试样处理方法、试样处理装置、程序及试样处理盒

文档序号:1413569 发布日期:2020-03-10 浏览:10次 >En<

阅读说明:本技术 试样处理方法、试样处理装置、程序及试样处理盒 (Sample processing method, sample processing device, program, and sample processing cartridge ) 是由 三浦由宣 山下秀治 长谷川雄大 林智也 于 2019-08-30 设计创作,主要内容包括:本发明旨在在使用盒处理试样时,可更简便地制成乳液。此试样处理方法是使用具备用于收容液体的室11的盒100的试样处理方法,其通过使盒100的室11收容试样80及分散剂82,使盒100绕旋转轴221旋转,搅拌室11内的试样80及分散剂82,形成含试样80的分散质分散于分散剂82中的乳液83。(The present invention aims to make an emulsion more easily when a sample is processed using a cartridge. This sample processing method is a sample processing method using a cartridge 100 having a chamber 11 for storing a liquid, and is a sample processing method in which a sample 80 and a dispersant 82 are stored in the chamber 11 of the cartridge 100, the cartridge 100 is rotated around a rotation shaft 221, the sample 80 and the dispersant 82 in the chamber 11 are stirred, and an emulsion 83 in which a dispersoid containing the sample 80 is dispersed in the dispersant 82 is formed.)

具体实施方式

[第1实施方式]

以下,基于附图而说明实施方式。

(试样处理方法的概要)

参照图1~图3而对于根据第1实施方式的试样处理方法进行说明。第1实施方式的试样处理方法是使用具备用于收容液体的室11 的盒100的试样处理方法。试样处理方法是使用注入有含被检测物质 MD的试样80的盒100而实施用于检测被检测物质MD的处理的方法。

试样是例如从作为受试者的人采集的生物体试样。试样是例如,从患者采集的体液或血液(全血、血清或血浆)等的液体、或者,对采集的体液或血液实施指定的预处理而得到的液体等。试样是,作为被检测物质MD,含例如,DNA(脱氧核糖核酸)等的核酸、细胞及细胞内物质、抗原或抗体等的蛋白质、肽等。例如被检测物质MD是核酸时,作为试样80,向盒100注入从血液等由指定的预处理提取核酸的提取液。

另外,盒100中可收容有用于对试样80中的被检测物质MD进行处理的试剂81。盒100中收容有分散剂82。用于对被检测物质MD 进行处理的试剂81与和被检测物质MD或被检测物质MD结合的其他物质反应。用于对被检测物质MD进行处理的试剂81可为1种,也可为多种。试样80、用于对被检测物质MD进行处理的试剂81及分散剂82是液体。但是,这些液体也可含有液体以外。分散剂82对于试样80及试剂81有非混合性。即,试样80及试剂81的混合液和分散剂82有与分别的相分离的性质。例如混合液是水系,分散剂82 是油系。试样80及试剂81和分散剂82通过在室11内搅拌,形成乳液83。即,试样80及试剂81的混合液和分散剂82成为含试样80及试剂81的分散质成为液滴84而分散到分散剂82中的分散系溶液。在本实施方式中,也可在盒100中不收容试剂81。形成了至少含试样80 的分散质分散于分散剂82中的乳液83即可。

盒100是能更换的消耗品。即,盒100在测定中使用仅预先设定的次数就废弃。盒100的能使用次数是1次或数次。盒是指综合对于试样80的处理必要的功能的能更换的部件。

盒100是例如形成了内部空间的平板形状的部件。盒100在内部具备能收容液体的室11。室11在盒100设1个或多个。室11作为能收容试样80、试剂81及分散剂82的容积的内部空间构成。室11中收容有试样80、试剂81及分散剂82。盒100可含作为用于向室11 导入液体的试样导入部20、通路40、液体收容部发挥功能的空间等。盒100例如,通过在形成了构成室11或通路40等的孔的部件的表面贴合透明膜而堵塞开口部分,可形成室11或通路等的内部空间。

室11中可为预先收容有试剂81及分散剂82,也可为不收容试剂。在未收容试剂81及分散剂82的室11中,试剂81及分散剂82可从盒 100内的别的位置,或者从盒100的外部注入。

如图2所示,第1实施方式的试样处理方法含以下的S1及S2的步骤。(S1)使试样80及分散剂82收容于盒100的室11。(S2)通过使盒100绕旋转轴221旋转,搅拌室11内的试样80及分散剂82,形成含试样80的分散质分散于分散剂82中的乳液83。

在步骤S1中,在室11收容液体的方法不特别限定。作业者可由使用移液器等的技术,从盒100的开口注入试样80及分散剂82或用于处理试样80中的被检测物质MD的试剂81。另外,液体可利用进行液体的分注的分注装置,从盒100的开口注入。试样80和试剂81 也可在预先混合而成为混合液的状态下,注入盒100。

在步骤S1中,试样80、用于对被检测物质MD进行处理的试剂 81、及分散剂82可直接注入室11内。试样80、用于对被检测物质 MD进行处理的试剂81及分散剂82收容在盒100的室11以外的部位时,经通路40等而向室11移送。步骤S1的结果,试样80、用于对被检测物质MD进行处理的试剂81及分散剂82收容在相同的室11 的内部。

在步骤S2中,盒100绕旋转轴221旋转。旋转轴221是沿相对于平板形状的盒100的表面的法线方向的轴。为了抑制伴随旋转的振动,旋转轴221优选以成为盒100的大致重心位置的方式配置。在如图1 一样圆盘形状的盒100的情况中,也可将圆形的盒100的中心认为是重心。

此时,伴随盒100的旋转的惯性力作用于室11而搅拌室11内的试样80、试剂81及分散剂82。即,含试样80及试剂81的分散质和分散剂82由惯性力,在室11内相对移动。此时,优选由旋转,在室 11内发生分散质及分散剂82的湍流。由此促进搅拌。伴随搅拌,分散质由分散剂82细细剪切。

结果,分散质在分散剂82中微细化,由分散质和分散剂82的界面隔区的分散质的液滴84在室11内形成多个。即,形成了将含被检测物质MD的分散质的液滴84分散于分散剂82中的乳液83。乳液 83中所含的液滴84含有被检测物质MD。将用于对被检测物质MD 进行处理的试剂81收容在室11内时,液滴84含有被检测物质MD 和用于处理被检测物质MD的试剂81。此时,在细细隔区化的各液滴 84中,能将被检测物质MD由试剂81确实地处理。

如上所述,在第1实施方式的试样处理方法中,通过使盒100绕旋转轴221旋转,形成了将分散质的液滴84分散于分散剂82中的乳液83。这样,由于不使用由空气压控制的送液而仅通过使盒100绕旋转轴221旋转,可在室11内形成乳液83,在使用盒处理试样时,可更简便地制成乳液83。

〈由试剂的反应处理〉

形成了乳液83之后,可使分散质中所含的被检测物质MD和试剂81反应。如图3所示,在乳液83中,由于被检测物质MD和试剂 81收容在细细隔区化的各液滴84中,可使隔区化的各被检测物质MD 与试剂81反应。

例如,形成了乳液83之后,通过使盒100的温度改变,使分散质中所含的被检测物质MD和试剂81反应。由此,可在将被检测物质 MD与用于对被检测物质MD进行处理的试剂81一同收容在分散质的液滴84中而隔区化的状态下,由温度变化使被检测物质MD和试剂 81确实地反应。另外,与在盒100的设置环境的温度下使被检测物质 MD和试剂81的反应自然进行时比较,在乳液83中所含的液滴84中,也可利用温度变化而使被检测物质MD和试剂81有效反应。

(使盒的旋转速度改变的动作)

在图4(A)及(B)中所示的例中,通过重复使绕旋转轴221旋转的盒100的旋转速度改变的动作,在室11内形成乳液83。使旋转速度改变使向一定的旋转方向旋转的盒100加速或减速,及,为了使盒100的旋转方向反转而向反方向旋转而进行含由减速的停止及向反对方向的加速。

在此例中,绕旋转轴221旋转的盒100的旋转速度发生改变。伴随旋转速度的变化,作用于室11内的液体的惯性力变动。由惯性力的变动搅拌室11内的分散质和分散剂82。即,分散质及分散剂82由旋转速度的变化导致的惯性力的变化,在室11内相对移动。由此,快速进行搅拌。此时,优选由旋转速度的变化,在室11内发生分散质及分散剂82的湍流。由此促进搅拌。

进而,重复使绕旋转轴221旋转的盒100的旋转速度改变的动作。使盒100的旋转速度改变的动作的重复例如决定的指定次数进行。使盒100的旋转速度改变的动作的重复设为例如以一定周期进行的,也可设为开始使旋转速度改变的动作后以指定时间期间重复。如图3所示,在室11内,作为重复发生旋转速度的变化的结果,有效率地进行搅拌。由搅拌而分散质被分散剂82细细剪切。

这样,由于通过重复使盒100的旋转速度改变的动作,可伴随速度变化的惯性力发挥作用而有效搅拌室11内的试样80及分散剂82,可将分散质由分散剂82快速细细剪切。结果,可有效率地制成乳液 83。

使盒100的旋转速度改变的动作含使盒100的旋转方向反转的动作、或者向相同方向加速及减速的动作。

图4(A)显示使盒100的旋转方向反转的动作的例。例如,盒 100以旋转轴221为中心,向绕旋转轴221的一侧和另一侧交替旋转。此时,旋转速度将绕旋转轴221的一侧设为正(+),将另一侧设为负(-),成为正、0、负、0、正…、,每次旋转方向反转时重复自停止状态的加速和至成为停止状态的减速。由此,能对室11内的液体施加大的惯性力。结果,有效率地搅拌分散质和分散剂82。这样,由于在使盒100的旋转方向反转时,可在使旋转方向反转时施加大的惯性力,可有效率地制成乳液83。

图4(B)显示向相同方向加速及减速的动作的例。在图4(B) 中,便宜地由盒100的周方向的实线的箭头表示加速,由虚线的箭头表示减速。在图4(B)中,使盒100以时钟旋转方向旋转,也可逆时针旋转方向。盒100以旋转轴221为中心,绕旋转轴221向一定方向交替重复加速和减速的方式旋转。减速可为减速至盒100的旋转停止,也可为在指定的高速度和低速度之间重复加减速。在图4(B)中,交替重复加速和减速,也可以如例如加速、加速、减速、加速、加速、减速…、一样不是交替重复的模式使盒100旋转。由于在使盒100向相同方向加速及减速时,无使用于使盒100旋转的旋转机构逆旋转的必要,可容易地制成乳液83。

(试样处理装置的概要)

接下来,参照图5而对于根据第1实施方式的试样处理装置200 的概要进行说明。

第1实施方式的试样处理装置200是用于实施上述的试样处理方法的装置。即,试样处理装置200是使用具备用于收容液体的室11 的盒100而对试样中所含的被检测物质MD进行处理的装置。含试样 80的分散质和分散剂82的混合、搅拌、加温或冷却、处理中使用的固体或液体的移动、此外的各种操作可由试样处理装置200,在盒100 的内部进行。

如图5(A)所示,试样处理装置200具备设置部210、旋转机构 220和控制部230。设置部210、旋转机构220和控制部230例如收容在筐体201内。

筐体201由有指定容积的内部空间的箱状部件,或框和外装板的组合等构成。例如,试样处理装置200的筐体201有能在台上设置的小型的箱状形状。

设置部210能设置具备用于收容试样80及分散剂82的室11的盒 100。设置部210有例如构成盒100的设置面的上表面,支持盒100 的下表面。设置部210能绕旋转轴221旋转地支持盒100。在图5(A) 的例中,设置部210设置部210本身可设置于旋转轴221而与旋转轴221一体旋转。设置部210例如,与旋转轴221个别地设,也可能经轴承等而旋转地支持盒100。

旋转机构220能使设置于设置部210的盒100绕旋转轴221旋转。旋转机构220可含旋转轴221和使旋转轴221旋转的驱动部222。旋转轴221例如垂直方向延伸。在图5(A)的例中,旋转机构220支持固定于旋转轴221的一端部的设置部210,由与旋转轴221的另一端侧连接的驱动部222,使旋转轴221和设置部210一体旋转。驱动部 222是例如电动电机。由此,旋转机构220使配置于设置部210上的盒100以旋转轴221作为中心在水平面内旋转。旋转机构220可将旋转轴221的旋转速度变更为至少2阶段。至少2阶段也可例如以停止作为旋转速度0,停止和旋转的2阶段。

控制部230能控制旋转机构220。具体而言,控制部230进行通过将在室11中收容试样80及分散剂82的盒100由旋转机构220旋转,搅拌室11内的试样80、试剂81、及分散剂82,使含试样80的分散质分散于分散剂82中的乳液83形成的控制。由此,控制部230在室 11内形成含试样80的分散质分散于分散剂82中的乳液83(图5(B) 参照)。控制部230由例如具备CPU等的处理器和存储器等存储部的计算机构成。控制部230也可由例如构建为试样处理装置200用的 FPGA(field-programmable gate array)等的可编程装置构成。

试样处理装置200能由这样的构成实施图2中所示的试样处理方法使乳液83形成。即,试样处理装置200在室11内收容试样80及分散剂82的盒100设置于设置部210,则通过控制部230控制旋转机构 220,使盒100绕旋转轴221旋转。结果,试样处理装置200搅拌室 11内的试样80及分散剂82而在盒100的室11内形成乳液83。如后所述,试样处理装置200也可以将配置于盒100内的室11以外的位置的试样80、试剂81、及分散剂82收容在室11的方式构成。另外,试样处理装置200也可使含试样80及试剂81的分散质分散于分散剂82 中的乳液83形成,在细细隔区化的各液滴84中,实施使被检测物质 MD和试剂81反应的处理。

这样,在第1实施方式的试样处理装置200中,不使用由空气压控制的送液而仅通过使盒100绕旋转轴221旋转,可在室11内形成乳液83。结果,在使用盒处理试样时,变得可更简便地制成乳液83。再者,使用由空气压控制的送液而形成乳液时,有设向收容分散剂82的部分和收容试样的部分各自加空气压的机构或精密控制空气压的机构的必要,与此相对,在图5中所示的构成中,可仅通过设旋转机构 220形成乳液83。因此,可使装置构成简便化,得到更小型且简便的试样处理装置200。

再者,如图4(A)及图4(B)所示,控制部230也可通过以重复使绕旋转轴221旋转的盒100的旋转速度改变的动作的方式控制旋转机构220,在室11内形成乳液83。当这样构成时,由于通过重复使盒100的旋转速度改变的动作,可伴随速度变化的惯性力发挥作用而有效搅拌室11内的试样80、试剂81及分散剂82,可将分散质由分散剂82快速细细剪切。结果,可有效率地制成乳液83。

(程序)

接下来,参照图6而对于根据第1实施方式的程序300进行说明。

如图6所示,试样处理装置200也可不具备控制部230而由外部的计算机310控制旋转机构220。根据第1实施方式的程序300是用于以计算机310作为试样处理装置200的控制部发挥功能的控制用的程序。

计算机310具备例如CPU等的处理器311、含易失性存储器及不易失性存储器等的存储部312和与含试样处理装置200的外部机器或网络通过有线或无线连接的输入输出部313。程序300收纳在存储部312,通过由处理器311执行,以计算机310作为试样处理装置200的控制部发挥功能。

即,程序300以与使用具备用于收容液体的室11的盒100处理试样80的试样处理装置连接的计算机作为进行下列控制的控制部230 发挥功能:由试样处理装置所具备的旋转机构220,使在室11内收容试样80及分散剂82的盒100绕旋转轴221旋转,通过使盒100旋转,搅拌室11内的试样80及分散剂82,使含试样80的分散质分散于分散剂82中的乳液83形成。

程序300可例如记录在计算机读取可能的非瞬时(non-transitory) 的记录介质320而提供。记录在记录介质320的程序300通过由计算机310的未图示的读取装置读取,收纳在计算机310的存储部312。记录介质320不含传送程序300的瞬时的传播信号,含例如不易失性的半导体存储器、光学式或磁式的记录介质等。另外,程序300可由例如传送程序300的瞬时的传播信号,从与计算机310连接的网络330 提供。

在第1实施方式的程序300中,如上所述,通过以计算机310作为进行下列控制的控制部230发挥功能,通过使盒100旋转,搅拌室 11内的试样80及分散剂82,使含试样80的分散质分散于分散剂82 中的乳液83形成,不使用由空气压控制的送液而仅通过使盒100绕旋转轴221旋转,在室11内形成乳液83。结果,在使用盒处理试样时,变得可更简便地制成乳液83。

(试样处理盒)

接下来,参照图1而对于根据第1实施方式的试样处理盒(以下,称为盒100)进行说明。

盒100具备用于导入试样80的试样导入部20。试样导入部20是例如在盒100的外表面形成的开口。成为试样导入部20的开口可被预先塞住,此时盒100的使用时由作业者开封。试样导入部20收纳至少试样80。试样导入部20可收纳试样80和用于对被检测物质MD进行处理的试剂81的混合液。

盒100在内部具备能收容液体的室11。室11可为以液体在盒100 的内部不漏出的方式实质上闭塞的空间。实质上闭塞的空间是指经试样导入部20而容许与盒100的外部连通。室11可以在通常的使用条件下,室11内的液体不向试样导入部20逆流的方式构成。室11能收容导入的试样80、用于对试样80中的被检测物质MD进行处理的试剂81和分散剂82。

盒100以通过绕旋转轴221旋转,搅拌室11内的试样80及分散剂82,形成含试样80的分散质分散于分散剂82中的乳液83的方式构成。盒100也可以通过绕旋转轴221旋转时重复使旋转速度改变的动作,在室11内形成乳液83的方式构成。

如上所述,盒100是例如形成了内部空间的平板形状的部件。盒 100可为无平板形状,也可为块形状或球状等。由于由使旋转速度改变时的惯性力搅拌室11内的分散质和分散剂82,优选以可容易地进行加减速的方式,盒100为轻量,且以不伴随旋转而发生振动的方式不偏心,具体而言优选为圆盘形状。

另外,在盒100内形成的室11的形状不特别限定,优选有沿绕旋转轴221的周方向或以旋转轴221为中心的圆的切线方向扩展的形状。含例如试样80及试剂81的分散质是水系,分散剂82是油系的液体时,如图3一样,分散质和分散剂82在室11内上下分离。因此,由旋转速度的变化搅拌分散质和分散剂82时,分散质和分散剂82接触的界面的面积越大,易在分散质和分散剂82之间施加剪切力。因此,室11优选沿旋转方向的扁平形状。另外,室11沿以旋转轴221为中心的半径方向,则在半径方向的内周侧和外周侧伴随旋转速度的变化的惯性力易偏差。因此,室11优选沿绕旋转轴221的周方向或以旋转轴 221为中心的圆的切线方向扩展。

在第1实施方式的盒100中,通过使盒100绕旋转轴221旋转,伴随盒100的旋转的惯性力作用于室11而搅拌室11内的试样80及分散剂82。伴随搅拌,分散质由分散剂82细细剪切。结果,形成了将含被检测物质MD的分散质的液滴84分散于分散剂82中的乳液83。这样,由于不使用由空气压控制的送液而仅通过使盒100绕旋转轴221 旋转,可在室11内形成乳液83,在使用盒处理试样时,可更简便地制成乳液83。

在图7中所示的例中,盒100含多个室11。即,用于形成含试样80的分散质分散于分散剂82中的乳液83的室11在盒100设多个。由此,可将从不同的生物体采集的多个试样80或超由1个室11的处理量的量的相同的试样80在1个盒100综合处理而形成乳液83。

在图7的例中,盒100含以自旋转轴221的半径方向的距离大致相等的圆弧状排列的多个室11。在图7中,多个室11在以平面视各室11的旋转轨迹互相重合的位置设。盒100旋转时的室11的周方向的移动速度与自各自的室11的旋转轴221的半径方向的距离D1成比例。因此,由于在自各自的室11的旋转轴221的距离不同时,作用于各自的室11的惯性力的大小变得不同,有制成的乳液83的品质在每室11散乱的可能性。与此相比,在图7中,由于通过多个室11以自旋转轴221的半径方向的距离大致相等的圆弧状排列而伴随旋转而作用于各自的室11的惯性力的大小变得大致相等,可使制成的乳液83 的品质更均一。例如,可由旋转抑制在各室11制成的乳液83中所含的液滴84的大小或液滴84的数散乱。

如图8所示,盒100除了试样导入部20及室11之外,还可具备收容处理中使用的液体的液体收容部30。液体收容部30,与室11同样地,是以在盒100内有指定的容积的方式形成的空间。液体收容部 30经在盒100内形成的通路40而与室11连接。

在图8中,作为液体收容部30的一例,显示预先收容有分散剂 82的液体收容部30。即,盒100具备与室11流体连接、预先收容有分散剂82的液体收容部30。进而,盒100以通过绕旋转轴221旋转,从液体收容部30向室11移送分散剂82的方式构成。

具体而言,液体收容部30在盒100中,在比室11更接近于旋转轴221的位置设。通路40在液体收容部30中,在以旋转轴221为中心的半径方向的外周侧的位置设,与室11连接。因此,盒100绕旋转轴221旋转,则向半径方向外侧的离心力作用于收容在液体收容部30 内的分散剂82。结果,分散剂82由通过旋转发生的离心力从液体收容部30向室11内移送。在从液体收容部30向室11内移送液体时,由于发生对于使液体移动而言必要的大小的离心力即可,无使盒100 的旋转速度重复改变的必要。

由这样的构成,由于在盒100预先收容分散剂82,变得无需将分散剂82注入到盒100中的作业。进而,不使用由空气压控制的送液而仅通过使盒100绕旋转轴221旋转,可向室11内移送分散剂82。由这些,在使用盒100处理试样时,可更简便地制成乳液83的

(试样处理方法的具体性构成例)

接下来,对根据第1实施方式的试样处理方法的具体性的构成例进行说明。以下,对使用图9中所示的盒100的例进行说明。

〈盒〉

对盒100的具体性的构成例进行说明。在图9的例中,盒100是由板状并且圆盘形状的基板50构成的盘型的盒。盒100内的各部通过贴合在基板50上形成的贯通孔部和基板50的两面中各自覆盖含贯通孔部的全面的未图示的膜而形成。基板50有由后述的温度调节部260 (参照图17)的盒100的温度调节变得容易的厚度。例如,基板50 的厚度设为数mm,具体而言约1.2mm。

在基板50设孔51和试样处理区域52。在试样处理区域52设多个室11~16、试样导入部20、多个液体收容部30和多个通路40。

孔51在基板50的中心贯通基板50。盒100以孔51的中心与旋转轴221的中心一致的方式设置于试样处理装置200。以下,将以孔 51作为中心的圆的半径方向及周方向各自称为“径方向”及“周方向”。

试样导入部20是用于向盒100内导入试样80的开口。在图9的例中,向试样导入部20注入试样80和用于对被检测物质MD进行处理的试剂81的混合液。混合液预先注入由作业者制作的盒100,但也可在盒100内混合分别注入的试样80和试剂81。

试样80是作为被检测物质MD含核酸的溶液。核酸是例如受试者的DNA。由此,可形成将含作为被检测物质MD的核酸和用于对被检测物质MD进行处理的试剂81的分散质的微小的液滴84分散于分散剂82中的乳液83(参照图3)。结果,通过在液滴84内隔区化各被检测物质MD,可将各被检测物质MD由试剂81确实地处理。

试剂81含使试样80中的核酸扩增的核酸扩增试剂。核酸扩增试剂含DNA聚合酶等的对于PCR必要的物质。再者,试剂81含与试样80中的核酸结合的磁性粒子PM(参照图12)。磁性粒子PM向表面赋予核酸扩增用的引物。作为磁性粒子,含具有磁性的材料作为基材,只要是在通常的受试体测定中使用的粒子即可。例如,作为基材,可利用使用Fe2O3及/或Fe3O4、钴、镍、千枚岩、磁铁矿等的磁性粒子。从试样导入部20向盒100内导入这些试样80、核酸扩增试剂及磁性粒子PM混合的分散质。在分散质中,作为被检测物质MD的核酸与磁性粒子PM结合。

室11~16是能收容液体的室。室11~16在基板50的外周附近在周方向排列。在图9中显示在盒100设有6个室11~16的例。

液体收容部30是收容向室移送的液体的收容空间。液体收容部 30各自经任何的室和通路40而连接。在图9中显示在盒100设有9 个液体收容部30的例。各自的液体收容部30在基板50的中央附近在周方向排列。液体收容部30各自配置于比连接的室更接近于旋转轴 221的位置。因此,通过使盒100绕旋转轴221旋转,能将收容在液体收容部30的液体由离心力从液体收容部30向室移送。

液体收容部30含封闭与室11的连接部分的封闭体30a。液体收容部30内的液体在盒100的制造时预先各自收容在液体收容部30内。封闭体30a是堵塞液体收容部30和外部空间的栓体。封闭体30a通过由试样处理装置200的开封机构250(参照图17)自上按压开栓可能地构成。使封闭体30a开栓之前,液体收容部30内的试剂不在通路 40流动,封闭体30a被开栓,则液体收容部30内的试剂流出。

再者,液体收容部30含收容从试样导入部20注入的混合液的试样收容部38。通过使盒100绕旋转轴221旋转,从试样收容部38向室11移送试样80及试剂81的混合液。

预先收容试剂的液体收容部30均收容能进行1次分的测定的试剂。即,盒100具备收容能进行对于被检测物质的1次分的测定的试剂的液体收容部30。在这样构成的盒100中,每盒100收容旨在1次用完的分别的试剂。

在图9中,以大致相同形状的6个室11、12、13、14、15、16 互相邻接的方式以周方向排列排列,各自经向周方向延伸的通路40 而连接。在这些6个室11~16间,从一侧(室11侧)向另一侧(第 6室16侧),经通路40而各1个顺序地移送被检测物质。

通路40具备向径方向延伸的6个径方向区域41和以周方向延伸的圆弧状的周方向区域42。周方向区域42与6个径方向区域41关联。 6个径方向区域41与各自室11~16关联。各自的液体收容部30经大致向径方向延伸的流路43而与室或通路关联。

由盒100的旋转和磁力的作用的组合,与磁性粒子PM结合的被检测物质MD向通路40及其他室11移送。具体而言,磁性粒子PM 在室11的内部和通路40的圆弧状的周方向区域42之间,由磁力向径方向移动。通过旋转盒100,磁性粒子PM在圆弧状的周方向区域42 内向周方向移动。磁性粒子PM移动至邻的室的位置,则磁性粒子PM 在通路40的圆弧状的周方向区域42和邻的室的内部之间,由磁力向径方向移动。这样,与被检测物质MD结合的磁性粒子PM由利用磁力的作用的径方向移动和由旋转的周方向移动的组合,向室11~16 依次移动。

再者,在图9的例中的试样处理区域52仅形成在基板50的大致 3分之1的区域。但是,不限于其,再者,也可在基板50的其余的3 分之2的区域形成了2个试样处理区域52,基板50上设有3个试样处理区域52。再者,1个试样处理区域52也可经比基板50的3分之 1的区域大的区域形成。

另外,室11及通路40的数及形状不限于图9中所示的。试样处理区域52的各部的构成对应于在试样处理区域52中执行的试样处理测定的内容确定。

〈试样的处理的流〉

接下来,对使用图9的盒100的具体性的测定的例进行说明。

图10显示乳液PCR测定的流的例。图12是对在乳液PCR测定中的反应的进行过程进行说明的图。使用图9中所示的盒100的处理也可含步骤S13~S19,还含步骤S20。

在步骤S11中,由预处理,从血液等的试样提取DNA(图12(A) 参照)。预处理使用专用的核酸提取装置而进行。

在步骤S12中,提取的DNA由Pre-PCR处理扩增(图12(A) 参照)。Pre-PCR处理是将预处理后的提取液中所含的DNA预备扩增至后续的乳液制成处理变得可能的程度的处理。在Pre-PCR处理中混合提取的DNA和含聚合酶或引物的PCR扩增用的试剂,由利用热循环仪的温度控制扩增分散质中的DNA。热循环仪进行对于分散质多次重复改变为多个不同的温度的1个循环的热循环处理。也可根据提取的核酸的浓度,省略Pre-PCR处理。

步骤S13是将含作为被检测物质MD的核酸(DNA)、核酸扩增试剂和成为核酸的载体的磁性粒子PM的分散质分散于分散剂82中的乳液形成工序。用于核酸的扩增反应的试剂含DNA聚合酶等的对于 PCR必要的物质。在步骤S13中,使用盒100而形成了包含含磁性粒子或聚合酶等的试剂和DNA的乳液83(图12(B)参照)。即,形成了在内部含含磁性粒子PM或聚合酶等的核酸扩增试剂和含DNA 的分散质的液滴84,由多数的液滴84构成的分散质分散于分散剂82 中。结果,作为被检测物质MD的DNA有限稀释(对象成分在各微小隔区被稀释成为1或0)而分散于微小隔区内。即,乳液83中的各液滴84成为微小隔区,液滴84以在液滴84内各自含1个左右磁性粒子和作为被检测物质MD的靶DNA分子的方式形成。

步骤S14是对由乳液形成工序形成的液滴84中的核酸(DNA) 进行扩增的乳液PCR工序。在步骤S14中,由利用热循环仪的温度控制,在乳液83的各液滴84内,DNA与磁性粒子PM上的引物结合,扩增(乳液PCR)(图12(C)参照)。由此,在各液滴84内,靶 DNA分子扩增。即,在各液滴84内形成核酸的扩增产物。扩增的核酸在液滴84内经引物而与作为载体的磁性粒子PM结合。

步骤S15是破坏含负载由乳液PCR工序的核酸(DNA)的扩增产物的磁性粒子PM的液滴84的乳液破坏工序。换言之,步骤S15 是使乳液PCR工序后的乳液83破乳化的工序。在步骤S14中在磁性粒子PM上扩增DNA后,在步骤S15中,破坏乳液83,从液滴84 取出含扩增的DNA的磁性粒子PM(乳液破坏)。在乳液的破坏中,使用使乳液破乳化的试剂85(参照图11)。使乳液破乳化的试剂85 含醇或表面活性剂等。

步骤S16是清洗由乳液破坏工序中的破乳化从液滴84取出的磁性粒子PM的清洗工序。在步骤S16中,从液滴84取出的磁性粒子 PM由用于清洗被检测物质MD的试剂86(参照图11)清洗(第1次清洗)。用于清洗被检测物质MD的试剂86例如,含醇。醇除去磁性粒子上的油膜。

步骤S17是将与磁性粒子PM结合的扩增的双链DNA变性为单链的变性工序。在步骤S17中,清洗的磁性粒子PM由用于使核酸变性的试剂87(参照图11)变性。用于使核酸变性的试剂87由pH变化,将扩增的双链DNA变性为单链。用于使核酸变性的试剂87含氢氧化钠水溶液等的碱性的试剂。

步骤S18是使DNA的扩增产物和标记物质反应的杂交工序。变性工序后,在步骤S18中,在磁性粒子PM上变性为单链的DNA由含与核酸的扩增产物反应的标记物质LS的试剂88(参照图11),与标记物质LS杂交(杂交)(图12(D)参照)。标记物质LS例如,含发荧光的物质。标记物质LS以与检测对象的DNA特异性地结合的方式设计。

在步骤S19中,负载与标记物质LS结合的DNA的磁性粒子PM 由用于清洗被检测物质MD的试剂89(参照图11)清洗(第2次清洗)。在第2次清洗工序中,例如,作为清洗液使用PBS(磷酸缓冲生理盐水)。PBS除去未与DNA结合的未反应的标记物质(含非特异性地吸附在磁性粒子的标记物质)。

在步骤S20中,经杂交的标记物质LS而检测作为被检测物质MD 的DNA。DNA例如,用流式细胞仪检测。在流式细胞仪中,含与标记物质结合的DNA的磁性粒子流经流动池,向磁性粒子照射激光。检测由照射的激光发出的标记物质的荧光。

DNA也可由图像处理检测。例如,含与标记物质结合的DNA的磁性粒子分散于平板载玻片上,分散的磁性粒子由摄像单元拍摄。基于拍摄的图像,对发荧光的磁性粒子数进行计数。这样,在本实施方式的试样处理方法中,也可用含用于对试样80中所含的被检测物质MD进行标记的标记物质LS的试剂88处理被检测物质MD,检测基于标记物质LS的信号。另外,本实施方式的试样处理装置200也可具备用于检测基于标记物质LS的信号的检测部。

接下来,参照图11而对使用盒100的处理进行详细说明。

盒100含形成了乳液83的室11。如图11所示,步骤S13~S15 在室11中进行。

液体收容部30含用于收容分散剂82的第1液体收容部31。分散剂82含对于试样80及试剂81有非混合性的油。从而,在此例中,分散质是水系,分散剂82是油系。分散剂82在盒100的制造时,预先收容在第1液体收容部31。

〈乳液形成〉

在步骤S13中,首先,从试样导入部20向试样收容部38内注入含作为被检测物质MD的核酸(DNA)、核酸扩增试剂和成为核酸的载体的磁性粒子PM的分散质。另外,第1液体收容部31的封闭体 30a被开封。进而,盒100绕旋转轴221旋转。由伴随旋转的离心力,从第1液体收容部31向室11移送分散剂82,从试样收容部38移送分散质。由此,不是乳液83的仅生成,使分散剂82收容于室11的作业,也可仅通过使盒100旋转来进行。因此,由于例如无向第1液体收容部31加空气压的必要,可更简便地进行试样的处理。

室11中收容有导入的试样80、用于对试样80中的被检测物质 MD进行处理的试剂81和分散剂82。进而,盒100通过在绕旋转轴 221旋转时,重复使旋转速度改变的动作,在室11内形成含试样80 及试剂81的分散质分散于分散剂82中的乳液83。

其中,由盒100的旋转,在室11内形成含收容1分子或1个被检测物质MD的分散质的液滴84的乳液83。由此,如图12所示,可将试样中所含的1个1个被检测物质MD各自在乳液83中所含的液滴 84中隔区化而确实地处理。结果,由于即使试样中仅含极微量的被检测物质MD,也可以高精度处理,在检测经处理的被检测物质MD时,也可使检测精度提升。

〈乳液PCR〉

在步骤S14中,形成了乳液83之后,通过使盒100的温度在多个温度范围周期性地改变,对分散质中所含的核酸进行扩增。由此,可在乳液83中所含的液滴84(参照图12)中进行热循环处理而使核酸有效扩增。

热循环由试样处理装置200所具备的温度调节部260(参照图13) 在室11内进行。温度调节部260至少由通过加热使盒100的温度改变的装置构成。温度调节部260例如,可由加热器等的加热装置或Peltier 元件等的能进行加热及冷却的装置构成。在步骤S14中,通过使温度调节部260与盒100接触,使盒100的温度改变。由此,与非接触地加热盒100时比,由于通过使温度调节部260与盒100接触而可有效率地传递热,可容易地使盒100的温度改变。

温度调节部260从盘状的盒100的上表面及下表面的一方或两方,与盒100接触而进行温度调节。在例如图13中,使用以平面视沿以旋转轴221为中心的周方向的形状的温度调节部260。在图13的例中,温度调节部260在以平面视与室11的旋转轨道重叠的带状的范围设。温度调节部260以周方向设多个,形成各自设定为不同的温度的温度区TZ。在图13中,3个温度调节部260在周方向120度的范围形成等分割的3个温度区TZ1~TZ3。温度区TZ1~TZ3在例如30℃以上 90℃以下的范围内,设定为低温、中温、高温的3个温度。通过使盒 100旋转而将形成乳液83的室11顺序地配置于各自的温度区TZ1~ TZ3,进行热循环。温度调节部260的数(即,温度区TZ的数)不限于其,也可为4个以上。在图13的构成中,由于可使各自的温度调节部260的设定温度设为一定,可容易并且高精度地温度控制。

另外,在例如图14中,以平面视,由1个温度调节部260进行热循环。在图14的例中,温度调节部260在以平面视与室11的旋转轨道重叠的位置设。温度调节部260能在形成的温度区TZ内收1个室 11。温度调节部260由Peltier元件等形成能在可变范围内向任意的温度变更的温度区TZ。在图14中,1个温度调节部260形成以3阶段温度改变的温度区TZ。温度区TZ在例如30℃以上90℃以下的范围内,改变为低温、中温、高温的3阶段的温度T1~T3。使盒100旋转而将形成乳液83的室11配置于与温度区TZ重叠的位置,通过使温度调节部260的温度重复改变,进行热循环。温度调节部260改变的温度的阶段数不限于其,也可为4阶段以上。在图14的构成中,由于可由1个温度调节部260处理1个室11,可使用于进行热循环处理的装置构成简便化。再者,设多个室11时,也设多个温度调节部260,就能同时实施热循环处理。

由这样的构成,在乳液83中进行PCR处理。热循环处理之后,从盒100放开温度调节部260。盒100返回室温。

〈乳液破坏〉

回到图11,液体收容部30含与室11连接、用于收容由混合使乳液破乳化的试剂85的第2液体收容部32。在步骤S15中,对分散质中所含的核酸进行扩增之后,从第2液体收容部32向形成乳液83的室11移送使乳液破乳化的试剂85。

首先,对分散质中所含的核酸进行扩增之后,第2液体收容部32 的封闭体30a被开封。由此,可由封闭体30a防止从第2液体收容部 32非本意地输送使乳液破乳化的试剂85。因此,可在确实地形成乳液 83而扩增核酸之后,进行乳液83的破乳化。

接下来,通过使盒100绕旋转轴221旋转,从第2液体收容部32 向形成乳液83的室11移送使乳液破乳化的试剂85。由此,可由使乳液破乳化的试剂85取出在乳液83中所含的液滴84中扩增的核酸。此时,与由空气压等输送时不同,由于仅通过使盒100绕旋转轴221旋转,可向室11输送使乳液破乳化的试剂85,可简便地使乳液83破乳化。

向室11内移送使乳液破乳化的试剂85,则破坏乳液83,含扩增的核酸的磁性粒子PM从液滴84取出。也可在使盒100旋转的同时,使旋转速度改变而在室11内搅拌。由此,搅拌使乳液破乳化的试剂 85和乳液83,可有效率地进行破乳化。

〈第1次清洗〉

盒100含与室11连接的第2室12。液体收容部30含与第2室12 连接、用于收容用于清洗被检测物质MD的试剂86的第3液体收容部33。在步骤S16中,用于清洗被检测物质MD的试剂86至少对分散质中所含的核酸进行扩增之后,通过使盒100绕旋转轴221旋转,从第3液体收容部33向第2室12移送。

例如,对分散质中所含的核酸进行扩增之后,在使第2液体收容部32的封闭体30a开封的相同的时机,第3液体收容部33的封闭体 30a被开封。由此,可由封闭体30a防止从第3液体收容部33非本意地输送用于清洗被检测物质MD的试剂86。另外,使第2液体收容部 32和第3液体收容部33在相同的时机开封,则为了送液而使盒100 旋转的动作1次完成。

如上所述,用于清洗被检测物质MD的试剂86含醇。在步骤S14 中,在扩增分散质中所含的核酸时,盒100的温度在30℃以上90℃以下的范围改变。因此,用于清洗被检测物质MD的试剂86受温度变化的影响,则有醇气化的可能性。从而,通过在扩增核酸之后向第2 室12输送用于清洗被检测物质MD的试剂86而可抑制温度变化对用于清洗被检测物质MD的试剂86的影响。此构成在含用于清洗被检测物质MD的试剂86是醇时,在可抑制醇的气化的点特别有效。

在步骤S16中,向室11移送使乳液破乳化的试剂85之后,通过对于盒100加磁力,从室11向第2室12移送从破乳化的液体中与磁性粒子PM结合的核酸。由于负载核酸的磁性粒子PM由破乳化从液滴84取出,如上所述,由磁力和盒100的旋转磁性粒子PM向第2 室12移动。

在第2室12中,负载核酸的磁性粒子PM由用于清洗被检测物质 MD的试剂86清洗。

在步骤S16中,这样,不由空气压等输送,仅通过从外部向盒100 加磁力,可简便地向第2室12移送被检测物质MD。另外,在由空气压等输送时,变得随液体移送室11内的被检测物质MD,但通过由磁力的移送,可留液体而向第2室12移送仅与磁性粒子PM结合的被检测物质MD。结果,抑制向第2室12移送不必要的成分而有效率地可进行在第2室12的核酸的清洗。

〈变性〉

盒100含与第2室12连接的第3室13。液体收容部30含与第3 室13连接、用于收容用于使核酸变性的试剂87的第4液体收容部34。

在步骤S17中,用于使核酸变性的试剂87在至少对分散质中所含的核酸进行扩增之后,通过使盒100绕旋转轴221旋转,从第4液体收容部34向第3室13移送。由此,在步骤S17中,在盒100中,对于进行在第3室13清洗核酸的处理之后的核酸而还可进行使核酸变性的处理。进而,在进行使核酸变性的处理时,也由于不是使用空气压等的送液,而仅通过使盒100绕旋转轴221旋转而可输送到第3室 13,可简便地进行使核酸变性的处理。

第4液体收容部34的封闭体30a例如,对分散质中所含的核酸进行扩增之后,在与使第2液体收容部32及第3液体收容部33的各封闭体30a开封的相同的时机开封。由此,可由封闭体30a防止从第4 液体收容部34非本意地输送用于使核酸变性的试剂87。另外,使第2液体收容部32、第3液体收容部33及第4液体收容部34在相同的时机开封,则为了送液而使盒100旋转的动作1次完成。

在步骤S17中,向室11移送用于使核酸变性的试剂87之后,通过对于盒100加磁力,从第2室12向第3室13移送与清洗处理完了的磁性粒子PM结合的核酸。如上所述,磁性粒子PM由磁力和盒100 的旋转向第3室13移动。

在第3室13中,用于使核酸变性的试剂87将扩增的双链DNA 变性为单链。

〈杂交〉

盒100含与第3室13连接的第4室14。液体收容部30含与第4 室14连接、用于收容含与核酸的扩增产物反应的标记物质LS的试剂 88的第5液体收容部35。

在步骤S18中,含标记物质LS的试剂88对分散质中所含的核酸进行扩增之后,通过使盒100绕旋转轴221旋转,从第5液体收容部 35向第4室14移送。

第5液体收容部35的封闭体30a例如,对分散质中所含的核酸进行扩增之后,在与使第2液体收容部32~第4液体收容部34的各封闭体30a开封的相同的时机开封。使第2液体收容部32~第5液体收容部35在相同的时机开封,则为了送液而使盒100旋转的动作1次完成。

在步骤S18中,向第4室14移送含标记物质LS的试剂88之后,通过对于盒100加磁力,从第3室13向第4室14移送与变性处理完了的磁性粒子PM结合的核酸。如上所述,磁性粒子PM由磁力和盒 100的旋转向第4室14移动。

在步骤S18中,通过使盒100的温度改变,使向第4室14移送的核酸和标记物质LS反应。由此,在盒100中,不仅是使核酸变性的处理,还可进行为了检测作为被检测物质MD的核酸而进行标记的处理。进而,在进行对核酸进行标记的处理时,也由于不是使用空气压等的送液,仅通过使盒100绕旋转轴221旋转而可输送到第4室14,可简便地进行对核酸进行标记的处理。

杂交的处理可由进行上述PCR的热循环处理的温度调节部260 (参照图13、图14)进行。即,温度调节部260通过至少由加热升高盒100的温度,使第4室14内的核酸和标记物质LS反应。由此,仅通过对至少盒100进行加热而可在盒100内进行使核酸扩增的处理和对核酸进行标记的处理的两方。因此,不仅是乳液83的制成,使用盒100而使核酸扩增的处理及对核酸进行标记的处理,也更简便地可进行。

在第4室14中,通过含标记物质LS的试剂88中的标记物质LS 与被磁性粒子PM负载的作为被检测物质MD的DNA结合,对靶DNA 进行标记(参照图12)。

〈第2次清洗〉

盒100含与第4室14连接的第5室15。液体收容部30含与第5 室15连接、用于收容用于清洗被检测物质MD的试剂89的第6液体收容部36。在步骤S19中,用于清洗被检测物质MD的试剂89至少对分散质中所含的核酸进行扩增之后,通过使盒100绕旋转轴221旋转,从第6液体收容部36向第5室15移送。

第6液体收容部36的封闭体30a例如,在与使第2液体收容部 32~第5液体收容部35的封闭体30a开封的相同的时机开封。由此,为了送液而使盒100旋转的动作1次完成。

在步骤S19中,向第5室15移送用于清洗被检测物质MD的试剂89之后,通过对于盒100加磁力,从第4室14向第5室15移送与标记的核酸结合的磁性粒子PM。如上所述,磁性粒子PM由磁力和盒100的旋转向第5室15移动。

在第5室15中,与标记的核酸结合的磁性粒子PM由用于清洗被检测物质MD的试剂89清洗。

〈检测〉

盒100含与第5室15连接的第6室16。液体收容部30含与第6 室16连接、用于收容用于使被检测物质MD分散的试剂90的第7液体收容部37。在图9及图11的例中显示设有2个第7液体收容部37 的例。这样,也可设多个收容相同的试剂的液体收容部。由此,可容易地确保必要的液量。用于使被检测物质MD分散的试剂90是例如 PBS(磷酸缓冲生理盐水)。

在步骤S20中,用于使被检测物质MD分散的试剂90至少对分散质中所含的核酸进行扩增之后,通过使盒100绕旋转轴221旋转,从第7液体收容部37向第6室16移送。

第7液体收容部37的封闭体30a例如,在与使第2液体收容部 32~第6液体收容部36的封闭体30a开封的相同的时机开封。由此,为了送液而使盒100旋转的动作1次完成。

使用流式细胞仪而进行检测时,例如作业者在第6室16的内部穿刺移液器(未图示),或使样品回收用的封闭体(未图示)开封而回收样品。通过第6室16被指定量的PBS填满,可确保检测含标记的核酸的磁性粒子PM时必要的样品液量。回收的样品中的标记物质LS 由流式细胞仪检测。

使用摄像单元而进行检测时,拍摄例如盒100的第6室16而由图像处理进行磁性粒子的计数。通过第6室16被指定量的PBS填满而成为含标记的核酸的磁性粒子PM在第6室16内充分地分散的状态。

由如上所述的构成,在第1实施方式的试样处理方法中,使用1 个盒100而实施图10的步骤S13~S19中所示的处理或步骤S13~S20 中所示的处理。

(试样处理装置的具体性构成例)

接下来,参照图15~图19而显示使用盒100实施上述的试样处理方法的试样处理装置200的具体性的构成例。即,试样处理装置200 可对于作为被检测物质MD的核酸(DNA)进行乳液形成(步骤S13)、乳液PCR(步骤S14)、乳液破坏(步骤S15)、第1次清洗(步骤 S16)、变性(步骤S17)、杂交(步骤S18)、及第2次清洗(步骤 S19)的各处理。试样处理装置200如后所述,也可为能执行检测处理 (步骤S20)。

如图15及图16所示,试样处理装置200的筐体201具备本体部 202和盖部203。盖部203以覆盖本体部202的上表面部的大致全面的方式设。在本体部202的上表面部设配置盒100的设置部210。盖部 203对于本体部202而上下转动,能开闭地设为开放图15中所示的设置部210的状态和图16中所示的覆盖设置部210的状态。本体部202 中收容有旋转机构220及控制部230。

〈试样处理装置的内部结构〉

如图17所示,设置部210作为从下方支持盒100的支持部件构成。设置部210在旋转机构220的旋转轴221的上端部设。设置部210是例如转台,通过嵌合在盒100的孔51(参照图9),使盒100的中心和旋转轴221的位置相合。在盖部203设夹持器204。在夹持器204 闭合盖部203的状态下,旋转可能地支持设置于设置部210上的盒100 的上表面的中心部。

在图17的例中,试样处理装置200含旋转机构220、移送机构240 和开封机构250。

旋转机构220具备旋转轴221和由电动电机构成的驱动部222。旋转机构220驱动驱动部222,使设置于设置部210的盒100以旋转轴221中心旋转。旋转机构220含用于检测驱动部222的旋转角度的编码器223和检测旋转角度的原点位置的原点传感器224。通过以由原点传感器224的检测位置作为基准,基于编码器223的检测角度而驱动驱动部222,能向任意的旋转位置移动盒100。

旋转机构220以通过使盒100以旋转轴221为中心旋转,执行试样的处理的至少一部分的方式构成。即,旋转机构220由旋转,在盒 100的内部进行乳液的形成、试样的移送、向各室11~16(参照图11) 的试剂的移送、试剂和试样的搅拌、各室11~16之间的磁性粒子PM 向周方向的移送等的处理。

移送机构240具备磁铁241,由磁铁移动机构242,有使盒100 的内部的磁性粒子PM向径方向移动的功能。移送机构240配置于比设置部210更下方。磁铁移动机构242由直动机构的组合构成,以向径方向移动磁铁241的方式构成。另外,磁铁移动机构242以向相对于盒100接近或远离的方向移动磁铁241的方式构成。通过使磁铁241 接近,盒100内的磁性粒子PM被集磁,通过使磁铁241隔离,解除磁性粒子PM的集磁。移送机构240通过在集磁状态下向径方向移动磁铁241,可向室的内外移动盒100内的磁性粒子PM(参照图11)。由此,移送机构240向与室11连接的第2室12移送磁性粒子PM。同样地,移送机构240进行向此外的室的磁性粒子PM的移送。

开封机构250具备能从配置于设置部210的盒100的上方向盒100 进退的针部件251。开封机构250由螺线管或电机等的驱动源,使针部件251进退。由旋转机构220,在针部件251的正下方的位置配置封闭体30a(参照图9),则开封机构250使针部件251突出而与盒100抵接,由按压使盒100内的封闭体30a开封。开栓后,开封机构 250向自盒100隔离而成为非接触的退避位置移动针部件251。

另外,试样处理装置200具备通过使盒100的温度改变而使乳液 83中的分散质中所含的被检测物质MD和试剂81反应的温度调节部 260。由此,可在将被检测物质MD与用于对被检测物质MD进行处理的试剂81一同收容在分散质的液滴84(参照图12)中而隔区化的状态下,由温度变化使被检测物质MD和试剂81确实地反应。另外,与在盒100的设置环境的温度下使被检测物质MD和试剂81的反应自然进行时比较,在乳液83中所含的液滴84中,也可利用温度变化而使被检测物质MD和试剂81有效反应。

温度调节部260在配置于设置部210的盒100的正上的位置设。温度调节部260以在盖部203的内表面与盒100面对的方式配置。温度调节部260的平面的的形状可采用图13或图14中所示的构成。温度调节部260由加热器或Peltier元件构成。

1个或多个温度调节部260通过使盒100的温度在多个温度范围周期性地改变,对分散质中所含的核酸进行扩增。由此,在乳液83 中所含的液滴84中,可进行所谓的热循环处理而使核酸有效扩增。

温度调节部260朝与对于配置在设置部210的盒100接触的位置离开的位置相对移动可能地构成。在图17的例中,温度调节部260 可由移动机构261,向与盒100的表面接触的位置和自盒100的表面离开的位置移动。移动机构261含例如螺线管或电机等的驱动源。温度调节部260在与盒100接触的状态下使盒100的温度改变。由此,与非接触地加热盒100时比,由于通过使温度调节部260与盒100接触而可有效率地传递热,可容易地使盒100的温度改变。

再者,固定地设有温度调节部260,设置部210也可为向相对于温度调节部260接近或离间的方向移动盒100的构成。再者,试样处理装置200具备温度传感器262。温度传感器262例如由红外线检测盒100的温度。基于温度传感器262的检测结果而控制温度调节部260。

试样处理装置200也可具备检测基于标记物质LS的信号的检测部270。检测部270如上所述,可为例如流式细胞仪、摄像单元(摄像部)等。在图17中,检测部270显示由摄像部构成的例。检测部 270经在本体部202的上表面形成的开口而配置于与配置在设置部210的盒100面对的位置。由此,检测部270拍摄第6室16(参照图11) 内。通过对摄像图像进行图像处理,能识别第6室16内的各磁性粒子 PM,取得起因于与磁性粒子PM结合的标记物质LS的荧光色。

试样处理装置200也可不具备检测部270。此时,如图19所示,将处理完了的盒100从试样处理装置200取出,使用别的测定装置而进行检测处理。

图18显示试样处理装置200的控制的的构成。

试样处理装置200具备控制部230。控制部230含例如,处理器和存储器。处理器例如,由CPU、MPU、FPGA等构成。存储器例如,由ROM及RAM等构成。控制部230从试样处理装置200的各部接收信号,控制试样处理装置200的各部。

试样处理装置200具备存储部231。在存储部231中,存储用于以处理器作为试样处理装置200的控制部230发挥功能的程序等。存储部231例如,由闪存、硬盘等构成。

试样处理装置200具备通信部232。通信部232能向外部机器的信息的发送及自外部机器的信息的接收。通信部232含例如通信模块、外部连接用的接口等。通信部232由有线或无线通信能进行与能与试样处理装置200通信的终端600(参照图19)的通信、及经网络的与服务器650(参照图19)的通信。试样处理装置200通过使用外部的终端600,能进行各种操作,或各种信息的显示地构成。终端600含例如,平板型终端或,智能手机等的携带信息终端、PC(个人计算机) 等的信息终端。

控制部230控制试样处理装置200的各部而使第1实施方式的试样处理方法执行。

〈试样处理装置的动作〉

接下来,参照图9~图17而对于试样处理装置200的处理动作进行说明。试样处理装置200的处理动作由控制部230控制。再者,作为准备作业,含进行图10的步骤S11及步骤S12之后的试样80及试剂81的分散质由作业者向盒100内注入。进而,盒100设置于试样处理装置200的设置部210(参照图15),闭合盖部203(参照图16)。在此状态下,开始处理动作。

在步骤S13中,控制部230以由旋转,向室11移送收容在盒100 所具备的试样收容部38的分散质的方式控制旋转机构220。另外,控制部230以使第1液体收容部31的封闭体30a开封的方式控制开封机构250。开封后,控制部230以由旋转,向室11移送收容在盒100所具备的第1液体收容部31的分散剂82的方式控制旋转机构220。分散质及分散剂82由离心力向室11内移送。

由此,不仅是乳液83的生成,使分散剂82收容于室11的作业,也可仅通过由旋转机构220使盒100旋转来进行。因此,由于例如无向第1液体收容部31加空气压的必要,可更简便地进行试样的处理。另外,因为由于从液体收容部30向室11输送分散剂82,设加无空气压的机构等的必要,可使装置构成进一步简便化。

控制部230通过以重复使盒100的旋转速度改变的动作的方式控制旋转机构220,在室11内形成含试样80及试剂81的分散质分散于分散剂82中的乳液83。

例如,控制部230以形成乳液83时,重复使盒100的旋转方向以 165毫秒以上330毫秒以下的周期反转的动作的方式控制旋转机构 220。由此,仅通过基于后述的实验的结果,重复使旋转方向以165 毫秒以上330毫秒以下的周期反转的动作,可处理被检测物质MD而制成对于检测适宜的乳液83。

控制部230由盒100的旋转,在室11内形成含收容1分子或1 个被检测物质MD的分散质的液滴84的乳液83。由此,可将试样中所含的1个1个被检测物质MD各自在乳液83中所含的液滴84中隔区化而确实地处理。结果,由于即使试样中仅含极微量的被检测物质 MD,也可以高精度处理,在检测经处理的被检测物质MD时,也可使检测精度提升。

在步骤S14中,控制部230以使盒100的温度在30℃以上90℃以下的范围改变的方式控制温度调节部260。由此,进行乳液PCR处理。在例如图13的构成例中,控制部230以3个温度调节部260形成各自的不同的温度区TZ1~TZ3的方式控制。进而,以向各温度区TZ1~TZ3依次移动室11的方式控制旋转机构220。在各温度区TZ中,控制部230以使温度调节部260和盒100接触的方式控制移动机构261,将室11内控制为期望温度。

在室11中形成乳液83,使盒100的温度改变而使被检测物质MD 和试剂81反应之后,控制部230以使第2液体收容部32的封闭体30a 开封的方式控制开封机构250。由此,可由封闭体30a防止从第2液体收容部32非本意地输送使乳液破乳化的试剂85。因此,通过设使封闭体30a开封的开封机构250而可在确实地形成乳液83而扩增核酸之后,进行乳液83的破乳化。同样地,控制部230以使第3液体收容部33~第7液体收容部37的各自的封闭体30a开封的方式控制开封机构250。

在步骤S15中,控制部230以由旋转,从盒100所具备的第2液体收容部32向形成乳液83的室11移送使乳液破乳化的试剂85的方式控制旋转机构220。由使乳液破乳化的试剂85,室11内的乳液83 被破乳化。由此,不仅是形成乳液83的处理,使乳液83破乳化的处理,也可由试样处理装置200在盒100中进行。在此时,也因为由于向室11输送使乳液破乳化的试剂85,无设加空气压的机构等的必要,可使装置构成进一步简便化。

此时、在第3液体收容部33~第7液体收容部37的封闭体30a 也被开封时,可以1次的送液动作收容在这些液体收容部30的各试剂也各自输送到对应的室。

这样,由于控制部230以至少由温度调节部260使被检测物质 MD和试剂81反应之后,使收容用于清洗被检测物质MD的试剂86 的第3液体收容部33的封闭体30a开封的方式控制开封机构250,在使用温度调节部260由温度变化扩增之后,向第2室12输送用于清洗被检测物质MD的试剂86。由此,可抑制温度变化对用于清洗被检测物质MD的试剂86的影响。

在步骤S16中,控制部230以乳液83被破乳化之后,从室11向第2室12移送被检测物质MD的方式控制移送机构240。即,控制部 230由移送机构240的磁力使磁性粒子PM向径方向移动的同时,由旋转机构220的旋转使盒100相对于磁性粒子PM而向周方向移动。与被检测物质MD结合的磁性粒子PM由磁力和盒100的旋转的组合,经通路40向第2室12移动。控制部230由用于清洗被检测物质MD 的试剂86清洗磁性粒子PM。由此,可在室11内扩增作为被检测物质MD的核酸,在由破乳化从液滴84中取出核酸之后,在第2室12 中进行核酸的清洗。

再者,控制部230在由温度调节部260使被检测物质MD和试剂 81反应之后(步骤S14之后),使收容用于使核酸变性的试剂87的液体收容部30的封闭体30a开封。因此,在使用温度调节部260而由温度变化扩增之后向第3室13输送用于使核酸变性的试剂87。由此,可抑制温度变化对用于使核酸变性的试剂87的影响。

在步骤S17中,控制部230以向第3室13移送收容在第2室12 的被检测物质MD的方式控制移送机构240。在第3室13中,由旋转,从第4液体收容部34移送用于使核酸变性的试剂87。结果,在第3 室13中,与磁性粒子PM结合的核酸(双链DNA)变性为单链。由此,在盒100中,对于进行在第2室12清洗核酸的处理之后的核酸而还可进行使核酸变性的处理。进而,在进行使核酸变性的处理时,也由于不是使用空气压等的送液,而仅通过使盒100绕旋转轴221旋转而可输送到第3室13,可以简便的装置构成,进行使核酸变性的处理。

再者,控制部230由温度调节部260使被检测物质MD和试剂81 反应之后(步骤S14之后),使收容用于使核酸变性的试剂87的液体收容部30的封闭体30a开封。因此,在使用温度调节部260而由温度变化扩增之后向第3室13输送用于使核酸变性的试剂87。由此,可抑制温度变化对用于使核酸变性的试剂87的影响。

在步骤S18中,控制部230以向第4室14移送收容在第3室13 的被检测物质MD的方式控制移送机构240。在第4室14中,由旋转,从第5液体收容部35移送含与核酸的扩增产物反应的标记物质LS的试剂88。由此,在盒100中,不仅是使核酸变性的处理,还可进行为了检测作为被检测物质MD的核酸而进行标记的处理。进而,在进行对核酸进行标记的处理时,也由于不是使用空气压等的送液,而仅通过由旋转机构220使盒100旋转而可输送到第4室14,可用简便的装置构成进行对核酸进行标记的处理。

控制部230通过控制温度调节部260而使盒100的温度升高,使第4室14内的核酸和标记物质LS反应。结果,控制部230在第4室 14中进行核酸的扩增产物的标记处理。由此,可将使核酸扩增的处理和对核酸进行标记的处理这两方由共同的温度调节部260在盒100内进行。因此,不仅是乳液83的制成,使用盒100而使核酸扩增的处理及对核酸进行标记的处理,也以简便的装置构成,更简便地可进行。

在步骤S19中,控制部230以向第5室15移送收容在第4室14 的被检测物质MD的方式控制移送机构240。在第5室15中,由旋转,从第6液体收容部36移送用于清洗被检测物质MD的试剂89。结果,控制部230在第5室15中清洗标记处理后的磁性粒子PM。

在步骤S20中,控制部230以向第6室16移送收容在第5室15 的被检测物质MD的方式控制移送机构240。在第6室16中,由旋转,从第7液体收容部37移送用于使被检测物质MD分散的试剂90 (PBS)。结果,控制部230在第6室16中,将标记处理后的磁性粒子PM分散于试剂中。

控制部230控制旋转机构220而在检测部270的摄像视野内配置第6室16。控制部230由检测部270取得第6室16内的图像。控制部230基于取得的图像,对各磁性粒子PM的数进行计数,取得各自的磁性粒子PM的荧光色及荧光强度。控制部230例如,从取得的磁性粒子PM的荧光色及荧光强度制作正常的DNA和变异DNA的散点图。

试样处理装置200不具备检测部270的情况,控制部230不执行步骤S20,使处理结束。此时,如图19所示,作业者将处理完了的盒 100从试样处理装置200取出,使用别的测定装置而进行检测。

[实施例]

接下来,对于本申请发明人对于根据第1实施方式的乳液制成进行的实验(实施例)进行说明。本申请发明人对于使盒100的旋转速度改变的周期、收容在室11内的液体(分散质及分散剂82)的量、旋转方向、旋转速度而在各种条件下进行实验。进而,尝试得到的实验结果和比较例的比较。以下,对于各自的实验进行说明。

试样在实施例及比较例中共同使用制成向野生型的DNA混入1%变异型的DNA的核酸溶液。

(比较例)

比较例是本申请发明人由手动方法使用流式细胞仪测定进行图10的至步骤S13~S19的处理的样品。制成含试样(核酸溶液)和核酸扩增试剂的分散质和分散剂的乳液,实施PCR。对于由乳液破坏处理取出的各DNA杂交与野生型和变异型各自特异性地结合的标记物质之后,由流式细胞仪检测。

图20显示根据比较例的散点图401。散点图是,纵轴显示表示野生型DNA的荧光强度,横轴显示表示变异型DNA的荧光强度。由与纵轴及横轴各自平行的2直线分区的区Q1中所含的标绘点表示野生型DNA,区Q3中所含的标绘点表示变异型DNA。相对于区Q1~Q4 中所含的总标绘点数,野生型DNA是98.3%、变异型DNA是1.07%。

(实施例1:旋转速度的变化周期)

制成图25中所示的试验用的盒100S,在重复使盒100S的旋转方向反转的动作的条件下,在使反转的周期不同的4条件下进行乳液的制成。旋转速度的变化周期T设定为T=1320毫秒、660毫秒、330毫秒、165毫秒、的4条件。在各自的周期T中的旋转速度的变化坐标图411~414示于图21。

使用的室11的容积是284.62μL。向室11注入90μL试样(核酸溶液)和核酸扩增试剂的混合液和分散剂。室11中所占的分散质及分散剂82的合计体积的比例是约30%。重复在1分钟之间使盒100S的旋转速度以各自的变化周期T改变的动作。

图22显示在实施例1的各自的周期T中制成的乳液83的显微镜图像402~405。从显微镜图像确认到,在任何的周期T中,也在分散剂82中形成分散质的液滴84分散的乳液83。另外,如从图像得知得知,有周期T越变小、液滴的尺寸(图像中的直径)越变小的倾向。

对于各自的周期T而取得各自25个显微镜图像402~405,将25 个显微镜图像中所含的液滴84由图像处理计数。在各周期T中的,总液滴数如下。

T=1320毫秒液滴数:410个

T=660毫秒液滴数:766个

T=330毫秒液滴数:2440个

T=165毫秒液滴数:2726个

从以上的结果确认到,在实施例1中,首先,即使使周期T改变,也可形成乳液83。进而确认到,通过使周期T改变,可控制乳液83 中所含的液滴84的尺寸、及个数。其中,为了形成含收容1分子或1 个靶DNA的分散质的液滴84的乳液83,统计学地确定相对于试样 80中所含的DNA的个数而用于大部分的液滴84变得含0个或1个 DNA的液滴84的个数。即,可制成相对于试样80中所含的DNA的个数而含统计学地确定的个数的液滴84的乳液83,则对于各液滴84 而有限稀释的靶DNA的数字处理(即,对于试样中所含的1个1个DNA的PCR处理)变得可能。根据实施例1提示,通过适合地设定盒100S的旋转速度的变化周期T,对应于试样中所含的DNA浓度的靶DNA的数字处理变得可能。

接下来,对以各自的周期T制成的乳液83实施PCR处理,对于由乳液破坏处理取出的各DNA杂交与野生型和变异型各自特异性地结合的标记物质之后,由流式细胞仪检测。进而,制成与上述比较例 (参照图20)同样的散点图。图23显示在各自的周期T的条件下处理时的散点图406~409。实验多次进行,示各自2个散点图406~409。

以比较例中检测的变位DNA数作为Mr,以实施例1中检测的变位DNA数作为Mt之时,以自比较例的偏离率作为(Mr-Mt)/Mr求出。偏离率成为如下所述。确认到关注于变异型DNA的检测数的偏离率,则对于本次实验中使用的试样的DNA浓度,最优选周期T=330 毫秒(偏离率:16%)的条件,接下来优选周期T=165毫秒(偏离率: 28%)的条件。结果确认到,通过对于试样的DNA浓度适合地设定使盒100S的旋转速度改变的周期T,可制成对于DNA检测而言更适宜的乳液。特别是,以165毫秒以上330毫秒以下的周期形成的液滴 84的个数变多,仅该部分能提高试样的DNA浓度。结果,由于由1 次的处理有效率地处理更多的DNA变得检测可能而优选。

(实施例2)

在使盒100S的室11中所占的分散质及分散剂82的合计体积的比例Rv不同的4条件下进行乳液的制成。室11的容积是284.62μL。合计体积的比例Rv设定为10%、30%、50%、70%、的4条件。在任何的条件中,也含试样(核酸溶液)和核酸扩增试剂的分散质和分散剂的体积比例维持为分散质:分散剂=2:7,使液量不同。在乳液制成中,在重复使盒100S的旋转方向反转的动作的条件下,设为旋转速度的变化周期T=330毫秒。重复在1分钟之间使盒100S的旋转速度以周期T改变的动作。

图25显示乳液制成后的室11内的状况的模式图。实验多次进行,示各自2个在各条件下的模式图。在室11内未附阴影的部分是空气所占的区域。确认到在任何的合计体积的比例Rv中,均形成了附阴影显示的乳液83。

接下来,制成进行与合计体积的比例Rv设定为10%、30%、50%、 70%的4条件,对于各自的比例Rv,将旋转速度的变化周期T设为 T=1320毫秒、660毫秒、330毫秒、165毫秒、的4条件而制成乳液 83时的上述实施例1同样的处理而检测的DNA的散点图。进而,在得到各自算出的各散点图中的相对于比较例的野生型DNA的检测数的偏离率、相对于比较例的变位DNA的检测数的偏离率。偏离率的算出结果示于图26。

从图26的结果确认到,由比例Rv和周期T的适合的组合得到与比较例同等的检测精度。即,以合计体积的比例Rv=30%、并且,旋转速度的变化周期T=330毫秒,偏离率均是13%左右,得到了与手动方法同等的结果。另外,以合计体积的比例Rv=50%或70%、并且,旋转速度的变化周期T=165毫秒,偏离率成为7%左右,得到了与手动方法同等的结果。再者,在手动方法中的作业每的结果的偏差是 10%~20%左右,由上述的适宜的条件的结果也可被认为与由手动方法的结果同等。

以上的实施例1及实施例2的结果,在第1实施方式的试样处理方法中,使盒100S的旋转速度改变的动作优选含使盒100S的旋转方向以165毫秒以上330毫秒以下的周期反转的动作。结果,仅通过重复使旋转方向以165毫秒以上330毫秒以下的周期反转的动作,可处理被检测物质MD而制成对于检测适宜的乳液83。

另外,在第1实施方式的试样处理方法中,室11中所占的分散质及分散剂82的合计体积的比例优选为30%以上70%以下。由此,可处理被检测物质MD而制成对于检测适宜的乳液83。

另外,在第1实施方式的试样处理方法中,使盒100S的旋转速度改变的动作含使盒100S的旋转方向以330毫秒的周期反转的动作,室11中所占的分散质及分散剂82的合计体积的比例更优选为30%。由此,可更进一步处理被检测物质MD而制成对于检测适宜的乳液83。

同样地,在第1实施方式的试样处理方法中,使盒100S的旋转速度改变的动作含使盒100S的旋转方向以165毫秒的周期反转的动作,室11中所占的分散质及分散剂82的合计体积的比例优选为50%以上70%以下。由此,可更进一步处理被检测物质MD而制成对于检测适宜的乳液83。

(实施例3)

在实施例3中,验证作为使盒100S的旋转速度改变的动作,在重复向相同方向加速及减速的动作时,能进行乳液83的制成及DNA 的检测与否。

即,如图4(B)所示,在重复使盒100S向相同方向加速及减速的动作的条件下,进行乳液的制成。旋转速度的变化周期T设定为 T=380毫秒。在实施例3中的旋转速度的变化坐标图415示于图27。此外的实验条件与上述实施例1同样。

图28显示乳液制成后的室11内的状况的模式图。实验多次进行,示2个在各条件下的模式图。从图28确认到,形成了附阴影显示的乳液83。在实施例3中,在重复使盒100S向相同方向加速及减速的动作时,也确认到乳液83可形成。

接下来,图29显示在实施例3的条件下处理时的散点图421及 422。在各自的散点图中,在表示变异型DNA的区Q3中,相对于区 Q1~Q4中所含的总标绘点数,变异型DNA的检测数成为0.62%(第1次)、0.54%(第2次)。由此确认到,可使用在重复使盒100S向相同方向加速及减速的动作的条件下制成的乳液83而进行核酸的检测。

(实施例4:旋转速度)

在重复使盒100S的旋转方向反转的动作的条件下,在使旋转速度的最大值不同的4条件下进行乳液的制成。旋转速度W设定为 W=230rpm、470rpm、700rpm、940rpm、的4条件。旋转速度的变化周期T设定为T=330毫秒。在各自的速度条件中的旋转速度的变化坐标图431~434示于图30。将室11中所占的分散质及分散剂82的合计体积的比例Rv设为30%,重复在各自的速度条件下在1分钟之间使盒100S的旋转速度改变的动作。确认到,即使以任何的速度W,均形成了乳液。

接下来,对以各自的速度W制成的乳液83实施PCR处理,对于由乳液破坏处理取出的各DNA杂交与野生型和变异型各自特异性地结合的标记物质之后,由流式细胞仪检测。进而,如图31所示,制成散点图435~438。另外,在各散点图435~438中的变异型DNA的检测数的比例及相对于比较例的偏离率示于图32。

从图32的结果确认到,对于本次实验中使用的试样的DNA浓度,最优选速度W=940rpm的条件,接下来优选速度W=700rpm的条件。确认到,通过对于比试样的DNA浓度适合地设定盒100S的旋转速度 W,可制成对于DNA检测而言更适宜的乳液。

(变形例)

在以上说明的构成例中,显示被检测物质MD是核酸,试剂81 是核酸扩增试剂的例,在图33中所示的试样处理方法的变形例中,被检测物质MD是蛋白质,试剂81含与和试样80中的蛋白质特异性地结合的标记物质反应的底物。蛋白质是具体而言,抗原或抗体。在此变形例中,能利用抗原抗体反应而检测受试体中的被检测物质,对于用于基于检测结果而进行测定被检测物质的免疫测定的试样处理方法进行说明。

(免疫测定〈Digital ELISA〉)

以下,显示在Digital ELISA(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay)中使用的盒500的构成例。

图34显示Digital ELISA的概要。ELISA是通过向磁性粒子负载成为对象成分的抗原(也可为抗体)及标记物质而形成免疫复合物,基于免疫复合物中的标记而进行对象成分的检测的方法。Digital ELISA是将有限稀释(稀释至各微小隔区中对象成分成为1或0)的样品分散于微小隔区内,通过对基于标记的信号成为阳性的微小隔区的数直接进行计数,绝对地对样品中的对象成分浓度进行测定的方法。在图34的情况中,乳液中的各液滴84变得微小隔区。使用图33的盒 500而执行图34的例中所示的测定。

〈第一次反应〉

盒500具备5个室和8个液体收容部。从试样导入部20注入有含作为被检测物质MD的抗原的试样80,收容在试样收容部538。与室 511连接的液体收容部531中收容有含与被检测物质MD结合的捕获物质的R1试剂。捕获物质例如,含与作为抗原的被检测物质结合的第一抗体。室511中收容有含磁性粒子PM的R2试剂。

如图35所示,在步骤S31中,含第一抗体的R1试剂和试样80 由盒100的旋转,各自向室511移送。含试样80、磁性粒子PM及第一抗体的R1试剂在室511混合。通过温度调节部260将盒100控制为指定的反应温度,生成含抗原、第一抗体及磁性粒子的免疫复合物 IC(参照图34)。温度控制为约40℃~约50℃、更优选约42℃。

〈清洗(第1次BF分离)〉

与室512连接的液体收容部532中收容有用于清洗免疫复合物的试剂。在步骤S32中,用于清洗免疫复合物的试剂由盒100的旋转,向室512移送。在室511中生成的免疫复合物通过由移送机构240赋予的磁力和利用旋转机构220的盒100的旋转的组合,向邻的室512移送。免疫复合物在室512中与用于清洗免疫复合物的试剂混合,清洗(第1次BF分离)。

〈第二次反应〉

与室513连接的液体收容部533中收容有含标记物质LS的R3试剂。标记物质LS是含与被检测物质特异性地结合的捕获物质和标记,例如与作为被检测物质MD的抗原结合的酶标记抗体。在步骤S33中,含标记物质LS的R3试剂由盒100的旋转,从液体收容部533向室513移送。在室512中清洗的免疫复合物由磁力和盒100的旋转的组合,向邻的室513移送。免疫复合物IC(参照图34)在室513中与含标记物质LS的R3试剂混合,与标记物质LS结合。

〈清洗(第2次BF分离)〉

与室514连接的液体收容部534中收容有用于清洗免疫复合物IC 的试剂。在步骤S34中,用于清洗免疫复合物IC的试剂由盒100的旋转,向室514移送。在室513中与标记物质LS结合的免疫复合物 IC由磁力和盒100的旋转的组合,向邻的室514移送。免疫复合物IC在室514中与用于清洗免疫复合物IC的试剂混合,清洗(第2次BF 分离)。

〈乳液形成〉

向室515连接3个液体收容部535、536、537。液体收容部535 中收容有用于使免疫复合物分散的R4试剂,液体收容部536中收容有含与标记物质LS反应的底物的R5试剂,液体收容部537中收容有分散剂82。在步骤S35中,R4试剂、R5试剂及分散剂82由盒100 的旋转,各自向室515移送。在室514中清洗的免疫复合物IC由磁力和盒100的旋转的组合,向邻的室515移送。免疫复合物IC在室 515内与R4试剂及R5试剂混合。R4试剂是例如缓冲液。R5试剂是含由与和复合物结合的标记抗体的反应发生光的发光底物的发光试剂。即,R5试剂是含与和试样80中的蛋白质特异性地结合的标记物质LS反应的底物的试剂81。室515内中收容有含免疫复合物IC、发光底物和缓冲液的分散质。

进而,在室515中,通过使盒100绕旋转轴221旋转,搅拌室11 内的试样80、试剂81、及分散剂82,形成含试样80及试剂81的分散质分散于分散剂82中的乳液83。具体而言,使盒100绕旋转轴221 旋转而重复使盒100的旋转速度改变的动作。由此,伴随速度变化的惯性力发挥作用,搅拌室515内的免疫复合物IC、与和试样80中的蛋白质特异性地结合的标记物质LS反应的基质、及分散剂82而形成了乳液83(参照图34)。

由盒100的旋转,在乳液83中形成收容1个或0个被检测物质 MD的分散质的液滴84。由温度调节部260,盒100被控制在指定的反应温度。由此,在各液滴内基质和免疫复合物反应,作为反应生成物生成荧光物质,发生荧光。

试样处理装置200具备检测部270时,检测部270可拍摄室515 内的液滴84而由检测荧光的摄像单元构成。由检测部270,包含在各液滴的被检测物质MD的一分子单位的检测变得可能。另外,不使乳液83形成而在试样容器中进行检测时,在样品中稀释由酶反应的反应生成物,与此相对,在形成乳液83时,不向液滴84中封入由酶反应的反应生成物而稀释。因此,可高灵敏度地检测各液滴84的荧光。

这样,在根据变形例的试样处理方法及试样处理装置中,由于被检测物质MD是蛋白质,可形成将含作为被检测物质MD的蛋白质和用于对被检测物质MD进行处理的试剂81的分散质的微小的液滴84 分散于分散剂82中的乳液83。结果,通过在液滴84内隔区化各被检测物质MD,可将各被检测物质MD由试剂81确实地处理。

另外,在根据变形例的试样处理方法及试样处理装置中,由于试剂81含与和试样80中的蛋白质特异性地结合的标记物质反应的基质,在乳液83中所含的液滴84中,可对于各被检测物质MD确实地进行基于作为被检测物质MD的蛋白质的标记物质的检测。

再者,在变形例中,磁性粒子也可包被用于与被检测物质结合的结合物质,也可经用于使磁性粒子和被检测物质结合的捕获物质而与被检测物质结合。捕获物质只要是与被检测物质特异性地结合,就不特别限定。例如,捕获物质与被检测物质由抗原抗体反应结合。更具体性地,捕获物质是抗体,被检测物质是抗体时,捕获物质也可为其抗体的抗原。另外,被检测物质是核酸时,捕获物质也可为与被检测物质互补的核酸。作为标记物质中所含的标记,例如,可举出酶、荧光物质、放射性同位素等。作为酶,可举出碱性磷酸酶(ALP)、过氧化物酶、葡萄糖氧化酶、酪氨酸酶、酸性磷酸酶、荧光素酶等。作为化学发光,电化学发光时,作为标记,只要是由电化学刺激发光的物质,就不特别限定例如可举出钌络合物。作为荧光物质,可利用异硫氰酸荧光素(FITC)、绿色荧光蛋白质(GFP)等。作为放射性同位素,可利用125I、14C、32P等。

另外,标记是酶时,对于酶的发光底物对应于使用的酶选择适宜公知的发光底物即可。例如,作为使用碱性磷酸酶作为酶时的发光底物,可利用CDP-Star(注册商标)、(4-氯-3-(甲氧基螺[1,2-二氧杂环丁烷-3,2’-(5’-氯)三环[3.3.1.13,7]癸烷]-4-基)苯基磷酸2 钠)、CSPD(注册商标)(3-(4-甲氧基螺[1,2-二氧杂环丁烷-3,2-(5’ -氯)三环[3.3.1.13,7]癸烷]-4-基)苯基磷酸2钠)等的化学发光底物;p-硝基苯基磷酸酯、5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸(BCIP)、4-硝基蓝四唑鎓氯化物(NBT)、碘硝基四唑鎓(INT)等的发光底物;4- 甲基伞形花酰·磷酸盐(4MUP)等的荧光底物;5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸(BCIP)、5-溴-6-氯-吲哚基磷酸2钠、p-硝基苯基磷等的显色底物等。

[第2实施方式]

图36显示根据第2实施方式的盒700。盒700具备5个室711~ 715和10个液体收容部。

室711~715在周方向排列。向室711各自连接液体收容部731a、731b、731c的3个液体收容部。向室712连接1个液体收容部732。向室713连接1个液体收容部733。向室714连接1个液体收容部734。向室715各自连接液体收容部735a、735b、735c、735d的4个液体收容部。另外,向室715连接试样导入部20。5个室711~715经通路 40的周方向区域42而连接。

10个液体收容部731a~731c、732~734、735a~735d均在径方向内侧与盒700的外部连通,在径方向外侧与和对应的室连通的流路 745连接。在各自的液体收容部与外部的连接部、及与各自的流路745 的连接部设封闭体30a,能由开封机构250开封。盒700的其他构成与上述盒100同样而省略说明。

图37显示使用盒700的处理的流。使用盒700的处理也可含步骤 S41~S56,还含步骤S57。

在步骤S41中,从试样导入部20注入有含作为被检测物质MD 的抗原的试样80。试样80是例如全血、血浆或血清等的血液试样。进而,由盒700的旋转,向室715移送试样80。

在步骤S42中,向室715移送试剂。首先,液体收容部735a~735d 中各自收容有酶试剂、可溶化试剂、核酸提取试剂、磁性粒子试剂。

酶试剂含分解试样80中所含的蛋白质的蛋白质分解酶。可由蛋白质分解酶有效进行自试样80中的细胞的核酸的提取。蛋白质分解酶是例如蛋白酶K。可溶化试剂含有胍化合物等的离液化合物,以使细胞溶解的同时,使核酸与载体结合的方式发挥作用。核酸提取试剂主要含有醇成分,以通过使提取核酸的核酸溶液成为疏水性环境,向磁性粒子PM优先吸附核酸的方式发挥作用。磁性粒子试剂是含包被吸附核酸的载体的磁性粒子PM的液体,载体是例如氧化硅。核酸在可溶化试剂及核酸提取试剂的存在环境中,优先吸附在磁性粒子PM的载体。

在步骤S42中,这些试剂之中,收容酶试剂及可溶化试剂的2个液体收容部的封闭体30a被开封。酶试剂及可溶化试剂由盒700的旋转,从液体收容部向室715移送。

在步骤S43中,搅拌含试样80和试剂的分散质,加温到指定温度。通过重复使盒700的旋转速度改变的动作,搅拌室715内的液体。进而,由温度调节部260,室715内的分散质在指定的反应时间之间、例如温度调整为75℃。

在步骤S44中,向室715移送试剂。首先,收容在液体收容部 735a~735d的试剂之中,收容核酸提取试剂及磁性粒子试剂的2个液体收容部的封闭体30a被开封。核酸提取试剂及磁性粒子试剂由盒700 的旋转,从液体收容部向室715移送。

在步骤S45中,与步骤S43同样地进行搅拌及加温。加温时的温度是例如75℃。由分散质内的反应,试样80中的被检测物质MD被吸附到磁性粒子PM上。

在步骤S46中,向室712、713、714内各自移送用于清洗被检测物质MD的试剂86。液体收容部732、733、734中各自收容有用于清洗被检测物质MD的试剂86。用于清洗被检测物质MD的试剂86例如,含乙醇等的醇。醇通过使核酸溶液成为疏水性环境,抑制核酸从磁性粒子PM的载体脱离的同时,除去被检测物质MD以外的附着在磁性粒子PM的不需要成分。各自收容在液体收容部732、733、734 的试剂的醇的含有比例可为相同,也可为不同。例如,收容的试剂中的含有醇的比例成为液体收容部732>733>734的关系。进而,为了使清洗效果提升,收容的试剂中的表面活性剂等的清洗成分的含有比例成为液体收容部732<733<734的关系。

首先,各自的液体收容部732~734的封闭体30a被开封。由盒 700的旋转,从各自的液体收容部732~734向对应的室712~714移送用于清洗被检测物质MD的试剂86。

在步骤S47中,从室715向室714移送磁性粒子PM。通过移送机构240对于盒700加磁力,从室715内的分散质中与被检测物质 MD结合的磁性粒子PM被集磁。负载被检测物质MD的磁性粒子PM 由磁力和盒700的旋转向室714移动。向室714内移动的磁性粒子PM 通过重复接近及远离磁铁241的动作,或者,通过重复使盒700的旋转速度改变的动作,在用于清洗室714内的被检测物质MD的试剂86 中搅拌。由此清洗磁性粒子PM。

在步骤S48中,从室714向室713移送磁性粒子PM。进而,与步骤S47同样地,在用于清洗室713内的被检测物质MD的试剂86 中搅拌磁性粒子PM。由此清洗磁性粒子PM。

在步骤S49中,从室713向室712移送磁性粒子PM。进而,与步骤S47同样地,在用于清洗室712内的被检测物质MD的试剂86 中搅拌磁性粒子PM。由此清洗磁性粒子PM。

在步骤S50中,向室711移送试剂。首先,液体收容部731a~731c 中各自收容有溶出试剂、试剂81、分散剂82。溶出试剂通过使核酸溶液成为亲水性环境,使吸附到磁性粒子PM的载体的核酸从载体脱离,在溶液中溶出。溶出试剂含例如TE(Tris/EDTA)缓冲液等的缓冲液。试剂81含使试样80中的核酸扩增的核酸扩增试剂。在图36的例中,核酸扩增试剂除了含DNA聚合酶等的对于PCR必要的物质之外,含标记物质LS。分散剂82含对于试样80及试剂81有非混合性的油。在步骤S50中,这些试剂之中,收容溶出试剂的液体收容部的封闭体30a被开封。由盒700的旋转,从液体收容部向室711移送溶出试剂。

在步骤S51中,从室712向室711移送磁性粒子PM。进而,通过重复使盒700的旋转速度改变的动作,在室711内的溶出试剂中搅拌磁性粒子PM。其后,通过对室711进行加温,吸附在磁性粒子PM 的载体的核酸从磁性粒子PM脱离而在溶出试剂中溶出。

在步骤S52中,从室711向室712移送磁性粒子PM。在步骤S52 中,为了在室711内的溶液中核酸溶出,向室712移送未吸附核酸的磁性粒子PM。作为被检测物质MD的核酸留在室711内的溶液中。

在步骤S53中,向室711移送试剂。收容在液体收容部731a~731c 的试剂之中,收容作为试剂81的核酸扩增试剂的液体收容部的封闭体 30a使开封。由盒700的旋转,从液体收容部向室711移送核酸扩增试剂。进而,通过重复使盒700的旋转速度改变的动作,搅拌室711 内的核酸扩增试剂和核酸溶液。

在步骤S54中,向室711移送试剂。收容在液体收容部731a~731c 的试剂之中,收容作为分散剂82的油的液体收容部的封闭体30a被开封。由盒700的旋转,从液体收容部向室711移送分散剂82。

在步骤S55中,在室711内实施了乳液形成工序。室711中收容有试样80中的被检测物质MD、作为试剂81的核酸扩增试剂及标记物质LS和作为分散剂82的油。进而,通过使盒100绕旋转轴221旋转,搅拌室11内的试样80、试剂81、及分散剂82,形成含试样80 及试剂81的分散质分散于分散剂82中的乳液83。例如盒700在绕旋转轴221旋转时,通过重复使旋转速度改变的动作,在室711内形成含试样80及试剂81的分散质分散于分散剂82中的乳液83。在乳液形成工序中,比各室内的搅拌动作高速地重复使旋转速度改变的动作。

在步骤S56中,实施了扩增由乳液形成工序形成的液滴84中的核酸(DNA)的乳液PCR工序。形成了乳液83之后,由温度调节部 260进行使盒700的温度在多个温度范围周期性地改变的热循环处理,扩增分散质中所含的核酸。由此,在乳液83中所含的液滴84(参照图12)中,有效扩增核酸。另外,液滴84中的核酸扩增产物与核酸扩增试剂中所含的标记物质LS反应,发荧光。

在步骤S57中,进行被检测物质MD的检测工序。例如通过由摄像部构成的检测部270拍摄盒700的室711。对于摄像图像而由控制部230进行图像解析,检测被检测物质MD。即,控制部230基于由检测部270拍摄的室711内的乳液83的摄像图像而输出存在作为被检测物质MD的核酸与否。再者,在图36及图37的例中,不实施乳液破坏工序。因此,以以含1分子或1个核酸的方式形成的液滴84作为检测的单位,从摄像图像对存在作为被检测物质MD的核酸与否进行计数。也可从试样处理装置200向服务器650(参照图19)发送摄像图像,在服务器650中进行图像解析。此时,服务器650基于室711 内的乳液83的摄像图像而经试样处理装置200或者直接向外部的终端 600(参照图19)输出存在作为被检测物质MD的核酸与否。

[第3实施方式]

图38显示根据第3实施方式的盒800。盒800具备3个室811~ 813、9个液体收容部和核酸提取用的滤器部821。

在室811比室812及813径方向内侧的位置,向周方向以圆弧状延伸。在室812及813盒800的径方向外缘的附近,在周方向排列。向室811各自连接液体收容部831、832、833、834、835a、835b、835c 的,7个液体收容部。另外,向室811连接试样导入部20。向室812 连接2个液体收容部836、837。

室811和室812及813经滤器部821而连接。具体而言,室811 经封闭体30a而与滤器部821连通。滤器部821经径方向外侧的封闭体30b而与室812及813各自连通。滤器部821经从封闭体30b延伸的流路841而与室812连通,经从封闭体30b延伸的流路840而与室 813连通。封闭体30b以使滤器部821和流路840连通,封闭流路841 的方式设。封闭体30b被开封,则滤器部821经流路841而与室812 连通。再者,室811~813各自在径方向内侧与盒800的外部连通。

7个液体收容部831~834及835a~835c均在径方向内侧与盒800 的外部连通,在径方向外侧,与和室811连通的流路843连接。在各自的流路843、连接液体收容部836和室812的流路844、及连接液体收容部837和室812的流路845各自设封闭体30a,能由开封机构250 开封。

图39显示使用盒800的处理的流。使用盒800的处理也可含步骤 S61~S74,还含步骤S75。

在步骤S61中,从试样导入部20注入有含作为被检测物质MD 的抗原的试样80。试样80与上述第2实施方式同样。进而,由盒800 的旋转,向室811移送试样80。

在步骤S62中,向室811移送试剂。首先,液体收容部831~834 中各自收容有酶试剂、可溶化试剂、核酸提取试剂、溶出试剂。这些中,收容酶试剂及可溶化试剂的2个液体收容部的封闭体30a被开封。由盒800的旋转,从液体收容部向室811移送酶试剂及可溶化试剂。

在步骤S63中,搅拌含试样80和试剂的分散质,加温到指定温度。通过重复使盒800的旋转速度改变的动作,搅拌室811内的液体。进而,由温度调节部260,室811内的分散质在指定的反应时间之间、例如温度调整为75℃。

在步骤S64中,向室811移送试剂。首先,收容在液体收容部831~834的试剂之中,收容核酸提取试剂的液体收容部的封闭体30a被开封。由盒800的旋转,从液体收容部向室811移送核酸提取试剂。

在步骤S65中,与步骤S63同样地进行搅拌。

在步骤S66中,向滤器部821移送室811内的分散质。首先,室 811和滤器部821之间的封闭体30a被开封。室811内的分散质成为含作为被检测物质MD的核酸的核酸溶液。由盒800的旋转,从室811 向滤器部821移送核酸溶液。

滤器部821是含有吸附核酸的载体的滤器,例如氧化硅膜滤器。滤器部821在可溶化试剂及核酸提取试剂的存在环境中,吸附捕获核酸,使核酸以外的成分或液体通过。核酸溶液中的核酸由滤器部821 吸附固定。

在步骤S67中,由用于清洗被检测物质MD的试剂86进行清洗处理。具体而言,液体收容部835a~835c中各收容有用于清洗被检测物质MD的试剂86。用于清洗被检测物质MD的试剂86与上述第2 实施方式同样。例如,液体收容部835a~835c之中,第1液体收容部 835a的封闭体30a被开封。用于清洗被检测物质MD的试剂86由盒 800的旋转,从液体收容部经由室811移送至滤器部821。

在用于清洗被检测物质MD的试剂86被移送至滤器部821的状态下,进一步旋转盒800。由此,经由封闭体30b及流路840而从滤器部821向室813移送用于清洗被检测物质MD的试剂86。结果,与试剂一同排出存在于滤器部821中的不需要成分。不需要成分是被检测物质MD以外的,被检测物质MD的检测中不需要的成分。再者,为了由封闭体30b封闭流路841,试剂不流入室812。

在步骤S68中,判断是否实施指定次数清洗处理。在图38的例中,由于液体收容部835a~835c的3个液体收容部中收容有用于清洗被检测物质MD的试剂86,指定次数是3次。在不实施指定次数清洗处理的情况中,回到步骤S67,以下的液体收容部835b的封闭体30a被开栓,由盒800的旋转,经滤器部821向室813移送用于清洗被检测物质MD的试剂86。对于液体收容部835c也同样。实施指定次数清洗处理,则进到步骤S69。

在步骤S69中,向室812移送捕获到滤器部821的作为被检测物质MD的核酸。具体而言,首先,液体收容部831~834之中,收容溶出试剂的液体收容部的封闭体30a被开封。再者,封闭与室812连接的流路841的封闭体30b被开封。由盒800的旋转,溶出试剂从液体收容部经由室811移送至滤器部821。由此,吸附在滤器部821的核酸从滤器部821脱离而在溶出试剂中溶出。通过进一步继续盒800 的旋转,经封闭体30a及流路841而向室812移送滤器部821内的核酸溶液。

再者,与室813连接的流路840延伸至处于比室812径方向内侧的位置的流路部分840a后,与室813连接。因此,由离心力移送液体时,只要是在封闭体30b被开封的状态下,室812未被液体填满,就无液体超流路部分840a而流入室813。由此,从滤器部821流出的核酸溶液不流入室813,向室812移送大致全量。

在步骤S70中,向室812移送试剂81。首先,液体收容部836及 837中各自收容有试剂81、分散剂82。试剂81及分散剂82与上述第 2实施方式同样。这些中,收容试剂81的液体收容部836的封闭体30a 被开封。由盒800的旋转,从液体收容部836经由流路844而向室812移送试剂81。

在步骤S71中,通过重复使盒800的旋转速度改变的动作,搅拌室812内的核酸溶液和试剂81。

在步骤S72中,向室812移送分散剂82。收容作为分散剂82的油的液体收容部837的封闭体30a被开封。由盒800的旋转,从液体收容部837经流路845向室812移送分散剂82。

在步骤S73中,在室812内实施了乳液形成工序。室812中收容有试样80中的被检测物质MD、作为试剂81的核酸扩增试剂及标记物质LS和作为分散剂82的油。进而,通过使盒100绕旋转轴221旋转,搅拌室11内的试样80、试剂81、及分散剂82,形成含试样80 及试剂81的分散质分散于分散剂82中的乳液83。盒800在绕旋转轴 221旋转时,通过重复使旋转速度改变的动作,在室812内形成含试样80及试剂81的分散质分散于分散剂82中的乳液83。再者,在图 38及图39的例中,不向磁性粒子PM负载被检测物质MD。因此,含有磁性粒子PM的磁性粒子试剂不收容在盒800。在图38的例中,如上所述,由于代替磁性粒子PM而设有滤器部821,仅由伴随盒800 的旋转的离心力进行向各室的被检测物质MD的移送。在不使用磁性粒子PM的情况中,无设移送机构240的必要。

在步骤S74中,实施了扩增由乳液形成工序形成的液滴84中的核酸(DNA)的乳液PCR工序。形成了乳液83之后,由温度调节部 260进行使盒800的温度在多个温度范围周期性地改变的热循环处理,扩增分散质中所含的核酸。由此,在乳液83中所含的液滴84(参照图12)中,有效扩增核酸。另外,液滴84中的核酸扩增产物与核酸扩增试剂中所含的标记物质LS反应,发荧光。

再者,在图38的例中,与第2实施方式同样,不实施乳液破坏工序。在步骤S75中,进行被检测物质MD的检测工序。例如通过由摄像部构成的检测部270拍摄盒800的室812。对于摄像图像而由控制部230进行图像解析,检测被检测物质MD。即,控制部230基于由检测部270拍摄的室812内的乳液83的摄像图像而输出存在作为被检测物质MD的核酸与否。也可在服务器650中进行图像解析。

[核酸检测装置的变形例]

图40显示根据第1实施方式的试样处理装置200A的变形例。根据变形例的试样处理装置200A以使用多个盒进行处理的方式构成。

在图40的例中,试样处理装置200A具备使用进行乳液83的制成工序、核酸扩增工序的第1盒100A而进行试样的处理的试样处理部281和使用进行核酸提取工序的第2盒100B进行试样的处理的试样提取部282。

另外,试样处理装置200A在盒100B和盒100A之间具备用于移送试样的试样分注部283、检测部270和移送盒100A的盒移送机构 284。

试样提取部282含设置有矩形形状的盒100B的3个设置部210B 和设在各设置部210B的温度调节部260B。向设置于试样提取部282 的盒100B导入含核酸的试样80。试样80的导入可为由使用者进行,也可为由试样分注部283进行。

试样处理装置200A使用配置于试样提取部282的盒100B而实施至少从试样80提取核酸的工序。作为用于提取核酸的试剂,可向盒 100B预先封入例如酶试剂、可溶化试剂、核酸提取试剂、溶出试剂。

试样处理装置200A也可使用配置于试样提取部282的盒100B而由用于清洗核酸的试剂86进行清洗提取的核酸的工序。此时,可向盒 100B预先封入用于清洗核酸的试剂86。

在盒100B中的试样80或试剂的移送通过由试样分注部283,在盒100B形成的孔间移送液体而进行。试样分注部283也可向在盒100B 形成的开口赋予压力而在盒200B内由压力移送液体。

试样分注部283含例如抽吸及吐出液体的抽吸部283a和抽吸部移动机构283b。抽吸部283a能由抽吸部移动机构283b向试样提取部 282中的盒100B的设置位置和试样处理部281中的盒100A的设置位置移动地构成。抽吸部283a例如能连离一次性用的移液器吸头地构成,在抽吸及分注含核酸的液体时更换移液器吸头。试样分注部283 由抽吸部283a从盒100B抽吸含使用盒100B提取的核酸的溶液而注入盒100A的试样导入部20。

在试样处理部281设设置圆盘形状的盒100A的设置部210A和温度调节部260A。在图40的例中,试样处理部281含旋转机构220A。

试样处理装置200A使用设置于试样处理部281的盒100A而至少实施乳液83的制成工序、核酸扩增工序。向盒100A预先封入例如,用于对核酸进行扩增的试剂81及标记物质LS和作为分散剂82的油。

试样处理装置200A也可使用设置于试样处理部281的盒100A而由用于清洗核酸的试剂86,在盒100B中进行清洗提取的核酸的工序。此时,可向盒100A预先封入用于清洗核酸的试剂86。

在盒100A中,具体而言,可采用图40中所示的上述第1实施方式的构成。此时,试样处理装置200A具备对盒100A施加磁力的移送机构240。盒100A可采用从图36中所示的上述第2实施方式的构成或图38中所示的上述第3实施方式的构成之中省略关于核酸的提取的结构的构成。

在试样处理部281中,由旋转机构220A,在盒100A的室11内形成乳液83,由温度调节部260A,在室11内进行液滴84中的核酸的扩增(即,乳液PCR)。在试样处理部281中,核酸的扩增产物和标记物质LS反应。

盒移送机构284含例如把持盒100A的把持部284a和把持部移动机构284b。把持部284a由挟持、吸附、卡合等的手段保持盒100A。把持部284a能由把持部移动机构284b向试样处理部281中的盒100A 的设置位置和检测部270中的盒100A的设置部210C移动地构成。盒移送机构284在试样处理部281中的处理之后,从试样处理部281向检测部270的设置部210C搬送收容与标记物质LS结合的核酸的盒 100A。

检测部270检测基于在盒100A内扩增的核酸的信号。检测部270 具备例如摄像部。再者,检测部270也可与图17中所示的构成同样地,配置于试样处理部281。此时,检测部270从配置于试样处理部281 的设置部210A的盒100A的下方或上方拍摄室11。此时,盒移送机构284可省略。

由这样的构成,根据变形例的试样处理装置200A使用多个盒而通过在盒间移送试样而进行核酸检测。

再者,本次公开的实施方式在全部的方面是例示,而不应被认为是限制。本发明的范围不是由上述实施方式的说明表示,而是由专利权利要求表示,还含与专利权利要求均等的含意及范围内的全部的变更。

【符号的说明】

11:室,12:第2室,13:第3室,14:第4室,15:第5室, 16:第6室,20:试样导入部,30:液体收容部,30a、30b:封闭体, 31:第1液体收容部,32:第2液体收容部,33:第3液体收容部, 34:第4液体收容部,35:第5液体收容部,36:第6液体收容部, 37:第7液体收容部,80:试样,81:用于处理被检测物质的试剂, 82:分散剂,83:乳液,84:液滴,85:使乳液破乳化的试剂,86:用于清洗被检测物质的试剂,87:用于使核酸变性的试剂,88:含标记物质的试剂,100、100A、500、700、800:盒,200、200A:试样处理装置,210、210A:设置部,220、220A:旋转机构,221:旋转轴,230:控制部,240:移送机构,250:开封机构,260、260A:温度调节部,300:程序,310:计算机,515:室,531~537:液体收容部,711~715:室,731a~731c、732~734、735a~735d:液体收容部,811~813:室,831~834、835a~835c:液体收容部,LS:标记物质,MD:被检测物质,PM:磁性粒子。

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