胺键C₁-C₃烷基，C₁-C₃烷氧基，C₁-C₃烷硫基，C₁-C₃酯键，

R₁为氢原子、甲基、C₂-C₈烷氧基、C₂-C₈的烯基、C₂-C₈的炔基、C₃-C₈的环烷基；

R₂为吡咯烷甲基、环丙甲基、环丁基、环戊基、环己基，也可与R₁相同；

R₃为选自以下结构之一：

苯基、4-氯苯基、3-氯苯基、4-氟苯基、3-氟苯基、4-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、3-甲 基苯基、4-三氟甲基苯基、3-三氟甲基苯基、3，5-二三氟甲基苯基、3，5-二氟苯基、3-氯-4- 氟苯基、4-氯-3-氟苯基、3，5-二氯苯基、3，4-二氯苯基、环己基。

R₄为含有3-6个碳原子的氨基。

进一步优选地，

L选自醚键酰胺键

R₁选自氢原子、甲基；

R₂选自吡咯烷甲基，环丙甲基，环丁基，环戊基，环己基；

R₃选自苯基、4-氯苯基、3-氯苯基、4-氟苯基、3-氟苯基、4-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、 3-甲基苯基、3-三氟甲基苯基、4-三氟甲基苯基、3,5-二三氟甲基苯基、3,5-二氟苯基、3-氯 -4-氟苯基、4-氯-3-氟苯基、3,5-二氯苯基、3,4-二氯苯基、环己基；

R₄选自6-己氨基，5-戊氨基，4-丁氨基，3-丙氨基。

具体地，本发明提供的烷氧基异噁唑类衍生物及其药学上可接受的盐包括以下化合物 (1)～(36)：

(1)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-苯基异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐

(2)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(4-氯苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐

(3)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3-氯苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐

(4)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(4-氟苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐

(5)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3-氟苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐

(6)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(4-甲氧基苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐

(7)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3-甲氧基苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐

(8)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3-三氟甲基苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐

(9)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3-甲基苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐

(10)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3,5-二氯苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐

(11)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3,5-二氟苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐

(12)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3-氯-4-氟苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐

(13)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(4-氯-3-氟苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐

(14)3-(2-((环丙基甲基)(甲基)氨基)乙氧基)-N-苯基异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐

(15)3-(2-(环己基(甲基)氨基)乙氧基)-N-苯基异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐

(16)3-(2-(环己基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(4-氟苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐

(17)3-(2-(环戊基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3-氟苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐

(18)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-环己基异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐

(19)3-(2-(环丁基氨基)乙氧基)-N-苯基异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐

(20)3-(2-(环戊基氨基)乙氧基)-N-苯基异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐

(21)3-(2-(环己基氨基)乙氧基)-N-苯基异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐

(22)3-(2-(环丁基氨基)乙氧基)-N-(3-氯苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐

(23)N-(2-((5-(苯氧基甲基)异噁唑-3-基)氧基)乙基)环戊胺盐酸盐

(24)N-(2-((5-(苯氧基甲基)异噁唑-3-基)氧基)乙基)环己胺盐酸盐

(25)(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-(苯氧基甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-氯化物

(26)(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-((3-氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-氯 化物

(27)(2S)-1-(4-氨基丁基)-2-(((5-((3-氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-氯 化物

(28)(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-((3,4-二氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷 -1-氯化物

(29)(2S)-1-(5-氨基戊基)-2-(((5-((3,4-二氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷 -1-氯化物

(30)(2S)-1-(4-氨基丁基)-2-(((5-((3,4-二氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-氯化物

(31)(2S)-1-(3-氨基丙基)-2-(((5-((3,4-二氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷 -1-氯化物

(32)(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-((3,5-二氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷 -1-氯化物

(33)(2S)-1-(4-氨基丁基)-2-(((5-((3,5-二氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷 -1-氯化物

(34)(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-((3-(三氟甲基)苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡 咯烷-1-氯化物

(35)(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-((4-(三氟甲基)苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡 咯烷-1-氯化物

(36)(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-((3,5-双(三氟甲基)苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基) 吡咯烷-1-氯化物。

本发明还提供了烷氧基异噁唑类衍生物的制备方法，包括以下步骤：Ⅰ为原料经DBU作 用于N-羟基脲反应得到化合物Ⅱ；化合物Ⅱ与N-Boc-N-甲基氨基乙醇、N-Boc-N-氨基乙醇 或N-Boc-D-脯氨醇发生Mitsunobu反应得到化合物Ⅲ、Ⅶ和ⅩⅡ，脱酯得到化合物Ⅷ和Ⅹ， 还原得到化合物Ⅳ和ⅩⅢ；化合物Ⅷ和化合物Ⅹ与苯胺及取代苯胺或环己胺经过缩合反应得 到含R3的化合物Ⅸ和ⅩⅠ，化合物Ⅳ和ⅩⅢ碘代之后得到化合物Ⅴ和ⅩⅣ，化合物Ⅴ和ⅩⅣ 与酚及取代苯酚反应得到化合物Ⅵ和ⅩⅤ，化合物Ⅵ、Ⅸ、ⅩⅠ脱Boc后与环丙甲基或环丁 基或环戊基或环己基经过还原胺化后成盐反应得到最终化合物；ⅩⅤ脱Boc后与对应碘代烷 基胺反应得到最终化合物；具体包括以下路线(1)～(4)：

本发明化合物(23)～(24)的合成路线如路线(1)所示：其中，路线(1)中所有基团的定义与所 述结构通式(I)中的定义相同。

本发明化合物(1)～(18)的合成路线如路线(2)所示：其中，路线(2)中所有基团的定义与所 述结构通式(I)中的定义相同。

本发明化合物(19)～(22)的合成路线如路线(3)所示：其中，路线(3)中所有基团的定义与所 述结构通式(I)中的定义相同。

本发明化合物(25)～(36)的合成路线如路线(4)所示：其中，路线(4)中所有基团的定义与所 述结构通式(I)中的定义相同。

上述路线(1)～(4)合成过程中所涉及的反应试剂和反应条件为：

1.N-羟基脲，DBU，甲醇，0℃至室温；

2.N-Boc-N-甲基氨基乙醇或N-Boc-N-氨基乙醇，三苯基膦，DIAD，THF，0℃至室温；

3.硼氢化锂，THF，0℃至室温；

4.碘，三苯基膦，咪唑，DCM；

5.碳酸钾，DMF；

6.a:三乙胺，环丁酮或环戊酮，氰基硼氢化钠，冰醋酸，甲醇，室温；b:HCl，EA，室温；

7.氢氧化钠，水，THF，室温；

8.a:苯胺、苯胺衍生物或环己胺，HATU，DIPEA，DMF，0℃至室温；或，苯胺、苯胺 衍生物或环己胺，EDC，HOBt，3-甲基吡啶，DCM，室温；b:HCl，EA，室温。

本发明还提出了式(I)所示烷氧基异噁唑类衍生物在制备sigma受体的配体中的应用。 其中，所述sigma受体包括sigma-1受体(σ1受体)和sigma-2受体(σ2受体)。

本发明还提出了式(I)所示烷氧基异噁唑类衍生物在制备促进神经再生活性的药物中的 应用。

本发明还提出了式(I)所示烷氧基异噁唑类衍生物在提高药物透膜中的应用。

其中，所述药物是指sigma受体配体及其他治疗神经系统药物。

本发明还提出了式(I)所示烷氧基异噁唑类衍生物在制备预防和/或治疗神经系统相关疾 病的药物中的应用。

其中，所述神经系统相关疾病包括药物成瘾、认知功能障碍、记忆衰退、抑郁症及神经 退行性系统疾病。

本发明还提出了式(I)所示烷氧基异噁唑类衍生物在制备预防和/或治疗中枢神经系统疾 病的药物中的应用。

其中，所述中枢神经系统疾病包括精神分裂、抑郁症、记忆衰退、认知功能障碍。

本发明还提出了式(I)所示烷氧基异噁唑类化合物在制备预防和/或治疗神经退行性疾病 的药物中的应用。

其中，所述神经退行性疾病包括阿尔茨海默病(AD)，帕金森病(PD)，多发性硬化症(MS)， 亨廷顿病(HD)，肌萎缩侧索硬化症(ALS)，不同类型脊髓小脑共济失调(SCA)，脑缺血(CI)， 脑损伤(BI)，癫痫等。

本发明所述式(I)所示烷氧基异噁唑类化合物在平行人工膜渗透模型(PAMPA)上具有 较高的透膜能力(6.4×10^-6cm/s≤Pe≤14.4×10^-6cm/s)。

本发明所述式(I)所示烷氧基异噁唑类化合物在NIE-115神经细胞轴突生长模型上具有 较好的促神经再生活性(神经突触长度50-86μm)。

本发明还提出了式(I)所示烷氧基异噁唑类衍生物在制备抗肿瘤活性药物中的应用，所 述烷氧基异噁唑类衍生物用于抑制肿瘤细胞的增殖、迁移、浸润，促进肿瘤细胞的凋亡。

其中，所述肿瘤包括骨肉瘤、乳腺癌、胰腺癌、黑色素瘤、神经母细胞瘤、肝癌、前列腺癌；优选地，为骨肉瘤。进一步优选地，所述肿瘤细胞为人骨肉瘤143B细胞。

本发明还提出了一种药物组合物，所述药物组合物包括如式(I)所示烷氧基异噁唑类衍 生物及其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体。

其中，所述药物组合物可制备成片剂、胶囊、丸剂、注射剂、冲剂等。

本发明的有益效果在于，本发明通过合理药物设计，并针对其药理作用进行结构优化， 得到了式(I)所示的一系列烷氧基异噁唑类化合物。所述烷氧基异噁唑类化合物是一类结构 新颖，具有高透膜能力和促神经再生活性的sigma受体配体。由于sigma-1受体为潜在的用于 治疗神经退行性疾病等的靶点，sigma-2受体配体是潜在用于治疗肿瘤的靶点。因此，式(I) 所示的烷氧基异噁唑类化合物可以有望开发成为治疗神经退行性疾病和抗肿瘤活性的新化学 实体。

具体实施方式

结合以下具体实施例，对本发明做进一步的详细说明。实施本发明的过程、条件、实验 方法等，除以下专门提及的内容之外，均为本领域的普通知识和公知常识，本发明没有特别 限制内容。

实施例(1)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-苯基异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐的制备

1.1 3-羟基异噁唑-5-羧酸甲酯的制备

在250mL三颈瓶中加入化合物羟基脲(7.6g,100mmol)，DBU(16.7g,110mmol)。体系冷却至0℃时，加入50mL溶剂甲醇。在氮气保护的条件下缓慢滴加化合物丁炔二酸二甲酯，滴加完毕后体系呈橙黄色，并在冰浴条件下搅拌1h。1h后撤离去冰浴，缓慢升至室温搅拌反应过夜。反应结束后，真空旋干溶剂，加入20mL水溶解，用盐酸调至pH 1。体系用乙酸 乙酯萃取(3*30mL)，无水Na₂SO₄干燥。旋干乙酸乙酯，得到的粗产品用40mL氯仿重结晶， 得最终产物3-羟基异噁唑-5-羧酸甲酯(5.7g,39.8％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.88(s,1H),6.73(s,1H),3.85(s,3H).¹³C NMR(101MHz,DMSO)δ170.5,159.3,156.7,101.1,52.7.

1.2 3-(2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)乙氧基)异噁唑-5-羧酸甲酯的制备

在250mL三颈瓶中加入1.1制备的化合物3-羟基异噁唑-5-羧酸甲酯(117mg,1.2mmol)， N-Boc-N-甲基氨基乙醇(175mg,1mmol)，三苯基膦(323mg,1.2mmol)以及30mL无水THF， 氮气保护冰浴条件下搅拌，向体系中逐滴加入0.24mL DIAD，滴加结束之后，体系呈棕黄色， 撤去冰浴升至室温，反应搅拌过夜。反应结束后，旋干溶剂，加入30mL乙酸乙酯溶解，水 洗涤有机相后用饱和食盐水洗涤，无水Na₂SO₄干燥。旋干乙酸乙酯，粗产品经快速柱层析得 到最终产物(190mg，77.2％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ6.49(s,1H),4.36(m,2H),3.90(s, 3H),3.58(m,2H),2.89(s,3H),1.40(s,9H).

1.3 3-(2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)乙氧基)异噁唑-5-羧酸的制备

在100mL圆底烧瓶中加入1.2制备的化合物3-(2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)乙氧基)异 噁唑-5-羧酸甲酯(300mg，1mmol)以及30mL THF：H₂O为1：1的溶剂，氮气保护下搅拌溶 解后，加入NaOH(120mg,3mmol)，体系呈黄色，室温搅拌4h后，旋干THF，乙酸乙酯萃取，水洗涤有机相后用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。旋干溶剂，得最终产物(280mg，98％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.48(s,1H),6.55(s,1H),4.40(t,J＝4.60Hz,2H),3.63(m,2H),2.94(s,3H),1.44(s,9H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ171.2,161.0,157.8,156.3,100.7,80.9,68.4,47.9,35.3,28.3,14.0.

1.4 3-(2-(甲基氨基)乙氧基)-N-苯基异噁唑-5-甲酰胺的制备

在250mL三颈瓶中加入1.3制备的化合物3-(2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)乙氧基)异噁 唑-5-羧酸(280mg，1mmol)和HATU(1.5g，4mmol)以及35mL DMF，氮气保护下搅拌溶解。 0℃条件下，缓慢滴加DIPEA(1mL，5mmol)搅拌10min后升至室温，反应搅拌过夜。反应结束后，体系中加水，用乙酸乙酯萃取，水洗，1N稀盐酸洗涤后用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。旋干乙酸乙酯，粗产品经快速柱层析得到化合物后，加入30mL盐酸乙酸乙酯搅拌过夜，旋干乙酸乙酯，无水乙醚打浆过滤得到最终化合物(160mg，55％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ10.83(s,1H),9.08(s,2H),7.77(d,J＝8.00Hz,2H),7.37(t,J＝7.800Hz,2H),7.19 (s,1H),7.15(t,J＝7.60Hz,1H),4.54(t,J＝4.80Hz,2H),3.36(m,2H),2.61(s,3H).¹³C NMR (101MHz,DMSO)δ170.9,163.9,153.8,137.7,128.7,124.6,120.7,98.1,65.8,46.9,32.7.

1.5 3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-苯基异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐的制备

在100mL圆底烧瓶中加入1.4制备的化合物3-(2-(甲基氨基)乙氧基)-N-苯基异噁唑-5-甲 酰胺(50mg，0.2mmol)和等当量的三乙胺以及20mL无水甲醇，搅拌10min后，加入环丁酮 (0.04mL，0.6mmol)，5倍当量的氰基硼氢化钠以及催化当量的冰醋酸，氮气保护下室温反应 过夜，反应结束后旋干溶剂，经快速柱层析得化合物3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-苯基 异噁唑-5-甲酰胺(40mg，66％)，加入10mL盐酸乙酸乙酯搅拌过夜，旋干乙酸乙酯，无水乙 醚打浆过滤得到最终化合物3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-苯基异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐。 ¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.15(s,1H),7.63(d,J＝8.00Hz,2H),7.38(t,J＝7.80Hz,2H), 7.19(t,J＝7.40Hz,1H),6.65(s,1H),4.38(t,J＝5.60Hz,2H),2.89(m,1H),2.71(t,J＝5.60Hz, 2H),2.21(s,3H),2.05(m,2H),1.90(m,2H),1.67(m,2H).¹³CNMR(101MHz,CDCl₃)δ172.2, 163.4,153.5,136.4,129.2,125.4,120.2,99.4,68.2,60.5,52.4,38.6,27.7,13.8.HRMS(ESI)：calcd for C₁₇H₂₂N₃O₃[M+H]⁺,316.1656；found,316.1682.

实施例(2)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(4-氯苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐的制备

将苯胺替换为4-氯苯胺，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(1)相同，得最终产 物3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(4-氯苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐。¹HNMR(400MHz, CDCl₃)δ8.12(s,1H),7.59(d,J＝8.80Hz,2H),7.35(d,J＝8.40Hz,2H),6.65(s,1H),4.37(t,J＝ 5.60Hz,2H),2.88(m,1H),2.70(t,J＝5.60Hz,2H),2.21(s,3H),2.12–1.98(m,2H),1.96–1.81 (m,2H),1.73-1.64(m,2H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ172.2,163.0,153.4,135.0,130.6,129.3, 121.4,99.6,68.4,60.5,52.5,38.6,27.8,13.9.HRMS(ESI)：calcd for C₁₇H₂₁ClN₃O₃[M+H]⁺, 350.1266；found,350.1292.

实施例(3)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3-氯苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐的制备

将苯胺替换为3-氯苯胺，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(1)相同，得最终产 物3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3-氯苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐。¹HNMR(400MHz, CDCl₃)δ8.23(s,1H),7.76(s,1H),7.48(d,J＝8.40Hz,1H),7.29(t,J＝8.20Hz,1H),7.16(d,J＝ 8.00Hz,1H),6.65(s,1H),4.37(t,J＝5.80Hz,2H),2.89(m,1H),2.70(t,J＝5.60Hz,2H),2.20(s, 3H),2.04(m,2H),1.89(m,2H),1.66(m,2H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ172.2,163.0,153.5, 137.6,134.9,130.2,125.5,120.4,118.2,99.7,68.4,60.5,52.5,38.6,27.7,13.9.HRMS(ESI)：calcd for C₁₇H₂₁ClN₃O₃[M+H]⁺,350.1266；found,350.1279.

实施例(4)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(4-氟苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐的制备

将苯胺替换为4-氟苯胺，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(1)相同，得最终产 物3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(4-氟苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐。¹HNMR(400MHz, DMSO-d₆)δ10.94(s,1H),7.80(m,2H),7.30–7.15(m,3H),4.63(m,2H),3.86–3.69(m,1H), 3.46(m,1H),3.35(m,1H),2.69(s,3H),2.30(m,2H),2.22–2.11(m,2H),1.69(m,2H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d₆)δ170.8,163.8,158.8(d,J＝243.4Hz),153.8,134.0(d,J＝3.0Hz), 122.6(d,J＝8.1Hz),115.4(d,J＝23.2Hz),98.3,64.6,50.8,36.6,25.5,25.0,12.6. HRMS(ESI)：calcd for C₁₇H₂₁FN₃O₃[M+H]⁺,334.1561；found,334.1589.

实施例(5)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3-氟苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐的制备

将苯胺替换为3-氟苯胺，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(1)相同，得最终产 物3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3-氟苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐。¹HNMR(400MHz, DMSO-d₆)δ11.14(s,2H),7.75(d,J＝11.20Hz,1H),7.64(d,J＝8.40Hz,1H),7.40(m,1H),7.33 (s,1H),6.99(t,J＝8.20Hz,1H),4.64(m,2H),3.76(m,1H),3.47(m,1H),3.37(m,1H),2.68(s, 3H),2.33(m,2H),2.17(m,2H),1.68(m,2H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d₆)δ170.7,163.5, 161.9(d,J＝242.4Hz),154.0,139.4(d,J＝10.1Hz),130.4(d,J＝9.1Hz),116.40(d,J＝3.0Hz), 111.1(d,J＝20.2Hz),107.4(d,J＝26.3Hz),98.6,64.6,58.7,50.7,36.6,25.5,24.9,12.7. HRMS(ESI)：calcd for C₁₇H₂₁FN₃O₃[M+H]⁺,334.1561；found,334.1586.

实施例(6)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(4-甲氧基苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐的 制备

将苯胺替换为4-甲氧基苯胺，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(1)相同，得最 终产物3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(4-甲氧基苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐。¹H NMR (400MHz,DMSO-d₆)δ11.20(s,1H),10.71(s,1H),7.67(d,J＝7.20Hz,2H),7.14(s,1H),6.92 (d,J＝8.80Hz,2H),4.62(m,2H),3.72(s,3H),3.46(m,1H),3.40(m,2H),2.67(s,3H),2.40– 2.27(m,2H),2.23–2.08(m,2H),1.67(m,2H).¹³C NMR(101MHz,DMSO)δ170.7,164.1, 156.1,153.5,130.6,122.2,113.8,97.9,64.6,58.7,55.2,50.7,36.6,25.5,24.9,12.6.HRMS(ESI)： calcd for C₁₈H₂₄N₃O₄[M+H]⁺,346.1761；found,346.1786.

实施例(7)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3-甲氧基苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐的 制备

将苯胺替换为3-甲氧基苯胺，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(1)相同，得最 终产物3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3-甲氧基苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐。¹H NMR (400MHz,DMSO-d₆)δ10.99(s,1H),10.81(s,1H),7.44(s,1H),7.38(m,1H),7.26(m,1H),7.21 (m,1H),6.71(m,1H),4.62(m,2H),3.73(s,3H),3.47(m,1H),3.35(m,2H),2.68(s,3H),2.40– 2.25(m,2H),2.23–2.08(m,2H),1.68(m,2H).¹³C NMR(101MHz,DMSO)δ170.7,163.8, 159.4,153.8,138.8,129.6,112.8,110.1,106.5,98.2,64.6,58.8,55.0,50.8,36.6,25.5,25.0,12.6. HRMS(ESI)：calcd for C₁₈H₂₄N₃O₄[M+H]⁺,346.1761；found,346.1786.

实施例(8)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3-三氟甲基苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐 的制备

在100mL圆底烧瓶中加入1.3制备的化合物3-(2-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)乙氧基)异 噁唑-5-羧酸(350mg，1.22mmol)，3-三氟甲基苯胺(196.6mg，1.22mmol)，EDC(304.8mg， 1.59mmol)，HOBt(214.8mg，1.59mmol)以及3-甲基吡啶(0.17mL，1.71mmol)以及25mLDCM， 氮气保护下室温反应搅拌过夜。反应结束后，旋干溶剂，乙酸乙酯溶解，水洗，1N稀盐酸洗 涤，饱和碳酸氢钠溶液洗涤后用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥。旋干乙酸乙酯，粗产品 经快速柱层析得到化合物后，加入30mL盐酸乙酸乙酯搅拌过夜，旋干乙酸乙酯，无水乙醚 打浆过滤得到化合物3-(2-(甲基氨基)乙氧基)-N-(3-三氟甲基苯基)异噁唑-5-甲酰胺。其余所需 原料，试剂以及制备方法与实施例1.5相同，得到最终产物3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧 基)-N-(3-三氟甲基苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.55(s,1H),7.94 (s,1H),7.81(d,J＝8.00Hz,1H),7.45(t,J＝7.80Hz,1H),7.40(d,J＝7.60Hz,1H),6.63(s,1H), 4.31(t,J＝5.60Hz,2H),2.82(m,1H),2.65(t,J＝5.40Hz,2H),2.15(s,3H),2.06–1.95(m,2H), 1.91–1.78(m,2H),1.68-1.55(m,2H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ172.1,162.9,153.8,137.1, 131.6(q,J＝33.0Hz),129.7,123.7(q,J＝273.7Hz),123.4,121.9(q,J＝3.7Hz),117.1(q,J＝ 3.7Hz),99.7,68.3,60.5,52.4,38.5,27.7,13.8.HRMS(ESI)：calcd for C₁₈H₂₁F₃N₃O₃[M+H]⁺, 384.1530；found,384.1549.

实施例(9)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3-甲基苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐的制 备

将3-三氟甲基苯胺替换为3-甲基苯胺，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(8) 相同，得最终产物3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3-甲基苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐。 ¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.23(s,1H),7.44(s,1H),7.40(d,J＝8.40Hz,1H),7.22(t,J＝7.80 Hz,1H),6.97(d,J＝7.20Hz,1H),6.61(s,1H),4.33(t,J＝5.40Hz,2H),2.89–2.79(m,1H),2.66 (t,J＝5.40Hz,2H),2.33(s,3H),2.17(s,3H),2.07–1.97(m,2H),1.94–1.79(m,2H),1.73– 1.54(m,2H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ172.1,163.5,153.5,139.2,136.4,129.0,126.2,120.9, 117.4,99.3,68.2,60.5,52.5,38.6,27.8,21.5,13.8.HRMS(ESI)：calcd for C₁₈H₂₄N₃O₃[M+H]⁺, 330.1812；found,330.1829.

实施例(10)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3,5-二氯苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐的 制备

将3-三氟甲基苯胺替换为3,5-二氯苯胺，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(8) 相同，得最终产物3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3,5-二氯苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐。 ¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.49(s,1H),7.61(s,2H),7.14(s,1H),6.64(s,1H),4.32(t,J＝5.40 Hz,3H),2.91–2.77(m,1H),2.66(t,J＝5.40Hz,3H),2.16(s,3H),2.07–1.96(m,3H),1.94– 1.78(m,2H),1.73–1.54(m,2H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ172.1,162.6,153.7,138.3,135.4, 125.3,118.6,99.9,68.3,60.5,52.4,38.6,27.7,13.8.HRMS(ESI)：calcd for C₁₇H₂₀Cl₂N₃O₃[M+H]⁺, 384.0876；found,384.0905.

实施例(11)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3,5-二氟苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐的 制备

将3-三氟甲基苯胺替换为3,5-二氟苯胺，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(8) 相同，得最终产物3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3,5-二氟苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐。 ¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.68(s,1H),7.31(s,2H),6.67(s,1H),6.64(s,1H),4.43–4.30(m, 2H),2.97–2.84(m,1H),2.77–2.69(m,2H),2.23(s,3H),2.11–2.01(m,2H),1.96–1.85(m, 2H),1.76–1.61(m,2H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ172.0,163.1(dd,J＝248.0,14.6Hz), 162.7,153.8,138.7(t,J＝13.1Hz),103.5(dd,J＝21.2,9.09Hz),100.6(t,J＝25.8Hz),99.7, 68.1,60.5,52.4,38.5,27.6,13.8.HRMS(ESI)：calcd forC₁₇H₂₀F₂N₃O₃[M+H]⁺,352.1467； found,352.1493.

实施例(12)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3-氯-4-氟苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐 的制备

将3-三氟甲基苯胺替换为3-氯-4-氟苯胺，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(8) 相同，得最终产物3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3-氯-4-氟苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐。 ¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.24(s,1H),11.16(s,1H),8.13–8.08(m,1H),7.85–7.77(m, 1H),7.47–7.40(m,1H),7.36(s,1H),4.71–4.57(m,2H),3.85–3.65(m,1H),3.53–3.38(m, 2H),2.68(s,3H),2.41–2.25(m,2H),2.23–2.09(m,2H),1.79–1.57(m,2H).13C NMR(101 MHz,DMSO-d6)δ170.7,163.3,153.9,153.8(d,J＝245.4Hz),135.0(d,J＝3.0Hz),122.2, 121.1(d,J＝7.1Hz),119.1(d,J＝18.2Hz),116.9(d,J＝22.2Hz),98.7,64.6,58.7,50.7,36.6, 25.5,24.9,12.7.HRMS(ESI)：calcd for C₁₇H₂₀ClFN₃O₃[M+H]⁺,368.1172；found,368.1198.

实施例(13)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(4-氯-3-氟苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐 的制备

将3-三氟甲基苯胺替换为4-氯-3-氟苯胺，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(8) 相同，得最终产物3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(4-氯-3-氟苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐。 ¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.37(s,1H),7.81(d,J＝6.00Hz,1H),7.45(d,J＝8.80Hz,1H), 7.11(t,J＝8.60Hz,1H),6.63(s,1H),4.33(t,J＝5.40Hz,2H),2.95–2.80(m,1H),2.68(t,J＝ 5.40Hz,2H),2.18(s,3H),2.09–1.95(m,2H),1.93–1.79(m,2H),1.71–1.55(m,2H).¹³C NMR (101MHz,CDCl₃)δ172.1,162.8,155.4(d,J＝248.8Hz),153.6,133.1(d,J＝3.4Hz),122.6, 121.4(d,J＝18.8Hz),120.1(d,J＝7.0Hz),116.9(d,J＝22.4Hz),99.7,68.2,60.5,52.4,38.6, 27.7,13.8.HRMS(ESI)：calcd for C₁₇H₂₁ClFN₃O₃[M+H]⁺,368.1172；found,368.1195.

实施例(14)3-(2-((环丙基甲基)(甲基)氨基)乙氧基)-N-苯基异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐的制 备

将环丁酮替换为环丙甲醛，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(1)相同，得最终 产物3-(2-((环丙基甲基)(甲基)氨基)乙氧基)-N-苯基异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐。¹H NMR(400 MHz,CDCl₃)δ8.22(s,1H),7.62(d,J＝7.60Hz,2H),7.37(t,J＝7.40Hz,2H),7.18(t,J＝7.00 Hz,1H),6.64(s,1H),4.40(t,J＝4.80Hz,2H),2.81(m,2H),2.40(s,3H),2.36(d,J＝6.40Hz, 2H),0.92–0.83(m,1H),0.54-0.51(m,2H),0.15–0.08(m,2H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ172.2,163.4,153.5,136.5,129.2,125.4,120.2,99.4,68.3,62.9,55.5,42.7,29.7,8.6,4.0. HRMS(ESI)：calcd for C₁₇H₂₂N₃O₃[M+H]⁺,316.1656；found,316.1682.

实施例(15)3-(2-(环己基(甲基)氨基)乙氧基)-N-苯基异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐的制备

将环丁酮替换为环己酮，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(1)相同，得最终产 物3-(2-(环己基(甲基)氨基)乙氧基)-N-苯基异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐。¹H NMR(400MHz,CDCl₃) δ8.55(s,1H),7.64(d,J＝8.00Hz,2H),7.36(t,J＝7.80Hz,2H),7.18(t,J＝7.60Hz,1H),6.72(s, 1H),4.48(t,J＝5.40Hz,2H),3.12(t,J＝5.40Hz,2H),2.71(m,1H),2.08–1.99(m,2H),1.85(m, 2H),1.84(m,2H),1.67(m,2H),1.50–1.40(m,2H).¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ172.1,163.5, 153.5,136.5,129.2,125.4,120.2,99.2,68.6,63.5,51.7,38.5,28.4,26.1,25.8.HRMS(ESI)：calcd for C₁₉H₂₆N₃O₃[M+H]⁺,344.1969；found,344.1987.

实施例(16)3-(2-(环己基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(4-氟苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐的制 备

将苯胺替换为4-氟苯胺，将环丁酮替换为环己酮，其余所需原料，试剂以及制备方法与 实施例(1)相同，得最终产物3-(2-(环己基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(4-氟苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐 酸盐。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ10.96(s,1H),10.55(s,1H),7.81(m,2H),7.23(s,1H), 7.20(d,J＝8.80Hz,2H),4.65(m,2H),3.63(m,1H),3.52–3.38(m,1H),3.25(m,1H),2.75(d,J ＝4.40Hz,3H),2.07(m,1H),2.01(m,1H),1.80(m,2H),1.59(m,1H),1.41(m,2H),1.26(m,2H), 1.09(m,1H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d₆)δ170.8,163.8,158.8(d,J＝243.4Hz),153.8, 134.0,122.6(d,J＝8.1Hz),115.4(d,J＝22.2Hz),98.3,64.6(d,J＝108.1Hz),50.8,36.5,26.2, 25.2,24.6,24.4,24.3.HRMS(ESI)：calcd for C₁₉H₂₅FN₃O₃[M+H]⁺,362.1874；found,362.1895.

实施例(17)3-(2-(环戊基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3-氟苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐的制 备

将苯胺替换为3-氟苯胺，将环丁酮替换为环戊酮，其余所需原料，试剂以及制备方法与 实施例(1)相同，得最终产物3-(2-(环戊基(甲基)氨基)乙氧基)-N-(3-氟苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐 酸盐。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.15(s,1H),10.88(s,1H),7.75(d,J＝11.60Hz,1H), 7.64(d,J＝8.40Hz,1H),7.40(m,1H),7.34(s,1H),6.99(t,J＝8.20Hz,1H),4.73–4.61(m,2H), 3.75–3.56(m,2H),3.47(m,1H),2.80(s,3H),2.07–1.93(m,2H),1.84–1.63(m,4H),1.53(m, 2H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d₆)δ170.8,163.3(d,J＝39.4Hz),160.7,154.0,139.4(d,J＝ 12.1Hz),130.4(d,J＝9.1Hz),116.4(d,J＝2.0Hz),111.1(d,J＝21.2Hz),107.4(d,J＝26.3Hz), 98.6,66.5,64.8,52.6,38.3,27.7,27.3,23.6.HRMS(ESI)：calcd for C₁₈H₂₃FN₃O₃[M+H]⁺, 348.1718；found,348.1745.

实施例(18)3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-环己基异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐的制备

将苯胺替换为环己胺，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(1)相同，得最终产物 3-(2-(环丁基(甲基)氨基)乙氧基)-N-环己基异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐。¹H NMR(400MHz,CDCl₃) δ6.51(s,1H),6.37–6.29(m,1H),4.33(t,J＝5.60Hz,2H),3.91(m,1H),2.86(m,1H),2.68(t,J ＝5.40Hz,2H),2.19(s,3H),2.04(m,2H),1.98(m,2H),1.94–1.81(m,2H),1.80–1.72(m,2H), 1.71–1.63(m,2H),1.43(m,2H),1.27m,2H),1.19(m,2H).¹³CNMR(101MHz,CDCl₃)δ172.1, 163.8,154.9,98.5,68.1,60.5,52.5,48.4,38.6,32.8,29.7,27.8,25.4,24.7,13.8.HRMS(ESI)：calcd for C₁₇H₂₈N₃O₃[M+H]⁺,322.2125；found,322.2143.

实施例(19)3-(2-(环丁基氨基)乙氧基)-N-苯基异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐的制备

将N-Boc-N-甲基氨基乙醇替换为N-Boc-N-氨基乙醇，其余所需原料，试剂以及制备方法 与实施例(1)相同，得最终产物3-(2-(环丁基氨基)乙氧基)-N-苯基异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆+MeOD)δ10.68(s,1H),7.73(d,J＝8.00Hz,2H),7.34(t,J＝7.60Hz, 2H),7.13(t,J＝7.20Hz,1H),7.06(s,1H),4.52–4.47(m,2H),3.81–3.68(m,1H),3.30–3.22 (m,2H),2.23–2.12(m,4H),1.86–1.70(m,2H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d₆+MeOD)δ 170.8,163.9,153.7,137.4,128.6,124.6,120.5,97.9,65.7,51.0,43.0,25.6,14.2.HRMS(ESI)： calcd for C₁₆H₂₀N₃O₃[M+H]⁺,302.1499；found,302.1512.

实施例(20)3-(2-(环戊基氨基)乙氧基)-N-苯基异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐的制备

将N-Boc-N-甲基氨基乙醇替换为N-Boc-N-氨基乙醇，将环丁酮替换为环戊酮，其余所需 原料，试剂以及制备方法与实施例(1)相同，得最终产物3-(2-(环戊基氨基)乙氧基)-N-苯基异 噁唑-5-甲酰胺盐酸盐。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ10.86(s,1H),9.22(s,2H),7.78(d,J＝ 8.00Hz,2H),7.37(t,J＝7.80Hz,2H),7.22(s,1H),7.15(t,J＝7.20Hz,1H),4.59–4.54(m,2H), 3.59–3.48(m,1H),3.38(s,2H),2.01–1.92(m,2H),1.71-1.63(m,4H),1.58–1.48(m,2H).¹³C NMR(101MHz,DMSO-d₆)δ170.9,163.9,153.8,137.6,128.7,124.7,120.7,98.1,66.0,58.6, 44.6,29.0,23.6.HRMS(ESI)：calcd for C₁₇H₂₂N₃O₃[M+H]⁺,316.1656；found,316.1671.

实施例(21)3-(2-(环己基氨基)乙氧基)-N-苯基异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐的制备

将N-Boc-N-甲基氨基乙醇替换为N-Boc-N-氨基乙醇，将环丁酮替换为环己酮，其余所需 原料，试剂以及制备方法与实施例(1)相同，得最终产物3-(2-(环己基氨基)乙氧基)-N-苯基异 噁唑-5-甲酰胺盐酸盐。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ10.82(s,1H),9.00(s,2H),7.77(d,J＝ 8.00Hz,2H),7.37(t,J＝7.80Hz,2H),7.19(s,1H),7.15(m,1H),4.55(m,2H),3.39(m,2H),3.05 (s,1H),2.05(m,2H),1.76(m,2H),1.60(m,1H),1.32(m,3H),1.12(m,2H).¹³C NMR(101MHz, DMSO-d₆)δ170.9,163.9,153.8,137.6,128.7,124.7,120.7,98.1,66.1,56.4,52.0,42.6,28.7,28.4, 24.7,23.9.HRMS(ESI)：calcd for C₁₈H₂₄N₃O₃[M+H]⁺,330.1812；found,330.184.

实施例(22)3-(2-(环丁基氨基)乙氧基)-N-(3-氯苯基)异噁唑-5-甲酰胺盐酸盐的制备

将N-Boc-N-甲基氨基乙醇替换为N-Boc-N-氨基乙醇，将苯胺替换3-氯苯胺，其余所需 原料，试剂以及制备方法与实施例(1)相同，得最终产物3-(2-(环己基氨基)乙氧基)-N-苯基异 噁唑-5-甲酰胺盐酸盐。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.55(s,1H),7.76(s,1H),7.50(d,J＝8.00 Hz,1H),7.29(t,J＝8.00Hz,1H),7.16(d,J＝8.00Hz,1H),6.64(s,1H),4.35(t,J＝5.00Hz,2H), 3.35–3.25(m,1H),2.96(t,J＝5.00Hz,2H),2.29–2.19(m,2H),1.78–1.61(m,4H).¹³C NMR (101MHz,CDCl₃)δ172.1,163.2,153.6,137.6,134.8,130.2,125.5,120.5,118.3,99.4,70.3,53.9, 45.5,31.1,14.7.HRMS(ESI)：calcd for C₁₆H₁₉ClN₃O₃[M+H]⁺,336.1109；found,336.1136.

实施例(23)N-(2-((5-(苯氧基甲基)异噁唑-3-基)氧基)乙基)环戊胺盐酸盐的制备

23.1(2-((5-(羟甲基)异噁唑-3-基)氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯的制备

将N-Boc-N-甲基氨基乙醇替换为N-Boc-N-氨基乙醇，其余所需原料，试剂以及制备方法 与实施例1.2相同，溶于20mL四氢呋喃中，氮气保护下搅拌至溶解。0℃条件下，加入硼氢 化锂搅拌约30min后升至室温反应。反应结束后，饱和氯化铵溶液淬灭反应，乙酸乙酯萃取， 水洗，旋干乙酸乙酯得化合物(2-((5-(羟甲基)异噁唑-3-基)氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯。

23.2(2-((5-(碘甲基)异噁唑-3-基)氧基)乙基)氨基甲酸叔丁酯的制备

在100mL圆底烧瓶中加入23.1制备的化合物(2-((5-(羟甲基)异噁唑-3-基)氧基)乙基)氨基 甲酸叔丁酯(160mg,0.6mmol)，咪唑(120mg,1.8mmol)，三苯基膦(233mg,0.9mmol)，溶于 25mL二氯甲烷搅拌至溶解。避光0℃条件下，加入碘单质(226mg,0.9mmol)升至室温反应过 夜。待反应结束后，旋干母液，经快速湿法柱层析得化合物(2-((5-(碘甲基)异噁唑-3-基)氧基) 乙基)氨基甲酸叔丁酯。

23.3 2-((5-(苯氧基甲基)异噁唑-3-基)氧基)乙-1-胺的制备

在100mL圆底烧瓶中加入23.2制备的化合物(2-((5-(碘甲基)异噁唑-3-基)氧基)乙基)氨基 甲酸叔丁酯(300mg,0.7mmol)，苯酚(220mg,1.4mmol)，20mL DMF，加入碳酸钾(500mg, 4mmol)，氮气保护下室温搅拌反应过夜。反应结束后，向体系中加入20mL饱和氯化铵溶 液，乙酸乙酯萃取，依次用水和饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥。旋干溶剂，粗产品经快速 柱层析得中间体化合物。在50mL反应瓶中加入中间体化合物(190mg,0.4mmol)，20mL饱 和氯化氢的乙酸乙酯溶液，氮气保护室温反应过夜。反应结束后，旋干溶剂，乙醚打浆，过 滤，洗涤，烘干得化合物2-((5-(苯氧基甲基)异噁唑-3-基)氧基)乙-1-胺。

23.4N-(2-((5-(苯氧基甲基)异噁唑-3-基)氧基)乙基)环戊胺盐酸盐的制备

将3-(2-(甲基氨基)乙氧基)-N-苯基异噁唑-5-甲酰胺替换为2-((5-(苯氧基甲基)异噁唑-3-基) 氧基)乙-1-胺，将环丁酮替换为环戊酮，其余所需原料，试剂以及制备方法与1.5相同，得 最终化合物N-(2-((5-(苯氧基甲基)异噁唑-3-基)氧基)乙基)环戊胺盐酸盐。¹H NMR(400MHz, DMSO)δ9.35(s,2H),7.32(t,J＝8.0Hz,2H),7.12–6.91(m,3H),6.44(s,1H),5.20(s,2H),4.50 (t,J＝5.0Hz,2H),3.50(m,1H),1.96(d,J＝8.3Hz,2H),1.69(m,4H),1.52(m,2H).¹³C NMR (101MHz,DMSO)δ170.8,169.2,157.4,129.6,121.4,114.7,95.4,65.5,60.4,58.6,44.6, 28.9,23.6.HRMS(ESI)：calcd for C₁₇H₂₂N₂O₃[M+H]⁺,303.1703；found,303.1707.

实施例(24)N-(2-((5-(苯氧基甲基)异噁唑-3-基)氧基)乙基)环己胺盐酸盐的制备

将环戊酮替换为环己酮，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例23相同，得最终化 合物N-(2-((5-(苯氧基甲基)异噁唑-3-基)氧基)乙基)环己胺盐酸盐。¹H NMR(400MHz,DMSO) δ8.86(s,2H),7.41–7.23(m,2H),7.10–6.89(m,3H),6.39(s,1H),5.17(s,2H),4.28(t,J＝6.0 Hz,2H),3.02(t,J＝6.0Hz,2H),2.16–2.07(m,2H),2.03(m,2H),1.76(m,2H),1.60(m,1H), 1.25(m,4H).¹³C NMR(101MHz,DMSO)δ171.1,169.0,157.4,129.6,121.4,114.7,95.3, 67.0,60.5,55.9,28.5,25.4,24.7 23.8.HRMS(ESI)：calcd forC₁₈H₂₄N₂O₃[M+H]⁺,317.1817； found,317.1820.

实施例(25)(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-(苯氧基甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷-1- 氯化物的制备

25.1(S)-5-(苯氧基甲基)-3-(吡咯烷-2-基甲氧基)异噁唑的制备

将N-Boc-N-氨基乙醇替换为N-Boc-D-脯氨醇，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施 例23.3相同，得化合物(S)-5-(苯氧基甲基)-3-(吡咯烷-2-基甲氧基)异噁唑。

25.2(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-(苯氧基甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-氯化物 的制备

将2-((5-(苯氧基甲基)异噁唑-3-基)氧基)乙-1-胺替换为(S)-5-(苯氧基甲基)-3-(吡咯烷-2- 基甲氧基)异噁唑，将苯酚替换为6-碘-1-己胺，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例 23.4相同，得最终化合物(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-(苯氧基甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡 咯烷-1-氯化物。¹H NMR(400MHz,Deuterium Oxide)δ7.25(t,J＝7.8Hz,2H),6.97(d,J＝7.4 Hz,1H),6.91(d,J＝8.0Hz,2H),6.21(s,1H),5.01(s,2H),4.53–4.30(m,2H),3.93–3.81(m, 1H),3.77–3.63(m,1H),3.39–3.26(m,1H),3.25–3.15(m,1H),3.14–3.01(m,1H),2.94(t,J＝ 7.6Hz,2H),2.36–2.22(m,1H),2.19–2.07(m,1H),2.07–1.95(m,2H),1.94–1.82(m,1H), 1.76–1.56(m,4H),1.43–1.27(m,4H).¹³C NMR(101MHz,D₂O)δ171.0,169.4,157.1,129.9, 122.2,114.9,95.4,67.3,66.3,61.0,55.2,54.9,39.3,26.4,25.8,25.3,25.1,24.7,22.2.

实施例(26)(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-((3-氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡 咯烷-1-氯化物的制备

将苯酚替换为3-氯苯酚，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(25)相同，得最终 化合物(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-((3-氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-氯化 物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.18(s,1H),8.17(s,3H),7.35(t,J＝8.2Hz,1H),7.17(s, 1H),7.05(t,J＝9.8Hz,2H),6.52(s,1H),5.26(s,2H),4.73(dd,J＝11.5,7.6Hz,1H),4.50(dd,J ＝11.3,3.8Hz,1H),3.99–3.76(m,1H),3.66–3.53(m,1H),3.38–3.27(m,1H),3.22–3.02(m, 2H),2.82–2.66(m,2H),2.23(dq,J＝14.8,7.5Hz,1H),2.07–1.89(m,2H),1.87–1.72(m,2H), 1.71–1.63(m,1H),1.63–1.53(m,2H),1.41–1.27(m,4H).¹³C NMR(101MHz,DMSO)δ 170.6,168.7,158.3,133.7,131.0,121.4,114.8,113.8,95.7,68.0,65.3,60.8,54.1,53.6,38.4,26.5, 26.5,25.5,25.3,24.4,21.8.HRMS(ESI)：calcd for C₂₁H₃₀ClN₃O₃[M+H]⁺,408.2048；found, 408.2082.

实施例(27)(2S)-1-(4-氨基丁基)-2-(((5-((3-氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡 咯烷-1-氯化物的制备

将6-碘-1-己胺替换为6-碘-1-丁胺，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(25)相同， 得最终化合物(2S)-1-(4-氨基丁基)-2-(((5-((3-氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷 -1-氯化物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.13(s,1H),8.21(s,3H),7.33(t,J＝8.4Hz,1H), 7.15(s,1H),7.03(t,J＝10.0Hz,2H),6.51(s,1H),5.23(s,2H),4.81–4.60(m,1H),4.59–4.42 (m,1H),3.99–3.80(m,1H),3.63–3.53(m,1H),3.34–3.25(m,1H),3.22–3.03(m,2H),2.85– 2.70(m,2H),2.30–2.13(m,1H),2.10–1.89(m,2H),1.88–1.72(m,3H),1.71–1.55(m,2H). ¹³C NMR(101MHz,DMSO)δ170.6,168.6,158.3,133.7,131.0,121.4,114.8,113.8,95.7,67.9, 65.3,60.8,53.6,53.5,37.9,26.5,24.1,21.9,21.7.HRMS(ESI)：calcd for C₁₉H₂₆ClN₃O₃[M+H]⁺, 380.1735；found,380.1758.

实施例(28)(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-((3,4-二氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基) 吡咯烷-1-氯化物的制备

将苯酚替换为3,4-二氯苯酚，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(25)相同，得最 终化合物(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-((3,4-二氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷 -1-氯化物。¹H NMR(400MHz,Deuterium Oxide)δ7.13(d,J＝8.8Hz,1H),6.84(s,1H),6.68(d, J＝8.6Hz,1H),6.14(s,1H),4.90(s,2H),4.45–4.25(m,2H),3.87–3.74(m,1H),3.69–3.57(m, 1H),3.25(q,J＝10.6,9.5Hz,1H),3.12(q,J＝7.9Hz,1H),3.08–2.95(m,1H),2.85(t,J＝7.4Hz, 2H),2.30–2.13(m,1H),2.12–1.99(m,1H),1.98–1.89(m,2H),1.88–1.76(m,1H),1.70– 1.46(m,4H),1.24(m,4H).¹³C NMR(101MHz,D₂O)δ170.9,168.6,156.3,132.2,130.8,124.4, 116.8,114.7,95.6,67.4,66.3,61.4,55.2,54.8,39.3,26.4,25.9,25.3,25.1,24.7,22.2. HRMS(ESI)：calcd for C₂₁H₂₉Cl₂N₃O₃[M+H]⁺,442.1659；found,442.1653.

实施例(29)(2S)-1-(5-氨基戊基)-2-(((5-((3,4-二氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基) 吡咯烷-1-氯化物的制备

将6-碘-1-己胺替换为5-碘-1-戊胺，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(28)相同， 得最终化合物(2S)-1-(5-氨基戊基)-2-(((5-((3,4-二氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡 咯烷-1-氯化物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.14(s,1H),8.27(s,3H),7.51(d,J＝9.0Hz, 1H),7.34(d,J＝2.9Hz,1H),7.06(dd,J＝8.9,2.9Hz,1H),6.54(s,1H),5.25(s,2H),4.70(dd,J＝ 11.5,7.8Hz,1H),4.48(dd,J＝11.4,3.7Hz,1H),3.97–3.85(m,1H),3.66–3.60(m,1H),3.36– 3.26(m,1H),3.20–3.07(m,2H),2.78–2.70(m,2H),2.27–2.15(m,1H),2.05–1.90(m,2H), 1.83–1.72(m,2H),1.71–1.65(m,1H),1.64–1.57(m,2H),1.40–1.31(m,2H).¹³C NMR(101 MHz,DMSO)δ170.6,168.3,156.7,131.6,131.0,123.4,116.8,115.7,95.9,68.0,65.3,61.1,53.9, 53.7,38.2,26.5,26.2,24.0,23.0,21.8.HRMS(ESI)：calcd for C₂₀H₂₇Cl₂N₃O₃[M+H]⁺,428.1502； found,428.1529.

实施例(30)(2S)-1-(4-氨基丁基)-2-(((5-((3,4-二氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基) 吡咯烷-1-氯化物的制备

将5-碘-1-戊胺替换为4-碘-1-丁胺，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(29)相同， 得最终化合物(2S)-1-(4-氨基丁基)-2-(((5-((3,4-二氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡 咯烷-1-氯化物。¹H NMR(400MHz,Deuterium Oxide)δ7.36(d,J＝8.3Hz,1H),7.12(s,1H), 6.88(d,J＝8.0Hz,1H),6.24(s,1H),5.09(s,2H),4.61–4.29(m,2H),4.06–3.86(m,1H),3.79– 3.60(m,1H),3.54–3.31(m,1H),3.18(dd,J＝20.0,10.4Hz,2H),3.07–2.83(m,2H),2.37– 2.19(m,1H),2.19–2.06(m,1H),1.98(dd,J＝23.7,11.3Hz,2H),1.87–1.52(m,4H).¹³C NMR (101MHz,D₂O)δ171.1,169.1,156.3,132.3,130.9,124.7,117.0,115.2,95.5,67.3,66.7,61.6, 54.9,54.4,38.8,25.8,24.0,22.2,22.2.HRMS(ESI)：calcd for C₁₉H₂₅Cl₂N₃O₃[M+H]⁺,414.1346； found,414.1363.

实施例(31)(2S)-1-(3-氨基丙基)-2-(((5-((3,4-二氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基) 吡咯烷-1-氯化物的制备

将4-碘-1-丁胺替换为3-碘-1-丙胺，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(30)相同， 得最终化合物(2S)-1-(3-氨基丙基)-2-(((5-((3,4-二氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡 咯烷-1-氯化物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.29(s,1H),8.31(s,3H),7.57(d,J＝8.9Hz, 1H),7.39(d,J＝2.8Hz,1H),7.09(dd,J＝9.0,2.9Hz,1H),6.54(s,1H),5.28(s,2H),4.70(dd,J＝11.4,7.7Hz,1H),4.51(dd,J＝11.3,3.9Hz,1H),3.97–3.84(m,1H),3.69–3.58(m,1H),3.56– 3.49(m,1H),3.29–3.22(m,1H),3.20–3.12(m,1H),3.02–2.93(m,1H),2.92–2.83(m,1H), 2.30–2.20(m,1H),2.18–2.10(m,1H),2.08–1.94(m,3H),1.88–1.77(m,1H).¹³C NMR(101 MHz,DMSO)δ170.6,168.3,156.8,131.6,131.1,123.4,116.8,115.8,95.9,67.8,65.7,61.2,53.8, 51.4,36.2,26.4,23.1,21.8.HRMS(ESI)：calcd for C₁₈H₂₃Cl₂N₃O₃[M+H]⁺,400.1189；found, 400.1182.

实施例(32)(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-((3,5-二氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基) 吡咯烷-1-氯化物的制备

将苯酚替换为3,5-二氯苯酚，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(25)相同，得最 终化合物(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-((3,5-二氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基)吡咯烷 -1-氯化物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ10.81(s,1H),7.96(s,3H),7.24(s,1H),7.19(s,2H), 6.51(s,1H),5.30(s,2H),4.66(dd,J＝11.8,7.3Hz,1H),4.50(dd,J＝11.7,3.8Hz,1H),3.95– 3.82(m,1H),3.66–3.55(m,1H),3.30–3.21(m,1H),3.18–3.04(m,2H),2.81–2.70(m,2H), 2.27–2.17(m,1H),2.08–1.88(m,3H),1.87–1.78(m,1H),1.77–1.70(m,1H),1.69–1.62(m, 1H),1.60–1.52(m,2H),1.38–1.28(m,4H).¹³C NMR(101MHz,DMSO)δ170.7,168.3,158.8, 134.7,121.3,114.2,95.8,68.0,65.4,61.2,54.2,53.8,38.5,26.6,26.4,25.5,25.3,24.5,21.9. HRMS(ESI)：calcd for C₂₁H₂₉Cl₂N₃O₃[M+H]⁺,442.1659；found,442.1685.

实施例(33)(2S)-1-(4-氨基丁基)-2-(((5-((3,5-二氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基) 吡咯烷-1-氯化物的制备

将3,4-二氯苯酚替换为3,5-二氯苯酚，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(30) 相同，得最终化合物(2S)-1-(4-氨基丁基)-2-(((5-((3,5-二氯苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲 基)吡咯烷-1-氯化物。¹H NMR(400MHz,Deuterium Oxide)δ7.36(d,J＝8.3Hz,1H),7.12(s, 1H),6.88(d,J＝8.0Hz,1H),6.24(s,1H),5.09(s,2H),4.61–4.29(m,2H),4.06–3.86(m,1H), 3.79–3.60(m,1H),3.54–3.31(m,1H),3.18(dd,J＝20.0,10.4Hz,2H),3.07–2.83(m,2H), 2.37–2.19(m,1H),2.19–2.06(m,1H),1.98(dd,J＝23.7,11.3Hz,2H),1.87–1.52(m,4H).¹³C NMR(101MHz,D₂O)δ171.1,169.1,156.3,132.3,130.9,124.7,117.0,115.2,95.5,67.3,66.7, 61.6,54.9,54.4,38.8,25.8,24.0,22.2,22.2.HRMS(ESI)：calcd for C₁₉H₂₅Cl₂N₃O₃[M+H]⁺, 414.1346；found,414.1346.

实施例(34)(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-((3-(三氟甲基)苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基) 甲基)吡咯烷-1-氯化物的制备

将苯酚替换为3-(三氟甲基)苯酚，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(25)相同， 得最终化合物(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-((3-(三氟甲基)苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基) 吡咯烷-1-氯化物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.00(s,1H),8.04(s,3H),7.57(t,J＝8.0Hz, 1H),7.43–7.30(m,3H),6.52(s,1H),5.33(s,2H),4.69(dd,J＝11.5,7.7Hz,1H),4.50(dd,J＝ 11.5,3.9Hz,1H),3.99–3.81(m,1H),3.68–3.50(m,1H),3.20–3.03(m,2H),2.75(q,J＝6.7 Hz,2H),2.32–2.11(m,1H),2.07–1.93(m,2H),1.87–1.70(m,2H),1.68–1.24(m,8H).¹³C NMR(101MHz,DMSO)δ170.7,168.6,157.7,130.8,130.3(q,J＝31.9Hz),123.8(q,J＝273.5 Hz),119.1,118.0(q,J＝3.6Hz),111.4(q,J＝4.0Hz),95.7,68.0,65.3,60.9,54.1,53.7,38.4,26.6, 26.5,25.5,25.3,24.4,21.8.HRMS(ESI)：calcd for C₂₂H₃₀F₂N₃O₃[M+H]⁺,442.2312；found, 442.2296.

实施例(35)(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-((4-(三氟甲基)苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基) 甲基)吡咯烷-1-氯化物的制备

将苯酚替换为4-(三氟甲基)苯酚，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(25)相同， 得最终化合物(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-((4-(三氟甲基)苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧基)甲基) 吡咯烷-1-氯化物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ10.95(s,1H),8.02(s,3H),7.70(d,J＝8.4Hz, 2H),7.24(d,J＝8.4Hz,2H),6.54(s,1H),5.33(s,2H),4.68(dd,J＝11.5,7.7Hz,1H),4.50(dd,J ＝11.7,3.9Hz,1H),3.95–3.83(m,1H),3.68–3.52(m,1H),3.21–3.01(m,2H),2.75(q,J＝6.8 Hz,2H),2.22(q,J＝14.9,7.5Hz,1H),2.04–1.92(m,2H),1.85–1.72(m,2H),1.70–1.51(m, 4H),1.37–1.29(m,4H).¹³C NMR(101MHz,DMSO)δ170.7,168.5,160.2,127.0(q,J＝3.6Hz), 124.4(q,J＝272.1Hz),122.0(q,J＝32.3Hz),115.3,95.8,68.0,65.3,60.7,54.1,53.7,38.4,26.6, 26.4,25.5,25.3,24.5,21.9.HRMS(ESI)：calcd for C₂₂H₃₀F₃N₃O₃[M+H]⁺,442.2312；found, 442.2344.

实施例(36)(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-((3,5-双(三氟甲基)苯氧基)甲基)异噁唑-3-基)氧 基)甲基)吡咯烷-1-氯化物的制备

将苯酚替换为3,5-双(三氟甲基)苯酚，其余所需原料，试剂以及制备方法与实施例(25)相 同，得最终化合物(2S)-1-(6-氨基己基)-2-(((5-((3,5-双(三氟甲基)苯氧基)甲基)异噁唑-3-基) 氧基)甲基)吡咯烷-1-氯化物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.16(s,1H),8.17(s,3H),7.74(s, 2H),7.67(s,1H),6.56(s,1H),5.45(s,2H),4.72(t,J＝9.7Hz,1H),4.61–4.37(m,1H),3.90(s, 1H),3.64–3.56(m,1H),3.36-3.27(m,2H),3.21–3.02(m,2H),2.83–2.63(m,2H),2.33–2.13 (m,1H),2.09–1.93(m,2H),1.85–1.71(m,2H),1.79-1.64(m,1H),1.62-1.51(m,2H),1.69– 1.16(m,4H).¹³C NMR(101MHz,DMSO)δ170.6,168.0,158.3,131.5(q,J＝33.8Hz),123.0(q, J＝276.5Hz),116.0(sep,J＝3.0Hz),114.6(q,J＝5.4Hz),96.0,68.0,65.3,61.4,54.1,53.6,38.4, 26.5,26.4,25.5,25.2,24.4,21.8.HRMS(ESI)：calcd for C₂₃H₂₉F₆N₃O₃[M+H]⁺,510.2186；found, 510.2201.

应用实施例1

本实施例提供结构通式(I)类化合物对σ受体体外亲和力测试

1.1仪器与试剂

材料：本发明所述部分化合物。

膜来源：大鼠脑组织匀浆(σ1)，PC-12细胞(σ2)

缓冲溶液：50mM Tris-HCl(pH＝8.0)

1.2实验方法

所有化合物对受体的亲和力筛选是由美国国家心理健康研究所的精神药物筛选中心测试 完成，具体测试过程如下所示：

将要测试的化合物配制成1mg/mL的DMSO溶液或缓冲溶液(50mM Tris–HCl,pH＝8.0)。过滤垫在0.5％聚乙烯亚胺水溶液中浸泡2h后方可使用。 所有受体亲和实验均在聚-L-赖氨酸包被的96孔板中进行，并且将测试化合物利 用Tris–HCl溶液(50mM，pH＝8.0)分别配制成50mM,5mM,1.5mM,500nM, 150nM,50nM,15nM,5nM,1.5nM,0.5nM,0.05nM的浓度。放射性配体及受体 来源如下：(a)σ1受体，[3H]-(+)-pentazocine，豚鼠脑匀浆；(b)σ2受体，[3H]-DTG，PC-12 细胞。分别向测试板的每个孔中加入100μL相应的放射性配体溶液，100μL试验化合物溶液 和50μL相应的受体溶液(总体积为250μL)，随后将96孔板置于恒温摇床中在特定温度下 以500–600rpm转速进行孵化(σ1受体，37℃，150min；σ2受体，室温，120min)，孵化 结束后，利用Whatman GF/B玻璃过滤器快速过滤，并用10mL冷却的缓冲溶液洗涤两次， 随后将滤液放置在6mL闪烁管中，加入4mL EcoScint scintillation cocktail并使用Beckman LS 6500液体闪烁计数器测量放射性结合。

本发明提供系列化合物对σ受体(σ1受体和σ2受体)体外亲和力活性测试数据，如下 表1所示：

表1部分烷氧基异噁唑类化合物体外亲和力活性数据

*NT，not test.

由表1数据分析可知，本发明化合物对sigma受体具有较好的亲和力，特别是当化合物 为结构式(I)B时，对sigma-2受体具有良好的亲和力。

应用实施例2

本实施例提供实施例(1)、(12)、(14)、(15)及(21)制备的化合物在平行人工膜渗透模型测 试及数据

2.1实验材料及试剂

实验材料：猪脑磷脂溶于十二烷溶液配成20mg/mL模拟生物膜

实验试剂：DMSO溶液，PBS缓冲液。

2.2实验模型及方法

实验模型：平行人工膜渗透模型

实验方法：所有测试化合物用DMSO溶液配成5mg/mL的储备溶液。将10μL储备溶液样品放入PBS缓冲液中稀释(最终浓度为25μg/mL)。过滤后将300mL样品溶液加入millipore公司供体板培养皿中。将4μL猪脑磷脂溶液均匀的包被滤膜，并加入150mL的PBS溶液， 随后将受体滤板放在供体培养皿上。将反应体系在室温下孵化18h，孵化后移出供体培养皿。 受体滤板中的测试化合物和对照化合物的浓度通过UV平板读数器测定。

数据处理及结果说明：实验选择单浓度条件下，即25μg/mL，对化合物进行测定。本实 施例中，每个样品在测试中均设置复孔(n≥3)，在结果中以标准偏差(StandardDeviation,SD) 或者标准误差(Standard Error,SE)表示。本实施例中，每次测试均有已报道的化合物作为参照。 化合物测试结果以Pe(×10^-6cm/s)表示，若Pe(×10^-6cm/s)>4.0，表示该化合物可能通过被动 扩散的方式进入中枢神经系统(CNS+)；若Pe(×10^-6cm/s)<2.0，表示该化合物不能通过被动 扩散的方式进入中枢神经系统(CNS-)；若2.0≦Pe(×10^-6cm/s)≦4.0，表示则该化合物透膜能 力不能确定(CNS±)。

本发明提供系列实施例(1)、(12)、(14)、(15)及(21)制备的化合物在平行人工膜渗透模型 的测试数据，如下表2所示：

表2平行人工膜渗透模型测试数据：(以Pe(×10^-6cm/s)表示)

表2数据表明，在平行人工膜渗透模型上，本发明实施例(1)、(12)、(14)、(15)及(21)制 备的化合物都具有较高的透膜能力。

应用实施例3

本发明提供结构通式(Ⅰ)类部分化合物在N1E-115神经细胞轴突生长模型测试及数据

3.1实验材料及试剂

实验材料：N1E-115神经细胞

实验试剂：DMEM完全培养基、BMEM+5％FBS+1％青霉素链霉素、DMSO溶液

3.2实验模型及方法

实验模型：N1E-115神经细胞轴突生长模型

实验方法：将未分化的N1E-115细胞在含有10％热灭活的马血清，5％牛胎儿血清，100 μg/mL青霉素，100μg/mL链霉素的DMEM完全培养基中培养，并在37℃潮湿培养箱补充5％CO₂。N1E-115细胞以密度1×10⁵个/mL接种于96孔板内，24h后更换培养基 (DMEM+5％FBS+1％青霉素链霉素)，加入DMSO或者待测药物的DMSO溶液(10μM) 作用至3天，显微镜下拍照，统计突触长度。

数据处理及结果说明：每孔随机选取5个视野，每个视野平均细胞数100个，将长度大于胞体直径一倍及以上的突触计入统计，所有数据采用Dunnett test，mean±SEM。

本发明提供结构通式(I)类化合物(化合物(1)～(22))在N1E-115神经细胞轴突生长模 型测试数据，如表3所示：其中，CN表示空白对照。由表3数据表明，在N1E-115神经细胞轴突生长模型上，相较于空白对照，本发明提供的结构通式(I)类大部分化合物有着较好的促神经再生活性。

表3 N1E-115神经细胞轴突生长模型测试数据

应用实施例4

本发明提供结构通式(I)B类化合物在抗骨肉瘤细胞增殖测试及数据

4.1实验材料

实验材料：本发明所述部分化合物(化合物(25)～(36))。

实验对象：人骨肉瘤143B细胞

4.2实验模型

实验模型：人骨肉瘤143B细胞毒性实验模型

实验方法：细胞常规培养于含体积分数10％新生小牛血清的RPMI-1640培养基中，其 中含100unit/ml青霉素和100μg/mL链霉素，在37℃、体积分数为5％CO₂、95％空气、饱和湿度下，CO₂孵箱内闭式传代培养，用传代后第3日处于指数增殖期细胞备实验用。将细胞经胰酶消化制成悬液后分别接种在96孔板上，每孔加180μL的细胞悬液和20μL的药物。细胞株分别与浓度为0、1.0、10.0、50.0、100.0μg/ml的化合物作用在CO₂孵箱内培养48h。经上述处理后，加MTT 20mL/孔，继续培养4h，弃上清液，加二甲亚矾150mL/孔，振荡 后溶解。

数据处理及结果说明：测定每孔的吸光度A，并计算细胞毒性指数值，进一步求出化合 物IC₅₀。

表4部分化合物在人骨肉瘤143B细胞上的毒性实验数据(以IC50(μM)表示)

表4数据表明，在人骨肉瘤143B细胞毒性模型实验中，与空白对照，本发明提供的结 构通式(I)B类大部分化合物，除了化合物25和26其他化合物都具有明显抗人骨肉瘤增殖 活性。有较好的抗人骨肉瘤增殖活性，有望发展为抗肿瘤活性药物。

本发明的保护内容不局限于以上实施例。在不背离发明构思的精神和范围下，本领域技术 人员能够想到的变化和优点都被包括在本发明中，并且以所附的权利要求书为保护范围。