阅读说明：本技术 凝血酶冻干粉中钡元素的测定方法 ([db:专利名称-en]) 是由 刘骞 于 2018-08-28 设计创作，主要内容包括：本发明公开了一种采用石墨炉原子吸收分光光度法测定凝血酶冻干粉中钡元素的方法,采用光谱带宽0.2-0.5nm,灯电流为15-20mA的原子吸收分光光度计在553.55nm处测定信号强度,石墨炉的原子化温度为2600-2700℃,保持时间为2～5秒,清洁温度为2600-2700℃,保持时间为4～8秒；本发明简化样品前处理过程,凝血酶样品配制过程中无需进行微波硝化操作,且无需使用基体改进剂；提高灯电流至15～20mA,大大改善Ba元素峰形；将原子化温度和清洁温度提高至2600-2700℃。提高了测试精度,解决多样品连续测定过程中,Ba元素残留的问题。通过上述改进,使其符合凝血酶冻干粉的质量控制要求。([db:摘要-en])

凝血酶冻干粉中钡元素的测定方法

技术领域

本发明涉及凝血酶冻干粉的制备技术领域，具体涉及凝血酶冻干粉中钡元素的测定方法。

背景技术

凝血酶冻干粉，主要成份为牛血或猪血中提取的凝血酶原，经激活而得的供口服或局部止血用凝血酶的无菌冻干制品，用于手术中不易结扎的小血管的止血、消化道出血及外伤出血等。已知凝血酶生产工艺中，有可能会使用到钡元素对凝血酶原进行激活，按照相关指导原则，最终产品应进行钡元素检测。

经文献检索，目前钡元素测定法，主要有火焰原子吸收法、石墨炉原子吸收法及ICP-OES或ICP-MS法。(ICP-MS:电感耦合等离子体质谱；ICP-OES:电感耦合等离子体发射光谱)上述方法仅用于废弃物、空气及水样(污水)中钡元素的检测，样品前处理比较复杂，

火焰原子吸收法测定钡含量的缺点为样品前处理比较复杂，微波硝解所用时间长，且比较危险；基于火焰原子吸收风光光度计的测定原理，其背景噪声较高，检测限、定量限较大，不能满足凝血酶冻干粉针中钡元素测定的要求。

石墨炉原子吸收法测定钡含量的缺点为样品经前处理(硝酸或氢氟酸，微波硝解)后，用石墨炉原子吸收分光光度法进行测定。一般情况下，需对石墨管进行涂层处理，并加入基体改进剂。

ICP-OES或ICP-MS法定钡含量的缺点为主要是仪器昂贵，使用成本较高，一般企业没有配备ICP-MS或ICP-OES。

发明内容

本发明要解决的技术问题是凝血酶冻干粉针中钡元素检测，尚无专用的高效的方法的缺陷，提供一种凝血酶冻干粉中钡元素的测定方法。

为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案：

一种凝血酶冻干粉中钡元素的测定方法，包括以下步骤：

1)、供试品溶液制备：取凝血酶冻干粉30-40mg，精密称定，至50ml容量瓶中，加新鲜配置的0.1％的硝酸溶液定容至刻度，作为供试品溶液；

2)、标准曲线的制备；

3)、采用光谱带宽0.2-0.5nm，灯电流为15-20mA的原子吸收分光光度计在553.55nm处测定信号强度测定供试品溶液的吸光度，石墨炉的原子化温度为2600-2700，℃保持时间为2～5秒，清洁温度为2600-2700，℃保持时间为4～8秒；

4)根据标准曲线计算凝血酶冻干粉中钡元素的含量。

进一步的，标准曲线的制备的方法为：精密移取100μg/ml的Ba标准物质溶液适量，用稀硝酸分别稀释成每1ml中含Ba元素0.02μg、0.04μg、0.06μg、0.08μg和0.10μg的溶液，作为标准品溶液，以0.1％硝酸为空白，精密吸取上述溶液各20μl，在553.55nm处测定信号强度，以Ba标准物质浓度(μg/ml)对应的信号强度，计算回归方程，回归方程中，相关系数r应≥0.99。

根据孙忠等的《石墨炉原子吸收法测定生活饮用水中的微量钡》和张欣等的《优化石墨炉原子吸收法测定生活饮用水中微量钡》中显示，使用石墨炉原子吸收分光光度法测定样品中Ba含量，灯电流一般使用10mA左右。但是发明人在实验中发现，提高灯电流，有利于Ba元素峰形的改善，且实验发现，灯电流在15-20mA时，峰形最佳。

现有的文献报道的Ba元素测定温度为2400℃以下。由于Ba为高温元素，理论上至少需要2500℃以上的温度，才能使其完全原子化，过低的原子化温度不利于Ba元素的测定。由于正常使用的石墨管为普通石墨管，不耐高温，2500℃以上无法保证其精密度，发明人将将石墨管更换为耐高温石墨管，并提高原子化温度至2600-2700，℃能极大地提高其灵敏度，并改善仪器精密度。

普通石墨管，生产过程中，未经耐高温处理，最高使用温度约为2400℃，超过2400℃后，极易损坏。

耐高温石墨管，是在生产过程中，在石墨管内外表面添加耐高温涂层，最高使用温度可超过2800℃。Ba为高温元素，2400℃不足以完成其原子化过程，所以需要使用耐高温石墨管进行测定。实验过程中对两种石墨管进行过摸索，发现普通石墨管进样＜50次就需要进行更换，而且无法保证仪器的精密度。更换为耐高温石墨管(普析3363A)后，问题解决。

实验过程中发现，清洁温度过低，在多样品测定过程中会由于清洁不完全，对样品造成污染，影响样品测定。提高清洁温度，有利于提高多批次样品测定时的数据准确度。因此发明人提高清洁温度至2600-2700。℃

本发明所达到的有益效果是：本发明通过对石墨炉原子吸收分光光度法的测定过程进行优化，简化样品前处理过程，凝血酶样品配制过程中无需进行微波硝化操作，且过程中无需使用基体改进剂；对仪器参数进行优化：①提高灯电流至15～20mA，大大改善Ba元素峰形；②原子化温度提高至2600-2700。℃Ba元素为高温元素，原子化所需温度较高，温度过低时会对信号强度及精密度造成影响；③提高清洁过程中石墨炉的温度，解决多样品连续测定过程中，Ba元素残留的问题。通过上述改进，使其符合凝血酶冻干粉的质量控制要求。

具体实施方式

以下对本发明的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例

一种凝血酶冻干粉中钡元素的测定方法，包括以下步骤：

1)、供试品溶液制备：取凝血酶冻干粉约30mg，精密称定，至50ml容量瓶中，加新鲜配置的0.1％的硝酸溶液定容至刻度，作为供试品溶液；

2)、标准曲线的制备；精密移取100μg/ml的Ba标准物质溶液适量，用稀硝酸分别稀释成每1ml中含Ba元素0.02μg、0.04μg、0.06μg、0.08μg和0.10μg的溶液，作为标准品溶液，以0.1％硝酸为空白，精密吸取上述溶液各20μl，在553.55nm处测定信号强度，以Ba标准物质浓度(μg/ml)对应的信号强度，计算回归方程，回归方程中，相关系数r应≥0.99；

所得标注曲线如下：

经回归计算，Y＝20952X+0.011(R²＝0.995)，表明线性良好。

3)、采用光谱带宽0.2-0.5nm，灯电流为15-20mA的原子吸收分光光度计在553.55nm处测定信号强度测定供试品溶液的吸光度，石墨炉的原子化温度为2600-2700，℃保持时间为2～5秒，清洁温度为2600-2700，℃保持时间为4～8秒；

仪器型号：TAS-990D原子吸收分光光度计，北京普析通用仪器有限责任公司(1)原子吸收仪参数

信号处理	峰高
		积分时间	3s
光谱带宽	0.5nm
		灯电流	20mA

(2)石墨炉参数

序号	步骤	温度℃	升温时间s	保持时间s	原子化	内气流量
							1	干燥	110	10	10	否	大
2	干燥	130	10	10	否	大
							3	灰化	1000	15	20	否	大
4	原子化	2600	0	3	是	关
							5	清洁	2600	0	5	否	大

4)，以0.1％硝酸为空白，在553.55nm处测定信号强度，由回归方程计算Ba含量。

样品测试结果为：

样品	含量
		201705001批(1000U)	73.59ppm
201705002批(2000U)	79.85pm

精密度实验：

取0.06ug/ml溶液，重复进样6次

1	2	3	4	5	6
						0.195	0.194	0.187	0.194	0.189	0.186

RSD＝1.85％，表明精密度良好。

最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。